Bước đầu nghiên cứu sử dụng tế bào gốc trung mô tạo các mảnh ghép mô công nghệ ứng dụng trong y học tái tạo

Tạo ra các mảnh ghép từ sự kết hợp của tế bào gốc trung mô với các loại vật liệu như san hô, Gelatin-Alginate và fibrin để tạo ra các mảnh ghép trong điều kiện in vitro.

Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 20 * Số * 2016 Nghiên cứu Y học BƯỚC ĐẦU NGHIÊN CỨU SỬ DỤNG TẾ BÀO GỐC TRUNG MÔ TẠO CÁC MẢNH GHÉP MÔ CÔNG NGHỆ ỨNG DỤNG TRONG Y HỌC TÁI TẠO Huỳnh Duy Thảo*, Trần Lê Bảo Hà**, Võ Quốc Vũ*, Trần Cơng Toại* TĨMTẮT Đặt vấn đề: Nghiên cứu ứng dụng tế bào gốc phát triển đạt nhiều kết khả quan, từ nghiên cứu khoa học ứng dụng lâm sàng y học Nhiều loại tế bào gốc thể nghiên cứu triển khai ứng dụng Tuy nhiên, tế bào gốc trung mô thu nhận từ mô trưởng thành thể cho thấy có ưu điểm bật Sự kết hợp tế bào gốc vật liệu sinh học để tạo mô công nghệ nhằm thay tái tạo mô thể xu hướng phát triển nhanh mạnh thời gian gần Mục tiêu nghiên cứu: Tạo mảnh ghép từ kết hợp tế bào gốc trung mô với loại vật liệu san hô, Gelatin-Alginate fibrin để tạo mảnh ghép điều kiện in vitro Phương pháp nghiên cứu: Thí nghiệm thực nghiệm mô tả Mô mỡ người thu nhận sử dụng để phân lập tế bào gốc trung mơ Sau đó, tế bào gốc trung mơ sử dụng để tạo mảnh ghép cách kết hợp với loại vật liệu sinh học Kết quả: Tế bào gốc trung mơ thỏa mãn theo tiêu chí ISCT Các mảnh ghép tạo từ tế bào gốc trung mô với khung san hô, khung Gelatin-Alginate Fibrin Kết luận: Nhóm nghiên cứu bước đầu tạo mảnh ghép dựa công nghê mô, nghiên cứu bước khởi đầu để triển khai nghiên cứu Từ khóa: Tế bào gốc trung mô, san hô biển, gelatin-alginate, fibrin, mảnh ghép ABSTRACT PRELIMINARY STUDIES USING MESENCHYMAL STEM CELLS TO CREATE TISSUE ENGINEERED GRAFTS FOR APPLICATIONS IN REGENERATIVE MEDICINE Huynh Duy Thao, Tran Le Bao Ha, Vo Quoc Vu, Tran Cong Toai * Y Hoc TP Ho Chi Minh * Supplement of Vol 20 - No - 2016: - 13 Background: Research and application of stem cells is now very developed and achieved many positive results, from basic research to clinical applications Many types of stem cells in the body have been studied and applied in clinical practice However, the mesenchymal stem cells derived from adult tissues in the body show that there are outstanding advantages The combination of stem cells and biomaterials to create new kinds of tissue engineering to replace and regenerate tissues in the human body has developed very quickly and effectively in recent times Objectives: Generate different types of tissue grafts from a combination of mesenchymal stem cells with biomaterials like sea coral, Gelatin-Alginate and fibrin in vitro Methods: The experiment was performed as described experiments Human adipose tissue is collected and used to isolate mesenchymal stem cells Then, mesenchymal stem cells are used to create tissue graft by combining with types of biomaterials * Bộ môn Mô – Phôi – Di truyền, ĐH Y Khoa Phạm Ngọc Thạch Bộ môn Sinh lý Động vật, ĐH Khoa học Tự nhiên TP.HCM ** Tác giả liên lạc: TS Huỳnh Duy Thảo ĐT: 01693891481 Email: thao_huynhduy@pnt.edu.vn Hội Nghị Khoa Học Kỹ Thuật Bệnh Viện An Bình năm 2016 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 20 * Số * 2016 Results: Mesenchymal stem cells are identified by the standards of ISCT The tissue graft made from mesenchymal stem cells with other types of substrates such as coral, Gelatin-Alginate and fibrin Conclusion: Our research team has succeeded initially to create tissue graft based on tissue engineering technology, this research is only the first step to implement the follow-up study Keywords: Mesenchymal stem cell, sea coral, gelatin-alginate, fibrin, graft tissue ĐẶT VẤN ĐỀ ĐỐITƯỢNG-PHƯƠNGPHÁPNGHIÊNCỨU Nghiên cứu ứng dụng tế bào gốc phát triển vào nhiều lĩnh vực nghiên cứu, từ nghiên cứu khoa học ứng dụng lâm sàng y học Nhiều loại tế bào gốc thể nghiên cứu triển khai ứng dụng Tuy nhiên, tế bào gốc trung mô (Mesenchymal Stem Cells – MSC) thu nhận từ mô trưởng thành tủy xương, mơ liên kết, tuyến tiêu hóa … phần phụ thai máu cuống rốn, cuống rốn(15) tế bào gốc đa tiềm năng, có ưu điểm bật hiệu lĩnh vực công nghệ mơ(15,8) Đối tượng nghiên cứu Do đó, MSC cần phải có quy trình thu nhận phù hợp để nhân khốiin vitro trước sử dụng với số lượng lớn tế bào(7) Mơ ghép nói riêng vật liệu cấy ghép nói chung ngày sử dụng phổ biến y học Đối với bệnh lý dẫn đến tổn thương mơ, khuyết mơ việc điều trị sử dụng mơ ghép tự thân, mô ghép đồng loại, mô ghép dị loại, loại vật liệu ghép sinh học … để thay Bên cạnh đó, để cải thiện hiệu cho vật liệu ghép nhà nghiên cứu tìm cách đưa yếu tố sinh học vào mô ghép tế bào yếu tố hoạt tính sinh học(5,11,9)… Trong đó, vai trò tế bào gốc trung mơ quan tâm triển khai nghiên cứu để tạo mơ ghép cơng nghệ Do nhóm nghiên cứu bước đầu thử nghiệm tạo loại mảnh ghép khác từ kết hợp tế bào gốc trung mô loại khung nâng đỡ sinh học khác để đánh giá tiềm loại mảnh ghép y học tái tạo Mô mỡ người thu nhận từ việc chọc hút mỡ quy trình phẫu thuật thẩm mỹ Mẫu mô thu nhận từ người hiến khỏe mạnh, đồng ý hiến mô để tiến hành nghiên cứu có xét nghiệm âm tính với HIV, HBV, HCV VDRL San hô tự nhiên (Porites lutea) thu nhận từ viện Hải Dương Học Nha Trang Máu ngoại vi dùng để tạo giá thể fibrin từ huyết người Gelatin Alginate thu nhận từ nguồn gốc sinh học để tạo giá thể Gelatin-Alginate (GA) Phương pháp nghiên cứu Thí nghiệm thiết kế phương pháp thực nghiệm mô tả Thu nhận mô mỡ Mẫu mô thu nhận điều kiện vơ trùng phòng mổ Sau đó, mẫu vận chuyển nhanh chóng phòng thí nghiệm Phân lập nuôi cấy tế bào gốc từ mô mỡ Mô mỡ cho vào tube 50ml khoảng 20-30ml dịch mô mỡ cho tube Sau bổ sung hỗn hợp enzyme Dispase-Collagenase vào tube với tỉ lệ (1 mẫu: enzyme, v/v), mẫu mô ủ enzyme nhiệt độ 370C, thời gian 90 phút Sau đó, ly tâm thu nhận phần cặn lắng đáy chai Bổ sung môi trường nuôi vào tube huyền phù phần cặn lắng đáy chai Lọc phần dịch tế bào qua phễu lọc tế bào (cell strainer, BD FalconTM) với đường kính 70 μM Sau thu phần cặn lắng đáy chai bổ sung dung dịch ly giải hồng cầu để loại bỏ hồng cầu lẫn tạp Sau đó, quay li tâm thu phần cặn Hội Nghị Khoa Học Kỹ Thuật Bệnh Viện An Bình năm 2016 Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 20 * Số * 2016 lắng, bổ sung môi trường nuôi đếm mật độ tế bào với dung dịch Trypan blue buồng đếm Neubauer Tế bào nuôi chai nuôi T25 cm2 (Corning) ủ tủ nuôi nhiệt độ 370C 5% CO2 Môi trường thay ngày/ 1lần Mẫu cấy chuyền khoảng thời gian từ – 14 ngày từ lúc bắt đầu nuôi cấy(12,8) Định danh tế bào gốc trung mô từ mô mỡ Để định danh tế bào gốc trung mô (Mesenchymal Stem Cell – MSC) thu nhận từ mô mỡ, chúng tơi đánh giá theo tiêu chí Hội liệu pháp Tế bào Quốc tế (International Society for Cellular Therapy – ISCT)(11) Chúng tơi sử dụng quy trình nghiên cứu thiết lập để phân lập định danh MSC(13) Tạo mảnh ghép từ kết hợp MSC với loại vật liệu sinh học Tạo mô ghép hướng đến tái tạo mô cứng từ san hô MSC MSC sau nhân khối để làm giàu số lượng thu nhận dung dịch Trypsin-EDTA (Gibco) Dịch tế bào sau tách chuyển lên giá thể san hô phương pháp quay ly tâm 1000 vòng/phút phút (lặp lại lần) Trong nghiên cứu này, định hướng phát triển mơ ghép thành mơ tạo xương Do đó, mảnh ghép nuôi cấy môi trường cảm ứng tạo xương gồm DMEM/F12, 10% FBS, 10-7M Dexamethasone, 10mM/ml -Glycerol phosphate, 50ng/ml Ascorbic acid, 10ng/ml FGF9, 10-7M vitamin D2 kháng sinh(1,18,19) Mảnh ghép theo dõi kính hiển vi đảo ngược vào ngày thứ 21 thu nhận đánh giá phương pháp nhuộm mơ học quan sát kính hiển vi điện tử quét Ngoài ra, mảnh ghép xử lý dung dịch cố định (Neutral Buffer Formalin Nghiên cứu Y học 10%) để nhuộm Giemsa H&E nhằm đánh giá cấu trúc phát triển tế bào bên mảnh ghép Để xác định nguyên bào xương (thông qua hoạt động enzyme alkaline phosphatase - AP) biệt hóa khung san hơ từ MSC, tiến hành nhuộm mảnh ghép với thuốc nhuộm Fast Red violet LB salt (sigma) để đánh giá biểu enzyme Đây marker sử dụng phổ biến để định danh cho nguyên bào xương Tạo mô ghép hướng đến tái tạo mô mềm từ giá thể G-4A, Fibrin MSC MSC thu nhận chuyển trực tiếp lên loại giá thể G-A Fibrin để tạo mảnh ghép mô mềm Giá thể G-A fibrin tạo theo quy trình nghiên cứu chúng tơi thiết lập(13,17,7) Trong nghiên cứu định hướng phát triển mô ghép thành mô tạo mô mở để tái tạo lại khuyết hỗng mơ mềm lâm sàng phẫu thuật thẩm mỹ, tế bào phát triển loại giá thể nuôi môi trường cảm ứng tạo tế bào mỡ gồm DMEM/F12, FBS (10%), Gentamycine (50μg/ml), HEPES (15 mm), NaHCO3 (14nM), Biotin (33μm), D-Panto (17 μm), Human insulin (66nM), Triiodo-Lthyronine (1nM), Humantransferrin (10μg/ml), Isobutyl-methylxanthin (0,5 mM), Hydrocortisone (100 nM) Dexamethasone (0,1 nM)(10,12,14) Mảnh ghép theo dõi kính hiển vi đảo ngược vào ngày thứ 21 thu nhận đánh giá phương pháp nhuộm mô học (H&E) quan sát kính hiển vi điện tử qt Ngồi ra, tế bào nhuộm Oil Red O để đánh giá khả biệt hóa MSC thành tế bào mỡ hai loại khung Hội Nghị Khoa Học Kỹ Thuật Bệnh Viện An Bình năm 2016 Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 20 * Số * 2016 Nghiên cứu Y học KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN Phân lập định danh MSC từ mô mỡ A Mẫu chứng 10X 10X B Alkaline phosphatase staining 10X C Oil red O staining D 10X Alcian blue staining Hình 1.Tiềm biệt hóa MSC (A) Tế bào bám dính, tăng trưởng chai cấy tạo thành lớp đơn tế bào (mẫu chứng) (B) MSC cảm ứng biệt hóa thành nguyên bào xương (được nhuộm với marker alkaline phosphatase) (C) MSC cảm ứng biệt hóa thành tế bào mỡ (được nhuộm Oil Red O) (D) MSC cảm ứng biệt hóa thành nguyên bào sụn (được nhuộm với alcian blue) Kết cho thấy tế bào gốc phân lập từ mô mỡ thỏa mãn tiêu chí biệt hóa theo ISCT Hình Kết phân tích marker dùng để định danh MSC hình thái nguyên bào sợi Những tế bào Các tế bào sau phân lập từ mơ mỡ bắt bám dính đáy chai nuôi Sau tuần nuôi đầu xuất bám dính sau hai ngày ni cấy cấy, tế bào tăng trưởng phát triển môi trường nuôi Các tế bào bám mạnh, tạo thành cụm chai ni Sau 14 dính riêng lẻ, có hình dạng thon, dài giống với Hội Nghị Khoa Học Kỹ Thuật Bệnh Viện An Bình năm 2016 Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 20 * Số * 2016 ngày nuôi cấy, tế bào đạt đến mật độ phù hợp để cấy chuyền (chiếm khoảng 75-80% diện tích bề mặt chai ni) Theo tiêu chí ISCT, MSC có tiềm biệt hóa thành nguyên bào xương, nguyên bào sụn tế bào mỡ in vitro Kết biệt hóa MSC thành tế bào mơ tả hình Ngồi ra, MSC phải biểu marker đặc hiệu CD73, CD90 CD105 không biểu số marker âm tính Kết đánh giá Flow Cytometry Kết cho hình Kết cho thấy quần thể tế bào có kiểu hình: CD45NegCD73+CD90+CD105+thỏa mãn tiêu chuẩn ISCT Như vậy, với kết khảo sát khả bám dính, tiềm biệt hóa biểu marker bề mặt cho thấy quần thể tế bào ni cấy tế bào gốc trung mô Đây nguồn tế bào gốc quan trọng đầy tiềm cho ứng dụng lâm sàng Tạo mảnh ghép từ kết hợp MSC với loại vật liệu sinh học Tạo mô ghép hướng đến tái tạo mô cứng từ san hô MSC Mẫu san hô có mang MSC sau biệt hóa thành nguyên bào xương xử lý nhuộm Giemsa, H&E quan sát kính hiển vi điện tử quét để đánh giá kết Bên cạnh đó, chúng tơi tiến hành nhuộm khối san hô với thuốc nhuộm Fast Red violet LB salt để đánh giá khả MSC biệt hóa thành ngun bào xương khung san hơ, MSC biệt hóa thành nguyên bào xương tế bào phản ứng lại với thuốc Nghiên cứu Y học nhuộm bào tương xuất màu hồng, hoạt động enzyme alkaline phosphatase Đây enzyme sử dụng phổ biến để định danh cho nguyên bào xương Kết mơ tả hình Tạo mô ghép hướng đến tái tạo mô mềm từ giá thể G-A, Fibrin MSC Tạo mô ghép từ MSC giá thể fibrin Các MSC sau biệt hóa thành tế bào mỡ giá thể fibrin xử lý nhuộm H&E quan sát kính hiển vi điện tử quét để đánh giá kết Tế bào mở xác định cách nhuộm với thuốc nhuộm Oil Red O Kết mô tả hình 4: Ngồi mảnh ghép mơ mềm đánh giá cấu trúc mô học để xem phát triển phân bố tế bào bên mảnh ghép khảo sát đặc tính bề mặt Kết mơ tả hình Các MSC sau biệt hóa thành tế bào mỡ giá thể G-A xử lý nhuộm H&E quan sát kính hiển vi điện tử quét để đánh giá kết Tế bào mở xác định cách nhuộm với thuốc nhuộm Oil Red O Kết mơ tả hình Như vậy, với loại khung nâng đỡ phù hợp G-A Fibrin sử dụng để ni cấy MSC cảm ứng phát triển khung để tạo mảnh ghép công nghệ theo xu hướng tạo mô mềm Đây mảnh ghép đáp ứng nhu cầu phẫu thuật làm đầy khuyết hổng mô mềm phẫu thuật thẩm mỹ dùng để làm đầy mô mềm Hội Nghị Khoa Học Kỹ Thuật Bệnh Viện An Bình năm 2016 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 20 * Số * 2016 A B C D Hình Đánh giá khả bám dính, phát triển biệt hóa MSC thành nguyên bào xương giá thể san hô (A) Mẫu san hô được chụp SEM kích thước 200µm, khơng ni tế bào (B) Mẫu san hơ chụp SEM (100µm) có mang MSC biệt hóa thành nguyên bào xương, MSC tạo lớp phát triển bên phía ngồi hốc san hô (C) Nhuộm H&E, tế bào phát triển phân bố bên khối san hô (D) Nhuộm AP, tế bào dương tính với thuốc nhuộm chứng tỏ biểu en zyme AP Điều cho thấy MSC biệt hóa thành nguyên bào xương giá thể san hô 10 Hội Nghị Khoa Học Kỹ Thuật Bệnh Viện An Bình năm 2016 Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 20 * Số * 2016 Nghiên cứu Y học A B C D Hình Kết ni cấy cảm ứng biệt hóa MSC thành tế bào tạo mỡ khung fibrin (A) Tế bào cảm ứng thành tế bào tạo mỡ in vitro, quan sát kính hiển vi đảo ngược (20X) (B) Tế bào nhuộm Oil red O trực tiếp khung fibrin (4X) (C) (D) Tế bào nhuộm Oil red O vật kính (20X) (40X) C A B Hình Kết tạo mảnh ghép mô mềm từ MSC khung fibrin (A) Mẫu tế bào phát triển khung fibrin in vitro sau ngày nuôi (20X) (B) MSC cảm ứng biệt hóa thành tế bào mỡ phát triển khung fibrin nhuộm H&E ngày thứ (20X), kết cho thấy tế bào phát triển phân bố đồng khung fibrin, ngồi MSC cảm ứng biệt hóa thành tế bào mỡ nên bào tương tế bào rộng tích trữ mỡ làm mơ học để lại nhiều khoảng trống (C) Kết chụp SEM đánh giá bám dính tế bào khung fibrin Kết quan sát cho thấy tế bào bám dính mạng lưới fibrin chặt Hội Nghị Khoa Học Kỹ Thuật Bệnh Viện An Bình năm 2016 11 Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 20 * Số * 2016 Nghiên cứu Y học Tạo mô ghép từ MSC giá thể fibrin C A B Hình Kết tạo mảnh ghép mô mềm từ MSC khung G-A (A) Mẫu tế bào phát triển khung G-A in vitro sau ngày nuôi (20X) Tế bào nhuộm Oil Red O để đánh giá biệt hóa MSC thành tế bào mỡ trực tiếp khung G-A, kết cho thấy có diện tế bào mỡ khung fibrin (B) MSC cảm ứng biệt hóa thành tế bào mỡ phát triển khung G-A nhuộm H&E ngày thứ (40X), kết cho thấy MSC cảm ứng biệt hóa thành tế bào mỡ với bào tương tế bào tích trữ giọt mỡ nhiều (C) Kết chụp SEM đánh giá bám dính tế bào khung fibrin Kết quan sát cho thấy tế bào bám dính mạng lưới G-A tốt KẾT LUẬN TÀI LIỆU THAM KHẢO Với quần thể tế bào gốc thu nhận từ mô mỡ phân lập nuôi cấy,chúng đánh giá quần thể tế bào tế bào gốc trung mô theo tiêu chí quốc tế (ISCT) Các MSC thu từ mơ mỡ tiến hành ni cấy loại giá thể khác Chúng tơi tạo mảnh ghép hướng đến phát triển thành mô cứng (mô xương) mô mềm (mô mỡ) Đây bước nghiên cứu điều kiện in vitro để nhóm nghiên cứu tiếp tục đánh giá in vivo mơ hình động vật thực nghiệm Đây hướng nghiên cứu theo xu hướng phát triển công nghệ mô giới với mục tiêu tạo mảnh ghép công nghệ mô để ứng dụng cụ thể vào lĩnh vực y học tái tạo nhằm làm đầy trường hợp khuyết hổng mô Các nghiên cứu bước đầu đạt nhiều kết tích cực động lực để nhóm nghiên cứu chúng tơi tiếp tục triển khai nghiên cứu sau 12 Chen F et al (2007), Segmental bone tissue engineering by seeding osteoblast precursor cells into titaniummesh-coral composites scaffolds, Journal of Oral and Maxillofacial Surgery, 36: 822-827 Chen F, S Chen, K Tao, X Feng, Y Liu, D Lei, T Mao.(2004) Marrow derived osteoblasts seeded into porous natural coral to prefabricate a vascularized bone graft in the shape of human mandibular ramus: experimental study in rabbits Journal of Oral and Maxillofacial Surgery, 42:532-537 Chen F, Tianqiu M, Kai T, Shujun C, Guicong D, Xiaoming.(2002) Bone graft in the shape of Human mandibular condyle reconstruction via seeding marrowderived osteoblast into porous coral in a nude mice model J Oral Maxillofac Surg, 60:1155-1159 Coleman SR (2006) Structural fat grafting: more than a permanent filler Plast Reconstr Surg 118:108S-120S Gregory CA (2008), Mesenchymal stem cells: from culture to clinic, Stem Cell Repair and Regeneration, Imperial College Press, Singapore, 2: 21-45 Holmes RE (1979), Bone regenaration within a coralline hydroxyapatite implant, Plastic and Reconstructive Surgery, 63:626-633 Huỳnh Duy Thảo (2015), Bước đầu đánh giá hiệu keo dán fibrin tự thân điều trị phẫu thuật mộng thịt nhãn khoa, Tạp chí Y học TP.HCM, Huỳnh Duy Thảo, Trần Lê Bảo Hà, Lê Thanh Hùng, Võ Quốc Vũ, Hoàng Kc Hương, Thái Trúc Quỳnh, Trần Cơng Toại Nghiên cứu quy trình thu nhận tế bào gốc trung mô từ mô mỡ người hướng đến ứng dụng lĩnh vực y học Y Học TP.HCM, 17(1): 459-466 Jo A (2009) Comparison neural cell differentiation of human adipose mesenchymal stem cells derived from young and old age Dev Repord 13:227-237 Hội Nghị Khoa Học Kỹ Thuật Bệnh Viện An Bình năm 2016 Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 20 * Số * 2016 10 11 12 13 14 15 16 17 Katz AJ, Mesenchymal cell culture: Adipose tissue In: Atala A, Lanza R (2002) Method of Tissue Engineering Academic Press San Diego Le Blanc DM, K, Mueller, I, Slaper-Cortenbach, I, Marini, F, Krause, D, Deans, R, Keating, A, Prockop, D, and Horwitz, E (2006), Minimal criteria for defining multipotent mesenchymal stromal cells, The International Society for Cellular Therapy position statement Cytotherapy, 8(4):315–317 Locke M, John Windsor, P Rod Dunbar (2009), Human adipose-derived stem cell: isolation, characterization and application in surgrey, ANZ Surgrey Journal, 79:235-244 Nguyen Htt, Quan Minh To, Thao Duy Huynh, Toai Cong Tran, Ha Le Bao Tran (2015), gelatin-alginate sponge: a potential scaffold for adipose tissue engineering, european jour nal of biomedical and pharmaceutical sciences, 2(7): 48-53 Pittenger MF, Mackay AM, Beck SC et al (1999) Multilineage potential of adult human mesenchymal stem cell Science; 284:143-147 Sen A et al (2001) Adipogenic potential of human adipose derived stromal cells from multiple donors is heterogenous J Cell biochem 81:312-319 Strem BM et al (2005) Multipotential differentiation of adipose tissue-derived stem cells The Keio journal of medicine, 54:132-141 Thái Trúc Quỳnh, Huỳnh Duy Thảo, Võ Quốc Vũ, Nguyễn Khánh Hòa, Lưu Thị Thu Thảo, Đặng Trần Quân, Trần Công Toại Nghiên cứu quy trình tạo keo dán từ huyết tương người Tạp chí Y Học Việt Nam 2014 18 19 20 21 22 23 Nghiên cứu Y học Tran Cong Toai, Huynh Duy Thao, Nguyen Phuong Thao, Ciro Gargiulo and Phan Kim Ngoc, et al (2010) In vitro culture and differentiation of osteoblasts from human umbilical cord blood Cell and Tissue Banking 11:269-280 Tran CT, Ciro Gargiulo, Huynh Duy Thao, Huynh Minh Tuan, Luis Filgueira and D Michael Strong (2011) Culture and differentiation of osteoblasts on coral scafford from human bone marrow mesenchymal stem cells Cell and Tissue Banking 12:247-261 Trần Giao Hòa, Đỗ Thu Hằng.(2002) Bước đầu đánh giá kết lâm sàng việc sử dụng chế phẩm san hô Việt Nam để điều trị sang thương xương Tuyển tập cong trình nghiên cứu khoa học Răng Hàm Mặt, Đại học Y Dược TP.HCM, 131138 Wolter TP, Von Heimburg D, Stoffels I et al (2005) Cryopreservation of mature human adipocytes: In vitro measurement of viability Ann Plast Surg 55:408-413 Zaffe D (2005) Some considerations on biomaterials and bone Micron, 36:583–592 Zuk PA, Zhu M, Ashjian P et al (2002), Human adipose tissue is a source of multipotent stem cells, Molecular Biological Cell, 13:4279-4295 Ngày nhận báo: 03/08/2016 Ngày phản biện nhận xét báo: 10/08/2016 Ngày báo đăng: 05/10/2016 Hội Nghị Khoa Học Kỹ Thuật Bệnh Viện An Bình năm 2016 13 ... dụng tế bào gốc phát triển vào nhiều lĩnh vực nghiên cứu, từ nghiên cứu khoa học ứng dụng lâm sàng y học Nhiều loại tế bào gốc thể nghiên cứu triển khai ứng dụng Tuy nhiên, tế bào gốc trung mô. .. nghiên cứu theo xu hướng phát triển công nghệ mô giới với mục tiêu tạo mảnh ghép công nghệ mô để ứng dụng cụ thể vào lĩnh vực y học tái tạo nhằm làm đ y trường hợp khuyết hổng mô Các nghiên cứu. .. ghép cơng nghệ Do nhóm nghiên cứu bước đầu thử nghiệm tạo loại mảnh ghép khác từ kết hợp tế bào gốc trung mô loại khung nâng đỡ sinh học khác để đánh giá tiềm loại mảnh ghép y học tái tạo Mô mỡ người