Bài viết trình bày nồng độ EBV - DNA huyết tương của bệnh nhân ung thư vòm mũi họng và mối tương quan với chẩn đoán giai ðoạn TNM (Nghiên cứu được thực hiện với mục tiêu định lượng nồng độ EBV - DNA huyết tương của bệnh nhân ung thư vòm mũi họng và khảo sát mối tương quan giữa nồng độ EBV - DNA huyết tương với chẩn đoán TNM (tumor nodes metastasis) (TNMs). 74 bệnh nhân ung thư vòm mũi họng giai đoạn I - IVB được lựa chọn vào nghiên cứu; Kỹ thuật Real Time PCR sử dụng để định lượng nồng độ EBV - DNA huyết tương.
TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC NỒNG ðỘ EBV - DNA HUYẾT TƯƠNG CỦA BỆNH NHÂN UNG THƯ VÒM MŨI HỌNG VÀ MỐI TƯƠNG QUAN VỚI CHẨN ðOÁN GIAI ðOẠN TNM (TUMOR NODES METASTASIS) Phạm Huy Tần, Trần Huy Thịnh, Trần Thị Thúy Hằng, Nguyễn ðình Phúc, Trần Vân Khánh Trường ðại học Y Hà Nội Nghiên cứu ñược thực với mục tiêu ñịnh lượng nồng ñộ EBV - DNA huyết tương b ệnh nhân ung thư vòm mũi họng khảo sát mối tương quan nồng ñộ EBV - DNA huyết tương với chẩn ñoán TN M (tumor nodes metastasis) (TN Ms) 74 b ệnh nhân ung thư vòm mũi họng giai đoạn I - IVB ñược lựa chọn vào nghiên cứu; Kỹ thuật Real Time PCR sử dụng ñể ñịnh lượng nồng ñộ EBV - DNA huyết tương Kết cho thấy tỷ lệ bệnh nhân có EBV - DNA dương tính 67,6%, âm tính 32,4%, số copies trung b ình 2,04 x 105 (trung vị 3,4 x 104) Mối tương quan nồng độ EBV - DNA với chẩn đốn T: giai đoạn T1 T2 có nồng độ dương tính 69,8%, giai đoạn T3 T4 61,9%, khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê với p > 0,05 Mối tương quan nồng ñộ EBV - DNA với chẩn đốn N: giai đoạn có nhiều di hạch cổ tỉ lệ bệnh nhân có nồng độ EBV - DNA dương tính cao, giai ñoạn N3 chiếm 92,9%, giai ñoạn N1 N2 chiếm 69%, giai đoạn lại 44,4%, khác biệt có ý nghĩa thống kê với p < 0,05 Số b ản copies nhóm bệnh nhân giai đoạn I, II 5,20 x 10 (trung vị 3,4 x 104) thấp cách có ý nghĩa thống kê so với nhóm bệnh nhân giai đoạn III IV 3,24 x 105 (trung vị 4,2 x 104), p < 0,05 Từ kết luận, nồng ñộ EBV - DNA huyết tương có tương quan với tình trạng di hạch giai đoạn b ệnh nhân ung thư vòm mũi họng Từ khóa: EBV-DNA, ung thư vòm mũi họng, mối tương quan I ðẶT VẤN ðỀ Ung thư vòm mũi họng loại ung thư phổ biến mang tính khu vực [1] Trên Thế giới hàng năm có 80.000 trườ ng hợp mắc, phía nam Trung Quốc tỉ lệ mắc cao 25 trường hợp 100.000 dân, Mỹ Châu Âu tỉ lệ mắc thấp 0,5 ñến 100.000 dân [2] Ở Việt Nam, tỉ lệ từ 5,2 ñến 13,2 trường hợp 100.000 dân, theo thống kê ung thư Hà Nội, ung thư vòm mũi họng loại ung thư hay gặp ung thư vùng tai mũi họng ñứng hàng thứ t rong 10 loại ung t hư phổ biến Việt Nam [3] Ung thư vòm mũi họng có liên quan đến nhiều yếu tố ñịa lý, chủng tộc, thói quen sinh hoạt ñặc biệt vai trò sinh bệnh học Epstein Barr Virus (EBV) ung thư vòm mũi họng Bằng kỹ thuật P CR, E BV DNA tìm t hấy máu, mô sinh thiết bệnh nhân ung thư vòm mũi họng Trong năm gần đây, nhiều cơng trình nghiên cứu giới đánh giá mối tương quan nồng ñộ EBV huyết tương ñáp ứ ng ñiều trị Năm 2006, Jeung c ộng ñã chứng minh nồng ñộ EBV - DNA huyết tương có vai t rò yếu tố tiên lượng ñộc lập [4] Các kết nghiên cứu sau ñó ñều cho thấy thay ñổi nồng ñộ EBV - DNA trước sau ñiều trị, nêu lên vai trò yếu tố đánh ðịa liên hệ: Trần Vân Khánh, Trung tâm Gen - Protein, Trường ðại học Y Hà Nội Email: vankhanh73@yahoo.com Ngày nhận: 27/5/2015 Ngày ñược chấp thuận: 20/7/2015 24 giá ñáp ứ ng với ñiều t rị tiên lượng nguy tái phát ung thư vòm mũi họng [5 - 7] Như vậy, kết từ nghiên cứu ñều cho thấy rằng, nồng ñộ EBV - DNA huyết TCNCYH 95 (3) - 2015 TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC tương xét nghiệm khơng xâm nhập, tiện lợi có vai trò tiên lượng đánh giá điều t rị cách lâu dài Ở Việt Nam có số nghiên T0: Khơng có chứng khối u ngun phát Tis: Ung thư biểu mô chỗ cứu ung thư vòm phát có mặt T1: U giới hạn vòm họng và/hoặc u EBV - DNA bệnh nhân ung thư vòm, chưa có nghiên cứu định lượng nồng xâm lấn họng miệng, hốc mũi c hưa ñộ EBV - DNA huyết tương bệnh nhân ung t hư vòm mũi họng ñánh giá mối tương quan giữ a nồng ñộ EBV - DNA theo giai đoạn ðể góp phần ñưa xét nghiệm ñịnh lượng nồng ñộ EBV - DNA vào chẩn đốn, điều trị tiên lượng bệnh ung thư vòm mũi họng Việt Nam, đề tài thực với mục tiêu: ðịnh lượng nồng ñộ EBV - DNA huyết tương bệnh nhân ung thư vòm mũi họng Khảo sát mối tương quan nồng độ EBV - DNA huyết tương với chẩn đốn TNMs II ðỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP ðối tượng Các bệnh nhân chẩn đốn ung thư vòm mũi họng giai ñoạn I - IVB Trung tâm xâm lấn khoang cạnh vòm họng T2: Xâm lấn khoang cận hầu T3: U xâm lấn cấu trúc xương và/ xoang cạnh mũi T4: U x âm lấn nội sọ, dây thần kinh sọ não, hạ họng, hốc mắt, hố thái dương, khoang nhai N - H6ch vùng Nx: Khơng thể đánh giá hạch lympho vùng No: Khơng có di hạch lymphơ vùng N1: Một hay nhiều hạch cổ c ùng bên đường kính ≤ cm phía hố thượ ng đòn, và/hoặc hạch sau vòm họng bên hai bên đường kính ≤ cm N2: Hạch cổ bên đường kính ≤ 6cm phía hố thượng đòn Ung bướ u Chăm sóc giảm nhẹ, Trung tâm N3: a: Hạch có đường kính > 6cm Y học hạt nhân, sở điều trị hóa xạ c b: Hạch hố thượng đòn bệnh viện K, bệnh viện Tai Mũi Họng Trung ương từ 09/2013 ñến 09/2014 Tiêu chu(n l+a ch-n b/nh nhân M - Di xa Mo: Chưa có di xa M1: Có di xa + Bệnh nhân điều trị lần đầu Nhóm giai đoạn + Chỉ số tồn trạng (PS) 0,1 Giai ñoạn Tis N0 M0 + Chẩn ñoán giải phẫu bệnh xác ñịnh Giai ñoạn I Giai ñoạn II T1 N0 M0 T2N0 M0 ung thư vòm mũi họng + Chẩn đốn giai đoạn I - IVB theo AJCC T1 N1 M0 2010 T2 N1 M0 Ch(n đốn giai ño6n theo phân lo6i Giai ñoạn III AJCC7 2010 T - KhBi u ngun phát Tx: Khơng thể đánh giá ñược khối u nguyên phát 2015 TCNCYH 95 (3) - 2015 T1N2 M0 T2 N2 M0 th T3,N0,1, 2M0 Giai ñoạn IVA T4 N0,1, M0 Giai ñoạn IVB T N3 M0 Giai ñoạn IVC T N M1 25 TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC Phương pháp PCR: 950C - 4phút; 40 chu kỳ: 950 C - 30 giây, Phương pháp nghiên cứu tiến cứu, theo 600C - phút (chọn ñọc kết bước này), dõi dọc 2.1 CM mOu: lấy tất bệnh nhân thỏa mãn tiêu chuẩn lựa chọn thời gian nghiên cứu giữ mẫu 150C + Nồng ñộ ngưỡng ño (< 300 copy/ ml) ñược coi âm tính với EBV - DNA + EBV - DNA dương t ính xác định nồng ñộ EBV - DNA ≥ 300 copy/ml + Nồng ñộ ngưỡng ño ñược ≥ 300 L+a ch-n b/nh nhân: theo tiêu chuẩn lựa copies/ml, ñược ghi nhận nồng ñộ cụ thể chọn Gð I - IVB B/nh ph(m: Lấy 2ml máu tĩnh mạch bệnh nhân chống đơng EDTA Phân tích mối tương quan nồng độ EBV - DNA huyết tương với chẩn đốn TNMs Xử lý số liệu Chẩn đốn giai đoạn theo AJCC 2010 + Xử lý số liệu c ác thuật t ốn thống ðánh giá nTng đU EBV - DNA huyXt tương Tách chiết DNA tổng số từ huyết tương theo phương pháp sử dụng enzym prot ease K phenol: chloroform: isoamyl alcohol Kỹ thuật realtime PCR ñược sử dụng ñể ñịnh lượng nồng ñộ EBV - DNA huyết kê y học + So sánh biến ñịnh tính kiểm định Fisher xác + Khảo sát mức khác biệt giá trị trung bình kiểm ñịnh Mann - Whitney ðạo ñức nghiên cứu tương Thành phần phản ứng realtime PCR (thể Bệnh nhân hoàn tồn tự nguyện tham gia tích 20µl) gồm: 1X đệm P CR; 2,5mM dNTP, vào nghiên cứu Bệnh nhân có quyền rút lui 0,2µM khỏi nghiên cứu khơng đồng ý tiếp tục mồi xuôi ngược, 0,5U Taq polymerase, 20 - 50ng DNA H2O tham gia vào nghiên cứu Các thơng tin cá Chu t rình nhiệt c phản ứng realt ime nhân ñược ñảm bảo bí mật III KẾT QUẢ Chẩn đốn TNMs Bảng Chẩn đốn giai đoạn theo TNMs Số lượng bệnh nhân Chẩn đốn TNMs Theo kíc h thước hạch (N) Theo kíc h thước khối u (T) Chẩn đốn TNMs 26 n (n = 74) % No, Nx 18 24,3 N1 - N2 42 56,8 N3 14 18,9 T1 - T2 53 71,6 T3 - T4 21 28,4 Giai ñoạn + 34 46,0 Giai ñoạn + 40 54,0 TCNCYH 95 (3) - 2015 TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC Trong số 74 bệnh nhân ñến khám, chủ yếu gặp giai ñoạn hạch N1 (39,2%), giai ñoạn không phát thấy hạch c ổ (24,3%) sau ñó ñến giai ñoạn N3 (18,9% ), giai ñoạn N2 t hấp (17,6% ) Chẩn đốn t heo T giai đoạn T1 chủ y ếu chiếm (51,4%), thấp giai ñoạn T4 (13,5% ) Chẩn đốn theo giai đoạn TNMs thấy chủ yếu giai đoạn II (33,8%) sau giai đoạn IV (29,7% ) , gặp giai ñoạn I (12,2% ) Kết nồng ñộ EBV - DNA huyết tương Hình Kết realtime PCR định lượng nồng ñộ EBV - DNA huyết tương Bệnh nhân c ó kết dương tính với EBV - DNA nồng độ 5,0 x 106 c opy/ml (độ pha lỗng 50 lần) Bảng Kết nồng ñộ EBV - DNA huyết tương nhóm nghiên cứu Số bệnh nhân Số lượng bệnh nhân Nồng ñộ EBV - DNA n % Âm tính 24 32,4 Dương tính 50 67,6 74 100 Tổng Trung bình (của nhóm dương tính): 2,04 x10 Trung vị: 3,4 x 104 Trong 74 bệnh nhân ñược làm xét nghiệm EBV - DNA huyết tương trước điều trị chúng t thấy tỷ lệ dương tính 67, 6%, âm tính 32,4%, số copies trung bình 2,04 x 105, 50% số bệnh nhân dương t ính có số copy 3,4 x 104 2015 TCNCYH 95 (3) - 2015 27 TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC Mối tương quan EBV - DNA với chẩn đốn TNMs Bảng Mối tương quan nồng ñộ EBV - DNA huyết tương với chẩn đốn T chẩn đốn N Nồng độ EBV - DNA Nồng độ EBV DNA Chẩn đốn TNM Theo kíc h thước u (T) Theo kíc h thước hạch (N) Âm tính Dương tính Tổng n1 % n2 % T1 T2 16 30,2 37 69,8 53 T3 T4 38,1 13 61,9 21 Nx, N0 10 55,6 44,4 18 N1 N2 13 31,0 29 69,0 42 N3 7,1 13 92,9 14 p > 0,05 < 0,05 Mối tương quan nồng ñộ EBV - DNA với chẩn đốn T chúng tơi t hấy giai đoạn T1 T2 có nồng độ dương tính 69,8%, giai ñoạn T3 T4 61,9%, khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê, p > 0,05 Mối tương quan nồng ñộ EBV - DNA với chẩn đốn N chúng tơi thấy giai đoạn nhiều di hạch cổ tỉ lệ có nồng độ EBV - DNA dương tính cao, giai ñoạn N3 chiếm 92,9%, giai ñoạn N1 N2 (69%) giai đoạn lại 44,4%, khác biệt có ý nghĩa thống kê, p < 0,05 Bảng Mối tương quan nồng ñộ EBV - DNA huyết tương với giai ñoạn bệnh Giai ñoạn bệnh Nồng ñộ EBV DNA Giai ñoạn I II (n = 22) Giai ñoạn III IV (n = 28) EBV - DNA dương tính (n = 50) Trung bình Trung vị Trung bình thứ hạng 5,11 x 104 3,4 x 104 21,5 4,2 x 104 28,6 3,24 x 10 p < 0,05 Trên bệnh nhân có xét nghiệm EBV - DNA dương tính chúng tơi thấy số copy trung bình 22 t rường hợp ñược phát sớm giai ñoạn I II có số lượ ng copy virus 5,11 x 104 copy (trung bình thứ hạng 21,5) tương ứng với trung vị 3,4 x 104, thấp hẳn so với nhóm phát muộn giai ñoạn III IV (28 bệnh nhân) với số copy tương ứng 3,24 x 105 (trung bình thứ hạng 28,6) tương ứng với trung vị 4,2 x 104 Kiểm ñịnh Mann - Whitney cho thấy khác biệt có ý nghĩa thống kê mức p < 0,05 28 TCNCYH 95 (3) - 2015 TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC IV BÀN LUẬN Mối quan hệ ung thư vòm mũi họng EBV chứng minh có mặt gen virus nhân tế bào ung thư Trước kia, người ta sử dụng kháng thể kháng EBV yếu tố để chẩn đốn tiên lượng ung thư vòm mũi họng ng phương pháp có giá thành cao, nhiều thời gian, có nguy phơi nhiễm với yếu tố gây ung thư Vì lý đó, kỹ thuật Realtime P CR để định lượng EBV - DNA t rên bệnh nhân ung thư vòm mũi họng đời có khả khắc phục ñược nhược ñiểm Chúng tiến hành xác ñịnh nồng ñộ EBV - DNA huyết tương 74 bệnh nhân ñược lựa chọn kỹ thuật Realtime PCR, kết ñã xác ñịnh nồng ñộ EBV - DNA dương tính 67,6 % với giá trị thấp đếm ñược x 102 copy/ml, nồng ñộ cao ñược ghi nhận nhóm bệnh nhân 1,65 x 106 copy/ ml Nồng ñộ x 102 copy/ml ngưỡng ño ñược ñược coi âm tính, tỉ lệ âm tính EBV - DNA trước điều trị 32,4% Kết nghiên cứu c c húng tơi tương đồng với nghiên cứu Anthony T.C cộng (2002), nghiên cứu 170 bệnh nhân, lấy điểm giới hạn 500 copy/ml có kết 39,7% bệnh nhân có nồng độ EBV - DNA < 500 copy/ml 60,3% có nồng độ EBV DNA cao 500 copy/ml [2] Một số tác giả lấy ngưỡng giá trị cut off thấp hơn, ví dụ Lo cộng [5] lấy giá trị c opy/ml cho tỉ lệ dương tính với xét nghiệm cao 96% Sau xâm nhập vào thể người bệnh, EBV cư trú ñầu tiên niêm mạc biểu mơ vùng vòm mũi họng ðây nơi virus nhân lên, sinh sơi Sau số năm, EBV vượt qua màng đáy cư trú dạng ngủ tế bào lympho B tế bào niêm mạc miệng Dạng DNA EBV huyết tương 2015 TCNCYH 95 (3) - 2015 tế bào ung thư vòm mũi họng tương đồng ðể chứng minh DNA không x uất phát từ virus dạng ngủ tế bào lympho B tế bào niêm mạc miệng, Mutirangura cộng ñã xét nghiệm ñịnh lượng EBV - DNA huyết tương c 82 người khỏe mạnh c ó tiền sử nhiễm virus Kết cho thấy khơng có trường hợp ñược phát EBV - DNA huyết tương [6] ðiều cho thấy EBV - DNA huyết tương phải có nguồn gốc từ tế bào ung thư vòm mũi họng Làm mà EBV DNA từ tế bào ung thư lại có mặt huyết tương ñiều chưa ñược làm sáng tỏ Mutirangura giả t huyết tế bào ung thư vòm mũi họng sau chết giải phóng EBV - DNA vào huyết tương, ơng nghiên cứu mối tương quan tượng chết theo chương trình nồng ñộ EBV - DNA Mặc dù hai yếu tố có mối liên quan với có tới 40% trường hợp chết theo chương trình khơng có EBV - DNA huyết tương tới 54% trường hợp có EBV - DNA huyết tương khơng có tượng chết theo chương trình [6] Có lẽ, có chế khác tham gia vào việc ñưa EBV DNA huyết tương, ví dụ như: tượng hoại tử giải phóng chủ động EBV - DNA từ tế bào ung thư vòm mũi họng thế, cần nhiều cơng trình nghiên cứu hơ n vấn đề Nếu EBV - DNA máu có nguồn gốc từ tế bào ung thư vòm mũi họng nồng độ có liên quan với giai ñoạn bệnh? ðể trả lời câu hỏi này, ñã khảo sát số mối tương quan thấy rằng: số lượng copy EBV - DNA có liên quan với việc có di hạch hay khơng, bệnh nhân di hạch c ó nồng độ EBV - DNA cao cách có ý nghĩa thống kê so với trường hợp chưa di hạch (p < 0,05, Mann - Whitney test) 29 TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC Thêm vào đó, tỉ lệ bệnh nhân có kết quả tỷ lệ dương tính 67,6%, âm tính EBV - DNA dương t ính nhóm giai đoạn 32,4% , nồng độ EBV - DNA huy ết tương c ho tiến triển (III & IV) cao cách có ý nghĩa bệnh nhân ung thư vòm mũi họng t rung bình thống kê so với tỉ lệ nhóm giai đoạn 2,04 x 105/ml, 50% số bệnh nhân khu trú (I&II), (p = 0.017, T - test) Các nghiên cứu công bố y văn vấn dương tính có nồng ñộ EBV - DNA huyết tương 3,4 x 104/ml ñề này, thời ñiểm có kết t rái - Mối tương quan nồng ñộ EBV - DNA ngược Lo cộng năm 1999 nghiên huyết tương với chẩn đốn TNMs: giai đoạn cứu 57 bệnh nhân ung thư vòm mũi họng bệnh muộn nồng độ EBV - DNA người Trung Quốc cơng bố nồng độ EBV - huyết tương cao, di hạch cổ DNA có liên quan tới giai đoạn bệnh, cụ thể nhiều nồng ñộ EBV - DNA huyết bệnh nhân giai ñoạn tiến triển (III & IV ) có tương cao tương quan có ý nồng độ DNA virus cao so với nhóm bệnh nghĩa thống kê nhân giai ñoạn khu trú [5] Tương tự, Hassen cộng năm 2011 kết luận nồng ñộ EBV - DNA bệnh nhân Tunisie có tương quan với di giai ñoạn [7] Ngược lại, tác giả người Thái, Mutirangura [6] Chindavijak [8] khơng tìm mối tương quan Các tác giả cho rằng, vùng địa lý có tỉ lệ mắc ung thư vòm mũi họng cao như: phía nam Trung Quốc, Việt Nam, Tunisie EBV có mối liên quan với bệnh chặt chẽ so với nhữ ng vùng địa lý có tỉ lệ mắc ung thư vòm mũi họng thấp Trong nghiên cứu này, chúng tơi tìm mối liên quan nồng độ EBV - DNA huyết tương với giai ñoạn T, số lượ ng copy EBV - DNA nhóm giai đoạn T3, T4 cao so với nhóm giai đoạn T1, T2 khác biệt khơng c ó ý nghĩa t hống kê ðào Văn Tú năm 2012 nghiên cứu 30 bệnh Lời cảm ơn Nhóm nghiên cứu trân trọng cảm ơn Trung tâm Ung bướu Chăm sóc giảm nhẹ, Trung tâm Y học hạt nhân, sở điều trị Hóa xạ bệnh viện K, bệnh viện Tai Mũi Họng Trung ương, Trung tâm Nghiên cứu Gen - Protein, Trường ðại học Y Hà Nội ñã tạo ñiều kiện giúp ñỡ trình thực nghiên cứu TÀI LIỆU THAM KHẢO Vũ Triệu An (1984) Một vài khía cạnh ung thư vòm họng Việt Nam, Y học thực hành, (252) 13 Anthony T C (2002) Plasma EpsteinBarr Virus DNA and Residual Disease After Radiotherapy for Undifferentiated Nasopharyngeal Carcinoma Journal of the National Canc er Institute, 94(21), 1614 - 1619 nhân ung thư vòm mũi họng ðỗ Hòa Bình (1993) Nghiên cứu tình khơng tìm ñược mối tương quan [ 9] trạng s uy giảm đáp ứng miễn dịch tế bào Có lẽ, thời gian tới cần phải có nghiên cứu với cỡ mẫu lớn ñể tiếp tục bệnh nhân NPC t rước điều trị Tạp chí Y học làm sáng tỏ vấn ñề V KẾT LUẬN - 74 bệnh nhân ñược làm xét nghiệm EBVDNA huyết tương trước ñiều trị cho kết 30 Việt Nam, 9, - Leung SF (2006) Plasma Epstein-Barr Viral Deoxyribonucleic Acid Quantitation Complements Tumor - Node - Metastasis Staging Prognostication in Nasophary ngeal Carci- noma JCO, 24(34), 5414 - 5418 TCNCYH 95 (3) - 2015 TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC Lo YMD, Chan LYS, Lo KW et al Hassen E, Farhat K, Gabbouj S et al (1999) Quantitative analysis of cell-free Ep- (2011) Epstein - B arr virus DNA quantification stein-Barr virus DNA in plasma of patients with and follow - up in Tunisian nasopharyngeal nasopharyngeal carcinoma Cancer Res, 59, carcinoma patients Biomark ers, 16(3), 274 - 280 1188 - 1191 Mutirangura A, Pornthanaka sem W, Chindavijak S, Tiwawech D, Sangari- Theamboonlers A, Sriurangong V et al yavanich E (2008) Quantitative detection of (1998) Epstein-Barr Viral DNA in serum of plasma cell-free E pstein-B arr virus DNA in patients with nas ophryngeal carcinoma Clini- nasopharyngeal carcinoma patients by real- cal Cancer Researc h, 4, 665 - 669 time PCR Thai Cancer Journal, 28(1), 13 - 23 Summary QUANTITATIVE ANALYSIS OF CELL - FREE EBV - DNA IN PLASMA OF PATIENTS WITH NASOPHARYNX CANCER AND CORRELATION TO TNMs DIAGNOSIS The study was carried out with the purpos e to quantitate the plasma EBV - DNA of cancer nasopharynx (NPC) patients and to examine the relationship bet ween the concentrations of plasma EBV - DNA with a diagnosis of TNM (TNMs) 74 NP C patients with stage I - IVB were selected for the study; Real Time PCR technique was used to quantify the concentrations of plasma EBV - DNA The results showed that the proportion of patients with positive EBV - DNA was 67.6%, negative EBV-DNA was 32.4% with an average number of copies of 2.04 x 105 (median 3.4 x 104) Correlations between EBV - DNA levels to diagnose T: T1 and T2 phase concentration was 69.8% positive, T3 and T4 stage was 61.9%, the difference was not statistically significant wit h p > 0.05 Correlations between EBV - DNA c oncent ration with N diagnosis: the rate of patients wit h high EBV - DNA positive levels is in direct correlation with the higher stage of metastatic lymphadenopathy; 92.9% in N3 stage, 69% in stages N1 and N2, the remaining stage represent 44.4%, the difference was statistically significant with p < 0.05 Patients in phase I and II have 5.20 x 104 (median 3.4 x 104) copies which is statistically lower when compared with patients with stage III and IV with 3,24 x 105 copies (median 4.2 x 104 ), p < 0.05 Conclusion: EBV - DNA levels in plasma correlat ed with lymph node met astasis status and stage of NPC patients Keywords: EBV -DNA, nasopharynx cancer, correlation 2015 TCNCYH 95 (3) - 2015 31 ... vòm mũi họng Việt Nam, ñề tài ñược thực với mục tiêu: ðịnh lượng nồng ñộ EBV - DNA huyết tương bệnh nhân ung thư vòm mũi họng Khảo sát mối tương quan nồng ñộ EBV - DNA huyết tương với chẩn đốn TNMs... ñộ EBV - DNA ngược Lo cộng năm 1999 nghiên huyết tương với chẩn đốn TNMs: giai đoạn cứu 57 bệnh nhân ung thư vòm mũi họng bệnh muộn nồng ñộ EBV - DNA người Trung Quốc ñã cơng bố nồng độ EBV - huyết. .. Bảng Mối tương quan nồng ñộ EBV - DNA huyết tương với giai ñoạn bệnh Giai ñoạn bệnh Nồng ñộ EBV DNA Giai ñoạn I II (n = 22) Giai ñoạn III IV (n = 28) EBV - DNA dương tính (n = 50) Trung bình Trung