Trong nghiên cứu này, khuôn định dạng ứng dụng trong kỹ thuật mô xương được chế tạo từ vật liệu vô cơ hydroxyapatit trên nền chitosan. Sự kết hợp giữa hydroxyapatit và chitosan sẽ làm tăng khả năng tương thích sinh học của khuôn định dạng.
VNU Journal of Science: Natural Sciences and Technology, Vol 35, No (2019) 86-94 Original Article Synthesis and Investigation into Apatite-forming Ability of Hydroxyapatite/Chitosan-based Scaffold Tran Thanh Hoai, Nguyen Kim Nga School of Chemical Engineering, Hanoi University of Science and Technology, Dai Co Viet, Hanoi, Viet Nam Received 10 May 2019 Revised 02 June 2019; Accepted 18 June 2019 Abstract: In this study, porous scaffolds were fabricated using inorganic material-hydroxyapatite and chitosan for bone-tissue engineering The combination of hydroxyapatite and chitosan may result in increasing biocompatibility of the scaffolds The scaffolds were prepared by solvent casting and paticulate leaching method Bioactivity of the scaffolds was evaluated through in vitro experiments by soaking scaffold samples in simulated body fluid (SBF) The scaffolds obtained were highly porous and interconnected with a mean pore size of around 200µm and porosity about 79 % The apatite-mineral layer was produced on the HAp/chitosan after 10 days of soaking in SBF, however, it was not observed on the chitosan scaffold after 10 days soaking The results revealed that the HAp/chitosan scaffold showed better bioactivity than the chitosan scaffold Keywords: Scaffold, Chitosan, Apatite, SBF Corresponding author Email address: nga.nguyenkim@hust.edu.vn https://doi.org/10.25073/2588-1140/vnunst.4896 86 VNU Journal of Science: Natural Sciences and Technology, Vol 35, No (2019) 86-94 Tổng hợp nghiên cứu khả tạo apatit khuôn định dạng hydroxyapatit chitosan Trần Thanh Hoài, Nguyễn Kim Ngà Viện Kỹ thuật Hóa học, Trường Đại học Bách Khoa Hà Nội, Đại Cồ Việt, Hà Nội, Việt Nam Nhận ngày 10 tháng năm 2019 Chỉnh sửa ngày 02 tháng năm 2019; Chấp nhận đăng ngày 18 tháng năm 2019 Tóm tắt: Trong nghiên cứu này, khn định dạng ứng dụng kỹ thuật mô xương chế tạo từ vật liệu vô hydroxyapatit chitosan Sự kết hợp hydroxyapatit chitosan làm tăng khả tương thích sinh học khn định dạng Khuôn định dạng tổng hợp phương pháp đổ dung mơi rửa hạt Hoạt tính sinh học đánh giá thơng qua thí nghiệm in vitro dung dịch giả plasma (SBF) Kết nghiên cứu cho thấy khuôn định dạng HAp/chitosan có độ xốp 83%, kích thước lỗ trung bình khoảng 200 µm, tạo lớp khống apatit sau 10 ngày ngâm dung dịch SBF Tuy nhiên, khuôn định dạng chitosan sau 10 ngày ngâm không tạo lớp khống apatit Kết cho thấy, khn định dạng HAp/chitosan có khả tương thích sinh học tốt khn định dạng chitosan Từ khóa: Khn định dạng, Chitosan (Cs), Apatit, SBF chất học khuôn định dạng HAp có thành phần tương tự thành phần khống xương nên có tính tương thích sinh học cao Hơn nữa, bị phân hủy, HAp giải phóng ion canxi photpho có lợi cho việc hình thành phát triển xương Các nghiên cứu trước công bố kết khuôn định dạng composite với có mặt nano HAp làm tăng khả tương thích sinh học khn định dạng với tế bào [2] Bên cạnh đó, việc lựa chọn polyme kết hợp với HAp đóng vai trò quan trọng đến tính tương thích sinh học khn định dạng Mở đầu Khuôn định dạng (scaffold) khuôn tạm thời để tế bào bám dính, sinh trưởng, phát triển hình thành khung ngoại bào trình hình thành cấu trúc mơ ứng dụng cấy ghép điều trị tổn thương xương [1] Khuôn định dạng chế tạo từ vật liệu polyme phân hủy sinh học, vật liệu vô có hoạt tính sinh học composite Vật liệu composite với liên kết hydroxyapatit (HAp) polyme, xem phương pháp hiệu để tăng cường hoạt tính sinh học tính Tác giả liên hệ Địa email: nga.nguyenkim@hust.edu.vn https://doi.org/10.25073/2588-1140/vnunst.4896 87 88 T.T Hoai, N.K Nga / VNU Journal of Science: Natural Sciences and Technology, Vol 35, No (2019) 86-94 Chitosan (Cs) polysacarit mạch thẳng cấu tạo từ D-glucosamine N-acetyl-Dglucosamin có cấu trúc gần giống với cấu trúc khn ngoại bào nên có khả tương thích tốt với tế bào [3, 4] Hơn nữa, Chitosan nghiên cứu ứng dụng nhiều lĩnh vực y sinh như: chất dẫn thuốc, thành phần da nhân tạo Các nghiên cứu cho thấy chitosan chất không độc hại, không gây phản ứng miễn dịch, có tính kháng khuẩn, có khả thúc đẩy q trình chữa lành mơ mềm, mơ cứng có khả phân hủy sinh học [5] Với ưu điểm nêu trên, nghiên cứu lựa chọn chitosan làm chất tổng hợp khuôn định dạng Khuôn định dạng dùng kỹ thuật mơ nói chung cần có ba u cầu sau: phải có khơng gian xác định để mơ tái sinh; phải có tính chất phù hợp để đảm nhiệm chức phần tổn thương q trình mơ tái tạo cho phép mô phát triển dễ dàng khuôn tế bào cấy lên, protein hay tín hiệu kích thích tạo xương [6] Cấu trúc 3D khn định dạng phải có độ xốp cao, lỗ xốp có độ liên thơng cao Các nghiên cứu cho thấy với kích thước lỗ tối thiểu 100 µm thích hợp cho tế bào di chuyển q trình trao đổi chất tế bào với mơi trường [7, 8] Cấu trúc vi mô khuôn định dạng yếu tố quan trọng ảnh hưởng đến hoạt tinh sinh học khuôn định dạng Các đặc điểm cấu trúc khuôn định dạng phụ thuộc vào phương pháp chế tạo Hiện nay, giới có số nghiên cứu chế tạo vật liệu composit HAp/CS theo phương pháp khác thử tính tương thích sinh học với tế bào động vật Thein-Han cộng chế tạo khuôn định dạng sở composit HAp/CS phương pháp đông khô Kết tạo mẫu khn định dạng có cấu trúc xốp, với kích thước lỗ xốp khoảng 50- 120 μm [9], có khả bám dính phát triển tế bào cao nhiều so với vật liệu CS (điều chế điều kiện) Trong đó, Yanzhong Zhang cộng dùng phương pháp electrospining để chế tạo khuôn định dạng HAp/Cs dạng sợi [10] Phương pháp có ưu điểm tạo khn định dạng có độ xốp cao khó điều chỉnh kích thước lỗ hình dạng khn định dạng Kết thử nghiệm sinh học với tế bào cho thấy composit HAp/CS dạng sợi có khả hình thành xương tốt nhiều so với vật liệu CS Trong nước, có số nghiên cứu chế tạo composit HAp/Cs [11], nghiên cứu chế tạo vật liệu dạng 2D ứng dụng kỹ thuật y sinh dạng 3D chưa có nghiên cứu công bố Từ tài liệu tổng hợp thấy, nhiều phương pháp khác nghiên cứu để chế tạo khuôn định dạng 3D HAp/Cs, phương pháp có ưu nhược điểm riêng Trong nghiên cứu này, sử dụng phương pháp đổ dung mơi rửa hạt, có ưu điểm đơn giản hiệu cao, dễ dàng tạo hình cho khn định dạng dễ kiểm sốt độ xốp, kích thước lỗ khn định dạng kích thước số lượng hạt tạo lỗ Phương pháp thực thành công nghiên cứu chế tạo khuôn định dạng HAp/PDLLA công bố chúng tơi [12] Trong cơng trình này, chúng tơi sử dụng phương pháp đổ dung môi rửa hạt với hạt tạo lỗ NaCl để chế tạo khuôn định dạng 3D composite HAp/Chitosan Tính tương thích sinh học vật liệu HAp/CS tổng hợp đánh giá thông qua thí nghiệm in-vitro với dung dịch mơ dịch thể người (SBF) Thực nghiệm 2.1 Hóa chất Các hóa chất sử dụng hóa chất Merck: CH3COOH, NaCl, CaCl2.2H2O, Na2HPO4.2H2O, NaOH, NaHCO3, KCl, K2HPO4.3H2O, MgCl2.6H2O, Na2SO4, CH2(OH)3CNH2, Chitosan Bột nano HAp (dtb = 28 nm ± 5, ltb = 120 nm ± 32, tỉ lệ Ca/P = 1,66, tỷ lệ bề mặt = 4,29) Bột HAp tổng hợp theo [13] 2.2 Chế tạo khuôn định dạng composite HAp/ Chitosan Khuôn định dạng tổng hợp theo phương pháp đổ dung môi rửa hạt T.T Hoai, N.K Nga / VNU Journal of Science: Natural Sciences and Technology, Vol 35, No (2019) 86-94 thực nghiên cứu trước [12] Phương pháp thực cách hòa tan 0,48 g Cs lọ thủy tinh chứa 24ml dung dịch CH3COOH 3% máy khuấy từ, điều chỉnh tốc độ khuấy 450 vòng/phút, nhiệt độ phòng, Cân 0,096 g HAp ống falcon dung tích 15ml, thêm vào 1,5 ml nước deion siêu âm Sau dung dịch Cs khuấy trộn 2-3 giờ, nhỏ từ từ huyền phù HAp vào dung dịch Cs, tiếp tục khuấy trộn hỗn hợp Sau giờ, hỗn hợp trộn với 16 g NaCl (kích thước hạt muối 405- 450 µm), hỗn hợp Cs/HAp muối đổ đĩa thủy tinh kích thước 5,5 cm Dùng que khuấy đảo trộn cho hạt muối bao phủ lớp gel Cs Hỗn hợp thu được, để tủ hút giờ, sau sấy 60oC 36 Sau sấy, đĩa vật liệu ngâm dung dịch NaOH 10% 30 phút, sau rửa lại nhiều lần nước cất lần Sau đó, sản phẩm đem sấy khô, cuối thu miếng vật liệu xốp HAp/Cs Thí nghiệm tổng hợp khn định dạng HAp/Cs thực phòng thí nghiệm Hóa Vơ cơ, trường Đại học Bách Khoa Hà Nội 2.3 Phương pháp nghiên cứu hình thái học đặc trưng khuôn định dạng Giản đồ XRD đo máy Siemens D5005 sử dụng xạ CuKα (λ= 0,15406 nm), góc quay từ 10-70o, Trung tâm Khoa học Vật liệu, trường Đại Học Khoa học Tự nhiên Phổ FT-IR đo máy Impact-410, Nicolet-Hoa Kỳ theo phương pháp ép viên KBr Thí nghiệm phân tích mẫu thực Viện Hóa học, Viện Hàn lâm Khoa học Cơng nghệ Việt Nam Hình thái học mẫu tổng hợp xác định thiết bị hiển vi điện tử truyền qua SEM (S4800, Hitachi, Nhật Bản), viện Vệ sinh Dịch tễ Trung ương Kích thước lỗ khuôn định dạng đo phần mềm ImageJ ảnh SEM Độ xốp mẫu đo theo phương pháp bão hòa chất lỏng [14] thực 89 phòng thí nghiệm Hóa Vơ cơ, trường Đại học Bách Khoa Hà Nội Chất lỏng sử dụng nước cất Mẫu sấy khô đến khối lượng không đổi cân khối lượng Wi Mẫu ngâm vào ống nước tích V1 Nước hút vào lỗ xốp đến tất lỗ bão hòa nước Tổng thể tích nước nước bão hòa khn định dạng V2 Khi thể tích đặc khuôn định dạng HAp/Cs (V2 – V1) Sau đó, khn định dạng bão hòa nước nhấc khỏi ống nước thể tích nước lại ống V3 Thể tích tổng cộng khn định dạng V = (V2 – V1) + (V1 – V3) = (V2 – V3) Khối lượng khuôn định dạng trước sau ngâm nước Wi Wf Thể tích lỗ khn định dạng (Wf – Wi)/𝜌𝐻2 𝑂 Độ xốp khuôn định dạng tính theo cơng thức sau: Độ xốp = (𝑊𝑓−𝑊 )/𝜌𝐻2 𝑂 𝑖 𝑉2 −𝑉3 Các kết đo nhiều lần lấy giá trị trung bình Sử dụng Anova để phân tích thơng kê với giá trị P < 0,05 giá trị có khác biệt mẫu 2.4 Thử nghiệm khả tạo apatit khuôn định dạng HAp/Chitosan Dung dịch giả plasma người SBF chuẩn bị theo tài liệu [15] Các hóa chất bổ sung theo protocol để đảm bảo dung dịch cuối thu không bị kết tủa pH đạt 7,4 Các mẫu khuôn định dạng HAp/Cs cắt nhỏ với đường kính 10 mm ngâm 15 ml dung dịch SBF nhiệt độ 37oC Sau 3, 6, 10 ngày, mẫu lấy tráng rửa nhiều lần nước khử ion sấy khô nhiệt độ 4045oC Mẫu sau sấy khô quan sát qua hiển vi điện tử quét (SEM) để xác định hình thái lớp apatit tạo thành Tỉ lệ Ca/P lớp apatit hình thành bề mặt khn định dạng HAp/Cs phân tích thiết bị đo phổ tán xạ lượng tia X (EDX) Lượng Ca2+ bám bề mặt khuôn định dạng đánh giá thông qua thay đổi nồng độ Ca2+ dung dịch SBF 90 T.T Hoai, N.K Nga / VNU Journal of Science: Natural Sciences and Technology, Vol 35, No (2019) 86-94 Kết thảo luận 3.1 Kết phân tích hình thái học đặc trưng khuôn định dạng Sự tương tác hai loại vật liệu chitosan pha tinh thể HAp việc tổng hợp khuôn định dạng đánh giá qua phổ FT-IR (Hình 1) giản đồ XRD (Hình 2) mẫu HAp, Cs HAp/Cs Trên phổ hồng ngoại Cs có dải hấp thụ nằm vùng 3200÷3500 cm-1 đặc trưng cho dao động hóa trị nhóm –OH liên hợp nhóm NH2 Hai đỉnh hấp thụ 2930,2860 cm-1 đặc trưng cho dao động hóa trị bất đối xứng đối xứng nhóm -CH2, đỉnh hấp thụ 1660 cm-1 đặc trưng cho dao động biến dạng nhóm amin bậc –NH2 Trên phổ hồng ngoại HAp có dải hấp thụ vùng 3400÷3600 cm đặc trưng cho nhóm –OH Đặc biệt hai đỉnh bật 1090 cm-1 629 cm-1 thể dao động hóa trị dao động biến dạng nhóm PO43- Phổ hồng ngoại Cs/HAp thể đầy đủ dải phổ, đỉnh nhóm chức quan trọng hai chất nguyên liệu ban đầu dải 3200÷3600 cm-1 nhóm OH NH2, đỉnh 2935 cm-1 2855 cm-1 nhóm -CH2, đỉnh 1670 cm-1của nhóm NH2, đỉnh 1050 cm-1 646 cm-1 nhóm PO43- HAp Trên giản đồ XRD mẫu Cs cho thấy có pic góc quay 2θ = 20° Giản đồ mẫu bột HAp thấy xuất nhiều pic đặc trưng tồn dạng tinh thể hình que Trong đó, đặc trưng pic vị trí góc quay 2θ = 31,5° đạt giá trị cực đại Mặt khác, HAp tồn dạng tinh thể hình que nên giản đồ XRD nhiều pic góc 2θ khác Tương tự phổ FTIR, từ giản đồ XRD khn định dạng HAp/Cs dễ dàng thấy pha trộn giản đồ chitosan HAp Cụ thể, pic đặc trưng Cs góc quay 2θ = 20° xuất Các pic đặc trưng HAp góc quay 2θ = 31,5°; 40°; 50° thể giản đồ XRS HAp/Cs Hình Phổ FT-IR mẫu HAp, (Cs), HAp/Cs Hình Giản đồ XRD mẫu Cs, HAp/Cs, Hap Điểm khác biệt cường độ đỉnh đặc trưng Cs HAp bị giảm đi, nguyên nhân trộn vào nhau, xuất che chắn Cs HAp ngược lại, từ làm giảm cường độ tán xạ chúng tia tới Kết phân tích giản đồ XRD cho phép khẳng định kết IR tồn pha tinh thể HAP khuôn định dạng compozit HAp/Cs Hơn nữa, hai loại vật liệu Cs HAp hòa trộn khơng xảy phản ứng hóa học mà phân tán vào giữ ngun đặc tính lý hóa T.T Hoai, N.K Nga / VNU Journal of Science: Natural Sciences and Technology, Vol 35, No (2019) 86-94 a c 91 b d Hình Ảnh SEM mẫu khuôn định dạng tạo thành: a, b – mẫu Cs, c,d-mẫu HAp/Cs Hình thái học, cấu trúc lỗ xốp khuôn định dạng Cs HAp/Cs tổng hợp thể hình Các ảnh SEM cho thấy, khuôn định dạng Cs HAp/Cs tổng hợp có cấu trúc xốp, kích thước lỗ xốp lớn khả liên thông lỗ xốp cao Các kết đo đạc tính tốn phần mềm ImageJ cho thấy, kích thước lỗ xốp khn định dạng Cs đạt 209 ± 60 µm (Hình 3: a b), khn định dạng HAp/Cs đạt 196 ± 30 µm (Hình 3: c d) Đây điều kiện thuận lợi cho việc thực trao đổi chất việc di chuyển tế bào vào vật liệu trình cấy ghép, kích thước tế bào nhân thực vào khong 10ữ100 àm Tuy nhiờn, c hai mu vt liệu, kích thước hình dạng lỗ xốp biến động nhiều Chưa đạt đồng mong muốn Mặt khác, độ phóng đại lớn cho thấy thành, vách lỗ xốp lớn hình thành nên lỗ xốp thứ cấp có kích thước nhỏ hơn, đạt mức 3,5 ± 1.6 µm đâm xun qua màng Có thể giải thích hình thành lỗ xốp thứ cấp nhờ vào bay dung mơi q trình sấy Sự xuất lỗ xốp thứ cấp làm tăng diện tích bề mặt khn định dạng, từ làm tăng khả trao đổi chất khả bám dính tế bào khống ni cấy, giúp cải thiện tính tương thích sinh học vật liệu [16] Bảng Độ xốp khuôn định dạng Cs HAp/Cs Mẫu khuôn định dạng HAp/Cs Cs Độ xốp trung bình 78,96 ± 3,18 84,32 ± 3,93 Kết đo thể độ xốp hai mẫu vật liệu tương đối cao Cụ thể, khn định dạng Cs có độ xốp đạt 84,32 ± 3.93 (%), khn định dạng HAp/Cs có độ xốp đạt 78.96 ± 3.18 (%) Nguyên nhân việc độ xốp mẫu Cs cao so với HAp/Cs vật liệu đơn pha chitosan có độ bền học hơn, trình sấy dễ bị co kéo lỗ xốp rộng hơn, đặc biệt khả hình thành lỗ xốp thứ cấp cao Khuôn định dạng HAp/Cs bổ sung pha phân tán HAp làm tăng độ bền học, giảm độ biến thiên biến dạng học tác nhân bên tác động đến vật liệu T.T Hoai, N.K Nga / VNU Journal of Science: Natural Sciences and Technology, Vol 35, No (2019) 86-94 92 3.2 Kết thử nghiệm hình thành apatit khn định dạng HAp/chitosan Ảnh SEM chụp thời gian khác cho thấy, khuôn định dạng Cs không thấy xuất apatit tất mốc thời gian ngày, ngày 10 ngày (Hình 4: a, b) b a c d Hình Ảnh SEM mẫu Cs (a, b) HAp/Cs (c, d) sau 10 ngày ngâm dung dịch SBF Trên khuôn định dạng Cs/HAp, mốc ngày khó để tìm vùng phát triển khoáng apatit, điểm khoáng mọc nằm rải rác Ở mốc ngày, khoáng apatit phát triển lớn hơn, hình thành nên đám lớn bắt đầu liên kết lại với Ở mốc thời gian 10 ngày (Hình 4: c,d), dễ dàng tìm thấy khống apatit kích thước chúng đạt lớn Điều phản ánh theo suy giảm nồng độ Ca2+ dung dịch SBF q trình ni cấy (Bảng 2) Trong dung dịch SBF ngâm với mẫu khuôn định dạng Cs, nồng độ Ca2+ có giảm nhẹ hấp phụ CO2 từ khơng khí dẫn đến kết tủa muối CaCO3 Bảng Nồng độ Ca2+ dung dịch SBF sau ngâm Mẫu Cs HAp/Cs Nồng độ Ca2+ (mM) 1,42± 0,04 1,40 ± 0,02 1,28 ± 0,01 0,94 ± 0,01 10 ngày 1,30± 0,02 0,92± 0,09 Ở độ phóng đại cao hơn, hình dạng apatit thể rõ ràng với cánh xếp lại với thành bông, đồng thời bơng có cấu trúc xốp giống đám san hơ, cấu trúc thành phần khoáng xương tự nhiên Kết đo tính tốn phần mềm ImageJ cho thấy kích thước bơng apatit 1,8 ± 0.4 µm Kích thước cánh apatite đạt 190 ± 31 nm Từ việc phân tích ảnh SEM, thấy vật liệu đơn pha chitosan khơng thể hoạt tính thí nghiệm Ngược lại, vật liệu HAp/Cs thể hoạt tính tốt có khả dẫn mọc khống apatit Có thể giải thích điều thơng qua chế kết tủa tạo apatit Thông thường, hợp chất kết tủa, tích nồng độ ion chất dung dịch phải lớn tích số tan hợp chất Trong trường hợp này, tích số tan HAp 2,12.10-118, tích số tan nhỏ tích số ion Ca2+ PO43có dung dịch Tuy nhiên, trạng thái bình thường, HAp có cấu trúc phức tạp nên ion tự tổ chức xếp lại để tạo thành tinh thể HAp Nhưng khả T.T Hoai, N.K Nga / VNU Journal of Science: Natural Sciences and Technology, Vol 35, No (2019) 86-94 dẫn tạo khoáng tốt HAp composit HAp/Cs, khống hình thành.Trong dung dịch SBF tồn ion có khả kết tủa tạo khơng HAp Ca10(PO4)6(OH)2 mà tạo loại khoáng khác Để xác định thành phần ngun tố có khống apatit phát triển vật liệu q trình ni cấy xác định xem khống có hydroxyapatit hay không, mẫu vật liệu HAp/Cs sau nuôi cấy 10 ngày phân tích EDX Bảng Thành phần nguyên tố lớp apatit mẫu HAp/Cs sau 10 ngày ngâm SBF Thành phần nguyên tố, At% C O Na P Cl Ca Tỷ lệ Ca/P 56,46 33,62 1,85 2,96 0,62 4,49 1,52 Kết phân tích EDX (Bảng 3) cho thấy, mẫu vật liệu chứa đầy đủ thành phần nguyên tố chủ yếu Ca, O, P Sự xuất thành phần nguyên tố Na, Cl trình rửa vật liệu tồn đọng Thành phần C có Cs Mặt khác, tỷ lệ Ca/P = 1,52 Tỷ lệ gần với tỷ lệ Ca/P = 1,6 chứng tỏ khoáng mọc vật liệu hydroxyapatit Hình Giản đồ thành phần nguyên tố EDX mẫu HAp/Cs sau 10 ngày ngâm dung dịch SBF Kết luận Khuôn định dạng HAp/Cs tổng hợp thành công phương pháp đổ dung môi rửa hạt Khuôn định dạng tổng hợp phương 93 pháp có độ xốp 83%, liên thơng lỗ cao kích thước lỗ phù hợp cho phát triển tế bào (khoảng 200 µm) Kết thử hoạt tính cho thấy mẫu khn định dạng HAp/Cs có khả tương thích sinh học tốt khn định dạng Cs Do mẫu HAp/Cs có hình thành lớp khoáng apatit ngâm dung dịch giả plasma người Trong mẫu khn định dạng Cs khơng có hình thành lớp khống Lời cảm ơn Các tác giả cảm ơn Quỹ Phát triển Khoa học Cơng nghệ Quốc gia hỗ trợ kinh phí cho nghiên cứu thông qua Đề tài 104.032015.25 Tài liệu tham khảo [1] M.P Bostrom, D.A Seigerman, The clinical use of allografts, demineralized bone matrices, synthetic bone graft substitutes and osteoinductive growth factors: a survey study, Hss Journal (2005) 9-18 https://doi.org/10 1007/s11420-005-0111-5 [2] T.T Hoai, N.K Nga, L.T Giang, T.Q Huy, P.N.M Tuan, B.T.T Binh, Hydrothermal Synthesis of Hydroxyapatite Nanorods for Rapid Formation of Bone-Like Mineralization, J Electron Mater 46 (2017) 5064-5072 https:// doi.org/10.1007/s11664-017-5509-6 [3] M Rinaudo, Chitin and chitosan: properties and applications, Prog Polym Sci 31 (2006) 603632 https://doi.org/10.1016/j.progpolymsci.2006 06.001 [4] N.K Nga, H.D Chinh, P.T.T Hong, T.Q Huy, Facile chitosan films for high performance removal of reactive blue 19 dye from aqueous solution, J Polym Environ 25 (2007) 146-155 https://doi.org/10.1007/s10924-016-0792-5 [5] M.N.V Ravi Kumar, R.A.A Muzzarelli, H Sashiwa, A.J Domb, Chitosan chemistry and pharmaceutical perspectives, Chem Rev 104 (2004) 6017-6084 https://doi.org/10.1021/cr03 0441b [6] J.M Karp, M.S Shoichet, J.E Davies, Bone formation on two‐dimensional poly (DL‐lactide‐ co‐glycolide)(PLGA) films and three‐ dimensional PLGA tissue engineering scaffolds 94 [7] [8] [9] [10] [11] T.T Hoai, N.K Nga / VNU Journal of Science: Natural Sciences and Technology, Vol 35, No (2019) 86-94 in vitro, J Biomed Mater Res A 64 (2003) 388396 https://doi.org/10.1002/jbm.a.10420 J.F Mano, R.L Reis, Osteochondral defects: present situation and tissue engineering approaches, J Tissue Eng Regen Med (2007) 261-273 https://doi.org/10.1002/term.37 A.G Mikos, J.S Temenoff, Formation of highly porous biodegradable scaffolds for tissue engineering, Electron J Biotechn (2000) 2324 http://dx.doi.org/10.4067/S0717-3458200000 0200003 W.W Thein-Han, R.D.K Misra, Biomimetic chitosan–nanohydroxyapatite composite scaffolds for bone tissue engineering, Acta Biomater (2009) 1182–1197 https://doi.org/ 10.1016/j.actbio.2008.11.025 Y Zhang, J.R Venugopal, A.E Turki, S Ramakrishna, B Su, C.T Lim, Electrospun biomimetic nanocomposite nanofibers of hydroxyapatite/chitosan for bone tissue engineering, Biomaterials 29 (2008) 4314–4322 https://doi.org/10.1016/j.biomaterials.2008.07.038 B.X Vương, Tổng hợp đặc trưng vật liệu composite hydroxyapatite/chitosan ứng dụng kỹ thuật y sinh.,Tạp chí Khoa học ĐHQGHN: Khoa học Tự nhiên Công nghệ Tập 34 (2018) 9-15 https://doi.org/10.25073/ 2588-1140/vnunst.4689 [12] N.K Nga, T.T Hoai, P.H Viet, Biomimetic scaffolds based on hydroxyapatite nanorod/poly (D, L) lactic acid with their corresponding apatite-forming capability and biocompatibility for bone-tissue engineering, Colloids Surf B Biointerf 128 (2015) 506-514 https://doi.org/10 1016/j.colsurfb.2015.03.001 [13] N.K Nga, L.T Giang, T.Q Huy, C Migliaresi, Surfactant-assisted size control of hydroxyapatite nanorods for bone tissue engineering, Colloids Surf B: Biointerf 116 (2014) 666-673 https://doi.org/10.1016/j.colsurfb.2013.11.001 [14] C.R Kothapalli, M.T Shaw, M Wei, Biodegradable HA-PLA 3-D porous scaffolds: effect of nano-sized filler content on scaffold properties, Acta Biomater (2005) 653-662 https://doi.org/10.1016/j.actbio.2005.06.005 [15] T Kokubo, H Takadama, How useful is SBF in predicting in vivo bone bioactivity?, Biomaterials 27 (2006) 2907-2915 https://doi.org/10.1016/j biomaterials.2006.01.017 [16] T.T Hoai, N.K Nga, Effect of pore architecture on osteoblast adhesion and proliferation on hydroxyapatite/poly (D, L) lactic acid-based bone scaffolds, J Iran Chem Soc 15 (2018) 16631671 https://doi.org/10.1007/s13738-018-1365-4 ... Trong nghiên cứu này, khn định dạng ứng dụng kỹ thuật mô xương chế tạo từ vật liệu vô hydroxyapatit chitosan Sự kết hợp hydroxyapatit chitosan làm tăng khả tương thích sinh học khn định dạng Khn định. .. khuẩn, có khả thúc đẩy q trình chữa lành mơ mềm, mơ cứng có khả phân hủy sinh học [5] Với ưu điểm nêu trên, nghiên cứu lựa chọn chitosan làm chất tổng hợp khuôn định dạng Khuôn định dạng dùng... Science: Natural Sciences and Technology, Vol 35, No (2019) 86-94 Tổng hợp nghiên cứu khả tạo apatit khuôn định dạng hydroxyapatit chitosan Trần Thanh Hoài, Nguyễn Kim Ngà Viện Kỹ thuật Hóa học,