Tìm hiểu về: phân tích clostridium perfrigens trong thực phẩm

Trường Đại Học Công Nghiệp Thực Phẩm TPHCM Khoa Công Nghệ Thực Phẩm Đề tài: Tìm hiểu về: phân tích clostridium perfrigens thực phẩm GVHD: Nguyễn Thị Mỹ Lệ Nhóm: Mục Lục I Giới thiệu clostridium perfrigens II.Quy trình phân tích III Ví dụ I Giới thiệu clostridium perfrigens họ Bacillacae sinh bào tử, phần lớn di động tạo khuẩn lạc màu đen môi trường phân lập quy định sinh nha bào Đặc điểm phân giải Sodium sulfil phân giải protein tạo H2S vi khuẩn Gram dương hình que kị khí khơng bắt buộc  Hình thái vi khuẩn Clostridium perfrigens Hình thái vi khuẩn Clostridium perfrigens Phân động vật Phân người nước cống rãnh Nơi sống Trong thực phẩm thực phẩm đồ hộp) bùn đất, 3.  Đặc điểm nuôi cấy:   Trên môi trường Fluid Thioglycolate: sau 24 – 28 nuôi cấy vi khuẩn phát triển tốt làm đục môi trường  Trên môi trường thạch máu: sau 24 – 28 nuôi cấy 37, vi khuẩn phát triển tạo khuẩn lạc tròn ướt có hai vòng dung huyết xung quanh  Trên mơi trường SPS, TSC agar vi khuẩn phát triển cho khuẩn lạc tròn màu đen, vi khuẩn sinh H2S tác dụng với Fe (trong mơi trường) tạo thành FeS có màu đen  Trên mơi trường nước thịt gan yếm khí vi khuẩn mọc tốt, nhanh chóng làm đục mơi trường Quy trình phân tích: 10g mẫu + 90ml dd đệm 10-1 Tiếp tục pha loãng mẫu đến 10-2 10-3 10-4… Lấy 1ml mẫu vào ống nghiệm vô trùng, đỗ 1015 ml môi trường ISA 450C lắc Đỗ lớp ISA thứ hai cao 1-2 cm sau phần đông đăc, ủ 370C , 24-48 Đếm tất khuẩn lạc màu đen xuất ống Tính kết số clostridium 1ml/1g mẫu phân tích c Kết kiểm tra hình thái vi khuẩn  Các chủng vi khuẩn làm tiêu nhuộm Gram để kiểm tra hình thái tính chất bắt màu kính hiển vi Kết cho thấy tất chủng vi khuẩn C perfringens dạng trực khuẩn bắt màu thuốc nhuộm Gram+ chúng đứng riêng rẽ song song, số kết thành dạng chuỗi ngắn  Hình thái vi khuẩn C perfringens Hình thái vi khuẩn C perfringens d.Kết kiểm tra khả di động phương pháp soi tươi:  Lấy giọt canh khuẩn nhỏ lên lamen sạch, cố định lamen dầu parafilm lam kính lõm lật ngược lam kính lại Quan sát tiêu kính hiển vi với vật kính dầu cho thấy, tất 17 chủng kiểm tra có dạng hình que ngắn, khơng di động Vi khuẩn C perfringens soi tươi e.  thử nghiệm đặc tính vi khuẩn số  môi trường  Trên môi trường Fluid Thyoglycolate: vi khuẩn mọc tốt 37, 10% sau 24 nuôi cấy vi khuẩn làm đục môi trường Trên môi trường TSC agar: sau 24 ni cấy túi yếm khí, 37, 10% vi khuẩn phát triển tạo thành khuẩn lạc tròn, đen  Khuẩn lạc vi khuẩn môi trường TSC agar  Trên môi trường thạch máu: khuẩn lạc vi khuẩn màu trắng đục, tròn ướt, có hai vòng dung huyết xung quanh Khuẩn lạc C perfringens môi trường thạch máu    Trên môi trường Limus milk: Sau 24 – 28 nuôi cấy tủ ấm 37, 10% Vi khuẩn phát triển, lên men lactose, làm đơng vón casein, mơi trường chuyển từ màu tím sang nâu sang trắng với thị pH litmus Nuôi cấy môi trường Litmus milk    Trên môi trường Egg yorlk: sau 24 – 28 nuôi cấy điều kiện yếm khí tủ ấm 37, 10% Vi khuẩn phát triển sinh men lecithinase phân giải lecithin tạo thành vòng trắng sữa xung quanh khuẩn lạc Trên môi trường Egg yorlk e.Kết TỶ LỆ NHIỄM C PERFRINGENS TRÊN THỊT GÀ Ở CHỢ TẠI NHA TRANG Biểu đồ biểu diễn tỷ lệ nhiễm C perfringens thịt gà chợ Cảm ơn cô bạn lắng nghe ... đệm 1 0-1 Tiếp tục pha loãng mẫu đến 1 0-2 1 0-3 1 0-4 … Lấy 1ml mẫu vào ống nghiệm vô trùng, đỗ 1015 ml môi trường ISA 450C lắc Đỗ lớp ISA thứ hai cao 1-2 cm sau phần đông đăc, ủ 370 C , 2 4-4 8 Đếm... mẫu để độ pha loãng 1 0-1 , 1 0-2 , 1 0-3 …  Bước 2: Dùng pipet lấy nồng độ pha loãng 1ml dung dịch huyền phù ban đầu 1ml mẫu thử cho vào đĩa pipet, nồng độ 02 đĩa  Bước 3: rót 1 5-2 0ml mơi trường TSC... sinh lý lắc từ - phút thu dung dịch mẫu thử có nồng độ 1 0-1  Hút xác 1ml dung dịch mẫu thử 101 cho sang ống nghiệm chứa sẵn 9ml nước muối sinh lý Lắc 2-3 phút thu dung dịch nồng độ 1 0-2 Làm tương