Nghiên cứu bào chế viên hai lớp amoxicilin và acid clavulanic giải phóng kéo dài tt

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI Lê Đình Quang NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ VIÊN HAI LỚP AMOXICILIN VÀ ACID CLAVULANIC GIẢI PHĨNG KÉO DÀI Chun ngành: Cơng nghệ dược phẩm bào chế thuốc Mã số: 62720402 TÓM TẮT LUẬN ÁN TIẾN SĨ DƯỢC HỌC Hà Nội, năm 2019 Cơng trình hoàn thành tại: - Trường Đại học Dược Hà Nội Công ty cổ phần dược phẩm TW1 Công ty cổ phần dược phẩm Hà Tây Khoa hóa học, Trường Đại học Khoa học tự nhiên, Đại học Quốc gia Hà Nội Người hướng dẫn khoa học: - PGS TS Nguyễn Ngọc Chiến PGS TS Nguyễn Văn Long Phản biện : ………………………… Phản biện : ………………………… Phản biện ………………………… Luận án bảo vệ trước Hội đồng đánh giá luận án cấp Trường họp tại: ………………………………………………… Vào hồi ngày .…tháng năm 2019 Có thể tìm hiểu luận án tại: - Thư viện Quốc gia Việt Nam Thư viện Trường ĐH Dược HN MỞ ĐẦU Amoxicilin kháng sinh phổ rộng, tác dụng loại vi khuẩn gram âm gram dương không bền với lactamase Để hạn chế β-lactamase phân hủy amoxicilin, đồng thời mở rộng thêm phổ kháng khuẩn nhiều vi khuẩn thông thường kháng, amoxicilin thường phối hợp với chất ức chế -lactamase acid clavulanic Theo phân loại Dược động học/Dược lực học (PK/PD), amoxicilin thuộc nhóm -lactam nằm nhóm kháng sinh phụ thuộc thời gian, khơng có tác dụng hậu kháng sinh, thời gian bán thải ngắn, cửa sổ hấp thu hẹp Muốn sử dụng amoxicilin tối ưu theo nguyên lý PK/PD cần phải kéo dài thời gian tiếp xúc thuốc với vi khuẩn Để đảm bảo yêu cầu thời gian trì nồng độ thuốc máu nồng độ ức chế tối thiểu phải dài 40% khoảng đưa liều Vì vậy, nhà điều trị phải kê đơn kháng sinh amoxicilin với khoảng cách liều ngắn cách tăng số lần dùng thuốc cho bệnh nhân Tuy nhiên, tăng số lần dùng ngày, nồng độ thuốc huyết tương không định thường có tượng đỉnh, đáy Để khắc phục nhược điểm này, bào chế amoxicilin dạng viên lớp: lớp giải phóng tạo liều ban đầu lớp giải phóng kéo dài trì nồng độ thuốc máu Hiện nay, giới có chế phẩm Augmentin SR 1000/62,5 mg giải phóng kéo dài sản xuất Anh (nằm vùng ơn đới có nhiệt độ độ ẩm thấp) lưu hành toàn giới Tuy nhiên, Việt Nam, doanh nghiệp dược nước chưa bào chế chế phẩm thuốc tác dụng kéo dài chứa amoxicilin acid clavulanic Mặt khác, Việt Nam nằm vùng khí hậu IVB có nhiệt độ độ ẩm cao nên trình nghiên cứu, bào chế sản phẩm gặp nhiều khó khăn hai dược chất dễ bị phân hủy Viên nén chứa amoxicilin acid clavulanic nước lại ổn định hình thức hàm lượng thời gian bảo quản Vì vậy, chúng tơi thực đề tài: “Nghiên cứu bào chế viên nén amoxicilin acid clavulanic hai lớp giải phóng kéo dài” với mục tiêu sau: Bào chế viên nén lớp chứa 1000 mg amoxicilin 62,5 mg acid clavulanic qui mơ 10.000 viên/lơ giải phóng kéo dài Đề xuất tiêu chuẩn chất lượng đánh giá độ ổn định viên nghiên cứu Những đóng góp luận án Cho đến thời điểm tại, chưa tìm thấy cơng bố nghiên cứu bào chế theo dõi độ ổn định viên nén lớp chứa amoxicilin acid clavulanic giải phóng kéo dài Việt Nam Điểm đề tài nghiên cứu Việt Nam thành công xây dựng thiết kế cơng thức qui trình bào chế viên nén hai lớp amoxicilin 1000 mg acid clavulanic 62,5 mg giải phóng kéo dài quy mơ 10000 viên/lơ điều kiện khí hậu nóng ẩm Việt Nam Viên nén có cấu trúc lớp: lớp GPN lớp GPKD Tá dược kiểm sốt giải phóng HPMC K100 LV có khả kéo dài giải phóng thay cho gôm xanthan Việc lựa chọn nguyên liệu amoxicilin trihydrat cho lớp thay cho nguyên liệu natri amoxicilin điểm đáng ý Theo đó, cơng thức qui trình bào chế cho viên nén lớp có khả ứng dụng cho sản xuất qui mơ lớn Mơ hình viên lớp với cấu trúc viên bao gồm lớp giải phóng nhanh tạo liều ban đầu (amoxicilin + kali clavulanat) lớp kéo dài (amoxicilin) trì tác dụng áp dụng vào việc phát triển chế phẩm giải phóng kéo dài khác chứa kháng sinh nhóm β-lactam Cấu trúc luận án Luận án gồm 150 trang không kể tài liệu tham khảo phụ lục, 61 bảng, 52 hình, 100 tài liệu tham khảo Bố cục gồm: Đặt vấn đề (2 trang); Tổng quan (22 trang); Nguyên liệu, trang thiết bị, nội dung phương pháp nghiên cứu (23 trang); Kết nghiên cứu (78 trang); Bàn luận (27 trang); Kết luận đề xuất (1 trang); Danh mục cơng trình cơng bố liên quan đến luận án (1 trang); Tài liệu tham khảo (10 trang); Phụ lục (111 trang) CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 Đại cương amoxicilin kali clavulanat 1.1.1 Amoxicilin Nguyên liệu amoxicilin sử dụng bào chế viên nén thường sử dụng dạng amoxicilin trihydrat (hạt compact) dạng muối natri amoxicilin (bột mịn) Tính chất vật lý: - Amoxicilin trihydrat: bột kết tinh, màu trắng, khó tan nước Ở pH 37oC, độ tan amoxicilin 4,44 mg/ml - Natri amoxicilin: bột màu trắng, hút ẩm mạnh Tan tốt nước (>1000 mg/ml), tan ethanol tuyệt đối aceton 1.1.2 Kali clavulanat Tính chất vật lý: bột kết tinh màu trắng gần trắng, dễ hút ẩm Dễ tan nước (300 mg/ml) 1.2 Độ ổn định amoxicilin kali clavulanat 1.2.1 Amoxicilin Amoxicilin dung dịch amoxicilin loãng phân hủy theo động học bậc khoảng pH rộng Amoxicilin ổn định khoảng 5,8-6,5 ổn định môi trường acid mạnh Ở dạng rắn, amoxicilin trihydrat dễ bị phân hủy độ ẩm cao nhiệt độ lớn 37oC 1.2.2 Kali clavulanat Kali clavulanat bị thủy phân dung dịch nước theo động học bậc ổn định vùng pH 4-8 bền vững khoảng pH 6,4, bị phân hủy mạnh vùng pH acid kiềm Đặc biệt trạng thái rắn, kali clavulanat bị phân hủy mạnh nhiệt độ độ ẩm cao 1.3 Tổng hợp số nghiên cứu amoxicilin kali clavulanat Để đánh giá tương tác amoxicilin kali clavulanat với tá dược dự kiến sử dụng sử dụng phương pháp thông dụng phương pháp theo dõi biến đổi màu sắc, phương pháp đo DSC, phương pháp đo phổ IR, phương pháp theo dõi suy giảm hàm lượng dược chất trình bảo quản Đối với hoạt chất amoxicilin bào chế dạng viên giải phóng kéo dài polyme sử dụng chủ yếu gôm xanthan HPMC K100LV, HPMC E6 Trong đó, tá dược HPMC thường lựa chọn sử dụng nhiều Các nghiên cứu dạng thuốc chứa amoxicilin khoảng 10 năm trở lại chủ yếu nghiên cứu mang tính định hướng với hàm lượng dược chất < 100 mg, bào chế viên giải phóng dày Hiện thị trường Việt Nam có chế phẩm thuốc tác dụng kéo dài Tên thương mại Augmetin SR 1000/62,5mg hãng GSK sản xuất Đây viên nén hai lớp giải phóng kéo dài, có màng bao, chứa 1000 mg amoxicilin 62,5 mg acid clavulanic Dược chất lớp GPN bao gồm amoxicilin trihydrat tương đương 562,5 mg amoxicilin dạng khan kali clavulanat (sử dụng hỗn hợp kali clavulanat trộn Avicel theo tỷ lệ 1:1) tương đương 62,5 mg acid clavulanic Để giải phóng dược chất nhanh, SSG thêm vào công thức lớp GPN tỷ lệ 2% Đối với lớp GPKD, dược chất có amoxicilin (sử dụng dạng muối natri amoxicilin dạng bột mịn) tương đương 440 mg amoxicilin dạng khan Polyme kiểm soát giải phóng gơm xanthan (sử dụng với tỷ lệ khoảng 2%) có đặc tính tạo gel độ nhớt cao trì giải phóng Tá dược điều chỉnh pH acid citric (sử dụng tỷ lệ khoảng 11%) dùng để tăng cường độ ổn định muối natri amoxicilin Do kali clavulanat không bền với nhiệt ẩm nên phương pháp bào chế lựa chọn phương pháp tạo hạt khô Viên nén lớp kéo dài giải phóng dược chất tới Để định lượng hỗn hợp dược chất amoxicilin kali clavulanat, phương pháp lựa chọn HPLC, phương pháp đại, độ tin cậy cao Không lựa chọn phương pháp đo quang trình xử lý mẫu phức tạp, tốn thời gian không loại trừ ảnh hưởng tá dược xây dựng khảo sát công thức Chương ĐỐI TƯỢNG NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Nguyên vật liệu 2.1.1 Nguyên liệu tá dược dùng cho bào chế Nguyên liệu amoxicilin trihydrat, natri amoxicilin, kali clavulanat đạt tiêu chuẩn NSX, hóa chất, tá dược sử dụng nghiên cứu đạt tiêu chuẩn DĐVN IV, USP 38, tinh khiết phân tích dùng cho HPLC 2.2 Thiết bị nghiên cứu Sử dụng thiết bị bào chế đánh giá thường quy như: máy trộn lập phương VC0010; máy dập viên quay tròn SHAKTI; máy bao phim mini Celeva; máy bao phim công nghiệp CP10; máy ép vỉ CP-250, máy thử độ hòa tan ERWEKA DT 60 DT 600; thiết bị quét phổ hồng ngoại IRAffinity-1S, Shimadzu; thiết bị quét nhiệt vi sai Labsys DSC 131; tủ vi khí hậu DAEYANG Contherm Global 5000 2.3 Thuốc đối chiếu Viên nén hai lớp Augmentin SR thành phần amoxicilin 1000 mg, acid clavulanic 62,5mg hãng GSK lưu hành thị trường Việt Nam Số lô 2066 Hạn dùng 04/2019 2.4 Nội dung nghiên cứu Nội dung nghiên cứu luận án bao gồm: thẩm định phương pháp định lượng, nghiên cứu tiền công thức, xây dựng công thức bào chế viên nén lớp, nâng cấp qui trình bào chế, đánh giá độ ổn định viên nén lớp, đánh giá tương đương hòa tan in vitro so với viên đối chiếu 2.5 Phương pháp nghiên cứu 2.5.1 Nghiên cứu tương tác dược chất – tá dược Sử dụng phương pháp thường qui như: theo dõi biến đổi màu sắc hỗn hợp dược chất với tá dược, quét nhiệt vi sai, xác định phổ hồng ngoại, xác định suy giảm hàm lượng dược chất mẫu thời điểm ban đầu sau tháng bảo quản 2.5.2 Phương pháp đánh giá ảnh hưởng độ ẩm tá dược đến độ ổn định dược chất viên Trên công thức, tiến hành bào chế mẫu T1 (sấy toàn tá dược, độ ẩm < 4%) T2 (không sấy tá dược) Mỗi mẫu bào chế 500 viên nén phương pháp dập thẳng Viên sau dập ép vỉ nhôm – nhôm, qui cách viên/vỉ để theo dõi sơ độ ổn định điều kiện 30±2oC/75±5%RH 40±2oC/75±5%RH tháng Lấy mẫu thời điểm 0, 2, 4, tháng bảo quản điều kiện 30±2oC/75±5%RH 40±2oC/75±5% để đánh giá hình thức vỉ, viên hàm lượng dược chất 2.5.3 Phương pháp bào chế viên nén Sử dụng phương pháp A phương pháp B phụ thuộc vào loại loại nguyên liệu amoxicilin sử dụng (Bảng 2.5) Bảng 2.5 Phương pháp bào chế viên nén lớp Phương pháp A B Phương pháp bào chế Lớp GPN Lớp GPKD “Dập thẳng” Tạo hạt khô (amoxicilin trihydrat, (natri amoxicilin, bột hạt compact) mịn) “Dập thẳng” “Dập thẳng” (amoxicilin trihydrat, (amoxicilin trihydrat, hạt compact) hạt compact) Sau trộn hoàn tất lớp lấy mẫu kiểm nghiệm bán thành phẩm, định lượng hàm lượng dược chất Dập viên Dựa theo kết kiểm nghiện bán thành phẩm, tiến hành dập viên máy SHAKTI với thông số sau: tốc độ dập viên vòng/phút, tốc độ quay phân phối vòng/phút Kiểm tra độ đồng khối lượng lớp giải phóng ngay, khối lượng viên (lấy mẫu kiểm tra khối lượng viên khối lượng lớp GPN định kỳ 10 phút/ lần; khối lượng lớp GPN lấy sau lấy mẫu kiểm tra khối lượng viên) độ cứng viên Bao viên Tiến hành bao phim ngày máy CP10 với thơng số: nhiệt gió vào 60oC, nhiệt gió 50oC, nhiệt viên tối đa 45oC, nhiệt làm việc 35-45oC, nhiệt viên tối thiểu 35oC, tốc độ lồng bao 5-12 vòng/phút, tốc độ quạt hút 2300 vòng/phút, tốc độ quạt thổi 1300 vòng/phút, bơm nhu động 20 rpm, áp suất súng phun 2,5 bar, tỷ lệ màng bao so với viên nhân 4% Sau phun hết dịch bao, sấy viên 40oC 10 phút Lấy mẫu kiểm nghiệm bán thành phẩm: đánh giá tiêu tăng khối lượng viên sau bao, độ cứng, độ đồng khối lượng, độ hòa tan hàm lượng dược chất Đóng gói Viên sau bao ép vỉ nhơm với màng nhơm dày 160 /25 µm máy CP250, qui cách viên/vỉ 11 2.5.5 Phương pháp đánh giá số tiêu chất lượng Phương pháp đánh giá bột hạt Các tiêu đánh giá bột, hạt (phân bố kích thước hạt, độ trơn chảy, khối lượng riêng biểu kiến, số Carr, độ ẩm tá dược) viên (độ đồng khối lượng, độ cứng, độ bở ) đánh giá theo qui định chung dược điển Phương pháp định lượng Theo phương pháp HPLC Xác định khả giải phóng thử nghiệm hồ tan Điều kiện thử hòa tan: máy thử hòa tan ERWEKA DT 60, DT 600 sử dụng cánh khuấy, tốc độ quay: 75 ± vòng/ phút, mơi trường: 900 ml nước, nhiệt độ: 37 ± 0,5oC, thời gian lấy mẫu: 15, 30, 45 phút, 1, 2, 3, 4, 5, Xử lý mẫu dịch hòa tan: Tại thời điểm lấy mẫu, hút xác ml dịch hòa tan (bổ sung lại xác ml nước cất để ấm nhiệt độ 37oC vào môi trường hòa tan) Hút xác ml dịch hòa tan cho vào bình định mức 10 ml, thêm nước vừa đủ tới vạch định mức, lắc đều, lọc qua màng lọc 0,45 µm Xác định hàm lượng dược chất dịch hòa tan: phương pháp HPLC Đánh giá mơ hình động học giải phóng Sử dụng cơng cụ DDsolver cài đặt MS Excel 2016 để khớp liệu GPDC từ mẫu viên thực nghiệm vào mơ hình động học giải phóng Căn vào giá trị AIC R2hc xác định mơ hình giải phóng phù hợp với dạng bào chế 12 2.5.6 Phương pháp đánh giá độ ổn định Viên nén lớp amoxicilin/acid clavulanic 1000/62,5mg bào chế qui mô 10.000 viên/lô ép vỉ nhôm- nhôm với số lượng viên/vỉ bảo quản điều kiện 30±2oC/75±5%RH 40±2oC/75±5%RH Đánh giá viên dựa tiêu: màu sắc viên, hàm lượng dược chất, độ hòa tan dược chất CHƯƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 3.1 Kết nghiên cứu tiền công thức Lựa chọn tá dược nghiên cứu tiền công thức: sử dụng kết hợp phương pháp (theo dõi biến đổi màu sắc, quét nhiệt vi sai, đo phổ hồng ngoại xác định hàm lượng dược chất) để đánh giá tương tác dược chất – tá dược Dựa theo kết khảo sát lựa chọn tá dược HPMC K100LV, HPMC K4M, HPMC K100M, HPMC E15, gôm xanthan, Avicel PH 102, dicalciphosphat, lactose, SSG, magnesi sterat, talc, Aerosil, Eudragit E100, acid stearic, PEG 6000 sử dụng thiết kế công thức viên nén lớp GPKD Kết đánh giá ảnh hưởng độ ẩm tá dược đến độ ổn định viên nén Ở điều kiện 30±2oC/75±5%RH, mẫu T1 (khơng sấy tá dược) có tượng phồng vỉ tháng thứ Tuy nhiên, quan sát hình thức viên vỉ, viên có mầu trắng đồng lớp Mẫu T2 (sấy tá dược) sau tháng bảo quản, hình thức vỉ viên khơng có thay đổi so với thời điểm ban đầu Ngược lại, 40±2oC/75±5%RH, mẫu T1, T2 13 bị phồng vỉ, viên nén bên bị ngả vàng lớp giải phóng thời điểm sau tháng bảo quản Về hàm lượng, hàm lượng amoxicilin mẫu T1, T2 sau bào chế 100,5 100,4% Sau tháng bảo quản điều kiện 30±2oC/75±5%RH, hàm lượng giảm 98,0 98,4% Ngược lại, hàm lượng kali clavulanat mẫu T1, T2 sau tháng khác có ý nghĩa thống kê (P 0,05) Ngược lại, hàm lượng kali clavulanat lại giảm mạnh xấp xỉ 90% khác biệt mẫu có ý nghĩa thống kê (P < 0,05) Kết luận cho thấy việc sấy tá dược trước dập viên đóng vai trò quan trọng đảm bảo độ ổn định viên nén sau bào chế Do đó, tá dược trước đưa vào sử dụng phải sấy đến độ ẩm < 4% 3.2 Kết xây dựng công thức bào chế viên nén lớp Trong mẫu khảo sát, công thức viên bào chế xây dựng sở xác định liều dược chất lớp dựa theo viên đối chiếu Augmentin SR 1000/62,5 mg Xây dựng công thức viên nén hai phương pháp A B (khảo sát ảnh hưởng cúa tá dược độn, dính, rã, polyme lớp; khảo sát yếu tố qui trình, khảo sát loại nguyên liệu amoxicilin, khảo sát tỷ lệ dược chất amoxicilin lớp GPN GPKD ) để lựa chọn công thức với phương pháp bào chế phù hợp Dựa kết khảo sát 31 công thức, công thức M30 lựa chọn (bào chế theo 14 phương pháp B) để tiếp tục xây dựng công thức màng bao bảo vệ Công thức M30: lớp GPN: amoxicilin trihydrat 649 mg, kali clavulanat/MCC (1:1) 156 mg, natri starch glycolat 12 mg, talc 16 mg, magnesi stearat 12 mg; Lớp GPKD amoxicilin trihydrat 570 mg, HPMC K100LV 130 mg, natri starch glycolat 12 mg, Aerosil mg, magnesi stearat mg Xây dựng công thức màng bao bảo vệ viên nén lớp Ở qui mơ phòng thí nghiệm, tiến hành khảo sát thơng số bao sau khảo sát loại màng bao có sử dụng loại polyme khác (HPMC E15, Eudragit, Opadry, Opadry AMB), lựa chọn công thức màng bao HPMC E15 45,5 mg; PEG 6000 4,6 mg; Acid stearic 4,6 mg; talc 9,1 mg; cồn 96% 0,9 ml; tỷ lệ màng bao so với viên nhân 4% Viên bao có màu trắng, khơng vàng mặt, hàm lượng dược chất ổn định Tối ưu hóa cơng thức bào chế Để nâng cao số f2 đồng thời kiểm sốt giải phóng dược chất theo mục tiêu mong muốn thời điểm 1, 3, amoxicilin kali clavulanat, tiến hành tối ưu hóa cơng thức bào chế dựa phần mềm Modde 12 Biến đầu vào lựa chọn bao gồm tá dược lớp GPN: magnesi stearat, natri starch glycolat; lớp GPKD HPMC K100LV, magnesi stearat Biến đầu số f2 với hoạt chất, tỷ lệ phần trăm giải phóng amoxicilin 1, 3, giờ, tỷ lệ phần trăm giải phóng kali clavulanat Thiết kế thí nghiệm theo mơ hình hợp tử tâm Tiến hành bào chế 24 công thức thiết kế, sau bao viên, định lượng, thử độ hòa 15 tan Kết cho thấy tất giá trị phương trình hồi qui thu sau xử lý phần mềm bao gồm R2, R2 hiệu chỉnh, Q2, P (hồi qui), P (phù hợp) đạt yêu cầu giới hạn cho phép Điều chứng tỏ phương pháp thiết kế theo mô hình hợp tử tâm phản ánh xác mối quan hệ biến đầu vào biến đầu Các số liệu thu xử lý có ý nghĩa thông kê (P < 0,05) Kết dự đốn cơng thức tối ưu cho thấy xác xuất thất bại thu tất biến đầu nhỏ 1% Tính tốn cho thấy vùng không gian thiết kế nằm khoảng khối lượng HPMC từ 130-150 mg, khối lượng SSG nằm khoảng 8-13 mg Công thức lựa chọn tối ưu nằm vùng không gian thiết kế với xác xuất thất bại nhỏ < 1% Công thức tối ưu: Lớp GPN amoxicilin trihydrat 623,0 mg, kali clavulanat/MCC (1:1) 165,0 mg, talc 16,0 mg, magnesi stearat 13,0 mg, natri starch glycolat 12,0 mg Lớp GPKD amoxicilin trihydrat 570,0 mg; Aerosil 4,0 mg, HPMC K100LV 140 mg, Avicel PH 102 40,0 mg, magnesi stearat 8,0 mg; Màng bao HPMC E15 g, talc g, acid stearic 0,5 g, PEG 6000 0,5 g, ethanol 96% vđ 100 ml, tăng khối lượng viên sau bao 4% Đánh giá mơ hình động học Động học giải phóng viên bào chế viên đối chiếu tn theo mơ hình Korsmeyer- Peppas với amoxicilin (AICVBC = 46,11 với R2hc=0,9762 AICVĐC = 49,89 với R2hc=0,9599) Trong khi, kali clavulanat tn theo mơ hình Weibull với (AICVBC = 18,35 với R2hc=0,9862 AICVĐC = 13,82 với R2hc=0,9940) 16 3.3 Nâng cấp qui trình bào chế Dựa theo cơng thức tối ưu tìm được, tiến hành nâng cấp qui mô Tiến hành bào chế lô qui mô 1000 viên để khảo sát thông số máy (dập viên, bao phim) tiêu chất lượng bán thành phẩm (kích thước tiểu phân nguyên liệu, bột dập viên, viên nhân) thành phẩm (viên bao) Từ đề xuất tiêu chuẩn bán thành phẩm thành phẩm làm sở để thẩm định qui trình sản xuất 3.3.1 Các thông số lựa chọn để thẩm định Dựa kết khảo sát qui mô 1000 viên nhận định trình bào chế, thơng số lựa chọn thẩm định lựa chọn : - Thông số trọng yếu: nhiệt độ, độ ẩm mơi trường, phân bố kích thước tiểu phân, hàm ẩm tá dược, trình tự trộn bột kép, thời gian trộn, tỷ trọng biểu kiến, độ trơn chảy phân bố kích thước hạt, độ cứng viên, định lượng, độ hòa tan - Thơng số kiểm sốt: khối lượng viên khối lượng lớp GPN lựa chọn làm thơng số kiểm sốt 3.3.2 Thẩm định qui trình bào chế viên nén lớp Giai đoạn chuẩn bị: Kết thẩm định độ ẩm tá dược cho thấy, tất tá dược sau sấy đạt độ ẩm < 4% Giai đoạn trộn bột kép: Đối với lớp GPN, thời gian trộn 10 phút đảm bảo cho phân tán đồng hàm lượng hoạt chất Đối với lớp GPKD, amoxicilin có tỷ lệ lớn thành phần cơng thức nên thời gian đạt độ đồng phân tán 17 hàm lượng phút Tại tất thời điểm lựa chọn RSD < % Phân tích ANOVA cho thấy khác biệt tỷ trọng biểu kiến độ trơn chảy lô thời điểm 10 phút lớp GPN phút lớp GPKD khơng có ý nghĩa thống kê (P > 0,05) Giai đoạn dập viên: thẩm định độ đồng khối lượng lớp GPN khối lượng viên cho thấy biểu đồ Shewhart XbarR đạt yêu cầu giới hạn +3σ, vùng giá trị cao, thấp, qui luật lên, xuống Các báo hiệu bao gồm: hiệu tổng quát (Cpk), hiệu tới hạn (Cpk), tình trạng lệch tâm (Cpm) lớn 1,33 Điều chứng tỏ qui trình sản xuất có tính lặp lại không lệch tâm Về độ cứng viên: tất mẫu viên lô đạt yêu cầu độ cứng từ 12 -20 kP Phân tích ANOVA cho thấy độ cứng trung bình viên thời điểm dập viên lô khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê (P > 0,05).iai đoạn bao phim Giai đoạn bao viên: lô đạt yêu cầu mức độ tăng khối lượng sau bao Độ cứng viên lô đạt yêu cầu, kết sau bao độ cứng nằm khoảng 12-19 kP Màng bao có hình thức trắng, mịn, bóng đạt u cầu Mặt khác, hàm lượng amoxicilin kali clavulanat lô đạt giá trị 104-105% nằm giới hạn cho phép 90-110% Tỷ lệ phần trăm giải phóng amoxicilin lô thời điểm (55-65%), (65-85%), (>85%) nằm tiêu hòa tan đề xuất Đối với kali clavulanat thời điểm (>80%), lơ 18 giải phóng 90% Khi so sánh đồ thị giải phóng với viên đối chiếu cho kết số f2 với amoxicilin 62,19; 64,21; 67,65 với kali clavulanat 58,22; 61,01; 63,58 Như viên bào chế từ lô 10.000 viên đạt tiêu chuẩn đề xuất định lượng độ hòa tan 3.4 Kết đánh giá độ ổn định viên nén lớp 3.4.1 Kết hình thức cảm quan Viên nén lớp ổn định điều kiện 30±2oC/75±5%RH, mặt cảm quan khơng có thay đổi so với thời điểm ban đầu hình dạng vỉ màu sắc viên sau 18 tháng bảo quản Ngược lại điều kiện 40±2oC/75±5%RH, viên không ổn định sau tháng bảo quản: viên bị vàng mặt vỉ bị phồng mặt 3.4.2 Kết hàm lượng Hàm lượng độ hòa tan amoxicilin kali clavulanat viên nén lớp giải phóng kéo dài bị thay đổi điều kiện 30±2oC;75%±5%RH sau 18 tháng bảo quản giảm nhẹ đạt gần 100% hàm lượng ghi nhãn Ngược lại, điều kiện 40±2oC; 75%±5%RH, hàm lượng kali clavulanat có xu hướng giảm mạnh xấp xỉ khoảng 6-7%/tháng Sau 03 tháng bảo quản, hàm lượng kali clavulanat lô giảm mạnh < 90% 3.4.3 Kết độ hòa tan Sau 18 tháng theo dõi độ ổn định viên nén lớp điều kiện 30±2oC; 75%±5%RH, độ hòa tan hoạt chất amoxicilin kali clavulanat từ viên nén lớp lô bào chế nhận thấy thay đổi đáng kể, thể số f2 > 70 19 Ở 40±2oC; 75%±5%RH sau tháng bảo quản hoạt chất amoxicilin khơng có thay đổi đáng kể với f2 lô đạt 80% Tuy nhiên kali clavulanat, hàm lượng giảm sau tháng bảo quản, tỷ lệ % giải phóng hoạt chất thời điểm giảm so với thời điểm ban đầu, tương ứng với số f2 giảm xuống khoảng 60% Do viên nén không ổn định hàm lượng điều kiện 40±2oC; 75%±5%RH sau tháng nên không tiến hành thử độ hòa tan 3.5 Kết đánh giá tương đương hòa tan in vitro so với viên đối chiếu VBC giải phóng kéo dài tương đương độ hòa tan in-vitro với viên Augmentin SR mơi trường hòa tan pH 4,5 pH 6,8 Tất giá trị f2 > 50 Giải phóng amoxicilin mơi trường ổn định Ngược lại, pH 1,2, kali clavulanat viên bào chế viên đối chiếu bị phân hủy mạnh Kết tương đương hòa tan in-vitro hai môi trường pH 4,5 6,8 điều kiện tiền đề để nghiên cứu, đánh giá sinh khả dụng tương đương sinh học viến nén lớp GPKD CHƯƠNG BÀN LUẬN Về đánh giá tương tác dược chất tá dược: nhận định kết đánh giá tương tác dược chất – tá dược sử dụng phương pháp có kết luận khơng xác Chính vậy, cần phải kết hợp đồng thời nhiều phương pháp để đánh giá tương tác dược chất – tá dược Bằng phương pháp quan sát 20 hình thức dễ dàng phát dược chất không ổn định calci carbonat, magnesi carbonat tinh bột Phương pháp HPLC cho kết tương đồng với phương pháp quan sát hình thức (hàm lượng kali clavulanat giảm mạnh sau tháng bảo quản) Chính vậy, calci carbonat, magnesi carbonat tinh bột loại bỏ nghiên cứu hóa lý, tránh khảo sát không cần thiết Quá trình đánh giá tương tác dược chất với hỗn hợp tá dược cho thấy kali clavulanat ổn định dược chất đặc biệt yếu tố nhiệt ẩm Trong trình bào chế cần quan tâm đến độ ổn định kali clavulanat với điều kiện nhiệt độ độ ẩm thấp Về phương pháp bào chế viên nén lớp: bào chế theo phương pháp B (nếu lựa chọn nguyên liệu amoxicilin trihydrat cho lớp GPKD) phương pháp A (nếu chọn nguyên liệu natri amoxicilin cho lớp GPKD) Nguyên liệu natri amoxicilin có độ tan lớn, dễ hút ẩm, bào chế dạng bột mịn thường sử dụng chế phẩm thuốc tiêm Việc lựa chọn loại nguyên liệu amoxicilin trihydrat, hạt compact với phương pháp dập thẳng cho thấy phù hợp với điều kiện nghiên cứu sản xuất Việt Nam Về thẩm định qui trình sản xuất: amoxicilin kali clavulanat khơng bền với yếu tố môi trường Đặc biệt, kali clavulanat không bền với nhiệt độ độ ẩm cao Để khắc phục nhược điểm cần bào chế môi trường khống chế nhiệt độ độ ẩm (nhiệt độ < 25oC, độ ẩm < 30%) Các tá dược 21 magnesi stearat, HPMC K100LV, Aerosil, Avicel PH102, natri starch glycolat sử dụng cho viên nén cần phải rây qua rây 250 sấy nhiệt độ 40-50oC đến độ ẩm nhỏ 4% trước bào chế viên nén Về giai đoạn trộn bột khô, kali clavulanat có hàm lượng thấp hẳn amoxicilin nên dễ gây tình trạng khơng đồng phân tán hàm lượng, khó trộn đồng Có nhận thấy hàm lượng hoạt chất cao thời gian trộn giảm dược chất tỷ lệ cao dễ dàng phân tán đồng vào khối bột dập viên dược chất có tỷ lệ thấp Khi dược chất phân tán tiếp tục kéo dài thời gian trộn làm giảm độ đồng hàm lượng Thời gian trộn tốt với lớp GPN 10 phút, lớp GPKD phút Về giai đoạn dập viên: với thông số khảo sát sơ tốc độ dập vòng/phút, tốc độ quay phân phối vòng/phút cho thấy viên nén bào chế đạt tiêu chuẩn độ đồng khối lượng viên cho lớp GPN tổng khối lượng viên Việc kiểm soát tốt khối lượng lớp GPN tổng khối lượng viên giúp tiêu hàm lượng dễ dàng đạt phạm vi 90-110% hàm lượng ghi nhãn hai hoạt chất Tuy nhiên kiểm sốt tổng khối lượng viên khơng đạt tiêu hàm lượng kali clavulanat Nguyên nhân q trình dập viên, lớp GPN khơng thiết kế cánh quay phân phối, khả đong khối lượng khơng lớp GPKD Trong đó, lớp GPKD lớp đong khối lượng cuối định khối lượng tổng 22 viên Do đó, viên nén đạt khối lượng tổng theo lý thuyết hàm lượng kali clavulanat khơng đạt chuyển dịch bột dập viên từ lớp GPN sang lớp GPKD ngược lại Chính việc, kiểm soát khối lượng lớp GPN yêu cầu bắt buộc trình sản xuất KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT KẾT LUẬN Đã bào chế viên nén lớp chứa 1000 mg amoxicilin 62,5 mg acid clavulanic giải phóng kéo dài qui mơ phòng thí nghiệm qui mô 10 000 viên/lô tương đương độ hòa tan với viên đối chiếu Cơng thức bào chế cho viên (cơng thức tính dư amoxicilin 3,0% acid clavulanic 5,7% so với hàm lượng ghi nhãn): - Lớp giải phóng ngay: 623,0 mg tương đương 538 Amoxicilin trihydrat mg amoxicilin 165,0 mg tương đương 66,1 Kali clavulanat/MCC (1:1) mg acid clavulanic Talc 16,0 mg Magnesi stearat 13,0 mg Natri starch glycolat 12,0 mg - Lớp giải phóng kéo dài: 570,0 mg tương đương 492 Amoxicilin trihydrat mg amoxicilin 23 HPMC K100LV 140,0 mg Avicel PH102 40,0 mg Magnesi stearat 8,0 mg Aerosil 4,0 mg - Công thức màng bao bảo vệ: HPMC E15 45,5 mg; PEG 6000 4,6 mg; acid stearic 4,6 mg; talc 9,1 mg; ethanol 96% 0,9 ml; % tăng khối lượng viên 4% Đã đề xuất tiêu chuẩn chất lượng viên nén lớp amoxicilin acid clavulanic giải phóng kéo dài theo dõi độ ổn định viên nén bào chế điều kiện 30±2oC/75±5%RH Viên nén đạt tiêu chuẩn sở ổn định 18 tháng điều kiện bảo quản ĐỀ XUẤT Bào chế qui mô lớn tiếp tục theo dõi độ ổn định viên nén lớp giải phóng kéo dài chứa 1000 mg amoxicilin 62,5 mg acid clavulanic Đánh giá tương đương sinh học viên nén lớp giải phóng kéo dài 24 DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH ĐÃ CƠNG BỐ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN TIẾN SĨ DƯỢC HỌC Lê Đình Quang, Nguyễn Phương Nhung, Nguyễn Văn Long, Nguyễn Ngọc Chiến (2017), Tối ưu hóa cơng thức bào chế viên nén lớp amoxicilin acid clavulanic giải phóng kéo dài, Tạp chí dược học, 498, tr 35-40 Lê Đình Quang, Nguyễn Phương Nhung, Nguyễn Ngọc Chiến, Nguyễn Văn Long (2018), Xây dựng công thức màng bao bảo vệ viên nén lớp amoxicilin acid clavulanic giải phóng kéo dài, Tạp chí dược học, 507, tr 8-14 Lê Đình Quang, Nguyễn Ngọc Chiến (2019), Đánh giá tương tác amoxicilin, kali clavulanat với tá dược sử dụng cho viên nén, Tạp chí dược học, 520, tr 58-62, 67 25 ... Viên nén chứa amoxicilin acid clavulanic nước lại ổn định hình thức hàm lượng thời gian bảo quản Vì vậy, chúng tơi thực đề tài: “Nghiên cứu bào chế viên nén amoxicilin acid clavulanic hai lớp giải... chứa amoxicilin acid clavulanic giải phóng kéo dài Việt Nam Điểm đề tài nghiên cứu Việt Nam thành công xây dựng thiết kế công thức qui trình bào chế viên nén hai lớp amoxicilin 1000 mg acid clavulanic. .. ổn định amoxicilin kali clavulanat 1.2.1 Amoxicilin Amoxicilin dung dịch amoxicilin loãng phân hủy theo động học bậc khoảng pH rộng Amoxicilin ổn định khoảng 5,8-6,5 ổn định môi trường acid mạnh