Thực tập Công nghệ gen 2018-2019

Bài 1: Trang thiết bị phòng thí nghiệm I Mục đích yêu cầu Bài thực tập nhằm giúp cho sinh viên có nhìn tổng quan tổ chức hoạt động phòng thí nghiệm sinh học phân tử điển hình Các thí nghiệm sinh học phân tử thường phức tạp đòi hỏi độ xác cao Thời gian cho thí nghiệm tương đối dài từ vài vài ngày dài hơn, trình cần phải sử dụng nhiều thiết bị, hóa chất đắt tiền để việc thực tập có hiệu quả, sinh viên cần phải biết máy móc, trang thiết bị thường dùng phòng thí nghiệm sinh học phân tử tính năng, cách vận hành máy móc II Hòa chất thiết bị máy móc Hóa chất Nhìn chung, khó để có phân loại hóa chất cách rõ ràng hóa chất sử dụng cho nhiều mục đích khác Ngồi hóa chất thơng thường, phòng thí nghiệm sinh học phân tử sử dụng hóa chất đặc thù bao gồm: - Các hóa chất sử dụng để tách chiết DNA, ARN protein từ đối tượng thực vật, động vật vi sinh vật - Các enzyme cắt giới hạn để cắt phân tử DNA thành đoạn xác định, enzyme nối đoạn DNA… - Các hóa chất, enzyme cần thiết để tổng hợp DNA tế bào nhờ kỹ thuật PCR - Các hóa chất sử dụng điện di, nhuộm màu DNA, protein… - Các hố chất sử dụng ni cấy, chọn lọc vi khuẩn, chất kháng sinh… - Các chủng vi khuẩn, nấm, virus… Thiết bị Trong phòng thí nghiệm nói chung, đặc biệt phòng thí nghiệm sinh học phân tử thường trang bị nhiều thiết bị máy móc Mỗi thí nghiệm thường phức tạp, kéo dài sử dụng kết hợp nhiều máy móc Hơn nữa, số thiết bị sử dụng cho nhiều mục đích khác 2.1 Hệ thống tủ lạnh Đây nhóm máy khơng thể thiếu cho phòng thí nghiệm Tuỳ thuộc vào u cầu sử dụng mà người ta sử dụng máy làm lạnh khác • Tủ mát: Nhiệt độ từ – 8oC • Bảo quản mẫu, hạt giống mà giữ ngun hoạt tính… • Bảo quản mẫu DNA, protein thời gian ngắn • Bảo quản mẫu vi khuẩn Tủ lạnh thường: Nhiệt độ từ -10oC đến 4oC: bảo quản vi khuẩn thời gian dài, bảo quản protein, enzyme, bảo quản hóa chất chạy PCR, hố chất khác Hình 1: Tủ lạnh 2.2 Nồi khử vơ trùng Hình 2: Nồi hấp khử trùng Ngồi hình thức khử trùng khử trùng tia cực tím (UV), Pasteur, màng lọc vơ khuẩn…2 hình thức khử trùng sử dụng phổ biến là: • Khử trùng khơ: Khử trùng khơ: Đây hình thức sử dụng nhiệt độ cao để khử trùng Để khử trùng người ta bọc vật cần khử trùng giấy nhơm sau đưa vào tủ sấy 200 – 300oC từ đến Loại khử trùng sử dụng dụng cụ thủy tinh, kim loại Nhược điểm chỗ thời gian khử trùng kéo dài, tiêu tốn điện năng, không diệt số bào tử không áp dụng với đồ nhựa, giấy • Khử trùng ướt: Là thiết bị sử dụng để khử trùng môi trường nuôi cấy, vi khuẩn, nấm, mầm bệnh dụng cụ cần vô trùng sử dụng Thiết bị hoạt động dựa sở khử trùng nước nhiệt độ áp suất cao Thông thường 120-130oC 30 phút áp suất 1atm Loại khử trùng nhanh, tiết kiệm điện tiêu diệt hầu hết bào tử, sử dụng nhiều 2.3 Cân phân tích Hình 3: Cân phân tích Là thiết bị sử dụng để cân khối lượng xác mẫu vật hóa chất Tuỳ thuộc khối lượng mẫu hóa chất mức độ sai số cho phép mà người ta chia cân phân tích thành nhóm: Cân phân tích thường cân phân tích đặc biệt Cân phân tích thường sử dụng để cân với lượng tương đối lớn (có thể đến 2000 g) độ xác khơng cao, sai số khoảng 10 – g, cân phân tích đặc biệt thường cân với lượng nhỏ (