PHẦN 1. MỞ ĐẦU 1.1. TÍNH CẤP THIẾT CỦA ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU Những công bố của Shull (1908, 1909) là sự khởi đầu khai thác ưu thế lai (heterosis) trong chọn tạo giống cây trồng và đây cũng là thành tựu vĩ đại của di truyền học. Các giống thụ phấn tự do được thay thế bằng các giống lai với tốc độ rất nhanh. Tại các bang ở Hoa kỳ, tỷ lệ trồng giống ngô lai được trồng ít hơn 10% vào năm 1935 đã tăng lên đến 90% sau bốn năm. Đến những năm 1950, ngô lai phổ biến toàn bộ nước Mỹ và cũng được trồng rộng rãi trên thế giới góp phần nâng cao năng suất và sản lượng ngô toàn cầu. So sánh số liệu sản xuất ngô giữa các năm 2016 và 1961 cho thấy diện tích trồng ngô toàn cầu từ 105,56 triệu ha năm 1961 tăng lên 187,96 triệu ha năm 2016 (tăng 1,78 lần); năng suất từ 1,94 t/ha tăng lên 5,64 t/ha (2,90 lần) và sản lượng từ 205,03 triêu tấn lên 1060, 11 triệu tấn (tăng 5,17 lần) (FAOSTAT, 2016). Ngô nếp (Zea mays L. var. certain Kulesh) là một đột biến tự nhiên đã phát hiện ở Trung Quốc năm 1909 (Collins, 1909; Tian et al., 2009; Zheng et al., 2013). Ngô nếp có nội nhũ gần 100% là amylopectin và được sử dụng chủ yếu làm lương thực ở châu Á, ngoài ra còn được sử dụng làm nguyên liệu cho công nghiệp dệt, làm giấy và chế biến thức ăn gia súc rộng rãi trên thế giới. Do có thành phần tinh bột và dinh dưỡng cao nên ngô nếp có giá trị kinh tế trong sản xuất nông nghiệp, vì thế sản xuất ngô nếp tăng nhanh những năm gần đây (Sa et al., 2010). Hiện nay ngô nếp được sản xuất thương mại ở Thái Lan, Trung Quốc và nhiều nước khác ở châu Á. Các giống ngô nếp địa phương thụ phấn tự do có rất nhiều loại khác nhau về độ lớn bắp, dạng bắp, màu sắc hạt và chất lượng ăn uống có thể sử dụng để phát triển giống ưu thế lai với chất lượng tốt đang được các nhà chọn giống quan tâm đặc biệt theo hướng thị trường ăn tươi ở châu Á và thế giới (Kim et al., 1994). Năng suất cao, chống chịu sâu bệnh, cứng cây, đồng đều, ngắn ngày vẫn là mục tiêu cơ bản của các chương trình chọn tạo giống cây trồng (Ferh, 1987). Tuy nhiên, đối với ngô nếp ngoài các mục tiêu trên, chất lượng là chỉ tiêu quan trọng. Vì vậy, đã có rất nhiều nghiên cứu về chất lượng ngô nếp như: Các nhà tạo giống ngô nếp trên thế giới đã nghiên cứu di truyền chọn giống ngô nếp chất lượng ăn tươi có vỏ hạt mỏng (Choe, 2010; Rocheford, 2012), chọn giống ngô nếp nâng cao hàm lượng đường trong hạt (Simla et al., 2009; Park et al., 2013), nâng cao hàm lượng protein trong ngô nếp (Chi, 2010). Nghiên cứu di truyền và nâng cao chất lượng ăn uống và hàm lượng đường trong ngô nếp được quan tâm gần đây, nghiên cứu di truyền phân tử xác định có 10 QTLs điều khiển độ mỏng vỏ (PER), hàm lương amylose (AMY), hàm lượng dextrose (DEX) và hàm lượng đường sucrose (SUC). Đây là cơ sở di truyền cho chọn giống ngô nếp chất lượng cao (Park et al., 2013). Ngoài các vấn đề nghiên cứu liên quan đến chất lượng ngô nếp trên đây. Trên thế giới đã có nhiều nghiên cứu nhằm cải thiện chất lượng cuộc sống thông qua tăng lượng thành phần hoạt chất sinh học, có lợi cho sức khỏe, đặc biệt là chất anthocyanin trong lương thực thực phẩm có hàm lượng cao. Anthocyanin đặc biệt rất giàu trong ngô có màu đậm, có lợi cho sức khỏe con người và được cho là chất kháng oxy hóa và tiềm năng hoạt động chống ung thư, ngăn chặn bệnh tim mạch, điều khiển chống béo phì, giảm nhẹ bệnh tiểu đường và khả năng kháng viêm nhiễm (Jones, 2005; He and Giusti, 2010). Chính vì vậy nghiên cứu chọn giống ngô nếp có chất lượng và giàu chất anthocyanin đang phát triển mạnh mẽ. Hiện nay ở một số nước, lai tạo ngô nếp tím đang được triển khai bằng phương pháp lai ngô nếp trắng với ngô nếp tím tạo giống ngô nếp lai chất lượng cao và giàu chất kháng ô xy hóa (Hu and Xu, 2011; Harakotr et al., 2013; 2016) Ngô nếp tím (Zea mays L. var. ceratina Kulesh) là một dạng đặc thù của ngô giàu anthocyanin và thành phần các chất kháng oxy hóa khác, được sản xuất và tiêu thụ rộng rãi ở Thái Lan và các nước khác ở châu Á (Harakotr et al., 2014; Hu and Xu, 2011). Dạng ngô này thu hoạch trước khi chín cho ăn tươi và làm lương thực khi hạt chín hoàn toàn được thương mại dưới dạng chế biến bột, hạt và bắp đông lạnh bán ở thị trường châu Âu và thị trường Mỹ (Harakotr et al., 2014; Ketthaisong et al., 2014). Ngô nếp hạt rất nhiều màu từ trắng đến đen tương quan với hàm lượng của các chất hóa học thực vật trong hạt. Màu hạt ở ngô do chất màu và hợp chất khác gồm carotenoids, phenols và anthocyanin tạo màu ở vỏ hạt và lớp ơloron trong nội nhũ. Các hợp chất sinh học và màu tăng tương quan với tăng chất lượng dinh dưỡng của ngô nếp. Hạt có màu đậm như tía, xanh và đỏ nhìn chung là ở lớp ơloron hoặc vỏ hạt ngô (Mahan et al., 2013). Nhận biết nguồn gen ngô nếp (Zea mays L. var. ceratina) có biến dị cao thành phần chất kháng oxy hóa anthocyanin, phenolic và antioxidant là giai đoạn quan trọng trong chọn giống ngô nếp cải tiến thành phần hóa sinh có lợi cho sức khỏe con người (Bhornchai Harakotr et al, 2014). Như vậy, để chọn tạo giống ngô nếp ưu thế lai, kết hợp năng suất, chất lượng và hàm lượng anthocyanin cao, cần có nguồn vật liệu ngô đa dạng về nguồn gốc, phòng phú về màu sắc bao gồm ngô nếp hạt tím, ngô nếp hạt trắng và ngô ngọt. Ở Việt Nam, nghiên cứu cải thiện chất lượng và chọn giống ngô nếp chất lượng cao và giàu anthocyanin còn hạn chế. Hiện nay trong nước chưa có các công bố về phương pháp lai cải thiện tính trạng chất lượng về độ ngọt trên cây ngô nếp, đặc biệt là ngô nếp tím; về chọn giống ngô nếp chất lượng và giàu anthocyanin cũng chưa có kết quả công bố, hiện tại trong nước mới có một giống ngô nếp tím giàu anthocyanin là Fancy111 nhập nội từ Thái Lan, có giá hạt giống rất cao (400-500 ngàn đồng/kg hạt) và không chủ động hạt giống. Chính vì vậy, việc nghiên cứu phát triển nguồn vật liệu phục vụ chọn tạo giống ngô nếp ưu thế lai có năng suất, chất lượng cao và giàu chất kháng ô xy hóa anthocyanin ở Việt Nam, đáp ứng yêu cầu sản xuất, thị trường ngô nếp ăn tươi nâng cao hiệu quả kinh tế cho sản xuất đang là vấn đề cấp thiết. 1.2. MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU - Đánh giá và chọn lọc vật liệu di truyền ngô nếp có năng suất, chất lượng và giàu anthocyanin phục vụ chọn tạo giống ngô nếp lai cho các tỉnh miền Bắc, Việt Nam. - Khai thác và cải tiến nguồn vật liệu ngô nếp trong nước và nhập nội, chọn tạo giống ngô nếp tím lai có chất lượng cao và giàu anthocyanin cho các tỉnh miền Bắc, Việt Nam.
HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM PHẠM QUANG TUÂN NGHIÊN CỨU PHÁT TRIỂN NGUỒN VẬT LIỆU PHỤC VỤ CHỌN TẠO GIỐNG NGÔ NẾP LAI CHẤT LƯỢNG CAO VÀ GIÀU HÀM LƯỢNG ANTHOCYANIN LUẬN ÁN TIẾN SĨ NHÀ XUẤT BẢN ĐẠI HỌC NÔNG NGHIỆP - 2019 MỤC LỤC Lời cam đoan i Lời cảm ơn ii Mục lục iii Danh mục viết tắt vi Danh mục bảng vii Danh mục hình xi Trích yếu luận án xiii Thesis abstract xv Phần Mở đầu 1.1 Tính cấp thiết đề tài nghiên cứu 1.2 Mục tiêu nghiên cứu 1.3 Đối tượng, phạm vi nghiên cứu 1.4 Những đóng góp luận án 1.5 Ý nghĩa khoa học ý nghĩa thực tiễn đề tài Phần Tổng quan tài liệu 2.1 Nguồn gốc, phân loại đặc điểm ngô nếp 2.1.1 Nguồn gốc ngô ngô nếp 2.1.2 Phân loại thực vật ngô ngô nếp 2.1.3 Đặc điểm thực vật ngô ngô nếp 2.2 Sản xuất ngô nếp giới việt nam 2.3 Đa dạng di truyền nguồn gen ngô ngô nếp 10 2.3.1 Đa dạng nguồn gen ngô 10 2.3.2 Đa dạng di truyền nguồn gen ngô nếp 13 2.3.3 Đa dạng di truyền nguồn gen ngô nếp Việt Nam 16 2.4 Nghiên cứu di truyền tính trạng ngơ nếp 18 2.4.1 Di truyền tính trạng nội nhũ sáp (Wx) 18 2.4.2 Di truyền tính trạng chất lượng 21 2.4.3 Di truyền hoạt chất ngơ nếp tím 22 2.4.4 Cải tiến chất lượng ngơ nếp 25 2.5 Nghiên cứu phát triển dòng ngơ nếp 27 iii 2.5.1 Phát triển dòng ngơ phương pháp tự thụ cưỡng 27 2.5.2 Phát triển dòng ngơ phương pháp chọn lọc phả hệ 28 2.5.3 Thành tựu phát triển dòng ngơ giới 30 2.5.4 Phát triển dòng ngơ nếp Việt Nam 30 2.6 Nghiên cứu khả kết hợp chọn tạo giống ngô nếp lai 31 2.6.1 Nghiên cứu khả kết hợp chung 32 2.6.2 Nghiên cứu khả kết hợp riêng 34 2.7 Thành tựu chọn tạo giống ngô nếp giới Việt Nam 36 2.7.1 Thành tựu chọn tạo giống ngô nếp giới 36 2.7.2 Thành tựu chọn tạo giống ngô nếp Việt Nam 37 2.7.3 Thành tựu chọn tạo giống ngơ nếp tím giàu anthocyanin 38 Phần Vật liệu, nội dung phương pháp nghiên cứu 40 3.1 Vật liệu nghiên cứu 40 3.2 Nội dung nghiên cứu 41 3.3 Trình tự thực thí nghiệm nội dung nghiên cứu 41 3.3.1 Nội dung trình tự thực thí nghiệm nghiên cứu 41 3.3.3 Tóm tắt q trình thực nội dung nghiên cứu đề tài 43 3.4 Phương pháp nghiên cứu 44 3.4.1 Phương pháp nghiên cứu dùng cho thí nghiệm đồng ruộng 44 3.4.2 Các phương pháp thí nghiệm áp dụng cho thí nghiệm phòng 47 3.4.3 Các tiêu theo dõi thí nghiệm 52 3.4.4 Phân tích kết thí nghiệm 53 Phần Kết thảo luận 54 4.1 Đánh giá, sàng lọc nguồn vật liệu ngô nếp 54 4.1.1 Đánh giá sàng lọc 56 dòng tự phối ngơ nếp nghiên cứu dựa kiểu hình 54 4.1.2 Đánh giá độ mỏng vỏ hạt 56 dòng ngơ thí nghiệm thị phân tử SSR vụ Xuân 2015 Gia Lâm - Hà Nội 4.1.3 65 Đánh giá đa dạng di truyền 56 dòng ngơ thí nghiệm sử dụng thị phân tử SSR 66 4.1.4 Kết chọn lọc dòng ngơ nếp tím ưu tú 69 4.2 Đánh giá khả kết hợp chung (GCA) dòng ngơ thí nghiệm 71 4.2.1 Kết thí nghiệm lai tạo tổ hợp lai đỉnh 71 iv 4.2.2 Đánh giá khả kết hợp chung 18 dòng ngơ nếp tím ưu tú 71 4.3 phát triển dòng ngơ nếp 80 4.3.1 Phát triển dòng phương pháp thụ phấn cưỡng 81 4.3.2 Phát triển dòng phương pháp lai trở lại thụ phấn cưỡng 94 4.4 Đánh giá khả kết hợp riêng (SCA) dòng tự phối ưu tú chọn lọc tổ hợp lai triển vọng 101 4.4.1 Kết lai tạo tổ hợp lai 101 4.4.2 Đánh giá khả kết hợp riêng dòng ngơ nếp ưu tú 101 4.4.3 Đánh giá độ mỏng vỏ hạt 15 THL ngô nếp ưu tú thị phân tử SSR 114 4.4.4 Đánh giá so sánh 15 tổ hợp lai ngô nếp ưu tú Gia Lâm, Hà Nội 116 4.5 Thử nghiệm tổ hợp lai số vùng sinh thái 123 4.5.1 Thời gian sinh trưởng tổ hợp lai ngô nếp vụ Thu Đông 2017 Xuân năm 2018 số vùng sinh thái 4.5.2 Các đặc điểm nông sinh học tổ hợp lai ngô nếp vụ Thu Đông 2017 Xuân năm 2018 số vùng sinh thái 4.5.3 128 Một số tiêu chất lượng THL vụ Thu Đông Xuân số vùng sinh thái 4.5.6 127 Các yếu tố cấu thành suất suất THL vụ Thu Đông 2017 Xuân2018 số vùng sinh thái 4.5.5 125 Khả chống chịu đồng ruộng yếu tố cấu thành suất THL vụ Thu Đông 2017 Xuân năm 2018 số vùng sinh thái 4.4.4 123 131 Một số tiêu đánh giá chất lượng định lượng THL vụ Xuân Thu Đông số vùng sinh thái 132 Phần Kết luận đề nghị 135 5.1 Kết luận 135 5.2 Đề nghị 136 Các cơng trình cơng bố có liên quan đến luận án 137 Tài liệu tham khảo 138 Phụ lục 149 v DANH MỤC VIẾT TẮT Chữ ký hiệu Nghĩa tiếng Việt viết tắt bảng CDB Chiều dài bắp ĐK Đường kính ĐR Đồng ruộng DT Diện tích DVH Độ dày vỏ hạt GN Giống nếp KNKH Khả kết hợp NC& PTCT Nghiên cứu Phát triển trồng NS Năng suất NSBT Năng suất bắp tươi NSLT Năng suất lý thuyết NSTT Năng suất thực thu T/ha Tấn/ha PIC Polymorphic information content (Giá trị thơng tin đa hình) PR Phun râu SH/H Số hạt /hàng SHH Số hàng hạt SL Sản lượng STT Số thứ tự TB Trung bình TCN Tiêu chuẩn ngành TĐ Thu Đông TGST Thời gian sinh trưởng THL Tổ hợp lai TP Tung phấn X Vụ Xuân ns Không sai khác so với đối chứng - Thấp đối chứng + Sai khác so với đối chứng mức ý nghĩa 95% ++ Sai khác so với đối chứng mức ý nghĩa 99% vi DANH MỤC BẢNG STT Tên bảng Trang 3.1 Danh sách vật liệu ngô sử dụng nghiên cứu 40 3.2 Các thí nghiệm, thời vụ thực 42 3.3 Các mồi sử dụng thí nghiệm đánh giá đa dạng di truyền thị phân tử SSR 48 3.4 Tên mồi phân tích tiêu chất lượng ngơ nếp 50 3.5 Trình tự mồi thí nghiệm đánh giá chất lượng sử dụng thị phân tử DNAError! Bookmark not defi 3.8 Thang điểm đánh giá số tiêu chất lượng nếm thử ngô nếp 51 3.9 Xác định tính trạng vỏ hạt cấu trúc hạt 52 3.1 Các giai đoạn sinh trưởng, phát triển dòng ngơ thí nghiệm vụ Xn 2015 Gia Lâm - Hà Nội 3.2 55 Các đặc điểm nơng sinh học dòng ngơ thí nghiệm vụ Xuân 2015 Gia Lâm - Hà Nội 3.3 57 Khả chống chịu sâu bệnh tỷ lệ đổ gốc dòng ngơ thí nghiệm vụ Xn2015 Gia Lâm - Hà Nội 3.4 Các yếu tố cấu thành suất suất dòng ngơ thí nghiệm vụ Xn 2015 Gia Lâm - Hà Nội 3.5 59 61 Chỉ tiêu chất lượng dòng ngơ thí nghiệm vụ Xn 2015 Gia Lâm - Hà Nội 63 3.6 Các mồi đa dạng di truyền giá trị PIC 56 dòng ngơ thí nghiệm 67 3.7 Đặc điểm dòng ngơ nếp tím ưu tú vụ Xuân 2015 70 3.8 Các giai đoạn sinh trưởng đặc điểm nông sinh học tổ hợp lai ngô nếp vụ Thu Đông 2015 Gia Lâm - Hà Nội 3.9 Các tiêu chống chịu sâu bệnh tỷ lệ đổ gãy tổ hợp lai ngô nếp vụ Thu Đông 2015 Gia Lâm - Hà Nội 3.10 74 Các yếu tố cấu thành suất suất tổ hợp lai ngô nếp vụ Thu Đông 2015 Gia Lâm - Hà Nội 3.11 72 76 Các tiêu tiêu chất lượng cảm quan tổ hợp lai ngô nếp vụ Thu Đông 2015 Gia Lâm - Hà Nội 77 vii 3.12 Đánh giá khả kết hợp chung tổ hợp lai ngô nếp vụ Thu Đông 2015 Gia Lâm - Hà Nội 79 3.13 Danh sách 40 dòng tự phối hệ S6-S7 81 3.14 Các giai đoạn sinh trưởng, phát triển dòng ngơ nếp tím vụ Xn 2016 Gia Lâm - Hà Nội 3.15 83 Đặc điểm nơng sinh học dòng ngơ nếp tím vụ Xuân 2016 Gia Lâm - Hà Nội 3.16 85 Các tiêu chống chịu sâu bệnh tỷ lệ đổ gãy dòng ngơ nếp tím vụ Xn 2016 Gia Lâm - Hà Nội 3.17 Các yếu tố cấu thành suất suất dòng ngơ nếp tím vụ Xn2016 Gia Lâm - Hà Nội 3.18 89 Một số tiêu đánh giá chất lượng ăn tươi dòng ngơ nếp tím vụ Xuân 2016 Gia Lâm - Hà Nội 3.19 87 91 Đặc điểm dòng ngơ nếp tím ưu tú chọn lọc vụ Xuân 2016 Gia Lâm - Hà Nội 93 3.20A Một số tiêu chất lượng dòng ngơ nếp ngơ nghiên cứu vụ Xuân 2015 Gia Lâm - Hà Nội 95 3.20B Một số tiêu chất lượng vật liệu ngô nghiên cứu hệ F1 BC2F1 - vụ Xuân 2016 Gia Lâm - Hà Nội 95 3.21 Kết tự phối ba hệ dòng ngơ nếp BC2F1 96 3.22 Một số đặc điểm nơng sinh học dòng ngơ nếp BC2F4 vụ Xuân 2017 Gia Lâm, Hà Nội 3.23 97 Một số tiêu suất chất lượng dòng ngơ nếp hệ BC2F4 vụ Xuân 2017 Gia Lâm, Hà Nội 3.24 Các tổ hợp lai luân phiên dòng tự phối theo mơ hình Griffing IV 3.25 Thời gian sinh trưởng tổ hợp lai vụ Thu Đông 2016 Gia Lâm Hà Nội 3.26 Một số đặc điểm nông sinh học tổ hợp lai ngơ nếp tím vụ Thu 104 Một số đặc tính chống chịu tổ hợp lai ngơ nếp tím vụ Thu Đơng 2016 Gia Lâm, Hà Nội 4.28 101 102 Đông 2016 Gia Lâm, Hà Nội 3.27 99 106 Các yếu tố cấu thành suất tổ hợp lai ngơ nếp tím vụ Thu Đơng 2016 Gia Lâm, Hà Nội 108 viii 4.29 Một số tiêu chất lượng ăn tươi tổ hợp lai ngô nếp tím vụ Thu Đơng 2016 Gia Lâm - Hà Nội 110 3.30 Giá trị khả kết hợp riêng tính trạng khối lượng 1000 hạt 112 3.31 Giá trị khả kết hợp riêng tính trạng suất bắp tươi 112 3.32 Giá trị khả kết hợp riêng tính trạng độ Brix 113 3.33 Giá trị khả kết hợp riêng tính trạng hàm lượng anthocyanin tổng số 113 3.34 Kết chọn lọc tổ hợp lai triển vọng vụ Thu Đông 2016 Gia Lâm - Hà Nội 114 4.35 Thứ tự tổ hợp lai ngơ nếp tím nghiên cứu giếng điện di 115 3.36 Các giai đoạn sinh trưởng phát triển tổ hợp lai ngơ nếp tím vụ Xuân 2017 Gia Lâm - Hà Nội 3.37 116 Một số đặc điểm nông sinh học THL ngô nghiên cứu đánh giá vụ Xuân 2017 Gia Lâm - Hà Nội 3.38 117 Một số tiêu chống chịu sâu bệnh tỷ lệ đổ gãy THL nghiên cứu vụ Xuân 2017 Gia Lâm - Hà Nội 3.39 Các yếu tố cấu thành suất suất bắp tươi tổ hợp lai ngô nếp vụ Xuân 2017 Gia Lâm - Hà Nội 3.40 119 121 Một số tiêu chất lượng tổ hợp lai ngô nếp vụ Xuân 2017 Gia Lâm - Hà Nội 122 3.41 Chọn lọc tổ hợp lai triển vọng vụ Xuân2017 Gia Lâm - Hà Nội 123 3.42 Các giai đoạn sinh trưởng THL vụ Thu Đông 2017 Xuân năm 2018 số vùng sinh thái 3.43 124 Một số đặc điểm nông sinh học THL vụ Thu Đông 2017 Xuân năm 2018 số vùng sinh thái 3.44 Khả chống chịu sâu bệnh tỷ lệ đổ gốc THL vụ Thu Đông 2017 Xuân 2018 số vùng sinh thái 3.45 129 Một số tiêu cấu thành suất suất THL vụ Thu Đông 2017 số vùng sinh thái 3.47 130 Các tiêu đánh giá chất lượng THL vụ Xuân Thu Đông số vùng sinh thái 4.48 127 Một số tiêu cấu thành suất suất THL vụ Xuân 2018 số vùng sinh thái 3.46 126 132 Các tiêu đánh giá chất lượng định lượng THL vụ Xuân Thu Đông số vùng sinh thái ix 133 x DANH MỤC HÌNH STT 2.1 Tên hình Trang Sơ đồ minh họa gen Wx mồi giải trình tự DNA, cDNA thị phân tử phát triển nghiên cứu ngô: S1F/R-S5F/R để giải trình tự DNA, R1F/R R2F/R để giải trình tự cDNA D7F/R D10F/R để phân tích kiểu gen Wx, mũi tên vùng hướng chúng 20 2.2 Cấu trúc gen wx ngô, hộp xanh exon eexon introns 21 2.3 Màu sắc hạt kiểu gen giai đoạn chín hồn tồn 25 2.4 Sơ đồ bước tạo giống sử dụng để phát triển hai dòng ngơ ND2005 ND2006 28 2.5 Năng suất ngô Mỹ từ 1890 đến 2010 32 2.6 Kiểu bắp dòng ngơ Tongxi 37 3.1 Sơ đồ tóm tắt q trình thực nội dung nghiên cứu đề tài 43 3.1 Sơ đồ hạt phương pháp bóc vỏ hạt ngơ 51 4.1 Kết dò tìm QTL quy định tính trạng vỏ hạt mỏng 56 dòng ngơ sử dụng mồi umc2118 4.2 65 Kết dò tìm QTL quy định tính trạng vỏ hạt mỏng 56 dòng ngơ sử dụng mồi bmc1325 66 4.3 Kết đa hình 56 dòng ngơ sử dụng mồi phi065 67 4.4 Kết đa hình 56 dòng ngơ sử dụng mồi phi299852 67 4.5 Kết đa hình 56 dòng ngơ sử dụng mồi phi101049 67 4.6 Kết đa hình 56 dòng ngơ sử dụng mồi phi223376 68 4.7 Kết đa hình 56 dòng ngơ sử dụng mồi phi083 68 4.8 Kết đa hình 56 dòng ngơ sử dụng mồi phi109275 68 4.9 Kết đa hình 56 dòng ngơ sử dụng mồi phi423796 68 4.10 Kết đa hình 56 dòng ngơ sử dụng mồi phi328175 68 4.11 Cây phân nhóm tương đồng di truyền 56 dòng ngơ thí nghiệm sử dụng thị phân tử SSR 4.12 4.13 69 Khả kết hợp chung suất bắp tươi 18 dòng tự phối ngơ nếp nghiên cứu 79 Khả kết hợp chung độ Brix 18 dòng tự phối ngơ nếp nghiên cứu 80 xi ³ ³ 9.574 ³ ³ ³ 10.691 ³ ³ ³ -17.144 ³ ³ ³ -12.461 ³ ³ ³ 10.169 ³ ³ 10 ³ 4.876 ³ ³ 11 ³ 18.371 ³ ³ 12 ³ -8.516 ³ ³ 13 ³ -18.736 ³ ³ 14 ³ 11.869 ³ ³ 15 ³ -32.261 ³ ³ 16 ³ 12.439 ³ ³ 17 ³ -0.766 ³ ³ 18 ³ 30.356 ³ ÀÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÙ Sai so cua KNKHC cua Dong : 2.872 Sai so so KNKHC cua Dong : 4.061 Kha nang ket hop rieng DONG * CAY THU ÚÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄ¿ ³ ³ Cay ³ Cay ³Bien dong³ ³ÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄij ³ dong ³ -10.134³ 10.134³ 205.403 ³ ³ dong ³ 26.521³ -26.521³1406.709 ³ ³ dong ³ -10.872³ 10.872³ 236.386 ³ ³ dong ³ 20.996³ -20.996³ 881.650 ³ ³ dong ³ 3.768³ -3.768³ 28.401 ³ ³ dong ³ -1.319³ 1.319³ 3.480 ³ ³ dong ³ 0.041³ -0.041³ 0.003 ³ ³ dong ³ 8.213³ -8.213³ 134.918 ³ ³ dong ³ -7.607³ 7.607³ 115.723 ³ ³ dong10 ³ 24.191³ -24.191³1170.393 ³ ³ dong11 ³ 14.426³ -14.426³ 416.209 ³ ³ dong12 ³ -9.032³ 9.032³ 163.142 ³ ³ dong13 ³ -9.782³ 9.782³ 191.362 ³ ³ dong14 ³ -9.877³ 9.877³ 195.097 ³ ³ dong15 ³ -12.127³ 12.127³ 294.112 ³ ³ dong16 ³ -3.592³ 3.592³ 25.800 ³ ³ dong17 ³ -9.577³ 9.577³ 183.425 ³ ³ dong18 ³ -14.239³ 14.239³ 405.508 ³ ÀÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÙ Bien dong 162.644 162.644 Trung binh bien dong cua cay thu 336.540 Trung binh bien dong cua Dong 162.644 Sai so cua KNKHR cua Dong * Cay thu : 4.061 Sai so so KNKHR cua Dong * Cay thu : 5.744 Kết phân tích khả kết hợp riêng vụ Thu Đơng 2016 Khối lượng 1000 hạt PHAN TICH DIALEN THEO GRIFFING Version 2.0 NGUYEN DINH HIEN 162 Danh gia KNKHR ngo nep tim dong nhac lai Griffing BANG PHAN TICH PHUONG SAI I -nguon bien Dong Tong BF Bac tu Do Trung Binh Ftn Toan bo 61960.50 71 872.68 giong 60933.16 35 1740.95 59.37 lap lai 0.93 0.93 0.03 Ngau nhien 1026.41 35 29.33 -BANG PHAN TICH PHUONG SAI II nguon bien Dong Tong BF Bac tu Do Trung Binh Ftn -Toan bo 30980.25 71 436.342 giong 30466.58 35 870.474 29.683 To hop chung 11805.28 1475.660 100.639 To hop rieng 18661.30 27 691.159 47.136 Ngau nhien 513.203 35 14.663 -MO HINH CO DINH - BANG CAC TO HOP RIENG -1 9 -3.843 -18.714 -15.943 2.629 28.557 25.843 1.700 -20.229 30.271 -16.857 36.714 13.643 -35.071 -12.214 -12.643 34.371 -4.057 -35.129 31.657 -23.986 -14.414 7.814 -0.257 -40.971 1.386 30.457 10.314 -3.400 -0.043 -49.971 -19.471 -3.614 5.957 8.671 32.743 28.100 Bang P * P Dialen -1 195.200 189.100 163.000 208.000 201.000 203.000 174.500 153.000 247.000 171.000 251.000 195.000 151.000 169.500 169.500 231.000 219.000 155.000 226.500 166.500 176.500 202.000 161.000 125.000 163.000 192.500 198.000 189.000 188.000 138.500 140.000 151.500 161.500 168.500 193.000 184.000 163 Phan tich ve To hop chung Gia tri To hop chung Dong1 Dong2 Dong3 Dong4 Dong5 Dong6 Dong7 Dong8 Dong9 3.803 12.717 21.489 -7.383 19.046 -13.883 -9.168 -13.525 -13.097 Bien Dong cua To hop chung 12.602 159.872 459.910 52.640 360.889 190.863 82.195 181.074 169.665 Bien Dong cua TO HOP RIENG -Dong1 Dong2 Dong3 Dong4 Dong5 Dong6 Dong7 Dong8 Dong9 347.650 600.059 770.820 614.443 565.641 383.116 861.243 217.029 858.686 Phg sai Do lech T(0.05) LSD(0.05) LSD(0.01) -GI 1.862 1.365 2.042 2.786 3.752 GI - GJ 4.189 2.047 2.042 4.180 5.629 SIJ 10.997 3.316 2.042 6.772 9.120 SIJ -SIK 25.136 5.014 2.042 10.238 13.787 SIJ -SKL 20.947 4.577 2.042 9.346 12.586 Năng suất bắp tươi PHAN TICH DIALEN THEO GRIFFING Version 2.0 NGUYEN DINH HIEN Danh gia KNKHR ngo nep tim dong nhac lai Griffing BANG PHAN TICH PHUONG SAI I -nguon bien Dong Tong BF Bac tu Do Trung Binh Toan bo 127.84 71 1.80 giong 106.51 35 3.04 5.01 lap lai 0.07 0.07 0.11 Ngau nhien 21.26 35 0.61 -BANG PHAN TICH PHUONG SAI II nguon bien Dong Tong BF Bac tu Do Trung Binh -Toan bo 63.92 71 0.900 giong 53.25 35 1.522 2.505 To hop chung 20.74 2.593 8.536 To hop rieng 32.51 27 1.204 3.964 Ngau nhien 10.631 35 0.304 -MO HINH CO DINH 164 Ftn Ftn - BANG CAC TO HOP RIENG -1 9 -0.646 0.861 -0.554 0.761 -0.125 0.482 -0.596 -0.182 0.304 0.039 0.804 0.918 -1.925 0.396 0.111 -0.604 -0.139 -1.625 0.182 -0.846 1.868 0.796 0.811 0.068 0.789 -1.346 0.625 -0.968 0.454 -2.332 1.096 -0.932 -0.768 -0.425 1.489 1.161 Bang P * P Dialen -1 11.200 12.300 10.100 12.100 11.100 11.400 11.350 10.400 11.200 10.150 11.600 11.600 8.450 11.800 10.150 9.100 10.250 8.650 10.150 10.150 11.500 10.400 10.300 9.250 11.000 7.500 10.800 8.900 11.350 7.200 10.850 9.850 8.650 10.050 10.600 11.300 Phan tich ve To hop chung Gia tri To hop chung Dong1 Dong2 Dong3 Dong4 Dong5 Dong6 Dong7 Dong8 Dong9 1.018 0.475 0.068 -0.717 -0.032 -0.146 -0.453 0.575 -0.789 Bien Dong cua To hop chung 0.998 0.187 -0.034 0.476 -0.038 -0.017 0.167 0.293 0.584 Bien Dong cua TO HOP RIENG -Dong1 Dong2 Dong3 Dong4 Dong5 Dong6 Dong7 Dong8 Dong9 0.123 0.579 0.896 0.369 1.004 0.769 0.956 0.376 1.874 Phg sai Do lech T(0.05) LSD(0.05) LSD(0.01) -GI 0.039 0.196 2.042 0.401 0.540 GI - GJ 0.087 0.295 2.042 0.602 0.810 165 SIJ 0.228 0.477 2.042 0.975 1.313 SIJ -SIK 0.521 0.722 2.042 1.474 1.984 SIJ -SKL 0.434 0.659 2.042 1.345 1.812 Brix PHAN TICH DIALEN THEO GRIFFING Version 2.0 NGUYEN DINH HIEN Danh gia KNKHR ngo nep tim dong nhac lai Griffing BANG PHAN TICH PHUONG SAI I -nguon bien Dong Tong BF Bac tu Do Trung Binh Toan bo 122.06 71 1.72 giong 113.98 35 3.26 14.43 lap lai 0.18 0.18 0.80 Ngau nhien 7.90 35 0.23 -BANG PHAN TICH PHUONG SAI II nguon bien Dong Tong BF Bac tu Do Trung Binh -Toan bo 61.03 71 0.860 giong 56.99 35 1.628 7.214 To hop chung 6.96 0.870 7.706 To hop rieng 50.03 27 1.853 16.419 Ngau nhien 3.950 35 0.113 -MO HINH CO DINH - Ftn Ftn BANG CAC TO HOP RIENG -1 9 0.154 -0.246 0.039 0.682 -0.818 -0.304 0.954 -0.461 -2.032 2.454 0.196 -1.004 -1.189 0.468 0.954 1.854 0.796 0.696 -2.389 1.068 0.254 -1.318 -1.118 -0.404 -0.646 -0.861 1.825 1.539 -1.604 -2.118 1.339 -1.004 0.082 0.011 1.396 0.754 Bang P * P Dialen -1 12.300 11.400 11.900 13.000 10.600 12.200 13.000 11.900 9.600 14.300 12.500 10.400 11.300 12.500 13.300 166 13.200 12.600 11.600 9.600 12.600 12.100 10.700 10.000 11.800 11.100 11.200 13.400 14.200 10.600 10.400 13.100 10.300 11.700 12.400 14.100 13.000 Phan tich ve To hop chung Gia tri To hop chung Dong1 Dong2 Dong3 Dong4 Dong5 Dong6 Dong7 Dong8 Dong9 0.110 0.095 -0.405 -0.190 0.267 -0.633 0.452 -0.005 0.310 Bien Dong cua To hop chung -0.002 -0.005 0.150 0.022 0.057 0.387 0.190 -0.014 0.081 Bien Dong cua TO HOP RIENG -Dong1 Dong2 Dong3 Dong4 Dong5 Dong6 Dong7 Dong8 Dong9 0.251 1.869 2.140 1.870 2.136 1.267 1.831 0.879 1.180 Phg sai Do lech T(0.05) LSD(0.05) LSD(0.01) -GI 0.014 0.120 2.042 0.244 0.329 GI - GJ 0.032 0.180 2.042 0.367 0.494 SIJ 0.085 0.291 2.042 0.594 0.800 SIJ -SIK 0.193 0.440 2.042 0.898 1.210 SIJ -SKL 0.161 0.402 2.042 0.820 1.104 Anthocyanin PHAN TICH DIALEN THEO GRIFFING Version 2.0 NGUYEN DINH HIEN Danh gia KNKHR ngo nep tim dong nhac lai Griffing BANG PHAN TICH PHUONG SAI I -nguon bien Dong Tong BF Bac tu Do Trung Binh Toan bo 19437.48 71 273.77 giong 19132.93 35 546.66 65.78 lap lai 13.69 13.69 1.65 Ngau nhien 290.86 35 8.31 -BANG PHAN TICH PHUONG SAI II - 167 Ftn nguon bien Dong Tong BF Bac tu Do Trung Binh -Toan bo 9718.74 71 136.884 giong 9566.47 35 273.328 32.891 To hop chung 1319.07 164.884 39.682 To hop rieng 8247.39 27 305.459 73.514 Ngau nhien 145.428 35 4.155 -MO HINH CO DINH - Ftn BANG CAC TO HOP RIENG -1 9 -0.564 -12.157 -12.457 15.057 13.543 -7.500 0.607 3.471 10.279 -24.971 -5.007 -8.571 21.686 7.143 0.007 12.386 5.950 6.386 -36.607 1.500 12.264 -9.950 -20.414 21.793 20.500 13.114 1.600 11.607 -2.836 -16.421 23.693 4.200 -20.436 -36.893 2.221 5.779 Bang P * P Dialen -1 121.550 108.600 102.550 146.600 135.600 109.950 125.000 125.000 126.500 85.500 122.000 108.950 134.600 127.000 117.000 121.500 131.600 122.550 74.950 120.000 127.900 109.950 90.000 127.600 133.250 123.000 128.550 133.950 126.450 110.000 136.550 124.000 96.500 78.300 114.550 125.050 Phan tich ve To hop chung Gia tri To hop chung Dong1 Dong2 Dong3 Dong4 Dong5 Dong6 Dong7 Dong8 Dong9 4.261 -0.275 -1.632 -7.382 9.154 -0.332 -4.939 2.004 -0.860 Bien Dong cua To hop chung 17.629 -0.452 2.135 53.963 83.268 -0.418 23.865 3.488 0.213 Bien Dong cua TO HOP RIENG 168 Dong1 Dong2 Dong3 Dong4 Dong5 Dong6 Dong7 Dong8 Dong9 108.166 189.206 278.692 355.734 110.893 241.234 625.528 267.016 147.875 Phg sai Do lech T(0.05) LSD(0.05) LSD(0.01) -GI 0.528 0.726 2.042 1.483 1.998 GI - GJ 1.187 1.090 2.042 2.225 2.996 SIJ 3.116 1.765 2.042 3.605 4.855 SIJ -SIK 7.123 2.669 2.042 5.450 7.339t SIJ -SKL 5.936 2.436 2.042 4.975 6.700 169 PHỤ LỤC: QCVN 01-56 : 2011/BNNPTNT QUY CHUẨN KỸ THUẬT QUỐC GIA VỀ KHẢO NGHIỆM GIÁ TRỊ CANH TÁC VÀ SỬ DỤNG CỦA GIỐNG NGÔ National technical regulation on testing for Value of Cultivation and Use of Maize varieties Lời nói đầu QCVN 01-56 : 2011/BNNPTNT chuyển đổi từ 10TCN 341 : 2006 theo quy định khoản Điều 69 Luật Tiêu chuẩn Quy chuẩn kỹ thuật điểm a khoản ĐIều Nghị định số 127/2007/NĐ-CP ngày 1/8/2007 Chính phủ qui định chi tiết thi hành số điều Luật Tiêu chuẩn Quy chuẩn kỹ thuật QCVN 01-56 : 2011/BNNPTNT Trung tâm Khảo kiểm nghiệm giống, sản phẩm trồng phân bón Quốc gia biên soạn, Cục Trồng trọt trình duyệt, Bộ Nông nghiệp Phát triển nông thôn ban hành Thông tư số 48 /2011/TT-BNNPTNT ngày 05 tháng năm 2011 I QUY ĐỊNH CHUNG 1.1 Phạm vi điều chỉnh Quy chuẩn quy định tiêu theo dõi, phương pháp đánh giá yêu cầu quản lý khảo nghiệm giá trị canh tác giá trị sử dụng (khảo nghiệm VCU) giống ngô thuộc loài Zea mays (L.) chọn tạo nước nhập nội Quy chuẩn không áp dụng cho giống ngô rau 1.2 Đối tượng áp dụng Quy chuẩn áp dụng cho tổ chức, cá nhân hoạt động liên quan đến khảo nghiệm VCU giống ngô Giải thích từ ngữ từ viết tắt 1.3.1 Giải thích từ ngữ Trong Quy chuẩn từ ngữ hiểu sau: 1.3.1.1 Giống khảo nghiệm: Là giống ngô đăng ký khảo nghiệm 1.3.1.2 Giống đối chứng: Là giống nhóm với giống khảo nghiệm công nhận giống trồng giống địa phương gieo trồng phổ biến sản xuất 1.3.2 Các từ viết tắt VCU: Value of Cultivation and Use (giá trị canh tác giá trị sử dụng) 1.4 Tài liệu viện dẫn QCVN 01-47 : 2011/BNNPTNT Quy chuẩn kỹ thuật quốc gia chất lượng hạt giống ngô thu phấn tự QCVN 01-53 : 2011/BNNPTNT Quy chuẩn kỹ thuật quốc gia chất lượng hạt giống ngô lai 170 II QUY ĐỊNH KỸ THUẬT Để xác định giá trị canh tác sử dụng giống ngô phải theo dõi, đánh giá tiêu Bảng Bảng - Các tiêu theo dõi TT Chỉ tiêu Đơn vị Mức độ tính biểu biện điểm Ngày Ngày bắt đầu gieo hạt Ngày có 50% số Cây mọc Ngày có bao mầm lên khỏi mặt đất (mũi chơng) Trổ cờNgày có 50% số tung Ngày có hoa nở 1/3 phấn trục Ngày có 50% số Trổ cờNgày có râu nhú dài từ phun râu đến 3cm Ngày có 75% Bắp chín Ngày có bi khơ chân hạt có chấm đen Giai đoạn Ngày gieo Ngày mọc Ngày trổ cờ Ngày phun râu Ngày chín Chiều cao Bắp chín sữa Cm Chiều cao đóng Bắp chín bắp sữa Cm Bắp bắt đầu chín sáp Trạng thái Độ che kín bắp Bắp chín sáp Phương pháp đánh giá Quan sát tồn cây/ô Quan sát đếm 10 hàng ô Quan sát đếm 10 hàng ô Quan sát đếm 10 hàng ô Đo từ gốc sát mặt đất đến đốt phân nhánh cờ 10 hàng ô Đo từ gốc sát mặt đất đến đốt đóng bắp (bắp thứ nhất) 10 hàng ô Quan sát đánh giá khả sinh trưởng phát triển, độ đồng chiều cao cây, chiều cao đóng bắp, kích thước bắp, sâu bệnh, chống đổ 10 hàng ô Tốt Khá Trung bình Kém Rất Rất kín: Lá bi kín đầu bắp vượt khỏi bắp Kín: Lá bi bao kín đầu bắp Hơi hở: Lá bi bao Quan sát đánh giá 10 bắp không chặt đầu bắp hàng Hở: Lá bi khơng che kín bắp để hở đầu bắp Rất hở: Bao bắp đầu bắp hở nhiều Đếm tổng số bắp hữu hiệu /tổng số hữu hiệu ô Đo từ đáy bắp đến mút bắp 30 mẫu lúc thu hoạch Chỉ đo bắp thứ 30 mẫu Đo bắp 30 mẫu Chỉ đo bắp thứ mẫu Đo phần bắp 10 Số bắp/cây Thu hoạch Bắp 11 Chiều dài bắp Thu hoạch Cm 12 Đường kính bắp Thu hoạch Cm 171 TT Giai đoạn Chỉ tiêu 13 Số hàng hạt/bắp Thu hoạch 14 Số hạt/hàng Thu hoạch 15 Tỉ lệ khối lượng hạt/khối lượng Sau thu bắp tươi khơng hoạch có bi Đơn vị tính điểm Hàng Hạt 4 Dạng hạt Thu hoạch 17 Mầu sắc hạt Thu hoạch 18 Khối lượng 1000 Sau thu hạt hoạch Gam 19 Năng khô Tạ/ha hạt Thu hoạch Phương pháp đánh giá Đếm số hàng hạt bắp Chỉ đếm bắp thứ mẫu Hàng hạt tính có >5 hạt Đếm số hạt hàng có chiều dài trung bình bắp 30 mẫu Chỉ đếm bắp thứ mẫu Thu bắp, tách hạt, phơi sấy % 16 suất Mức độ biểu biện Đá Bán đá Bán ngựa Răng ngựa Trắng Trắng đục Vàng nhạt Vàng Vàng cam Đỏ Tím Quan sát 30 mẫu vừa bóc bi Quan sát 30 mẫu vừa bóc bi Thực theo phương pháp kiểm nghiệm hành - Thu đánh dấu bắp thứ để theo dõi tiêu 11, 12, 13, 14, 15 16 Cân khối lượng bắp tươi 10 mẫu - Thu cân tồn số bắp lại hàng (thứ thứ 3) ơ, sau cộng thêm khối lượng bắp tươi 10 mẫu để tính khối lượng bắp tươi/ơ + Tính suất: Gộp chung cân khối lượng bắp tươi lần nhắc (30 cây) vào túi, tách hạt phơi khô đến độ ẩm 14% Cân khối lượng hạt khơ 30 mẫu tính suất hạt khô theo công thức: P1 P2 NS (tạ/ha)= -x - x 103 m2 S0 P3 P1: Khối lượng bắp tươi hàng thứ hàng thứ ô 172 TT Chỉ tiêu Giai đoạn Đơn vị tính điểm Mức độ biểu biện Phương pháp đánh giá S0: Diện tích hàng ngơ thứ hàng thứ thu hoạch (7m2) P2: Khối lượng hạt khô 30 mẫu độ ẩm 14% P3: Khối lượng bắp tươi 30 mẫu + Tính suất theo phương pháp tính nhanh (tạ/ha): P1 P2 (100-A0) NS(tạ/ha)= -x x -x103m2 S0 P3 (100-14) P1: Khối lượng bắp tươi hàng thứ hàng thứ ô A0: ẩm độ hạt cân khối lượng hạt mẫu S0: Diên tích hàng ngơ thứ hàng thứ thu hoạch (6 m2) P2: Khối lượng hạt mẫu (cân lúc đo độ ẩm hạt "AO") P3: Khối lượng bắp tươi mẫu (100 - A0) = Hệ số qui đổi NS (100 - 14) độ ẩm 14% 20 21 Năng suất bắp tươi Chín sữa ngơ nếp, ngô Mức độ nhiễm sâu bệnh hại 21.1 Sâu đục thân Chín sáp Chilo partellus 21.1 Sâu đục thân Chín sáp Chilo partellus 21.2 Sâu đục bắp Heliothis zea Chín sáp H armigera 21.3 Rệp cờ Chín sữa Rhopalosiphum chín maidis sáp Thực mục 19 tạ/ha 5 < 5% số bị sâu 5-