TỔNG QUAN
Rosuvastatin
1.1.1 Công thức cấu tạo và tính chất vật lý
Hình 1.1 Công thức cấu tạo của rosuvastatin
Rosuvastatin is a potent HMG-CoA reductase inhibitor, scientifically known as (E,3R,5S)-7-[4-(4-fluorophenyl)-2-[methyl(methylsulfonyl)amino]-6-propan-2-ylpyrimidin-5-yl]-3,5-dihydroxyhept-6-enoic acid Its molecular formula contributes to its effectiveness in lowering cholesterol levels and improving cardiovascular health.
Rosuvastatin, có công thức hóa học C22H28FN3O6S và phân tử lượng 481,539 g/mol, tồn tại dưới dạng bột vô định hình màu trắng Chất này ít tan trong nước và methanol, nhưng hơi tan trong ethanol, với độ tan trong nước là 41 mg/L ở 25ºC Rosuvastatin được phân loại vào nhóm II trong bảng phân loại sinh dược học (BCS) và có nhiệt độ nóng chảy đặc trưng.
151 - 156ºC, giá trị logP là 0,13 và pKa = 3,8; 4,9; 5,5 [32]
Rosuvastatin competitively inhibits the enzyme HMG-CoA reductase, which converts HMG-CoA into mevalonic acid in the cholesterol biosynthesis pathway As a result, rosuvastatin reduces hepatic sterol synthesis, leading to decreased levels of cholesterol in liver cells.
Rosuvastatin giúp giảm nồng độ cholesterol trong máu bằng cách tăng tổng hợp các thụ thể LDL-c ở gan, từ đó tăng cường thu nhận LDL-c từ tuần hoàn và giảm nồng độ LDL-c huyết thanh cũng như cholesterol toàn phần Ngoài ra, thuốc còn làm giảm sản xuất apolipoprotein B, dẫn đến giảm sản xuất lipoprotein tỷ trọng rất thấp (VLDL-c) và triglycerid ở gan Nghiên cứu cho thấy rosuvastatin có thể tăng HDL-c từ 8% đến 12% Bên cạnh đó, rosuvastatin còn có một số tác dụng khác độc lập với cơ chế ức chế HMG-CoA.
Rosuvastatin có tác dụng cải thiện chức năng nội mô, chống viêm, chống huyết khối và cung cấp hiệu ứng chống oxy hóa, giúp giảm rối loạn chức năng nội mô liên quan đến xơ vữa động mạch Đồng thời, thuốc này cũng ức chế kết tập tiểu cầu và ngăn chặn sự hình thành cục máu đông trong nội mô bị tổn thương.
Sinh khả dụng đường uống của rosuvastatin đạt 20%, với nồng độ đỉnh (Cmax) là 6,1 ng/ml sau 5 giờ (Tmax) sau khi dùng liều 20mg Mặc dù thức ăn làm giảm tỷ lệ hấp thu rosuvastatin khoảng 20%, nhưng mức độ hấp thu không bị ảnh hưởng Rosuvastatin có thể tích phân bố trung bình là 134 lít và liên kết thuận nghịch với protein huyết tương lên tới 88% Thời gian bán thải ở mức ổn định của rosuvastatin khoảng 19 giờ, và nó được thải trừ chủ yếu qua phân (90%), trong khi chỉ 10% được bài tiết qua thận.
Nghiên cứu về tế bào gan người cho thấy rosuvastatin ít bị chuyển hóa bởi cytochrome P450, với 90% thuốc được thải trừ ở dạng không đổi Isoenzym CYP2C9 là yếu tố chính liên quan đến quá trình chuyển hóa rosuvastatin.
Rosuvastatin, giống như các chất trong nhóm statin, có sinh khả dụng tương đối thấp do đặc tính ít tan trong nước và phân tử lượng lớn Hình thức tinh thể với độ tan thấp của rosuvastatin ảnh hưởng đến tốc độ hấp thu và sinh khả dụng của nó.
Để tăng độ tan và sinh khả dụng của rosuvastatin, nhiều biện pháp đã được áp dụng Một trong số đó là sử dụng hệ phân tán rắn, trong đó rosuvastatin ở dạng vô định hình, giúp tăng độ tan của thuốc Ngoài ra, việc tạo phức với β-cyclodextrin cũng làm tăng khả năng hòa tan và tốc độ hòa tan Công nghệ tinh thể nano là một phương pháp khác, cải thiện khả năng hòa tan bằng cách giảm kích thước hạt và tăng diện tích bề mặt tiểu phân Gần đây, hệ nano tự nhũ hóa (SNEDDS) đã trở thành một phương pháp phổ biến, với khả năng tự nhũ hóa trong đường tiêu hóa khi tiếp xúc với nước và dịch tiêu hóa, từ đó cải thiện đáng kể độ tan và sinh khả dụng đường uống của thuốc.
Hệ nano tự nhũ hóa chứa Rosuvastatin
1.2.1 Khái niệm hệ nano tự nhũ hóa
Hệ nano tự nhũ hóa (SNEDDS) là một dạng tiền nano nhũ tương, bao gồm hỗn hợp đồng nhất của dầu, chất diện hoạt, chất đồng diện hoạt và dược chất Khi được đưa vào cơ thể qua đường uống, SNEDDS tiếp xúc với dịch tiêu hóa và dưới tác động của co bóp dạ dày cùng nhu động ruột, sẽ tự hình thành nhũ tương với kích thước giọt dầu ở cấp độ nanomet.
Khi vào cơ thể, SNEDDS tạo ra các hạt nhũ tương nano, tăng diện tích tiếp xúc của dược chất với đường tiêu hóa và cải thiện vận chuyển thuốc qua lớp nước niêm mạc ruột, từ đó nâng cao sinh khả dụng Nhờ đó, SNEDDS giúp tăng Cmax và cải thiện hiệu quả điều trị của các thuốc chứa dược chất khó tan trong nước.
SNEDDS không chỉ tăng Cmax mà còn giảm đáng kể Tmax, từ đó giúp thuốc hấp thu nhanh hơn và khởi phát tác dụng nhanh chóng sau khi uống.
Các dược chất peptid thường bị thủy phân bởi enzym trong đường tiêu hóa, dẫn đến sinh khả dụng qua đường uống thấp Việc sử dụng SNEDDS giúp bảo vệ thuốc khỏi môi trường khắc nghiệt trong ruột, từ đó cải thiện khả năng vận chuyển các peptid qua đường uống.
SNEDDS có khả năng sản xuất dễ dàng ở quy mô lớn, điều này tạo ra lợi thế quan trọng và sự khác biệt so với các hệ mang thuốc mới như hệ phân tán rắn, liposome và tiểu phân nano.
Hệ nano tự nhũ hóa, mặc dù có nhiều ưu điểm, vẫn tồn tại một số hạn chế, chẳng hạn như khả năng bị phân lớp sau thời gian bảo quản dài Tuy nhiên, nhược điểm này có thể được khắc phục bằng cách hấp thụ hệ SNEDDS vào chất mang để hóa rắn.
Một nhược điểm của hệ SNEDDS là dược chất có thể bị kết tủa khi pha loãng với nước hoặc dịch tiêu hóa Để hạn chế hiện tượng này, có thể sử dụng các polyme ức chế kết tủa như HPMC và PVP.
Khi SNEDDS được bọc trong viên nang, đồng dung môi có thể tương tác với vỏ gelatin, gây ra kết tủa dược chất Việc sử dụng gelatin động vật làm vỏ nang cũng gặp một số nhược điểm, bao gồm nguy cơ bệnh bò điên và các yếu tố liên quan đến sở thích hoặc tôn giáo của người bệnh.
1.2.3 Thành phần hệ nano tự nhũ hóa
Các thuốc được lựa chọn cho bào chế SNEDDS là các dược chất thuộc nhóm II và
Trong bảng phân loại sinh dược học, IV thường có thân dầu, giá trị logP lớn hơn 4, điểm nóng chảy thấp và liều thấp Tính chất và lượng dược chất ảnh hưởng đáng kể đến các khía cạnh của SNEDDS, bao gồm trạng thái pha và kích thước giọt Các đặc tính lý hóa của thuốc như logP, pKa, cấu trúc, khối lượng phân tử và sự hiện diện của nhóm ion hóa đều có tác động quan trọng đến tính chất của SNEDDS.
Pha dầu đóng vai trò quan trọng trong công thức SNEDDS, với yêu cầu dầu phải có khả năng hòa tan dược chất tối đa và tạo ra các giọt nano nhũ tương kích thước nhỏ Các loại dầu có chuỗi hydrocarbon dài, như dầu thực vật hoặc triglycerid chuỗi dài, thường khó tự nhũ hóa Ngược lại, các loại dầu có chuỗi trung bình và ngắn, như triglycerid mạch trung bình, monoglycerid mạch trung bình và các este của acid béo như ethyl oleat, dễ dàng tự nhũ hóa hơn, mang lại hiệu quả cao hơn trong việc tạo ra nhũ tương.
Triglycerid mạch dài cải thiện khả năng vận chuyển thuốc qua bạch mạch ở ruột, giúp tránh quá trình chuyển hóa qua gan lần đầu, so với triglycerid mạch trung bình, diglycerid và monoglycerid Trong khi đó, triglycerid chuỗi trung bình, diglycerid và monoglycerid lại hòa tan các thuốc kỵ nước tốt hơn và tăng cường tính thấm Do đó, việc tìm kiếm một loại dầu tối ưu cho cả khả năng tự nhũ hóa và vận chuyển thuốc là một thách thức.
Hệ nano tự vi nhũ hóa chủ yếu sử dụng chất diện hoạt tan trong nước, với nhóm chất diện hoạt không ion hóa như polysorbat (Tween), sorbitan ester (Span), và polyoxyl (Cremophor) Những chất này có giá trị HLB từ 2 đến 18 và có thể kết hợp với tá dược dầu để tạo ra vi nhũ tương hiệu quả.
Các thuộc tính của chất diện hoạt như HLB, độ nhớt và ái lực với pha dầu ảnh hưởng lớn đến quá trình tự nhũ hóa, vùng tự nhũ hóa và kích thước giọt của nano nhũ tương Nồng độ chất diện hoạt trong SNEDDS có tác động đáng kể đến kích thước giọt nano nhũ tương Nhiều chất diện hoạt không ion hóa như Cremophor EL có khả năng tăng cường tính thấm và hấp thu thuốc do nhạy cảm với P-gp.
Một số chất diện hoạt có thể gây kích ứng niêm mạc đường tiêu hóa và da khi ở nồng độ cao Do đó, trong quá trình xây dựng công thức, cần lựa chọn nồng độ chất diện hoạt ở mức tối thiểu để đảm bảo an toàn và hiệu quả.
1.2.3.4 Các chất đồng diện hoạt hoặc đồng dung môi
Các dung môi như propylen glycol, PEG và glycol ether (chẳng hạn như diethylen glycol monoethyl ether hay transcutol P) thường được sử dụng trong SNEDDS để nâng cao khả năng hòa tan dược chất và rút ngắn thời gian tự nhũ hóa Việc áp dụng các chất đồng diện hoạt hoặc đồng dung môi không chỉ cải thiện khả năng hòa tan mà còn điều chỉnh thời gian tự nhũ hóa và kích thước giọt của SNEDDS.
Chất điều chỉnh pH, điều vị và chất chống oxy hóa có thể được dùng trong SNEDDS
Thuốc nang mềm
Viên nang mềm gelatin, hay còn gọi là viên nang mềm, là một loại liều đơn đặc biệt, bao gồm chất lỏng, bán rắn hoặc rắn được bao bọc trong một lớp vỏ đàn hồi kín, giúp bảo vệ và duy trì tính ổn định của thành phần bên trong.
Viên nang mềm có nhiều hình dạng khác nhau tùy thuộc vào loại khuôn sử dụng và phương pháp bào chế
Bảng 1.1 Các loại viên nang mềm điển hình
Hình dạng Thể tích chứa (ml) Đường dùng
Hình đạn 0,1-20 Đặt âm đạo, hậu môn
Kể từ khi máy làm viên nang mềm ra đời vào những năm 1970, công thức thuốc nang mềm đã trở nên phổ biến hơn, đặc biệt là trong những năm gần đây Hiện nay, viên nang mềm tiên tiến được ứng dụng rộng rãi trong các ngành công nghiệp dược phẩm, hóa chất, thực phẩm và mỹ phẩm.
Viên nang là dạng thuốc phân liều tiện lợi, dễ bảo quản và vận chuyển Viên nang mềm có hình thuôn dài, dễ nuốt, rất phù hợp cho người già và trẻ nhỏ.
Độ dày, độ đàn hồi và độ ẩm của viên nang có thể được điều chỉnh tùy theo công thức Các dạng dược chất như lỏng, bán rắn, gel hoặc bột nhão rất phù hợp để đóng vào nang mềm.
Viên nang, so với viên nén, là dạng thuốc dễ nghiên cứu và phát triển công thức hơn, đồng thời thuận tiện cho việc sản xuất ở nhiều quy mô khác nhau Người dùng có thể áp dụng máy đóng nang thủ công cho quy mô nhỏ hoặc sử dụng máy đóng nang bán tự động và tự động cho quy mô sản xuất lớn.
Thuốc nang có sinh khả dụng cao nhờ vào công thức bào chế đơn giản, ít tá dược và kỹ thuật bào chế ít tác động, giúp dễ tan rã và giải phóng dược chất hiệu quả trong đường tiêu hóa.
Viên nang mềm chứa thuốc lỏng giúp che giấu vị đắng, mang lại trải nghiệm dễ chịu hơn so với thuốc đóng chai Ngoài ra, việc đóng gói dạng viên nang còn hỗ trợ phân phối và sử dụng thuốc một cách thuận tiện hơn.
Quá trình sản xuất viên nang mềm cần có những trang thiết bị sản xuất đặc biệt [3],
[15] Việc tạo nang mềm bằng tay trở nên lỗi thời khi không đáp ứng được quy mô sản
Sản xuất nang mềm có chi phí cao hơn so với viên nén, nhưng nó mang lại nhiều lợi ích như tính đồng nhất, ngoại hình hấp dẫn, độ hòa tan tốt, độ ổn định cao và đặc biệt là lợi nhuận vượt trội.
Các dược chất có khả năng kích ứng niêm mạc đường tiêu hóa không nên được đóng nang, vì khi vỏ nang bị rã, nồng độ thuốc sẽ tập trung cao tại vị trí giải phóng, gây ra nguy cơ kích ứng.
Một số thuốc có khả năng hút nước từ vỏ nang làm cho vỏ mất nước, co lại do đó không thích hợp để chứa trong viên nang [15]
1.3.2 Thành phần thuốc nang mềm
Gelatin là một loại protein được hình thành từ các amino acid sắp xếp theo chuỗi thẳng, kết hợp bởi hai hoặc nhiều amino acid Nó là hỗn hợp dị thể của các sợi polypeptid đơn và đa, với cấu trúc hình prolin xoắn ốc bên trái, chứa từ 300-400 amino acid Cấu trúc gelatin được tạo nên từ 18 loại amino acid khác nhau, liên kết theo một trật tự tuần hoàn nhất định, trong đó có glycin, prolin và 4-hydroxyprolin Hầu hết gelatin thương mại có khối lượng phân tử dao động từ 15.000 đến 250.000 đvC.
Gelatin thương mại là một sản phẩm tinh khiết, khô, cứng giòn, không mùi, không vị, có màu vàng nhạt đến hổ phách và trong suốt, với độ ẩm từ 9-12% Mặc dù gelatin và collagen có thành phần acid amin tương tự, nhưng chúng lại có những tính chất khác nhau Gelatin có khả năng hút nước và hòa tan trong nước nóng 50°C, tạo thành dung dịch nhớt, trong khi collagen chỉ co rút lại Gelatin có thể hấp thụ nước gấp 5-10 lần khối lượng ban đầu, và hòa tan nhanh chóng trong dung dịch acid và kiềm, trong khi collagen chỉ trương nở mà không hòa tan Tính chất của gelatin phụ thuộc vào nguyên liệu, pH, nhiệt độ, nồng độ, thời gian và phương pháp chế biến.
Có 2 loại gelatin phụ thuộc vào sự có hay không có bước xử lý với kiềm, chất sẽ làm biến đổi asparagin và glutamin thành acid asparagic và acid glutamic Gelatin loại A có nguồn gốc từ da cá và thỉnh thoảng từ xương, phân tử collagen đơn giản, được tách chiết từ acid, thường ở pH = 4 Gelatin loại B có nguồn gốc từ da bò hoặc da động vật già bị giết mổ, phân tử collagen phức tạp hơn, được xử lý với kiềm
Độ nhớt là yếu tố quan trọng trong việc đánh giá chất lượng gelatin thành phẩm, với giá trị thương mại thường dao động từ 2-7 cP Nhiều yếu tố ảnh hưởng đến độ nhớt của gelatin, bao gồm nguồn nguyên liệu, nồng độ dung dịch, loại dung môi, pH và nhiệt độ.
Khả năng tạo gel là một trong những tính chất quan trọng nhất của gelatin, ảnh hưởng đến chất lượng và ứng dụng của nó Độ bền gel, được đánh giá qua độ Bloom, là yếu tố quyết định chất lượng gelatin khi đông Độ bền gel phụ thuộc vào nồng độ gelatin và khả năng hình thành gel, với gelatin có khả năng hình thành và ổn định liên kết hydro với phân tử nước, tạo ra cấu trúc gel 3 chiều ổn định Gelatin từ động vật thường có độ Bloom cao hơn và ổn định hơn so với gelatin từ cá.
Các thông số gelatin trong sản xuất nang mềm được quy định nghiêm ngặt để tạo ra gel có độ dày, đàn hồi và bền cơ học phù hợp Để bào chế viên nang mềm hoàn hảo, gelatin cần đáp ứng các yêu cầu cụ thể.
• Độ bền gel (độ Bloom): 150-200 g, tùy thuộc vào loại gelatin
• Độ nhớt ở 60°C với nồng độ 6 2
3% thể tích/ thể tích trong nước: 2,8-4,5 mPa.s, tùy thuộc vào loại gelatin
• Kích thước hạt xác định, cho phép hòa tan nhanh và loại bỏ bọt khí trong khối gel nóng chảy, ngay cả ở nồng độ gelatin cao
• Phân bố khối lượng phân tử rộng, nhiệt độ tạo gel thấp hơn nhiệt độ hóa hơi của chất hóa dẻo
Ngoài ra, Dược điển Việt Nam V quy định còn quy định một số chỉ tiêu của gelatin như sau:
• Cảm quan: màu hơi vàng hoặc vàng nâu, thể rắn, thường trong suốt, vụn, dạng hạt
• pH 3,8 đến 7,6 với dung dịch 1% trong nước
• Độ bền gel (Bloom): 80-120% giá trị ghi trên nhãn
• Mất khối lượng do làm khô: không quá 15,0%, xác định trên 5,000 g bằng cách sấy ở 105 o C trong 16 giờ b Chất hóa dẻo
Đối tượng và phương pháp nghiên cứu
Nguyên liệu, thiết bị nghiên cứu
Các nguyên liệu sử dụng trong nghiên cứu được liệt kê như dưới bảng 2.1
Bảng 2.1 Nguyên liệu được sử dụng trong quá trình nghiên cứu
STT Tên nguyên liệu Nguồn gốc Tiêu chuẩn
1 Rosuvastatin calci Enaltec- Ấn độ TCNSX
2 Rosuvastatin calci Viện kiểm nghiệm thuốc Tp
3 Gelatin Lapi gelatin- Italia Dược điển châu Âu
6 Cremophor RH 40 BASF- Đức EP
10 Methanol Fisher- USA Tinh khiết phân tích
11 Acetonitril Fisher- USA Tinh khiết phân tích
13 Nước cất Việt Nam DĐVN IV
Các thiết bị sử dụng trong nghiên cứu được trình bày như dưới bảng 2.2
Bảng 2.2 Thiết bị nghiên cứu
STT Thiết bị Xuất xứ
1 Cân phân tích Precisa XB 220A Thụy Sỹ
2 Máy lọc nước PureLab Classic UV, ELGA Anh
3 Thiết bị lọc nén Sartorius SM 16249 Đức
4 Máy cất nước hai lần Anh
5 Máy đo kích thước tiểu phân Zetasizer NanoZS90 Anh
6 Máy sắc ký lỏng hiệu năng cao HPLC Shimazdu Nhật
7 Máy khuấy từ IKA Đức
8 Máy đo độ bền gel Texture Analyzer CT3 1500 Mỹ
9 Tủ vi khí hậu Climacell Đức
10 Thước kẹp điện tử Đức
11 Bể điều nhiệt Memmert Đức
13 Máy thử độ rã Eureka Đức
14 Máy thử độ hòa tan Eureka DT 600 Đức
15 Máy đo pH Eutech Instruments pH 510 Nhật
16 Máy đo độ nhớt DVE Viscometer Brookfield Mỹ
17 Các dụng cụ thủy tinh khác
Nội dung nghiên cứu
• Bào chế và đánh giá dịch vỏ nang, vỏ nang mềm gelatin
• Bào chế và đánh giá SNEDDS chứa rosuvastatin
• Bào chế và đánh giá viên nang mềm chứa hệ SNEDDS chứa rosuvastatin
• Sơ bộ đánh giá độ ổn định của viên nang mềm chứa SNEDDS chứa rosuvastatin
Phương pháp nghiên cứu
2.3.1.1 Phương pháp bào chế dịch vỏ nang
Để chuẩn bị hỗn hợp, cho nước vào cốc có mỏ, sau đó thêm glycerin và dung dịch sorbitol, khuấy đều Đun nóng hỗn hợp đến 80°C, rồi thêm gelatin và khuấy nhẹ nhàng để tránh tạo bọt, sau đó đậy kín miệng cốc Đặt cốc vào bể cách thủy, điều chỉnh nhiệt độ ở 70°C trong 1 giờ, sau đó giảm nhiệt xuống 50°C trong 3 giờ để ổn định dịch.
2.3.1.2 Phương pháp bào chế vỏ nang
Để sản xuất vỏ nang, đầu tiên hãy nhúng khuôn vào dịch vỏ nang ổn định nhiệt ở 50 o C trong vài giây Sau đó, xoay khuôn 2 vòng để dịch bám đều và nhấc khuôn ra khỏi cốc Đặt khuôn trên mặt phẳng trong phòng mát ở 25 o C trong 15 phút Khi vỏ nang đã ổn định, nhẹ nhàng kéo vỏ ra khỏi khuôn và đặt lên bề mặt sạch để khô Cuối cùng, vỏ đã khô sẽ được mang đi đóng thuốc.
2.3.1.3 Phương pháp bào chế SNEDDS chứa rosuvastatin
Trong nghiên cứu trước, công thức tối ưu của SNEDDS chứa rosuvastatin có tỷ lệ khối lượng của Rosuvastatin, Capryol 90, Cremophor RH 40 và PEG 400 tương ứng là 9: 23: 44: 33
Tiến hành bào chế SNEDDS chứa rosuvastatin theo các bước dưới đây
Chuẩn bị các thành phần trong công thức như bảng 2.4:
Bảng 2.3 Công thức bào chế SNEDDS rosuvastatin
Tên thành phần Khối lượng (g)
Cho PEG và Capryol vào cốc thủy tinh, điều chỉnh nhiệt độ ở 50 o C và khuấy với máy khuấy chân vịt ở tốc độ 1500 vòng/phút trong 10 phút để có hỗn hợp đồng nhất Thêm dược chất và khuấy trong 20 phút cho đến khi thu được dung dịch trong suốt Cuối cùng, thêm Cremophor vào hỗn hợp và khuấy thêm 10 phút để tạo thành hệ đồng nhất trong suốt.
Sử dụng pipet để hút dịch nhân vào trong vỏ nang đã sấy khô cho đến khi đạt thể tích đầy Sau đó, dùng một miếng vỏ nang khác để che đầu thủng và hàn kín viên nang bằng nhiệt Cuối cùng, kiểm tra độ kín sơ bộ bằng cách bóp nhẹ viên nang; nếu viên khó bóp và không bị nén, thì đạt yêu cầu.
21 thấy có lớp dịch chảy ra bên ngoài thì chứng tỏ viên đã được hàn kín Để viên ở phòng mát
25 o C cho khô sẽ thu được viên nang mềm hoàn chỉnh
2.3.2.1 Định lượng rosuvastatin bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) a Định lượng rosuvastatin trong viên nang mềm chứa SNEDDS rosuvastatin
Các điều kiện sắc ký của phương pháp như sau:
• Cột thộp khụng gỉ Shimazdu (250 mm x 4,6 mm) được nhồi pha tĩnh C18 (5 àm)
• Detector quang phổ tử ngoại đặt ở bước sóng 242 nm
• Pha động là ACN: dung dịch acid trifluoroacetic 1%: nước với tỷ lệ tương ứng 37:1:62 (v/v)
Các mẫu được tiến hành pha như sau:
• Dung môi pha mẫu: ACN: H2O = 25:75 (v/v)
Để chuẩn bị dung dịch chuẩn gốc, cân chính xác 62,5mg rosuvastatin và cho vào bình định mức 50ml Hòa tan hoàn toàn bằng 12,5ml ACN và thêm nước đến vạch Kết quả thu được là dung dịch chuẩn gốc có nồng độ rosuvastatin là 1250 µg/ml.
• Dung dịch chuẩn: Pha loãng dung dịch chuẩn gốc bằng dung môi pha mẫu để được dóy dung dịch chuẩn cú nồng độ rosuvastatin trong khoảng 50 - 250 àg/ml
• Mẫu thử: Pha loãng mẫu thử bằng dung môi pha mẫu ở tỷ lệ nhất định để được dung dịch thử cú nồng độ rosuvastatin trong khoảng 50 – 250 àg/ml
Dựa trên kết quả thu được, hệ thống đã được thẩm định về tính thích hợp và độ đặc hiệu, đồng thời xây dựng đường chuẩn thể hiện mối quan hệ giữa diện tích peak và nồng độ rosuvastatin Nồng độ rosuvastatin trong mẫu thử được xác định bằng cách so sánh với mẫu chuẩn có nồng độ trong khoảng tuyến tính, giúp định lượng chính xác rosuvastatin trong mẫu thử độ hòa tan.
Các điều kiện sắc ký tương tự như ở phần 2.3.2.1.a
Các mẫu được tiến hành pha như sau:
• Dung môi pha mẫu: dung dịch đệm citrat pH 6,6 (chứa 10,5 g/l acid citrat monohydrat và 5,9 g/l natri hydroxid, điều chỉnh pH bằng dung dịch NaOH 0,2 M hoặc HCl 0,2 M tới pH 6,6)
Để chuẩn bị dung dịch chuẩn gốc, cần cân chính xác khoảng 40 mg rosuvastatin và cho vào bình định mức 250 ml Tiếp theo, thêm khoảng 200 ml đệm và lắc đều Sau đó, siêu âm dung dịch trong 15 phút Sau khi lấy bình ra và để nguội, thêm dung môi pha mẫu cho đủ tới vạch Hàm lượng rosuvastatin trong mẫu chuẩn gốc đạt 160 µg/ml.
• Dung dịch chuẩn: Pha loãng dung dịch chuẩn gốc bằng dung môi pha mẫu để được dóy dung dịch chuẩn cú nồng độ rosuvastatin trong khoảng 1,6 - 160 àg/ml
• Mẫu thử: Hỳt mẫu thử từ cốc hũa tan sau đú lọc ở màng 0,45 àm sau đú đem đi định lượng
Dựa trên kết quả thu được, chúng tôi đã thẩm định tính thích hợp của hệ thống và độ đặc hiệu, đồng thời xây dựng đường chuẩn thể hiện mối quan hệ giữa diện tích peak và nồng độ rosuvastatin Nồng độ rosuvastatin trong mẫu thử được xác định thông qua việc so sánh với mẫu chuẩn có nồng độ nằm trong khoảng tuyến tính.
2.3.2.2 Đánh giá tính chất gelatin sử dụng làm vỏ nang a Mất khối lượng do làm khô
Để chuẩn bị mẫu, bạn cần một cốc có nắp đậy và cân khối lượng của cả nắp Tiếp theo, cân chính xác khoảng 5,000g gelatin và cho mẫu vào cốc, sau đó đậy nắp và cân lại khối lượng Đặt cốc vào tủ sấy, mở nắp và điều chỉnh tủ sấy ở nhiệt độ 105 oC trong 16 giờ Sau khi sấy xong, ngay lập tức đậy nắp cốc và để nguội ở nhiệt độ phòng trong bình hút ẩm trước khi tiến hành cân Khối lượng mất đi sau khi làm khô được tính bằng công thức.
Hòa tan 1,00 g chế phẩm trong nước không có carbon dioxyd ở nhiệt độ khoảng 55 o C, sau đó pha loãng thành 100 ml với cùng dung môi và để nguội về nhiệt độ phòng 20-25 o C Tiến hành đo giá trị pH bằng máy đo pH 3 lần với 3 dung dịch khác nhau.
23 c Độ nhớt của dung dịch gelatin 6,67% ở 60 o C
Để pha dung dịch gelatin 6,67%, cần thêm gelatin vào nước RO và để yên trong 3 giờ Sau đó, đun cách thủy ở 60°C trong 30 phút, khuấy đều để tạo thành dịch đồng nhất Cuối cùng, đo độ nhớt bằng máy đo độ nhớt Brookfield với spindle 1 ở tốc độ 20 rpm để xác định độ bền gel (độ Bloom).
Tiến hành tương tự như phần đánh giá độ bền gel trong Dược điển Việt Nam V Các bước tiền hành như sau:
Cho 7,5 g gelatin vào cốc đong, thêm 105 ml nước và để yên trong 3 giờ Đun nóng bằng cách thủy ở 65°C trong 15 phút, khuấy nhẹ bằng đũa thủy tinh cho đến khi dung dịch đồng nhất Để nguội ở nhiệt độ phòng trong 15 phút, sau đó chuyển chai vào bể điều nhiệt ở (10 ± 0,1) °C, đặt chai nằm ngang và đậy bằng nút cao su, để yên trong 16 đến 18 giờ Lấy chai mẫu từ bể điều nhiệt, đặt vào giữa máy đo độ bền gel, điều chỉnh piston tiếp xúc với bề mặt gel gần trung tâm nhất có thể, tiến hành đo 3 lần và lấy kết quả trung bình.
2.3.2.3 Đánh giá tính chất của dịch vỏ nang và vỏ nang a Tính chất
Dùng mắt thường quan sát hình dạng, màu sắc, độ trong, mức độ bọt của vỏ b Độ nhớt của dịch nang
Cân 20,00 g dịch vỏ nang vào cốc đong 100 ml và thêm 80,00 g nước RO Đun cách thủy hỗn hợp ở 60 o C trong 30 phút đến khi đạt được dịch đồng nhất, nhớ khuấy đều trong suốt quá trình Sau đó, sử dụng máy đo độ nhớt Brookfield với spindle 1 và tốc độ quay 20 rpm để đo độ nhớt của dịch.
Để đo độ dày của vỏ nang đã sấy khô, hãy cắt vỏ nang và sử dụng thước kẹp điện tử để đo phần ở giữa thân vỏ Thực hiện việc đo nhiều lần và ghi lại các kết quả độ dày.
24 a Xác định hàm lượng rosuvastatin trong SNEDDS
Cân 1 lượng chính xác SNEDDS sau đó pha loãng bằng dung môi ACN: nước (25:
Để xác định hàm lượng dược chất trong SNEDDS, nồng độ được điều chỉnh từ 75 v/v đến khoảng 50 - 250 àg/ml và tiến hành định lượng theo phương pháp đã mô tả ở phần 2.3.2.1.a Đồng thời, cần đánh giá kích thước giọt và phân bố kích thước giọt của nano nhũ tương để đảm bảo tính ổn định và hiệu quả của sản phẩm.
Kết quả và bàn luận
Xây dựng phương pháp định lượng rosuvastatin bằng HPLC
3.1.1 Xây dựng phương pháp định lượng rosuvastatin trong thuốc nang mềm
Phương pháp định lượng rosuvastatin trong thuốc nang mềm chứa SNEDDS được trình bày chi tiết trong phần 2.3.2.1.a Kết quả thẩm định phương pháp cho thấy đạt yêu cầu về độ thích hợp hệ thống, với độ lệch chuẩn tương đối (RSD) của thời gian lưu nhỏ hơn 1% và diện tích peak dưới 2%.
Phương pháp đạt yêu cầu về độ đặc hiệu khi các mẫu trắng và mẫu placebo không xuất hiện peak tại thời gian lưu 16 phút của rosuvastatin trong dung dịch chuẩn và dung dịch thử Thời gian lưu của dung dịch thử gần tương đương với thời gian lưu của dung dịch rosuvastatin chuẩn Sắc ký đồ của các mẫu trắng, mẫu placebo và mẫu chuẩn được trình bày chi tiết trong phụ lục.
Kết quả khảo sát cho thấy có sự tương quan tuyến tính mạnh mẽ giữa diện tích peak và nồng độ rosuvastatin trong khoảng 50 - 250 àg/ml ở thỏ, với giá trị R² đạt 0,9993 (hình 3.1).
Hình 3.1 Đồ thị biểu diễn mối tương quan giữa diện tích peak và nồng độ rosuvastatin trong phương pháp định lượng rosuvastatin y = 33284x + 79794 R² = 0.9993
3.1.2 Định lượng rosuvastatin trong mẫu thử độ hòa tan Để xác định được nồng độ của rosuvastatin trong phép thử hoà tan, chúng tôi tiến hành xây dựng phương pháp định lượng rosuvastatin trong dịch hoà tan Phương pháp định lượng sử dụng thiết bị HPLC được mô tả chi tiết ở phần 2.3.2.1.b
Phương pháp được thẩm định với các yêu cầu về độ tích hợp hệ thống, cho thấy đạt tiêu chuẩn với độ lệch chuẩn tương đối (RSD) của thời gian lưu dưới 1% và diện tích peak nhỏ hơn 2%.
Phương pháp đạt yêu cầu về độ đặc hiệu khi các mẫu trắng và mẫu placebo không xuất hiện đỉnh tại thời gian lưu 16 phút của peak rosuvastatin trong dung dịch chuẩn và dung dịch thử Thời gian lưu của dung dịch thử gần tương đương với thời gian lưu của dung dịch rosuvastatin chuẩn Độ tuyến tính được xác định trong khoảng nồng độ từ 1,6 - 160 àg/ml với hệ số tương quan R² = 0,9985.
Hình 3.2 Đồ thị biểu diễn mối tương quan giữa diện tích pic và nồng độ rosuvastatin trong phương pháp định lương rosuvastatin thử hòa tan
Đánh giá một số tính chất của gelatin sử dụng làm vỏ nang mềm
Trong nghiên cứu, hai nguồn nguyên liệu gelatin (G1, G2) với nguồn gốc và tính chất khác nhau đã được mô tả chi tiết trong bảng 3.1 Các mẫu gelatin được bảo quản trong túi PE và lưu trữ ở tủ chống ẩm với điều kiện nhiệt độ 25 o C ± 2 o C và độ ẩm 75% ± 5%.
Bảng 3.1 Bảng so sánh 2 nguyên liệu gelatin
Xuất xứ Lapi gelatin- Italia Nhật Bản
Cảm quan Hạt nhỏ, mịn, màu vàng nhạt
Hạt to, xù xì, màu vàng nâu đậm
Nguồn gốc Da bò Da bò Độ bloom ghi trên nhãn 150 150
Lấy ngẫu nhiên 3 mẫu từ hai nguồn nguyên liệu gelatin G1 và G2, tiến hành đánh giá chúng dựa trên các tiêu chí như mất khối lượng do làm khô, pH, độ nhớt, và độ Bloom Mục đích là xác định loại gelatin phù hợp nhất cho việc bào chế thuốc nang mềm chứa SNEDDS rosuvastatin.
Kết quả thu được được tính trung bình trên 3 mẫu và thể hiện ở bảng 3.2:
Bảng 3.2 Kết quả đánh giá các chỉ tiêu của mẫu gelatin G1, G2
Chỉ tiêu mất khối lượng do làm khô (%)
9,20 ± 0,005 9,34 ± 0,003 < 15% pH 5,94 ± 0,010 6,75 ± 0,009 3,8 - 7,6 Độ nhớt dung dịch 6,67% (cP) 3,4 ± 0,106 4,1 ± 0,084 2,8- 4,5 Độ bền gel (g) 156,7 ± 0,010 141,1 ± 0,019 150- 250
Cả hai nguồn nguyên liệu gelatin đều đáp ứng tiêu chuẩn về lượng mất khối lượng do làm khô, pH, độ nhớt và độ bền gel theo Dược điển Việt Nam V Đặc biệt, gelatin G1 có độ Bloom từ 150-250 g, phù hợp hơn cho việc bào chế viên nang mềm bằng phương pháp nhúng khuôn.
Kết luận cho thấy gelatin G1 phù hợp hơn gelatin G2 trong việc bào chế viên nang mềm, dựa trên các chỉ tiêu và kết quả thực nghiệm Vì vậy, gelatin G1 sẽ được sử dụng trong các thí nghiệm tiếp theo.
Bào chế và đánh giá dịch vỏ nang và vỏ nang
Gelatin G1 được sử dụng làm nguyên liệu chính trong việc chế tạo dịch vỏ nang Quy trình bào chế dịch vỏ nang và vỏ nang được thực hiện theo hướng dẫn trong các phần 2.3.1.1 và 2.3.1.2, với các thành phần công thức khác nhau được liệt kê trong bảng 3.6.
Bảng 3.3 Các công thức thành phần vỏ nang
Thành phần Gelatin Glycerin Sorbitol PEG 400 Nước Vai trò Tạo gel Chất hóa dẻo Chất hóa dẻo Chất hóa dẻo Dung môi
Đánh giá các đặc tính của mẫu dịch vỏ nang và vỏ nang được thực hiện theo phương pháp đã mô tả ở mục 2.3.2.3 Kết quả thu được sẽ được trình bày trong các phần tiếp theo.
Tiến hành đánh giá tính chất của các dịch vỏ nang Các kết quả được tổng hợp vào bảng dưới đây
Bảng 3.4 Bảng đánh giá tính chất của các mẫu dịch vỏ nang, vỏ nang
Công thức Dịch vỏ nang Vỏ nang
Dấu "+" thể hiện hình thức dịch vỏ nang đạt tiêu chuẩn với đặc điểm đẹp, trong suốt, ít bọt khí, màu sắc đồng đều, vỏ nang dày và chứa ít bọt khí Ngược lại, dấu "-" chỉ ra hình thức dịch vỏ nang kém chất lượng, không đồng nhất, có các cục bên trong, nhiều bọt khí li ti, vỏ nang xấu, dày không đều và chứa nhiều bọt khí Dấu "X" cho biết không tạo ra được vỏ nang.
• Mẫu F1, F2: dịch vỏ nang trong, màu vàng nhạt, vỏ nang tạo ra rất mỏng, ít bọt khí tuy nhiên do quá mỏng nên không đóng được nang
Mẫu F4 và F5 có đặc điểm là vỏ nang không trong, màu vàng đậm hơn, và chứa nhiều bọt khí lơ lửng Vỏ nang dày và tạo ra nhiều bọt khí, dẫn đến hình thành nang hoàn chỉnh nhưng có chất lượng xấu và bề mặt xù xì.
• Mẫu F7: dịch vỏ nang không đồng nhất, tách thành 2 lớp gel ở dưới và lớp PEG bên trên, không tạo được vỏ nang
• Mẫu F9, F10: dịch vỏ nang đẹp đều màu, vỏ nang tạo ra dày vừa phải, ít bọt tuy nhiên rất dễ bị rách
• Mẫu F3, F6, F8: dịch vỏ nang trong, đẹp, đều màu, vỏ nang tạo ra dày vừa phải, bọt ít
3.3.2 Đánh giá độ nhớt của dịch nang, độ dày của vỏ nang
Độ nhớt của dịch vỏ nang được đánh giá theo mục 2.3.2.3.b, trong khi độ dày của vỏ nang tạo thành được xem xét theo mục 2.3.2.3.c Kết quả thu được được trình bày trong bảng 3.8.
Bảng 3.5 Độ nhớt dịch vỏ và độ dày vỏ nang của công thức vỏ nang
Công thức Độ nhớt của dịch vỏ nang (cP)
GTTB ± SD (n=3) Độ dày của vỏ nang (mm)
(dấu X nghĩa là không đánh giá)
• Mẫu F7: tạo dịch vỏ nang không đồng nhất nên không đánh giá độ nhớt và độ dày
• Mẫu F1, F2: có độ nhớt dịch vỏ nhỏ nhất và độ dày vỏ nang nhỏ nhất trong các công thức, vỏ quá mỏng để có thể đóng nang
• Mẫu F4, F5: có độ nhớt dịch vỏ lớn nhất và độ dày lớn nhất trong các công thức, vỏ quá dày dẫn đến viên hoàn chỉnh to xấu
• Mẫu F3, F6, F8, F9, F10: có độ nhớt và độ dày xấp xỉ nhau, vừa phải, đóng được nang một cách dễ dàng
Kết luận: Dựa trên các tiêu chí đã đề ra và kết quả thu được, các công thức F3, F6, F8 đã được chọn để tiến hành sản xuất vỏ nang và hoàn thiện viên nang mềm.
Bào chế và đánh giá SNEDDS rosuvastatin
SNEDDS rosuvastatin đã được bào chế theo quy trình mô tả ở phần 2.3.1.3 và sau đó được tiến hành đánh giá các đặc tính như hàm lượng rosuvastatin, kích thước giọt, phân bố kích thước giọt nano nhũ tương và hiệu suất nano nhũ hóa theo hướng dẫn ở mục 2.3.2.4 Kết quả thu được được trình bày chi tiết trong bảng 3.9.
Bảng 3.6 Kết quả đánh giá SNEDDS rosuvastatin
Hàm lượng rosuvastatin trong hệ
SNEDDS so với lý thuyết (%) 98,52 ± 0,34
Hiệu suất nano nhũ hóa (%) 92,55 ± 0,43
Hàm lượng rosuvastatin đạt tiêu chuẩn từ 95-105% so với giá trị lý thuyết, kích thước giọt nhỏ hơn 200 nm, và tỷ lệ dược chất nhũ hóa vượt quá 90%.
Dịch nhân chứa SNEDDS rosuvastatin đã đạt tiêu chuẩn và có thể được sử dụng để đóng vào nang mềm Hệ thống SNEDDS chứa rosuvastatin được bảo quản trong lọ thủy tinh kín để phục vụ cho các thử nghiệm tiếp theo.
Bào chế và đánh giá thuốc nang mềm chứa SNEDDS rosuvastatin
Sau khi tạo vỏ nang với ba mẫu F3, F6, F8 và dịch nhân là hệ SNEDDS chứa rosuvastatin, quá trình đóng thuốc vào nang được thực hiện theo hướng dẫn ở phần 2.3.1.4 Các thuốc nang hoàn chỉnh sẽ được đánh giá dựa trên các chỉ tiêu đã mô tả ở phần 2.3.2.5.
Viên nang mềm có hình trứng, màu vàng nhạt, dịch bên trong không màu, có bọt khí bên trên khối dịch nhân
Tiến hành chạy sắc ký cho mẫu thử và mẫu chuẩn theo phương pháp định lượng đã được nêu trong mục 2.3.2.5.b Hình ảnh của peak từ mẫu chuẩn và mẫu thử được trình bày trong hình.
Hình 3.3 Sắc ký đồ của mẫu thử nang mềm chứa rosuvastatin và mẫu chuẩn dung dịch rosuvastatin
Trên sắc ký đồ, thời gian lưu của peak mẫu thử gần giống với thời gian lưu của peak mẫu chuẩn, cho thấy thuốc nang mềm đạt tiêu chí định tính.
Các mẫu viên nang được định lượng theo phương pháp được ghi ở phần 2.3.2.5.c Kết quả thu được được trình bày ở bảng 3.10:
Bảng 3.7 Kết quả định lượng các mẫu nang F3, F6, F8
Diện tích pic của mẫu chuẩn (mAU.s) 4081308
Hàm lượng thuốc trong nang (mg) 63,0 64,0 62,0
Nhận xét: Hàm lượng rosuvastatin định lượng được ở 3 mẫu F3, F6, F8 gần bằng nhau, trong đó hàm lượng rosuvastatin trong mẫu F6 cao nhất trong 3 mẫu
Theo công thức F3, 20 viên nang mềm được chọn ngẫu nhiên để đánh giá đồng đều khối lượng, như đã mô tả ở phần 2.3.2.5.d Kết quả khối lượng dịch nhân và độ lệch chuẩn so với giá trị trung bình được thể hiện trong bảng 3.11.
Bảng 3.8 Khối lượng dịch nhân có trong các viên nang mẫu F3
Phần trăm chênh lệch so với KLTB (%)
Phần trăm chênh lệch so với KLTB (%)
Khối lượng nang trung bình (g) ± RSD = 0,8079 ± 1,92 %
Từ bảng 3.11, có thể thấy rằng không viên nang nào có độ lệch vượt quá 7,5% so với khối lượng trung bình của thuốc trong nang Độ lệch chuẩn tương đối của 20 viên nang mẫu F3 nằm trong giới hạn cho phép, cho thấy viên nang đạt tiêu chí về sự đồng đều khối lượng.
3.5.5 Độ rã và độ hòa tan
Đối với mỗi công thức đã chọn, chúng tôi ngẫu nhiên lấy 6 viên nang mềm để thử nghiệm độ rã theo phương pháp mô tả ở mục 2.3.2.5.e Kết quả thử nghiệm được trình bày trong bảng 3.12.
Bảng 3.9 Thời gian rã trung bình của mẫu nang F3, F6, F8
Công thức Thời gian rã trung bình (phút)
Thời gian viên bắt đầu rã Thời gian viên rã hết
Tiến hành thử độ hòa tan của viên nang mềm theo phương pháp được mô tả ở phần 2.3.2.5.f Kết quả thu được được thể hiện trong bảng 3.13 và đồ thị 3.4:
Bảng 3.10 Kết quả độ hòa tan của mẫu nang F3, F6, F8
Thời gian (phút) Phần trăm giải phóng trung bình ± SD (%) (n=3)
Hình 3.4 Đồ thị hòa tan theo thời gian của mẫu nang F3, F6, F8
Các viên nang F3, F6 và F8 có mức độ và tốc độ hòa tan tương tự nhau, với nang F3 đạt tốc độ hòa tan cao nhất Sau 10 phút, độ hòa tan của các viên nang bắt đầu, và từ 10 đến 30 phút, chúng rã nhanh chóng, tăng phần trăm hàm lượng dược chất giải phóng Sau 45 phút, các viên nang đã rã hết với hơn 75% hòa tan, và sau 60 phút, phần trăm hàm lượng dược chất giải phóng đạt khoảng 90%.
3.5.6 Đánh giá kích thước giọt và phân bố kích thước giọt nano nhũ tương sau khi hòa tan viên nang
Các mẫu SNEDDS và viên nang được tiến hành theo mô tả ở phần 2.3.2.5.g Kết quả thu được được trình bày ở bảng 3.18
Bảng 3.11 Kết quả đánh giá kích thước trung bình và PDI của các mẫu nang F3, F6, F8
Mẫu Kích thước trung bình (nm) PDI
Nhận xét: Các nang F3, F6, F8 có kích thước trung bình và PDI lớn hơn so với mẫu SNEDDS, trong đó mẫu F6 cho kết quả gần với mẫu SNEDDS nhất
Trong thành phần dịch nhân có chứa PEG và Cremophor RH, hai chất này có khả năng tương tác với vỏ nang, dẫn đến sự thay đổi tỷ lệ các thành phần trong SNEDDS và làm thay đổi khả năng tự nhũ hóa của hệ Đặc biệt, nang F6 với hàm lượng sorbitol cao nhất, ít xảy ra sự di chuyển của PEG vào vỏ nang.
Nghiên cứu sơ bộ độ ổn định
Sau khi bảo quản trong 1 tháng và 2 tháng ở điều kiện thực (nhiệt độ 18-30°C, độ ẩm 40-80%) và trong tủ vi khí hậu (nhiệt độ 40°C ± 2°C, độ ẩm 75% ± 5%), cần lấy một lượng viên nang nhất định để đánh giá các tính chất của viên nang theo các phương pháp mô tả trong phần 2.3.2.5.a (đánh giá tính chất), phần 2.3.2.5.c (định lượng) và phần 2.3.2.5.f (độ hòa tan).
Kết quả đánh giá tính chất của viên nang sau khi bảo quản được ghi lại ở bảng 3.15:
Bảng 3.12 Tính chất của viên nang sau khi bảo quản Điều kiện bảo quản Tính chất của viên nang
Ban đầu Sau 1 tháng Sau 2 tháng
Nhiệt độ 18-30 o C và độ ẩm tương đối 40- 80%
Viên nang mềm có hình trứng, màu vàng nhạt, dịch bên trong
Không thay đổi, không thấy có sự rò rỉ
Không thay đổi, không thấy có sự rò rỉ
Nhiệt độ 40 o C ± 2 o C và độ ẩm tương đối 75% ±
5% không màu, có bọt khí bên trên khối dịch nhân
Không thay đổi, không thấy có sự rò rỉ
Không thay đổi, không thấy có sự rò rỉ
Nhận xét: Sau khi bảo quản 2 tháng ở 2 điều kiện, các viên nang không có sự thay đổi về tính chất của viên nang
Kết quả định lượng thuốc nang mềm sau khi bảo quản được ghi lại ở bảng 3.16:
Bảng 3.13 Kết quả định lượng các mẫu nang F3, F6, F8 sau khi bảo quản Điều kiện bảo quản
Loại nang Hàm lượng rosuvastatin (%)
Ban đầu Sau 1 tháng Sau 2 tháng
Nhiệt độ 18-30 o C và độ ẩm tương đối
Nhiệt độ 40 o C ± 2 oC và độ ẩm tương đối 75% ± 5%
Sau khi bảo quản, hàm lượng rosuvastatin trong các nang giảm đáng kể Đặc biệt, khi bảo quản ở điều kiện lão hóa cấp tốc (nhiệt độ 40°C ± 2°C và độ ẩm tương đối 75% ± 5%), mức độ giảm này còn mạnh hơn so với điều kiện bảo quản thực tế (nhiệt độ 18°C).
30 o C và độ ẩm tương đối 40- 80%)
Kết quả thử hòa tan của các mẫu nang sau khi bảo quản 1 tháng ở lão hóa cấp tốc được ghi lại ở bảng 3.17:
Bảng 3.14 Kết quả thử hòa tan các mẫu nang F3, F6, F8 sau 1 tháng ở điều kiện lão hóa cấp tốc
Hình 3.5 Đồ thị hòa tan của các mẫu F3, F6, F8 sau 1 tháng ở điều kiện lão hóa cấp tốc
Các viên nang thể hiện sự khác biệt về mức độ và tốc độ hòa tan Đường màu xanh, đỏ và xám lần lượt biểu diễn độ hòa tan của các mẫu F3, F6 và F8.
42 thời điểm, nang F3 có phần trăm dược chất hòa tan cao hơn 2 mẫu còn lại Mẫu F6 có tốc độ giả phóng hoạt chất chậm nhất trong 3 mẫu
Kết quả thử độ hòa tan của mẫu nang bảo quản sau 1 tháng ở điều kiện thường được trình bày ở bảng 3.18:
Bảng 3.15 Kết quả thử hòa tan các mẫu nang F3, F6, F8 sau 1 tháng ở điều kiện thực
Hình 3.6 Đồ thị hòa tan của các mẫu F3, F6, F8 sau 1 tháng ở điều kiện thực
Các viên nang thể hiện sự khác biệt rõ rệt về mức độ và tốc độ hòa tan Đường màu xanh, đỏ và xám lần lượt biểu diễn độ hòa tan của các mẫu F3, F6 và F8 Trong suốt quá trình thử nghiệm, mẫu F3 luôn có tỷ lệ hòa tan cao hơn hai mẫu còn lại Đặc biệt, mẫu F6 cho thấy tốc độ giải phóng hoạt chất chậm nhất trong ba mẫu.
Kết luận chung cho thấy, qua đánh giá tính chất của nang mềm chứa SNEDDS rosuvastatin và nghiên cứu sơ bộ độ ổn định của ba mẫu nang F3, F6, F8, cả ba mẫu đều cho kết quả tương tự nhau mà không có sự khác biệt rõ rệt Do đó, chúng tôi quyết định chọn công thức F6 làm công thức bào chế vỏ nang mềm chứa hệ nano tự nhũ hóa rosuvastatin, vì kích thước giọt và PDI sau khi hòa tan của mẫu F6 gần nhất với mẫu SNEDDS.
