CẢI TIẾN kỹ THUẬT SOI TRỰC TIẾP tìm nấm MALASSEZIA

1 BỘ Y TẾ BỆNH VIỆN DA LIỄU TRUNG ƯƠNG CẢI TIẾN KỸ THUẬT SOI TRỰC TIẾP TÌM NẤM MALASSEZIA Người thực hiện: Chủ nhiệm: Ths.Bs Trần Cẩm Vân Thư ký: CN Trần Kim Chi Hà Nội, tháng 12 năm 2017 CÁC CHỮ VIẾT TẮT BN KHV M caparae M cuniculi M dermatis M equina M furfur M globosa M japonica M nana M obtusa M pachydermatis M restricta M slooffiae M sympodialis Malassezia spp P orbiculair P ovale NaOH KOH BI TB/VT : : : : : : : : : : : : : : : : : : : : : : Bệnh nhân Kính hiển vi Malassezia caparae Malassezia cunniculi Malassezia dermatis Malassezia equina Malassezia furfur Malassezia globosa Malassezia japonica Malassezia nana Malassezia obtusa Malassezia pachydermatis Malassezia restricta Malassezia slooffiae Malassezia sympodialis Malassezia species plus Pityrosporum orbiculair Pityrosporum ovale Natri hydroxyd Kali hydroxyd ParkerTM Blue Black ink Tế bào/Vi trường MỤC LỤC IỆU THAM KHẢO DANH MỤC BẢNG ĐẶT VẤN ĐỀ Malassezia spp nấm men thuộc vi hệ da người động vật Vi nấm biết đến 150 năm qua, đóng vai trò ngun bội nhiễm thứ phát nhiều bệnh lý khác Malassezia có 14 lồi, lồi có độc tính riêng nên khả gây bệnh đa dạng: Lang ben, viêm da dầu, viêm da địa, viêm nang lông Bệnh biểu triệu chứng lâm sàng như: Ngứa, đỏ da, bong vẩy,…Thương tổn gặp vùng thể thông thường khu trú vùng tiết nhiều bã nhờn như: da đầu, lưng, ngực, mặt Ngoài ra, gặp nếp kẽ, nang lơng, vùng móng…thậm chí vi nấm xâm nhập quan, phận gây nhiễm nấm nội tạng, nhiễm nấm huyết Do đó, thiếu điều kiện xét nghiệm dễ dẫn đến chẩn đoán nhầm bỏ qua Tại Bệnh viện Da liễu Trung Ương, bệnh nhân đến khám làm xét nghiệm tìm nấm đơng đa dạng Mỗi năm có khoảng 30.000.000 lượt đến khám xét nghiệm nấm tỉ lệ dương tính khoảng 60% Theo Trần Cẩm Vân cs (2012), tỉ lệ nhiễm Malassezia lang ben cao 1,48%, viêm da dầu chiếm 0,37%, viêm da địa 0,28% tổng số bệnh nhân đến khám bệnh [1] Bệnh da nhiễm Malassezia không tử vong, gây nhiều phiền toái ảnh hưởng đến chất lượng sống bệnh nhân, đặc biệt không điều trị kịp thời diễn biến dai dẳng, tiến triển nặng nề Thực tế, việc xác định nấm phương pháp trực tiếp bước chẩn đoán sơ quan trọng giúp bác sỹ đối chiếu với đặc điểm lâm sàng để định điều trị chưa có điều kiện làm kháng nấm đồ Trong lấy bệnh phẩm bước quan trọng để xét nghiệm xác nguyên gây bệnh Đối với nấm da, phòng thí nghiệm thường lấy bệnh phẩm vảy da dao cùn Kỹ thuật tương đối hiệu đa phần trường hợp Tuy nhiên, thực tế lấy bệnh phẩm dao cùn gây tâm lý sợ hãi không hợp tác trẻ nhỏ kỹ thuật viên thực hiện, chí, hiệu khơng cao số trường hợp thương tổn vị trí đặc biệt mặt, nếp kẽ, sinh dục Gần đây, phòng xét nghiệm Nấm khoa Vi sinh Nấm Ký sinh trùng Bệnh viện Da liễu Trung Ương, áp dụng kỹ thuật lấy bệnh phẩm băng dính để xét nghiệm loại vi nấm men gây bệnh nấm nông Đây kỹ thuật mới, chưa áp dụng rộng rãi tất trường hợp bị nấm Để phục vụ tốt cho cơng tác chẩn đốn điều trị bệnh nhân, tiến hành: “Cải tiến kỹ thuật soi trực tiếp tìm Malassezia Bệnh viện Da liễu Trung Ương” Mục tiêu: So sánh hiệu kỹ thuật soi trực tiếp tìm Malassezia băng dính dao cùn có sử dụng hóa chất NaOH + ParkerTM blue black ink bệnh nhân lang ben người khỏe mạnh tình nguyện Xây dựng quy trình soi trực tiếp tìm Malassezia cải tiến Yêu cầu: Quy trình ngắn gọn, dễ hiểu Các thao tác kỹ thuật dễ thực kiểm chuẩn theo ASM/CDC Có thể áp dụng đào tạo chuyển giao kỹ thuật cho tuyến y tế sở CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan nấm Malassezia 1.1.1 Vài nét lịch sử Bệnh nấm da nói chung mơ tả sớm lịch sử lồi người Năm 1910, Sabouraud người đưa bảng định danh loài nấm, đặc điểm lâm sàng phương pháp điều trị bệnh nấm Từ năm 40 – 50 ký 19, tác giả ghi nhận vai trò gây bệnh Pityrosporum nhận thấy diện vi nấm số bệnh như: Lang ben, viêm da dầu, viêm nang lơng, viêm da địa Cũng thời gian đó, Sabouraud xác định vi sinh vật gây tương gầu da đầu có tên gọi là: Pityrosporum Còn Louis - Charler lại mô tả vi nấm tên gọi Malassezia Ban đầu số nhà khoa học cho hình thái Malassezia tồn dạng sợi nấm, Pityrosporum hình thái nấm men Năm 1995-1996, thành tựu khoa học công nghệ phát triển nhanh chóng ứng dụng thành cơng việc giải mã trình tự gen vi nấm tìm loài phụ thuộc lipid, đặt tên chung Malassezia spp [16] Hệ thống loài Malassezia tiếp tục hoàn thiện, đến năm 2004, nhà khoa học Nhật Bản cơng bố thêm lồi mới: M dermatis M japonica phân lập từ viêm da địa, M yamatoensis từ da người khỏe mạnh bệnh nhân bị viêm da dầu [2] Một số loài phụ thuộc lipid mô tả M nana [3], M caparae, M equina [4], M cuniculi [5] phân lập từ da động vật, tổng số lồi cơng nhận lên tới 14 lồi 1.1.2 Đặc điểm Malassezia spp Malassezia spp nấm men tồn vi hệ nấm da người động vật Hiện nay, nấm Malassezia nguyên quan trọng nhiều bệnh lý da lang ben, viêm da dầu, viêm da địa, vảy nến… - Thuộc ngành Basidomycota, phân ngành Ustilaginomycotina, lớp Exobasidomycetes, Malasseziales, họ Malasseziacae - Tồn trạng thái đơn bào, có nhân chuẩn - Hình dạng: Là nấm khơng màu, vách ngăn rộng, hình tròn hình bầu dục, đơi gặp dạng sợi vơ định hình - Kích thước dao động từ 3-10 µm, thông thường lớn gấp 10 lần so với vi khuẩn - Sinh sản vơ tính theo phương thức nảy chồi Khi bào tử chồi sinh theo dạng tuyến tính khơng phân cắt hình thành nên cấu trúc gọi giả sợi nấm - Khả thích nghi mơi trường đường cao - Tồn thiên nhiên, môi trường chứa đường hoa quả, rau dưa, mật mía… - Có 14 lồi Malassezia da người động vật, lồi gặp nhiều M globosa, M sympodialis, M furfur [6], [7], [8] 1.1.3 Cơ chế gây bệnh 10 Sự xâm nhập diễn bào tử nấm nhiễm vào thể trạng thái nghỉ không hoạt động, sau chuyển hóa thể vật chủ, nẩy mầm sinh sản xâm nhập vào mô Mỗi hình thái nấm như: Sợi nấm, bào tử nấm tế bào nấm men có tính kháng ngun đặc trưng khác Do đó, xâm nhập vào thể nấm gây đáp ứng miễn dịch với thể vật chủ có hai chế bảo vệ: Miễn dịch dịch thể miễn dịch tế bào [9] Trong trình trao đổi chất lý  thiếu hụt gen mã hóa Enzym tổng hợp axit béo vi nấm không tự tổng hợp axit béo  sử dụng nguồn axit béo từ bên ngồi Xu hướng tìm vùng giàu chất bã nhờn: da đầu, mặt, lưng, ngực Malassezia spp tiết loại Lipase loại Phospholipase Thủy phân axit béo trung tính axit béo tự do phản ứng trung gian tế bào kích hoạt đường gây viêm [10] 1.1.4 Một số yếu tố thuận lợi * Yếu tố bên - Sinh lý: phụ nữ có thai, trẻ sơ sinh - Bệnh lý tồn thân: Nhiễm trùng cấp mạn tính, bệnh chuyển hóa, béo phì…Các bệnh lý bỏng, ung thư, Hodking, nhiễm HIV/AIDS… - Bệnh lý chỗ làm thay đổi tính chất da: Viêm da địa, Rụng tóc, Bạch biến… - Sử dụng hóa chất: Dùng kháng sinh phổ rộng, kéo dài làm thay đổi cân vi hệ… 36 phương pháp băng dính dao cùn Phương pháp lấy bệnh phẩm Bệnh phẩm Băng dính Dao cùn n % n % Khơng có vảy 0 0 Ít vảy 39 65,0 40 66,7 Nhiều vảy 21 35,0 20 33,3 Tổng số 60 100,0 60 100,0 P >0,05 Nhận xét: Tỉ lệ lấy bệnh phẩm nhiều vảy nhóm băng dính 35,0% cao nhóm dao cùn 33,3% Sự khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê, p> 0,05 Bảng 3.5 Kết soi trực tiếp phương pháp băng dính dao cùn Phương pháp lấy bệnh phẩm Hình thái Băng dính Dao cùn n % n % Dương tính 55 91,7 47 78,3 Âm tính 8,3 13 21,7 Tổng số 60 100 60 100 p > 0,05 Nhận xét: Tỉ lệ xét nghiệm dương tính nhóm băng dính 91,7%, cao so với dao cùn 78,3%, khác biệt có ý nghĩa thống kê với p> 0,05 Bảng 3.6 Ảnh hưởng phương pháp băng dính dao cùn nhận định hình thái kính hiển vi Nhận định hình Phương pháp lấy bệnh phẩm 37 thái Sợi nấm +Tế Dễ dàng bào Khó nấm khăn Băng dính n % Dao cùn n % 26 47,3 20 42,5 10,9 14,9 14 25,5 12 25,5 5,5 8,5 7,2 4,3 men Dễ dàng Khó Sợi nấm khăn Tế bào Dễ dàng Khó nấm 3,6 4,3 khăn men Tổng số 55 100,0 47 100,0 Nhận xét: Tỉ lệ nhận định dễ dàng dạng sợi nấm tế bào nấm men nhóm băng dính 47,3% cao nhóm dao cùn 42,5% Bảng 3.7 Kết nhận định số lượng Malassezia phương pháp băng dính dao cùn Phương pháp lấy bệnh phẩm Băng dính Dao cùn Hình thái n % n % 0 0 Âm tính (0-3TB/VT) 0 0 1+ (3-10TB/VT) 16,7 0 2+ (11-19TB/VT) 50,0 75,0 3+ (20-39TB/VT) 33,3 25,0 4+ (>40TB/VT) Tổng số 100 100 Nhận xét: Tỉ lệ soi trực tiếp phát dạng tế bào nấm men 4+ nhóm băng dính 33,3% cao nhóm dao cùn (25,0%) 3.2 Hiệu kỹ thuật lấy bệnh phẩm tìm Malassezia phương pháp băng dính dao cùn người 38 khỏe mạnh tình nguyện 3.2.1 Đặc điểm nhóm nghiên cứu người lành Trong trình nghiên cứu, chúng tơi chọn 80 người khỏe mạnh tình nguyện thỏa mãn tiêu chuẩn chia ngẫu nhiên thành nhóm: nhóm gồm 40 bệnh nhân lấy bệnh phẩm phương pháp băng dính, nhóm gồm 40 bệnh nhân lấy bệnh phẩm phương pháp dao cùn Kết sau: Bảng 3.8 Phân bố nhóm nghiên cứu theo tuổi Nhóm tuổi Phương pháp lấy bệnh phẩm Băng dính Dao cùn n % n % 10-19 0 0 20-29 30 75,0 27 67,5 30-39 17,0 17,5 40-49 5,0 10,0 >50 4,0 5,0 Tổng số 40 100,0 40 100,0 Tuổi trung bình 29,4 ± 9,6 28,3 ± 7,2 X ± SD (19-62) (20-57) (min-max) p >0,05 Nhận xét: Tuổi trung bình nhóm băng dính 29,4± 9,6, nhóm dao cùn 28,3 ± 7,2, khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê p> 0,05 Bảng 3.9 Phân bố nhóm nghiên cứu theo giới 39 Phương pháp lấy bệnh phẩm Giới Băng dính Dao cùn n % n % Nam 13 32,5 12 30,0 Nữ 27 67,5 28 70,0 Tổng số 40 100,0 40 100,0 p >0,05 Nhận xét: Tỉ lệ nam nhóm băng dính 32,5% cao nhóm dao cùn 30,0%, khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê p>0,05 3.2.2 So sánh kết lấy bệnh phẩm phương pháp băng dính dao cùn người khỏe mạnh Bảng 3.10 Kết lượng bệnh phẩm băng dính dao cùn Bệnh phẩm Phương pháp lấy bệnh phẩm Băng dính Dao cùn n % n % Khơng có vảy 10,0 7,5 Ít vảy 32 80,0 31 77,5 Nhiều vảy 10,0 15,0 Tổng số 40 100,0 40 100,0 Nhận xét: Tỉ lệ lấy bệnh phẩm nhiều vảy nhóm băng dính 10,0% thấp nhóm dao cùn 15,0% Bảng 3.11 Kết soi trực tiếp phương pháp băng dính dao cùn Phương pháp lấy bệnh phẩm 40 Kết xét Băng dính nghiệm n n n n 13 32,5 7,5 Âm tính 27 67,5 37 92,5 Tổng số 40 100,0 40 100,0 Dương tính (Tế bào nấm men) P Dao cùn < 0,05 Nhận xét: Tỉ lệ xét nghiệm dương tính nhóm băng dính 32,5% cao nhóm dao cùn 7,5%, khác biệt có ý nghĩa thống kê với p40TB/VT) 0 0 Tổng số 100 100 Nhận xét: Tỉ lệ soi trực tiếp phát dạng tế bào nấm men 1+ nhóm băng dính 50,0% cao nhóm dao cùn (0%) Chương BÀN LUẬN 4.1 Hiệu kỹ thuật lấy bệnh phẩm tìm Malassezia 41 phương pháp băng dính dao cùn bệnh nhân lang ben 4.1.1 Đặc điểm nhóm nghiên cứu Trong thời gian tiến hành nghiên cứu từ tháng 7/2016 đến tháng 11/2016 lựa chọn 120 bệnh nhân thỏa mãn tiêu chuẩn Chúng chia thành nhóm: nhóm gồm 60 bệnh nhân lấy bệnh phẩm băng dính, nhóm gồm 60 bệnh nhân lấy bệnh phẩm dao cùn Kết khơng có khác biệt phân bố theo tuổi, giới nhóm (bảng 3.1, bảng 3.2) 4.1.2 So sánh kết soi trực tiếp kỹ thuật băng dính dao cùn  Thời gian trả kết phương pháp băng dính dao cùn Bảng 3.3 cho thấy thời gian trả kết trung bình nhóm băng dính 45,5 ± 11,9 (phút), nhanh so với dao cùn 67,9 ± 16,6 (phút), khác biệt có ý nghĩa thống kê với p 0,05 Kết phù hợp, phản ánh thực tế bước đầu cho thấy nấm Malassezia, kỹ thuật lấy bệnh phẩm băng dính cho kết tốt kỹ thuật dao cùn 4.2 Hiệu kỹ thuật lấy bệnh phẩm phương pháp băng dính dao cùn người khỏe mạnh tình nguyện 4.2.1 Đặc điểm đối tượng nghiên cứu Trong q trình nghiên cứu, chúng tơi chọn 80 người khỏe mạnh thỏa mãn tiêu chuẩn chúng tơi 44 chia ngẫu nhiên thành nhóm: nhóm gồm 40 bệnh nhân xét nghiệm kỹ thuật băng dính, nhóm gồm 40 bệnh nhân xét nghiệm kỹ thuật dao cùn Kết khơng có khác biệt phân bố theo tuổi, giới nhóm nghiên cứu (bảng 3.8, bảng 3.9) 4.2.2 So sánh kết soi trực tiếp kỹ thuật băng dính dao cùn  Kết lượng bệnh phẩm lấy Khác với đối tượng bệnh nhân lang ben, với người khỏe mạnh tình nguyện, nhằm tăng giá trị dương tính cho xét nghiệm, tiến hành lấy bệnh phẩm từ tất vị trí bao gồm da đầu, lưng, ngực, tay Những vị trí thuộc vùng da dầu vùng thường gặp vi nấm men Malassezia Vi nấm ký sinh lớp sừng, theo trình sinh lý bình thường, lớp sừng có từ 8-14 lớp, ngày trung bình bong lớp Do đó, thực kỹ thuật lấy bệnh phẩm, quan trọng lấy nhiều vảy da tốt Bảng 3.10 cho thấy tỉ lệ lấy nhiều vảy nhóm băng dính 10,0% nhóm dao cùn 15,0% Sở dĩ vì, thực kỹ thuật, thực bước giống bao gồm dùng miếng băng dính dán vào dao cùn cạo vảy tất vị trí độ dày vảy da lấy băng dính dao cùn Yếu tố địa gây ảnh hưởng đến tỉ lệ bong vảy da lượng bệnh phẩm lấy Do đó, kết phù hợp  Kết soi trực tiếp 45 Bảng 3.11 cho thấy tỉ lệ phát dạng tế bào nấm men (dạng điển hình) nhóm băng dính 32,5% cao nhóm dao cùn 7,5%, khác biệt có ý nghĩa thống kê với p< 0,05 Vi nấm men Malassezia gây bệnh hội gặp điều kiện thuận lợi Trên da người khỏe mạnh, chúng vi nấm thuộc vi hệ với dạng tồn chủ yếu tế bào nấm men Theo Cabanes (2014), da người khỏe mạnh, vi nấm M globosa thường xuyên tồn tại, dạng chủ yếu tế bào nấm men [14] Do đó, kết thu phù hợp với nghiên cứu khác Có lẽ phương pháp băng dính lấy lớp sừng bong mà không gây phá hủy lớp khác da dao cùn tỉ lệ phát tế bào nấm men ẩn tế bào sừng nhóm băng dính cao nhóm dao cùn KẾT LUẬN Hiệu kỹ thuật lấy bệnh phẩm người bệnh lang ben 46 - Thời gian trả kết nhóm băng dính 45,5 ± 11,9 (phút), nhanh so với dao cùn 67,9 ± 16,6 (phút) - Tỉ lệ lượng bệnh phẩm nhiều vảy nhóm băng dính 35,0% cao nhóm dao cùn 33,3% - Tỉ lệ xét nghiệm dương tính nhóm băng dính 91,7%, cao so với dao cùn 78,3% - Tỉ lệ nhận định dễ dàng dạng sợi nấm tế bào nấm men nhóm băng dính 47,3% cao nhóm dao cùn 42,5% - Tỉ lệ soi trực tiếp phát dạng tế bào nấm men 4+ nhóm băng dính 33,3% cao nhóm dao cùn (25,0%) Hiệu kỹ thuật lấy bệnh phẩm người khỏe mạnh tình nguyện - Tỉ lệ lượng bệnh phẩm nhiều vảy nhóm băng dính 10,0% thấp nhóm dao cùn 15,0% - Tỉ lệ xét nghiệm dương tính nhóm băng dính 32,5% cao nhóm dao cùn 7,5% - Tỉ lệ soi trực tiếp phát dạng tế bào nấm men 1+ nhóm băng dính 50,0% cao nhóm dao cùn (0%) 47 KIẾN NGHỊ - Kỹ thuật lấy bệnh phẩm băng dinh hiệu quả, an toàn cho bệnh nhân lang ben - Cần tiến hành nghiên cứu phạm vi rộng với thời gian, cỡ mẫu lớn áp dụng kỹ thuật cao để đánh giá xác số lượng tế bào nấm men gây bệnh TÀI LIỆU THAM KHẢO Trần Cẩm Vân, Trần Hậu Khang, Nguyễn Thị Xuân cộng (2017), Khảo sát tình hình nhiễm Malassezia spp số bệnh da thường gặp Bệnh viện Da liễu Trung Ương từ tháng đến tháng 12 năm 2012, Y học Việt Nam, 466(1), 176-179 Sugita T et al (2004), A new yeast, Malassezia yamatoensis, isolated from a patient with seborrheic dermatitis, and its distribution in patients and healthy subjects, Microbiol Immunol, 48579-583 Hirai A, et al (2004), Malassezia nana sp nov., a novel lipid-dependent yeast species isolated from animals, Int J Syst Evol Microbiol, 54623-627 Cabanes FJ, Theelen B, Castella G et al (2007), Two new lipiddependent Malassezia species from domestic animals, FEMS Yeast Res, 71064-4076 Cabanes FJ, Vega S, Castella G (2011), Malassezia cuniculi sp nov., anovel yeast species isolated from rabbit skin, Med Mycol., 4940-48 Wu G, Zhao H, Li C et al (2015), Genus-Wide Comparative Genomics of Malassezia Delineates Its Phylogeny, Physiology, and Niche Adaptation on Human Skin, PLOS genetic, 11(11), 1-26 F Javier Cabanes (2014), Malassezia yeasts: How many species infect humans and animals, PLOS pathogens, 10(2), Aristea Velegraki, Claudia Cafarchia, Georgios Gaitanis et al (2015), Malassezia infections in humans and Animals: Pathophysiology, Detection, and Treatment, PLOS pathogens, 11(1), 1-6 Velegraki A., Cafarchia C., Gaitanis G et al (2015), Malassezia infections in humans and animals: pathophysiology, detection, and treatment, PLoS Pathog, 11(1), e1004523 10 Gaitanis G., Magiatis P., Hantschke M et al (2012), The Malassezia Genus in Skin and Systemic Diseases, Clin Microbiol Rev, 25(1), 106-141 11 Crespo Erchiga V., Ojeda Martos A., Vera Casano A et al (2000), Malassezia globosa as the causative agent of pityriasis versicolor, Br J Dermatol, 143(4), 799-803 12 Gupta A K., Bluhm R., Summerbell R (2002), Pityriasis versicolor, J Eur Acad Dermatol Venereol, 16(1), 19-33 13 Borda L J., Wikramanayake T C (2015), Seborrheic Dermatitis and Dandruff: A Comprehensive Review, J Clin Investig Dermatol, 3(2) 14 Cabañes F Javier (2014), Malassezia Yeasts: How Many Species Infect Humans and Animals?, PLoS Pathogens, 10(2), e1003892 15 Clark G W., Pope S M., Jaboori K A (2015), Diagnosis and treatment of seborrheic dermatitis, Am Fam Physician, 91(3), 185-190 16 Scalabrin D.M., Bavbek S., Perzanowski M.S et al (1999), Use of specific IgE in assessing the relevance of fungal and dust mite allergens to atopic dermatitis: A comparison with asthmatic and nonasthmatic control subjects, J Allergy Clin Immunol, 1041273-1279 17 Scheynius A., Johansson C., Buentke E et al (2002), Atopic eczema/dermatitis syndrome and Malassezia, int Arch Allergy Immunol, `127(161-169) 18 Johansson C., Eshaghi H., Linder M.T et al (2002), Positive atopy patch test reaction to Malassezia furfur in atopic dermatitis correlates with a T helper 2-like peripheral blood mononuclear cells response, J Investig Dermatol, 1181044-1051 19 Zargari A., Eshaghi H., Back O et al (2001), Serum IgE reactivity to Malassezia furfur extract and recombinant M furfur allergens in patients with atopic dermatitis, Acta Derm Venereol, 81418-422 20 Song H S., Kim S K., Kim Y C (2014), Comparison between Malassezia Folliculitis and Non-Malassezia Folliculitis, Ann Dermatol, 26(5), 598-602 21 Phạm Văn Hiển (2009) Bệnh Lang ben Bệnh Da liễu, Nhà xuất y học, Hà Nội, 92-95 22 Silva V., Fischman O., Zaror L (1996), Importancia Del examen microscopio directo semi- quanitativo em el diagnostico de Malassezia furfur, Rev Iberoamerica de Micologia, 1390-92 ... bị nấm Để phục vụ tốt cho cơng tác chẩn đốn điều trị bệnh nhân, tiến hành: Cải tiến kỹ thuật soi trực tiếp tìm Malassezia Bệnh viện Da liễu Trung Ương” Mục tiêu: So sánh hiệu kỹ thuật soi trực. .. trực tiếp dương tính ni cấy dương tính 1.2 ) Kỹ thuật xét nghiệm trực tiếp tìm Malassezia cải tiến 1.2.1 Hóa chất sử dụng để nhuộm soi kính hiển vi Phát Malassezia phương pháp soi trực tiếp xét... thái vi nấm Malassezia Kỹ thuật coi tiêu chuẩn, hữu ích chẩn đốn sơ tìm Malassezia phòng xét nghiệm Trong q trình soi trực tiếp, nhuộm hóa chất KOH đơn 16 khó quan sát hình thái vi nấm Malassezia