Nghiên cứu thành phần tinh dầu một số mẫu nghệ vàng ở việt nam

BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI PHẠM THỊ KIỀU DUNG NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN TINH DẦU MỘT SỐ MẪU NGHỆ VÀNG Ở VIỆT NAM KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ HÀ NỘI - 2018 BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI PHẠM THỊ KIỀU DUNG Mã sinh viên : 1301058 NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN TINH DẦU MỘT SỐ MẪU NGHỆ VÀNG Ở VIỆT NAM KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ Người hướng dẫn: TS Nguyễn Quỳnh Chi ThS Phạm Tuấn Anh Nơi thực hiện: Bộ môn Dược liệu HÀ NỘI - 2018 LỜI CẢM ƠN Trong q trình hồn thành khóa luận, tơi nhận nhiều giúp đỡ quý báu thầy giáo, bạn bè gia đình Trước hết, với lòng kính trọng biết ơn sâu sắc, xin gửi lời cảm ơn đến TS Nguyễn Quỳnh Chi ThS Phạm Tuấn Anh, hai người thầy dìu dắt tơi từ ngày bắt đầu nghiên cứu khoa học môn Dược liệu, định hướng, bảo, giúp đỡ tạo điều kiện cho tơi suốt q trình thực hồn thành khóa luận Tơi xin bày tỏ lòng biết ơn đến ThS Nghiêm Đức Trọng, người thầy giúp đỡ hướng dẫn bước đầu bắt đầu thực đề tài Tôi xin trân trọng cám ơn tồn thể thầy giáo trường Đại học Dược Hà Nội, đặc biệt thầy cô môn Dược liệu, thầy cô môn Thực vật, người thầy truyền cho kiến thức kĩ suốt năm qua Tôi vô biết ơn DS.NCS Nguyễn Thanh Tùng, DS Phạm Thị Linh Giang, DS Lê Thiên Kim người thầy, người chị, người anh động viên tinh thần cho tơi nhiều góp ý quan trọng để tơi hồn thành khóa luận sau bao khó khăn Xin gửi lời cám ơn đến chị Đỗ Thị Ngân, em Nguyễn Thị Linh, Trịnh Thị Hải Yến - người đồng hành với suốt trình nghiên cứu thực đề tài Cám ơn hỗ trợ nhiệt tình em Nguyễn Thị Linh, Trịnh Thị Hải Yến, Khổng Thị Minh Thư, Nguyễn Thị Thúy đóng góp nhiều cơng sức quý báu dành cho khóa luận Cảm ơn bạn, em, người học tập mái trường Đại học Dược Hà Nội giúp đỡ động viên suốt năm qua Cuối xin gửi lời cám ơn đến gia đình thân u, bạn bè thương mến ln tin tưởng ủng hộ tôi, điểm tựa để ngày cố gắng học tập sống Hà Nội, ngày 18 tháng 05 năm 2018 Sinh viên Phạm Thị Kiều Dung MỤC LỤC DANH MỤC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT iii DANH MỤC CÁC BẢNG iv DANH MỤC CÁC HÌNH v ĐẶT VẤN ĐỀ CHƢƠNG TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan chi Curcuma L 1.1.1 Vị trí phân loại chi Curcuma L 1.1.2 Đặc điểm thực vật chi Curcuma L 1.2 Tổng quan Nghệ vàng Curcuma longa L 1.2.2 Sinh trưởng phân bố 1.2.3 Thành phần hóa học thân rễ Nghệ vàng Curcuma longa L 1.2.4 Công dụng 11 CHƢƠNG 2: NGUYÊN LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 14 2.1 Nguyên liệu phƣơng tiện nghiên cứu 14 2.1.1 Nguyên liệu 14 2.1.2 Phương tiện nghiên cứu 15 2.2 Nội dung nghiên cứu 16 2.3 Phƣơng pháp nghiên cứu 17 2.3.1 Thu mẫu nghiên cứu 17 2.3.2 Xác định hàm lượng tinh dầu 17 2.3.3 Định tính mẫu tinh dầu phương pháp sắc ký lớp mỏng 17 i 2.3.4 Phân tích thành phần tinh dầu sắc ký khí kết hợp khối phổ (GC/MS) 19 2.2.5 Phân nhóm mẫu Nghệ vàng nghiên cứu kỹ thuật phân chùm 20 CHƢƠNG 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 22 3.1 Kết thu mẫu 22 3.2 Hàm lƣợng tinh dầu mẫu Nghệ vàng 26 3.3 Định tính tinh dầu sắc ký lớp mỏng 28 3.4 Kết phân tích mẫu tinh dầu Nghệ vàng sắc ký khí khối phổ 29 3.5 Phân nhóm mẫu tinh dầu Nghệ theo thành phần tinh dầu 33 BÀN LUẬN 37 ĐỀ XUẤT 42 ii DANH MỤC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT GC/MS Gas chromatography-mass spectrometry HPTLC High performance thin layer chromatography SKLM Sắc ký lớp mỏng TT Thứ tự DEET N,N-diethyl-meta-toluamide RI Retention index iii DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1: Các loài thuộc chi Curcuma L Việt Nam Bảng 3.2: Kết phân tích thành phần tinh dầu mẫu: HN.02; NA.01; HN.05; HY.01; HB.01; HY.02; NA.02; HN.07; HN.08; HN.09; HB.03; HB.02; HN.06 29 Bảng 3.3: Kết phân tích thành phần tinh dầu mẫu: HN.03; HN.04; HN.01; CB.01; BG.01; NĐ.02; TH.01; TB.01; HT01; NĐ.01; TN.01; HN.10 30 Bảng 3.4: Các cấu tử thành phần thƣờng gặp mẫu tinh dầu 32 Bảng 3.5: Bảng hàm lƣợng thành phần thuộc cụm pic M1, S1, S2 tỉ lệ S2/S1 33 iv DANH MỤC CÁC HÌNH nh Công thức cấu tạo curcuminoid thƣờng gặp .10 nh : Hình ảnh mẫu thân rễ thu đƣợc 24 nh 3.2: Sắc ký đồ mẫu tinh dầu Nghệ sau phun thuốc thử vanillin/H2SO4 28 nh : Sắc ký đồ mẫu HT.01 31 nh : Biểu đồ phân nhóm tinh dầu phƣơng pháp phân tích chùm 35 v ĐẶT VẤN ĐỀ Nghệ vàng theo cách gọi dân gian trồng quen thuộc nhiều địa phƣơng nƣớc, đƣợc sử dụng từ lâu đời để làm gia vị làm thuốc Trong thập kỷ gần đây, nhiều nghiên cứu đƣợc cơng bố hoạt tính sinh học Nghệ vàng nhƣ thành phần chiết xuất từ củ nghệ, thành phần curcuminoid tinh dầu nghệ đƣợc chứng minh thành phần tạo nên dƣợc tính cao củ Nghệ vàng Các nghiên cứu chứng minh tinh dầu Nghệ vàng có nhiều hoạt tính sinh học bật nhƣ tác dụng kháng khuẩn, đặc biệt với loại vi khuẩn Streptococus mutans vi khuẩn tạo mảng bám gây sâu [25], tác dụng diệt số chủng vi nấm gây bệnh da [1] nhƣ số chủng nấm gây bệnh cho trồng [22], [40], tác dụng chống muỗi, đặc biệt chủng muỗi vector truyền bệnh sốt xuất huyết, sốt rét với thành phần có hoạt tính ar-turmeron [14] Tinh dầu nghệ đƣợc nghiên cứu sử dụng để bảo quản hoa tƣơi sau thu hoạch cho kết khả quan [6] Đồng thời tinh dầu Nghệ đƣợc FDA xếp vào danh mục hợp chất an toàn sử dụng: GRAS (Generally Recognized As Safe) [42] Nhƣ bên cạnh thành phần curcuminoid , tinh dầu thành phần cần đƣợc nghiên cứu, khai thác nhằm nâng cao giá trị sử dụng Nghệ vàng Trên thực tế Nghệ vàng tên gọi chung địa phƣơng cho số giống Nghệ mà phần thân rễ có màu vàng có lồi Curcuma longa L lồi thức đƣợc đƣa vào Dƣợc điển Việt Nam nhƣ Dƣợc điển số nƣớc giới Là nƣớc đƣợc đánh giá cao đa dạng sinh học, Việt Nam có nguồn Nghệ vàng phong phú, phân bố miền núi, đồng bằng, trung du Qua số khảo sát thực tế thị trƣờng, nhóm nghiên cứu nhận thấy có nhiều giống nghệ mà thân rễ có màu vàng, đƣợc sử dụng với cơng dụng, nhƣng chúng lại có khác đặc điểm hình thái thân rễ Tại Việt Nam có nghiên cứu thành phần tinh dầu Nghệ vàng nhiên chƣa có nghiên cứu đƣợc thực số lƣợng mẫu lớn nhiều tỉnh thành khác Để góp phần vào việc nghiên cứu cách sâu rộng lồi nghệ nƣớc nói chung, cụ thể Nghệ vàng Curcuma longa nói riêng, để từ lựa chọn nguồn gen Nghệ vàng cho tinh dầu có hoạt tính sinh học cao để ứng dụng Nghệ vàng cách khoa học, có hiệu quả, đem lại lợi ích kinh tế hơn, đề tài: “Nghiên cứu thành phần tinh dầu số mẫu Nghệ vàng Việt Nam ” đƣợc thực với mục tiêu sau: Phân tích thành phần tinh dầu số mẫu Nghệ vàng Việt Nam Bƣớc đầu phân nhóm mẫu Nghệ vàng theo thành phần tinh dầu 12 Hình ảnh SKĐ GC/MS mẫu HB.02 13 Hình ảnh SKĐ GC/MS mẫu HN.06 14 Hình ảnh SKĐ GC/MS mẫu HN.03 15 Hình ảnh SKĐ GC/MS mẫu HN.04 16 Hình ảnh SKĐ GC/MS mẫu HN.01 17 Hình ảnh SKĐ GC/MS mẫu CB.01 18 Hình ảnh SKĐ GC/MS mẫu BG.01 19 Hình ảnh SKĐ GC/MS mẫu NĐ.02 20 Hình ảnh SKĐ GC/MS mẫu TH.01 21 Hình ảnh SKĐ GC/MS mẫu TB.01 22 Hình ảnh SKĐ GC/MS mẫu HT.01 23 Hình ảnh SKĐ GC/MS mẫu NĐ.01 24 Hình ảnh SKĐ GC/MS mẫu TN.01 25 Hình ảnh SKĐ GC/MS mẫu HN.10 ... tài: Nghiên cứu thành phần tinh dầu số mẫu Nghệ vàng Việt Nam ” đƣợc thực với mục tiêu sau: Phân tích thành phần tinh dầu số mẫu Nghệ vàng Việt Nam Bƣớc đầu phân nhóm mẫu Nghệ vàng theo thành phần. .. gặp Tinh dầu Bên cạnh thành phần curcuminoid, tinh dầu Nghệ vàng thành phần đƣợc quan tâm nghiên cứu Tinh dầu Nghệ vàng đƣợc thu từ lá, hoa thân rễ Tuy nhiên có hàm lƣợng lớn chứa nhiều thành phần. .. Tại Việt Nam có nghiên cứu thành phần tinh dầu Nghệ vàng nhiên chƣa có nghiên cứu đƣợc thực số lƣợng mẫu lớn nhiều tỉnh thành khác Để góp phần vào việc nghiên cứu cách sâu rộng lồi nghệ nƣớc nói