Nghiên cứu thành phần hóa học và một số tác dụng sinh học của loài xạ can (belamcanda chinensis (l ) DC ) thu hái tại việt nam

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ VIỆN DƯỢC LIỆU BÙI THỊ BÌNH NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HĨA HỌC VÀ MỘT SỐ TÁC DỤNG SINH HỌC CỦA LOÀI XẠ CAN (BELAMCANDA CHINENSIS (L.) DC.) THU HÁI TẠI VIỆT NAM LUẬN ÁN TIẾN SĨ DƯỢC HỌC HÀ NỘI, 2019 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ VIỆN DƯỢC LIỆU BÙI THỊ BÌNH NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HĨA HỌC VÀ MỘT SỐ TÁC DỤNG SINH HỌC CỦA LOÀI XẠ CAN (BELAMCANDA CHINENSIS (L.) DC.) THU HÁI TẠI VIỆT NAM LUẬN ÁN TIẾN SĨ DƯỢC HỌC CHUYÊN NGÀNH: Dược liệu - Dược học cổ truyền MÃ SỐ: 9720206 Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS Nguyễn Thị Bích Thu PGS.TS Đỗ Thị Hà HÀ NỘI, 2019 HÀ NỘI, 2016 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng tơi hướng dẫn khoa học PGS.TS Nguyễn Thị Bích Thu PGS.TS Đỗ Thị Hà Các số liệu, kết trình bày luận án trung thực chưa cơng bố cơng trình khác Tác giả luận án NCS Bùi Thị Bình LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành luận án này, nhận nhiều giúp đỡ quý báu thầy cô giáo, nhà khoa học bạn bè, đồng nghiệp gia đình Trước hết, tơi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới PGS.TS Nguyễn Thị Bích Thu PGS.TS Đỗ Thị Hà, người thầy tận tình hỗ trợ, bảo, giúp đỡ, tạo điều kiện thuận lợi cho tơi q trình học tập, nghiên cứu hồn thành luận án Tôi xin trân trọng cám ơn Ban lãnh đạo, Khoa, Phòng đồng nghiệp Viện Dược liệu, Đại học Quốc gia Chung Nam (Hàn Quốc), Trường Đại học Y Dược Thái Bình, Viện Hóa học, Viện Sinh thái Tài nguyên Sinh vật - Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam nhiệt tình giúp đỡ, tạo điều kiện cộng tác giúp tơi hồn thành cơng trình Tơi xin chân thành cảm ơn NGND.TTƯT.GS.TS Lương Xuân Hiến - nguyên Hiệu trưởng Trường Đại học Y Dược Thái Bình, TTƯT.PGS.TS Hoàng Năng Trọng - Hiệu trưởng Trường Đại học Y Dược Thái Bình động viên tinh thần tạo điều kiện thuận lợi thời gian kinh phí để tơi hồn thành luận án Cuối cùng, tơi xin gửi lời cám ơn sâu sắc tới gia đình, bạn bè đồng nghiệp động viên, giúp đỡ tạo điều kiện tốt cho suốt q trình nghiên cứu, học tập hồn thành luận án Tôi xin chân thành cảm ơn! NCS Bùi Thị Bình MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN LỜI CÁM ƠN DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU, TỪ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, SƠ ĐỒ DANH MỤC CÁC BẢNG ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 TỔNG QUAN VỀ CÂY XẠ CAN 1.1.1 Thực vật học 1.1.1.1 Vị trí phân loại Xạ can 1.1.1.2 Đặc điểm thực vật 1.1.1.3 Phân bố 1.1.2 Thành phần hóa học 1.1.2.1 Các hợp chất nhóm flavonoid 1.1.2.2 Các hợp chất nhóm phenolic 10 1.1.2.3 Các hợp chất nhóm iridal 12 1.1.2.4 Các hợp chất nhóm xanthon 13 1.1.2.5 Các hợp chất nhóm sterol 14 1.1.2.6 Các hợp chất nhóm triterpen 16 1.1.2.7 Các hợp chất nucleotid 16 1.1.3 Tác dụng sinh học 17 1.1.3.1 Tác dụng chống viêm 17 1.1.3.2 Tác dụng chống ung thư 18 1.1.3.3 Tác dụng kháng khuẩn, kháng nấm 20 1.1.3.4 Tác dụng bảo vệ gan chống oxy hóa 20 1.1.3.5 Tác dụng bệnh tiểu đường 21 1.1.3.6 Tác dụng kiểu estrogen 22 1.1.4 Công dụng 26 1.1.4.1 Tính vị cơng 26 1.1.4.2 Công dụng 26 1.1.4.3 Một số thuốc có Xạ can 26 1.2 TỔNG QUAN VỀ VIÊM VÀ TĂNG SINH TẾ BÀO 27 1.2.1 Tổng quan viêm 27 1.2.1.1 Định nghĩa viêm 27 1.2.1.2 Nguyên nhân gây viêm 27 1.2.1.3 Phân loại viêm 28 1.2.1.4 Một số mô hình nghiên cứu tác dụng chống viêm 29 1.2.2 Tổng quan tăng sinh tế bào 31 CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 34 2.1 ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU 34 2.1.1 Nguyên liệu 34 2.1.2 Động vật thí nghiệm 36 2.1.3 Thuốc thử, hóa chất, dung mơi 36 2.1.4 Máy móc, thiết bị 39 2.2 ĐỊA ĐIỂM NGHIÊN CỨU 41 2.2.1 Giám định tên khoa học 41 2.2.2 Nghiên cứu hóa học 41 2.2.3 Nghiên cứu tác dụng sinh học 41 2.3 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 42 2.3.1 Giám định tên khoa học 42 2.3.2 Nghiên cứu thành phần hóa học 42 2.3.3 Nghiên cứu số tác dụng sinh học 48 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 58 3.1 THÀNH PHẦN HÓA HỌC 58 3.1.1 Định tính nhóm chất hữu 58 3.1.2 Chiết xuất phân lập hợp chất 59 3.1.3 Xác định cấu trúc hợp chất 64 3.1.4 Định lượng hợp chất thân rễ Xạ can 107 3.2 TÁC DỤNG SINH HỌC 114 3.2.1 Tác dụng chống viêm in vitro thân rễ Xạ can 114 3.2.2 Tác dụng chống viêm in vivo thân rễ Xạ can 128 3.2.2.1 Kết nghiên cứu tác dụng chống viêm cấp 128 3.2.2.2 Kết nghiên cứu tác dụng chống viêm mạn 129 3.2.3 Tác dụng ức chế tăng sinh tế bào trơn thành mạch máu phần mặt đất Xạ can 130 CHƯƠNG 4: BÀN LUẬN 132 4.1 VỀ ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU 132 4.2 VỀ HÓA HỌC 133 4.3 VỀ TÁC DỤNG SINH HỌC 142 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 153 KẾT LUẬN 153 KIẾN NGHỊ……………………………………………………………………………154 CÁC CÔNG TRÌNH CƠNG BỐ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN TÀI LIỆU THAM KHẢO DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, TỪ VIẾT TẮT Tên viết tắt Tên viết đầy đủ Ac Acetyl ADN Acid deoxyribonucleic AP-1 Protein hoạt hóa-1 (actived protein 1) 13 C-NMR Phổ cộng hưởng từ hạt nhân carbon 13 (Carbon-13 Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy) COSY Correlation Spectroscopy COX-2 Cyclooxygenase-2 CTCT Cơng thức cấu tạo CTHH Cấu trúc hóa học EtOAc Ethyl acetat DCM Dichloromethan DEPT Distortionless Enhancement by Polarization Transfer Dex Dexamethanson DMEM Môi trường dùng cho nhiều dòng tế bào khác (Dulbecco's Modified Eagle Medium) DMSO Dimethyl sulfoxid DPPH 1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl EC50 Nồng độ có hiệu 50% (Effective Concentration 50%) EGF Yếu tố tăng trưởng biểu bì (Epidermal Growth Factor) EI-MS Phổ khối ion hóa điện tử (Electronic ionization-Mass Spectrometry) ESI-MS Phổ khối ion hóa phun mù điện tử (Electron Spray Ionization-Mass Spectrometry) EtOAc Ethyl acetat EtOH Ethanol Glc Glucopyranosyl GSH-px HepG2 HL-60 HMBC H-NMR HSCCC HSQC Glutathion peroxidase Dòng tế bào ung thư gan người (Human hepatocellular carcinoma cell line) Dòng tế bào ung thư bạch cầu tiền tủy bào người (Human promyelocytic leukemia cell line) Phổ tương quan dị nhân đa liên kết (Heteronuclear Multiple Bond Correlation) Phổ cộng hưởng từ hạt nhân proton (Proton Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy) Sắc ký phân bố ngược dòng tốc độ cao (High-Speed Counter-Current Chromatography) Phổ tương tác dị nhân lượng tử đơn (Heteronuclear Single Quantum Coherence) HPLC Sắc ký lỏng hiệu cao (High Performance Liquid Chromatography) HPLC- Sắc ký lỏng hiệu cao đầu dò DAD ghép với phổ khối ion hóa phun DAD-ESI- mù điện tử (High Performance Liquid Chromatography-Detector Diode MS Array-Electron Spray Ionization-Mass Spectrometry) HPLCDAD-MS HR-ESI-MS Sắc ký lỏng hiệu cao đầu dò DAD ghép với khối phổ (High Performance Liquid Chromatography-Detector Diode Array-Mass Spectrometry) Phổ khối ion hóa phun mù điện tử phân giải cao (High Resolution-Electron Spray Ionization-Mass Spectrometry) IC50 Nồng độ ức chế 50% (Inhibitory Concentration 50%) IFN-γ Interferon gamma IL Interleukin iNOS Inducible Nitric Oxide Synthase IR Hồng ngoại (Infrared) KLPT LC-MS LC-NMR LNCaP Khối lượng phân tử Sắc ký lỏng kết nối phổ khối (Liquid Chromatography–Mass Spectrometry) Sắc ký lỏng kết hợp với cộng hưởng từ hạt nhân (Liquid Chromatography–Nuclear Magnetic Resonance) Ung thư biểu mô hạch bạch huyết tuyến tiền liệt (Lymph Node Carcinoma of the Prostate) LOD Giới hạn phát (Limit of Detection) LOQ Giới hạn định lượng (Limit of Quantitation) LPS Lipopolysaccharid m Khối lượng chất thu MCF-7 Dòng tế bào ung thư vú (Human breast adenocarcinoma cell line) Melox Meloxicam MIC Nồng độ ức chế tối thiểu (Minimal Inhibitory Concentration) MTT 3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-Diphenyltetrazolium Bromide m/z Mass to charge ratio (tỉ lệ khối lượng/điện tích) n-BuOH n-Butanol NF-κB Yếu tố nhân kappa B (Nuclear Factor-kappa B) NMR Cộng hưởng từ hạt nhân (Nuclear Magnetic Resonance) NO Nitric oxid NOESY Nuclear Overhauser Effect Spectroscopy NOS Nitric Oxid Synthase NXB Nhà xuất PC-3 Dòng tế bào ung thư tuyến tiền liệt PDGF PGE2 Yếu tố tăng trưởng có nguồn gốc từ tiều cầu (Platelet Derived Growth Factor) Prostaglandin E2 ... tồn Xạ can làm thu c, đề tài tiến hành nghiên cứu thành phần hóa học số tác dụng sinh học Xạ can với tiêu đề: "Nghiên cứu thành phần hóa học số tác dụng sinh học loài Xạ can (Belamcanda chinensis. ..BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ VIỆN DƯỢC LIỆU BÙI THỊ BÌNH NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HĨA HỌC VÀ MỘT SỐ TÁC DỤNG SINH HỌC CỦA LOÀI XẠ CAN (BELAMCANDA CHINENSIS (L. ) DC .) THU HÁI TẠI VIỆT NAM LUẬN ÁN... (Belamcanda chinensis (L. ) DC .) thu hái Việt Nam" với mục tiêu chính: Xác định thành phần hóa học Xạ can Đánh giá số tác dụng sinh học cao chiết hợp chất phân lập từ Xạ can Để đạt mục tiêu trên,