Khảo sát đặc điểm vi học và tác dụng chống oxy hóa của dây vác (cayratia trifolia (l ) domino)

MỤC LỤC DANH MỤC BẢNG DANH MỤC HÌNH ẢNH – SƠ ĐỒ Hình 2.1 Sơ đồ vị trí phân loại thực vật dây Vác………………………… Hình 3.1 Sơ đồ tóm tắt quy trình chiết xuất thu cao phân đoạn…………… Hình 4.1 Thân tua cuống dây Vác……………………………………… Hình 4.2 Tiết diện thân thân hóa gỗ dây Vác………………………… Hình 4.3 Lá già non dây Vác………………………………………… Hình 4.4 Lá cuống dây Vác……………………………………………… Hình 4.5 Hoa dây Vác………………………………………………………… Hình 4.6 Qủa hạt dây Vác….……………………………………………… Hình 4.7 Rễ dây vác…………………………………………………………… Hình 4.8 Tổng quan vi phẫu thân dây Vác…………………………………… Hình 4.9 Chi tiết vi phẫu thân dây Vác……………………………………… Hình 4.10 Tổng quan vi phẫu dây Vác……………………………………… Hình 4.11 Chi tiết vi phẫu gân dây Vác……………………………… Hình 4.12 Vi phẫu phiến dây Vác…………………………………………… Hình 4.13 Tổng quan vi phẫu cuống dây Vác……………………………… Hình 4.14 Chi tiết vi phẫu cuống dây Vác………………………………… Hình 4.15 Lỗ khí kiểu dị bào dây Vác………………………………… Hình 4.16 Tổng quan vi phẫu rễ dây Vác……………………………………… Hình 4.17 Chi tiết vi phẫu rễ dây……………………………………………… Hình 4.18 Bột thân dây Vác…………………………………………………… Hình 4.19 Các cấu tử bột thân dây Vác………………………………… Hình 4.20 Bột dây Vác……………………………………………………… Hình 4.21 Các cấu tử bột lá……………………………………………… Hình 4.22 Bột rễ dây Vác……………………………………………………… Hình 4.23 Các cấu tử bột rễ dây Vác…………………………………… Hình 4.24 SKLM thăm dò hoạt tính chống oxy hóa thân dây Vác…… Hình 4.25 SKLM thăm dò hoạt tính chống oxy hóa dây Vác……… 30 40 40 41 41 42 43 43 44 46 47 48 49 49 51 51 52 53 54 55 56 57 58 59 72 72 Hình 4.26 SKLM thăm dò hoạt tính chống oxy hóa rễ dây Vác………… Hình 4.27 SKLM thăm dò hoạt tính chống oxy hóa trái dây Vác……… Hình 4.28 Biểu đồ đường chuẩn cao TP thân dây Vác…………………… Hình 4.29 Biểu đồ đường chuẩn cao n-hexan thân dây Vác…………… Hình 4.30 Biểu đồ đường chuẩn cao DCM thân dây Vác……………… Hình 4.31 Biểu đồ đường chuẩn cao EA thân dây Vác………………… Hình 4.32 Biểu đồ đường chuẩn cao n-butanol thân dây Vác…………… Hình 4.33 Biểu đồ đường chuẩn Vitamin C……………………………… Hình 4.34 Biểu đồ so sánh khả chống oxy hóa cao thân dây Vác với vitamin C………………………………………………………… Hình 4.35 Biểu đồ đường chuẩn cao TP dây Vác…………………… Hình 4.36 Biểu đồ đường chuẩn cao DCM dây Vác………………… Hình 4.37 Biểu đồ đường chuẩn cao EA dây Vác…………………… Hình 4.38 Biểu đồ đường chuẩn cao n-butanol dây Vác……………… Hình 4.39 Biểu đồ so sánh khả chống oxy hóa cao dây Vác với vitamin C…………………………………………………………… Hình 4.40 Biểu đồ đường chuẩn cao TP rễ dây Vác…………………… Hình 4.41 Biểu đồ đường chuẩn cao n-hexan rễ dây Vác……………… Hình 4.42 Biểu đồ đường chuẩn cao DCM rễ dây Vác………………… Hình 4.43 Biểu đồ đường chuẩn cao EA rễ dây Vác…………………… Hình 4.44 Biểu đồ đường chuẩn cao n-butanol rễ dây Vác……………… Hình 4.45 Biểu đồ đường chuẩn cao nước rễ dây Vác…………………… Hình 4.46 Biểu đồ so sánh khả chống oxy hóa cao r ễ dây Vác với vitamin C…………………………………………………………… Hình 4.47 Biểu đồ đường chuẩn cao TP trái dây Vác…………………… Hình 4.48 Biểu đồ đường chuẩn cao n-hexan trái dây Vác……………… Hình 4.49 Biểu đồ đường chuẩn cao DCM trái dây Vác………………… Hình 4.50 Biểu đồ đường chuẩn cao EA trái dây Vác…………………… Hình 4.51 Biểu đồ đường chuẩn cao n-butanol trái dây Vác…………… Hình 4.52 Biểu đồ so sánh khả chống oxy hóa cao trái dây Vác với vitamin C…………………………………………………………… Hình 4.53 Đồ thị biểu diễn HTCO cao thử nghiệm………………… 73 73 76 76 77 77 78 78 79 81 81 82 82 83 85 85 86 86 87 87 88 90 90 91 91 92 93 94 DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT ROS FR AO CCOH O•− Tác nhân phản ứng chứa oxy (Reactive Oxygen Species) Gốc tự (Free Radical) Chất chống oxy hóa (Anti oxydant) Chất chống oxy hóa Gốc superoxyd OH • Gốc hydroxyl O2 Oxy đơn bội LO• Gốc lipoxyd LOO• Gốc lipoperoxyd RO• Gốc alkoxyd SOD GSH GSH – Px NO● Hv MDA HTCO DPPH OD MeOH NBT EtOH n-he DCM EA n-bu UV – Vis DMSO TP SKLM Abs EtOAc Enzym superoxyd dismutase Glutathion Enzym glutathion peroxydase Gốc tự nitric oxide Tia cực tím, tia phóng xạ Malonyl dialdehyd Hoạt tính chống oxy hóa 1,1 – diphenyl – – picrylhydrazyl Mật độ quang Methanol Nitroblue tetrazolium Ethanol n – hexan Dichlorometan Ethyl acetat n – butanol Ultra violet - visible Dimethyl sulfoxyd Toàn phần Sắc ký lớp mỏng Mật độ quang Ethyl acetat CHƯƠNG MỞ ĐẦU Sự thối hóa tế bào nguyên nhân gây nên b ệnh t ật c thể người Bệnh ung thư có liên quan đến thối hóa t ế bào, tế bào ác tính nói chung hoạt động tế bào bình thường vi ệc tạo superoxide (các hợp chất chứa liên kết đơn O–O) Các bệnh tật k ết qu ả tạo nhiều tác nhân phản ứng chứa oxy (Reactive Oxygen Species– ROS) hoạt động trao đổi chất tế bào, dẫn đ ến s ự hư tổn tế bào bao gồm peroxy hóa lipid, hình thành s ản phẩm cộng DNA, trình oxy hóa protein, làm hoạt tính enzyme cuối dẫn đến ch ết tế bào (Hileman et al., 2004) Cơ thể động vật hay người thường lưu giữ hợp chất có tính chống oxy hóa cao gluthathione, vitamin E, vitamin C… Khi hàm lượng chất chống oxy hóa thể giảm xuống làm tăng nguy c h ủy hoại tế bào Tuy nhiên, ảnh hưởng bất lợi ROS có th ể ngăn ngừa cách bổ sung chế độ ăn giàu thực phẩm có chứa chất ch ống oxy hóa (các loại đậu, rau trái tươi …) với tác dụng có l ợi cho s ức kh ỏe ng ười (Schramm et al., 2003; Conforti et al., 2008).Vì thời gian gần đây, chất chống oxy hóa có nguồn gốc tự nhiên ngày thu hút nhiều quan tâm Ở Việt Nam có khí hậu nhiệt đới với thảm thực vật vô phong phú đa dạng, nên tiềm khai thác cỏ để làm dược liệu r ất l ớn Các h ợp ch ất có tính kháng khuẩn, kháng nấm, chống oxy hóa chiết xu ất từ loài cỏ nghiên cứu ứng dụng vào y học ngày nhiều Việc tận dụng loại cỏ phổ biến địa phương, giá trị kinh tế cao, có kh ả trở thành loại thảo dược dùng làm nguyên liệu để sản xuất s ản ph ẩm có giá trị kinh tế cao, quan tâm, khai thác Dây Vác ( Cayratia trifolia (L.) Domin), loài hoang dại mọc rộng rãi trải dài từ Bắc vào Nam Theo nhiều nghiên cứu, dây Vác có khả kháng số vi khuẩn gram dương, gram âm, chống oxy hóa tốt, có khả chống ung thư Từ th ực t ế đó, đ ề tài “Khảo sát đặc điểm vi học tác dụng chống oxy hóa dây Vác ( Cayratia trifolia (L.) Domino)”, thực nhằm tìm kiếm nguồn s ản phẩm có khả chống oxy hóa Để góp phần tìm hiểu thêm giá trị mà thuốc đem lại, đề tài “Khảo sát đặc điểm vi học tác dụng chống oxy hóa dây Vác ( Cayratia trifolia (L.) Domino)”, tiến hành với nội dung sau: - - Mô tả đặc điểm hình thái, khảo sát vi học phận thân, lá, r ễ c dây - Vác Định tính sơ thành phần hóa học phận thân, , rễ, trái dây Vác Khảo sát tác dụng sinh học: Thử hoạt tính chống oxy hóa thân, lá, r ễ, tráicủa dây Vác CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU TỔNG QUAN VỀ DÂY VÁC 1.1 Thực vật học 1.1.1 Vị trí phân loại Tên gọi: Dây Vác Tên gọi khác: Dây Giác, dây Sạt Tên nước ngoài: Fox grape (tiếng Anh) Tên khoa học: Cayratia trifolia (L.) Domino Đồng danh: (C carnosa (Wall.) Gagnep) Họ: Nho (Vitaceae) Vị trí phân loại theo hệ thống ArmenTakhtalan (Takhtalan A, 2009) Giới thực vật (Plantae) Phân giới thực vật bậc cao (Cormobionta) Ngành Ngọc Lan (Magnoliophyta) Lớp Ngọc Lan (Magnoliopsida) Phân lớp Hoa hồng (Rosidae) Bộ Nho (Vitales) Họ Nho (Vitaceae) Chi Cayratia Loài Cayratia trifolia (L.) Domino Hình 2.1 Sơ đồ vị trí phân loại thực vật dây Vác 1.1.2 Đặc điểm thực vật họ Nho (Vitaceae) Thân: Cây bụi leo hay dây leo thân gỗ vòi cu ốn mọc đối di ện v ới Lá: Đơn, mọc cách, có khía có thùy hình chân v ịt ho ặc kép hình chân vịt với – chét Lá kèm nhỏ, dễ rụng Cụm hoa: Xim, tán ngù, chùm, chùm kép nách hay đối diện với (do s ự phát tri ển c ộng tr ụ c thân) Hoa:Nhỏ, đều, lưỡng tính hay đơn tính trụy, mẫu hay 5, vòng Bao hoa: – đài, – cánh hoa, tiền khai van; cánh hoa có th ể r ời hay dính chóp nón (Nho) Bộ nhị: Số nhị số cánh hoa, rời mọc trước cánh hoa Đĩa mật dày nằm phía vòng nhị Bộ nhụy: nỗn dính thành bầu ơ, ô noãn Quả: Mọng, chứa – hạt, hạt có nội nhũ (Trương Thị Đẹp, 2017) Ở Việt Nam có chi: Ampelocissus, Ampelopsis, Cayratia, Cissus, Parthenocissus, Tetrastigma, Vittis; khoảng 85 loài Cây họ + Vác (Dây Sạt) : Cayratia trifolia (L.) Domino Rễ dùng trị nhọt phổi đinh nhọt + Chìa vơi: Cissus modeccoides Planch Củ dùng chữa đau nhức xương, nhức đầu, tê thấp, gân xương co quắp, sưng tấy, mụn nhọt ; dùng làm thuốc xổ nhuận tràng + Nho: Vittis vinifera L Cây trồng lấy Hoa, chống nhiều siêu khuẩn 1.1.3 Đặc điểm thực vật chi Cayratia Có 14 loài : + Cayratia cannabina Gagnep – Vác cần sa + Cayratia ceratophora Gagnep – Vác có sừng + Cayratia corniculata (Benth.) Gagnep – Vác sừng nhỏ + Cayratia geniculata (Blume) Gagnep – Vác gối, vác gấp khúc, Dây sạt gấp khúc + Cayratia hayatae Gagnep – Vác Hayata + Cayratia japonica (Thunb.) Gagnep – Vác Nhật + Cayratia mollissima (Wall.) Gagnep – Vác bao phấn đen, Vác lông mềm + Cayratia oligocarpa (H.Lesv et Vaniot) Gagnep – Vác trái, Vác l ớn + Cayratia palmata Gagnep – Vác chân vịt + Cayratia pedata (Lam.) Gagnep – Vác chân, Vác lông + Cayratia roxburghii (Laws.) Gagnep – Vác Roxburgh + Cayratia tenuifolia (Wight et Arn.) Gagnep – Vác nhỏ + Cayratia trifolia (L.) Domin – Vác, Dây sạt + Cayratia wrayi (King) Gagnep – Vác Wray.(Võ Văn Chi, 2007) 1.1.4 Đặc điểm thực vật Dây vác Dây Vác thường gọi Fox grape tiếng Anh ; Amlabel, Ramchana Ấn Độ, Amlavetash tiếng Phạn Dây có nguồn gốc Ấn Độ, châu Á Úc Dây Vác loại dây leo sống lâu năm, thân thảo phân nhi ều nhánh, có thân g ỗ g ốc Dây leo nhờ tua mọc đối diện với lá, tua có nhi ều nhánh, màu nâu đỏ.Lá mọc cách, phụ, dày, bìa có to, v ới cu ốn dài kho ảng – cm phiến có hình xoan thn dài – cm, rộng kho ảng 1,5 – cm, nh ọn chóp Phát hoa nách lá, hoa nhỏ có màu xanh lục nhạt màu nâu kho ảng 2,5mm, đài hoa hình đĩa, cánh hoa 4, màu xanh, ti ểu nhụy trước cánh hoa, đĩa mặt vng, nốm đỏ Qủa có nhiều thịt, mọng nước, màu tím sẫm ho ặc đen, g ần hình cầu (tròn bẹp) đường kính khoảng cm, bên chứa từ đ ến hạt Hạt hình tam giác, đỉnh tròn, lỗ bụng xương s ườn phi ến d ọc theo b ờ, h nhô lên (Kumar et al ,2011) Dây Vác (Cayratia trifolia L.Domin) loại dây leo, phát triển tồn lưu đa niên, thân phân thành nhiều nhánh, nhánh phát triển thành dây leo mới, vươn dài mét/tuần Dây mọc hoang nhiều hệ sinh thái khác nhau, chủ yếu dọc theo rào, bụi từ tỉnh Lào Cai, Hải Phòng qua tỉnh miền Trung An Giang (Phạm Hoàng Hộ, 2003) Dây Vác xem dại khó diệt, sinh trưởng mạnh Nếu khơng có biện pháp phòng trừ thích hợp phát triển lấn át triệt tiêu loại khác kể cổ thụ Một biện pháp hạn chế hiệu phát triển dây Vác sử dụng thành phẩm để chế biến thành sản phẩm có giá trị kinh tế Mặc dù, có mơ hình dùng trái để làm rượu quy mơ cơng nghiệp, phận sử dụng chủ yếu trái chín Ngồi ra, người dân thường sử dụng trái chín ăn chủ yếu Ở Việt Nam chưa có sản phẩm hay mơ hình giúp khai thác hiểu dây Vác Bộ phận dùng:Rễ thân - Radix et Caulis Cayratiae Trifoliae Nơi sống thu hái: Loài phân bố Ấn Độ, Trung Quốc, Thái Lan, Lào, Campuchia, Inđônêxia, Philippin Ở nước ta, mọc hoang qu ần hệ thứ sinh dọc rào, bụi, từ tỉnh Lào Cai, Nam Hà, H ải Phòng qua t ỉnh miền Trung An Giang, Kiên Giang (thaythuoccuaban.com) 10 PHỤ LỤC 1:KẾT QUẢ THỬ HTCO THEO PHƯƠNG PHÁP DPPH CỦA THÂN DÂY VÁC Kết thăm dò khả chống oxy hóa cao thân dây Vác nồng độ 2000 g/mL 1000 g/mL STT 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 Tên mẫu Trắng DPPH DPPH DPPH Cao ethanol 96% 1000g/mL (1) Cao ethanol 96% 1000g/mL (2) Cao ethanol 96% 1000g/mL (3) Cao ethanol 96% 2000g/mL (1) Cao ethanol 96% 2000g/mL (2) Cao ethanol 96% 2000g/mL (3) Cao n-hexan 1000g/mL (1) Cao n-hexan 1000g/mL (2) Cao n-hexan 1000 g/mL (3) Bì cao n-hexan 1000 g/mL (1) Bì cao n-hexan 1000 g/mL (2) Bì cao n-hexan 1000g/mL (3) Cao n-hexan 2000 g/mL (1) Cao n-hexan 2000g/mL (2) Cao n-hexan 2000 g/mL (3) Bì cao n-hexan 2000 g/mL (1) Bì cao n-hexan 2000g/mL (2) Bì cao n-hexan 2000g/mL (3) Cao DCM 1000 g/mL (1) Cao DCM 1000 g/mL (2) Cao DCM 1000 g/mL (3) Bì cao DCM 1000 g/mL (1) Bì cao DCM 1000 g/mL (2) Bì cao DCM 1000 g/mL (3) Cao DCM 2000 g/mL (1) Cao DCM 2000 g/mL (2) Cao DCM 2000g/mL (3) Bì cao DCM 2000g/mL (1) Bì cao DCM 2000g/mL (2) Bì cao DCM 2000g/mL (3) Abs 0,000 0,715 0,701 0,688 0,272 0,268 0,272 0,036 0,035 0,033 0,089 0,090 0,112 0,045 0,043 0,045 0,148 0,140 0,136 0,088 0,088 0,090 0,066 0,064 0,066 0,028 0,028 0,028 0,145 0,130 0,157 0,116 0,082 0,096 Cao EA 1000 g/mL (1) Cao EA 1000 g/mL (2) Cao EA 1000g/mL (3) 0,059 0,060 0,061 103 Abs trung bình HTCO (%) 0,701 0,271 69,04 0,035 95,01 0,097 92,44 0,044 0,141 92,58 0,089 0,065 94,72 0,028 0,144 93,44 0,098 0,060 93,58 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 Bì cao EA 1000g/mL (1) Bì cao EA 1000g/mL (2) Bì cao EA 1000 g/mL (3) Cao EA 2000 g/mL (1) Cao EA 2000 g/mL (2) Cao EA 2000 g/mL (3) Bì cao EA 2000 g/mL (1) Bì cao EA 2000 g/mL (2) Bì cao EA 2000 g/mL (3) Cao n-butanol 1000 g/mL (1) Cao n-butanol 1000 g/mL (2) Cao n-butanol 1000g/mL (3) Cao n-butanol 2000 g/mL (1) Cao n-butanol 2000 g/mL (2) Cao n-butanol 2000g/mL (3) Cao nước 1000g/mL (1) Cao nước 1000 g/mL (2) Cao nước 1000g/mL (3) Cao nước 2000 g/mL (1) Cao nước 2000g/mL (2) Cao nước 2000 g/mL (3) 0,017 0,015 0,014 0,074 0,078 0,084 0,022 0,022 0,022 0,064 0,065 0,084 0,063 0,064 0,066 0,586 0,596 0,595 0,891 0,849 0,852 0,015 0,079 91,87 0,022 0,071 89,87 0,064 90,87 0,590 15,83 0,864 -23,25 Kết đo độ hấp thu caoTP thân dây Vác nồng độ Abs Abs Abs TB HTCO % DPPH Chứng 0,834 0,835 0,821 0,830 100 g/mL 0,722 0,744 0,747 0,738 11,12 250 g/mL 0,611 0,64 0,645 0,632 23,86 500 g/mL 0,411 0,414 0,459 0,428 48,43 1000 g/mL 0,272 0,268 0,272 0,271 67,39 2000 g/mL 0,036 0,035 0,033 0,035 95,82 Kết đo độ hấp thu cao n-hexan thân dây Vác nồng độ Abs Abs Abs TB HTCO % Abs DPPH Chứng 0,834 0,835 0,821 0,830 100 g/mL 0,631 0,638 0,638 0,635 23,49 250 g/mL 0,402 0,407 0,406 0,405 51,20 500 g/mL 0,248 0,245 0,242 0,245 73,25 Bì 500 g/mL 0,023 103 1000 g/mL 0,097 0,097 0,095 0,096 92,01 Bì 1000 g/mL 0,03 2000 g/mL 0,149 0,14 0,142 0,144 93,53 Bì 2000 g/mL 0,09 Kết đo độ hấp thu cao n-hexan thân dây Vác nồng độ Abs Abs Abs TB HTCO % DPPH Chứng 0,834 0,835 0,821 0,830 100 g/mL 0,631 0,638 0,638 0,635 23,49 250 g/mL 0,402 0,407 0,406 0,405 51,20 Abs 500 g/mL 0,248 0,245 0,242 0,245 73,25 Bì 500 g/mL 0,023 1000 g/mL 0,097 0,097 0,095 0,096 92,01 Bì 1000 g/mL 0,03 2000 g/mL 0,149 0,14 0,142 0,144 93,53 Bì 2000 g/mL 0,09 Kết đo độ hấp thu caoDCM thân dây Vác nồng độ Abs Abs Abs TB HTCO % DPPH Chứng 0,834 0,835 0,821 0,830 50 g/mL 0,655 0,597 0,668 0,640 22,89 100 g/mL 0,449 0,441 0,446 0,445 46,35 Abs 250 g/mL 0,201 0,199 0,198 0,199 87,39 Bì 250 g/mL 0,007 500 g/mL 0,094 0,096 0,104 0,098 89,872 Bì 500 g/mL 0,011 1000 g/mL 0,086 0,082 0,085 0,084 94,06 Bì 1000 g/mL 0,035 Kết đo độ hấp thu caoEA thân dây Vác nồng độ TB HTCO % DPPH Chứn g 0,834 0,835 0,821 0,830 50 g/mL 100 g/mL 250 g/mL 500 g/mL 1000 g/mL 0,61 0,634 0,646 0,630 24,10 0,428 0,441 0,453 0,441 46,91 0,201 0,198 0,202 0,200 75,86 0,111 0,118 0,111 0,113 86,35 0,066 0,06 0,061 0,062 92,49 Kết đo độ hấp thu cao n-butanol thân dây Vác nồng độ Abs Abs Abs TB HTCO % DPPH Chứn g 0,834 0,835 0,821 0,830 100 g/mL 250 g/mL 500 g/mL 1000 g/mL 2000 g/mL 0,737 0,644 0,675 0,685 17,43 0,457 0,415 0,413 0,428 48,39 0,246 0,247 0,295 0,263 68,35 0,084 0,091 0,079 0,085 89,80 0,057 0,058 0,057 0,057 93,09 105 PHỤ LỤC 2:KẾT QUẢ THỬ HTCO THEO PHƯƠNG PHÁP DPPH CỦA LÁ DÂY VÁC Kết thăm dò khả chống oxy hóa cao dây Vác nồng độ 2000 g/mL 1000 g/mL STT 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 Tên mẫu Trắng DPPH DPPH DPPH Cao ethanol 96% 1000g/mL (1) Cao ethanol 96% 1000g/mL (2) Cao ethanol 96% 1000g/mL (3) Bì cao ethanol 96% 1000g/Ml Cao ethanol 96% 2000g/mL (1) Cao ethanol 96% 2000g/mL (2) Cao ethanol 96% 2000g/mL (3) Cao n-hexan 1000g/mL (1) Cao n-hexan 1000 g/mL (2) Cao n-hexan 1000 g/mL (3) Cao n-hexan 2000 g/mL (1) Cao n-hexan 2000 g/mL (2) Cao n-hexan 2000 g/mL (3) Cao DCM 1000 g/mL (1) Cao DCM 1000 g/mL (2) Cao DCM 1000 g/mL (3) Bì cao DCM 1000 g/mL (1) Cao DCM 2000 g/mL (1) Cao DCM 2000 g/mL (2) Cao DCM 2000 g/mL (3) Bì cao DCM 2000 g/mL (1) Cao EA 1000 g/mL (1) Cao EA 1000 g/mL (2) Cao EA 1000 g/mL (3) Cao EA 2000 g/mL (1) Cao EA 2000 g/mL (2) Cao EA 2000 g/mL (3) Cao n-butanol 1000 g/mL (1) Cao n-butanol 1000 g/mL (2) Cao n-butanol 1000 g/mL (3) Cao n-butanol 2000 g/mL (1) Cao n-butanol 2000 g/mL (2) Cao n-butanol 2000 g/mL (3) Cao nước 1000 g/mL (1) Cao nước 1000 g/mL (2) Cao nước 1000 g/mL (3) Cao nước 2000 g/mL (1) Abs 0,000 0,802 0,944 0,946 0,250 0,289 0,293 0,051 0,156 0,145 0,160 0,762 0,761 0,860 1,029 0,964 1,086 0,494 0,391 0,454 0,240 0,559 0,513 0,562 0,467 0,091 0,084 0,083 0,108 0,102 0,114 0,593 0,579 0,715 0,166 0,163 0,260 1,460 1,462 1,139 1,130 106 Abs trung bình HTCO (%) 0,897 0,277 74,80 0,154 82,83 0,794 11,48 1,026 -14,38 0,446 77,03 0,545 91,30 0,086 90,41 1,108 -23,52 0,629 29,88 0,196 78,15 1,354 -50,95 42 43 Cao nước 2000 g/mL (2) Cao nước 2000 g/mL (3) 1,086 1,122 1,113 Kết đo độ hấp thu caoTP dây Vác nồng độ Abs Abs Abs TB HTCO % DPPH Chứn g 0,834 0,835 0,821 0,830 100 g/mL 250 g/mL 500 g/mL 1000 g/mL 2000 g/mL 0,711 0,712 0,71 0,711 14,34 0,696 0,605 0,594 0,632 23,90 0,434 0,438 0,432 0,435 47,63 0,257 0,259 0,253 0,256 75,26 Bì 1000 g/mL 0,051 0,156 0,145 0,16 0,154 81,49 Abs Kết đo độ hấp thu cao DCM dây Vác nồng độ Abs Abs Abs TB HTCO % Abs DPPH Chứn g 0,748 0,842 0,795 0,795 100 g/mL 250 g/mL 500 g/mL 1000 g/mL 2000 g/mL 0,729 0,714 0,721 0,721 17,07 Bì 100 g/mL 0,609 0,609 0,611 0,610 34,50 Bì 250 g/mL 0,470 0,480 0,472 0,474 55,90 Bì 500 g/mL 0,033 0,066 0,108 0,351 0,344 0,511 0,402 71,33 Bì 1000 g/mL 0,164 0,516 0,524 0,538 0,526 92,89 Bì 2000 g/mL 0,467 106 -24,08 Kết đo độ hấp thu cao EA dây Vác nồng độ Abs Abs Abs TB HTCO % DPPH Chứn g 0,834 0,835 0,821 0,830 50 g/mL 100 g/mL 250 g/mL 500 g/mL 1000 g/mL 0,663 0,71 0,683 0,685 17,43 0,615 0,632 0,558 0,602 27,51 0,257 0,253 0,255 0,255 69,28 0,06 0,06 0,063 0,061 92,65 0,054 0,054 0,052 0,053 95,86 Bì 1000 0,019 Abs Kết đo độ hấp thu cao n-butanol dây Vác nồng độ Abs Abs Abs TB HTCO % DPPH Chứn g 0,834 0,835 0,821 0,830 500 g/mL 1000 g/mL 1250 g/mL 1500 g/mL 1750 g/mL 2000 g/mL 0,788 0,699 0,754 0,747 10,00 0,448 0,504 0,490 0,481 42,55 0,417 0,420 0,426 0,421 49,28 0,343 0,336 0,309 0,329 60,32 0,309 0,304 0,308 0,307 63,01 0,274 0,203 0,203 0,227 72,69 PHỤ LỤC 3:KẾT QUẢ THỬ HTCO THEO PHƯƠNG PHÁP DPPH CỦA RỄ DÂY VÁC Kết thăm dò khả chống oxy hóa cao dây Vác nồng độ 2000 g/mL 1000 g/mL STT Tên mẫu Trắng DPPH DPPH DPPH Cao ethanol 96% 1000g/mL (1) Cao ethanol 96% 1000g/mL (2) Cao ethanol 96% 1000g/mL (3) Bì cao ethanol 96% 1000g/mL Abs 0,000 0,709 0,800 0,804 0,036 0,037 0,038 0,003 10 11 12 13 Cao ethanol 96% 2000g/mL (1) Cao ethanol 96% 2000g/mL (2) Cao ethanol 96% 2000g/mL (3) Bì cao ethanol 96% 2000g/mL Cao n-hexan 1000 g/mL (1) 0,066 0,074 0,064 0,039 0,089 108 Abs trung bình HTCO (%) 0,771 0,037 81,19 91,57 0,068 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 Cao n-hexan 1000 g/mL (2) Cao n-hexan 1000 g/mL (3) Bì cao n-hexan 1000g/mL (1) Cao n-hexan 2000 g/mL(1) Cao n-hexan 2000 g/mL(2) Cao n-hexan 2000 g/mL(3) Bì caon-hexan 2000 g/mL(1) Cao DCM 1000 g/mL(1) Cao DCM 1000 g/mL(2) Cao DCM 1000 g/mL(3) Cao DCM 2000 g/mL(1) Cao DCM 2000 g/mL(2) Cao DCM 2000 g/mL(3) Bì cao DCM 2000 g/mL(1) Cao EA 1000 g/mL(1) Cao EA 1000g/mL (2) Cao EA 1000 g/mL(3) Cao EA 2000g/mL (1) Cao EA 2000 g/mL(2) Cao EA 2000g/mL (3) Bì cao EA 2000g/mL (1) Cao n-butanol 1000g/mL (1) Cao n-butanol 1000 g/mL(2) Cao n-butanol 1000 g/mL(3) Cao n-butanol 2000 g/mL(1) Cao n-butanol 2000g/mL (2) Cao n-butanol 2000g/mL (3) Cao nước 1000 g/mL(1) Cao nước 1000 g/mL(2) Cao nước 1000 g/mL(3) Cao nước 2000 g/mL(1) Cao nước 2000g/mL (2) Cao nước 2000 g/mL(3) 0,135 0,097 0,051 0,197 0,197 1,189 0,121 0,078 0,078 0,076 0,107 0,192 0,284 0,055 0,104 0,105 0,106 0,130 0,131 0,146 0,064 0,064 0,065 0,055 0,084 0,080 0,080 0,058 0,059 0,060 0,069 0,063 0,067 108 0,107 92,74 0,194 90,53 0,077 90,01 0,194 81,32 0,105 86,38 0,136 90,66 0,061 92,09 0,081 89,49 0,059 92,35 0,066 91,44 Kết đo độ hấp thu cao TP rễ dây Vác nồng độ Abs Abs Abs TB HTCO % DPPH Chứng 0,834 0,835 0,821 0,830 50 g/mL 0,697 0,625 0,638 0,653 20,39 100 g/mL 0,576 0,599 0,596 0,590 28,07 250 g/mL 0,412 0,489 0,482 0,461 43,83 500 g/mL 0,296 0,298 0,297 0,297 63,81 1000 g/mL 0,146 0,147 0,148 0,147 82,45 Bì 1000 g/mL 0,003 Abs Kết đo độ hấp thu cao n-hexan rễ dây Vác nồng độ Abs Abs Abs TB HTCO % DPP Chứng 0,834 0,835 0,821 0,830 50 g/mL 0,808 0,802 0,804 0,805 3,05 100 g/mL 0,655 0,630 0,644 0,643 22,53 Abs 250 g/mL 0,416 0,414 0,414 0,415 51,34 Bì 250 g/mL 0,021 500 g/mL 0,292 0,296 0,281 0,290 68,233 Bì 500 g/mL 0,026 1000 g/mL 0,139 0,114 0,108 0,120 92,37 Bì 1000 g/mL 0,057 Kết đo độ hấp thu cao DCM rễ dây Vác nồng độ Abs Abs Abs TB HTCO % DPPH Chứn g 0,834 0,835 0,821 0,830 50 g/mL 100 g/mL 250 g/mL 500 g/mL 1000 g/mL 0,711 0,705 0,708 0,708 14,70 0,568 0,569 0,567 0,568 31,57 0,342 0,348 0,342 0,344 58,55 0,108 0,105 0,103 0,105 87,31 0,102 0,103 0,109 0,105 92,45 Bì 1000 g/mL 0,042 Abs 110 Kết đo độ hấp thu cao EAcủa rễ dây Vác nồng độ Abs Abs Abs TB HTCO % DPPH Chứng 0,834 0,835 0,821 0,830 50 g/mL 0,474 0,407 0,511 0,464 44,10 100 g/mL 0,285 0,284 0,285 0,285 65,70 250 g/mL 0,165 0,167 0,164 0,165 80,08 500 g/mL 0,078 0,079 0,078 0,078 90,56 Abs 1000 g/mL 0,101 0,101 0,101 0,101 95,54 Bì 2000 g/mL 0,064 Kết đo độ hấp thu cao n-butanolcủa rễ dây Vác nồng độ Abs Abs Abs TB HTCO % DPPH Chứng 0,834 0,835 0,821 0,830 50 g/mL 0,749 0,739 0,749 0,746 10,16 100 g/mL 0,516 0,482 0,498 0,499 39,92 250 g/mL 0,317 0,315 0,315 0,316 61,97 500 g/mL 0,185 0,187 0,186 0,187 77,59 1000 g/mL 0,084 0,084 0,084 0,084 89,88 Kết đo độ hấp thu cao nướccủa rễ dây Vác nồng độ Abs Abs Abs TB HTCO % DPPH Chứng 0,834 0,835 0,821 0,830 250 g/mL 0,805 0,761 0,799 0,788 5,02 500 g/mL 0,533 0,576 0,544 0,551 33,61 1000 g/mL 0,190 0,252 0,234 0,225 72, 1500 g/mL 0,099 0,098 0,098 0,098 88,15 2000 g/mL 0,069 0,063 0,067 0,066 92,01 PHỤ LỤC 4:KẾT QUẢ THỬ HTCO THEO PHƯƠNG PHÁP DPPH CỦA TRÁI DÂY VÁC Kết thăm dò khả chống oxy hóa cao trái dây Vác nồng độ 2000 g/mL 1000 g/mL 111 Kết thăm dò khả chống oxy hóa cao trái dây Vác nồng độ 2000 g/mL 1000 g/mL STT 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 Tên mẫu Trắng DPPH DPPH DPPH Cao ethanol 96% 1000g/mL (1) Cao ethanol 96% 1000g/mL (2) Cao ethanol 96% 1000g/mL (3) Cao ethanol 96% 2000g/mL (1) Cao ethanol 96% 2000g/mL (2) Cao ethanol 96% 2000g/mL (3) Bì cao ethanol 96% 2000g/mL Cao n-hexan 1000g/mL (1) Cao n-hexan 1000 g/mL (2) Cao n-hexan 1000 g/mL (3) Bì cao n-hexan 1000 g/mL (1) Cao n-hexan 2000 g/mL (1) Cao n-hexan 2000 g/mL (2) Cao n-hexan 2000 g/mL (3) Bì cao n-hexan 2000 g/mL (1) Cao DCM 1000 g/mL (1) Cao DCM 1000 g/mL (2) Cao DCM 1000 g/mL (3) Bì cao DCM 1000g/mL Cao DCM 2000 g/mL (1) Cao DCM 2000 g/mL(2) Cao DCM 2000 g/mL(3) Bì cao DCM 2000 g/mL(1) Cao EA 1000 g/mL(1) Cao EA 1000 g/mL(2) Cao EA 1000 g/mL(3) Cao EA 2000 g/mL(1) Cao EA 2000 g/mL(2) Cao EA 2000 g/mL(3) Cao n-butanol 1000 g/mL(1) Cao n-butanol 1000 g/mL(2) Cao n-butanol 1000 g/mL(3) Bì cao n-butanol 1000 g/mL Cao n-butanol 2000 g/mL(1) Cao n-butanol 2000 g/mL(2) Cao n-butanol 2000 (3) Bì caon-butanol 2000 (1) Abs 0,000 0,888 0,903 0,889 0,121 0,100 0,100 0,049 0,049 0,049 0,03 0,419 0,361 0,367 0,034 0,150 0,136 0,139 0,066 0,483 0,485 0,517 0,010 0,276 0,271 0,268 0,034 0,149 0,199 0,214 0,072 0,064 0,067 0,321 0,351 0,343 0,010 0,105 0,091 0,088 0,023 Cao nước 1000 g/mL(1) Cao nước 1000g/mL (2) 0,738 0,622 112 Abs trung bình HTCO (%) 0,893 88,02 0,107 0,049 97,87 0,382 61,04 0,142 91,49 0,495 45,71 0,272 73,36 0,187 79,07 0,068 92,39 0,338 63,28 0,506 45,93 0,668 22,53 44 45 46 47 Cao nước 1000 g/mL(3) Cao nước 2000 g/mL(1) Cao nước 2000 g/mL(2) Cao nước 2000 g/mL(3) 0,644 0,474 0,599 0,444 0,506 Kết đo độ hấp thu cao TPcủa trái dây Vác nồng độ Abs Abs Abs TB HTCO DPPH Chứng 0,834 0,835 0,821 0,830 100 g/mL 0,645 0,653 0,663 0,654 21,24 250 g/mL 0,493 0,531 0,504 0,509 38,63 500 g/mL 0,311 0,301 0,236 0,283 65,94 1000 g/mL 0,121 0,100 0,100 0,107 87,11 Abs 2000 g/mL 0,049 0,049 0,049 0,049 97,71 Bì 2000 g/mL 0,03 Kết đo độ hấp thu cao n-hexancủa trái dây Vác nồng độ Abs Abs Abs TB HTCO % Abs DPPH Chứng 0,834 0,835 0,821 0,830 100 g/mL 0,773 0,723 0,786 0,761 8,35 250 g/mL 0,613 0,625 0,632 0,623 26,59 Bì 250 g/mL 500 g/mL 0,530 0,541 0,534 0,535 38,43 Bì 500 g/mL 0,056 0,024 112 1000 g/mL 0,372 0,378 0,380 0,377 58,47 Bì 1000 g/mL 0,032 2000 g/mL 0,172 0,174 0,146 0,164 86,99 Bì 2000 g/mL 0,056 43,36 Kết đo độ hấp thu cao DCMcủa trái dây Vác nồng độ Abs Abs Abs TB HTCO % DPPH Chứng 0,834 0,835 0,821 0,830 100 g/mL 0,697 0,698 0,688 0,694 16,35 Abs 250 g/mL 0,609 0,607 0,606 00,617 28,63 Bì 250 g/mL 0,015 500 g/mL 0,471 0,471 0,475 0,472 45,02 Bì 500 g/mL 0,016 1000 g/mL 0,353 0,351 0,363 0,356 59,68 Bì 1000 g/mL 0,021 2000 g/mL 0,142 0,157 0,188 0,162 86,22 Bì 2000 g/mL 0,048 Kết đo độ hấp thu cao EAcủa trái dây Vác nồng độ Abs Abs Abs TB HTCO % DPPH Chứng 0,834 0,835 0,821 0,830 100 g/mL 0,649 0,644 0,647 0,647 22,09 250 g/mL 0,521 0,523 0,523 0,522 37,07 500 g/mL 0,347 0,348 0,348 0,348 58,11 Abs 114 1000 g/mL 0,155 0,185 0,150 0,163 80,32 2000 g/mL 0,059 0,062 0,068 0,063 93,61 Bì 2000 g/mL 0,01 Kết đo độ hấp thu cao n-butanolcủa trái dây Vác nồng độ Abs Abs Abs TB HTCO % Abs DPP H 0,834 0,835 0,821 0,830 50 g/mL 0,729 0,743 0,756 0,743 10,52 100 g/mL 0,645 0,655 0,655 0,652 21,49 250 g/mL 0,513 0,517 0,514 0,515 39,08 Bì 250 500 g/mL 0,406 0,406 0,405 0,406 52,09 Bì 500 0,009 0,008 115 1000 g/mL 0,289 0,289 0,268 0,282 68,19 Bì 1000 g/mL 0,018 XÁC NHẬN CỦA GIẢNG VIÊN HƯỚNG DẪN Họ tên sinh viên: Lê Kim Huyền Sinh viên lớp: Đại học Dược 8B Niên khóa: 2013 – 2018 MSSV: 13D720401110 Chuyên ngành: Dược học Đã thực đề tài khóa luận tốt nghiệp “Khảo sát đặc điểm vi học tác dụng chống oxy hóa dây Vác (Cayratia trifolia (L.) Domino)” hướng dẫn giảng viên Ths Đỗ Văn Mãi TP Cần Thơ, ngày 06 tháng 06 năm 2018 GIẢNG VIÊN HƯỚNG DẪN Ths Đỗ Văn Mãi 116 116 ... tài Khảo sát đặc điểm vi học tác dụng chống oxy hóa dây Vác ( Cayratia trifolia (L. ) Domino) , tiến hành với nội dung sau: - - Mơ tả đặc điểm hình thái, khảo sát vi học phận thân, lá, r ễ c dây. .. khả chống ung thư Từ th ực t ế đó, đ ề tài Khảo sát đặc điểm vi học tác dụng chống oxy hóa dây Vác ( Cayratia trifolia (L. ) Domino) , thực nhằm tìm kiếm nguồn s ản phẩm có khả chống oxy hóa. .. MỤC TỪ VI T TẮT ROS FR AO CCOH O•− Tác nhân phản ứng chứa oxy (Reactive Oxygen Species) Gốc tự (Free Radical) Chất chống oxy hóa (Anti oxydant) Chất chống oxy hóa Gốc superoxyd OH • Gốc hydroxyl