Bào chế chế phẩm dạng bột hòa tan hỗ trợ điều trị các bệnh về tim mạch từ nấm linh chi và cà phê tại khoa dược – điều dưỡng, trường đại học tâyđô

CHƯƠNG 1: MỞ ĐẦU/ ĐẶT VẤN ĐỀ Bệnh tim mạch nhóm bao gồm nhiều rối loạn tim, mạch máu, bao gồm: bệnh mạch máu cung cấp cho tim, bệnh liên quan đến mạch máu não, bệnh động mạch biên, bệnh thấp tim, bệnh tim bẩm sinh, huyết khối tĩnh mạch sâu thuyên tắc phổi Xã hội ngày phát triển giúp cho sống người nâng cao, việc dùng loại thuốc có nguồn gốc thiên nhiên ngày ưa chuộng Các thảo dược có nguồn gốc thiên nhiên có tác hại thấp khơng có, tác dụng tương đối bình hòa cần sử dụng cách tạo hiệu rõ rệt nhiều thuốc khơng có tác dụng chữa bệnh mà có tác dụng điều hòa âm dương giúp chữa bệnh mạn tính, cấp tính, nan y có hiệu cao Nghiên cứu thuốc hoạt chất có nguồn gốc thiên nhiên kết hợp với dạng bào chế phù hợp vấn đề quan tâm hàng đầu nhiều nhà khoa học giới Nấm Linh chi vị thuốc quý loài người nghiên cứu sử dụng từ lâu Trong sách “Bản thảo cương mục”, tác giả Lý Thời Trân chia nấm Linh chi thành “Lục bảo Linh chi” theo màu sắc xanh, trắng, đỏ, vàng, đen, tím khái quát tác dụng trị liệu Linh chi theo màu Trên lâm sàng, sơ thấy nấm Linh chi có tác dụng mức độ định số bệnh đau thắt ngực, bệnh động mạch vành, huyết áp dao động, viêm phế quản, hen, viêm gan mạn tính, thấp khớp, bệnh đường tiêu hóa, rối loạn mãn kinh làm tăng trí nhớ, minh mẫn Nấm Linh chi có vị nhạt, tính ấm(Đỗ Huy Bích ctv, 2006) Cà phê thức uống quen thuộc với người ngày Tuy nhiên, biết ngồi tác dụng phụ gây khó ngủ, nhịp tim nhanh sử dụng q liều cà phê cà phê lại có tác dụng trị bệnh sử dụng với liều lượng phù hợp Quả cà phê tươi có tác dụng hạ sốt, lợi tiểu Hạt cà phê rang chế biến thành đồ uống có tác dụng kích thích thần kinh trung ương, hệ tim mạch, lợi tiểu làm giãn trơn Cà phê dùng làm đồ uống dạng chiết hãm nước sôi từ bột cà phê rang dạng cà phê hòa tan Uống cà phê giúp tinh thần tỉnh táo, giảm cảm giác mệt mỏi, chữa phù thũng, giúp tiêu hóa (Đỗ Huy Bích ctv, 2006) Cà phê có ba dòng cà phê chè, cà phê vối cà phê mít; trồng tỉnh Đăk Lăk, Kon Tum, Gia Lai, Thanh Hoá, Lâm Đồng…(Luanvn.net, 2013) Ở Việt Nam năm gần Linh chi ưa chuộng sử dụng việc bảo vệ sức khoẻ, phòng ngừa bệnh nên xuất nhiều sản phẩm từ Linh chi: thuốc Linh chi dạng viên nén, trà túi lọc Linh chi, rượu Linh chi… Tuy nhiên sản phẩm so với yêu cầu ngày cao thị trường Chính việc 1 nghiên cứu, phát triển sản phẩm tiện lợi, hữu ích nhằm đáp ứng nhu cầu sử dụng cho người việc cần thiết Bên cạnh Linh chi với tác dụng trị liệu khái quát theo màu sắc giá thành khác việc chọn lựa loại linh chi phù hợp với mục đích nghiên cứu hỗ trợ điều trị bệnh lý tim mạch quan trọng Trong “Lục bảo Linh chi” (Lý Thời Trân, 1595) bật nấm Linh chi đỏ Nấm Linh chi đỏ biết đến khơng có tác dụng chữa bệnh mà xếp vào nhóm thượng dược cải lão hồng đồng Linh chi đỏ bật với thành phần hoá học quan trọng Polysaccharides, Adenisine,Alcaloid … Hiện nay, nấm Linh chi đỏ nghiên cứu trồng rộng rãi Việt Nam giá thành có phần ổn định phù hợp với mục đích nghiên cứu so với Linh chi khác Hiện nay, sử dụng dạng thuốc bào chế từ dược liệu xu hướng Khi công nghệ sản xuất tiên tiến, tận dụng nguồn dược liệu phong phú, đa dạng kết hợp với kỹ thuật bào chế đại cho đời nhiều sản phẩm song chưa đáp ứng yêu cầu ngày cao người Đề tài “Bào chế chế phẩm dạng bột hòa tan hỗ trợ điều trị bệnh tim mạch từ nấm linh chi cà phê khoa Dược – điều dưỡng, trường Đại học TâyĐô” thực với mong muốn đem lại sản phẩm có hiệu điều trị cao tiện lợi cách sử dụng cho người dùng Đặc biệt đối tượng mắc bệnh tim mạch Đề tài xây dựng với mục tiêu sau: Mục tiêu tổng quát Bào chế chế phẩm dạng bột hòa tan hỗ trợ điều trị bệnh tim mạch từ nấm linh chi cà phê khoa Dược – điều dưỡng, trường Đại học Tây Đô Mục tiêu cụ thể (1) Xây dựng cơng thức bào chế trà hòa tan có chứa dược chất từ thảo dược Nấm Linh chi đỏ cà phê có tác dụng hỗ trợ điều trị bệnh tim mạch (2) Xây dựng tiêu chuẩn nguyên liệu, thành phẩm trà hòa tan VINA-LINHCHI Yêu cầu đề tài  Kết hợp thảo dược quen thuộc với dạng bào chế đại dễ dùng, an toàn hiệu  Đánh giá cảm quan màu sắc mùi vị sản phẩm Chọn công thức tối ưu  Đánh giá chất lượng sản phẩm tiêu lý hóa, tiêu vi sinh cảm quan sau tháng bảo quản xem có thay đổi hay khơng so với sản xuất Nếu có thay đổi có nằm giới hạn cho phép không CHƯƠNG 2: TỔNG QUAN TÀI LIỆU TỔNG QUAN VỀ BỆNH TIM MẠCH 1.1 Định nghĩa 2 Thuật ngữ “bệnh tim” sử dụng để mô tả rối loạn hệ thống tim mạch (tức trái tim mạch máu) bẩm sinh mắc phải, có ảnh hưởng đến khả hoạt động bình thường tim Bệnh tim gọi bệnh tim mạch, bệnh tim mạch vành bệnh mạch vành Ở Việt Nam, 100 người chết bệnh tật có khoảng 25 người chết liên quan đến vấn đề tim mạch Con số có dấu hiệu gia tăng ngày (Phan Thị Băng Trâm ctv, 2016) H ình 2.1Bệnh tim mạch (suckhoedoisong.vn) 1.2 Nguyên nhân gây bệnh(Phan Thị Băng Trâm ctv, 2016) 1.2.1 Các nguyên nhân khách quan  Giới tính: nhìn chung, nam giới có nguy bị đau tim nhiều phụ nữ Tuy nhiên phụ nữ thời kỳ mãn kinh, nguy tăng cao sau tuổi 65, nguy mắc bệnh tim mạch nam giới phụ nữ  Di truyền: gia đình có tiền sử bệnh tim mạch, ví dụ cha mẹ anh chị em bạn gặp phải vấn đề tim mạch trước tuổi 55, bạn có nguy mắc bệnh tim mạch nhiều bình thường Ngồi yếu tố rủi ro dẫn đến nguy tim mạch cao huyết áp, tiểu đường béo phì mang tính di truyền  Tuổi tác: tuổi già yếu tố nguy bệnh tim mạch Càng lớn tuổi, hoạt động tim hiệu Thành tim dày lên, động mạch cứng lại khiến cho q trình bơm máu trở nên khó khăn, lý nguy mắc bệnh tim mạch gia tăng theo tuổi 1.2.2 Nguyên nhân chủ quan  Béo phì thừa cân: việc thừa cân góp phần gia tăng tổng mức cholesterol máu, đồng thời mang đến nguy huyết áp cao bệnh mạch vành Nếu cấp độ béo phì, lượng cholesterol tăng vọt, huyết áp đặc biệt cao kéo theo bệnh tiểu đường 3 Trong nhiều trường hợp, chứng béo phì chịu trách nhiệm cho hầu hết bệnh tật liên đới, đa phần bệnh tim mạch Có thể nói béo phì yếu tố nguy mang đến nhiều yếu tố nguy khác gây tim mạch  Nghiện thuốc lá: hầu hết người biết hút thuốc làm tăng nguy ung thư phổi, nhận ranó làm tăng đáng kể nguy mắc bệnh tim mạch Nghiên cứu cho thấy hút thuốc làm tăng nhịp tim, thắt chặt động mạch lớn làm cho nhịp tim bất thường, dẫn đếnloạn nhịp tim… khiến hoạt động tim hiệu trở nên khó khăn Việc hút thuốc làm tăng huyết áp tăng nguy đột quỵ người có sẵn chứng huyết áp cao Ngồi nicotine, hố chất khác có khói thuốc carbon monoxide có hại cho tim Những chất dẫn đến tích tụ mảng bám động mạch, ảnh hưởng đến cholesterol mức fibrinogen – yếu tố làm đông máu, điều khiến cho nguy đơng máu tăng dẫn đến đau tim Hình tim tử 2.2 Cơ bị hoại mạch máu bị tắc nghẽn (baomoi.com)  Thiếu vận động thể chất: người lười vận động có hội vận động thể chất có nguy mắc bệnh tim mạch cao người thương xuyên tập thể dục Việc hoạt động tập luyện đốt cháy calo, giúp kiểm soát mức cholesterol bệnh tiểu đường đồng thời hạ huyết áp Tập thể dục tăng cường dẻo dai cho tim làm cho động mạch linh hoạt Những người tích cực đốt cháy 500 – 3500 calo tuần cách tập thể dục hình thức vận động khác thường sống lâu người không tập thể dục Ngay việc tập thể dục với cừng độ trung bình đặn thường xuyên hữu ích  Cao huyết áp: chứng cao huyết áp dẫn đến nguy đau tim đột quỵ Nếu kết hợp thêm béo phì, nghiện thuốc cholesterol cao nguy bệnh tim hay đột quỵ 4 tăng lên đáng kể Huyết áp thay đổi tuỳ theo điều kiện vận động tuổi tác, bản, số huyết áp người lớn nghỉ ngơi nên mức 120/80mmHg  Cholesterol máu cao: cholesterol chất tương tự chất béo có sẵn máu Gan sản xuất cholesterol để hình thành màng tế bào tạo số hormone định Ngoài lượng cholesterol ra, thể nhận thêm lượng cholesterol khác từ thực phẩm dung nạp, thực phẩm đa phần có nguồn gốc động vật thịt, trứng, sản phẩm từ sữa…Mặc dù ta thường đổ lỗi cho lượng cholesterol thức ăn khiến cho số cholesterol máu tăng cao, thực tế thủ phạm lại chất béo bão hồ có thực phẩm Hãy cẩn thận điều này, có thực phẩm khơng chứa cholesterol chứa lượng lớn chất béo bão hoà khác Những loại thực phẩm chứa nhiều chất béo bão hòa thường thực phẩm có nguồn gốc bơ sữa thịt đỏ Các chất béo bão hoà làm gia tăng lượng cholesterol “xấu” (LDL – C), tạo mảng bám thành động mạch bắt đầu trình xơ vữa động mạch Khi mảng bám tích tụ động mạch vành cung cấp máu cho tim, nguy đau tim tăng cao  Tiểu đường: ước tính có đến 65% số người tiểu đường tử vong bệnh tim mạch Tiểu đường làm tăng nguy bệnh tim đột quỵ Một phần nguyên nhân bệnh tiểu đường làm ảnh hưởng đến cholesterol triglyceride, người bị tiểu đường bị huyết áp cao béo phì kèm theo, nguy cao Có thể thấy phần lớn nguyên nhân dẫn tới bệnh lý tim mạch thuộc nhóm yếu tố nguy thay đổi 1.3 Triệu chứng học bệnh tim mạch (Phan Thị Băng Trâm ctv, 2016) Mặc dù khám tim mạch thường tập trung vào tim, dấu hiệu ngoại biên quan trọng 1.3.1 Triệu chứng chức phận  Khó thở: thiếu oxy suy tim cản trở trao đổi khí (O CO2) phế nang - - mao mạch phổi Khó thở có nhiều mức độ: khó thở gắng sức; làm việc nhẹ; nghỉ ngơi; khó thở kịch phát ban đêm; khó thở hen tim, phù phổi cấp Khó thở khởi phát lên gắng sức gây tăng áp lực nhĩ trái tĩnh mạch phổi giảm oxy máu Tăng áp lực nhĩ trái tĩnh mạch phổi thường gặp rối loạn chức tâm trường thất trái (do phì đại, xơ hố bệnh màng ngồi tim) bít tắc van gây Đợt khởi phát nặng lên tăng áp lực nhĩ trái dẫn đến phù phổi Giảm oxy máu phù phổi luồng thơng tim 5 - Khó thở kịch phát ban đêm giảm nhẹ cách ngồi đứng lên, triệu chứng thường đặc biệt bệnh tim - Nhồi máu tim khiến người bệnh có cảm giác hết hơi, ngột ngạt, thở nhanh nông Đôi phải ngồi vùng dậy để thở Tim suy dễ gây ứ máu tiểu tuần hoàn tim phổi, ảnh hưởng trực tiếp đến hoạt động phế nang Khi vận động gắng sức, chất dịch ứ thoát đột ngột từ mạch máu tiểu tuần hoàn tràn phế nang gây khó thở - Nhiều trường hợp bệnh tim gây khó thở kéo dài, ban đầu cảm giác khó thở gắng sức lên dốc, mang vác nặng, ngược gió lớn Sau này, khó thở thương xun Tuỳ theo tình trạng suy tim mà bệnh nhân bị khó thở nhiều hay ít, khơng có kịch phát khó thở thường xun, làm khó thở Phổi nhiều ran ướt, chụp X –quang thấy tim to  Đau ngực: đau vùng trước tim hay đau sau xương ức với nhiều tính chất khác Đau nhói kim châm gặp rối loạn thần kinh tim, suy nhược thần kinh tuần hoàn - Đau thắt ngực đau thắt bóp, nóng rát vùng ngực; có lan lên cổ, sau lưng lan theo mặt cánh tay trái tới đầu ngón tay số bàn tay trái Khi thiểu động mạch vành tim, đau kéo dài – 25 phút hết đau dùng thuốc giãn động mạch vành tim (nitroglycerin) Nếu đau thắt ngực nhồi máu tim cấp tính đau ngực nặng hơn, thời gian kéo dài (hơn 15 phút), thuốc giãn động mạch vành tác dụng cắt đau - Nguyên nhân thường gặp đau thắt ngực tim thiếu máu tim cục Đau thường mô tả âm ỉ, nhức nhối cảm giác ép vào, siết chặt ngột ngạt đau dao đâm co thắt lại, thường nhận thức cảm giác bứt rứt đau Đau thiếu máu tim cục thường giảm vòng 30 phút, kéo dài - Những đau kéo dài thường tương ứng với nhồi máu tim, đau thường kèm cảm giác bứt rứt lo lắng Vị trí đau thường sau xương ức vùng trước tim bên trái Đau thiếu máu cục thường gắng sức, nhiệt độ lạnh, sau bữa ăn, stress kết hợp yếu tố thúc đẩy thường giảm nghỉ ngơi - Phì đại thất trái bệnh van động mạch chủ phát sinh đau thiếu máu đau điển hình Phình tách động mạch chủ gây đau xé lồng ngực cách đột ngột thường lan sau lưng  Hồi hộp đánh trống ngực: tình trạng tim đập nhanh, mạnh, dồn dập Đây - phản ứng bù đắp thiếu máu (thiếu oxy) suy tim Nhận thấy nhịp đập tim tượng bình thường phản ánh tăng cung lượng tim tăng cung lượng nhát bóp tim bệnh nhân với nhiều tình trạng bệnh ngồi tim (gắng sức, thiếu máu, lo âu…) Nó bệnh 6 tim mạch làm tăng thể tích nhát bóp (hở van tim, nhịp chậm) dấu hiệu rối loạn nhịp tim - Nếu nhịp tim bất thường kết hợp giảm đáng kể huyết áp cung lượng tim, có thể, đặc biệt tư đứng thẳng, làm ảnh hưởng tới dòng máu lên não, gây choáng váng, mờ mắt, ý thức (ngất) - Ngất tim thường gặp ngừng nút xoang block đường nút xoang, block nhĩ thất tim nhanh thất rung thất  Phù: bệnh tim, phù tăng áp lực nhĩ phải gây Suy tim phải thường suy tim trái dấu hiệu suy tim phải rõ rệt Các nguyên nhân khác phù gồm bệnh màng tim, bệnh van tim bên phải chứng tim phổi mạn Phù chi tăng chiều, kèm tiểu ít, sau có cổ chướng, tràn dịch màng phổi, màng tim…  Ho ho máu: ho khan ho đờm, ho máu nhĩ trái to chèn dây thần kinh quặt ngược, tăng áp lực ứ trệ mao mạch phổi, hen tim, phù phổi cấp, tắc ĐM phổi…Khi máu phổi không kịp tim, tắc lại phổi làm giảm chức trao đổi khí thể Máu ứ gây tượng tăng tiết dịch phế quản, phế nang làm cho nhung mao đường hô hấp chuyển động mạnh, tạo thành phản xạ ho Máu ứ TM khí quản tế bào mạch máu phế nang bị tổn thương gây tượng ho máu Vậy nên, xuất ho khan, ho máu kéo dài không nên bỏ qua nguy mắc bệnh tim mạch  Tím tái da niêm mạc: thiếu oxy tăng HbCO máu, gặp có bệnh tim bẩm sinh có luồng máu thơng (shunt) từ phải sang trái (máu TM sang hồ vào máu ĐM) Ngồi gặp suy tim nặng, viêm màng tim co thắt (hội chứng Pick)  Các triệu chứng khác: - Ngất lịm: giảm dòng máu não nhịp chậm; block nhĩ thất độ II, III; hẹp khít lỗ van ĐM chủ; hẹp lỗ van lá; hở van động mạch chủ… - Người hay cảm thấy mệt mỏi: sau chơi thể thao, chạy hay lên dốc, cảm thấy chóng mặt, nhức đầu, mệt mỏi tim khơng cung cấp đủ máu giàu oxy đến quan thể Do đó, khơng nên bỏ qua nguy bệnh tim thấy dấu hiệu lạ - Đau vùng thượng vị: đau vùng thượng vị trước sau bữa ăn dấu hiệu đau dày thiếu máu tim Ngồi ra, dấu hiệu nhồi máu tim vùng sát hoành - Khám phổi: nghe thấy ran hai đáy phổi dấu hiệu suy tim ứ trệ, bệnh phổi khu trú gây Ran ran ngáy chứng tỏ bệnh phổi tắc nghẽn, xảy suy tim trái Tràn dịch màng phổi với gõ đục hai đáy phổi rì rào phế nang giảm thường gặp suy tim ứ trệ 7 - Mạch đập vùng trước tim: nhấp nhô cạnh ức thường chứng tỏ phì đại thất trái, tăng áp ĐM phổi (TTh > 50mmHg) nhĩ trái to Xung động mỏm thất trái kéo dài rộng, chứng tỏ phì đại rối loạn chức tim Nếu rõ rệt không kéo dài, xung động mỏm chứng tỏ q tải thể tích cung lượng tim cao - Bị đau vùng trái hay ngực: dấu hiệu rõ ràng bệnh tim mà người bệnh cảm nhận Các triệu chứng đau xuất thường thiểu ĐM vành khiến chúng không vận chuyển đủ máu ni tim gây kích thích đầu dây thần kinh gây cảm giác đau vùng trước ngực - Bị đau vai, tay trái: xuất triệu chứng đau vai tay trái dễ làm liên tưởng tới bệnh xương khớp bệnh lý mạch vành gây triệu chứng đau Cảm giác đau, ran ran lan từ ngực xuống cánh tay, ngón tay, vùng cổ, hai bên bả vai 1.3.2 Triệu chứng thực thể  Triệu chứng nhìn: - Màu sắc da, niêm mạc: tím, tái, vàng, ban đỏ vòng, xuất huyết da… - Ngón tay, ngón chân dùi trống: bệnh tim – phổi mạn tính, bệnh tim bẩm sinh… - Biến dạng lồng ngực: sụn sườn xương ức vùng trước tim gồ cao - TM cảnh căng phồng, đập nảy suy tim phải - ĐM cảnh đập mạnh hở van ĐM chủ - Vị trí mỏm tim thay đổi so với bình thường: lên cao thất phải to, xuống thấp thất trái to, liên sườn IV, V đường đòn trái thất phải thất trái to - Mỏm tim đập mạnh hở van ĐM chủ, Basedow Không thấy mỏm tim đập tràn dịch màng tim  Triệu chứng sờ: sờ rung miu kết hợp bắt mạch để xác định rung miu TTh hay TTr: - Rung miu TTh rung miu mạch nảy (thì TTh) - Rung miu TTr rung miu mạch chìm (thì TTr) - Rung miu TTh hõm ức liên sườn II cạnh ức phải liên sườn III cạnh ức trái gặp hẹp lỗ van ĐM chủ - Rung miu TTh liên sườn II cạnh ức trái hẹp lỗ van ĐM phổi; ống thơng ĐM - Rung miu TTh liên sườn III, IV cạnh ức trái thông liên nhĩ, thông liên - Rung miu TTh mỏm tim hở van - Rung miu TTr mỏm tim hẹp lỗ van - Sờ mạch (bắt mạch): đập hay không đập (nếu tắt ĐM), giảm đập (hẹp mạch), nảy nhanh xẹp nhanh (hở van động mach chủ)… - Đo huyết áp động mạch theo phương pháp Korotkoff (dùng bao hơi)  Triệu chứng gõ: gõ xác định vùng đục tương đốivà tuyệt đối tim, xác định - cung tim đối chiếu với trường hợp bình thường: Nhĩ phải giãn: gõ thấy cung phải vượt đường cạnh ức phải 0,5 – 1cm 8 - Thất phải giãn: đường nối góc tâm hồnh phải đến mỏm tim > – 11cm, mỏm tim lên cao liên sườn IV – V đường đòn trái - Thất trái giãn: cung trái liên sườn IV – V đường đòn trái, mỏm tim xuống - Diện tim to toàn (tất cung tim lớn bình thường); gặp tim to tồn bộ, tràn dịch màng tim…  Triệu chứng nghe: - Vị trí nghe: • Vùng van lá: nghe mỏm tim thấy tiếng thổi bệnh van • Vùng van lá: nghe mũi ức - Tiếng tim: • Tiếng thứ (T1) đanh gặp bị hẹp lỗ van lá; tiếng T1 mờ gặp hở van lá, hở van lá, tràn dịch màng ngồi tim… • Tiếng thứ (T2): van ĐM chủ van ĐM phổi đóng lúc mạnh bình thường gọi T2 đanh gặp bệnh hẹp lỗ van lá, tăng huyết áp ĐM… • Tiếng thứ (T3): gặp người bệnh tim nặng, buồng tim giãn to Khi nghe thấy T1, T2, T3 tạo thành nhịp tiếng gọi nhịp ngựa phi • Tiếng lắc mở van lá: bệnh hẹp lỗ van lá, van bị xơ cứng, vơi hố nên mở tạo tiếng clack • Tiếng click: gặp bệnh sa van • Tiếng cọ màng tim: viêm màng tim - Tiếng thổi: • Tiếng thổi TTh: nghe mạch nảy (ở TTh) ∗ Tiếng thổiTTh mỏm tim: hở van ∗ Tiếng thổi TTh liên sườn II cạnh ức phải liên sườn III cạnh ức trái, lan lên hố thượng đòn phải hõm ức, tiếng thổi xuất hẹp van ĐM chủ ∗ Tiếng thổi TTh liên sườn II cạnh ức trái lan lên hố thượng đòn trái xương đòn trái, tiếng thổi xuất hẹp lỗ van ĐM phổi ∗ Tiếng thổi TTh mũi ức hở van ∗ Tiếng thổi TTh liên sườn III – IV cạnh ức trái lan xung quanh (hình nan hoa) bệnh thông liên nhĩ ∗ Tiếng thổi TTh liên sườn IV – V cạnh ức trái thơng liên • Tiếng thổi TTr: tiếng thổi xuất thời kỳ TTr (mạch chìm) ∗ Tiếng thổi TTr mỏm tim hẹp lỗ van ∗ Tiếng thổi TTr liên sườn II cạnh ức phải liên sườn III cạnh ức trái hở van ĐM chủ ∗ Tiếng thổi TTr liên sườn II cạnh ức trái hở van ĐM phổi • Tiếng thổi liên tục: tiếng thổi TTh TTr ∗ Tiếng thổi liên tục liên sườn II – III cạn ức trái bệnh tim bẩm sinh ∗ Tiếng thổi liên tục gặp bệnh thông ĐM – TM, máu từ ĐM qua lỗ thông sang TM 9 1.4 Các bệnh tim mạch thường gặp(Nguyễn Hoàng Nam, 2012) 1.4.1 Bệnh động mạch vành (CAD)  CAD gọi bệnh tim xơ vữa ĐM Đây mỡ đóng lại thành mạch máu gọi mảng xơ vữa làm cho mạch máu bị cứng Khi mảng đóng đầy, máu di chuyển mạch khó khăn, thành mạch cứng nên độ co giãn dẫn đến vỡ mạch máu, làm đau thắt ngực, tim bị hoại tử,…  Các triệu chứng ban đầu CAD nhiều mơ hồ, thường cảm giác nặng ngực hay đau thắt ngực bên trái Trong chun mơn gọi đau thắt ngực khơng ổn định Cơn đau xuất xúc động, gắng sức thường xuất vào buổi sáng Cơ thể kèm theo cao huyết áp gây nhức đầu, chóng mặt, cảm giác khó thở  Tần suất đau ngày tăng cường độ đau ngày nặng đưa đến nhồi máu tim cấp không điều trị kịp thời Tỉ lệ tử vong nhồi máu tim cấp cao, hoàn cảnh khả cấp cứu tim mạch nhiều bệnh viện Việt Nam nhiều hạn chế thiếu nhân lực, trang thiết bị việc vận chuyển bệnh nhân từ nơi đến bệnh viện cấp cứu nhiều hạn chế 1.4.2 Tai biến mạch máu não  Não quan nhận máu nhiều hệ tuần hoàn tế bào thần kinh tế bào nhạy cảm với tình trạng thiếu oxy Chỉ cần thiếu oxy phút tế bào não chết khơng có khả hồi phục  Tai biến mạch máu não (cơn đột quỵ) xảy nguồn cung cấp máu cho phần não bị gián đoạn suy gảm nghiêm trọng, làm oxy dinh dưỡng mơ não Trong vòng vài phút, tế bào não bắt đầu chết dẫn đến di chứng nặng nề cho bệnh nhân tử vong Các thể bệnh tai biến mạch máu não hay gặp co thắt mạch máu não, thiếu máu não thoáng qua, nhồi máu não, vỡ mạch máu não… Và nặng xuất huyết ạt gây ngập não thất làm bệnh nhân tử vong vòng – 1.4.3 Bệnh động mạch ngoại biên (PAD)  Động mạch ngoại vi hệ thống gồm nhiều ĐM vừa nhỏ, có nhiệm vụ đưa máu từ tim nuôi phận thể Đặc biệt tứ chi Bệnh viêm tắc mạch ngoại vi có thể: thể Buerger tình trạng viêm lớp thành,xảy bệnh nhân trẻ 40 tuổi, nghiện thuốc nặng  PAD thứ hai hay gặp tình trạng viêm tắc ĐM xơ vữa ĐM, xảy người bị bệnh cao huyết áp có rối loạn chuyển hoá mỡ Tổn thương xảy lớp nội mạc với mảng xơ vữa làm hẹp lòng ĐM, gây thiếu máu ngoại vi  Các triệu chứng ban đầu bệnh mơ hồ Thường bắt đầu tình trạng lặc cách hồ Tức bệnh nhân đoạn vài trăm mét đau nhói sau bắp chân, đau khiến bệnh nhân phải ngồi nghỉ khoảng – 10 phút sau hết đau 10 10  Chuẩn bị mẫu: - Dd thử: cân khoảng 2g bột thô dược liệu, thêm 30ml MeOH, đun hồi lưu 30 phút, lọc Bốc dịch lọc cách thuỷ đến cạn Hoà cắn 2ml MeOH - Dd đối chiếu: cân khoảng 2g bột thô Linh chi (mẫu chuẩn) tiến hành chiết mẫu thử (hoặc dd acid ganoderic A chuẩn 0,1 mg/ml) - Thuốc thử: H2SO4 10%/EtOH  Tiến hành: chấm riêng biệt lên mỏng l dd thử dd đối chiếu Triển khai sắc ký đến dm 10cm đến 12cm, lấy mỏng ra, để khô khơng khí, quan sát mỏng bước sóng 254nm, 366nm sau phun thuốc thử màu  Yêu cầu: sắc ký đồ dd thử phải có vết có màu sắc giá trị R f với vết sắc ký đồ dd đối chiếu 2.2.1.4 Xác định độ ẩm  Độ ẩm không 17%  Phương pháp: thực theo phương pháp khối lượng Cân khối lượng nguyên liệu trước sau sấy, khối lượng sau sấy xem khối lượng nước tự có mẫu, từ tính độ ẩm mẫu  Tiến hành: Sấy bì đựng mẫu thử tủ sấy áp suất thường thời gian 30 phút Cân xác định khối lượng bì m0 (g) Cân khoảng 1g bột dược liệu, dàn mỏng, sấy nhiệt độ 100 oC đến khối lượng không đổi Sau sấy làm nguội tới nhiệt độ phòng bình hút ẩm có silica gel cân Xác định khối lượng cốc mẫu sau sấy m’ (g) Xác định thời gian làm khô giới hạn độ ẩm nấm Linh chi Xác định độ ẩm tương đối nguyên liệu theo công thức sau: Độ ẩm (%) = x 100% Trong đó: mo: khối lượng cốc cân sấy khô đến khối lượng không đổi m: khối lượng cốc bột nấm Linh chi trước sấy m’: khối lượng cốc bột nấm Linh chi sau sấy đến khối lượng không đổi 2.2.1.5 Xác định tro tồn phần  Khơng q 3,0%  Tiến hành theo phương pháp 1, phụ lục 9.8 DĐVN IV Cho - 3g bột đem thử vào chén sứ chén platin nung cân bì Nung nhiệt độ khơng q 450oC tới khơng carbon, làm nguội cân Bằng cách mà tro chưa loại hết carbon dùng nước nóng cho vào khối chất than hóa, dùng đũa thủy tinh khuấy đều, lọc qua giấy lọc không tro Rửa đũa thủy tinh gấy lọc, tập trung nước rửa vào dịch lọc Cho giấy lọc cắn vào chén nung đến thu tro màu trắng gần trắng Hợp dịch lọc vào cắn chén nung, đem bốc đến khô nung nhiệt độ không q 450 oC đến khối lượng khơng đổi Tính tỷ lệ phần trăm tro toàn phần theo dược liệu làm khơ khơng khí 54 54 2.2.1.6 Xác định tro không tan acid  Không 0,5%  Tiến hành theo phương pháp 1, phụ lục 9.7 của DĐVN IV Cho 25ml acid HCl 2M (TT) vào tro tồn phần, đun sơi phút, lọc để tập trung chất không tan vào phễu thủy tinh xốp cân bì, vào giấy lọc khơng tro, rửa nước nóng đem nung 500 oC đến khối lượng khơng đổi Tính tỷ lệ phần trăm tro không tan acid so với dược liệu làm khơ khơng khí 2.2.1.7 Chất chiết dược liệu  Không thấp 3,0 % tính theo dược liệu khơ kiệt  Tiến hành theo phương pháp chiết nóng, phụ lục 12.10 DĐVN IV Cân xác khoảng – 4g bột duowjclieuej có cỡ bột nửa thơ cho vào bình nón 100 250ml Thêm xác 50 100ml nước, đậy kín Cân xác định khối lượng Để yên giờ, sau đun sơi nhẹ hồi lưu giơ, để nuội, lấy bình nón Đậy kín, cân xác định lại khối lượng Dùng nước để bổ dung phần khối lượng bị giảm, lọc qua phễu lọc khô vào bình hứng khơ thích họp Lấy xác 25ml dịch lọc vào cốc thủy tinh cân bì trước Cô cách thủy đến cắn khô, cắn thu sấy ỏ 105oC Lấy để nguội bình hút ẩm 30 phút Cân nhanh để xác định khối lượng cắn Tính phần trăm lượng chất chiết nước theo dược liệu khô 2.2.2 Đánh giá nguyên liệu bột cà phê chè Đánh giá yêu cầu cảm quan, yêu cầu lý – hoá cà phê bột theo tiêu chuẩn quốc gia 5251:2015 nêu mục 5.2 – chương Bố trí thí nghiệm: 2.2.2.1 Yêu cầu cảm quan Quan sát đánh giá tiêu màu sắc, mùi, vị, trạng thái, cà phê pha bột cà phê trình bày bảng 2.8 2.2.2.2 Xác định độ mịn  Tiến hành theo TCVN 10821:2015  Thiết bị, dụng cụ: cân phân tích, rây (cỡ lỗ 0,56 mm 0,25 mm, lỗ tròn vuông)  Cách tiến hành: Lắp rây theo thứ tự rây lỗ nhỏ dưới, rây lỗ lớn trên, nắp đậy rây, đáy rây Cân 100 g mẫu thử cho vào rây, lắc tròn sau vỗ nhẹ vào thành rây Cân phần cà phê bột lọt qua rây cỡ lỗ 0,56 mm phần cà phê bột rây cỡ lỗ 0,25 mm Phần cà phê bột lỗ rây tính theo loại rây  Tính kết quả: 55 55 Tỷ lệ cà phê bột lọt qua rây cỡ lỗ 0,56 mm, X 1, tính phần trăm khối lượng, tính cơng thức (1): X1 = x 100 (1) Tỷ lệ cà phê bột giữ lại rây cỡ lỗ 0,25 mm, X 2, tín phần trăm khối lượng, tính công thức (2): X2 = x 100 (2) Trong đó: a: khối lượng cà phê bột lọt qua rây cỡ lỗ 0,56 mm,tính gam (g); b: khối lượng cà phê bộtgiữ lại rây cỡ lỗ 0,25 mm, tính gam (g); m: khối lượng mẫu thử, tính gam (g) Kết cuối trung bình cộng hai phép xác định song song với hai số không lớn 0,5% 2.2.2.3 Xác định độ ẩm  Tiến hành theo TCVN 7035:2002 (ISO 11294:1994)  Thiết bị, dụng cụ: tủ sấy, đĩa (làm từ kim loại thủy tinh, có nắp), bình hút ẩm, cân phân tích  Cách tiến hành: - Chuẩn bị đĩa: Sấy khô đĩa nắp tủ sấy 103 0C Đặt đĩa nắp từ tủ sấy vào bình hút ẩm để nguội đến nhiệt độ phòng Cân đĩa nắp xác đến 0,1mg - Mẫu thử: cho khoảng g mẫu thử vào đĩa Đậy nắp lên đĩa, cân đĩa, nắp mẫu thử xác đến 0,1 mg - Phép xác định: Đặt đĩa chứa phần mẫu thử, mở nắp đặt bên cạnh bên đĩa vào tủ sấy nhiệt độ 1030C sấy khô ± 0,1 Lấy đĩa ra, đậy nắp lại đặt vào bình hút ẩm Để đĩa, nắp mẫu chứa bên nguội đến nhiệt độ phòng cân xác đến 0,1 mg  Biểu thị kết quả: Lượng hao hụt 103oC, biểu thị phần trăm khối lượng mẫu, tính cơng thức: 56 56 x 100% Trong đó: mo khối lượng đĩa nắp, tính gam; m1 khối lượng đĩa, phần mẫu thử nắp trước sấy, tính gam; m2 khối lượng đĩa, , phần mẫu thử nắp sau sấy, tính gam 2.2.2.3 Xác định hàm lượng chất tan nước  Theo TCVN 5252:1990  Dụng cụ thiết bị: Cân phân tích, cốc thuỷ tinh chịu nhiệt 300 ml, nước cất, bếp cách thủy, chén sứ miệng rộng, bình định mức 200 ml, phễu thuỷ tinh, giấy lọc, tủ sấy, pipet 25 ml, bình hút ẩm  Cách tiến hành: Cho 10 g mẫu vào cốc 300 ml Đổ 100 ml nước cất đun sôi vào cốc Tiếp tục đun phút Cho dd vừa đun vào bình định mức 200 ml Dùng nước cất rửa cốc cho nốt vào bình Làm nguội đến 200C vòi nước Cho thêm nước cất vào đến vạch định mức Lắc bình 2-3 phút Để lắng Lọc giấy lọc qua bình khác Dùng pipet 25 ml hút nước trích ly lọc vào chén sứ biết khối lượng Làm bay bếp cách thuỷ đến khô Mang sấy chén sứ có chất tan tủ sấy nhiệt độ 90-950C 2h30 phút Làm nguội bình hút ẩm cân  Tính tốn kết quả: Tỷ lệ chất hồ tan nước (X3) tính phần trăm theo cơng thức: Trong đó: A: khối lượng chất tan, tính g B: thể tích bình định mức, tính ml G: lượng nước trích ly mang sấy, tính ml m: khối lượng mẫu, tính g 57 57 b: độ ẩm mẫu mang phân tích, tính % Nếu với thể tích bình định mức 200 ml lượng mẫu phân tích 10 g phần lượng nước mang sấy 25 ml công thức là: Làm mẫu song song, kết cuối trung bình cộng lần xác định Cho phép sai số 0,1 % 2.2.2.4 Xác định hàm lượng tro tổng số  TCVN 5253:1990  Tiến hành thử: cân 5g cà phê mẫu cho vào chén sứ biết khối lượng Dàn mẫu đáy chén đốt nhẹ bếp điện mẫu cháy hết Chuyển chén sứ vào đốt lò nung nhiệt độ 550 đến 6000C 30 phút, đến mẫu tro hố hồn tồn, có màu trắng màu trắng xám màu xám Làm nguội chén sứ bình hút ẩm khoảng 40 phút đem cân Làm lặp lại q trình nung mẫu khối lượng khơng đổi  Tính tốn kết quả: Hàm lượng tro tổng số mẫu (X) tính phần trăm theo cơng thức: Trong đó: A: khối lượng mẫu dùng để phân tích, tính g B: khối lượng tro lấy được, tính g b: độ ẩm mẫu mang phân tích, tính % Làm hai mẫu song song, kết cuối dùng trung bình cộng hai lần xác định, sai số phép không 0,2% 2.2.2.5 58 Xác định hàm lượng tro không tan acid clohydric 58  Theo TCVN 5253:1990  Cách tiến hành: Cho vào chén sứ có đựng tro thu theo mục 2.2.2.5 từ 15 đến 20ml acit HCl 10%, đun nhẹ bếp điện có lưới amiăng sơi Sau lọc qua giấy lọc khơng có tro Cân giấy lọc rửa nước cất đun sôi đến nước lọc không tạo nên vẩn đục cho tác dụng với bạc nitrat Giấy lọc cặn cho vào chén sứ nung sẵn để nguội cân Sấy khô nung 30 phút 9000C Làm nguội chén bình hút ẩm đến nhiệt độ phòng cân lại Phần lại sau nung hàm lượng tro không tan  Tính tốn kết Hàm lượng tro khơng tan axit clohyđric (Y), tính phần trăm theo cơng thức: Trong đó: Bk : khối lượng tro khơng tan nhận được, tính g A : khối lượng mẫu dùng để phân tích, tính g b : độ ẩm mẫu mang phân tích, tính % Làm hai mẫu song song Kết cuối trung bình cộng lần xác định Cho phép sai số khơng q 0,01% 2.2.3 Trích ly hoạt chất sinh học tạo cao Linh chi Tiến hành chiết nấm Linh chi, từ thu cao lỏngLinh chi, phục vụ cho giai đoạn phối hợp với cà phê Sử dụng phương pháp trích ly cách thuỷ Tiến hành q trình chiết Linh chi theo hình 3.1 59 59 Nguyên liệu nấm Linh chi Xử lý nguyên liệu: d 2mm Nguyên liệu/dm : 1/20 Ngâm Siêu âm 20 phút tần số 20kHz Trích ly: Lần nhiệt độ 90oC, 120 phút Lần nhiệt độ 90oC, 120 phút Lọc Bã trích ly lần Thu dịch Cơ dịch Cao lỏng Linh chi Hình 3.1 Quy trình trích ly hoạt chấtvà tạo cao lỏng nấm Linh chi Thuyết minh quy trình:  Xay, nghiền: nấm Linh chi đảm bảo chất lượng, chủng loại nghiền nhỏ đến kích thước d 2mm Trộn nguyên liệu với dm (nước) tỷ lệ 1/20, ngâm thời gian 90 phút điều kiện nhiệt độ thường, sau siêu âm thời gian 20 phút tần số 20 kHz  Trích ly: nồi chiết cách thuỷ, nhằm tách tối đa hoạt chất sinh học hợp chất hoà tan có nấm Linh chi Trích ly lần nhiệt độ 90oC trong120 phút Trích ly lần với bã chiết lần đem trộn với dm tỷ lệ 1/20, trích lý nhiệt độ 90 oC trong120 phút  Lọc dịch chiết: nhằm loại cặn, bã khỏi dịch chiết để thu dịch chiết chứa hợp chất hoà tan Dịch chiết lọc giấy lọc thu dịch chiết 60 60  Cô dịch chiết: sau lọc tiến hành cô dịch chiết để thu cao lỏng có tỷ lệ quy ước (1ml cao lỏng tương ứng với 1g dược liệu) 2.2.4 Chiết xuất tạo cao cà phê Cà phê bột nguyên chất sau tiến hành đánh giá cảm quan yêu cầu lý – hoá đem chiết với dm nước nóng Từ tài liệu tham khảo điều kiện thiết bị, dụng cụ phòng thí nghiệm, tiến hành chiết cao lỏngcà phê theo hình 3.2 Bột cà phê Nước sơi Chiết Lọc Thu dịch Cô dịch Cao lỏng cà phê Hình 3.2 Quy trình chiết xuất hình thành cao cà phê Tiến hành: trước chiết ta cần đảm bảo phin ly tách sẽ, khô Cà phê chiết với tỷ lệ nguyên liệu/dm 1:16 đến 1:18 Nhiệt độ nước 91 – 96oC Cho cà phê vào phin, cho thêm 1/3 lượng nước sôi để bột cà phê thấm nước Sau cho thêm 2/3 nước sơi lại vào đậy nắp phin ta thu dịch Dịch chiết sau đem lọc qua giấy lọc thu dịch lọc Tiến hành đặc dịch lọc hình thành cao đặc cà phê 2.2.5 Định lượng hoạt chất cao lỏng 2.2.5.3 Định lượng cao lỏng nấm Linh chi • Định lượng Ps phương pháp UV – VIS Từ tài liệu tham khảo phương pháp định lương Ps sau: 61 61 Bột dược liệu Bã dược liệu V ml H2O, 100oC, Dịch nước 200ml EtOH 96o, 2oC, để 24 Dịch EtOH Ps thơ Hình Quy trình chiết Ps nấm Linh chi  Cân xác khoảng 5g bột nấm Linh chi, cho vào bình cầu 250ml, thêm 100ml nước, đuun hồi lưu 100oC vòng Lọc nóng, tiếp tục thêm 100ml nước vào đun hồi lưu khoảng 1,5 lọc Tiếp tục đun hổi lưu với 100ml nước 1,5 Gộp dịch chiết, cách thuỷ 50ml Thêm 200ml EtOH vào, khuấy Để lạnh 2oC 24 Ly tâm 3500 vòng/phút, 10 phút, thu tủa Ps thô Cân xác định khối lượng Ps thô Tiến hành đo quang để xác định hàm lượng Ps tinh khiết  Chuẩn bị mẫu định lượng: - Mẫu trắng: hút 2ml phenol 5% EtOH, cho vào bình nón nút mài 50ml, thêm 10ml dd acid H2SO4 đđ vào, lắc Đun cách thuỷ 70oC 10 phút - Mẫu chuẩn: cân xác hồ tan khoảng 25 mg D-glucose vừa đủ 250ml nước cất (dd A có nồng độ 0,1 mg/ml) Pha lỗng dd A thành xác dd A 1, A2, A3, A4, A5 có nồng độ lần lượt: 0,01 mg/ml; 0,02 mg/ml; 0,03 mg/ml; 0,04 mg/ml; 0,06 mg/ml Hút ml dd A, A1, A2, A3, A4, A5 cho vào bình nón nút mài 50ml, them 2ml phenol 5% vào 10 ml acid H2SO4 đđ , lắc Đun cách thuỷ 70oC 10 phút - Mẫu thử: hoà tan 10mg Ps 100ml nước cất (dd B) Hút 2ml dd B cho vào bình nón nút mài 50ml, them 2ml phenol 5% 10ml acid H 2SO4 đđ , lắc Đun cách thuỷ 70oC 10 phút  Quét phổ bước sóng 490nm để có độ hấp thụ cực đại Hàm lượng Ps nấm Linh chi tính dựa vào phương trình hồi quy dãy tuyến tính 62 62 • Định lượng GAA phương pháp HPLC: Sau tham khảo tài liệu kết nghiên cứu đề tài khác nhau, quy trình phân tích GAA tiến hành sau:  Điều kiện HPLC: - Cột sắc ký Gemini C18 (250 x 4,6 mm, m) - Bước sóng phát hiện: 254 nm - Nhiệt độ cột: 30oC - Tốc độ dòng: 1,3 ml/phút - Thể tích tiêm: 20 - Thời gian phân tích: 40 phút - Pha động: acetonitrile – acid acetic 1% (30:70)  Chuẩn bị mẫu: - Mẫu thử: cân xác khoảng 2g bột nấm cho vào bình nón nút mài 250ml, thêm 40ml dd NaHCO3 5% siêu âm khoảng giờ, sau chiết lấy dịch kiềm Tiếp tục thêm 40ml dd NaHCO3 5% vào cắn siêu âm khoảng 30 phút chiết dịch kiềm Tiếp tục siêu âm cắn với 20ml dd NaHCO 5% 30 phút Tập trung dịch chiết kiềm, acid hoá chlorofoem lần (40 x 30 x 30ml) Tập trung dịch chloroform bay đến cắn Hoà cắn 20ml MeOH Lọc qua giấy lọc Milipore 0,45 m - Mẫu trắng: MeOH 100% - Dd đối chiếu: cân xác khoảng 10mg GAA cho vào bình định mức 20ml, hồ tan khoảng 15ml MeOH, sau thêm MeOH vừa đủ thể tích, lắc (dd có nồng độ khoảng 0,5 mg/ml)  Hàm lượng acid GAA nấm Linh chi tính theo đường chuẩn theo cơng thức: X = x Cc x x p x100 Trong đó: X: hàm lượng acid GAA có dược liệu (%) Sc: diện tích đỉnh mẫu chuẩn St: diện tích đỉnh mẫu thử Cc: nồng độ mẫu chuẩn (mg/ml) K: độ pha loãng mẫu đo m: khối lượng cân dược liệu (mg) h: độ ẩm dược liệu p: độ tinh khiết chất chuẩn (%) 2.2.5.4 Xác định hàm lượng caffein  Tiến hành theo TCVN 9723:2013  Thuốc thử: - Metanol: loại dùng cho HPLC - 63 Magie oxit (MgO): loại nặng, có chất lượng cao 63 - Cafein: dạng khan tinh khiết - Pha động: 24 % phần thể tích metanol nước Chuyển 240 ml metanol vào bình định mức vạch lít Thêm nước đến vạch, trộn lọc qua lc c l 0,45 àm - Dd chun cafein: Dd gốc: tương ứng với 200 mg/l Cân (0,200 ± 0,100) g cafein dạng khan vào bình định mức lít Thêm nước ấm đến nửa bình Xoay bình để hòa tan cafein, để nguội đến nhiệt độ phòng, thêm nước đến vạch trộn Dung dịch bền tháng bảo quản +4 oC Bảo quản dung dịch tủ lạnh • Dd chuẩn pha lỗng cà phê thơng thường: tương ứng với khoảng 40 mg/l Dùng pipet lấy 50 ml dd chuẩn gốc cafein cho vào bình định mức 250 ml Thêm nước đến vạch trộn Chuẩn bị dung dịch chuẩn pha lỗng ngày sử dụng • Đường chuẩn: sử dụng từ ba đến năm điểm đường chuẩn tùy chọn Dải nồng độ khuyến cáo từ mg/l đến 25 mg/l mẫu cà phê thông thường  Thiết bị, dụng cụ: cân phân tích, Bộ lọc màng (cỡ lỗ 0,45 µm), máy HPLC, cột sắc ký dùng cho HPLC, máy khuất từ, bể siêu âm  Cách tiến hành: - Mẫu thử: cân xác khoảng g mẫu thử cho vào bình định mức 250 ml - Chiết caffeine: thêm 5g magie oxit khoảng 200 ml nước vào phần mẫu thử đựng bình định mức Đặt bình vào nồi cách thủy trì điểm sơi chờ dd đạt đến 90 oC Tiếp tục gia nhiệt bình nồi cách thủy 20 phút, trộn lượng chứa bình cách khuấy lắc bình Lấy bình khỏi nồi cách thủy, làm nguội đến nhiệt độ phòng vòi nước thêm nước đến vạch Chờ chất rắn lắng xuống Lấy phần dịch lỏng phía lọc qua lọc cỡ lỗ 0,45 µm, loại bỏ vài ml Dịch lọc dùng để tách HPLC - Cài đặt máy sắc ký: a) tốc độ dòng pha động 1,0 ml/min; b) detector UV cài đặt 272 nm (hoặc 254 nm trường hợp detector có lọc) 64 64 - Phân tích HPLC: tốc độ dòng pha động áp suất tương ứng ổn định, hệ thống cân 10 phút Sau bơm 10 µl dung dịch chuẩn lên cột, dùng xyranh µl, lần chạy sau đó, bơm tiếp thể tích tương tự dịch chiết caffeine  Tính kết quả: Hàm lượng cafein, wx, biểu thị phần trăm khối lượng, tương đương với gam 100 g cà phê, theo cơng thức sau: wx = Trong đó: Ac diện tích pic cafein dung dịch chuẩn cafein xác định HPLC, tính đơn vị diện tích; Ax diện tích pic cafein dung dịch mẫu xác định HPLC, tính đơn vị diện tích; ms khối lượng phần mẫu thử, tính gam (g); V thể tích dung dịch mẫu chiết được, xác định 8.2 (V = 0,25 l), tính lít (l); ρc nồng độ khối lượng dung dịch chuẩn cafein, tính gam lít (g/l) Chiều cao pic sử dụng để thay cho diện tích pic 2.2.6 Lựa chọn cơng thức phối chế tạo sản phẩm trà hoà tan VINA – LINHCHI Để người sử dụng lần gói trà hồ tan trọng lượng 3g cóchứa hàm lượng hoạt chất sinh học khoảng 0,015g Ps (tương đươngvới hàm lượng hoạt chất sinh học có 1g nấm Linh chi nguyên liệu), cần phối chế sản phẩm trà hòa tan có hàm lượng Ps đạt 0,5% Thí nghiệm xây dựng thành công thức phối chế khác để tạo 65 65 sản phẩm trà hoà tan VINA – LINHCHI từ nấm Linh chi, cà phê nguyên liệu khác sau:  Cao đặc nấm Linh chi  Cao đặc cà phê  Chất tạo beta cyclodextryn  Bột lactose Qui trình pha chế trà? Tiêu chuẩn thành phẩm trà? Trong tiêu chuẩn TP có nội dung phần 2.2.6 2.2.7 Phân tích vi sinh vật, độc tố nấm kim loại nặng  Đánh giá phân tích độc tố vi nấm: theo QCVN 8-1:2011/BYT Quy chuẩn kỹ thuật quốc gia giới hạn ô nhiễm độc tố vi nấm thực phẩm  Đánh giá phân tích kim loại nặng: theo QCVN 8-2:2011/BYT Quy chuẩn kỹ thuật quốc gia giới hạn kim loại nặng thực phẩm  Đánh giá phân tích vi sinh vật: theo QCVN 8-3:2011/BYT Quy chuẩn kỹ thuật quốc gia ô nhiễm vi sinh vật thực phẩm 2.2.8 Phương pháp đánh giá cảm quan Xây dựng thang điểm cho tiêu đánh giá cảm quan sản phẩm dựa theo TCVN 3215 – 79 Sản phẩm thực phẩm – Phân tích cảm quan – Phương pháp cho điểm Chỉ tiêu đánh giá: màu sắc, mùi vị, trạng thái sản phẩm Theo TCVN 3215:79 quy định sử dụng hệ 20 điểm dựa thang thống có bậc điểm (từ đến 5), đó: - bậc đánh giá (bằng chữ số từ đến 1) dạng chưa có trọng lượng mức độ khuyết tật tiêu cảm quan - bậc đánh giá chữ số để biểu thị khuyết tật ứng sản phẩm không sử dụng  Tiến hành xây dựng thang điểm cho tiêu sản phẩm trà hoà tan VINA – LINHCHI bảng 3.2  Sau chấm điểm tiến hành tính tốn điểm trung bình mẫu  Hội đồng cảm quan có người • Phiếu cho điểm đánh giá cảm quan: PHIẾU CHO ĐIỂM Phép thử cho điểm chất lượng cảm quan (TCVN 3215-79) Tên sản phẩm đánh giá:………………………………… Ngày tháng năm Họ tên người đánh giá:………………………………… Chữ ký: Mẫu số LC1 66 Các tiêu Điểm từ đến Màu sắc Mùi 66 Ghi (nhận xét từ) LC2 LC3 Vị Màu sắc Mùi Vị Màu sắc Mùi Vị 2.2.9 Phương pháp xử lý số liệu Sự sai khác cơng thức thí nghiệm xác định phân tích phương sai Xử lý số liệu máy tính phần mầm Microsoft Excell 2010 IrristatTÀI LIỆU THAM KHẢO Đỗ Huy Bích, Đặng Quang Chung, Bùi Xuân Chương, Nguyễn Thượng Dong, Đỗ Trung Đàm, Phạm Văn Hiển, Vũ Ngọc Lộ, Phạm Duy Mai, Phạm Kim Mãn, Đoàn Thị Nhu, Nguyễn Tập, Trần Toàn Cây thuốc động vật làm thuốc Việt Nam – Tập II Nhà xuất khoa học kỹ thuật Hà Nội Ngô Vân Thu Trần Hùng(2011) Dược liệu học – Tập I Nhà xuất Y học Nguyễn Như Quỳnh, 2006 Đề tài Tìm hiểu loại nấm Linh chi thu hái Thủ Đức – TP Hồ Chí Minh Luận văn kỹ sư chun ngành cơng nghệ sinh học, trường Đại học Nông Lâm - TP.HCM Nguyễn Bá Hiệp, Nguyễn Hữu Hùng, Lê Sỹ Nghị (2007) Đề tài Kỹ thuật sấy cà phê Đọc từhttp://doan.edu.vn/do-an/do-an-ky-thuat-say-ca-phe-35995/ Phan Thị Băng Trâm, Lý Thị Hương, Nguyễn Thị Như An, Lê Thị Thuý Hằng Lý Thị Diễm Trang (2016) Đề tài Bệnh tim học Tiểu luận môn Sinh lý động vật, khoa công nghệ sinh học kỹ thuật môi trường Trường Đại học Công Nghiệp Thực Phẩm – TP.HCM “Không tên”, 2013 Đề tài Sản xuất nấm Linh chi đóng hộp Đọc từ http://luanvan.net.vn/luan-van/luan-van-nghien-cuu-san-xuat-nam-linh-chidong-hop-48057/ Hải Hồ (2011) Bài viết Giới thiệu Nấm Linh chi Ngày 08/9/2011 Đọc từhttps://honhuhai.wordpress.com/2011/09/08giới-thiệu-về-nấm-linh-chi/ Bài viết Kỹ thuật bào chế thuốc bột Học Viện Y Học Dược Cổ Truyền Việt Nam Ngày 03/06/2013 Đọc từhttp://medicare.health.vn/cong-dong/tailieu/bai-2-ki-thuat-bao-che-thuoc-bot https://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK92757/ 10 Giảng viên Huỳnh Quang Phước Đồ án Tổng quan cẩ cà phê sản phẩm Đọc từhttp://luanvan.net.vn/luan-van/do-an-tong-quan-ve-cay-ca-phe-vacac-san-pham-37963/ 67 67 11 http://www.puriocafe.com/tin-tuc/ca-phe-va-suc-khoe/104-10-loi-ich-chinhcua-ca-phe-nguyen-chat-doi-voi-suc-khoe-con-nguoi 12 http://doan.edu.vn/do-an/gioi-thieu-ve-nam-linh-chi-ganoderma-lucidum24558/ 13 “Không tác giả”, 2013 Đề tài Kỹ thuật trồng sau thu hoạch nấm Linh chi Đọc từ http://www.tai-lieu.com/tai-lieu/khoa-luan-ky-thuat-trong-va-sau-thuhoach-nam-linh-chi-7409/ 14 DS Phạm Thiệp, DS Lê Văn Thuấn, DS Bùi Xuân Chương (1999) Cây thuốc, Bài thuốc Biệt dược Nhà xuất Y học 15 Đỗ Tất Lợi (2013) Những thuốc vị thuốc Việt Nam Nhà xuất Y học 16 Trại nấm linh chi Tiên Thảo(2015).Bài viết thành phần dược tính nấm Linh chi đỏ Đọc từ https://www.linhchitienthao.com/5-thanh-phan-duoc-tinhtrong-nam-linh-chi-do.html 17 Trại nấm linh chi Tiên Thảo (2014) Bài viết tác dụng nấm Linh chi đỏ Đọc từ https://www.linhchitienthao.com/tac-dung-cua-nam-linh-chi-do.html 18 Trần Chí Tình (2014) Bài viết Nguồn gốc phân bố cà phê Việt Nam Đọc từ http://www.tranchitinh.com/2014/01/nguon-goc-va-su-phan-bocay-ca-phe-o-viet-nam.html 19 Ngành cà phê (2017) Bài viết Cấu tạo cà phê thành phần hoá học hạt cà phê Primecoffe ngày 09/7/2017 Đọc từ https://primecoffe.com/cau-taohat-cafe-va-thanh-phan-hoa-hoc-trong-hat-ca-phe.html 20 Trương Thị Tuyết Mai(2013) Đề tài Nghiên cứu số chế phẩm dược liệu có nguồn gốc từ nấm Linh chi Việt Nam Trường Cao đẳng lương thực – thực phẩm 21 PGS TS Nguyễn Thượng Dong(2007) Nấm Linh chi Nhà xuất Khoa học kỹ thuật Hà Nội 22 PGS.TS Nguyễn Hoàng Nam (2012) Bài viết Các bệnh tim mạch thường gặp Ngày 02/11/2012 Sức khoẻ đời sống Đọc từ http://suckhoedoisong.vn/cacbenh-tim-mach-thuong-gap-n55662.html 23 Trại nấm Ngọc Anh Bài viết Nghiên cứu khoa học nấm Linh chi Đọc từhttp://www.linhchivn.com/tim-hieu-them/nghien-cuu-khoa-hoc-ve-nam-linhchi-do.html 68 68 ... nhiều sản phẩm song chưa đáp ứng yêu cầu ngày cao người Đề tài Bào chế chế phẩm dạng bột hòa tan hỗ trợ điều trị bệnh tim mạch từ nấm linh chi cà phê khoa Dược – điều dưỡng, trường Đại học TâyĐô”... trợ điều trị bệnh tim mạch từ nấm linh chi cà phê khoa Dược – điều dưỡng, trường Đại học Tây Đô Mục tiêu cụ thể (1) Xây dựng công thức bào chế trà hòa tan có chứa dược chất từ thảo dược Nấm Linh. .. Linh chi đỏ cà phê có tác dụng hỗ trợ điều trị bệnh tim mạch (2) Xây dựng tiêu chuẩn nguyên liệu, thành phẩm trà hòa tan VINA-LINHCHI Yêu cầu đề tài  Kết hợp thảo dược quen thuộc với dạng bào chế