Nghiên cứu đặc điểm thực vật thành phần hóa học và tác dụng sinh học của một số loài tầm gửi, họ tầm gửi (loranthaceae)

Ảnh một số đặc điểm bột Tầm gửi Macrosolen affinis 19 Hình 3.19.. Như vậy cùng một loài tầm gửi mọc ký sinh trên những cây chủ khác nhau có giống nhau về thành phần hoá học và tác dụng

BỘ G IÁ O D ỤC V À Đ À O TẠO BỘ Y TÊ

TR Ư Ờ N G ĐẠ I HỌC Dược H À N Ộ I

NGUYỄN THỊ MAI HƯƠNG

THÀNH PHẦN HOÁ HỌC VÀ TÁC DỤNG SINH HỌC CỦA MỘT SỐ LOÀI Tầ M g ử i , h ọ t ầ m g ử i

(.LORANTHACEAE )

CHUYÊN NGÀNH -Dược LIỆU- Dược HỌC c ổ TRUYỀN

Mã số: 03.02.03

HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: GS.TS PHẠM THANH KỲ

TS NGUYỄN VIẾT THÂN

HÀ NỘI- 2002

M Ồ & & c M ( t i l Luận ván này được thực hiện tại bộ môn Dược liệu- Trường Đại học Dược Hà nội.

Với lòng biết ơn và kính trọng, tôi xin chân thành cảm ơn: Gs Ts Phạm Thanh Kỳ; Ts Nguyễn Viết Thân đã trực tiếp hướng dẫn, chỉ bảo tận tình cho tôi trong suốt quá trình nghiên cứu khoa học.

Tôi xin bày tỏ lời cảm ơn chân thành tới:

- Pgs Ts Phạm Quang Tùng - Phòng sau Đại học- Trường Đại học Dược

Hà nội.

- Gs Vũ Văn Chuyên- Bộ môn Thực vật- Trường Đại học Dược Hà nội.

- Ts Đ ỗ Ngọc Thanh- Phòng thí nghiệm trung tâm- Trường Đại học Dược

Hà nội.

- Pgs Ts Chu Đình Kính -Viện hoá học- TTKHTN và CNQG.

- TS Nguyễn Thị Vinh- Trưởng phòng Dược lý -Viện kiểm nghiệm.

-Ts Trần Vân Hiên - Trưởng phòng Đông y thực nghiệm- Viện Y học cổ truyền Việt nam.

Đ ã đóng góp những ý kiến quí báu cho tôi thực hiện luận văn này Nhân dịp này tôi cũng xin trán trọng cảm ơn các thầy cô giáo, kỹ thuật viên Bộ môn Dược liệu, bộ môn Thực vật, bộ môn Dược học cổ truyền, Viện hoá học, Viện kiểm nghiệm, Viện Dược liệu, Viện Y học cổ truyền, Ban giám hiệu Trường Đại học dược Hà nội, các Thầy giáo phòng sau đại học Trường Đại học Dược Hà nội Đ ã luôn tạo điều kiện thuận lợi cho tôi trong thời gian thực hiện luận văn này.

Hà nội, ngày 02tháng 12 năm 2002.

Ds Nguyễn thị M ai Hương.

1679

1012

15151515151616161617

1.1.3 Đặc điểm thực vật một số loài thuộc chi Macrosolen.

1.1.4 Đặc điểm thực vật một số loài thuộc chi Scurrula.

1.1.5 Đặc điểm thực vật một số loài thuộc chi Taxillus

1.2 Những nghiên cứu về thành phần hoá học.

1.3 Tác dụng và công dụng của Tầm gửi.

N G U Y Ê N LIỆU, PHƯƠNG TIỆN VÀ PHƯƠNG PHÁP

NGHIÊN CỨU.

2.1 Nguyên liệu nghiên cứu.

2.2 Phương tiện nghiên cứu

2.3.2 Nghiên cứu hoá học

2.3.3 Nghiên cứu về một số tác dụng sinh học

Phần 3 THỰC NGHIỆM VÀ KẾT QUẢ 20

3.1.1 Nghiên cứu đặc điểm thực vật mẫu 1 20

3.1.1.1 Mô tả hình thái cây và định tên khoa học 20

3.1.1.2 Đặc điểm giải phẫu của loài Taxillus chinensis 20

3.1.2 Nghiên cứu đặc điểm thực vật mẫu 2 24

3.1.2.1 Mô tả hình thái cây và định tên khoa học 24

3.1.2.2 Đặc điểm giải phẫu của loài Macrosolen tricolor 24

3.1.3 Nghiên cứu đặc điểm thực vật mẫu 3 28

3.1.3.1 Mô tả hình thái cây và định tên khoa học 28

3.1.3.2 Đặc điểm giải phẫu của loài Macrosolen affinis 28

robosonii.

3.1.4 Nghiên cứu đặc điểm thực vật mẫu 4a và 4b 32

3.1.4.1 Mô tả hình thái cây và định tên khoa học 32

3.1.4.2 Đặc điểm giải phẫu của loài Scurula gracilifolia 33

3.2.1 Định tính các nhóm chất hữu cơ trong dược liệu 373.2.2 Định tính flavonoid trong 5 mẫu dược liệu bằng SKLM 443.2.3 Định lượng flavonoid toàn phần trong 5 mẫu dược liệu 453.2.4 Chiết xuất và phân lập flavonoid trong 2 loài Tầm gửi

Macrosolen tricolor và Scurrula gracilifolia ký sinh trên cây

3.2.4.1 Chiết xuất flavonoid toàn phần 49

3.3.4 Xác định hoạt tính dọn gốc tự do anion superoxide của 71TG2.

3.3.5 Thử tác dụng bảo vệ gan của TG2 733.3.6 Thử tác dụng kháng khuẩn của chế phẩm TG2 74

PHỤ LỤC

STT TÊN BẢNG T ran g

1 Bảng 3.1 Kết quả định các nhóm chất chính trong 5 mẫu dược liệu 43

2 Bẳng 3.2 Kết quả SKLM flavonoid của 5 mấu Tầm gửi trên cùng 1

3 Bảng 3.3 Hàm lượng flavonoid toàn phần trong 5 mẫu dược liệu 48

4 Bảng 3.4 Kết quả SKLM flavonoid toàn phần của loài Tầm gửi

5 Bảng 3.5 Kết quả SKLM flavonoid toàn phần của loài Tầm gửi

6 Bảng 3.6 Số liệu cộng hưởng từ hạt nhân của H2 61

7 Bảng 3.7 Số liệu cộng hưởng từ hạt nhân của V, (TG-V,) 64

8 Bảng 3.8 Kết quả thử độc tính cấp của loài tầm gửi Scurrula

9 Bảng 3.9 Kết quả thử độc tính cấp của loài Tầm gửi Scurruỉa

10 Bảng 3.10 Ảnh hưởng các nồng độ khác nhau của chất TG2 đến

phản ứng oxy hoá lipid dịch đồng thể tế bào gan chuột nhắt trắng 70

11 Bảng 3.11 Tác dụng bảo vệ của chế phẩm TG, đối với tế bào não

trong các điều kiện oxy hoá khác nhau 71

12 Bảng 3.12 Tác dụng của chế phẩm TG2 đối với sự tạo thành anion

superoxide trong hệ XT/XOD (nồng độ dung dịch thử lmg/ml) 72

13 Bảng 3.13 Kết quả định lượng GPT, Bilirubin trong huyết thanh

14 Bảng 3.14 Kết quả thí nghiệm thử tác dụng kháng khuẩn của TG2 74

STT TÊN H ÌN H T rang

1 Hình 3.1 Ảnh Tầm gửi Taxillus chinensis. 22

2 Hình 3.2 Ảnh cành mang hoa Tầm gửi Taxillus chinensis. 22

3 Hình 3.3 Ảnh chùm hoa, quả và các bộ phận của một hoa Tầm gửi

4 Hình 3.4 Ảnh một phần vi phẫu lá Tầm gửi Taxillus chinensis. 23

5 Hình 3.5 Ảnh một phần vi phẫu thân Tầm gửi Taxillus chinensis. 23

6 Hình 3.6 Ảnh một số đặc điểm bột Tầm gửi Taxillus chinensis. 23

7 Hình 3.7 Ảnh Tầm gửi Macrosolen tricolor (Lee.) Dans 26

8 Hìmh 3.8 Ảnh cành mang hoa và quả Tầm gửi Macrosolen tricolor

(Lee.) Dans

26

9 Hình 3.9 Ảnh các bộ phận hoa và quả Tầm gửi Macrosolen

tricolor (Lee.) Dans.

13 Hình 3.13 Ảnh cành Tầm gửi Macrosolen robinsonii. 30

14 Hình 3.14 Ảnh cụm hoa Tầm gửi Macrosolen robinsonii. 30

15 Hình 3.15 Ảnh các bộ phận của hoa Tầm gửi Macrosolen ajfinis

16 Hình 3.16 Ảnh một phần vi phẫu lá Tầm gửi Macrosolen affinis

17 Hình 3.17 Ảnh một phần vi phẫu thân Tầm gửi Macrosolen affinis

18 Hình 3.18 Ảnh một số đặc điểm bột Tầm gửi Macrosolen affinis

19 Hình 3.19 Ảnh cành Tầm gửi Scurrula gracilifolia (Schult.) Dans 35

20 Hình 3.20 Ảnh cành mang hoa Tầm gửi Scurrula gracilifolia 35

21 Hình 3.21 Ảnh các bộ phận hoa và quả Tầm gửi Scurrula

22 Hình 3.22 Ảnh một phần vi phẫu lá Tầm gửi Scurrula gracilifolia

25 Hình 3.25 Ảnh SKLM flavonoid toàn phần của 05 mẫu Tầm gửi

với hê III

47

26 Hình 3.26 Sơ đồ chiết xuất flavonoid toàn phần 50

27 Hình 3.27 Ảnh SKLM của chất Vị trong 3 hệ dung môi. 55

28 Hình 3.28 Ảnh SKLM của chất V3 trong 3 hệ dung môi. 55

29 Hình 3.29 Ảnh SKLM của chất H2 trong 3 hệ dung môi. 55

30 Hình 3.30 Ảnh SKLM so sánh H5 và quercetin chuẩn với hệ III. 58

31 Hình 3.31 Ảnh SKLM so sánh H5 và quercetin chuẩn với hệ IX. 58

32 Hình 3.32 Ảnh SKLM hai chiều của H5 và quercetin vói hệ III, VII 58

33 Hình 3.33 Ảnh tinh thể H2 dưới kính hiển vi phân cực. 62

34 Hình 3.34 Ảnh tinh thể H5 dưới kính hiển vi phân cực. 62

35 Hình 3.35 Ảnh tinh thể Vị dưói kính hiển vi. 62

36 Hình 3.36 Ảnh SKLM so sánh Mị, M2, M4a, M4b, Vj, H2, H5 vói hệ

III

66

CNQG : Công nghệ quốc gia

COSY : Corelation spetrocopy

DEPT : Distortionless enhancement by polarization transferEDTA : Ethylen diamine tetra acetic sendizodic acid

HMBC : Heteronuclear Multiple Bond Corelation

HMQC : Heteronuclear Multiple Quantum Corelation

MDA : Malonyl dialdehyd

MS : Mass spectrum

NOESY : Nuclear Overhouser effect Spectrocopy

NBT : Nitro Blue Tetrazolinum

NMR : Nuclear magnetic resonance

13C-NMR : Carbon (13) Nuclear magnetic resonance

'H-NMR : Proton Nuclear magnetic resonance

ĐẶT VẤN ĐỂ

Việt nam nằm trong vùng khí hậu nhiệt đód do đó có nguồn tài nguyên cây thuốc rất phong phú và đa dạng Theo điều tra của Viện Dược liệu cùng các cơ sở y tế trong cả nước, đã công bố năm 2001 Việt Nam có khoảng 3400 loài cây thuốc

Nhiều cây thuốc đã được nghiên cứu và xây dựng tiêu chuẩn đưa vào Dược điển Việt Nam Tuy nhiên, còn nhiều cây thuốc đang sử dụng theo kinh nghiệm dân gian mà chưa được nghiên cứu hoặc nghiên cứu chưa kỹ và đầy

đủ Vì vậy việc nghiên cứu cây thuốc nhằm sáng tỏ kinh nghiệm dân gian trên phương diện khoa học, nâng cao hiệu lực chữa bệnh là cần thiết

Tầm gửi là những cây nhỏ thường sống ký sinh trên những cây khác và trên cùng một cây chủ có thể có nhiều loài Tầm gửi Như vậy cùng một loài tầm gửi mọc ký sinh trên những cây chủ khác nhau có giống nhau về thành phần hoá học và tác dụng sinh học không? Thành phần hoá học trong cây chủ nhất là cây độc có ảnh hưởng tới cây ký sinh không? Để góp phần trả lời câu

hỏi đó chúng tôi tiến hành đề tài: “ Nghiên cứu đặc điểm thực vật, thành

phần hoá học và tác dụng sinh học của một số loài Tầm gửi thuộc họ Tầm

gửi ( Loranthaceae ) “ với các nội dung sau :

1 Nghiên cứu đặc điểm thực vật, định tên khoa học một số loài Tầm gửi ký sinh trên cây Trúc đào, cây Bưởi, cây Dâu tằm mà chúng tôi nghiên cứu, đồng thời nghiên cứu đặc điểm vi phẫu, đặc điểm bột dược liệu để góp phần tiêu chuẩn hoá dược liệu

2 Bước đầu nghiên cứu thành phần hoá học một số mẫu Tầm gửi thu hái được

3 Nghiên cứu độc tính cấp và một số tác dụng sinh học chính của 1 mẫu Tầm gửi chúng tôi nghiên cứu

PHẦN 1 TỔNG QUAN

1.1 ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT.

1.1.1 Đặc điểm chung của cây ký sinh thuộc họ Tầm gửi (Loranthaceae).

Theo tài liệu [14], [15], [16], [21], [24], [28] mô tả như sau :

Cây ký sinh có diệp lục, mọc trên cành các cây nhỡ và cây to Cây bụi hoặc bụi nhỏ, thường sống phụ sinh Cành có thể chia đốt, lá mọc đối, đơn, nguyên, không có lá kèm, lá có thể quang hợp được nhưng cây Tầm gửi không vận dụng chức năng này mà sống nhò cây chủ bằng những rễ mút cắm sâu vào hút nhựa của cây chủ Hoa đều, lưỡng tính hoặc đơn tính, có màu sặc sỡ, có 3-8 lá đài, không có cánh hoa, số nhị bằng số lá đài và xếp đối diện với chúng Rất đặc trưng bởi cụm hoa (chùm, bông hay tán) gồm những nhóm 3 hoa đầy đủ hoặc hoa giữa thoái hoá để thành nhóm 2 hoa Bầu hạ nhiều noãn lẫn với giả noãn Quả mọng, thường có chất dính, gieo rắc hạt trên các cây gỗ lớn thông qua loài chim Tầm gửi có nhiều loại: loại chỉ sống được trên một loài cây

chủ; loại sống được trên nhiều cây chủ, như Tầm gửi cây Sến (Elytranthe tricolor H.Lec.) có thể mọc trên cả cây Dâu tằm Cùng một cây chủ có thể có

nhiều loài Tầm gửi như vị thuốc Tang ký sinh lấy từ cây Dâu tằm gồm nhiều

loài như: Loranthus parasiticus (L.) Merr.(Trung Quốc); Loranthus gracilifolia Schultes và Loranthus espititatus Stapf.

1.1.2 Phân loại thực vật.

Họ Tầm gửi (Loranthaceae) là họ quan trọng nhất trong thực vật bậc

cao sống ký sinh Gồm khoảng 40 chi, 1400 loài phân bố chủ yếu ở vùng nhiệt đới, cận nhiệt đới, một số ít ở vùng ôn đới [12]

* Theo Đường Hồng D ật [16] 1980, họ Tầm gửi có khoảng 20 chi, 850 loài,

phân chia như sau:

+ Chi Loranthus L gồm khoảng 400 loài, loài đại biểu:

L ỉncanus Schum.

P crassifolium (Pohl.) Eichl.

+ Chi Arceuthobium Bieb.

A chinensis Lee.

A mỉnutissimum Hook.

+ Chi Phthirusa Mort.

Phthirusa theobromea Eichl.

+ Chi Struthanthus Mort.

L chinensis (DC.) Mộc vệ Trung Quốc.

L yadoriki Siebold = Taxillus chinensis (DC.) Danser Tang ký sinh.

L heteranthus Wall Tầm gửi khác hoa.

L pentandrus Linn = Dendrophthoe pentandra Miq Tầm gửi năm

nhị

L pentapetalus Roxb = Helixanthera parasitica Lour Tầm gửi năm

E tricolor H Lee = Macrosolen tricolor Danser Tầm gửi cây Sến.

E robinsinii Gamble = Macrosolen robinsonii Danser.

+ Chi Viscum.

V japonicum Thunb = Korthalsella japonicum (Thunb.) Engl =

Korthalseỉla opuntia (Thunb.) Merr Tầm gửi cây Dẻ.

V articulatum Burm Tầm gửi dẹt.

V coloratum (Kom.) Tầm gửi cây Sồi.

L cordifolia Wall Chùm gởi lá hình tim.

L tienyenensis Li Chùm gởi Tiên yên.

+ Chi Hyphear.

H delavayi (van Tiegh.) Dans = Loranthus delayayi (van Tiegh.) Dans

Chùm gởi delavay

+ Chi Macrosolen.

M annamicus Dans Đại cán Việt.

M avenis (Bl.) Dans = Loranthus avenỉs Bl Đại cán núi Ave.

M bibracteolatus (Hance) Dans = Loranthus bibracteolatus Hance.

M cochinchinensis (Lour.) van Tiegh = Loranthus cochinchinensis Lour = L ẹlobosus Roxb = L ampullaceus Roxb Đại cán Nam bộ.

M dianthus (King) Dans = Loranthus dianthus King = Elytranthe krempfii H Lee Đại cán hai hoa.

M robỉnsonii (Gamble) Dans = Elytranthe robinsonii Gamble Đại cán

H.annamica Dans Chùm gỏi trung việt.

H brevỉcalyx Dans Chùm gởi đài ngắn.

H coccinea (Jack.) Dans = Loranthus coccineus Jack Chùm gởi đỏ

tì cyỉindrica (Roxb.) Dans = Loranthus cylindricus Jack ex Roxb

Chùm gởi trụ

tì ligustrinum (Wall.) Dans = Loranthus ligustrỉnus W all Chùm gởi

nữ trinh

tì parasitica Lour = Loranthus adpressus Engl = L pentapentalus

Roxb Chùm gởi ký sinh

tì pỉerreỉ Dans Chùm gởi Pierre.

tì pulchra (DC.) Dans = Loranthus pulchra DC Chùm gởi tuyệt

+ Chi Dendrophtoe.

D falcata (L.f.) Dans = Loranthus falcata L.f Mộc ký cong.

D pentandra (L.) Miq = Loranthus pentandra L Mộc ký ngũ hùng.

D siamensis (Kurz) Dans = Loranthus siamensis Kurz Mộc ký xiêm

D varian (BI.) Bl = Loranthus varian Bl Mộc ký biến thiên.

+ Chi Scurrula.

s arẹentea Dans Mộc vệ bạc.

S atropurpurea (Bl.) Dans = Loranthus atropurpurea Bl Mộc vệ đỏ

đen

s.ferruginea ( Jack.) Dans = Loranthus ferrginea Jack Mộc vệ sét.

S gracilifolia ( Schult.) Dans = Loranthus gracilifolia Roxb Ex Schultes = Loranthus chinensis Benth Mộc vệ lá mảnh.

S notothixoides ( Hance) Dans = Loranthus notothỉxoỉdes Hance Mộc

vệ tròn

S parasitica L = Lornthus scurrula ( L.) L Mộc vệ ký sinh.

S philippensis ( Cham And Schl.) G Don = Loranthus philippensis

Cham And Schecht

V liquadanbaturicum Hay Ghi trên- thâu, ký sinh chỉ trên cây Thâu

Liquandambar hay cây Sồi Quercus

V album L Ghi trắng.

V capiteỉlatum Sm Ghi đầu.

V.heyneanum DC = V capiteỉlatum non Sm., H Lee Ghi Heyneanum

V indochinensis Dans Ghi Đông Dương

V ovalifolium DC Ghi lá xoan.

V orientale Willd Ghi Đông Dương.

* Theo Nguyến Tiến Bân [11] họ Tầm gửi gồm 70 chi, 940 loài chủ yếu ở vùng nhiệt đới, ít ở ôn đói Việt Nam có 5 chi:

+ Dendrophthoe

+ Elytranthe

+ Helxanthera ( Hyphear p.p.)

+ Macrosolen

+ Taxỉllus (Scurrula sesnu Dans.) Có gần 35 loài.

Có 3 chi thuộc họ Tầm gửi dẹt (Viscaceae) : Ginalloa, Korthal- selỉa, Viscum

thường xếp chung với họ Loranthaceae

1.1.3 Đặc điểm thực vật một số loài thuộc chi Macrosolen [21], [22].

* M annamicus Dans Đại cán Việt.

Bụi to, không lông Lá mọc đối; phiến bầu dục, dài 10 - 18 cm, rộng 4 - 7 cm, gân phụ rất mảnh; cuống ngắn Tán 2 hoa, hoa màu đỏ, đài dài 4mm, cánh hoa dài 6,5 - 8,5 cm

* M avenỉs (Bl.) Dans = Loranthus avenis BI Đại cán núi A ve.

Bán ký sinh Lá có phiến bầu dục, to 3- 7,5 X 1- 3,5 cm, đầu thon, đáy tà, dai, gân - phụ 4 cặp; cuống 2 - 3mm Tán hoa có cuộng ngắn, 2-4 hoa; cuộng hoa

ngắn; vành lưỡng trắc, hoa dài 3,2- 4,5 cm Có nhiều ờ Phú Khánh, Lâm Đồng

* M bibracteolatus (Hance) Dans = Loranthus bibracteolatus Hance

Đại cán 2 tiền diệp

Bán ký sinh Không có lông; nhánh già tròn; lóng dài 1,5- 8 cm Lá có phiến thon, dài 8 -1 2 cm, chóp thon nhọn, dày, dai, gân phụ khó nhận; cuống ngắn Tán hoa 2- 3 hoa; đài 4 mm; vành đài 2,5- 3,5 cm Quả 9 x 6 mm, có đáy vòi nhuỵ còn lại.

* M cochinchinensis (Lour.) van Tiegh = Loranthus cochinchinensis Lour = L globosus Roxb = L ampullaceus Roxb Đại cán Nam Bộ.

Bụi bán ký sinh có chồi Lá có phiến bầu dục thon, to 6- 8cm X 2,5- 5 cm, dày không lông; cuống 2-3 mm Chùm hoa đứng cao 2-3 cm; lá hoa 1; tràng hoa hình túi phù, cao 2,5 - 4,5 cm, tai 6; nhị 6 Quả tròn

* M dianthus (King) Dans = Loranthus dianthus King = Elytranthe krempfii H Lee Đại cán hai hoa.

Bụi ký sinh to; thân dài đến 2 m; vỏ xám trắng, lóng dài 5 - 6 cm, đáy tròn, đầu tà, dày, dai, gân phụ rõ 4 - 5 cặp Hoa to, đỏ; ống tràng dài 5 - 7 cm, tai 2,5 cm; nhị 1,5 cm Có ở Nha Trang

* M robinsonii (Gamble) Dans = Elytranthe robinsonii Gamble Đại

cán robinson

Bán ký sinh không lông; lóng tròn Lá có phiến xoan thon, to 5 - 7,5 X 2 - 3,5

cm, mỏng; gân phụ 5 cặp; cuống 3 - 9 mm Phát hoa ở mắt, tán 2 - 4 hoa có cuông ngắn hay không cuộng; cuộng hoa 2,5mm; ống dài 3mm; tràng dài 12 - 15mm, phần đáy hơi phù, 6 tai Quả xoan Có ở Quảng Trị, Nha Trang

* M tricolor (Lee) Dans.= Elytranthe tricolor H.lec Đại cán tam sắc

Bụi bán ký sinh, không lông; vỏ xám, Lá có phiến bầu dục, rộng 2 - 2,5 cm, dai, đầu tròn; cuống dài 2 - 3 mm Hoa từng cặp; lá hoa 1,5 mm; đài cao 4 mm; tràng hình ống dài 3 - 4 mm, nhị 6 Quả tròn Có ở Nha Trang, Phan Rang

1.1.4.Đặc điểm thực vật một s ố loài thuộc chi Scurrula [21], [22].

* S argentea Dans Mộc vệ bạc.

Bán ký sinh cao 50 cm, to 7 - 8 mm ở gốc; nhánh mảnh, to 0,5 - 1,5 mm, đen, đầy lông ở phần non Lá mọc đối; phiến xoan, dài 1 - 1,5 cm, đầy lông hình sao màu trắng, gân chính và gân phụ không rõ; cuống 4 - 6 mm Tán 2 hoa; đài 2 mm; vành cao 2,2 cm.

* S atropurpurea (Bl.) Dans = Loranthus atropurpurea Bl Mộc vệ đỏ

đen

Bán ký sinh; nhánh tròn, vỏ xám hay nâu đo đỏ Lá có phiến bầu dục hay xoan thon, to 4 - 9,5 X 2- 5 cm, có lông nâu nâu hay xám xám, gân phụ 6 - 7 cặp; cuống 1 cm Chùm hoa dài 1 cm; đài cao 4mm, tràng dài 15 - 19 mm, lưỡng trắc, có lông mặt ngoài, thuỳ 4, nhị đỏ đậm Có ở Lâm Đồng, Vinh

* s.ferruqinea ( Jack.) Dans = Loranthus ferruginea Jack Mộc vệ sét

Bụi bán ký sinh; nhánh và mặt dưói có lông dầy hình sao nhiều tầng, màu nâu

đỏ Lá mọc đối; phiến bầu dục, to 8 X 4 cm, mặt trên gần như không lông, đen đen lúc khô; cuống 3 - 5 mm Chùm hoa ngắn, dài 4mm; tràng hình ống có lông dày, 4 thuỳ Nhị 4 Quả có lông màu sét

* S gracilifolia (Schult.) Dans = Loranthus gracilifolia Roxb Ex Schultes = Loranthus chinensis Benth Mộc vệ lá mảnh.

Bán ký sinh cao 20 - 25 cm v ỏ xám trắng Lá mọc đối; phiến xoan, to 5,5 X

3- 4 cm, đáy tù hay tròn, mỏng; cuống 4 - 6 mm Hoa 3 trên một cọng ngắn; dài 2 - 3 mm; tràng dài 2 cm, tai cao 4 - 5 mm, đỏ đậm mặt trong, sét mặt ngoài

* s notothixoỉdes (Hance) Dans = Loranthus notothixoides Hance

Mộc vệ tròn

Bụi bán ký sinh; nhánh non và lá có lông hình sao nhiều tầng, màu nâu nâu

Lá có phiến xoan ngược, đầu tròn, đáy từ từ hẹp trên cuống Tán hoa có 2 hoa

ở nách lá trên cọng ngắn; đài cao 3 mm, tràng hình ống dài 2,5 - 3 cm, tai 4,

nhị 4 Quả hình xá xị Gặp ở Nha Trang, Thủ Đức.

* S parasitica L = Lornthus scurrula ( L.) L Mộc vệ ký sinh.

Bụi bán ký sinh; nhánh và lá có lông hình sao nhiều tầng, màu hoe hoe Lá có phiến bầu dục, to 6 X 3 cm, đầu tròn tà, dai, gân phụ mảnh; cuống 5 - 7 mm Chùm ngắn; dài 3mm, tràng hoa hình ống phù ở phần trên, cao 1,7-2 cm, tai

4, cao 4mm; nhị 4 Quả hình xá xị, cao 5- 8 mm

* s philippensis ( Cham And Schl.) G Don = Loranthus philippensis

Cham And Schecht

Bán ký sinh Lá mọc đối; phiến bầu dục, to 8 X 3- 4 cm, có lông màu trắng, gân phụ 4 cặp; cuống 3 - 5 mm, có lông trắng Chùm hoa ngắn ở nách lá, đầy lông sét; đài có lông; tràng dài 7 - 2,5 cm, tai 4 cao 5 - 8 mm; nhị 4, gắn ở miệng hoa

1.1.5 Đặc điểm thực vật một số loài thuộc chi Taxillus [21], [22].

* T delavayi (van Tiegh.) Danser = Phyllodermis deỉavayi van Tiegh

Hạt mộc Delavay

Bán ký sinh cao 30 cm; nhánh mảnh, không lông Lá có phiến xoan ngược, nhỏ, to 3,5 X 1,2 - 1,8 cm, dai, gân phụ 3 - 4 cặp; cuống dài 5 mm Tán hoa ở ngọn Hoa đực cao 3 cm, đỏ đậm, tai ngắn, 2- 3 mm, nhị 4 Hoa cái nhỏ hơn, tím Có ở SaPa

* T balansae ( H Lee.) Dans = Loranthus balansae H.Lec = Mộc hạt

Balansa

Bụi bán ký sinh; nhánh non mảnh, có lông sét, vỏ xám Lá gần như mọc đối; phiến lá xoan, bầu dục, t o 5 - 7 x 3 - 4 cm, gân phụ 4 - 5 cặp, dai, mặt dưới có lông hình sao mau rụng Tán 3 hoa trên cuộng ngắn; đài 2mm; tràng mảnh, cao 3- 4 cm, thuý 4 Quả xoan, dài 4 mm Có ở Ba Vì, Đà Nẵng

* T kwangtungensis ( Merr.) Dans = Loranthus kwangtungensis Merr

Hạt mộc Quảng Đông

Bụi bán ký sinh cao lm Lá gần như mọc đối, có phiến thường thon, to 8x2,8cm, tù 2 đầu, dai, không lông, láng mặt trên, đen đen khi khô, gân phụ khó nhận, 3 - 4 cặp; cuống dài 1 cm Tán hoa 2 - 4 hoa trên cuộng cao 3 mm;

đài 4 - 5 mm tràng cong dài 2 - 3 cm, tai dài 1 cm; nhị 4 - 5 Quả dài 5 mm, mặt như có hạt.

* T chinensis ( DC.) Dans = Loranthus chinensis DC Hạt mộc Trung

Quốc

Bán ký sinh; nhánh non có lông vàng vàng rồi không lông, có bì khẩu trắng

Lá mọc đối; phiến bầu dục, lúc non có lông ở gân, gân phụ 4 cặp; cuống 1 cm

Tán hoa mọc ở nách lá; cuộng hoa ngắn hay dài; hoa dài 1,5 - 2,5 cm, xanh mặt ngoài đỏ mặt trong; tai vành 4; nhị 4, gắn ở miệng hoa Quả tròn hay tròn dài, có u nần, cao 6 - 8 mm Hạt 1

Hiện nay ở Việt nam chưa có nhiều công trình nghiên cứu về thành

phần hoá học của Tầm gửi

- Theo ‘Dược điển Việt Nam III” và ‘Từ điển cây thuốc Việt Nam” có ghi Tầm gửi ký sinh trên cây Dâu tằm (Tang ký sinh), cành lá có chứa quercetin và avicularin, ngoài ra các thành phần khác chưa có tài liệu nghiên cứu [13], [17]

- Theo Phạm Xuân Sinh và cộng sự nghiên cứu một số loài Tầm gửi ký sinh trên cây Bưởi, cây Trúc đào, cây Hồng cho thấy trong các loài Tầm gửi này

có chứa flavonoid, glycosid tim, antraglycosid, tanin, acid hữu cơ [30] Tuy nhiên nghiên cứu này chưa xác định rõ tên khoa học loài Tầm gửi nghiên cứu

- Theo những thông tin chúng tôi thu thập được qua mạng Internet và tài liệu Chemical abtract cho thấy trên thế giói mới chỉ nghiên cứu chủ yếu một số loài thuộc chi Taxillus

+ Tác giả Li,Meirong; Li, Liangquong; Li, Ping (Dep Pharm West China Univ Med Sci., Chengdu, Peop Rep China) nghiên cứu flavonoid của 2 loài

Tầm gửi Taxillus sutchuennensis (Lecomte) Danser và T duclouxii (

Lecomte) Kiuined cho thấy 2 loài Tầm gửi trên chứa quercetin, quercitrin,

D- catechol [34].

+ Tác giả Fukunaga, Takehiko; Nishiya, Koichi; Takeya, Koichi (Nippon Hoechst CO., Ldt., Saitama, Japan) nghiên cứu các loài Tầm gửi Taxillus yadoriki, T keampferi, Korthalsella japonica, đã phân lập được 2 flavonoid từ loài T yadorỉki là hyperin, quercitrin; ngoài ra trong loài này còn chứa sterol, acid béo, sterol glycosid Loài T kaempferi chứa : acid béo, sterol, sterol

glycosid, quercetin, avicularin, taxillusin, quercitrin và hyperin Hàm lượng

quercitin chứa trong các cây khác nhau Loài K japonica chứa: acid béo,

sterol, oleanolic acid, sterol glycosid, flavone glycosid [35]

+ Tác giả Li,Meirong; Li, Liangquong; Yang, Zhibica (Sch Pharm., West China Univ Mad Sci, Chengd, peop Rep China 610041) nghiên cứu lá loài

Tầm gửi Taxiỉlus nigrans, đã phân lập từ lá loài T nigrans 8 chất : (+)-

catechin; 7-0- golloyl- (+)- catechin; isoquercitrin; avicularin; quercetin 3- o- (6” galloyl)- P- D- glucoside; quercetin 3 -0 - (6” galloyl)- Ị3- D- galactosid; rutin và quercetin 3- o- Ị3- D- glucoronide [36]

+ Tác giả Seetharama, T.R; Manijula, K (Dep Chem Kanchi Manuniva Cent Postgrad Stud., Pondicherry, 605 Indian) nghiên cứu lá và hoa loài Tầm

gửi Taxillus bracteatus trồng tại Lannea Coromandelica, phân lập được các

flavonoid: Quercetin; quercetin-3-o- noehesperidorids, ellagic acid, quercetin 3-o-|3-D-glucopyranoside; quercetin-3-o-a-L- arabinopyranoside và Myricetin [37]

+ Tác giả Li,Meirong; Li, Liangquong; Zhu, aijang (School pharmacy, West China Univ., Medical.,Chengdu, peop., Rep., China 610041) nghiên cứu

lá loài Tầm gửi Taxcillus levinei (Mer.) H.S.Kiu, phân lập được:

Protocatechuic acid; isoquercetin; quercetin 3- o- (6” galloyl)-P- D- glucoside;

9

quercetin 3- o- (3- D- glucoronide [38]

+ Tác giả Jer-Huei Lin và Ya- Tze Lin (National Laboratories of food and drugs, Department of Health, Executive Yuan, 161-162, Kuen Yang Street,

Nankang Taipei, Taiwan, R o c ) nghiên cứu về flavonoid trong lá loài Tầm

gửi Loranthus kaoi (Chao) Kiu, đã phân lập được 8 flavonoid từ lá tươi của Loranthus koai Những thành phần này là hỗn hợp của (+) và (-)- catechin;

(-)-epi-catechin;2,,4’,6,trihydroxydihydrochalcon-4-o-|3-D-glucoside; pnocembrin-7-o-ị3-D-glucoside;kaempferol-3-o-a-D-rhamnoside; kaempferol- 3,7-di-o-P-D-glucoside; quercetin-3-o-(3-D-glucoside và quercetin-3-o-a-D- rhamnoside [43]

Nhận xét: Qua các nghiên cứu trên cho thấy thành phần đáng quan tâm nhất

và được nghiên cứu chủ yếu trong Tầm gửi là flavonoid Trên cơ sở đó trong luận văn này chúng tôi cũng tiến hành chiết xuất và phân lập flavonoid từ một

số loài Tầm gửi

1.3 TÁC DỤNG VÀ CÔNG DỤNG CỦA TẨM GỦ1.

Theo Dược điển Việt Nam và Đỗ Tất Lợi Tầm gửi cây Dâu (Tang ký sinh) dùng để chữa trị gân cốt tê đau, lưng mỏi đau, động thai, phụ nữ sau đẻ không xuống sữa [3],[17],[28]

- Tác dụng dược lý của Tang ký sinh: Với liều 0,4- 0,5 g/kg thể trọng, cho uống chó và mèo (đã gây mê) làm hạ huyết áp, còn có tác dụng lợi tiểu Ngoài

+Tầm gửi lá nhỏ: (Taxillus gracilifolius Schult.) lá sắc uống chữa đau lưng

mỏi gối, phong thấp, mụn nhọt, làm chắc chân răng, làm tóc chóng mọc và

cũng làm trà uống cho phụ nữ mói sinh Quả dùng sắc uống có giá trị sáng mắt.

ở Quảng Châu (Trung Quốc) cây dùng trị đòn ngã tổn thương [13]

+Tầm gửi quả chuỳ: (Scurrula parasitica L = Loranthus parasiticus (L.)

Merr = Taxillus parasitica (L.) Ban) thường dùng làm thuốc bổ gan thận,

mạnh gân cốt, lợi sữa Ở Trung Quốc cây được dùng chữa phong thấp, đau nhức xương, lưng gối đau mỏi, trẻ em di trứng bại liệt, tay chân tê liệt, thiếu sữa, động thai, cao huyết áp

Liều dùng 12-20g/ngày, dạng thuốc sắc, hoặc nấu nước uống thay trà [13]

+Tầm gửi sét\{Scurruỉa ferruginea (Jack.) Danser = Taxillus ferruginea

(Tack.) Ban) thường dùng trị gân cốt mỏi đau, động thai, phụ nữ sau khi đẻ không xuống sữa Liều dùng 12-20g/ngày, dạng thuốc sắc [13]

Một số bài thuốc dùng Tang ký sinh :

* Thiên ma câu đằng thang [1]

Thành phần:

Câu đằng 12g Hoàng cầm 12g ích mẫu 16g

Dạ giao đằng 20g Ngưu tất 16g Bạch linh 20gThảo quyết minh 32g Tang ký sinh 32g

Chủ t r ị : Dùng điều trị cao huyết áp

* Độc hoạt ký sinh thang [1]

Thành phần:

Tang ký sinh 12g Bạch linh 12 Thục địa 12gPhòng phong 8g Cam thảo 4g Đương quy 8g

Xuyên khung 8g Bạch thược 8g

Chủ trị : Lưng gối đau, tê lạnh Viêm dây thần kinh ngoại biên, đau xương khớp.

* Bán hạ, Bạch truật, thiên ma thang.

Cam thảo 4g Sinh khương 1 lát

Chủ trị: dùng trị cảm cúm đàm thấp, đau đầu do đàm thấp

Ngoài ra còn một số bài thuốc chữa theo kinh nghiêm dân gian như:

- Tang ký sinh 60g, A giao (hoặc cao ban long) nướng thơm 20g, Ngải diệpsao vàng 20g Dùng trong trường hợp động thai, đau bụng [28]

- Tang ký sing 20g, Địa long 8g, Hạ khô thảo 12g, Ngưu tất 12g, Rau má20g, Tâm sen 8g, Rễ cỏ tranh 20g Dùng để chữa cao huyết áp [30]

- Tầm gửi cây Khế, Tầm gửi mối, Rau má, Bạc hà, lá Hẹ, mật ong dùng chữa hen xuyễn (Đặc san những cây thuốc quý số 9- năm 2002- Hội Dược liệu Việt Nam)

- Tầm gửi cây khế, nước vo gạo đắp chữa gãy xương (Đặc san những câythuốc quý số 9- năm 2002- Hội Dược liệu Việt Nam)

* Robert K., Zeecheng (Dep Pharmacology, toxicology and therapeutics,univ Kanasas Cancer center, USA) nghiên cứu 135 loài Tầm gửi thấy chúng

có tác dụng chống ung thư [39]

PHẦN 2 NGUYÊN LIỆU, PHƯƠNG TIỆN VÀ• / •

PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN c ứ u

2.1 NGUYÊN LIỆU NGHIÊN c ứ u

Nguyên liệu là toàn bộ cành Tầm gửi ký sinh trên cây Trúc đào, cây Bưởi và cây Dâu tằm Các mẫu Tầm gửi thu được gồm 5 mẫu :

M ẫu 1: Tầm gửi ký sinh trên cây Trúc đào được thu hái vào tháng 6, 7 năm

2001 tại bệnh viện Trung ương quân đội 108- Hà Nội

M ẫu 2: Tầm gửi ký sinh trên cây Bưởi được thu hái vào tháng 6 năm 2001 tại

xã Xuân Mai- Hà Tây

M ẫu 3: Tầm gửi ký sinh trên cây Dâu tằm được thu hái vào tháng 9 năm 2001 tại xã Quất Lưu- huyện Bình Xuyên - tỉnh Vĩnh Phúc

M ẫu 4a: Tầm gửi ký sinh trên cây Trúc đào được thu hái vào tháng 7, 8 năm

2001 tại Nhà văn hoá quận Hoàn Kiếm - Hà Nội

M ẫu 4b : Tầm gửi ký sinh trên cây Bưởi được thu hái vào tháng 8 năm 2001 tại xã Chi Đông- huyện Mê Linh - tỉnh Vĩnh Phúc

2.2 PHƯƠNG TIỆN NGHÊN c ứ u

2.2.1 Động vật nghiên cứu.

Chuột nhắt trắng, trọng lượng 20g ± 03g đạt tiêu chuẩn thí nghiệm, do viện vệ sinh dịch tễ cung cấp

2.2.2 Các máy và thiết bị dùng trong nghiên cứu.

- Máy xác định độ ẩm Precisa HA60 tại bộ môn Dược học cổ truyền Trường Đại học Dược Hà Nội

- Máy đo phổ tử ngoại ƯV- VIS Spectrophotometer cary (Australia) tại phòng thí nghiệm trung tâm trường Đại học Dược Hà nội

- Máy đo phổ hồng ngoại FT—IR Spectrophotometer 1650-Perkin Elmer (USA), tại phòng thí nghiệm trung tâm trường Đại Học Dược Hà Nội

- Máy đo phổ khối 5989- MS tại phòng cấu trúc- Viện Hoá học TTKHTN và CNQG.

- Đo phổ NMR trên máy NMR-Bruker-500 MHZ tại phòng cộng hưởng

từ hạt nhân - Viện Hoá học - TTKHTN và CNQG

- Máy đo quang ELx 800 tại phòng Đông Y thực nghiệm - Viện Y Học

2.3.1 Nghiên cứu vê thực vật.

* Mô tả đặc điểm hình thái thực vật, phân tích hoa theo tài liệu:

+ Bài giảng thực vật (1991)- Vũ Văn Chuyên [14]

+ Tóm tắt đặc điểm các họ cây thuốc Việt nam [15]

+ Thực tập hình thái và giải phẫu thực vật (1987)-Trần Công Khánh[25]

*Vi phẫu được cắt tẩy nhuộm theo tài liệu:

+ Thực tập Dược liệu phần vi học [29]

*Quan sát hình thái bằng mắt thường và kính lúp nổi [26], [29]

*Quan sát cấu tạo giải phẫu lá, thân, bột dược liệu bằng kính hiển vi [26],[29]

2.3.2 Nghiên cứu hoá học.

*Định tính các nhóm hợp chất hữu cơ trong dược liệu theo tài liệu:

+ Bài giảng Dược liệu [7]

+ Thực tập Dược liệu phần hoá học [8]

+ Phương pháp nghiên cứu hoá học cây thuốc [19]

* Sắc ký lớp mỏng dùng chất hấp phụ là silicagel GF254 (MERCK) [19]

* Phân lập flavonoid bằng sắc ký cột dùng chất hấp phụ là silicagel (MERCK), có kích thước hạt 0,015- 0,04mm [8], [19].

* Nhận dạng chất phân lập dựa trên số liệu các phổ u v , IR, MS, 1H- NMR, 13C-NMR, DEPT 90, DEPT 135, HMQC, HMBC, COSY, NOESY

2.3.3 Nghiên cứu về một số tác dụng sinh học.

2.3.3.1 T h ử độc tính cấp theo các tài liệu sau:

- Phương pháp xác định độc tính cấp của thuốc theo tài liệu của Đỗ Trung Đàm (NXB Y học 1996) [18]

- Hướng dẫn kèm theo quyết định số 371/BYT- QĐ ngày 12/03/1996 về việc ban hành “ Quy chế đánh giá tính an toàn và hiệu lực thuốc cổ truyền” [4]

- Hướng dẫn về nghiên cứu dược lý và khảo sát độc tính của thuốc cổ truyền [5], [6]

- A wallce Hayes (1994) Principles and Methods of Toxicology [33]

2.23.2 Thử tác dụng chống ôxy hoá bảo vệ tê bào gan của chê phẩm TG2 (TG2 là flavonoid toàn phần của mẫu 2) trên invitro [42], [43],[44], [45].

Việc đánh giá tác dụng chống peroxy hoá lipid màng tế bào được thực hiện qua việc xác định hàm lượng MDA, một sản phẩm trung gian của quá trình này dựa theo phương pháp đã được miêu tả bởi Jadwiga Robax (Ba Lan, 1987) và Mitsno Tanaka (Nhật Bản, 1994) vói một số thay đổi nhỏ

Nguyên lý của phương pháp là MDA- một sản phẩm được tạo ra trong quá trình peroxy hoá lipid, có thể phản ứng với acid thiobarbituric để tạo phức Trimethine có màu hồng và có đỉnh hấp thụ cực đại ở 530-532nm

Phản ứng của MDA vóti acid thiobarbituric:

Malonyl dialdehyd Thiobabituric Phức hợp Trimethine

Cường độ màu của dung dịch tỷ lệ thuận với nồng độ MDA Hàm lượng MDA được tính theo đường cong chuẩn sử dụng MDA tinh khiết nồng độ từ 2nmol đến 15,2nmol Tất cả các mẫu thử đều được đo độ hấp thụ quang học ở bước sóng 532nm

2.2.3.3 Thử tác dụng chống oxy hoá bảo vệ t ế bào não của ch ế phẩm TG2 (Invitro) [ 42], [43],[44], [45].

Nguyên tắc tương tự như thử tác dụng chống oxy hoá bảo vệ tế bàogan

Mô não được biết là rất nhạy cảm với phản ứng peroxy hoá lipid, trong thí nghiệm này dịch đồng thể tế bào não được giữ ở nhiệt độ phòng trong khoảng thòi gian nhất định (2 giờ, 4 giờ) và không có sự tham gia của tác nhân oxy hoá là (Fe++, acid ascorbic)

2.2.3.4 Xác định hoạt tính dọn gốc tự do anion superoxỉde của TG2 [9],

[20], [40].

Hoạt tính dọn gốc tự do anion superoxide được xác định theo phương pháp của Imanari và cộng sự bằng cách tạo ra anion superoxide 0 2' trong hệ Xanthin/Xanthin oxydase Sau đó các gốc anion superoxide sẽ phản ứng với NBT tạo phức có màu Dung dịch chống gốc sẽ được đưa vào hỗn hợp phản ứng để xác định khả năng hạn chế sự tạo thành gốc anion superoxide

Hỗn hợp phản ứng gồm: 700|ul dd Na2C 0 3 0,05M; 50|ul dd Xanthin

3mM; 50fj.l dd EDTA 3mM; 50|il dd thử ở các nồng độ khác nhau Hỗn hợp

được trộn kỹ trong 10 phút ở nhiệt độ phòng Sau đó thêm 50 |Lil dd XOD 0,14mg Prot/ml, lắc kỹ và giữ 20 phút ở nhiệt độ phòng Ngừng phản ứng bằng cách cho thêm 50|ul dd C u ơ 2 6mM Dung dịch sẽ có màu xanh tím do phản ứng giữa NBT và anion superoxide 0 9\ Đo quang ở bước sóng 570nm Tác dụng dọn gốc tự do (theo phần trăm) được tính bằng cách so sánh độ hấp thụ quang học của dung dịch thử so với độ hấp thụ quang học của dung dịch không chứa mẫu thử.

2.2.3.5 Thử tác dụng bảo vệ gan của TG2.

Định lượng GPT, bilirubin trong huyết thanh chuột bằng kít thử của hãng Human trên máy sinh hoá bán tự động Scout Tiến hành so sánh 3 lô chuột: lô chuột sinh lý, lô chuột gây bệnh, lô chuột thử thuốc xem chế phẩm TG2 có tác dụng bảo vệ gan không

2.23.6 Thử tác dụng kháng khuẩn của TG2.

Thử tác dụng kháng khuẩn theo phương pháp dùng canh thang nuôi dưỡng (Nutrien both) hãng Abbott, môi trường Muller Hinton agar (MH) Tạo hỗn dịch vi khuẩn bằng cách cấy chủng vi khuẩn vào canh thang dinh dưỡng Cấy canh khuẩn trên môi trường thử nghiêm Chuẩn bị đĩa chất thử, mỗi đĩa

có hàm lượng 20mg chất TG2 Đặt các đĩa thử lên môi trường Muller Hinton

đã cấy vi khuẩn Để tủ ấm 37°c Đọc kết quả sau 24 giờ

PHẦN 3 THỰC NGHIỆM VÀ KẾT q u ả.

3.1 NGHIÊN CỨU VỂ THựC VẬT.

3.1.1 Nghiên cứu đặc điểm thực vật của mẫu 1.

3.1.1.1 Mô tả hình thái cây và định tên khoa học.

Cành ký sinh dài 50- 60 cm, vỏ thân xanh trắng, thân mang cành nhỏ mọc đối Lá đơn nguyên, mọc đối dài 6-10cm, rộng 3-5cm chóp lá nhọn, không có lông Gân lá hình lông chim ít rõ Cuống lá dài 0,5-lcm Cụm hoa xim mọc ở kẽ lá, từng nhóm 4 cái một, hoa dài 2-2,5cm, tràng hình ống dính với nhau phần dưới khi nở chia 4 thuỳ ở trên, mặt trong màu đỏ đậm, mặt ngoài tràng hoa màu trắng xanh Bộ nhị 4, chỉ nhị dính trên tràng ống, bao phấn hướng trong mầu vàng Vòi nhụỵ màu đỏ dài 2-3cm Cuống hoa dài lcm Bầu hạ, 1 ô Quả hình chuông mặt vỏ quả nhẵn, khi chín có màu vàng, (hình 3.1; hình 3.2; hình 3.3- trang 22)

Sau khi quan sát và phân tích các đặc điểm hình thái của mẫu cây nghiên cứu, đối chiếu các tài liệu tham khảo [11],[13],[21],[23],[31] GS Vũ

Văn Chuyên định tên khoa học loài Tầm gửi chúng tôi nghiên cứu là: Taxillus

chinensis (DC.) Dans Họ Tầm gửi (Loranthaceae).

Tên Việt Nam là Mộc vệ Trung quốc

3.1.1.2 Đặc điểm giải phẫu của loài Taxỉllus chinensis (DC.) Dans.

a Đặc điểm vi phẫu lá (Hình 3.4- trang 23): Quan sát tiêu bản vi phẫu lá

chúng tôi thấy

* Phán gân lá: Gân lá lồi ít ở phía trên lồi nhiều hơn ở phía dưới Biểu bì trên và dưới là một hàng tế bào nhỏ, tương đối đều, có thành ngoài hoá cutin(1) Sát biểu bì trên và biểu bì dưới là mô dày cấu tạo bỏi các tế bào hình trứng, thành hơi dày (2) Mô mềm cấu tạo bởi các tế bào hình trứng hay đa giác, thành mỏng, kích thước không đều nhau (3) Có 3 bó libe-gỗ ở gân chính, mỗi bó có cung libe ôm sát mô gỗ (4) Mô gỗ gồm nhiều mạch gỗ lớn xếp thành hàng (5) Trong mô mềm vỏ có nhiều thể cứng hình dạng khác nhau

thường có những chỗ lồi lõm (6), đứng riêng lẻ hoặc tập trung thành từng đám trong có chứa tinh thể calci oxalat hình khối, hình cầu gai tròn Các tinh thể calci oxalat thấy nằm rải rác khắp nơi.

* Phần phiến lá: Biểu bì ở phiến lá tương tự phần gân lá Mô dậu không rõ Trong mô mềm có các thể cứng và tinh thể calci oxalat giống như ở phần gân lá

b Đặc điểm vi phẫu thân (Hình 3.5- trang 23):

Mặt cắt của thân có hình tròn, từ ngoài vào trong có: Bần gồm nhiều hàng tế bào hình chữ nhật xếp thành vòng đồng tâm và dãy xuyên tâm, rải rác thấy có các lỗ vỏ (1) Mô mềm vỏ là các tế bào hình trứng, thành mỏng, kích thước không đều (2) Libe gồm các bó libe xếp thành vòng (3), trên mỗi bó thường có sợi tập trung thành đám Dưới libe là tầng phát sinh libe- gỗ Mô gỗ cấu tạo bởi tế bào thành dầy hoá gỗ tạo thành vòng liên tục, rải rác có mạch

gỗ riêng lẻ hoặc xếp thành từng đám (4) Mô mềm ruột cấu tạo bỏi các tế bào tương đối tròn, to, thành mỏng, càng vào phía trong càng lớn (6) Có nhiều thể cứng trong có chứa tinh thể canxi oxalat hình khối (5)

3J.1.3 Đặc điểm bột (Hình 3.6)

Bột có màu nâu, không mùi, vị nhạt, quan sát dưới kính hiển vi thấy: Các mảnh bần (1), mảnh phiến lá có thể nhìn thấy những tế bào hình đa giác hoặc mảnh mạch (2), đôi khi chứa lỗ khí (5) Mảnh mô mềm cấu tạo bởi các

tế bào thành mỏng, lớn, tương đối tròn (4), đôi khi thấy những mảnh tổ chức màu hồng có chứa những giọt hình cầu có chiết xuất lớn (3, 6, 11), hoặc các mảnh tổ chức mang những thể giống như tinh thể calci oxalat hình khối (8)

Tế bào sợi dài, khoang rộng, đứng riêng lẻ hay tập trung thành từng bó (7) Thể cứng thành dày có chứa tinh thể calci oxalat hình khối (9) Rải rác thấy mảnh mạch điểm, mảnh mạch vạch (10) Tinh thể calci oxalat hình khối có kích thước khoảng 0,01-0,03 mm (12), đôi khi có hạt phấn hoa hình 3 cạnh (14) Lông che chở phân nhánh, hình sao (13)

Hình 3.1: Anh Tầm gửi Taxillus chỉnensis (DC.) Dans.

Hình 3.2:

Ánh cành mang hoa của Tầm gửi

Taxillus chinensis (DC.) Dans.

Hình 3-3 : Anh chùm hoa, quả và các bộ phận của một hoa Tầm gửi

Taxillus chinensis (DC.) Dans.

Hình 3.6: Ảnh một số đặc điểm bột Tầm gửi cTaxillus chinnensis (DC.)

Dans.)

Hình 3.4:

Anh một phần vi phẫu lá Tầm gửi

(Taxillus chinnensis í DC.) Dans.)

Hình 3.5 : Ánh một phần vi phẫu Thân Tầm gửi

Ợaxiỉlus chinnensis (IX!.) Dans.)

3.1.2 Nghiên cứu đặc điếm thực vật của mẫu 2.

3.1.2.1 Mô tả hình thái cây và định tên khoa học.

Cành cứng nhiều đốt, vỏ xám, không có lông Lá mọc đối mép lá nguyên , có 3 gân lá cong, kích thước lá dài 6-7cm, rộng 2- 3,5cm, mặt lá

bóng, giòn dễ gẫy Cụm hoa xim, hoa mọc từng cặp chi chít ở kẽ lá, kẽ nhánh

nhỏ Đài cao 4mm, tràng hình ống dài 3mm, 4 thuỳ màu vàng Bầu hạ, 1 ô Quả hình chuỳ, vỏ quả có gai sần (hình 3.7; hình 3.8; hình 3.9- trang 26)

Giáo sư Vũ văn Chuyên đã định tên khoa học là Macrosolen tricolor (Lee.)

Dans.= Elythranthe tricolor HFLec Họ Tầm gửi (Loranthaceae).

Tên Việt Nam là Đại cán tam sắc

3.1.2.2 Đặc điểm giải phẫu của loài Macrosolen tricolor (Lee.) Dans.

a Đặc điểm vi phẫu lá (Hình 3.10- trang 27) Quan sát tiêu bản vi phẫu lá

chúng tôi thấy

* Phần gân lá: Gân phía trên phẳng, phía dưới hod lồi Biểu bì trên và dưới là một hàng tế bào hình chữ nhật dài, xếp đều đặn (1) Thành ngoài tế bào biểu bì hoá cutin dày Sát biểu bì là hàng tế bào hình trứng lớn thành hơi dày (2) Mô mềm cấu tạo bởi các tế bào hình trứng hay đa giác, thành mỏng, kích thước không đều nhau (3) Giữa gân chính có một bó libe- gỗ Libe ôm quanh gỗ (4) Có đám sợi (ở lá già) hình bán nguyệt lớn ôm libe Gỗ gồm các mạch gỗ nhỏ xếp thành hàng tạo thành bó (5) Có rất nhiều tinh thể calci oxalat hình cầu gai nằm rải rác trong toàn bộ phần gân lá (6)

* Phần phiến lá: Biểu bì của phiến lá giống gân lá Mô dậu không rõ Trong phiến lá cũng chứa rất nhiều tinh thể calci oxalat hình cầu gai (6)

b Đặc điiểm vi phẫu thân (Hình 3.11- trang 27).

Mặt cắt của thân có hình tròn, nhìn dưới kính hiển vi từ ngoài vào trong có: Bần gồm một số hàng tế bào hình chữ nhật, rải rác thấy có các lỗ vỏ (1)

Mô mềm vỏ là các tế bào hình trứng dẹt, thành mỏng, kích thước không đều (2) Libe là các bó hình cung, nhỏ, ôm lấy bó gỗ (3) Phần gỗ cấu tạo bởi các

tế bào sợi thành dày, các mạch gỗ có kích thước tương đối đều, xếp thành hàng, liên tục tạo thành vòng (4) Tầng phát sinh libe- gỗ không rõ Trên mỗi

bó libe-gỗ thưòng có đám sợi hình trứng, lớn (5) Trong mô mềm vỏ có các tế bào thành dày hoá gỗ, có kích thước khác nhau, đôi khi có chứa tinh thể calci oxalat hình khối (7) Các tinh thể calci oxalat hình cầu gai cũng thường gặp trong vi phẫu Mô mềm ruột cấu tạo bởi các tế bào tương đối tròn, thành mỏng, có kích thước lớn (6)

3.1.2.3 Đặc điểm bột (Hình 3.12-trang 27).

Bột có màu nâu, không mùi, vị nhạt, quan sát dưới kính hiển vi thấy: Nhiều mảnh biểu bì mang lỗ khí (1) cấu tạo bởi các tế bào hình đa giác kích thước lớn, mảnh biểu bì thân có những gân nổi lên rất rõ (2) Mảnh mô mềm cấu tạo bởi các tế bào hình đa giác lớn, thành mỏng, mang tinh thể calci oxalat hình cầu gai, có đường kính khoảng 0,02-0,03mm (3) Tế bào sợi có thành dày, khoang hẹp, đứng riêng lẻ hay tập trung thành bó (4) Mảnh mạch mạng (5) Tế bào thành dày (Thể cứng) đôi khi có chứa tinh thể calci oxalat hình khối hoặc hình cầu gai (6) Rất nhiều tinh thể calci oxalat hình khối, dài khoảng 0,015-0,045 mm (7), hình cầu gai (8) Đôi khi thấy hạt phấn hoa hình cầu hay hình trứng, có đường kính khoảng 0,01-0,015 mm (9) Rải rác thấy hạt tinh bột hình trứng, có kích thước khoảng 0,005-0,015 mm (10) Có thể thấy những u hình cầu (11), mảnh tế bào cánh hoa (12)

Hình 3.7 :

Ảnh Tầm gửi

Macrosolen tricolor (Lee.) Dans.

Hình 3.8:

Ánh cành mang hoa và quả Tầm gửi

Macrosolen tricolor (Lee.) Dans.

3.1.3 Nghiên cứu đặc điểm thực vật của mẫu 3.

3.1.3.1 Mô tả hình thái cây và định tên khoa học.

Cành cứng có đốt dày, vỏ tím Lá mọc đối, mép lá nguyên, phiến có thể chia thuỳ Kích thước lá dài 3-5,5cm, rộng 2-3cm Cụm hoa xim, mọc thành chùm ở kẽ lá, hoa mọc đôi một, lá bắc ngắn lm m Cuống hoa ngắn Tràng hoa liền thuôn dài hơi thắt ở đầu, dài l,5-2cm, khi nở chia 6 thuỳ màu tím đỏ cao 5-6mm Bộ nhị 6, chỉ nhị dính trên tràng ống màu vàng xanh, bao phấn hướng trong dính vào núm nhuỵ Bầu hạ, lô Quả hình trụ (hình 3.13; hình 3.14; hình

3.15- trang 30) Giáo sư Vũ Văn Chuyên đã định tên khoa học là Macrosolen

affinis robinsoniỉ (Gamble.) Dans Họ Tầm gửi (Loranthaceae).

Tên Việt Nam là Đại cán Robinson

3.1.3.2 Đặc điểm giải phẫu của loài Macrosolen affinis robinsonii

* Phần phiến lá: Biểu bì có cấu tạo tương tự phần gân lá Mô dậu không

rõ Thường gân phụ có các bó libe-gỗ cấu tạo tương tự bó libe-gỗ gân chính,

có kích thước nhỏ hơn

b Đặc điểm vi phẫu thân (Hình 3.17- trang 31).

Mặt cắt của thân có hình tròn, từ ngoài vào trong có:

Bần gồm nhiều hàng tế bào hình chữ nhật xếp thành vòng đồng tâm và dãy xuyên tâm, rải rác thấy các lỗ vỏ (1) Mô mềm vỏ là các tế bào hình trứng, thành mỏng, kích thước không đều (2) Libe- gỗ tạo thành các bó rõ rệt Các

bó xếp thành vòng tròn và cách nhau bởi các tia ruột 3-4 hàng tế bào (3) Tầng phát sinh libe- gỗ là hai hàng tế bào hình chữ nhật nhỏ tạo thành vòng liên tục Các mạch gỗ lớn, phân bố rải rác trong mô gỗ (4) Phía trên mỗi bó libe-gỗ thường có đám sợi lớn (7) Trong mô mềm mang các tế bào thành dày hoá gỗ

có kích thước và hình dạng rất khác nhau, đứng riêng lẻ hay tập trung thành đám lớn, đôi khi mang tinh thể calci oxalat hình khối, tinh thể calci oxalat nằm rải rác khắp trong vi phẫu (5) Mô mềm ruột cấu tạo bởi các tế bào tương đối tròn, to, thành mỏng, càng vào phía trong càng lớn (6)

3.I.3.3 Đặc điểm bột (Hình 3.18- trang 31).

Bột có màu nâu, không mùi, vị nhạt, quan sát dưới kính hiển vi thấy: Mảnh bần (1), mảnh phiến lá có những tế bào hình đa giác lớn (5), chứa lỗ khí(2) Mảnh cánh hoa (3), tạo bởi các tế bào hình chữ nhật, xếp lộn xộn Mảnh

mô mềm cấu tạo bởi các tế bào thành mỏng, lớn, tương đối tròn đôi khi có chứa các tế bào thành dày hoá gỗ hoặc tinh thể calci oxalat hình khối (4, 6, 7)

Tế bào sợi dài, khoang hẹp, có thể mang tinh thể calci oxalat hình khối (8) Những tế bào thành dày, khoang rộng (9), mang tinh thể calci oxalat hình khối(11) Tinh thể calci oxalat hình khối, có kích thước khoảng 0,01-0,02 mm(12), hình cầu gai (10), có đường kính khoảng 0,02-0,03 mm Rải rác thấy mảnh mạch điểm, mảnh mạch vạch (13) và mảnh tổ chức mang những giọt hình cầu có chiết xuất lớn (14)

Hình 3.13:

Anh cành Tầm gửi Macrosolen

ajfinis robinsonii (Gramble.)