Tổng hợp và thử hoạt tính kháng tế bào ung thư của một số dẫn chất 6 amino 2 aryl quinazolin 4 on

BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI HOÀNG PHƯƠNG THÚY TỔNG HỢP VÀ THỬ HOẠT TÍNH KHÁNG TẾ BÀO UNG THƯ CỦA MỘT SỐ DẪN CHẤT 6-AMINO-2-ARYL QUINAZOLIN-4-ON KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ HÀ NỘI-2018 BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI HOÀNG PHƯƠNG THÚY Mã sinh viên: 1301404 TỔNG HỢP VÀ THỬ HOẠT TÍNH KHÁNG TẾ BÀO UNG THƯ CỦA MỘT SỐ DẪN CHẤT 6-AMINO-2-ARYL QUINAZOLIN-4-ON KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ Người hướng dẫn: PGS TS Văn Thị Mỹ Huệ ThS Hoàng Thu Trang Nơi thực hiện: Trung tâm nghiên cứu phát triển thuốcViện hóa sinh biển-Viện hàn lâm khoa học Công nghệ Việt Nam Bộ môn Hóa Hữu cơ-Đại học Dược Hà Nội HÀ NỘI-2018 Lời cảm ơn Trong trình nghiên cứu tìm hiểu để hồn thành khóa luận tốt nghiệp, em nhận nhiều giúp đỡ từ thầy cô giáo, bạn bè, người thân Nhân dịp này, em xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới: PGS TS Văn Thị Mỹ Huệ, cô giao cho em đề tài thường xuyên quan tâm, động viên, tạo điều kiện thuận lợi cho em thực đề tài ThS Hồng Thu Trang, ThS Ngơ Xn Hồng hỗ trợ, quan tâm em trình thực nghiệm mang đến cho em nhiều kiến thức quý báu để em hoàn thành tốt mục tiêu đề tài TS Lê Nguyễn Thành cán Trung tâm nghiên cứu phát triển thuốc -Viện Hóa sinh biển- Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam giúp đỡ, bảo em tận tình trình thực nghiệm Cuối cùng, em xin cảm ơn gia đình, bạn bè, người thân ln ủng hộ, khích lệ tinh thần, giúp đỡ em nhiều suốt thời gian học tập hồn thành khóa luận tốt nghiệp đạt kết mong muốn Hà Nội, ngày 18 tháng 05 năm 2018 Sinh viên Hoàng Phương Thúy MỤC LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, SƠ ĐỒ ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 Hợp chất 4(3H)-quinazolinon tác dụng kháng ung thư 1.2 Phương pháp tổng hợp dẫn chất 2-arylquinazolin-4-on 12 CHƯƠNG NGUYÊN LIỆU, THIẾT BỊ, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 17 1.3 Nguyên vật liệu, thiết bị 17 1.3.1 Ngun vật liệu, hóa chất, dung mơi 17 2.1.2 Thiết bị thí nghiệm 18 2.2 Nội dung nghiên cứu 18 2.3 Phương pháp nghiên cứu 19 2.3.1 Phương pháp tổng hợp dẫn chất 6-butylamino-2-arylquinazolin-4on 19 2.3.2 Phương pháp tinh chế xác định cấu trúc 19 2.3.3 Phương pháp xác định hoạt tính kháng tế bào ung thư 19 3.1 Tổng hợp hóa học 23 3.1.1 Tổng hợp chất trung gian 5-butylamino-2-nitrobenzamid (2) 23 3.1.2 Tổng hợp chất trung gian 2-amino-5-(butylamino)benzamid (3) 23 3.1.3 Tổng hợp dẫn chất 6-butylamino-2-arylquinazolin-4-on (5) 24 3.2 Kiểm tra độ tinh khiết khẳng định cấu trúc 28 3.2.1 Kiểm tra độ tinh khiết chất tổng hợp 28 3.2.2 Khẳng định cấu trúc 29 3.3 Thử hoạt tính gây độc tế bào ung thư 33 3.4 Bàn luận 34 3.4.1 Về tổng hợp hóa học 34 3.4.2 Về khẳng định cấu trúc 36 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 44 DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT ATCC The American Type Culture Collection (Tổ chức tài nguyên tiêu chuẩn vật liệu sinh học Mỹ) Ar Aryl CDCl3 Cloroform-D6 13 Carbon-13 nuclear magnetic resonance (Phổ cộng hưởng từ hạt C-NMR nhân 13C) CTPT Công thức phân tử Đ.v.C Đơn vị carbon DMAC N,N-Dimethyl acetamid DMC Dimethyl carbonat DMF Dimethyl formamid DMSO Dimethyl sulfoxid EC50 50% Effective concentration (Nồng độ có tác dụng với 50% cá thể) EGFR Epidermal growth factor receptor (Thụ thể yếu tố phát triển biểu bì) ESI Electrospray ionization (Ion hóa phun điện tử) EtOAc Ethylacetat GI50 50% Growth inhibition (Nồng độ ức chế 50% phát triển) hl Hồi lưu Proton nuclear magnetic resonance (Phổ cộng hưởng từ hạt nhân H-NMR proton) IC50 Half maximal inhibitory concentration (Nồng độ ức chế 50%) IR Infrared Spectrometry (Phổ hồng ngoại) J Hằng số tương tác spin-spin KLPT Khối lượng phân tử LC50 50% Lethal concentration (Nồng độ gây chết 50% cá thể) Me Methyl MS Mass spectrometry (Phổ khối lượng) MTT 3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyltetrazoli bromid n-Bu n-Butyl SKLM Sắc ký lớp mỏng n-HE n-Hexan Tonc Nhiệt độ nóng chảy Than ht Than hoạt tính DANH MỤC CÁC BẢNG Trang Bảng 1.1 Hợp chất I tác dụng gây độc tế bào Bảng 1.2 Hợp chất IV tác dụng kháng ung thư Bảng 1.3 Các dẫn chất 2-arylquinazolin-4-on hoạt tính kháng ung thư Bảng 1.4 Hoạt tính độc tế bào dẫn chất (X) 10 Bảng 1.5 Kết thử hoạt tính gây độc tế bào số dẫn chất 11 XIa-e dòng tế bào ung thư người Bảng 2.1 Ngun vật liệu, hóa chất, dung mơi dùng nghiên cứu 17 Bảng 3.1 Kết tổng hợp dẫn chất 6-butylamino-2-aryl 27 quinazolin-4-on (5a-e) Bảng 3.2 Giá trị Rf Tonc hợp chất 5a-e 28 Bảng 3.3 Số liệu phổ IR dẫn chất 5a-e 29 Bảng 3.4 Số liệu phổ MS dẫn chất 5a-e 30 Bảng 3.5 Số liệu phổ 1H-NMR dẫn chất 5a-e 31 Bảng 3.6 Số liệu phổ 13C-NMR dẫn chất 5a-e 32 Bảng 3.7 Kết thử hoạt tính gây độc tế bào dẫn chất 5a-e 33 Bảng 3.8 Kết thử hoạt tính kháng ung thư chất 5a-e 41 DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, SƠ ĐỒ HÌNH VẼ Trang Hình 1.1 Khung cấu trúc 4(3H)-quinazolinon Hình 1.2 Các dẫn chất 6-pyrrolidinylquinazolin-4-on (II) Hình 1.3 Các dẫn chất 6,8-dibrommo-4(3H)-quinazolinon Hình 1.4 Hợp chất 6-cloro-2-(pyridin-4-yl)quinazolin-4(3H)-on (VI) Hình 1.5 Các hợp chất 2- mercapto-3-(3,4,5-trimethoxy benzyl)- 4(3H)- quinazolinon có hoạt tính kháng ung thư cao Hình 1.6 Hợp chất 3-(2-(2-phenylthiazol-4-yl)ethyl)-2propylquinazolin-4(3H)-on (VIII) SƠ ĐỒ Trang Sơ đồ 1.1 Phản ứng tổng hợp Shishoo C.J 12 Sơ đồ 1.2 Phản ứng benzoyl clorid 2-amino benzamid 13 Potewar Sơ đồ 1.3 Phản ứng anthranilamid aroyl halogenid 13 Mann Jen-Hour Sơ đồ 1.4 Phản ứng tổng hợp Wei cộng 13 Sơ đồ 1.5 Phản ứng tổng hợp Wu cộng 14 Sơ đồ 1.6 Phản ứng tổng hợp Hour M J cộng 14 Sơ đồ 1.7 Phản ứng tổng hợp Kim N Y Cheon CH 15 Sơ đồ 1.8 Phản ứng tổng hợp Shingare cộng 15 Sơ đồ 1.9 Phản ứng tổng hợp Angel H Romero 15 Sơ đồ 1.10 Phản ứng tổng hợp dẫn chất quinazolin-4-on nhóm 16 nghiên cứu Ấn Độ năm 2017 Sơ đồ 3.1 Quy trình tổng hợp dẫn chất 6-butylamino-2arylquinazolin -4-on 23 Phụ lục Phổ 13C-NMR chất 5b Phụ lục Phổ IR chất 5b Phụ lục Phổ MS chất 5b Phụ lục Phổ 1H-NMR chất 5c Phụ lục 10 Phổ 13C-NMR chất 5c Phụ lục 11 Phổ IR chất 5c Phụ lục 12 Phổ MS chất 5c Phụ lục 13 Phổ 1H-NMR chất 5d Phụ lục 14 Phổ 13C-NMR chất 5d Phụ lục 15 Phổ IR chất 5d Phụ lục 16 Phổ MS chất 5d Phụ lục 17 Phổ 1H-NMR chất 5e Phụ lục 18 Phổ 13C-NMR chất 5e Phụ lục 19 Phổ IR chất 5e Phụ lục 20 Phổ MS chất 5e ... chất 6- butylamino -2- arylquinazolin -4- on 2. 2 .2 Tinh chế xác định cấu trúc dẫn chất tổng hợp 2. 2.3 Thử hoạt tính kháng ung thư dẫn chất tổng hợp Tiến hành thử hoạt tính kháng ung thư dẫn chất tổng. .. 6- amino- 2- arylquinazolin -4- on tiến hành với hai mục tiêu: Tổng hợp số dẫn chất 6- amino- 2- arylquinazolin -4- on Thử hoạt tính gây độc tế bào dẫn chất tổng hợp số dòng tế bào ung thư CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 Hợp chất 4( 3H)-quinazolinon... cứu 2. 2.1 Tổng hợp dẫn chất 6- butylamino -2- arylquinazolin -4- on 18 - Tổng hợp chất trung gian 5-butylamino -2- nitrobenzamid - Tổng hợp chất trung gian 2 -amino- 5-(butylamino)benzamid - Tổng hợp dẫn