Tổng hợp và thử hoạt tính kháng tế bào ung thư của một số dẫn chất 6 diethylamino 2 (2 triflourethoxyphenyl) 3h quinazolin 4 on

BỘ Y TẾ TRƯ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC C HÀ NỘI N NGUYỄN DUY DŨNG Mã sinh viên: 1201096 TỔNG NG HỢP H VÀ THỬ HOẠT T TÍNH KHÁNG TẾ BÀO UNG THƯ CỦA C MỘT SỐ Ố DẪN CHẤT 6-DIETHYLAMINO2-(2-TRIFLOUROMETHOXYPHENYL) TRIFLOUROMETHOXYPHENYL) TRIFLOUROMETHOXYPHENYL)-3HQUINAZOLIN-4-ON KHÓA LU LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢ ỢC SĨ HÀ NỘI - 2017 BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI NGUYỄN DUY DŨNG Mã sinh viên: 1201096 TỔNG HỢP VÀ THỬ HOẠT TÍNH KHÁNG TẾ BÀO UNG THƯ CỦA MỘT SỐ DẪN CHẤT 6-DIETHYLAMINO2-(2-TRIFLOUROMETHOXYPHENYL)-3HQUINAZOLIN-4-ON KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ Người hướng dẫn: TS Văn Thị Mỹ Huệ Nơi thực hiện: Bộ môn Hóa hữu - Đại học Dược Hà Nội Viện Hóa sinh biển – Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam HÀ NỘI – 2017 LỜI CẢM ƠN Những dòng đầu tiên, em xin dành cho người bên cạnh giúp đỡ em hoàn thành khóa luận tốt nghiệp Trước hết, em xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến TS.Văn Thị Mỹ Huệ - Bộ môn Hóa Hữu – Trường đại học Dược Hà Nội TS Lê Nguyễn Thành – Viện Hóa Sinh Biển – Viện hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam Thầy cô không dõi theo, bảo giúp đỡ em lúc khó khăn mà tạo điều kiện tốt để em hoàn thành tốt khóa luận Em xin gửi lời cảm ơn tới anh chị Viện Hóa sinh biển – Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam giúp đỡ em trình thực nghiệm Cuối cùng, em xin bày tỏ tình cảm chân thành tới gia đình bạn bè quan tâm, động viên tạo động lực cho em suốt trình làm khóa luận tốt nghiệp Vì kiến thức thân hạn chế, trình thực khóa luận khó tránh khỏi sai sót Rất mong nhận góp ý thầy cô, bạn bè để khóa luận hoàn thiện Hà Nội, ngày 17 tháng năm 2017 Sinh viên Nguyễn Duy Dũng MỤC LỤC MỤC LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, SƠ ĐỒ ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 Các hợp chất mang khung cấu trúc 4(3H)-quinazolinon 1.2 Tác dụng chống ung thư dẫn chất 2-aryl-3H-quinazolin-4-on 1.2.1 Tác dụng kháng ung thư dẫn chất 2-aryl-3H-quinazolin-4-on với nhóm vị trí C6 2-aryl 1.2.2 Tác dụng kháng ung thư dẫn chất với nhóm vị trí N3 1.3 Phương pháp tổng hợp dẫn chất N3 2-arylquinazolin-4(3H)-on 14 1.3.1 Phản ứng tạo sản phẩm trung gian benzoxazinon 14 1.3.2 Phản ứng tạo sản phẩm trung gian 2-aryl quinazolin-4(3H)-on 14 1.3.3 Phản ứng tổng hợp từ 2-arylindol amin 15 CHƯƠNG NGUYÊN LIỆU, THIẾT BỊ VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 17 2.1 Nguyên liệu thiết bị 17 2.1.1 Nguyên liệu, hóa chất, dung môi 17 2.1.2 Dụng cụ thiết bị thí nghiệm 17 2.2 Nội dung phương pháp nghiên cứu 18 2.2.1 Nội dung nghiên cứu 18 2.2.2 Phương pháp tổng hợp 18 2.2.3 Phương pháp tinh chế xác định cấu trúc 19 2.2.4 Phương pháp xác định hoạt tính kháng tế bào ung thư 19 CHƯƠNG 3: THỰC NGHIỆM, KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 22 3.1 Tổng hợp hóa học 22 3.1.1 Tổng hợp chất trung gian 6-Diethylamino-2-(2-trifluoromethoxy phenyl)quinazolin-4-on (7) 23 3.1.2.Tổng hợp dẫn chất N3 6-diethylamino-2-(2trifluoromethoxy phenyl)-3H-quinazolin-4-on (9a-e) 24 3.2 Kiểm tra độ tinh khiết, khẳng định cấu trúc 28 3.2.1 Kiểm tra độ tinh khiết 28 3.2.2 Khẳng định cấu trúc 29 3.3 Thử hoạt tính gây độc tế bào 35 3.4 Bàn luận 36 3.4.1 Về tổng hợp hóa học 36 3.4.2.Về xác định cấu trúc 38 3.4.3 Về hoạt tính kháng tế bào ung thư 43 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 45 KẾT LUẬN 45 KIẾN NGHỊ 45 TÀI LIỆU THAM KHẢO 46 PHỤ LỤC 50 DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT 13 C-NMR H-NMR Ar CDCl3 CTPT d dd DMAC DMF DMSO Đ.v.c EA, EtOAc ED50 HE IC50 IR KLPT m MS Rf s SKLM t THF Tonc Phổ cộng hưởng từ hạt nhân 13C (carbon-13 nuclear magnetic resonance) Phổ cộng hưởng từ hạt nhân 1H (proton nuclear magnetic resonance) Aryl Cloroform-d Công thức phân tử Doublet Doublet of doublet Dimethylacetamid Dimethylformamid Dimethyl sulfoxid Đơn vị carbon Ethylacetat Liều gây tác dụng 50% cá thể n-Hexan Nồng độ ức chế tối đa 50% cá thể(half maximal inhibitory concentration) Phổ hồng ngoại (infrared spectroscopy) Khối lượng phân tử multiplet Phổ khối lượng (mass spectrometry) Hệ số lưu giữ singlet Sắc ký lớp mỏng triplet Tetrahydrofuran Nhiệt độ nóng chảy DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 3.1: Kết tổng hợp dẫn chất 9a-e 28 Bảng 3.2: Giá trị Rf Tonc dẫn chất 9a-e 29 Bảng 3.3: Số liệu phổ MS dẫn chất 9a-e 30 Bảng 3.4: Số liệu phổ IR dẫn chất 9a-e 30 Bảng 3.5: Phổ 1H-NMR chất trung gian 31 Bảng 3.6: Số liệu phổ 1H-NMR dẫn chất 9a-e 32 Bảng 3.7: Số liệu phổ 13C-NMR dẫn chất 9a-e 34 Bảng 3.8: Kết thử hoạt tính gây độc tế bào 9a-e 35 DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, SƠ ĐỒ HÌNH VẼ Hình 1.1: Khung cấu trúc quinazolin quinazolinon Hình 1.2: Một số thuốc có chứa khung cấu trúc quinazolinon thị trường Hình 1.3: Dãy hợp chất 2-phenyl-4-quinazolinon nghiên cứu MannJen Hour năm 2000 Hình 1.4: Cấu trúc hợp chất 2-aryl-6-subtituted quinazolinon Mann-Jen Hour năm 2013 Hình 1.5: Dãy hợp chất 2-aryl-4-quinazolinon nghiên cứu Lê Nguyễn Thành cộng Hình 1.6: Hợp chất 6-(diethylamino)-2-(2-triflouromethoxyphenyl)-4quinazolinon Hình 1.7: Các dẫn chất 2-phenylquinazolin-4(3H)-on nghiên cứu Rhee Hình 1.8: Các hợp chất 3-(arylidenamino)-2-phenylquinazolin-4(3H)-on nghiên cứu Subhadip Das Hình 1.9: Cấu trúc hợp chất 2-(4-substituted phenyl) quinazolin-4(3H)-on Hình 1.10: Dãy hợp chất 6,8-dibromo-2-phenyl-4(3H)-quinazolinon 10 Hình 1.11: Cấu trúc nhóm hợp chất 2-phenylquinazolin-4(3H)-on nghiên cứu Deep.A 11 Hình 1.12: Cấu trúc dãy hợp chất 2-phenylquinazolin-4(3H)-on nghiên cứu Hamdy M Abdel-Rahman 11 Hình 1.13: Cấu trúc dãy hợp chất 2-arylquinazolinon nghiên cứu Mohammad Mahdavi 12 Hình 1.14: Dãy hợp chất 6,8-dibromo-2-(4-clorophenyl)quinazolin-4(3H)-on 13 Hình 1.15: Cấu trúc dãy hợp chất 2-phenylquinazolin-4-(3H)-on nghiên cứu Alex Joseph 13 Hình 3.1: Phổ khối lượng (MS) hợp chất 9d 39 Hình 3.2: Phổ hồng ngoại (IR) hợp chất 9a 40 Hình 3.3: Phổ cồng hưởng từ hạt nhân proton (NMR-1H) hợp chất 9d 42 Hình 3.4: Phổ cộng hưởng từ hạt nhân NMR-13C hợp chất 9d 43 SƠ ĐỒ Sơ đồ 1.1: Phản ứng tổng hợp dẫn chất N3 quinazolin-4(3H)-on thông chất trung gian benzoxazinon 14 Sơ đồ 1.2: Phản ứng tổng hợp N3-alkyl-2-arylquinazolin-4-on thông qua tạo chất trung gian 2-aryl quinazolin-4(3H)-on 15 Sơ đồ 1.3: Phản ứng tổng hợp N3-alkyl-2-arylquinazolin-4-on Rhee 15 Sơ đồ 1.4: Phản ứng tổng hợp từ 2-arylindol amin 16 Sơ đồ 3.1: Tổng hợp 6-diethylamino-2-trifloromethoxyphenyl-4-quinazolinon (7) 22 Sơ đồ 3.2: Tổng hợp 2-amino-5-diethylaminobenzamid (5) Error! Bookmark not defined Sơ đồ 3.3: Tổng hợp dẫn chất N3 6-diethylamino-2-(2trifluoromethoxyphenyl)-3H-quinazolin-4-on 23 Sơ đồ 3.4: Tổng hợp dẫn chất N3 6-diethylamino-2-(2trifluoromethoxyphenyl)-3H-quinazolin-4-on 37 Sơ đồ 3.5: Hiện tượng hỗ biến vòng lactam hợp chất 37 ĐẶT VẤN ĐỀ Ung thư bệnh nguy hiểm nguyên nhân đứng thứ gây tử vong người Theo thống kê tổ chức y tế giới, năm 2014đã có 8,8 triệu người chết ung thư, chiếm 16% số ca tử vong toàn giới [29] Trong đó, Việt Nam quốc gia có tỷ lệ tử vong ung thư cao với khoảng 115.000 người năm tương đương với 315 người/ngày [30] Mặc dù giới có nhiều tiến việc điều trị ung thư, nhiên, việc tìm thuốc với hiệu điều trị cao độc tính luôn cần thiết Trong số nhiều hợp chất nghiên cứu dẫn chất chứa khung cấu trúc quinazolinon thu hút nhiều quan tâm nhà khoa học hoạt tính kháng tế bào ung thư tốt chúng [8,20,22], số dãy hợp chất 2-arylquinazolin-4(3H)-on[14,24] Một số kết nghiên cứu cho thấy dẫn chất 2-arylquinazolin-4-on với nhóm vị trí C6 N3 có tác dụng ức chế tế bào ung thư đáng quan tâm [2,9,12,7] Đặc biệt, hợp chất 2-aryl-6-diethylaminoquinazolinon thể hoạt tính kháng ung thư mạnhtrên dòng tế bào ung thư KB, Hep-G2, LU MCF7 với giá trị IC50từ 0,021-1,25 µg/ml [1] Sử dụng hợp chất 2-aryl-6-diethylaminoquinazolin-4-on hợp chất dẫn đường, đề tài “Tổng hợp thử hoạt tính kháng ung thư số dẫn chất 6-diethylamino-2-(2-trifluoromethoxyphenyl)-3H-quinazolin-4-on” tiến hành với mục tiêu: Tổng hợp số dẫn chất N3của 6-diethylamino-2-(2trifluoromethoxyphenyl)-3H-quinazolin-4-on Thử hoạt tính gây độc tế bàocủa dẫn chất tổng hợp số dòng tế bào ung thư Phụ lục 7: Phổ MS chất 9b 56 Phụ lục 8: Phổ IR chất 9b 57 Phụ lục 9: Phổ 1H-NMR chất 9c 58 Phụ lục 10: Phổ 13C-NMR chất9c 59 Phụ lục 11: Phổ MS chất 9c 60 Phụ lục 12: Phổ IR chất 9c 61 Phụ lục 13: Phổ 1H-NMR chất 9d 62 Phụ lục 14: Phổ 13C-NMR chất 9d 63 Phụ lục 15: Phổ MS chất 9d 64 Phụ lục 16: Phổ IR chất9d 65 Phụ lục 17: Phổ 1H-NMR chất 9e 66 Phụ lục 18: Phổ 13C-NMR chất 9e 67 Phụ lục 19: Phổ MS chất 9e 68 Phụ lục 20: Phổ IR chất 9e 69 Phụ lục 21: Phổ 1H-NMR chất 70 ... hợp số dẫn chất N 3của 6- diethylamino- 2- (2trifluoromethoxyphenyl) -3H- quinazolin- 4- on Thử hoạt tính gây độc tế bàocủa dẫn chất tổng hợp số dòng tế bào ung thư CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 Các hợp chất mang... kháng tế bào ung thư tốt đáng quan tâm 13 Kết hợp khả thể hoạt tính tốt vị trí C 6và N 3của dẫn chất 2- aryl -3H- quinazolin- 4- on, đề tài Tổng hợp thử hoạt tính kháng ung thư số dẫn chất 6- Diethylamino- ... 22 3.1 Tổng hợp hóa học 22 3.1.1 Tổng hợp chất trung gian 6- Diethylamino- 2- (2- trifluoromethoxy phenyl )quinazolin- 4- on (7) 23 3.1 .2 .Tổng hợp dẫn chất N3 6- diethylamino- 2- (2trifluoromethoxy