Xây dựng phương pháp định lượng đồng thời lumivudin zidovudin và nevirapin trong chế phẩm viên nén bằng MEKC

BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI VƯƠNG LAN HƯƠNG XÂY DỰNG PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯỢNG ĐỒNG THỜI LAMIVUDIN, ZIDOVUDIN & NEVIRAPIN TRONG CHẾ PHẨM VIÊN NÉN BẰNG MEKC KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ HÀ NỘI, 2013 Ket-noi.com Ket-noi.com kho kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI VƯƠNG LAN HƯƠNG XÂY DỰNG PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯỢNG ĐỒNG THỜI LAMIVUDIN, ZIDOVUDIN & NEVIRAPIN TRONG CHẾ PHẨM VIÊN NÉN BẰNG MEKC KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ GV hướng dẫn: Nguyễn Thị Thùy Linh Nơi thực hiện: Bộ mơn Hóa phân tích - Độc chất Trường Đại học Dược Hà Nội HÀ NỘI, 2013 LỜI CẢM ƠN Khóa luận tốt nghiệp hồn thành mơn Hóa phân tích Độc chất trường Đại học dược Hà Nội Em xin chân thành gửi lời cảm ơn sâu sắc tới cô Nguyễn Thị Thùy Linh, người tận tâm dìu dắt, bảo em suốt trình nghiên cứu hồn thành khóa luận Em xin chân thành cảm ơn Ban giám hiệu, thầy cô giáo trường Đại học Dược Hà Nội thầy cô giáo, anh chị kỹ thuật viên mơn Hóa phân tích - Độc chất tạo điều kiện tốt cho em trình học tập nghiên cứu Cuối em xin gửi lời cảm ơn đến gia đình, bạn bè, người hết lòng giúp đỡ động viên em hồn thành khóa luận Hà Nội, tháng 02 năm 2013 Sinh viên Vương Lan Hương Ket-noi.com Ket-noi.com kho kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi MỤC LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ PHẦN I: TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan Lamivudin, Zidovudin & Nevirapin 1.1.1 Tổng quan chung 1.1.2 Dược động học 1.1.3 Ứng dụng Lamivudin, Zidovudin & Nevirapin điều trị HIV 1.2 Cơ sở lý thuyết điện di mao quản 1.2.1 Cơ chế trình điện di mao quản 1.2.2 Các kiểu điện di mao quản 10 1.2.3 Các yếu tố ảnh hưởng đến trình điện di 12 1.2.4 Điện di mao quản micelle (MEKC) 12 1.2.5 Ưu - nhược điểm MEKC 17 1.3 Một số nghiên cứu gần tách định lượng đồng thời 3TC, AZT & NVP 18 1.3.1 Phương pháp HPLC 18 1.3.2 Phương pháp CE 20 PHẦN II: ĐỐI TƯỢNG, NỘI DUNG & PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 21 2.1 Điều kiện nghiên cứu 21 2.1.1 Các chất chuẩn đối chiếu 21 2.1.2 Hóa chất 21 2.1.3 Thiết bị dụng cụ 23 2.2 Đối tượng nghiên cứu 23 2.3 Nội dung phương pháp nghiên cứu 24 2.3.1 Nội dung nghiên cứu 24 2.3.2 Phương pháp nghiên cứu 24 3.1 Lựa chọn điều kiện điện di tối ưu 27 3.1.1 Lựa chọn bước sóng 27 3.1.2 Điều kiện điện di 28 3.1.3 Lựa chọn phương pháp bơm mẫu 29 3.1.4 Lựa chọn kiểu điện di 30 3.1.5 Lựa chọn dung dịch điện ly 31 3.1.6 Khảo sát điều kiện pH dung dịch điện ly 32 3.1.7 Khảo sát nồng độ dung dịch điện ly 35 3.1.8 Khảo sát nồng độ chất tạo micelle SDS 37 3.1.9 Khảo sát đặt vào hai đầu mao quản 39 3.1.10 Khảo sát áp suất tiêm mẫu 41 3.1.11 Định tính Lamivudin, Zidovudin, Nevirapin điều kiện điện di thiết lập 43 3.1.12 Kết luận 45 3.2 Thẩm định phương pháp 45 3.2.1 Khảo sát tính tương thích hệ thống 45 3.2.2 Tính đặc hiệu 46 3.2.3 Xác định khoảng tuyến tính 48 3.2.4 Độ lặp lại phương pháp 52 3.2.5 Độ phương pháp 54 3.3 Ứng dụng định lượng chế phẩm 56 PHẦN IV: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT 58 4.1 4.2 Kết luận 58 Đề xuất 59 Ket-noi.com Ket-noi.com kho kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT AIDS AZT C CE Hội chứng suy giảm miễn dịch mắc phải người ( Acquired immunodeficiency syndrome) Zidovudin Nồng độ Điện di mao quản (Capillary Electrophoresis) CEC Điện sắc ký mao quản (Capillary Electrochromatography) CGE Điện di mao quản gel (Capillary Gel Electrophoresis) CZE Điện di mao quản vùng (Capillary Zone Electrophoresis) Cmax Nồng độ đỉnh thuốc huyết tương DAD Detector mảng diod (Diod Array Detector) EOF Dòng điện thẩm (Electro – osmotic Flow) HPLC HIV NVP MEKC RSD % Sắc ký lỏng hiệu cao (High Performance Liquid Chromatography) Virus gây bệnh suy giảm miễn dịch người ( Human Immunodeficiency Virus) Nevirapin Sắc ký điện động micelle (Micellar Electrokinetic chromatography) Độ lệch chuẩn tương đối (Relative Standard Deviation) Spic Diện tích pic SD Độ lệch chuẩn (Standard Deviation) STT Số thứ tự T1/2 Thời gian bán thải Tmax Thời gian để đạt Cmax Tm Thời gian di chuyển Tnc Nhiệt độ chảy UV – VIS Bước sóng tử ngoại - khả kiến (Ultra Violet – Visiable) WHO Tổ chức Y tế giới (World Heal Organization) 3TC Lamivudin ddC Zalcitabine ddI Didanosine Ket-noi.com Ket-noi.com kho kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi DANH MỤC CÁC BẢNG STT bảng Tên bảng Tổng quan chung Lamivudin, Zidovudin & Nevirapin Dược động học Lamivudin, Zidovudin & Nevirapin Các kiểu điện di, chế tách ứng dụng Kết khảo sát tính tương thích hệ thống phương pháp (n=6) Diện tích pic điện di đồ nồng độ 3TC tương ứng Diện tích pic điện di đồ nồng độ AZT tương ứng Diện tích pic điện di đồ nồng độ NVP tương ứng 10 11 12 13 14 Kết xác định độ lặp lại phương pháp MEKC định lượng 3TC Kết xác định độ lặp lại phương pháp MEKC định lượng AZT Kết xác định độ lặp lại phương pháp MEKC định lượng NVP Kết khảo sát độ phương pháp thêm chuẩn Lamivudin Kết khảo sát độ phương pháp thêm chuẩn Zidovudin Kết khảo sát độ phương pháp thêm chuẩn Nevirapin Kết định lượng viên nén Avocomb-N 15 Kết định lượng viên nén Lamivudin 150mg & Zidovudin 300mg Ket-noi.com Ket-noi.com kho kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi DANH MỤC CÁC HÌNH STT hình Tên hình Sơ đồ nguyên tắc hoạt động CE Sự di chuyển ion phân tử mao quản Thứ tự rửa giải điện di đồ Cấu trúc micelle dòng EOF MEKC Micell hình cầu Phổ hấp thụ Lamivudin Phổ hấp thụ Zidovudin Phổ hấp thụ Nevirapin 10 11 12 13 Điện di đồ chuẩn Lamivudin, Zidovudin, Nevirapin ba dung dịch điện ly khác Điện di đồ hỗn hợp ba chuẩn với dung dịch điện ly Na2B4O7 10mM/ SDS 50mM pH khác Điện di đồ hỗn hợp chuẩn với dung dịch điện ly nồng độ borat khác Điện di đồ hỗn hợp chuẩn với dung dịch điện ly nồng độ SDS khác Điện di đồ hốn hợp chuẩn với dung dịch điện ly borat 10mM/SDS 50mM khác 14 Điện di đồ hỗn hợp chuẩn với thời gian tiêm mẫu khác 15 Điện di đồ hỗn hợp thử 48 Hình 23: Điện di đồ hỗn hợp chế phẩm thêm hỗn hợp chuẩn Nhận xét: Mẫu trắng pic trùng với pic chất phân tích hay pic lạ Điện di đồ mẫu chuẩn mẫu thử cho kết ba pic với thời gian lưu tương tự Khi thêm chuẩn vào hỗn hợp chế phẩm, tiến hành điện di đồ không thấy xuất pic lạ diện tích pic mẫu thử tăng lên Vậy phương pháp có tính đặc hiệu 3.2.3 Xác định khoảng tuyến tính Chúng tơi tiến hành chạy chuẩn theo điều kiện điện di lựa chọn Chuẩn bị hỗn hợp dung dịch chuẩn có chứa Lamivudin có nồng độ từ 77,25µg/ml đến 231,7µg/ml; Zidovudin có nồng độ từ 149,0µg/ml đến 447,0µg/ml; Nevirapin có nồng độ từ 99,25µg/ml đến 297,7µg/ml tiến hành khảo sát Kết thu sau: Ket-noi.com Ket-noi.com kho kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi 49 Bảng 5: Diện tích pic điện di đồ nồng độ Lamivudin tương ứng Nồng độ (µg/ml) Diện tích pic (mAU.s) 77,25 123,6 154,5 169,95 185,4 231,7 29,85 47,60 62,10 70,70 78,76 97,80 Phương trình hồi quy tuyến tính S = 0,4493 x C – 6,1032 Hệ số tương quan R2 = 0,9968 Diện tích pic mAU.s 120 y = 0.4493x - 6.1032 R² = 0.9968 95 70 45 20 50 70 90 110 130 150 170 190 210 230 250 Nồng độ Lamivudine µg/ml Hình 24: Đồ thị biểu diễn phụ thuộc diện tích pic nồng độ 3TC tương ứng 50 Bảng 6: Diện tích pic điện di đồ nồng độ Zidovudin tương ứng Nồng độ (µg/ml) Diện tích pic (mAU.s) 149,0 238,4 298,0 327,8 357,6 447,0 57,4 94,8 120,6 138,7 149,4 186,5 Phương trình hồi quy tuyến tính S = 0,4385 x C – 8,2912 Hệ số tương quan R2 = 0,9982 Diện tích pic mAU.s 220 y = 0.4385x - 8.2912 R² = 0.9982 170 120 70 20 100 150 200 250 300 350 400 450 500 Nồng độ Zidovudine µg/ml Hình 25: Đồ thị biểu diễn phụ thuộc diện tích pic nồng độ AZT tương ứng Ket-noi.com Ket-noi.com kho kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi 51 Bảng 7: Diện tích pic điện di đồ nồng độ Nevirapin tương ứng Nồng độ (µg/ml) Diện tích pic (mAU.s) 99,25 158,8 198,5 218,3 238,2 297,7 58,6 93,7 119,48 136,7 148,6 188,4 Phương trình hồi quy tuyến tính S = 0,6606 x C – 9,0497 Hệ số tương quan R2 = 0,9981 220 Diện tích pic mAU.s y = 0.6606x - 9.0497 R² = 0.9981 170 120 70 20 50 100 150 200 250 300 350 Nồng độ Nevirapine µg/ml Hình 26: Đồ thị biểu diễn phụ thuộc diện tích pic nồng độ NVP tương ứng Nhận xét: Từ kết bảng 5, & hình 24, 25 & 26, ta nhận thấy khoảng nồng độ khảo sát dung dịch hỗn hợp chuẩn 3TC, AZT & NVP với nồng độ 3TC 77,25 µg/ml – 231,7 µg/ml; nồng độ AZT 149,0 µg/ml – 447,0 µg/ml & nồng độ NVP 99,25 µg/ml – 297,7 µg/ml có mối tương quan 52 tuyến tính diện tích pic nồng độ, với hệ số tương quan tuyến tính r ≈ (0,998; 0,999 & 0,999) Như ba chất cho độ tuyến tính cao nồng độ diện tích pic chất phân tích điện di mao quản khoảng nồng độ khảo sát với điệu kiện điện di lựa chọn mục 3.1.12 3.2.4 Độ lặp lại phương pháp Độ lặp lại phương pháp tính khi phép phân tích lặp lại phòng thí nghiệm, khoảng thời gian ngắn người phân tích Độ lặp lại biểu thị độ lệch chuẩn tương đối (RSD%) Tiến hành phân tích độc lập lần ba mức nồng độ khác dung dịch chuẩn 3TC, AZT & NVP Kết xác định độ lặp lại thể bảng sau: Bảng Kết xác định độ lặp lại phương pháp MEKC định lượng 3TC Diện tích pic mức nồng độ 3TC Lần tiêm mẫu Thấp Trung bình 77,25µg/ml 150µg/ml 29,85 63,51 98,83 30,10 62,73 97,85 29,54 63,32 98,43 29,76 62,86 98,62 30,55 62,95 97,95 ̅ 𝑿 29,96 63,07 98,34 SD 0,386 0,328 0,424 RSD (%) 1,3 0,5 0,4 Cao 231,7 µg/ml Ket-noi.com Ket-noi.com kho kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi 53 Bảng Kết xác định độ lặp lại phương pháp MEKC định lượng AZT Diện tích pic mức nồng độ AZT Lần tiêm mẫu Thấp 149 µg/ml Trung bình 298 µg/ml Cao 447 µg/ml 57,65 122,35 190,23 58,34 120,60 186,56 57,40 119,76 187,49 58,63 122,57 191,12 58,80 122,20 187,32 ̅ 𝑿 58,16 121,50 188,54 SD 0,612 1,244 2,001 RSD (%) 1,1 1,0 1,1 Bảng 10 Kết xác định độ lặp lại phương pháp MEKC định lượng NVP Diện tích pic mức nồng độ NVP Lần tiêm mẫu Thấp 99,25 Trung bình µg/ml 198,5µg/ml 59,70 120,56 190,67 58,63 121,34 190,32 58,12 119,48 188,44 57,45 120,40 189,95 59,36 122,87 188,74 ̅ 𝑿 58,65 120,93 189,62 SD 0,912 1,270 0,983 RSD (%) 1,6 1,1 0,5 Cao 297,7 µg/ml 54 Nhận xét: Từ kết bảng 8, & 10, ta nhận thấy RSD (%) < % ba chất 3TC, AZT & NVP ba mức nồng độ khác Vì vậy, phương pháp có độ tập trung liệu cao 3.2.5 Độ phương pháp Độ phương pháp xác định tỷ lệ tìm lại mẫu thử cho thêm lượng chất chuẩn định Trong phần thẩm định này, thêm khoảng 20% chất chuẩn so với lượng có mẫu Tỷ lệ thu hồi lý thuyết 98 – 102% Bảng 11 Kết khảo sát độ phương pháp thêm chuẩn Lamivudin Diện Số tích pic mẫu thử (mAu.s) Nồng độ Nồng chuẩn độ thử thêm µg/ml vào (µg/ml) Diện tích pic Nồng Nồng thử độ thu độ thu thêm hồi chuẩn µg/ml (µg/ml) (mAu.s) Tỷ lệ phần trăm thu hồi 48,3 121,08 61,9 151,35 30,27 100,6 47,8 119,97 61,3 150,02 30,05 99,87 47,5 119,30 60,8 148,91 29,61 98,40 48,4 121,31 62,0 151,58 30,27 100,6 48,7 121,97 62,2 152,02 30,05 99,87 47,4 119,08 61,1 149,57 30,49 101,3 30,09 Ket-noi.com Ket-noi.com kho kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi 55 Bảng 12 Kết khảo sát độ phương pháp thêm chuẩn AZT Diện Số tích pic mẫu thử (mAu.s) Nồng độ thử µg/ml Nồng độ chuẩn thêm vào (µg/ml) Diện tích pic thử thêm chuẩn (mAu.s) Nồng Nồng độ thu độ thu hồi µg/ml (µg/ml) Tỷ lệ phần trăm thu hồi 95,3 236,24 121,5 295,99 59,75 99,92 94,9 235,33 120,8 294,39 59,06 98,76 95,6 236,92 122,0 297,13 60,21 100,7 95,8 237,38 121,8 296,67 59,29 99,15 96,1 238,06 122,6 298,50 60,43 101,1 95,6 236,92 122,3 297,81 60,89 101,8 59,8 Bảng 13 Kết khảo sát độ phương pháp thêm chuẩn NVP Diện Số tích pic mẫu thử (mAu.s) Nồng độ thử µg/ml Nồng độ chuẩn thêm vào (µg/ml) Diện tích pic thử thêm chuẩn (mAu.s) Nồng Nồng độ thu độ thu hồi µg/ml (µg/ml) Tỷ lệ phần trăm thu hồi 93,9 155,84 120,7 196,41 40,57 101,7 95,3 157,96 121,9 198,23 40,27 100,9 94,4 156,60 120,4 195,96 39,36 98,65 94,8 157,21 121,3 197,32 40,12 100,6 95,0 157,51 120,9 196,71 39,21 98,27 94,7 157,05 121,5 197,62 40,57 101,7 39,9 56 Nhận xét: Từ bảng 11, 12 & 13 ta thấy, tỷ lệ phần trăm thu hồi 3TC, AZT & NVP nằm giới hạn cho phép (98 % - 102 %) Vậy phương pháp có độ cao 3.3Ứng dụng định lượng chế phẩm Phương pháp xây dựng được ứng dụng để xác định làm lượng Lamivudin, Zidovudin & Nevirapin chế phẩm viên nén Avocomb-N viên nén Lamivudin 150mg & Zidovudin 300mg sử dụng điều trị HIV/AIDS Tiến hành chạy điện di mẫu chế phẩm điều kiện điện di tối ưu chọn (mục 3.1.12), ta thu kết sau: Hình 27: Điện di đồ chế phẩm viên nén Avocomb-N Bảng 14: Kết định lượng viên nén Avocomb-N Mẫu thử Hàm lượng hoạt chất viên (mg) % Hàm lượng so với nhãn 3TC NVP AZT 3TC NVP AZT T1 152,6 203,5 298,3 101,73 101,8 99,43 T2 148,3 205,0 295,5 98,87 102,5 98,5 T3 154,3 200,8 286,4 102,87 100,4 95,47 TB 151,7 203,1 293,4 101,13 101,6 97,8 Ket-noi.com Ket-noi.com kho kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi 57 Hình 28: Điện di đồ chế phẩm viên nén Lamivudin 150mg & Zidovudin 300mg Bảng 15: Kết định lượng viên nén Lamivudin 150mg & Zidovudin 300 mg Mẫu thử Hàm lượng hoạt chất viên (mg) % Hàm lượng so với nhãn Lamivudin Zidovudin Lamivudin Zidovudin T1 148,5 304,7 99,0 101,57 T2 153,6 297,4 102,4 99,13 T3 151,5 302,5 101,0 100,83 TB 151,2 301,5 100,8 100,5 Nhận xét: Sau ba lần chạy điện di chế phẩm điều kiện tối ưu thiết lập, chế phẩm khảo sát có hàm lượng chế phẩm nằm khoảng giới hạn cho phép (Lamivudin 95% - 105%; Zidovudin 97% - 102%; Nevirapin 98% - 102%) 58 PHẦN IV: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT 4.1Kết luận Như vậy, sau thời gian nghiên cứu, chúng tơi hồn thành hai mục tiêu đề sau: Xây dựng phương pháp tách định lượng đồng thời Lamivudin, Zidovudin Nevirapin chế phẩm phương pháp MEKC với điều kiện điện di sau: - Chiều dài hiệu dụng cột mao quản silica trần 60cm, đường kính 75µm - Điện đặt vào hai đầu mao quản 20kV - Nhiệt độ mao quản 25 0C - Tiêm mẫu 50mbar x 5s - Bước sóng phát 270,5nm Lamivudin; 264,5nm Zidovudin & 268,5nm Nevirapin - Dung dịch điện ly Borat 10mM/SDS 50mM, pH = 9,3 Hoạt hóa cột: Thời điểm bắt đầu: rửa nước loại ion 10 phút, dung dịch NaOH 1M phút, nước loại ion 10 phút, dung dịch NaOH 0,1M 10 phút rửa lại nước loại ion 10 phút (tất dung dịch trước chạy lọc qua màng lọc 0,2µm) Giữa lần chạy: phút nước loại ion – phút NaOH 0,1M – phút nước loại ion – phút dung dịch điện ly Thời điểm kết thúc: rửa nước loại ion 10 phút, dung dịch NaOH 0,1M 10 phút, nước loại ion 10 phút Phương pháp áp dụng thu kết khả quan việc định lượng hàm lượng Lamivudin, Zidovudin, Nevirapin chế phẩm viên nén Avocomb-N Lamivudin 150mg, Zidovudin 300mg Ket-noi.com Ket-noi.com kho kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi 59 Nevirapin 200mg công ty Ranbaxy Ấn Độ sản suất sử dụng phác đồ điều trị HIV/AIDS Việt Nam 4.2Đề xuất Kết thúc q trình thực nghiệm này, tơi xin phép có vài đề xuất sau: Tiếp tục nghiên cứu, xây dựng hoàn thiện áp dụng phương pháp để định lượng đồng thời Lamivudin, Zidovudin & Nevirapin chế phẩm lưu hành thị trường, nâng cao lực quản lý chất lượng thuốc, đảm bảo sử dụng thuốc an toàn hợp lý Nên cân nhắc việc trang bị máy điện di mao quản vào trung tâm kiểm nghiệm phòng kiểm nghiệm sở sản xuất phương pháp có nhiều ưu điểm tốn dung mơi, hóa chất, độc hại, hiệu lực tách cao… Tài liệu tham khảo Tiếng việt Nguyễn Thị Kiều Anh (2004), Một số đặc điểm ứng dụng điện di mao quản, Chuyên đề chuyên sâu nghiên cứu sinh, Trường Đại học Dược Hà Nội Phạm Luận (1999), Cơ sở lý thuyết sắc ký điện di mao quản hiệu suất cao, Trường Đại học Tổng hợp Quốc gia Hà Nội, tr 123 – 128 Bộ Y tế (2009), Dược thư Quốc gia Việt Nam, Nhà xuất Y học, tr 715 – 717; tr 1179 – 1182 Bộ Y tế (2009), Dược điển Việt Nam IV, xuất lần thứ tư, Nhà xuất Y học, tr.346 – 348; tr 637 – 639 Bộ Y tế (2007), Hóa dược tập II, Nhà xuất Y học, tr 224 – 226; tr 227 – 228 Bộ Y tế (2007), Dược lý học tập II, Nhà xuất Y học, tr 238 – 241 Bộ Y tế (2007), Kiểm nghiệm dược phẩm, Nhà xuất Y học Bộ Y tế (2007), Hóa phân tích tập I, Nhà xuất Y học, tr 54 – 106 Bộ Y tế (2007), Hóa phân tích tập II, Nhà xuất Y học, tr 215 – 234 10.Ủy ban quốc gia phòng chống AIDS (2012), Báo cáo tiến độ phòng, chống AIDS Việt Nam 2012 Tiếng Anh 11.Martindale 36 (2009), vol 1, p 856 – 859 12.US Pharmacopeia 32 (2009), vol 2, p 2747 – 2748; vol 3, p 3072 – 3076; p 3887 - 3891 Ket-noi.com Ket-noi.com kho kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi 13.World Heal Organization (2009), Lamivudin, Zidovudin and Nevirapin tablets: Final text for addition to The International Pharmacopoeia 14.David Heiger (2000), High performance capillary electrophoresis, Agilent Technologies, p – 58 15.Fred Strohmerier (1995), A new High – performance – capillary – electrophoresis instrument, Hewlett – Packard Journal, p 10 – 15 16.Bin Fan, James T Stewart, Determination of Zidovudine/ Lamivudine/ Nevirapine in human plasma using ion-pair HPLC, Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis Volume 28, Issue 5, June 2002, Pages 903–908 17.Geetha Ramachandran, A.K Hemanthkumar, V Kumaraswami, Soumya Swaminathan, A simple and rapid liquid chromatography method for simultaneous determination of Zidovudine and Nevirapine in plasma, Journal of Chromatography B Volume 843, Issue 2, November 2006, Pages 339–344 18.D Anantha Kumar, M.V Naveen Babu, J.V.L.N Seshagiri Rao and V Jayathirtha Rao, 2009, Simultaneous determination of Lamivudine, Zidovudine and Nevirapine in tablet dosage forms by RP-HPLC method 19.Bin Fan, James T Stewart, Determination of Lamivudine/ Didanosine/ Nevirapine in human serum using Capillary zone electrophoresis, J Capill Electrophor Microchip Technol 2002 Sep-Dec;7(5-6):103-6 20.Bin Fan, James T Stewart, Determinations of zidovudine/ didanosine/ nevirapine and zidovudine/ didanosine/ ritonavir in human serum by micellar electrokinetic chromatography, Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis Volume 30, Issue 4, November 2002, Pages 955–960 21.BIN FAN, B.S., Shanghai Medical University, P.R.China, (1992), Part II, Bioanalysis of Anti-HIV Drugs in Human Serum Using HPLC, CE, LC-MS-MS (Under the direction of JAMES THOMAS STEWART) 22.Antimicrobial agents and chemotherapy, Feb 1993, Vol 37 No 2, Pharmacokinetics of Nevirapine: Initial Single-Rising-Dose, p.178 – 182 Trang web 23.http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/12546158 24.http://www.fip.org/files/fip/BPS/BCS/Monographs/Lamivudine.pdf ... Xây dựng phương pháp định lượng đồng thời Lamivudin, Nevirapin & Zidovudin MEKC nhằm hai mục tiêu - Xây dựng phương pháp phù hợp ổn định để tách định lượng đồng thời Lamivudin, Zidovudin & Nevirapin. .. xác định độ lặp lại phương pháp MEKC định lượng 3TC Kết xác định độ lặp lại phương pháp MEKC định lượng AZT Kết xác định độ lặp lại phương pháp MEKC định lượng NVP Kết khảo sát độ phương pháp. .. TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI VƯƠNG LAN HƯƠNG XÂY DỰNG PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯỢNG ĐỒNG THỜI LAMIVUDIN, ZIDOVUDIN & NEVIRAPIN TRONG CHẾ PHẨM VIÊN NÉN BẰNG MEKC KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ GV hướng dẫn: