Nghiên cứu bào chế và đánh giá sinh khả dụng viên nén metformin giải phóng kéo dài

MTC: nông đô tối thiểu gây đôc, MEC: nông đô tối thiểu có tac dung Hinh 1.1: Đồ thị nồng độ dược chất trong máu theo thời gian của dạng viên giải phóng kéo dài so với dạng viên quy ước 1

ĐĂT VÂN ĐÊ

Đai thao đương la môt bênh man tinh gây ra do sư thiêu hut tương đôihoăc tuyêt đôi insulin, dân đên rôi loan chuyên hoa carbohydrat Bênh đươcđăc trưng bơi tinh trang tăng đương huyêt man tinh va cac rôi loan chuyênhoa kem theo Bênh đai thao đương đang co xu hương tăng lên ơ nhiêu nươctrên thê giơi, ơ Viêt Nam, đây la môt căn bênh thương găp (1 - 2,5 % dân sô)

va co ty lê tư vong cao nhât trong cac bênh nôi tiêt, bênh cân điêu tri keo dai

va liên tuc [2]

Co nhiêu nhom thuôc điêu tri đai thao đương, trong đo metformin lathuôc điển hình trong điều trị bệnh đái tháo đường typ 2 Tuy nhiên, thuốc cóthời gian bán thải ngắn (từ 2 đến 6 giờ) nên nếu dùng dạng thuốc qui ước phảiuống nhiều lần trong ngày gây nhiều phiền phức cho bệnh nhân và hiệu quảđiều trị không cao Metformin hấp thu chậm và không hoàn toàn qua đườngtiêu hoá (sinh khả dụng theo đường uống với liều 500 mg vào khoảng 50 – 60

%) Với liều dùng cao và tác dụng không mong muốn của thuốc trên đườngtiêu hoá đòi hỏi bào chế dạng thuốc giải phóng kéo dài (GPKD) để duy trìnồng độ thuốc trong máu, giảm số lần dùng thuốc và cải thiện khả năng tuânthủ của người bệnh Mặt khác, do đặc tính hoá lý tương đối đặc biệt (thuộcphân nhóm sinh dược học thứ 3) nên việc sử dụng metformin là dược chất đểnghiên cứu bào chế còn có giá trị khoa học Vì vậy, trong những năm qua,trên thế giới đã có nhiều nghiên cứu bào chế dạng thuốc GPKD chứametformin

Ở nươc ta, môt sô đơn vi đa san xuât thanh công viên quy ươc cuametformin Tuy nhiên, dang thuôc GPKD vân chưa đươc nghiên cưu va phainhâp khâu cho nhu câu điêu tri Chinh vi thê, viêc nghiên cưu dang thuôcGPKD chưa metformin, co chât lương tương đương san phâm nhâp ngoai, co

tinh câp thiêt va y nghia đôi vơi khoa hoc bao chê Xuất phát từ thực tiễn trên,

đề tài: “Nghiên cứu bào chế và đánh giá sinh khả dụng viên nén metformin giải phóng kéo dài” đặt ra cac muc tiêu sau:

1 Bào chế được viên metformin 500 mg giải phóng kéo dài 12 giờ.

2 Xây dựng được tiêu chuẩn chất lượng và bước đầu đánh giá độ ổn định của viên nghiên cứu.

3 Đánh giá được sinh khả dụng viên nghiên cứu trên chó thực nghiệm.

Đê thưc hiên 3 muc tiêu đê ra, đề tài luân an thực hiện cac nôi dung sau:

1 Xây dưng công thưc bao chê viên metformin 500 mg giải phóng kéo dài

12 giờ.

2 Xây dưng qui trinh bao chê viên metformin 500 mg giải phóng kéo dài

ơ qui mô pilot.

3 Xây dựng tiêu chuân cơ sở và đánh giá độ ổn định của viên metformin

500 mg giải phóng kéo dài.

4 Xây dựng và thẩm định phương pháp HPLC để định lượng metformin trong huyết tương chó.

5 Đanh gia sinh kha dung viên metformin 500 mg giải phóng kéo dài trên cho thực nghiệm, so sánh với viên đối chiếu Glucophage XR.

CHƯƠNG 1 TÔNG QUAN

1.1 METFORMIN HYDROCLORID

1.1.1 Cấu trúc hóa học

(Nguồn: Bộ Y tế (2009) [3])

Công thức phân tử: C4H11N5.HCl

Khối lượng phân tử: 165,6

Tên khoa học: 1,1 – dimethylbiguanid monohydroclorid

Điểm chảy: Từ 222 0C đến 226 0C [3]

1.1.2 Tính chất lý hóa và đặc tính sinh dươc học

Metformin hydroclorid (MH) ở dạng tinh thể màu trắng, dễ tan trongnước, ít tan trong ethanol và thực tế không tan trong aceton, ether vàdiclorometan [3] Theo bảng phân loại đặc tính sinh dược học (BCS), MHthuộc phân nhóm thứ III, vì thuốc có độ tan trong nước cao, tính thấm qua

màng thấp, hệ số log P là - 1,43 trong môi trường n-octanol và đệm pH 7,4

và hệ số thấm của MH là 5,5 x 10-6 cm/s tại pH 7,4 thấp hơn nhiều so với cácthuốc thuộc nhóm BCS I [66]

DĐVN IV sử dụng phương pháp đo quang tại bước sóng 232 nm đểđịnh lượng MH trong viên [3] Một số tác giả sử dụng phương pháp đo quangtại các bước sóng λmax từ 230 nm đến 236 nm để định lượng MH trong cácnghiên cứu bào chế viên MH GPKD [14], [63], [73].

1.1.4 Dược động học

1.1.4.1 Hâp thu

MH hấp thu chậm và không hoàn toàn trên đường tiêu hóa, vị trí hấpthu chính là tại ruột non [97] Việc sử dụng thuốc với liều 2,5 g/ngày đượcchia làm 3 lần uống cùng bữa ăn có thể hạn chế tối đa các tác dụng khôngmong muốn của thuốc trên đường tiêu hóa như buồn nôn, khó chịu và tiêuchảy [4]

SKD theo đường uống của viên nén quy ước có chứa 500 mg MH vàokhoảng 50 – 60 % và nồng độ tối đa đạt được trong máu sau 2,5 giờ [97] Saukhi uống MH với liều từ 500 - 1500 mg, nồng độ tối đa của thuốc trong huyếttương khoảng 400 – 3000 ng/ml và thức ăn lại làm giảm khả năng hấp thu củathuốc Mưc đô hấp thu thuốc giảm khi tăng nhu động ruột [96]

1.1.4.2 Phân bô

Metformin liên kêt vơi protein không đang kê nên co thê tich phân bôrât cao (300 đên 1000 lit sau khi dung liêu đơn) Trang thai ôn đinh đat đươctrong môt hoăc hai ngay [4] Nồng độ metformin đạt cao nhất trong ống tiêu

hóa, nồng độ metformin tại thận, gan, tuyến nước bọt cao khoảng gấp đôinồng độ trong huyết tương Chưa có nghiên cứu nào khẳng định việcmetformin có qua được hàng rào máu não, rau thai hay có bài tiết qua tuyếnsữa hay không

1.1.4.3 Chuyên hoa va thai trư

Metformin không bị chuyển hóa qua gan và không bài tiết qua mật Saukhi uống, khoảng 90 % lượng MH hấp thu đươc thải trừ qua thận trong vòng

24 giờ ở dạng không chuyển hóa Thuốc bị tích lũy trong trường hợp suygiảm chức năng thận Độ thanh thải MH qua thận giảm ở người bệnh suy thận

và người cao tuổi [4] Thời gian bán thải của thuốc t1/2 là 2 - 6 h [97]

1.1.5 Tác dụng và cơ chế tác dụng

Trong điều trị bệnh đái tháo đường typ 2, ngoài tác dụng làm giảmđường huyết MH còn có thêm nhiều tác dụng tốt đối với tình trạng khánginsulin đi kèm với béo phì, rối loạn lipid máu, tăng huyết áp, tăng nguy cơđông máu, cu thê:

+ Tác dụng giảm đường máu

MH có tác dụng làm giảm sản xuất glucose trong máu và làm tănginsulin – gián tiếp làm giảm glucose bằng cách tăng hấp thu glucose ở phầnxương, bắp thịt và mô mỡ [53] MH ngăn cản sự hô hấp oxy của các ty lạp thểtrong gan để ngăn cản sự tổng hợp glucose, cơ chế tác dụng chính của thuốc

là làm giảm sản xuất glucose ở gan

MH làm giảm HbA1C khoảng 1,5 % - 2,0 %, giảm đường huyết lúc đói

60 - 80 mg/dl [29] Mức độ giảm đường huyết của MH phụ thuộc vào nồng

độ đường huyết trước khi điều trị [29]

Trên tế bào nhạy cảm với insulin, MH gián tiếp làm tăng sự hấp thuglucose Hơn nữa, MH cải thiện sự nhạy cảm của insulin bằng cách làm giảmquá trình oxy hóa của các acid béo tự do là tác nhân gây kháng insulin ở bệnhnhân đái tháo đường typ 2 đi kem béo phì [53]

+ Không gây tăng cân: MH gây giảm cân hoặc không ảnh hưởng đến

cân nặng của bệnh nhân [60], [65] MH có tác dụng làm giảm tổng lượng mỡ(đặc biệt là mỡ nội tạng) và phân bố lại mỡ trong cơ thể [53], [87]

+ Không gây tai biến hạ đường máu: MH không ảnh hưởng trực tiếp

đến việc tiết insulin của tế bào beta đảo tụy nên rất hiếm khi xảy ra hạ đườnghuyết ở bệnh nhân điều trị đơn độc bằng MH [4], [51]

+ Tác dụng trên chuyển hóa lipid: MH có tác dụng làm giảm

triglycerid (khoảng 15 – 20 %) [24], [38], giảm cholesterol toàn phần và giảmLDL cholesterol [24], làm tăng HDL cholesterol (khoảng 2 %) [24], [87]

+ Tác dụng hạ huyết áp [29].

+ Giảm các biến chứng trên mạch máu lớn: MH là thuốc duy nhất

trong số các thuốc điều trị đái tháo đường đã được chứng minh là làm giảmcác biến chứng trên mạch máu lớn [38]

+ Tác dụng bảo vệ tế bào beta đảo tụy: MH có tác dụng bảo vệ tế bào

beta của tiểu đảo tụy khỏi quá trình gây độc tế bào bởi acid béo tự do Kết quảlàm giảm sự thu nhận glucose tại gan và rối loạn chuyển hóa glucose MH cótác dụng trong việc điều hòa chuyển hóa lipid, làm giảm nồng độ acid béo tự

do trong máu nên có tác dụng ngăn cản quá trình gây độc tế bào này [87]

1.1.6 Chỉ định

Metformin được chỉ định cho bệnh nhân đái tháo đường typ 2 (khôngphụ thuộc insulin), dùng đơn độc hoặc phối hợp với các thuốc uống chống đáitháo đường khác như nhóm sulfonylurea [39], [45] hoặc insulin Metformin làthuốc được lựa chọn đầu tiên trong điều trị đái tháo đường typ 2, đặc biệt ởbệnh nhân thừa cân, béo phì Theo FDA Mỹ, chế phẩm metformin(Glucophage®) được chỉ định cho trẻ em và bệnh nhân mắc hội chứng buồngtrứng đa nang [60]

1.1.7 Chống chỉ định

+ Phụ nữ có thai, suy gan thận và suy hô hấp

+ Nhiễm khuẩn nặng, nhiễm khuẩn huyết

+ Hoại tử, nghiện rượu, thiếu dinh dưỡng,

1.1.8 Tác dụng không mong muốn

+ Tiêu hóa: Chán ăn, nôn, ỉa chảy, dùng kéo dài gây đắng miệng, + Da: Ban, mày đay, nhạy cảm với ánh sáng,

+ Chuyển hóa: Giảm nồng độ vitamin B12, nhiễm acid lactic,

+ Huyết học: Thiếu máu bất sản, thiếu máu tan huyết, suy tủy [4]

1.1.10 Một số biệt dược giải phóng kéo dài chứa metformin hydroclorid

Hiên nay, trên thi trương co nhiêu biêt dươc cua MH, bang 1.1 liêt kêmôt sô biêt dươc dang thuôc GPKD chưa MH

Bang 1.1 Môt sô biêt dươc giải phóng kéo dài chưa metformin hydroclorid

(mg)

Dạng bào chế

Viên nén dạngcốt

Glumetza® Depomed, Inc 500, 1000

Panfor SR Mega lifesciences

Fortamet® Shionogi Pharma, Inc 500, 1000 Viên thẩm thấu

Như vậy, viên metformin GPKD đã được một số công ty nước ngoàisản xuất với hàm lượng chủ yếu là 500 mg Trong đó, viên nén dạng cốt là lựachọn của hầu hết các hãng vì đơn giản và dễ bào chế Bên cạnh đó, dạng viênthẩm thấu cũng được ứng dụng để bào chế viên metformin GPKD

1.2 THUÔC GIAI PHONG KEO DAI

1.2.1 Khái niệm về thuốc giải phóng kéo dài

Thuốc giải phóng kéo dài là các chế phẩm có khả năng giải phóng dược chất liên tục theo thời gian để duy trì nồng độ thuốc trong máu trong phạm vi điều trị trong khoảng thời gian dài, nhằm nâng cao hiệu quả điều trị, giảm bớt tác dụng phụ, giảm số lần dùng thuốc cho người bệnh [1].

(MTC: nông đô tối thiểu gây đôc, MEC: nông đô tối thiểu có tac dung)

Hinh 1.1: Đồ thị nồng độ dược chất trong máu theo thời gian của dạng viên

giải phóng kéo dài so với dạng viên quy ước

1 Dạng quy ước 3 Dạng giải phóng nhắc lại

2 Dạng GPKD 4 Dạng giải phóng có kiểm soát

(Nguồn: Bộ môn Bào chế (2006) [1])

1.2.2 Thuôc giải phóng kéo dài dang côt thân nươc

Hê côt thân nươc hiên nay đươc nhiêu nha nghiên cưu quan tâm do conhiêu ưu điêm như: Dê bao chê, co thê dùng được với nhiều loại TD và dễdàng nâng qui mô

1.2.2.1 Môt sô ta dươc hay dung đê tao côt thân nươc

Với cốt thân nước, nguyên liệu tạo cốt là các TD có phân tử lượng lớn,trương nở và hoà tan trong nước [84] bao gôm:

a, Cac ether cellulose

Mặc dù có rất nhiều loại polyme được sử dụng làm TD kiểm soátGPDC từ hệ cốt thân nước, song các dẫn chất cellulose, đặc biệt các ethercellulose, được dùng phổ biến nhất do sẵn có, an toàn và trương nở trongnước Các ether cellulose có tính chịu nén tốt nên đươc dùng trong phươngpháp dập thẳng, thích hợp với đa số các dược chất, có thể kết hợp với dượcchất theo ty lê lớn và không độc Trong đó, HPMC là một TD thân nước điểnhình tạo cốt kiểm soát GPDC Cac loai HPMC đươc sư dung đê bao chê dangthuôc GPKD la HPMC E50LV, K100LV, K4MCR, K15MCR, K100MCR,E4MCR va E10MCR HPMC được dung rộng rãi trong ngành dược vì nókhông độc, tương đối rẻ, có cac độ nhớt khác nhau nên phù hợp cho nhiềumục đích Độ nhớt thấp thường được dùng bao phim hay dung dịch, độ nhớtcao dùng làm TD dính của viên và làm TD kiểm soát giải phóng

Cac loai ether cellulose không ion hoa đươc nghiên cưu trong viêc taocôt kiêm soat giai phong do co đô nhơt cao như hydroxy propylcellulose vahydroxy ethylcellulose [84] Cac ether cellulose ion hoa như NaCMC vơi đônhơt thâp va trung binh cung đươc phôi hơp vơi cac polyme không ion hoakhac [37] Tuy nhiên, nêu chi sư dung đơn thuân NaCMC, côt không đu khanăng hydrat hoa đê tao nên câu truc gel khi tiêp xuc vơi môi trương hoa tan ơ

pH thâp như pH 1,2

b, Cac polyethylen oxyd (PEO)

PEO la môt loai polymer tan trong nươc không ion hoa co khôi lươngphân tư vao khoang 100.000 đên 7.000.000 Dalton Cac PEO co khôi lươngphân tư cao như WSR-250NF, WSR-1105NF, WSR N-12K NF, WSR N-60K

NF, WSR-301 NF, WSR-303 NF va WSR Coagulant NF Đo la cac polymecho tôc đô hydrat hoa nhanh nhât trong cac polyme thân nươc va phu hơp đêlam châm qua trinh GPDC [84] Tốc độ GPDC từ hệ cốt PEO cho thấy có phụthuộc vào pH môi trường hoà tan [110]

c, Chitosan

Chitosan là polyme không độc, bị phân huỷ sinh học và được dùngrộng rãi trong ngành Dược Mặc dù, chitosan được sử dụng nhiều để kiểmsoát GPDC nhưng khi dùng đơn độc có thể bị rã ở pH trung tính [80] Vì vậy,chitosan thường được phối hợp với các polyme anionic để tăng khả năngkiểm soát GPDC và làm giảm sự phụ thuộc pH môi trường [94]

d, Gôm xanthan

Tan tốt trong nước, bền vững trong khoảng nhiệt độ rộng và trong môitrường acid – base, không bị phá huỷ bởi enzym đường tiêu hoá Gômxanthan là một polyme acid với 10 chuỗi saccarid, 2 phân tử đường, 2 phân tửmannose và 1 acid glucuronic theo tỷ lệ 2,8:2,0:2,0 [25] Trong hệ cốt, gômxanthan được sử dụng làm TD dính và TD kiểm soát giải phóng Shaikh A và

cs (2011) [93] sử dụng gôm xanthan, gôm guar và κ-carrageenan để tạo cốt,kết quả cho thấy: κ-carrageenan có khả năng trương nở cao hơn và điều hoàtốc độ GPDC tốt hơn gôm xanthan Trong một nghiên cứu khác, Jackson C

và cs sử dụng gôm xanthan và ethylcellulose tạo hệ cốt giải phóng tại tátràng Kết quả nghiên cứu cho thấy: Tốc độ GPDC giảm khi tăng nồng độgôm xanthan trong viên và khi sử dụng với lượng lớn gôm xanthan cho khảnăng duy trì GPDC tốt hơn khi phối hợp với ethylcellulose [48]

Để bào chế thành công một hệ cốt thân nước, cân lựa chọn polymetrương nở tạo thành lớp màng gel nhanh chóng đủ để ngăn sự tan rã của viên

và bảo vệ phần bên trong viên khỏi sự hòa tan trong giai đoạn đầu thấm nước

và pha hydrat hóa Để đạt được điều này, có thể sử dụng đơn thuần hoặc phốihợp các loại polyme khác nhau để thu được thời gian GPDC như mong muốn

1.2.2.2 Cơ chê giai phong dươc chât tư hệ côt thân nươc

Trong cốt mòn dần, tốc độ GPDC phụ thuộc vào khả năng ăn mònpolyme trên bề mặt cốt, còn đối với cốt thân nước, việc tạo thành lớp gel vàthời gian tao thanh lơp gel quyết định lượng thuốc giai phong Bề dày của lớpgel quyết định các kênh khuêch tán thuốc cũng như khoang cách giữa lớpkhuêch tán và lớp ăn mòn Sau khi uống, dược chất trong cốt được giải phóngqua các bước sau [1]:

- Cốt thấm nước và hoà tan lớp dược chất ở bề mặt cốt

- Polyme trương nở tạo thành hàng rào gel hoá kiểm soát quá trình GPDC

- Môi trường hoà tan khuếch tán qua lớp gel thấm vào trong cốt hoà tan dượcchất và cốt

- Dung dịch dược chất khuếch tán qua lớp gel ra môi trường bên ngoài

Ăn mon bê măt

Dươc chât giai phong

12 Dươc chât phân tan

trong côt polyme

Lơp gel Lơp khuêch

tan

Lơp ăn mon

Dươc chât giai phong

Dươc chât phân tan trong

côt polyme

Hinh 1.2 Cơ chế giải phóng dược chất từ hệ cốt ăn mòn và cốt thân nước

a Cốt ăn mòn b Cốt thân nước

(Nguồn: Narasimharao R (2011) [64])

Khi quá trình trương nở tiếp tục thì lớp gel dày lên và làm giảm tốc độGPDC Tuy nhiên, quá trình hydrat hóa tiếp tục xảy ra, polyme thoát ra từ bềmặt cốt và tăng tốc độ hòa tan Đôi vơi cac dươc chât dê tan co thê giai phongtheo ca cơ chê khuêch tan va ăn mon nhưng con đôi vơi cac dươc chât it tan

thi ăn mon lai la cơ chê nôi bât [78] Như vây, đê bào chế được hê kiêm soatGPDC thi quá trình hydrat hoa polyme va tôc đô hinh thanh lơp gel trên bêmăt cang nhanh cang tôt đê ngăn can sư GPDC.

1.2.2.3 Các yếu tố ảnh hưởng đến khả năng giải phóng dược chất

Có nhiều yếu tố ảnh hưởng đến tốc độ GPDC từ hệ cốt thân nước như:Khả năng hòa tan của dược chất, khả năng trương nở và ăn mòn polyme, đặctính hòa tan hoặc khuêch tán hoặc phân bố của dược chất vào cốt polyme, tỷ

lệ các thành phần và hình dạng của hệ [19], [81] Độ nhớt và tính đàn hồi củapolyme cũng ảnh hưởng đến việc GPDC [36]

* Anh hương cua đăc tinh dươc chât

Đôi vơi cac dươc chât rât it tan (vi du < 0,01 mg/ml), được hoa tanchâm va khuêch tan châm qua lơp gel Bên canh đo, cơ chê giai phong chinh

la sư ăn mon qua bê măt cua côt hydrat hoa Trong trương hơp nay viêc kiêmsoat ăn mon côt co thê đat đươc sư duy tri GPDC khi di chuyên qua đươngtiêu hoa la rât kho Đôi vơi cac dược chất dê tan se đươc hoa tan trong lơp gel

va khuêch tan ra ngoai môi trương Ngoai ra, qua trinh giai phong cung chiuanh hương cua môt sô yêu tô co liên quan như pH, mưc đô va tôc đô tao gel,kha năng thâm nươc vao bên trong lơp gel va cac đăc tinh khac cua gel Đôivơi cac dược chất tan trong nươc, có nhiều loại TD có thể sử dụng bào chế cốtthân nước như cac loai HPMC co đô nhơt cao: HPMC K4M CR, K15M CRhoăc K100M CR Con đôi vơi cac dươc chât it tan, cac HPMC co đô nhơtthâp K100 LV CR va E50 LV thương cho qua trinh GPDC chu yêu theo cơchê ăn mon

* Anh hương cua tá dược trương nở

Một số đặc tính của TD trương nở đã được chứng minh có ảnh hưởngđến tốc độ GPDC như: Kích thước tiểu phân, khối lượng phân tử, độ nhớt,cấu trúc hoá học và nồng độ sử dụng Kich thươc tiêu phân cang min, tôc đôhydrat hoa polyme cang nhanh do đo viêc kiêm soat GPDC se tôt hơn [102]

Tôc đô GPDC giảm khi sư dung cac loai HPMC [90] hoặc chitosan [94] cokhôi lương phân tư cao hơn Tuy nhiên, cung co môt sô nghiên cưu cho thâykhông co sư khac biêt vê tôc đô GPDC khi sư dung cac loai HPMC co khôilương phân tư khac nhau Cac công thưc viên côt chứa HPMC có độ nhớt caohoăc sư dung vơi lương lơn polyme (HPMC [55], [90], gôm xanthan [76],chitosan [94]) trong viên se tao gel tôt hơn kêt qua lam châm tôc đô khuêchtan va ăn mon vi vây lam châm tôc đô GPDC Ty lê cac nhom thê methoxyl

va hydroxypropyl cua HPMC cung anh hương đên viêc GPDC thông thươngtheo thư tư HPMC E (hypromellose 2910) > K (hypromellose 2208) [74]

* Ảnh hưởng của ta dươc đôn

Đôi vơi cac TD đôn không tan trong nươc va co kha năng trương nơkem như MCC đong vai tro chinh trong câu truc gel va thương lam giam tôc

đô GPDC [55] Đôi vơi cac dươc chât co đô tan cao hoăc tan it trong nươc,day cac thư tư anh hương cua TD đôn đên tôc đô GPDC đươc xêp theo thư tưgiảm dần như sau: Lactose > MCC > tinh bôt biên tinh [57]

* Anh hương cua ta dươc điêu chinh pH va giup ôn đinh thuôc

Mưc đô kiêm soat cua vi môi trương pH phu thuôc vao hăng sô ion hoa

va kha năng hoa tan cua TD điêu chinh Thông thương, pKa cua acid cao hơnthi vi môi trương pH se cao hơn Thêm vao đo, đê kiêm soat vi môi trương

pH, polyme điêu chinh pH cung co thê lam thay đôi lơp gel, tôc đô ăn moncôt va anh hương đên tôc đô GPDC [99] Viêc phôi hơp ca hai dang trên cung

co thê anh hương đên qua trinh giai phong không phu thuôc vao pH

Tôc đô GPDC tư hê thương phu thuôc vao đăc tinh cua dươc chât va

TD điêu chinh pH cung như ty lê cua dươc chât vơi TD điêu chinh pH [99].Trong hê côt, viêc thêm vao môt TD khôi lương phân tư nho điêu chinh pH(như acid tartric hoăc acid citric) co thê hoa tan trong nươc dân đên viêc taothanh lơp gel nhanh hơn va co môt giơi han thay đôi pH trong lơp gel

Ta dươc điêu chinh pH cung đươc sư dung đê tao ra sư ôn đinh cho cacthanh phân trong hê côt Vi du: Bupropion HCl la môt thuôc co tac dung giamđau va bi phân huy trong môi trương base, đê bao chê dang thuôc GPKD, viêc

sư dung acid yêu hoăc muôi cua acid manh (acid tartric, citric, ascorbic, cystein HCl va glycin HCl) co thê tao ra sư ôn đinh cho dươc chât vi cung câpmôi trương acid xung quanh dươc chât nên ngăn can đươc sư phân huy [86]

L-* Anh hương cua muôi va cac chât điên phân

Thông thương, khi nông đô cua ion trong dung dich polyme tăng, khanăng hoa tan va hydrat hoa giam Cac ion anh hương đên kha năng hydrat hoapolyme ơ nhiêu mưc đô khac nhau Tinh nhay cam cua cac cellulose ether đôivơi ion anh hương theo thư tư hoa tan cua cac ion (clorid < tartarat < phosphat

va kali < natri) [61] Sư thay đôi trang thai hydrat hoa cua polyme trong dungdich đươc cho la chiu anh hương bơi đô nhơt cua môi trương hoa tan [90] Ơmưc ion thâp, sư hydrat hoa polyme không bi anh hương nhưng ơ mưc ionhoa cao làm ngăn cản việc tạo thành lớp gel Mưc đô anh hương phu thuôcvao loai polyme va tinh tan cua cac ion Anh hương cua chât điên phân haymuôi chi quan trong trong trương hơp sư dung nông đô lơn va phu thuôc vaothanh phân cua môi trương hoa tan [50]

* Ảnh hưởng của quá trình bao chê

Anh hương cua lưc nen đên qua trinh GPDC tư hê côt thân nươc hâunhư không đang kê khi cac viên đươc bao chê vơi môt mưc tôi ưu cac polyme[102] Lưc nen anh hương đên viêc tao thanh cac lô xôp trên bê măt viên Tuynhiên, cac lô xôp cua côt hydrat hoa phu thuôc vao đô xôp ban đâu thi lưc nencho thây it anh hương đên tôc đô GPDC Tôc đô dâp viên đươc bao cao ty lênghich vơi sưc căng bê măt cua viên [67]

* Anh hương cua đăc tinh dang thuôc

Mưc đô thay đôi hinh dang va kich thươc viên nen co thê anh hươngđên diên tich bê măt va qua trinh GPDC tư côt HPMC Cac viên chưa HPMC

co kich thươc va hinh dang khac nhau nhưng co cung môt hăng sô ty lê diêntich bê măt côt/thê tich se cho qua trinh GPDC tương tư nhau [82].

1.2.3 Hệ thẩm thấu dùng đường uống (Oral osmotically driven systems)

1.2.3.1 Khai niêm và thành phần cơ bản

a, Khái niệm

Là một hệ phân phối thuốc sử dụng áp suất thẩm thấu làm động lực để giải phóng dược chất, với việc sử dụng màng bán thấm để kiểm soát lượng nước đi vào từ đó kiểm soát áp suất thủy động được tạo ra bên trong và do đó kiểm soát được dược chất giải phóng [43].

b, Thành phần cơ bản

Hệ thẩm thấu gồm 2 phần cơ bản: Viên nhân và màng bao

* Thành phần viên nhân

+ Dược chất: Có thời gian bán thải ngắn, được dùng để điều trị các

bệnh mạn tính như diazepam hydroclorid, carbamazepin,…dạng bào chế nàyphù hợp với cả các dược chất dễ tan và ít tan [43]

+ Tá dược tạo áp suất thẩm thấu: Được sử dụng để duy trì gradient áp

suất qua màng Thường là các muối vô cơ như natri clorid, kali clorid, muốisulfat của natri, kali, lithi hoặc muối carbohydrat, các loại đường nhưglucose, sorbitol, saccarose [43]

+ Tá dược trương nở: Thường phối hợp với TD thẩm thấu để đạt được

động học giải phóng theo mong muốn Trong hệ thẩm thấu 2 lớp thì TDtrương nở thường được thêm vào lớp đẩy để duy trì áp suất trong viên đảmbảo quá trình giải phóng theo động học bậc 0 TD trương nở được sử dụngnhư tinh bột biến tính, crosscarmelose, cellulose vi tinh thể, Carbopol,HPMC, NaCMC,…[28],[43]

+ Tá dược trơn: Để tăng độ trơn chảy cho hạt và chống dính trong quá

trình dập viên, quá trình bao như: Magnesi steatrat, titan dioxid, aerosil,talc,

+ Tá dược tạo kênh: Có khả năng kéo nước vào hệ thống lỗ xốp của hệ,

có thể trương nở hoặc không trương nở tự nhiên, có khả năng chịu được sựthấm hút tự nhiên của nước Chức năng của TD tạo kênh là mang nước đến bềmặt trong của viên nhân nhằm tạo ra các kênh hay các nguồn để tăng diện tích

bề mặt, thường được sử dụng là: Silic dioxid, kaolin, titan dioxid, NaLS,

polyvinyl pyrrolidon phân tử thấp, m-pyrol, bentonit, [43].

* Thành phần màng bao

+ Màng bán thấm: Các polyme hay được sử dụng như: Cellulose

acetat, cellulose acetat butyrat, cellulose triacetat, Màng này chỉ cho nước điqua mà không cho dung dịch dược chất thấm ra ngoài môi trường [43]

+ Tá dược tạo lỗ xốp: Thường được sử dụng trong hệ thẩm thấu chứa

dược chất ít tan, trong hệ thẩm thấu tự tạo lỗ xốp hoặc hệ nhiều bơm thẩmthấu Trong môi trường hòa tan, hệ thống vi lỗ xốp được tạo ra trên bề mặtmàng bao cho phép dược chất và các thành phần khác đi qua Một số TD tạo

lỗ xốp hay được sử dụng có muối kiềm như natri clorid, natri bromid, kaliclorid, kali sulfat, kali phosphat; muối kiềm thổ như calci clorid, calci nitrat;carbohydrat như mannitol, fructose, lactose, sorbitol; các diol hay polyol [43]

+ Dung môi bao: Thường sử dụng đơn thuần các dung môi hữu cơ như

methylen clorid, aceton, methanol, ethanol, isopropyl alcol, butyl alcol, ethylacetat, cyclohexan hay hỗn hợp dung môi như hỗn hợp aceton – nước, aceton– ethanol, aceton – methanol, methylen clorid – methanol, methylen clorid –methanol – nước, [43]

+ Chất hóa dẻo: Tạo độ dẻo dai cho màng, tránh hiện tượng nứt vỡ

màng bao do dung môi bay hơi gây tăng sức căng bề mặt, đồng thời tăng khảnăng bám dính của màng bao và nhân bao Tỷ lệ chất hóa dẻo có thể thay đổi

từ 1 – 50 % so với các chất rắn trong công thức bao [1], [43] Một số chấthóa dẻo hay được dùng trong bao màng bán thấm như: Các loại polyethylen

glycol, ethylen glycol monoacetat và diacetat cho màng có độ thấm thấp,triethyl citrat, diethyl tartarat hoặc diacetin cho màng có độ thấm cao.

1.2.3.2 Nguyên tắc giải phóng dược chất

Dược chất được bào chế thành viên sau đó bao ngoài viên một màngbán thấm có miệng GPDC [1] Quá trình GPDC từ hệ qua 3 bước như sau:

- Nước từ môi trường ngoài thấm qua màng bao vào viên

- Nước hòa tan dược chất và TD tạo áp suất lớn trong khoang màng bao

- Dung dịch dược chất được đẩy ra môi trường bên ngoài qua miệng giảiphóng đến khi đạt được sự cân bằng áp suất ngoài và trong viên [1] Môhình hệ bơm thẩm thấu được thể hiện ở hình 1.3

Hình 1.3 Mô hình hệ bơm thẩm thấu quy ước

(Nguồn: Bộ môn Bào chế (2006) [1])

1.2.3.3 Ưu – nhược điểm của bơm thẩm thấu

- Có thể gây kích thích hay gây loét đường tiêu hóa do sự GPDC dưới dạngdung dịch bão hòa [43].

1.2.3.4 Phân loại

Có thể phân loại các hệ thẩm thấu dùng đường uống dựa trên tính chấtcủa viên nhân [43]

- Viên nhân một lớp:

Bơm thẩm thấu quy ước (elementary osmotic pumps)

Bơm thẩm thấu đơn thành phần (single–composition osmotic pumps).Bơm thẩm thấu tự tạo lỗ xốp (controlled–porosity osmotics pumps) Bơm thẩm thấu tự nhũ hóa (self – emulsified osmotics pumps)

- Viên nhân nhiều lớp:

Bơm thẩm thấu đẩy – kéo (push – pull osmotics pumps)

Bơm thẩm thấu đẩy – dính (push – stick osmotics pumps)

Ngoài ra, còn có thêm dạng bơm thẩm thấu kép kiểu sandwich(Sanwiched osmotic tablets), viên thẩm thấu trương nở (Swellable elementaryosmotic pump) [28], hệ thẩm thấu đồng nhất (monolithic osmotic system).Hiện nay, còn có thêm dạng viên nang thẩm thấu (capsule – based osmoticspumps) [72],[95]

1.2.3.5 Phương pháp bào chế

+ Bào chế viên nhân: Có thể sử dụng phương pháp xát hạt ướt [68] hay

phương pháp dập thẳng Kiểm soát thành phần, tỷ lệ các TD, thời gian nhàotrộn, thời gian xát hạt, nhiệt độ sấy,…

+ Bao màng bán thấm: Có thể sử dụng phương pháp bao film, bao

nhúng, bao dập Với phương pháp bao film có thể sử dụng nồi bao truyềnthống hoặc thiết bị bao tầng sôi Trong quá trình bao, kiểm soát thành phầnmàng bao, khối lượng màng bao, các thông số của quá trình bao (tốc độ phundịch, thời gian bao, nhiệt độ đầu vào, nhiệt độ đầu ra, xử lý bụi,…) [1]

+ Tạo miệng giải phóng: Có thể sử dụng máy khoan cơ học, thay đổi

cấu trúc chày hoặc sử dụng máy khoan laser hoặc sử dụng TD tạo lỗ xốp Vớidạng thẩm thấu kéo đẩy miệng giải phóng thường được tạo bằng máy khoanlaser Việc sử dụng khoan laser có ưu điểm là dễ dàng kiểm soát đường kínhmiệng giải phóng và dễ tiến hành trên quy mô lớn hơn [72]

1.2.3.6 Vài nét về bơm thẩm thấu quy ước (elementary osmotic pumps)

Dạng bào chế này được phát triển bởi Theeuwes năm 1974, sau đóđược phát triển thành hệ bơm Higuchi – Theeuwes với việc sử dụng dượcchất làm TD thẩm thấu Bào chế viên nhân bằng phương pháp thích hợp, baomàng bán thấm (cellulose acetat, PVC,…) và khoan miệng giải phóng trên bềmặt viên bao (hinh 1.3) Sự GPDC được kiểm soát bởi lượng môi trường quamàng bán thấm và dược chất giải phóng qua miệng [43],[72] Tốc độ nướcqua màng bán thấm được tính toán theo công thức:

d V

 A k

dt h  (  p)

(Nguồn: Gupta B.P et al., (2010) [43])

Trong đó: dV/dt: Tốc độ nước qua màng bán thấm, k: Khả năng thấmcủa màng, A: Diện tích bề mặt màng, h: Độ dày màng, ∆π, ∆p: Chênh lệch ápsuất thẩm thấu và áp suất thủy động trong và ngoài màng Khi đường kínhmiệng giải phóng đủ rộng thì sự chênh lệch áp suất thủy động trong và ngoàimàng không đáng kể ∆p→0 thì công thức trên trở thành:

d V

 A k

dt h  

(Nguồn: Gupta B.P et al., (2010) [43])

Tốc độ dược chất giải phóng được tính theo công thức:

d M

 d V  C s

dt dt (Nguồn: Gupta B.P et al., (2010) [43])

Trong đó: dV/dt: Tốc độ nước đi vào viên, Cs: Nồng độ dược chất

1.2.4 Môt sô nghiên cưu bao chê viên metformin giải phóng kéo dài

1.2.4.1 Nghiên cưu bao chê viên metformin giải phóng kéo dài dang côt

Viêc nghiên cưu anh hương cua TD đên tôc đô GPDC se giup lưa chonđươc loai va ty lê TD phu hơp vơi dươc chât, cung như xac đinh đươc phươngphap bao chê để thu được thời gian duy trì GPDC như mong muốn

* Nghiên cưu ảnh hưởng của tá dược đến tốc độ giải phóng metformin

Trong các TD tạo cốt, các polyme thân nước được sử dụng khá rộng rãitrong nghiên cứu bào chế viên MH GPKD Ngoài ra, một số polyme sơ nướcbào chế hệ cốt ăn mòn cũng được nghiên cứu áp dụng với viên MH GPKD

- Hydroxy propylmethyl cellulose (HPMC)

HPMC la TD thân nươc đươc sư dung rông rai cho thuốc GPKD vi cókha năng hydrat hoa nhanh, chiu nen tôt va la yêu tô tao gel vơi cac ưu điêm

dê sư dung, săn co va đôc tinh thâp

Senthilkumar DRK.L và cs (2011) [91] đa bao chê viên nen MHGPKD vơi TD dinh la PVP K30, TD kiêm soat tôc đô giai phong la HPMCK15M va K100M Kêt qua nghiên cưu cho thây: Khi tăng nông đô HPMCK100M và K15M lam keo dai qua trinh GPDC Điêu nay cung phu hơp vơicac nghiên cưu khac như: Lê Duy Hưng (2009) [10], Amish D.A (2011) [18],Rajendran N.N và cs (2011) [75] Viêc sư dung đơn đôc HPMC K15M lam

TD kiêm soat cung đươc sử dụng trong nghiên cưu cua Mandal U va cs.(2007) [59] và Jadhav C.M va cs (2012) [49] Kêt qua nghiên cưu cho thây:Tôc đô giai phong MH đên 8 giơ co xu hương giam khi tăng nông đô HPMCK15M Narasimharao R va cs (2011) [64] đanh gia anh hương cua cácHPMC co đô nhơt khac nhau đên tôc đô GPDC cho thây tôc đô giai phong

MH phu thuôc vao đô nhơt cua HPMC Tôc đô giai phong MH xêp theo thư

tư giảm dân như sau: HPMC K15M > K100M > K200M Chandria M và cs.(2010) [31] đa bao chê viên MH GPKD sư dung đông thơi HPMC K100M vaCarbopol 71G, kêt qua cho thây: Đô nhơt cao cua polyme tăng thì tốc độ

GPDC giảm Như vậy, HPMC được sử dụng nhiều trong các nghiên cứu bào

chế viên nén MH GPKD dạng cốt Loại và tỷ lệ HPMC trong cốt cho thấy đềuảnh hưởng đến tốc độ GPDC Trong đó, HPMC có độ nhớt càng cao hoặc sửdụng với lượng lớn cho tốc độ GPDC càng chậm (do viêc hinh thanh lơp gel

va pha hydrat hoa xảy ra nhanh nên can trơ sư GPDC) [92]

- Eudragit

Ngoai HPMC, môt sô polyme thân nươc khac như Eudragit (RLPO,RSPO, NE30D,…) cung đươc sư dung Cac loai methacrylic (Eudragit) khacnhau cho thây nhưng ưu điêm riêng biêt vi chung co đô bên vât ly cao va khanăng chiu nen tôt Eudragit RLPO va RSPO la cac polyme co đô tan khôngphu thuôc pH trên đương tiêu hoa, co kha năng thâm nươc như cac TD trương

nơ va anh hương đên tốc độ GPDC theo cơ chê khuêch tan

Viên nen MH GPKD đươc Wadher K.J va cs (2011) [103] bao chêbăng phương phap dâp thăng sư dung Eudragit RLPO va RSPO ơ dang đơnthuân hoăc ơ dang phôi hơp vơi polyme sơ nươc la ethylcellulose Kêt quacho thây: Khi sư dung đơn thuân Eudragit RLPO va RSPO lam yêu tô kiểmsoát giải phóng không đat đươc sư duy tri GPDC như mong muôn Điêu nay

co thê do Eudragit co nhiêu nhom amoni va co tinh thâm tôt Khi tiêp xuc vơimôi trương hoa tan, phân tư nươc xâm nhâp vao giưa cac câu nôi cuaEudragit Sau khi xâm nhâp vao chuôi polyme kich thươc cac phân tư polymetăng lên do viêc hut nươc lam trương nơ Tôc đô GPDC giam khi tăng lươngethylcellulose va giam lương Eudragit trong viên Viêc thêm ethylcelluloselam tăng gâp đôi thơi gian GPDC (12 giơ), vi ethylcellulose la polyme kinươc co tac dung ngăn can sư xâm nhâp cua nước vao viên Wadher K.J va

cs (2011) [104] đa phôi hơp giưa môt polyme phu thuôc pH va polymekhông phu thuộc pH đê kiêm soat tôc đô GPDC Khi sư dung Eudragit RLPO

la polyme duy nhât trong viên thi qua trinh GPDC xay ra hoan toan trong 2giơ đâu Viêc phôi hơp cac Eudragit vơi ty lê khac nhau cho thây: Viên chưa

hôn hơp S100/RLPO va S100/RSPO co thê duy tri đươc qua trinh GPDC tôthơn cac hôn hơp L100/RLPO va L100/RSPO Roy H va cs (2013) [85]nghiên cứu ảnh hưởng của các polyacrylat đến tốc độ giải phóng MH chothấy: Viên có chứa Eudragit RS100 kéo dài thời gian GPDC hơn so vớiEudragit RL100.

- Môt số tá dược khác

Chandan G và cs (2013) [30] sư dung chitosan la môt polyme sinh hoc

va HPMCP la môt polyme không tan trong da dày nhưng trương nơ va tan ranhanh ơ đoan đâu ruôt non (pH > 5) lam TD tao côt Cac công thưc viên đươcbao chê băng cach giam dân nông đô chitosan va HPMCP (35 đên 5 mg) đêtôi ưu hoa qua trinh GPDC Qua trinh giai phong va đông hoc giai phong phuthuôc vao câu truc va ty lê cua cac polyme Vơi ty lê cao cac polyme trongviên se lam giam kha năng hoa tan cua dươc chât, can trơ qua trinh hoa tan va

ăn mon Nanjwade B.K và cs (2011) [63] sư dung đông thơi ca acid stearic(SA) va PEO để tạo cốt Tôc đô GPDC giam khi nông đô PEO tăng, điêu naychưng to khi lương polyme thân nươc trong côt tăng se lam tăng tôc đôtrương nơ polyme va lam tăng bê day cua lơp mang nay nên ngăn can sựGPDC Viêc tăng nông đô polyme không chi làm tăng đô nhơt cua gel ma conlam giam tốc đô hòa tan vi vây lam giam tôc đô GPDC [58] Tôc đô GPDCgiam khi tăng lương SA trong côt nên lam châm qua trinh xâm nhâp cua môitrương hoa tan vao côt Hơn nưa, sư xâm nhâp cua môi trương hoa tan co thê

bi can trơ bơi lơp vo sơ nươc cua SA xung quanh dược chất dân đên lam giamtôc đô GPDC Wadher K.J va cs (2010) [105] bào chế thuôc GPKD cua MH

sư dung cac sap thân lipid như: Dâu thâu dâu hydrogen hoa, SA va glyceryl

monostearat đơn thuân hoăc phôi hơp Khi sư dung đơn thuân dâu thâu dâu,

keo dai thơi gian GPDC hơn so vơi SA va glyceryl monostearat Nêu sư dung

ca dầu thâu dâu va SA (1:1) keo dai thơi gian GPDC hơn so vơi khi dung hônhơp dâu thâu dâu va glyceryl monostearat hoăc SA va glyceryl monostearat

vơi cung ty lê Khi lương dâu thâu dâu, SA va glyceryl monostearat trong côttăng, tôc đô GPDC giam Điêu nay co thê do sư xâm nhâp cua môi trương hoatan vao côt châm hơn vi lam tăng tinh thân dâu Hơn thê nưa, sư xâm nhâpcua môi trương hoa tan co thê bi can trơ bơi lơp vo thân lipid cua dâu thâudâu dân đên lam châm qua trinh GPDC.

Reddy A.M va cs (2013) [81] đanh gia anh hương cua gôm guar vagôm xanthan đên tôc đô giai phong MH nhận thấy: Viêc tăng nông đô gômtrong viên se lam keo dai qua trinh GPDC Amish D.A và cs (2011) [18] đakhao sat anh hương cua TD đôn đên tôc đô giai phong MH tư hê côt chưaHPMC Khi thêm vào TD độn tan và không tan đều ảnh hưởng đến tốc độGPDC từ cốt chứa HPMC K100M T80 (thời gian để 80 % dươc chât đượchòa tan) tăng dân khi dùng TD độn không tan tương ứng là MCC,dicalciphosphat và tinh bột T80 của viên tăng dân khi sử dụng các TD độn

tương ứng là lactose khan, natri clorid, tinh bột gelatin hoa, β-cyclodextrin,

povidon và NaLS Dữ liệu hòa tan chứng tỏ rằng việc duy trì GPDC tốt hơnkhi sử dụng TD độn không tan

Rojas J và cs (2011) [83] đã nghiên cứu ảnh hưởng của các loạipolyme: PVP K30, carrageenan, ethylcellulose, natri alginat, gôm arabic vàHPMC (loại E) đến việc giải phóng MH Kết quả nghiên cứu sử dụng riêngtưng polyme trên cho thấy: PVP K30 cho tốc độ GPDC nhanh nhất và khităng lượng PVP K30 thì tốc độ GPDC tăng Do PVP K30 rất tan trong nước

và dễ thấm ướt sớm khi tiếp xúc với môi trường nước nên làm tăng tốc độ hòatan và ăn mòn cốt Điêu nay cung phu hơp vơi kêt qua nghiên cưu Lê DuyHưng (2009) [10] HPMC cho tốc độ GPDC chậm nhất do tốc độ hydrat hóanhanh khi bề mặt viên tiếp xúc với môi trương nước và MH được duy tri giảiphóng bằng cách khuêch tán qua lớp gel Carrageenan cho tốc độ ăn mòn gelnhanh và làm tăng độ nhớt của môi trường Natri alginat tạo gel khi tiếp xúcvới môi trường nhưng quá trình ăn mòn rất chậm Gôm arabic có thể tạo gel

nhưng độ nhớt kém hơn carrageenan và natri alginat Tốc độ giải phóng MH

từ viên chứa các polyme xếp theo thứ tự giảm dần: PVP K30> Carrageenan >ethylcellulose > natri alginat ≈ gôm arabic > HPMC Corti G va cs (2008)

[35] sư dung phương phap dâp thăng vơi cac TD sơ nươc la triacetyl – β – cyclodextrin (TA βCD) phân tan trong cac polyme như HPMC, gôm xanthan,

chitosan, ethylcellulose, Eudragit L100-55 va Precirol, nhận thây: HPMChoăc chitosan phối hợp vơi polyme phu thuôc pH như Eudragit L100-55 duytri giai phong tôt hơn so vơi khi dung đơn đôc tưng polyme

Tóm lại, tốc độ giải phóng MH phụ thuộc vào loại và tỷ lệ TD tạo cốt,việc sử dụng các TD độn loại tan và không tan cũng ảnh hưởng đến tốc độGPDC, để thu được thời gian duy trì GPDC như mong muốn có thể phối hợpnhiều loại TD kiểm soát khác nhau

* Phương phap bao chê viên nen dang côt metformin giải phóng kéo dài

Viên nén dạng cốt GPKD được bào chế băng cac phương phap truyênthông như: Dập thẳng, xát hạt ướt và tạo hạt khô MH có khả năng chịu nénkém, hút ẩm mạnh và nhanh chóng bị vón cục khi tiếp xúc với môi trường Vìvậy, để bào chế viên nén MH GPKD dạng cốt bằng phương pháp dập thẳngđòi hỏi phải kiểm soát độ ẩm trong quá trình bào chế, kiểm soát kích thướctiểu phân trước khi dập viên để đảm bảo độ đồng đều hàm lượng Đồng thời,việc sử dụng lượng thích hợp TD dính và thêm vào các TD trơn như bột talc,magnesi stearat sẽ giúp cải thiện khả năng chịu nén cũng như tốc độ trơn chảycủa khối hạt, đảm bảo độ đồng đều khối lượng viên Phương pháp bào chếnày đã được sử dụng trong nghiên cứu Amish D.A và cs (2011) [18],Senthilkumar DRK.L và cs (2011) [91] Tuy nhiên, việc sử dụng phươngphap dâp thăng đê bao chê viên nen MH ham lương 500 mg GPKD [44], [69]trên quy mô công nghiêp co thê gặp khó khăn do đô trơn chay kem dân tơigiam sư đông đêu vê khôi lương, đô cưng va đô mai mon cua viên vi MH cokha năng chiu nen kem [35], [63] Để khắc phục nhược điểm của phương

pháp dập thẳng trong bào chế viên nén MH GPKD, việc xát hạt ướt hoặc tạohạt khô hay phương pháp dập kép cũng được áp dụng trong các nghiên cứu.Trong đó, đa số nghiên cứu sử dụng phương pháp xát hạt ướt như: Aruna N.

và cs (2011) [19], Chandan G và cs (2013) [30], Chandira M và cs (2010)[31], Kumar S và cs (2011) [54] Phương pháp tạo hạt khô được đề cập trongnghiên cứu của Dutta S và cs (2010) [40]

Trong nghiên cưu cua Nanjwade B.K va cs (2011) [63] MH đươc baochê băng phương phap nung chay va dâp thăng Tôc đô GPDC cho thấy phuthuôc vao phương phap tao hat Phương phap nong chay anh hương đên tôc

đô GPDC nhiều hơn so vơi phương phap dâp thăng Điêu nay co thê do chiuanh hương cua lơp vo sơ nươc bao xung quanh hat cua SA Đông thơi,phương phap nong chay la môt ki thuât đơn gian va hiêu qua đôi vơi dươcchât thân nươc, đem lai nhiêu ưu điêm so vơi cac phương phap khac cungđươc sư dung trong nghiên cưu bao chê viên nen MH GPKD vơi glipizid giaiphong ngay cua Bui Tuyêt Mai (2012) [12]

* Cơ chê giai phong metformin tư viên nén dạng cốt

Trong cac nghiên cưu viên nen dang côt, viêc phân tich đông hoc va cơchê GPDC co y nghia lơn trong kiêm soat va dư đoan tôc đô giai phong thuôc

Về mặt lý thuyết, động học giải phóng từ hệ cốt thường phức tạp và chịu ảnhhưởng nhiều của loại và tỷ lệ của TD tạo cốt Wadher K.J va cs (2011) [103]

sử dụng TD tạo cốt là Eudragit RLPO, RSPO va ethylcellulose; Rojas J va

cs (2011) [83] tạo cốt bằng HPMC E; Roy H va cs (2013) [85] sử dụng hỗnhợp gồm HPMC K15M, K100M, K200M, Eudragit RL100 va RS100;Nanjwade B.K va cs (2011) [63] phối hợp cả TD thân nước PEO và TD thânlipid SA; Wadher K.J va cs (2010) [105] sử dụng các loại sáp thân lipid nhưdâu thâu dâu hydrogen hoa, SA va glyceryl monostearat Các nghiên cứu trênđều nhận thấy dữ liệu giải phóng MH phu hơp vơi mô hinh động hocKorsmeyer va qua trinh khuêch tan xay ra đông thơi vơi qua trinh ăn mon Dữ

liệu GPDC cũng được chứng minh tuân theo đông hoc bâc 0 va mô hìnhKorsmeyer-Peppas vơi n > 0,5 cho thây qua trinh GPDC theo cơ chê khuêchtan không theo đinh luât Fick như trong nghiên cứu Aruna N và cs (2011)[19] với TD kiểm soát là HPMC K100M, Eudragit RLPO, Carbopol 940 vaethylcellulose.

Rajendran N.N va cs (2011) [75] tạo cốt với HPMC K4M va K100M

và nhận thấy, quá trình giải phóng MH tuân theo mô hinh đông hoc Higuchi.Điều này cũng tương tự trong nghiên cứu của Mandal U va cs (2007) [59]khi sử dụng HPMC K15M Tuy nhiên, Narasimharao R va cs (2011) [64]cũng sử dụng các HPMC K15M, K100M, K200M lại nhận thấy quá trình giảiphóng MH tuân theo cơ chê khuêch tan không theo đinh luât Fick Điều nàyđược chứng minh tương tự trong nghiên cứu của Dutta S và cs (2010) [40]với TD tạo cốt là HPMC K4M va K100M

Khi phối hợp HPMC K100M với Carbopol trong nghiên cứu củaChandira M va cs (2010) [31] lại cho thấy quá trình GPDC tuân theo cả môhình động học bậc 0 và Higuchi Dữ liệu GPDC cũng có thể tuân theo nhiêu

mô hinh đông hoc va cơ chê giai phong dưa trên qua trinh khuêch tan khôngtheo đinh luât Fick như Chandan G và cs (2013) [30] với TD kiểm soát làchitosan và HPMCP Qua trinh hoa tan va ăn mon xay ra đông thơi đươc goi

la qua trinh hoa tan bât quy tăc được chứng minh trong nghiên cứu củaWadher K.J va cs (2011) [104] khi sử dụng polyme phu thuôc pH (EudragitL100 va S100) cung polyme không phu thuôc pH (Eudragit RLPO va RSPO).Khi chỉ sử dụng gôm guar và gôm xanthan để kiểm soát giải phóng trongnghiên cứu của Reddy A.M va cs (2013) [81] nhận thấy quá trình giải phóngtuân theo mô hinh đông hoc bâc 0 vơi hê sô tuyên tinh la 0,999 Cơ chế nàycũng được chứng minh trong nghiên cứu của Corti G va cs (2008) [35] khi

sử dụng TD kiểm soát là Triacetyl – β – cyclodextrin (TA βCD), HPMC, gôm

xanthan, chitosan, ethylcellulose, Eudragit L100-55 va Precirol

Như vây, cơ chê giai phong MH tư viên nen dang côt phức tạp, có thểtuân theo nhiêu mô hinh đông hoc như đông hoc bâc 0, bâc 1, Higuchi,Korsmeyer va qua trinh khuêch tan xay ra đông thơi vơi qua trinh ăn mon côt.

1.2.4.2 Nghiên cưu bao chê viên metformin giải phóng kéo dài theo cơ chê bơm thâm thâu

Trong những năm gần đây, đã có một số nghiên cứu ứng dụng bơmthẩm thấu trong bào chế thuốc GPKD chứa MH Viêc phôi hơp giưa MH vaglipizid se đem lai hiêu qua nhiêu hơn so vơi viêc sư dung đơn đôc do đem laitac dung hiêp đông Vi vây, Ouyang D và cs (2005) [68] va Bharadwaj P và

cs (2012) [26] đa nghiên cưu bao chê hê bơm thâm thâu quy ươc co thê giaiphong đông thơi ca MH va glipizid duy tri trong môt khoang thơi gian Ca hainghiên cưu đêu sư dung phương phap xat hat ươt đê bao chê viên nhân

Ouyang D và cs (2005) [68] nhận thấy: MH không chi đong vai tro ladươc chât ma con la chât tao ap lưc thâm thâu Hê bơm thâm thâu tôi ưu đươcchưng minh co thê giai phong đông thơi ca hai dươc chât vơi tôc đô hăng đinhgân theo đông hoc bâc 0 keo dai tơi 10 giơ khi thư nghiêm trong môi trương

pH 6,8, tôc đô GPDC không phu thuôc vao pH môi trương hoa tan.Bharadwaj P và cs (2012) [26] nhận thấy khi tăng lương TD thâm thâu(manitol va lactose) trong viên nhân thi tôc đô GPDC tăng PVP K30 khônganh hương đên tôc đô GPDC Lekkala V.K (2010) [56] cung nghiên cưu baochê va tôi ưu hoa công thưc viên MH GPKD theo cơ chê bơm thâm thâu vơiham lương dươc chât la 1000 mg, nhận thây: Tôc đô GPDC co thê kiêm soatđươc nhơ ap suât thâm thâu cua viên nhân, đô cưng cua viên nhân va khôilương mang bao Tốc độ GPDC không phụ thuộc vào pH va tôc đô khuây cuamôi trương nhưng ty lê nghich vơi ap suât thâm thâu cua môi trương hoa tan.Qin C va cs (2014) [73] đa bao chê hê bơm thâm thâu chưa đông thơi haidươc chât vơi đông hoc bâc 0, trong đo MH va repaglinid đươc chưa trongcac lơp khac nhau và ngăn cach bơi lơp đây Bơm thâm thâu đươc bao chê

băng cach dâp viên ba lơp sau đo bao băng môt mang ban thâm Khi tănglương TD đây, TD thâm thâu và PEG 400 ở màng se lam tăng GPDC Sư comăt cua PEO WSR N10 va N80 vơi ty lê sư dung trong nghiên cưu khônglam anh hương đên sư giai phong MH Như vậy, tôc đô giai phong MH ty lêthuân vơi đương kinh lô khoan va lương TD thâm thâu trong viên nhân va ty

lê nghich vơi bê day mang bao; pH và tôc đô khuây cua môi trương hoa tankhông anh hương đên tôc đô GPDC Dư liêu GPDC tư hê bơm thâm thâu gầnnhất vơi mô hinh đông hoc bâc không

Ngoài dạng cốt và dạng bơm thẩm thấu, hiện nay cũng có một sốnghiên cứu khác bào chế thuốc GPKD chứa MH như: Patil S.A va cs (2010)[70] đa nghiên cưu bao chê hê phân tan răn GPKD chưa MH, trong đo sưdung HPMC K100M lam chât mang băng phương phap bay hơi dung môi vanghiên lanh Dạng nổi GPDC ở dạ dày được sử dụng trong một số nghiêncứu: Ashok A.H và cs (2012) [20], Wadher K.J và cs (2013) [106] Bêncạnh đó, cung co môt sô nghiên cứu bào chế pellet MH GPKD như: Lã Thị

Lệ Quyên (2008) [13] sử dụng TD kiểm soát là hỗn hợp ethylcellulose vàTEC; Trinh Phương Thao (2013) [14] sư dung phương phap đun - tao câu.Kêt qua, đã chọn được công thức pellet có khả năng GPDC khá đều đặntương đương viên đôi chiêu Glucophage XR 500 mg với lượng dược chất giảiphóng tỉ lệ tuyến tính với căn bậc 2 của thời gian Hasan A.A va cs (2013)[44] nghiên cưu sư dung Span 40 va cholesterol đê bao chê niosom chưa MHbăng ki thuât bốc hơi pha đao Như vậy, các nghiên cứu bào chế viên MHGPKD hiện nay chủ yếu tập trung vào dạng cốt vì MH có tính tan tốt trongnước nên có thể tạo cốt thân nước hoặc sơ nước Bên cạnh đó, MH GPKDcũng được bào chế dạng thẩm thấu, vi cầu nổi trong dạ dày hoặc pellet

1.3 ĐỊNH LƯỢNG METFORMIN TRONG DỊCH SINH HỌC

Trong phân tích dược chất trong dịch sinh học, mẫu định lượng thường

có nồng độ thấp, nền mẫu phức tạp (chứa nhiều lipid, protein,…), lượng mẫu

ít nên không thể tiến hành định lượng lặp lại nhiều lần Vì vậy, phương phápphân tích định lượng cần phải có độ nhạy, độ chọn lọc cao, giới hạn địnhlượng dưới thấp, độ lặp lại tốt và thời gian phân tích cho một mẫu đủ ngắn.Trên cơ sở đó, khi xây dựng phương pháp phân tích dược chất trong dịch sinhhọc, nội dung quan trọng đầu tiên là phương pháp phân tích định lượng và kỹthuật xử lý mẫu Phương pháp phân tích sau đó được thẩm định chặt chẽ theonhững qui định riêng nhằm đảm bảo độ tin cậy của phương pháp.

1.3.1 Kỹ thuật xử lý mẫu

Các mẫu dịch sinh học (máu, huyết tương, nước tiểu,…) thường cónồng độ dược chất thấp và chứa một tỷ lệ lớn các protein, các chất nội sinhlàm cản trở khả năng phát hiện và định lượng dược chất Vì vậy, mẫu cầnphải được chiết tách, xử lý để loại bỏ tạp chất và làm giàu mẫu trước khi tiếnhành phân tích nhằm tăng độ nhạy của thiết bị và phương pháp phân tích.Hiện nay, để xử lý mẫu người ta thường dùng 3 kỹ thuật cơ bản như tủaprotein, chiết lỏng – lỏng và chiết pha rắn [71]

1.3.1.1 Kỹ thuật tủa protein

Các tác nhân gây tủa protein được sử dụng để loại đi phần lớn lượngprotein có trong mẫu huyết tương trước khi phân tích Một số tác nhân gây tủaprotein [71] như:

+ Thêm dung môi hữu cơ có thể trộn lẫn với nước như acetonitril,methanol làm giảm hằng số điện môi của dung dịch

+ Thêm acid mạnh như acid percloric, tricloroacetic để làm thay đổi pHcủa dung dịch

+ Thêm muối như amoni sulfat, natri clorid hoặc các ion kim loại như

Cu+2, Zn+2, Fe+2 để làm thay đổi lực ion;

+ Đun nóng mẫu làm biến tính protein;

+ Lọc và siêu lọc

Trong các nghiên cứu đánh giá SKD chế phẩm chứa MH, chủ yếu sửdụng kỹ thuật tủa protein bằng dung môi hữu cơ hoặc acid để xử lý mẫu huyếttương Dung môi hữu cơ được sử dụng nhiều là acetonitril [17], [32], [101],[109] Ngoài ra, methanol cũng được dùng để tủa protein huyết tương [101].Acid percloric được sử dụng trong nghiên cứu của Bhavesh D và cs [27],Yuen K.H và cs (1999) [108] Sau khi lắc để kết tủa protein, tiến hành ly tâmvới tốc độ cao, lấy dịch trong và tiêm sắc kí.

Ưu điểm của kỹ thuật này là tiến hành đơn giản, sử dụng dung môi ít vàkinh tế Tuy nhiên, mẫu có thể bị pha loãng khi tủa bằng dung môi hữu cơhoặc hoạt chất bị biến đổi khi thêm acid vào trong mẫu Ngoài ra, dung dịchthu được đem tiêm sắc kí thường không sạch nên làm giảm tuổi thọ của cột

1.3.1.2 Kỹ thuật chiết lỏng – lỏng

Chiết lỏng – lỏng trong xử lý mẫu huyết tương là chuyển chất phân tích

từ nền mẫu huyết tương (pha nước) sang dung môi hữu cơ không hoà tan vớinước, đồng thời tách được chất phân tích ra khỏi các tạp có trong nền mẫu[71] Để chiết được chất phân tích trong mẫu huyết tương và loại được tạpchất có trong nền mẫu cần phải chọn được dung môi chiết có khả năng hoàtan chất phân tích nhưng hoà tan ít tạp chất và dễ bay hơi khi đem cô, cònchất phân tích trong mẫu huyết tương (pha nước) cần chuyển sang dạng trungtính (các chất có bản chất base sẽ được kiềm hoá, các chất có bản chất acid sẽđược acid hoá) trước khi chiết để tăng khả năng hoà tan chất phân tích trongdung môi chiết Các dung môi thường được lựa chọn để chiết chất phân tíchtrong mẫu huyết tương là diethylether, chloroform, dicloromethan,…Cácdung môi này có thể dùng riêng rẽ hay trộn lẫn vào nhau theo tỷ lệ thích hợptuỳ từng chất phân tích Sau khi chọn được dung môi chiết, chiết chất phântích trong huyết tương bằng cách: Lắc, ly tâm, hút lớp dung môi với thể tíchxác định, đem cô, thu được cắn và hoà tan cắn trong pha động để tiêm sắc kí

So với kỹ thuật tủa protein thì kỹ thuật chiết lỏng – lỏng phức tạp hơn,phải trải qua nhiều bước tiến hành hơn và có thể cho tỷ lệ thu hồi thấp hơnnên được sử dụng trong ít các nghiên cứu đánh giá SKD chế phẩm chứa MH[46], [52] Ưu điểm của phương pháp này là mẫu thu được sạch hơn và có thểlàm giàu mẫu Vì vậy, có thể kết hợp đồng thời kỹ thuật tủa protein và chiếtlỏng – lỏng để xử lý mẫu vì có thể làm nền mẫu sạch hơn và khả năng thu hồichất phân tích tốt hơn.

1.3.1.3 Kỹ thuật chiết pha rắn

Chiết pha rắn (SPE – Solid phase extraction) dựa trên nguyên tắc của

kỹ thuật tách sắc ký có sự khác nhau về ái lực của chất phân tích và các tạpchất với pha tĩnh là chất rắn và pha động là chất lỏng [9]

Qui trình chiết pha rắn gồm 4 bước chính [5]:

- Hoạt hoá cột bằng các dung môi hoặc dung dịch đệm thích hợp

- Nạp mẫu: Mẫu được hoà tan trong dung môi và cho qua cột

- Rửa: Dùng dung môi hoặc dung dịch đệm cho qua cột để loại tạp

- Rửa giải: Dùng dung môi thích hợp để đẩy chất phân tích ra khỏi cột

Lấy dung dịch rửa giải, tiến hành bay hơi dung môi để thu được cắn.Hoà tan cắn trong pha động và tiêm sắc ký Ngoài ra, có thể chiết tách mẫutheo kiểu lưu giữ tạp chất trên cột và cho hoạt chất đi qua Để xây dựng 4bước quy trình chiết trên cần xác định: Hiệu quả của dung môi rửa giải chấtphân tích và hiệu lực tách chất phân tích mà người ta sử dụng các loại cột cóbản chất khác nhau và các hệ dung môi khác nhau để chiết tách [5] So với hai

kỹ thuật trên, kỹ thuật SPE ưu điểm là nền mẫu thu được sạch hơn, có thể làmgiàu mẫu nhưng phức tạp và chi phí tốn kém hơn nên đến nay chưa có nghiêncứu nào sử dụng để xử lý mẫu sinh học chứa metformin

1.3.2 Phương pháp phân tích định lượng metformin trong dịch sinh học

Mẫu sinh học thường có nồng độ dược chất thấp, nền mẫu dịch sinhhọc rất phức tạp nên các phương pháp phân tích sắc kí có độ nhạy cao hay

được ứng dụng để định lượng dược chất trong mẫu Tuỳ thuộc vào nồng độ,đặc tính lý hoá và khả năng hấp thụ UV – VIS,… của chất phân tích mà lựachọn phương pháp định lượng phù hợp Trong đó, phương pháp sắc kí lỏnghiệu năng cao (HPLC) được sử dụng phổ biến nhất Phương pháp phân tíchkhối phổ đặc biệt là kỹ thuật sắc kí lỏng khối phổ hai lần (LC – MS/MS) vì cókhả năng tăng nhạy và độ chọn lọc cao được sử dụng với những mẫu dịchsinh học có nồng độ dược chất thấp [5].

Metformin được sử dụng với hàm lượng lớn, nồng độ dược chất tronghuyết tương cao và có độ nhạy cao với phương pháp HPLC nên được dùngtrong hầu hết các nghiên cứu Các điều kiện sắc kí phải được khảo sát để đạtđược các yêu cầu của phương pháp phân tích dược chất trong dịch sinh họctheo quy định của FDA

+ Pha động: Việc lựa chọn pha động trong phân tích HPLC giúp đảm

bảo việc thu hồi hoạt chất Trong các nghiên cứu định lượng metformin tronghuyết tương, hỗn hợp gồm acetonitril và đệm phosphat được sử dụng nhiềuvới pH thay đổi từ 3,5 đến 7,5 [46], [62], [98], [108] Vì acetonitril là dungmôi hữu cơ rẻ tiền, sẵn có và cho hiệu suất chiết cao Đồng thời, có thể lựachọn dung dịch đệm phosphat có pH phù hợp để đảm bảo độ chọn lọc củaphương pháp định lượng Hỗn hợp acetonitril và đệm phosphat được phối hợptheo nhiều tỷ lệ khác nhau: (65:35) [17], (25:75) [32], (80:20) [62], (60:40)[101], [108] Ngoài ra, một số hỗn hợp pha động khác cũng được lựa chọnnhư: Methanol và đệm phosphat [27]; acetonitril và amoni acetat [98]

+ Cột sắc ký: Cột pha đảo thường được dùng trong các nghiên cứu định

lượng MH trong dịch sinh học là: C18 [98], [101] và cyano [17], [62], [108].Ngoài ra, cột silica [33] và cột trao đổi ion [27] cũng được sử dụng

+ Nhiệt độ cột: Nhiệt độ cột thường được duy trì ở 25 0C cho thấy thờigian lưu ngắn phù hợp với việc phân tích số lượng mẫu lớn

+ Tốc độ dòng: Việc lựa chọn tốc độ dòng ảnh hưởng đến độ phân giải

và thời gian chạy sắc kí Tốc độ 1 ml/phút cho thấy phù hợp với nhiều phađộng và pha tĩnh khác nhau [11], [32], [108] Bên cạnh đó, một số nghiên cứukhác lựa chọn tốc độ dòng chậm hơn như 0,5 ml/phút [98], 0,6 ml/phút [62]hoặc tốc độ dòng cao hơn như 1,2 ml/phút [89], 1,5 ml/phút [46] và 2,0ml/phút [17]

+ Nội chuẩn: Nội chuẩn là chất có nồng độ xác định được thêm vào

mẫu phân tích nhằm giảm sai số và tăng độ lặp lại của phương pháp địnhlượng Nội chuẩn tốt nhất là các chất có cấu trúc hoá học tương tự với chấtphân tích, trong cùng điều kiện sắc kí có thời gian lưu gần với thời gian lưucủa chất phân tích nhưng được tách hoàn toàn Một số nội chuẩn được sửdụng trong định lượng metformin bằng phương pháp HPLC gồm: Atenolol[17], [32], [109]; phenformin [11], [27]; ranitidin [101], glipizid [52] vàclorpheniramin [62]

+ Giới hạn định lượng dưới: Metformin có độ nhạy cao với phương

pháp định lượng bằng HPLC, nồng độ phát hiện thấp khoảng 10 - 50 ng/ml

1.3.3 Thẩm định phương pháp định lượng metformin trong dịch sinh học

Phương pháp phân tích dịch sinh học phải được thẩm định một số tiêu

chí trước khi áp dụng vào phân tích mẫu [22], [41]: Tính chọn lọc – đặc hiệu (Selectivity – specificity), xây dựng đường chuẩn và xác định khoảng tuyến tính (Linearity), giới hạn định lượng dưới (LLOQ), độ đúng – độ chính xác (Accuracy – precision), phần trăm tìm lại, độ ổn định.

Trong hầu hết các nghiên cứu, phương pháp định lượng metformintrong dịch sinh học được xây dựng và định lượng theo các tiêu chí của FDA

và dược điển Mỹ

Tóm lại, dạng thuốc GPKD chứa MH được bào chế theo nhiều cơ chếkhác nhau Trong đó, dạng cốt thân nước được ứng dụng nhiều vì có ưu điểm

dễ bào chế, TD sẵn có và dễ dàng nâng qui mô Vì vậy, viên nén MH GPKDdạng cốt được nhiều hãng lớn trên thế giới sản xuất, viên Glucophage XR củahãng Merck – santé là sản phẩm được lựa chọn làm viên đối chiếu trong nhiềunghiên cứu Hiện nay, có một số nghiên cứu bào chế viên MH GPKD theo cơchế bơm thâm thâu và đã có ứng dụng trong công nghệ dược phẩm Dạngbơm thẩm thấu qui ước có cấu tạo đơn giản với lỗ giải phóng trên bề mặt viênđược khoan bằng tia laser cho tốc độ GPDC duy trì hằng định theo động họcbậc 0 và phù hợp với điều kiện nghiên cứu ở Việt Nam Căn cứ vào liều dùng

và lượng dược chất trong viên đối chiếu, lựa chọn hàm lượng 500 mg để bàochế viên MH GPKD Như vậy, dạng cốt thân nước và dạng bơm thẩm thấuqui ước được lựa chọn để nghiên cứu bào chế viên MH 500 mg GPKD.DĐVN IV chưa có chuyên luận cho viên nén MH GPKD, vì vậy các thửnghiệm hoà tan đánh giá khả năng GPDC được tiến hành theo hướng dẫn của

USP 35 Chế phẩm bào chế được đánh giá SKD in vivo so với viên đối chiếu Glucophage XR Việc đánh giá SKD in vivo có thể được thực hiện trên người

hoặc động vật Phần lớn các nghiên cứu này trên thế giới đều được tiến hànhtrên người tình nguyện khoẻ mạnh Nhận thấy, việc đánh giá SKD trên chóthực nghiệm có các điều kiện gần với người nhất, đồng thời do sự giới hạn vềthời gian và kinh phí nên chó đực khoẻ mạnh được lựa chọn để tiến hànhnghiên cứu Qua việc tham khảo các tài liệu cho thấy, hầu hết các nghiên cứuđều sử dụng phương pháp phân tích HPLC với detector UV Do đó, lựa chọnphương pháp này để định lượng MH trong huyết tương chó Phương pháp tủaprotein được sử dụng trong nhiều nghiên cứu, đơn giản và dùng ít dung môi

Vì vậy, mẫu trước khi phân tích sẽ được xử lý bằng phương pháp tủa proteinvới acetonitril

CHƯƠNG 2 NGUYÊN LIÊU, THIÊT BI, ĐỐI TƯỢNG

VA PHƯƠNG PHAP NGHIÊN CƯU

2.1 NGUYÊN LIÊU, THIÊT BI VÀ ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CƯU

2.1.1 Nguyên liệu

Các nguyên liệu và hoá chất chính được sử dụng trong các nội dungnghiên cứu của luận án được trình bày trong bảng 2.1

Bảng 2.1 Các nguyên liệu và hoá chất sử dụng trong nghiên cứu

1 Metformin hydroclorid

(Hàm lượng: 99,73 %) Trung Quốc

BP 2011(Han dung: 2017)

2 Metformin hydroclorid chuẩn

(Hàm lượng: 99,84 %) Viện kiểm

13 Opadry® (gôm cellulose acetat

STT Nguyên liệu Nguồn gốc Tiêu chuẩn

17 Disolcel (natri croscarmelose) Đài Loan BP

2.1.2 Thiết bị và dụng cụ

2.1.2.1 Thiết bị bào chế và sản xuất

- Bộ rây các kích cỡ (Trung Quốc)

- Máy khoan laser Epilog Helix (Mỹ)

- Nồi bao truyền thống

- Tủ sấy Memmert (Đức)

- Máy xay dao RRH-A350

- Máy trộn lập phương ERWEKA

- Máy xát hạt ERWEKA

- Máy trộn chữ Z ERWEKA

- Đầu máy KALWEKA

- Máy nhào trộn cao tốc tạo hạt GHL

- Máy sấy tầng sôi tạo hạt FL-5

- Máy sửa hạt JFZ – B

- Máy dập viên quay tròn Rimeck minipress II

- Máy dập viên Krosch (Đức)

- Máy ép vỉ CP 250 (Việt Nam – Công nghệ Đức)

- Máy siêu âm ELMA Sonic S100

- Máy ly tâm 80 – 2 Centrifuge

- Máy khuấy từ I KA RH Basic 1 (Đức)

2.1.2.2 Thiết bị và dụng cụ đánh giá

- Cân phân tích Sartorius TE 214S có độ chính xác 0,1 mg

- Cân xác định hàm ẩm AND MF-50

- Cân kỹ thuật Sartorius TE 3102S

- Máy đo độ cứng Pharmatest PTB 511B

- Máy đo độ mài mòn Pharmatest PTF E

- Máy đo độ trơn chảy ERWEKA GWF

- Máy đo tỉ trọng biểu kiến ERWEKA SVM (Đức)

- Máy thử hòa tan Logan UDT-804

- Máy quang phổ SPECORD 200 (Đức)

- Máy phân tích nhiệt vi sai DSC 1 Mettler Toledo (Thụy Sĩ)

- Hệ thống sắc ký lỏng hiệu năng cao HPLC Alliance Waters 2695D,autosampler, detector UV

- Dụng cụ thuỷ tinh dùng trong phân tích

2.1.3 Thuốc đối chiếu và thuốc thử

+ Thuốc đối chiếu: Viên nén Glucophage XR 500 mg của công tyMerck Sante – Pháp, số lô T0915158, sản xuất ngày 18-10-2012, hạn sử dụngngày 17-10-2014 và lô T1444166, sản xuất ngày 09-06-2013, hạn sử dụngngày 09-06-2015 dùng để nghiên cứu từ tháng 4/2013 đến tháng 12/2014.Viên dạng cốt hình caplet có chứa các thành phần là hypromellose 2910 và

2208, NaCMC, MCC và magnesi stearat

+ Thuốc thử: Viên nén MH 500 mg GPKD dạng cốt thân nước

2.1.4 Động vật thí nghiệm

Chó ta khỏe mạnh, giống đực, cân nặng 18 ± 2 kg, được nuôi dưỡngtrong điều kiện thí nghiệm 7 ngày trước khi tiến hành thử thuốc tại Ban Độngvật – Học viện Quân y

2.1.5 Địa điểm và thời gian nghiên cứu

2.1.5.1 Địa điểm nghiên cứu

Các nội dung chính của đề tài luận án được thực hiện tại:

- Trung tâm Đào tạo – Nghiên cứu Dươc – Hoc viên Quân y

- Trung tâm Nghiên cưu Y Dươc hoc Quân sự – Hoc viên Quân y

- Bộ môn Bào Chế - Trường Đại Học Dược Hà Nội

- Viện Công nghệ Dược phẩm Quốc gia – Trường Đại học Dược Hà Nội

- Trung tâm kiểm nghiệm Thuốc tỉnh Phú Thọ

- Xưởng GMP – Công ty TNHH IMC – Chi nhánh Phú Thọ

- Công ty cổ phần Dược phẩm Vĩnh Phúc

- Viên kiêm nghiêm Thuôc Trung Ương

- Trung tâm thí nghiệm – Trường Cao đẳng Dược Phú Thọ

2.1.5.2 Thời gian nghiên cứu

Từ năm 2010 đến năm 2014

2.2 PHƯƠNG PHAP NGHIÊN CƯU

2.2.1 Phương pháp nghiên cứu bào chế

Viên MH 500 mg GPKD được bào chế theo hai cơ chế: Dạng cốt thânnước và dạng bơm thẩm thấu

2.2.1.1 Dang côt thân nươc

a, Qui mô phòng thí nghiệm

Viên nén MH GPKD dạng cốt thân nước được bào chế bằng phươngpháp tạo hạt ướt với quy trình như sau: MH, TD kiểm soát (HPMC K4M hoặcHPMC K100M hoặc gôm xanthan), TD độn (Avicel PH101 hoặc dicalciphosphat hoặc lactose) được nghiền và rây qua rây 200 µm, trộn đồng nhất.Sau đó, nhào tạo khối ẩm với dung dịch PVP K90 10 % trong ethanol 96 %.Xát hạt qua rây 1000 µm, sấy hạt ở 50 – 55 0C tới khi độ ẩm của hạt từ 2 - 3

% Sửa hạt khô qua rây 1000 µm và trộn hạt khô với magnesi stearat Dậpviên bằng bộ chày cối caplet với mỗi mẻ 100 viên

b, Qui mô pilot

Để xác định các thông số trọng yếu của qui trình, tiến hành lấy mẫutheo kế hoạch lấy mẫu ở qui mô pilot được trình bày ở bảng 2.2