KHẢO SÁT TỈ LỆ NHIỄM VIRUS VIÊM NÃO NHẬT BẢN TRÊN HEO VÀ BIẾN ĐỘNG KHÁNG THỂ MẸ TRUYỀN TRÊN HEO CON Ở MỘT SỐ TRẠI THUỘC HUYỆN CỦ CHI THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH KHỐ LUẬN TỐT NGHIỆP KHẢO SÁT TỈ LỆ NHIỄM VIRUS VIÊM NÃO NHẬT BẢN TRÊN HEO VÀ BIẾN ĐỘNG KHÁNG THỂ MẸ TRUYỀN TRÊN HEO CON Ở MỘT SỐ TRẠI THUỘC HUYỆN CỦ CHI THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH Họ tên sinh viên: NGUYỄN HỮU TRUNG Ngành: DƯỢC THÚ Y Niên khoá: 2004 – 2009 Thành phố Hồ Chí Minh Tháng 09/2009 iv  KHẢO SÁT TỈ LỆ NHIỄM VIRUS VIÊM NÃO NHẬT BẢN TRÊN HEO VÀ BIẾN ĐỘNG KHÁNG THỂ MẸ TRUYỀN TRÊN HEO CON Ở MỘT SỐ TRẠI THUỘC HUYỆN CỦ CHI THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH Tác giả NGUYỄN HỮU TRUNG Khố luận đệ trình để đáp ứng u cầu cấp Bác sĩ Thú y chuyên ngành Dược thý y Giáo viên hướng dẫn TS LÊ ANH PHỤNG Tp Hồ Chí Minh Tháng 09/2009 v  LỜI CẢM TẠ Thành kính ghi ơn Con xin suốt đời ghi ơn Cha, Mẹ người sinh thành, nuôi lớn khôn dạy dỗ nên người ngày hôm Xin chân thành biết ơn Ban giám hiệu trường Đại Học Nơng Lâm Thành Phố Hồ Chí Minh tồn thể quý thầy, cô khoa Chăn Nuôi – Thú Y tận tình giảng dạy, truyền đạt tri thức cho em suốt thời gian học tập trường Chân thành biết ơn TS Lê Anh Phụng tận tình hướng dẫn, giúp đỡ tạo điều kiện tốt cho em suốt q trình thực tập hồn thành luận văn Tôi xin cảm ơn tất bạn bè giúp đỡ ủng hộ trình học tập trình thực luận văn tốt nghiệp vi  MỤC LỤC Chương MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục đích đề tài 1.3 Yêu cầu đề tài CHƯƠNG CƠ SỞ LÝ LUẠN 2.1 Tổng quan bệnh VNNB 2.1.1 Đặc điểm chung bệnh 2.1.2 Tình hình bệnh viêm não Nhật Bản .4 2.1.2.1 Tình hình bệnh nước 2.1.2.2 Tình hình bệnh viêm não Nhật Bản việt nam 2.1.3 Những nghiên cứu bệnh viêm não Nhật Bản 2.1.3.1 Những nghiên cứu giới 2.1.3.2 Những nghiên cứu việt nam 2.2 Căn bệnh .9 2.2.1 Đặc diểm hình thái virus 2.2.2 Sức đề kháng 2.2.3 Đặc tính ni cấy khả gây bệnh tích tế bào .9 2.2.4 Đặc tính ngưng kết hồng cầu .10 2.3 Truyền nhiễm học 10 2.3.1 Động vật cảm thụ 10 2.3.2 Động vật trung gian truyền bệnh 10 2.2.3 Chất chứa bệnh 11 2.3.4 Cơ chế sinh bệnh 11 2.3.5 Vòng truyền lây virus viêm não Nhật Bản 12 2.4 Triệu chứng – bệnh tích .13 2.4.1 Triệu chứng 13 2.4.1.1 Triệu chứng bệnh heo 13 2.4.1.2 Triệu chứng bệnh người 13 2.4.1.3 Các loài khác 14 2.4.2 Bệnh tích 14 2.4.2.1 Bệnh tích đại thể 14 vii  2.4.2.2 Bệnh tích vi thể .14 2.5 Chuẩn đoán bệnh VNNB heo .15 2.5.1 Chuẩn đoán dựa lâm sàng 15 2.5.1.1 Dựa vào dịch tễ .15 2.5.1.2 Chẩn đoán phân biệt 15 2.5.2 Chẩn đốn phòng thí nghiệm .15 2.5.2.1 Chẩn đoán virus học 15 2.5.2.2 Chẩn đoán huyết học .16 2.6 Điều trị 16 2.7 Phòng bệnh 16 CHƯƠNG VẬT LIỆU VA PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 18 3.1 Thời gian địa điểm 18 3.1.1 thời gian tiến hành đề tài .18 3.1.2 Địa điểm tiến hành đề tài .18 3.2 Vật liệu thí nghiệm .18 3.2.1 mẫu khảo sát 18 3.2.2 Hồng cầu ngỗng 19 3.2.3 Kháng nguyên viêm não Nhật Bản 19 3.2.4 Dụng cụ .19 3.3 Nội dung .19 3.4 Phương pháp nghiên cứu .19 3.4.1 Bố trí lấy mẫu huyết heo 19 3.4.2 Cách lấy mẫu – bảo quản mẫu .20 3.4.3 Chuẩn bị hồng cầu (hc) ngỗng: .21 3.4.4 Xử lý huyết 21 3.4.4.1 Xử lý với kaolin 21 3.4.4.2 Xử lý với hồng cầu 21 3.4.5 Chuẩn độ kháng nguyên (phản ứng HA: haemagglutination) .21 3.4.6 Xử lý huyết (mẫu) 23 3.4.7 Phương pháp thực phản ứng hi (haemagglutination inhibition) 24 3.4.8.Các tiêu theo dõi: 27 3.4.9 Phương pháp sử lý số liệu .28 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẠN 29 viii  4.1 Tỷ lệ nhiễm chung .29 4.2 Tỷ lệ nhiễm virus VNNB heo theo trại chăn nuôi 30 4.3 Tỷ lệ nhiễm virus VNNB heo thịt trại chăn nuôi 31 4.4 Tỷ lệ nhiễm virus VNNB nhóm heo sinh sản trại 34 4.5 Tỷ lệ nhiễm virus VNNB nhóm heo sinh sản 35 4.6 Hiệu giá kháng thể chống virus VNNB heo dương tính .36 4.7 Hiệu giá kháng thỂ kháng virus VNNB trại khảo sát 38 4.8 Hiệu giá kháng thể nhóm heo .40 4.9 Tỷ lệ mẫu dương tính heo sinh nái nhiễm virus vnnb 42 4.10 Hiệu giá kháng thể heo qua thời điểm khảo sát .44 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 48 5.1 KẾT LUẬN 48 5.2 ĐỀ NGHỊ .49 TÀI LIỆU THAM KHẢO 50 PHỤ LỤC 53  ix  DANH SÁCH CÁC BẢNG Bảng 3.1 Sơ đồ bố trí lấy mẫu huyết heo trại ………… …………… 18 Bảng 3.2 Bố trí lấy mẫu huyết heo sinh heo nái có kết dương tính………………………………………………………… 19 Bảng 3.3 Sơ đồ thực phản ứng HA ………………………………………… 22 Bảng 3.4 Sơ đồ thực phản ứng HI …………………………………………… 24 Bảng 3.5 Kiểm tra đơn vị ngưng kết kháng nguyên …………………………… 25 Bảng 4.1 Tỷ lệ mẫu dương tính …………………………………………………… 27 Bảng 4.2: Tỷ lệ nhiễm virus VNNB trại khảo sát … ………………… 28 Bảng 4.3 Tỷ lệ mẫu dương tính virus VNNB heo thịt …………… ………… 29 Bảng 4.4 Tỷ lệ nhiễm virus VNNB heo nái trại ……………………… 31 Bảng 4.5 Tỷ lệ nhiễm virus VNNB nhóm heo ………………………… 32 Bảng 4.6 Hiệu giá kháng thể chống virus VNNB heo dương tính …………… 33 Bảng 4.7 Hiệu giá kháng thể chống virus VNNB theo trại khảo sát……………… 35 Bảng 4.8 Hiệu giá kháng thể kháng virus VNNB nhóm heo……………… 36 Bảng 4.9 Tỷ lệ mẫu dương tính qua giai đoạn khảo sát ……………………… 38 Bảng 4.10 Hiệu giá kháng thể mẫu dương tính qua thời điểm khảo sát … 39 Bảng 4.11 Chỉ số MG qua giai đoạn khảo sát………………………………… 40 x  DANH SÁCH CÁC BIỂU ĐỒ VÀ HÌNH Hình 1: Muỗi Culex …………………………………………………………… 10 Biểu đồ 4.1: Tỷ lệ heo nhiễm virus VNNB trại khảo sát………………… 21 Biểu đồ 4.2: Tỷ lệ nhiễm VNNB heo thịt trại chăn nuôi ……………… 30 Biểu đồ 4.3: Tỷ lệ nhiễm virus VNNB heo nái ……………………………… 32 Biểu đồ 4.4: Tỷ lệ nhiễm virus VNNB nhóm heo sinh sản ……………… 33 Biểu đồ 4.5: Tỷ lệ mức hiệu giá kháng thể kháng virus VNNB ……………… 34 Biểu đồ 4.6: Chỉ số MG dàn heo khảo sát trại ……………………… 36 Biểu đồ 4.7: Chỉ số MG nhóm heo khảo sát …………………………… 37 Biểu đồ 4.8 Tỷ lệ mẫu huyết heo dương tính qua thời điểm khảo sát 39 Biểu đồ 4.9: Chỉ số MG qua thời điểm ………………………………………… 41 xi  TÓM TẮT LUẬN VĂN “Khảo sát tỷ lệ nhiễm Virus VNNB heo biến động kháng thể mẹ truyền heo số trại thuộc huyện Củ Chi, Tp HCM.” Mẫu huyết heo lấy 01/03/2009 đến 30/08/2009 04 trại thuộc huyện Củ Chi, xét nghiệm phòng vi sinh, khoa Chăn Nuôi – Thú Y, trường Đại học Nông Lâm Tp HCM Mẫu huyết heo lấy ngẫu nhiên chia làm hai đợt Đợt 01 Mẫu lấy đối tương Thịt, Hậu bị, Nái đẻ 1-3 lứa, Nái đẻ nhiều 03 lứa với tổng số mẫu 216 Đợt 02 Mẫu lấy từ heo sinh heo nái có kết dương tính đợt 01 Thời điểm lấy mẫu 07, 14, 21, 28 ngày tuổi Tổng số mẫu 48 Mẫu khảo sát lấy 04 trại heo thuộc huyện Củ Chi, Tp HCM Nhằm khảo sát tỷ lệ nhiễm virus viêm não Nhật Bản, xác định hiệu giá mẫu huyết dương tính Biến động kháng thể mẹ truyền chống virus VNNB heo Trong thời gian từ 01/03/2009 đến 30/08/2009 Qua xét nghiệm huyết heo phản ứng ngăn trở ngưng kết hồng cầu ngỗng nhằm phản ánh tình trạng nhiễm virus viêm não Nhật Bản đàn heo khảo sát, chúng tơi ghi nhận số kết sau: • Đàn heo khảo sát trại địa bàn huyện Củ Chi có tỷ lệ nhiễm virus viêm não Nhật Bản cao 99,5% • Tỷ lệ nhiễm nhóm heo cao heo thịt 87,5% Trên heo hậu bị, heo nái • Hiệu giá kháng thể heo khảo sát mức cao từ 1/80 đến 1/1280 Hiệu giá ≥ 1/160 100% 74,9% Hiệu giá < 1/160 26,1 % Kết cho thấy đàn heo khảo sát có đủ kháng thể chống virus viêm não Nhật Bản • Tỷ lệ mẫu dương tính heo 07 ngày tuổi 100% giảm dần theo thời điểm 14 ngày tuổi 66,7%, Thời điểm 21 ngày tuổi 41,6%, Thời điểm 28 ngày tuổi 16,6% • Hiệu giá kháng thể giảm từ 1/80 ( chiếm 50%) 07 ngày tuổi đến 1/20 ( chiếm 50%) 14 ngày tuổi Chỉ số MG thời điểm 07 ngày tuổi từ 62 xuống 10 lúc 14 ngày tuổi Trong khảo sát kháng thể mẹ truyền chống virus viêm não Nhật Bản bảo vệ heo tới 11 ngày tuổi 1  Chương MỞ ĐẦU 1.1 ĐẶT VẤN ĐỀ Bệnh Viêm Não Nhật Bản B bệnh truyền nhiễm chung người động vật heo (bệnh Zoonosis) Bệnh gây tác động đến hệ thần kinh trung ương người trẻ em Ở heo, bệnh gây nên tượng co giật heo 06 tháng tuổi, gây nên rối loạn sinh sản heo nái giảm khả sinh tinh chất lượng tinh heo đực Tuy nhiên, Việt Nam lâu nay, người ta nghiên cứu bệnh người bệnh heo không ý mà coi heo mắt xích quan trọng việc lây lan bệnh cho người mà Ngành chăn nuôi heo nước ta đà phát triển mạnh chăn ni gia đình tỉnh số trại chăn nuôi heo tập trung trại heo Thành Phố Hồ Chí Minh thường xuyên gặp phải tượng rối loạn sinh sản Điều ảnh hưởng lớn đến suất chăn nuôi hiệu kinh tế Theo tài liệu OIE (Tổ chức dịch tể Thế Giới), nước ta nằm vùng dịch tể bệnh Viêm Não Nhật Bản B Bệnh có nhiều nước Châu Á như: Nhật, Phần viễn tây Nga, Hàn Quốc, Trung Quốc, Đài Loan, Philipin, Singapore, Malaysia, Hồng Kông, Việt Nam, Lào, Thái Lan, Miến Điện, Srilanka, Ấn Độ số đảo Thái Bình Dương…Nguyên nhân gây rối loạn sinh sản heo có nhiều như: Dịch tả heo, Aujeszky, Parvovirus, Leptospirosis… Theo khuyến cáo OIE Virus Viêm Não Nhật Bản B nguyên nhân gây nên sẩy thai chết sau sinh heo nước Đông Á Xuất phát từ thực tiễn chăn nuôi heo nay, phân công khoa Chăn Nuôi Thú Y- Trường Đại Học Nông Lâm Thành Phố Hồ Chí Minh chúng tơi tiến hành thực đề tài: “KHẢO SÁT TỈ LỆ NHIỄM VIRUS VIÊM NÃO NHẬT BẢN TRÊN HEO VÀ BIẾN ĐỘNG KHÁNG THỂ MẸ TRUYỀN TRÊN HEO CON Ở MỘT SỐ TRẠI THUỘC HUYỆN CỦ CHI THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH” Dưới hướng dẫn của: Tiến sĩ.Lê Anh Phụng 2  4.10 HIỆU GIÁ KHÁNG THỂ CỦA HEO CON QUA CÁC THỜI ĐIỂM KHẢO SÁT Kết khảo sát hiệu giá kháng thể heo qua giai đoạn trình bày bảng 4.10 Bảng 4.10: Hiệu giá kháng thể mẫu dương tính qua thời điểm khảo sát Số mẫu Ngày xét tuổi nghiệm Hiệu giá kháng thể mẫu khảo sát Số mẫu 1/20 âm 1/40 1/80 1/160 (+) % (+) % (+) % (+) % 07 12 12 16,6 16,6 50 16,6 14 12 4 33,3 16,6 16,6 0 21 12 16,6 8,3 0 16,6 28 12 0 8,3 8,3 0 (+: số mẫu dương tính, %: tỷ lệ phần trăm) Từ bảng 4.10 cho thấy kháng thể kháng virus VNNB thời điểm sau: - Thời điểm 07 ngày tuổi hiệu giá nằm khoảng 1/20 – 1/160, tập trung nhiều mức hiệu giá 1/80 (chiếm tỷ lệ 50% mẫu dương tính) - Thời điểm 14 ngày tuổi hiệu giá nằm khoảng 1/20 – 1/80, tập trung nhiều mức 1/20 (chiếm tỷ lệ 33,3% số mẫu dương tính) - Thời điểm 21 ngày tuổi hiệu giá tập trung mức 1/40 1/160 hiệu giá chiếm tỷ lệ 16,6% tổng số mẫu dương tính - Thời điểm 28 ngày tuổi hiệu giá tập trung mức 1/40 1/80 hiệu giá chiếm tỷ lệ 8,3% số mẫu dương tính Nhìn chung hiệu giá kháng thể có thay đổi qua giai đoạn có rỏ rệt giảm theo tuần tuổi Giai đoạn đầu phân bố nhiều mức hiệu giá 1/80 – 44  1/160 Thời điểm lượng kháng thể heo nhận qua sữa đầu cao Sang giai đoạn 14 ngày tuổi hiệu giá giảm tập trung mức 1/20, lượng kháng thể giảm rõ rệt Sang giai đoạn 21 ngày tuổi hiệu giá lại tập trung 1/20 – 1/40 có có hiệu giá kháng thể đến cá biệt, tình trạng chung đàn heo giai đoạn kháng thể khơng cao Giai đoạn 28 ngày tuổi tương tự giai đoạn 21 ngày tuổi biểu rõ nét Chỉ số MG heo giai đoạn khảo sát Kết số MG trình bày qua bảng 4.11 Bảng 4.11: Chỉ số MG qua giai đoạn khảo sát Số mẫu Giai đoạn xét nghiệm Hiệu giá kháng thể Số mẫu MG dương 1/20 1/40 1/80 1/160 07 12 12 2 62 14 12 2 10 21 12 2 5,2 28 12 1 1.9 Bảng 4.11 cho thấy số MG giảm theo giai đoạn tuổi Thời điểm từ trước 07 ngày tuổi bầy heo có đủ kháng thể miễn dich với virus VNNB Từ giai đoạn 07 đến 14 ngày tuổi số MG giảm rỏ rệt không khả bảo hộ (Chỉ số MG=20, đàn heo có khả bảo hộ chống virusVNNB) Thời điểm từ 14 đến 28 ngày tuổi số MG thấp Đây thời điểm thích hợp để virus VNNB xâm nhập 45  MG Ngày tuổi Biểu đồ 4.9: Chỉ số MG qua thời điểm Qua biểu đồ thấy rõ giai đoạn 07 đến 14 ngày tuổi số MG giảm nhanh chóng, mức độ bảo hộ giảm nhanh Dựa vào số liệu có đươc, biểu đồ 4.9 với hỗ trợ phần mềm Win word chúng tơi lập phương trình biểu thị số MG thời gian từ 07 đến 28 ngày tuổi MG Ngày tuổi Biểu đồ 4.10: Phương trình biến thiên MG heo giai đoạn 07 đến 28 ngày tuổi Phương trình: y= 60,842x-2,4269 46  Với x : Ngày tuổi/7 y : Chỉ số MG Qua phương trình chúng tơi xin đưa dự đốn thời điểm hiệu giá kháng thể ngưỡng bảo hộ: y = 20 Ỉ x = 11,07 Như vậy: Thời điểm 11 ngày tuổi ngưỡng bảo hộ kháng thể mẹ truyền chống virus VNNB Heo bảo vệ tốt sữa đầu đến khoản 11 ngày tuổi khảo sát 47  Chương KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 5.1 KẾT LUẬN Qua xét nghiệm 216 mẫu huyết heo nái sinh sản,hậu bị, thịt 48 mẫu huyết heo sinh heo nái có huyết dương tính 04 trại Củ Chi TP HCM, phản ứng ngăn trở ngưng kết hồng cầu (HI) virus VNNB, chúng tơi có kết luận sau: (1) Tỷ lệ heo nhiễm virus VNNB đàn heo khảo sát 99,5% Heo thịt chiếm tỷ lệ 87,5% Heo nái hậu bị 100% (2) Hiệu giá kháng thể heo khảo sát nhìn chung cao ( mức hiệu giá = 1/160 chiếm tỷ lệ 74,9%) Như đàn heo có lượng kháng thể đủ bảo hộ (3) Chỉ số MG trại cao (từ 223 đến 275) , nhóm heo cao (từ 91 đến 632), cho thấy hiệu giá kháng thể chống virus VNNB heo khảo sát cao, nên khả miễn dịch chống virus VNNB cao (4) Heo nhận lượng kháng thể kháng virus VNNB từ mẹ thông qua sữa đầu Mẫu huyết heo 07 ngày tuổi có tỷ lệ 100% mẫu dương tính (5) Lượng kháng thể giảm nhanh chóng giai đoạn 07 đến 14 ngày tuổi, mẫu xét nghiệm dương tính giảm từ 100% xuống 66,7%, hiệu giá kháng thể giảm từ 1/80 ( chiếm 50%) 07 ngày tuổi đến 1/20 ( chiếm 50%) 14 ngày tuổi Chỉ số MG thời điểm 07 ngày tuổi từ 62 xuống 10 lúc 14 ngày tuổi 48  (6) Kháng thể mẹ truyền đợt khảo sát bảo vệ đàn heo khoảng 11 ngày tuổi 5.2 ĐỀ NGHỊ Nên lấy máu lần (trên heo lấy lần 1) để xét nghiệm, dương tính lần mà xét nghiệm lần hiệu giá tăng cao lần có sở chắn để kết luận heo nhiễm bệnh VNNB Nên lấy máu heo sơ sinh lúc vừa bú sữa đầu để đo sát lượng kháng thể mẹ truyền Tính chu kì bán hủy t1/2 49  TÀI LIỆU THAM KHẢO Nguyễn Chương, 2000 Viêm nảo Nhật Bản Việt Nam Nhà xuất y hoc, Hà Nội Ngô Đức 1997 Nghiên cứu tỷ lệ nhiễm virus vim nảo Nhật Bản B heo số tỉnh miền trung số trại khu vực TP.HCM Luận văn tốt nghiệp Trường Đại Học Nông Lâm Đỗ Quang Hà, Vũ Thị Quế Hương, Huỳnh Thị Kim Loan, Đinh Quấc Thống, Deubel ctv, 1992 Báo cáo khoa học virus viêm não Nhật Bản Dengue, Viện Pasteur Tp HCM, 1976-1992 Nguyễn Ngọc Hải, Tơ Minh Châu, 2001 Giáo trình thực hành vi sinh Tủ sách trường Đại Học Nông Lâm Tp.HCM Huỳnh Thị Thu Hương, 2002 Điều tra tình hình nhiễm viêm não Nhật Bản đàn heo Củ Chi Bùi Quý Huy, 2002 Sổ tay phòng chống bệnh từ động vật lây sang người NXB Nông Nghiệp Hà Nội Nguyễn Lương, 1987 Giáo trình dịch tể học thú y Tủ sách trường Đại Học Nông Lâm Tp.HCM Lê Hồng Phong, 1995, Báo cáo khoa học tỷ lệ nhiễm virus viêm nảo Nhật Bản heo động vật khác qua điều tra phản ứng huyết Trung Tâm Nghiên cứu Thú y – Cty thuốc Thú y Trung Ương II Trần Thanh Phong, 1996 Giáo trình bệnh truyền nhiễm virus heo Tủ sách trường Đại Học Nông Lâm Tp.HCM 10 Lê Anh Phụng, Trần Thị Bích Liên, 1999 Giáo trình virus thú y chuyên biệt Tủ sách trường Đại Học Nông Lâm Tp.HCM 11 Trịnh Công Thành, 1998 Giáo trình thống kê ứng dụng nghiên cứu thú y.Tủ sách trường Đại Học Nông Lâm Tp.HCM 50  12 Nguyễn Duy Thanh, 1992 Giáo trình bệnh truyền nhiễm.Trường Đại Học Y Dược Tp HCM 13 Nguyễn Việt Thanh, 1994 Bước đầu điều tra nghiên cứu tỷ lệ nhiễm bệnh viêm não Nhật Bản B vùng khác Luận văn tốt nghiệp trường Đại Học Nông Lâm 14 Lê Hùng Thịnh, 1994 Bước đầu điều tra tỷ lệ viêm não Nhật Bản B heo vài thời điểm khí hậu số trang trại thuộc khu vực đồng Nam Bộ Luận văn tốt nghiệp trường Đại Học Nông Lâm Tp.HCM 15 Hồ Thị Việt Thu, 2001 Sự lưu hành virus viêm não Nhật Bản B heo- Vai trò hội chứng rối loạn sinh sản số tỉnh đồng sông Cửu Long Đề cương nghiên cứu sinh trường Đại Học Nông Lâm 16 Hồ Nguyễn Thiện Trung, Trần Thanh Phong Nguyễn Ngọc Tuân 2003 Tình hình nhiễm virus viêm não Nhật Bản B heo Đồng Tháp Tạp chí KHKT Nơng nghiệp, số 1/2003 17 Viện Pastuer Tp HCM Thường quy xét nghiệm Arbovirus Khoa vi sinh miễn dịch, Labo Arbovirus Tài liệu nước Office International Des Epizooties, 1992 Manual of standard for domestic test and vaccines for lists A and B diseases of mammals birds and bees,Office International Des Epizooties, p 501-505 Chu R.M., Joo H S., 1999 Diseases of swine 8th edition, edition, Iowa State University Press/ AMS, Iowa USA 51  52  PHỤ LỤC Dung dịch dùng phản ứng ngưng kết hồng cầu (1) Dung dịch đệm Borat (pH=9) Dung dịch gồm 03 dung dịch -Dung dịch : NaCl 8,77g Nước cất vừa đủ 100,0ml -Dung dịch : Acid boric 3,1g Nước cất vừa đủ 100,0ml -Dung dịch : NaOH 4,0g Nước cất vừa đủ 100,0ml Hòa dung dịch theo tỷ lệ : -Dung dịch 80,0ml -Dung dịch 100,0ml -Dung dịch 24,0ml Nước cất vừa đủ 1000ml Chỉnh pH=9 (2).Dung dịch Kaolin 25% dung dịch đệm Borat Kaolin : 25,0g Dung dịch Borat(pH=9) 100,0ml (3).Dung dịch chống đông Alsever Acid citric 0,55g Dextrose 20,5g NaCl 4,2g Natri citrate 8g 53  Nước cất vừa đủ 1000ml (4).Dung dịch DGV(Dextrose-Gelatine-Véronal) Véronal( Barbital) 0,58g (Acid 5,5 diethyl barbituric) Gelatin 0,6g Natri Véronal 0,38g (5,5 diethyl barbiturate de sodium) CaCl2 khan 0,02g MgSO4.7H20 0,12g NaCl 8,5g Dextrose 10,0g Nước cất vừa đủ 1000ml Hấp ướt 121oC 10 phút (5).Dung dịch VAD (Virus Adjusting Diluent) pH biểu kiến = 6,2 Pha dung dịch gốc: -Dung dịch NaCl 1,5M NaCl 87,68g Nước cất vừa đủ 1000ml -Dung dịch Na2HPO42M Na2HPO4 khan 283,96g Nước cất vừa đủ 1000ml -Dung dịch NaH2PO42M NaH2PO4.H2O 276,02g Nước cất vừa đủ 1000ml (5.1).Pha dung dịch làm việc: -Dung dịch NaCl 0,15M – Na2HPO4 0,2M (Dung dịch 1) -Dung dịch NaCl 1,5M 100ml 54  -Dung dịch Na2HPO4 2M 100ml -Nước cất 800ml -Dung dịch NaCl 0,15M-NaH2PO4 0,2M (Dung dịch 2) -Dung dịch NaCl 1,5M 100ml -Dung dịch NaH2PO42M 100ml -Nước cất 800ml (5.2).Pha dung dịch VAD pH biểu kiến = 6,2 -Dung dịch 22ml -Dung dịch 78ml 55  Bảng: Các chủng virus VNNB phân lập Việt Nam từ 1964 đến 1967 Năm Tên Chủng Phân lập từ HN – 60 Máu bệnh nhi HN – 51 Não bệnh nhi HN - 59 Chim liếu điếu 1965 HN – 145C Não bệnh nhi 1966 QN Nảo bệnh nhi 1967 B - 67 Nảo bệnh nhi 1968 B - 68 Nảo bệnh nhi 1971 HN – CT – 304, HB – CT – 305, HNCT-310 Culex tritaeniorhynch 1964 Culex tritaeniorhynch 1974 ĐP-493, GP-494, TS-502 Aedes (Sp) diemmaccuus Heo 1976 BT- CT-548, BT- CT -549 Culex tritaeniorhynch BT-CG-583 Culex gelidus BT-AA-584 Aedes albopitus S-AA-25 (Tp HCM) Culex tritaeniorhynch 1978 S-M-14 (TP.HCM) 1979 S-CF-79, S-CF-114, S-CF 115(Tp.HCM) Culex tritaeniorhynch S-CF-129, S-CF-133, S-CF-137 (TP.HCM) Culex quinquefasciatus 1980 Máu BN tuổi Ades aegypyti S-AA-136 (TP.HCM) 1982 LA-CF-227 Culex quinquefasciatus 56  Máu BN 5-6 tuổi S-M-99, S-M-377 1987 Máu BN tuổi ĐT-M-580 Máu BN 11 tuổi SB-AA-29/88 1988 S-M-3/88, S-CF-25/88 Culex quinquefasciatus S-AA-29/88 Ades aegypyti Máu BN 10 tuổi 1989 S-M-25/89 1991 ĐN-M-230/91 Máu BN 40 tuổi CSF-56/92, CSF-69/92, CSF- 147/92 Dịch nảo tuỷ: 4,7,8 tuổi CSF-66/92, CSF-67/92 Dịch nảo tuỷ: 16,48 tuổi S-M-194/92 Máu BN tuổi S-CSF-104/93 Dịch nảo tuỷ: 45 tuổi ST-M-95/95 Máu BN 10 tuổi BT-M-330/95 Máu BN 13 tuổi LA-M-345/97 Máu BN tuổi S-M-902/97 Máu BN 14 tuổi S-M-1336/97 Máu BN tuổi 1992 1993 1995 1997 57  58  ... Hùng Thịnh, 1994), khu vực miền Trung Tây Nguyên 30,2% (TTTY vung Đà Nẵng, 1998), Đồng Tháp từ 41,76% đến 63,43% (Trần Thanh Phong, Nguyễn Ngọc Tuân Hồ Nguyễn Thiện Trung, 2003) 2.1.3 Những nghiên... .10 2.3 Truyền nhiễm học 10 2.3.1 Động vật cảm thụ 10 2.3.2 Động vật trung gian truyền bệnh 10 2.2.3 Chất chứa bệnh 11 2.3.4 Cơ chế sinh bệnh ... B bệnh truyền nhiễm chung người động vật heo (bệnh Zoonosis) Bệnh gây tác động đến hệ thần kinh trung ương người trẻ em Ở heo, bệnh gây nên tượng co giật heo 06 tháng tuổi, gây nên rối loạn sinh