KHẢO SÁT KHẢ NĂNG SỐNG SÓT CỦA B.SUBTILIS TRONG SẢN PHẨM BỘT ĐẬU NÀNH LÊN MEN BỞI B.SUBTILIS

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP KHẢO SÁT KHẢ NĂNG SỐNG SÓT CỦA B.SUBTILIS TRONG SẢN PHẨM BỘT ĐẬU NÀNH LÊN MEN BỞI B.SUBTILIS Họ tên sinh viên : PHÙNG THỊ XUÂN THƯỜNG Ngành : CHẾ BIẾN BẢO QUẢN NÔNG SẢN THỰC PHẨM VÀ DINH DƯỠNG Lớp : DH05DD Niên khóa : 2005 – 2009 Tháng 8/2009 KHẢO SÁT KHẢ NĂNG SỐNG SÓT CỦA B.SUBTILIS TRONG SẢN PHẨM BỘT ĐẬU NÀNH LÊN MEN BỞI B.SUBTILIS Tác giả PHÙNG THỊ XUÂN THƯỜNG Khóa luận đệ trình đề để đáp ứng yêu cầu cấp Kỹ sư ngành Chế Biến Bảo Quản Nông Sản Thực Phẩm Dinh Dưỡng Người Giáo viên hướng dẫn: TS LÊ CHIẾN PHƯƠNG ThS VƯƠNG THỊ VIỆT HOA Trang tựa Tháng 8/20089 i LỜI CẢM ƠN Tơi xin gửi lòng biết ơn sâu sắc đến: Ban giám hiệu trường Đại học Nông Lâm TP.HCM, Ban chủ nhiệm Khoa Công Nghệ Thực Phẩm, tất qúy thầy cô truyền đạt kiến thức cho tơi suốt q trình học trường TS Lê Chiến Phương, người tận tình hướng dẫn, giúp đỡ, động viên suốt thời gian thực tập hồn thành khố luận tốt nghiệp ThS Vương Thị Việt Hoa, người hướng dẫn, giúp đỡ tạo điều kiện để tơi hồn thành trình thực tập thời gian vừa qua KS Phan Văn Dân, KS Võ Thị Thanh Trang hướng dẫn tận tình suốt q trình hồn thành khóa luận Các bạn lớp DH05DD bên tôi, giúp đỡ, động viên, chia sẻ thời gian thực tập suốt năm học vừa qua Cha mẹ, bậc sinh thành sinh ni dưỡng tơi, anh chị em gia đình ln quan tâm, ủng hộ tơi học tập hồn thành khoá luận tốt nghiệp Những người bạn thân ln ln bên tơi, động viên q trình thực đề tài Sinh viên thực Phùng Thị Xuân Thường ii TÓM TẮT Đề tài nghiên cứu “Khảo sát khả sống sót B.subtilis sản phẩm bột đậu nành lên men B.subtilis”, thực với mục đích xây dựng quy trình chế biến bột đậu nành lên men B.subtilis khảo sát khả sống sót B.subtilis nhằm xem thực phẩm chức năng, bổ sung probiotic vào thể người có khả làm tiêu huyết khối Đề tài thực Phòng Cơng nghệ Biến Đổi Sinh Học Viện Sinh Học Nhiệt Đới, thời gian từ 23/02/2009 đến 09/07/2009 Đề tài bố trí qua thí nghiệm thu kết sau: - Thí nghiệm 1: Khảo sát ảnh hưởng pH đến sinh trưởng B.subtilis theo thời gian: Chúng thực điều kiện nuôi cấy lắc nhiệt độ phòng, pH khảo sát mức 6, 6,5, 7, 7,5 mức thời gian 0, 12, 24, 36, 48, 60, 72, 84 96 Với kết thu được: B.subtilis phát triển mạnh pH = 6,5 thời gian 24 với lượng tế bào 12,18 log(CFU/ml) Thí nghiệm 2: So sánh khả thủy phân B.subtilis với chủng B.natto o Thủy phân tinh bột o Thủy phân casein o Thủy phân fibrin Chúng tơi tiến hành thí nghiệm với: Yếu tố cố định: pH (6,5), nuôi lắc, nhiệt độ phòng Yếu tố thay đổi: thời gian, với mức 0, 12, 24, 36 48 Với kết thu được: Hoạt độ amylase protease chủng vi khuẩn khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê hoạt độ amylase protease chủng vi khuẩn mạnh 24 Thí nghiệm 3: Khảo sát tỉ lệ B.subtilis sống sót sản phẩm bột đậu nành lên men Với kết thu được: • Trung bình lượng tế bào B.subtilis g đậu nành lên men trước sấy 4,2.1010 CFU/g tính theo trọng lượng khơ tuyệt đối iii • Trung bình lượng tế bào B.subtilis g bột đậu nành lên men 1,29.1010 CFU/g tính theo trọng lượng khơ tuyệt đối • Tỉ lệ trung bình lượng tế bào B.subtilis sống sót g sản phẩm bột đậu nành lên men so với đậu nành lên men trước sấy 30,71% • Xây dựng quy trình chế biến bột đậu nành lên men B.subtilis iv MỤC LỤC Trang Trang tựa i Lời cảm ơn ii Tóm tắt iii Danh sách bảng ix Danh sách hình xi Danh sách đồ thị sơ đồ .xii Danh sách chữ viết tắt xiii Chương 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục đích 1.3 Nội dung Chương 2.1 Tổng quan B.subtilis 2.1.1 Lịch sử phát 2.1.2 Phân loại 2.1.3 Đặc điểm phân bố 2.1.4 Đặc điểm sinh trưởng phát triển 2.1.5 Bào tử vi khuẩn Bacillus subtilis 2.1.5.1 Sự hình thành bào tử 2.1.5.2 Thành phần hoá học bào tử 2.1.5.3 Sức đề kháng bào tử 2.1.6 Tính chất đối kháng Bacillus subtilis với số vi sinh vật gây bệnh 2.1.7 Hệ enzyme Bacillus subtilis 2.1.7.1 Hệ enzyme protease 2.1.7.2 Hệ enzym amylase 2.1.8 Ứng Dụng vi khuẩn B.subtilis 2.1.8.1 Ứng dụng Việt Nam 2.1.8.1.1 Trong y học 2.1.8.1.2 Trong công nghiệp 10 v 2.1.8.1.3 Trong thực phẩm 10 2.1.8.1.4 Trong nông nghiệp 10 2.1.8.2 Ứng dụng giới 11 2.1.8.2.1 Trong y học 11 2.1.8.2.2 Trong công nghiệp 11 2.1.8.2.3 Trong nông nghiệp 11 2.1.8.2.4 Trong thực phẩm 11 2.2 Tổng quan Đậu nành 12 2.2.1 Đặc điểm phân loại 12 2.2.2 Thành phần dinh dưỡng đậu nành 12 2.2.2.1 Protein 13 2.2.2.2 Chất sinh tố chất khoáng 14 2.2.2.3 Chất béo chất cholesterol 15 2.2.3 Công dụng đậu nành 15 2.2.4 Các sản phẩm từ đậu nành 17 2.2.4.1 Đậu phụ 17 2.2.4.2 Chao 17 2.2.4.3 Tương 17 2.2.4.4 Miso 18 2.2.4.5 Natto 18 2.2.4.6 Tempeh 18 Chương 19 3.1 Vật liệu 19 3.2 Dụng cụ thiết bị 19 3.3 Phương pháp thí nghiệm 20 3.3.1 Thí nghiệm 1: Khảo sát ảnh hưởng pH đến sinh trưởng B.subtilis theo thời gian 20 3.3.2 Thí nghiệm 2: So sánh khả thủy phân B.subtilis với chủng B.natto 21 3.3.2.1 Thủy phân tinh bột 21 3.3.2.1.1 Định tính amylase 21 vi 3.3.2.1.2 Xác định hoạt độ enzym amylase 22 3.3.2.2 Thủy phân casein 24 3.3.2.2.1 Định tính protease 24 3.3.2.2.2 Xác định hoạt độ protease: dùng casein làm chất 24 3.3.2.3 Thủy phân fibrin 26 3.3.2.3.1 Phương pháp thu fibrin từ huyết heo 26 3.3.2.3.2 Định tính protease: dùng fibrin làm chất 27 3.3.2.3.3 Xác định hoạt độ protease: dùng fibrin làm chất 27 3.3.3 Thí nghiệm 3: Khảo sát khả sống sót B.subtilis bột đậu nành lên men B.subtilis 28 3.3.3.1 Quy trình chế biến bột đậu nành lên men dự kiến B.subtilis 28 3.3.3.2 Giải thích quy trình 28 3.3.3.3 Khảo sát tỉ lệ B.subtilis thời gian ảnh hưởng đến chất lượng đậu nành lên men 28 3.3.3.4 Xác định độ ẩm đậu nành lên men trước sau sấy 29 3.3.4.5 Kiểm tra tỉ lệ B.subtilis sống sót sản phẩm bột đậu nành lên men 30 3.4 Phương pháp sử lý số liệu 31 Chương 32 4.1 Kết thí nghiệm 1: Khảo sát yếu tố pH ảnh hưởng đến khả sinh trưởng B.subtilis theo thời gian 32 4.2 Kết thí nghiệm 2: So sánh khả thủy phân B.subtilis với chủng B.natto 33 4.2.1 Kết thủy phân tinh bột 33 4.2.1.1 Kết định tính amylase 33 4.2.1.2 Kết hoạt độ amylase 34 4.2.2 Kết thủy phân casein 36 4.2.2.1 Kết định tính protease 36 4.2.2.2 Kết hoạt độ protease: dùng casein làm chất 37 4.2.3 Kết thủy phân fibrin 38 4.2.3.1 Kết thu fibrin từ huyết heo 38 vii 4.2.3.2 Kết định tính protease 38 4.2.3.3 Kết hoạt độ protease: dùng fibrin làm chất 39 4.3 Kết thí nghiệm 3: Khảo sát tỉ lệ B.subtilis sống sót sản phẩm bột đậu nành lên men 40 4.3.1 Kết khảo sát tỉ lệ B.subtilis bổ sung vào đậu nành 40 4.3.2 Quy trình chế biến bột đậu nành lên men 42 4.3.3 Giải thích quy trình 43 4.3.4 Kết độ ẩm (%) đậu nành lên men trước sau sấy 44 4.3.5 Kết khảo sát tỉ lệ B.subtilis sống sót sản phẩm bột đậu nành lên men 44 Chương 45 5.1 Kết luận 45 5.2 Đề nghị 46 TÀI LIỆU THAM KHẢO 47 viii DANH SÁCH CÁC BẢNG Trang Bảng 2.1: Đặc điểm sinh hóa B.subtilis Bảng 2.2: Thành phần axit amin protein đậu nành 13 Bảng 2.3: Thành phần khoáng đậu nành 14 Bảng 2.4: Thành phần vitamin đậu nành 15 Bảng 3.1: Bố trí kết lượng tế bào B.subtilis khảo sát pH theo thời gian 21 Bảng 3.2: Bố trí kết hoạt độ amylase B.subtilis chủng B.natto theo thời gian 23 Bảng 3.3: Bố trí kết hoạt độ protease B.subtilis chủng B.natto theo thời gian 26 Bảng 3.4: Bố trí kết hoạt độ protease B.subtilis chủng B.natto theo thời gian 27 Bảng 3.5: Bố trí kết cảm quan khảo sát tỉ lệ B.subtilis bổ sung vào đậu nành theo thời gian 29 Bảng 3.6: Bố trí kết lượng tế bào B.subtilis khảo sát tỉ lệ B.subtilis bổ sung vào đậu nành theo thời gian 29 Bảng 3.7: Bố trí kết độ ẩm (%) đậu nành lên men trước sau sấy 30 Bảng 3.8: Bố trí kết lượng tế bào B.subtilis đậu nành lên men trước sau sấy31 Bảng 4.1: Kết lượng tế bào B.subtilis thí nghiệm khảo sát ảnh hưởng pH theo thời gian 32 Bảng 4.2: Kết hoạt độ amylase trung bình B.subtilis chủng B.natto theo thời gian 34 Bảng 4.3: Kết hoạt độ protease B.subtilis chủng B.natto với casein làm chất theo thời gian 37 Bảng 4.4: Kết hoạt độ protease trung bình B.subtilis chủng B.natto với fibrin làm chất theo thời gian 39 Bảng 4.5: Kết cảm quan khảo sát tỉ lệ vi khuẩn thời gian thích hợp để lên men đậu nành Error! Bookmark not defined Bảng 4.6: Kết lượng tế bào B.subtilis khảo sát tỉ lệ vi khuẩn thời gian thích hợp để lên men đậu nành 41 ix Bảng 1.5: Kết đo OD595nm thí nghiệm so sánh khả thủy phân tinh bột B.subtilis chủng B.natto theo thời gian Thời gian 12 24 36 48 OD595nm B.subtilis B.N1 B.N2 0,967 0,967 0,967 0,942 0,942 0,942 0,961 0,961 0,961 0,782 0,783 0,784 0,743 0,729 0,786 0,735 0,738 0,720 0,524 0,536 0,538 0,515 0,527 0,529 0,536 0,538 0,518 0,73 0,712 0,709 0,725 0,698 0,704 0,71 0,716 0,712 0,788 0,791 0,783 0,784 0,782 0,791 0,762 0,759 0,748 53 Ống chuẩn 1,225 Bảng 1.6: Kết hoạt độ amylase thí nghiệm so sánh khả thủy phân tinh bột B.subtilis chủng B.natto theo thời gian Thời gian 12 24 36 48 UI/ml B.subtilis B.N1 B.N2 6,32 6,32 6,32 6,93 6,93 6,93 6,46 6,46 6,46 10,85 10,8 10,8 11,8 12,1 10,75 12 11,9 12,37 17,17 16,9 16,82 17,39 17,1 17,04 16,87 16,8 17,31 12,12 12,6 12,64 12,25 12,9 12,76 12,6 12,5 12,56 10,7 10,6 10,82 10,8 10,8 10,63 11,34 11,4 11,68 54 Bảng 1.7: Kết đo OD660nm nồng độ tyrosin Nồng độ tyrosin 10 20 30 40 50 0,035 0,096 0,146 0,19 0,238 (μg/ml) OD Đường chuẩn tyrosine 0.6 y = 0.0049x - 0.0046 0.5 R2 = 0.9994 OD 0.4 0.3 0.2 0.1 0 10 20 30 40 50 60 70 80 Nồng độ tyrosine (MicroG/ml) Đồ thị 1.1: Đường chuẩn tyrosine 55 90 100 110 Bảng 1.8: Kết đo OD660nm thí nghiệm so sánh khả thủy phân casein B.subtilis chủng B.natto theo thời gian OD660nm Thời gian B.subtilis B.N1 B.N2 Mẫu đối chứng 12 24 36 48 0,192 0,192 0,192 0,189 0,189 0,189 0,193 0,193 0,193 0,311 0,309 0,308 0,3 0,31 0,311 0,29 0,304 0,305 0,668 0,673 0,584 0,672 0,66 0,582 0,626 0,629 0,61 0,5 0,492 0,493 0,496 0,501 0,496 0,51 0,521 0,501 0,281 0,283 0,262 0,275 0,285 0,283 0,284 0,282 0,281 56 0,084 Bảng 1.9: Kết hoạt độ protease thí nghiệm so sánh khả thủy phân casein protease B.subtilis chủng B.natto theo thời gian Thời gian 12 24 36 48 UI/ml B.subtilis B.N1 B.N2 91,92 91,92 91,92 89,47 89,47 89,47 92,73 92,73 92,73 189,06 187,43 186,61 180,08 188,24 189,06 171,92 183,35 184,16 480,49 484,57 411,92 483,75 473,96 410,29 446,20 448,65 433,14 343,35 336,82 337,63 340,1 344,16 340,1 351,51 360,49 344,16 164,57 166,2 149,06 159,67 167,84 166,2 167,02 165,39 164,57 57 Bảng 1.10: Kết đo OD660nm thí nghiệm so sánh khả thủy phân fibrin B.subtilis chủng B.natto theo thời gian OD660nm Thời gian B.subtilis B.N1 B.N2 Mẫu đối chứng 12 24 36 48 0,153 0,153 0,153 0,143 0,143 0,143 0,152 0,152 0,152 0,25 0,251 0,251 0,252 0,246 0,248 0,257 0,263 0,264 0,554 0,567 0,563 0,567 0,569 0,558 0,574 0,57 0,56 0,471 0,472 0,471 0,473 0,469 0,468 0,472 0,471 0,475 0,187 0,186 0,184 0,187 0,185 0,183 0,186 0,183 0,186 58 0,086 Bảng 1.11: Kết hoạt độ protease thí nghiệm so sánh khả thủy phân fibrin protease B.subtilis chủng B.natto theo thời gian UI/ml Thời gian 12 24 36 48 B.subtilis B.N1 B.N2 58,45 58,45 58,45 59,27 57,63 137,63 139,27 143,35 385,8 396,41 402,12 318,04 319,67 318,86 86,2 86,2 85,39 59,27 57,63 138,45 134,37 148,24 396,41 398,04 398,86 318,86 316,41 318,04 85,39 84,57 82,94 59,27 57,63 138,45 136 149,06 393,14 389,06 390,69 318,04 315,59 321,31 83,76 82,94 85,39 59 Bảng 1.12: Kết lượng tế bào B.subtilis g đậu nành lên men trước sấy với tỉ lệ bổ sung 1%, 2% B.subtilis theo thời gian Thời Tỉ lệ (%) gian 1% B.subtilis Nồng Đĩa Số KL Số 1010CFU/ (1) độ (3) KLtb g (5) (2) (1) 12 24 2% B.subtilis 10-6 10-7 (2) (3) (4) (5) 146 1,46 234 2,34 (4) 132 150 120 137 123 151 151 230 202 192 133 280 125 0,125 162 1,62 60 10-7 10-7 Bảng 1.13: Kết độ ẩm (%) đậu nành lên men trước sau sấy Đậu Trọng lượng (g) Lần sấy nành Độ ẩm Độ ẩm trung (%) bình lên G G1 G2 45 200 107,8 59,5 45 200 106,23 60,5 45 200 106,54 60,3 45 100 94,72 9,6 45 100 95,34 10,3 45 100 94,45 10,1 men Trước sấy Sau sấy 60 10 Bảng 1.14: Kết trung bình lượng tế bào B.subtilis g đậu nành lên men trước sau sấy tính theo trọng lượng khơ tuyệt đối Đậu nành lên CFU/g trung bình Độ ẩm trung bình CFU/g theo trọng (%) lượng khơ tuyệt men đối Trước sấy 1,68.1010 60 4,2.1010 Sau sấy 1,26.1010 10 1,29.1010 61 Bảng 1.15: Kết lượng tế bào B.subtilis g đậu nành lên men trước sau sấy Đậu Nồng độ Đĩa nành Số khuẩn Số khuẩn lạc lạc trung lên men -7 Trước 10 10 -7 -7 10-7 Sau sấy CFU/g trung bình bình 10 sấy CFU/g 10 -7 10-7 153 197 158 124 209 147 162 190 173 153 120 98 102 134 92 148 104 97 169 1,69.1010 160 1,6.1010 175 1,75.1010 124 1,24.1010 109 10 116 62 1,09.10 1,16.1010 1,68.1010 1,26.1010 PHỤ LỤC 2: CÁC BẢNG XỬ LÝ THỐNG KÊ Bảng 2.1: Kết bảng ANOVA thí nghiệm so sánh khả thủy phân tinh bột amylase B.subtilis chủng B.natto Analysis of Variance for amyl.UI - Type III Sums of Squares -Source of variation Sum of Squares d.f Mean square F-ratio Sig level -MAIN EFFECTS A:amyl.vk B:amyl.tgian RESIDUAL 01689 00845 055 9470 501.09690 125.27423 808.621 0000 5.8870844 38 1549233 -TOTAL (CORRECTED) 507.00088 44 Bảng 2.2: Kết bảng LSD so sánh ảnh lưởng thời gian đến hoạt độ amylase Multiple range analysis for amyl.UI by amyl.tgian Method: 95 Percent LSD Level Count LS Mean Homogeneous Groups 6.617778 48 10.974444 12 11.485556 36 12.547778 24 17.044444 X X X X X contrast difference limits - 12 -4.86778 0.37571 * - 24 -10.4267 0.37571 * - 36 -5.93000 0.37571 * - 48 -4.35667 0.37571 * 12 - 24 -5.55889 0.37571 * 12 - 36 -1.06222 0.37571 * 12 - 48 0.51111 0.37571 * 24 - 36 4.49667 0.37571 * * denotes a statistically significant difference 63 Bảng 2.3: Kết bảng ANOVA thí nghiệm so sánh khả thủy phân casein protease B.subtilis chủng B.natto Analysis of Variance for PROTE.UI - Type III Sums of Squares -Source of variation Sum of Squares d.f Mean square F-ratio Sig level -MAIN EFFECTS A:PROTE.vk 5678.97 2839.48 2.906 0673 B:PROTE.tgian 742331.71 185582.93 189.928 0000 RESIDUAL 36153.491 37 977.12137 -TOTAL (CORRECTED) 781850.92 43 Bảng 2.4: Kết bảng LSD so sánh ảnh lưởng thời gian đến hoạt lực protease với casein làm chất Multiple range analysis for PROTE.UI by PROTE.tgian Method: 95 Percent LSD Level Count LS Mean Homogeneous Groups 90.73844 X 48 163.14773 X 12 184.43444 X 36 322.58000 24 452.55222 X X contrast difference limits - 12 -93.6960 29.8641 * - 24 -361.814 29.8641 * - 36 -231.842 29.8641 * - 48 -72.4093 30.8308 * 12 - 24 -268.118 29.8641 * 12 - 36 -138.146 29.8641 * 12 - 48 21.2867 30.8308 24 - 36 129.972 29.8641 * * denotes a statistically significant difference 64 Bảng 2.5: Kết bảng ANOVA thí nghiệm so sánh khả thủy phân fibrin protease B.subtilis chủng B.natto Analysis of Variance for PROTE.UI - Type III Sums of Squares -Source of variation Sum of Squares d.f Mean square F-ratio Sig level -MAIN EFFECTS A:PROTE.tgian B:PROTE.vk RESIDUAL 800850.63 200212.66 13495.731 0000 10.26 5.13 346 7098 563.73982 38 14.835258 -TOTAL (CORRECTED) 801424.63 44 Bảng 2.6: Kết bảng LSD so sánh ảnh lưởng thời gian đến hoạt độ protease với fibrin làm chất Method: 95 Percent LSD Level Count LS Mean Homogeneous Groups 57.27111 48 84.75333 12 140.53556 36 318.31333 24 394.42333 X X X X X contrast difference limits - 12 -83.2644 3.67652 * - 24 -337.152 3.67652 * - 36 -261.042 3.67652 * - 48 -27.4822 3.67652 * 12 - 24 -253.888 3.67652 * 12 - 36 -177.778 3.67652 * 12 - 48 55.7822 3.67652 * 24 - 36 76.1100 3.67652 * * denotes a statistically significant difference 65 PHỤ LỤC 3: MÔI TRƯỜNG, THUỐC NHUỘM VÀ THỬ 3.1 Môi trường cá pepton Nước mắm 30oN Pepton 10 g Agar 20 g Thêm nước cất đến 1000 ml 3.2 Nước muối sinh lý 0,9% g muối NaCl pha nước vào cho đủ 1000 ml 3.3 Môi trường sữa đậu nành Bổ sung 3% đường saccharose 3.4 Môi trường Czapek – Dox thạch NaNO3 3,5 g K2HPO4 0,5 g MgSO4 0,5 g KCl 0,5 g FeSO4 0,1 g Agar 20 g Thêm nước đến 1000 ml pH = 6,5 – 7,0 3.5 Môi trường A1: Môi trường cảm ứng tổng hợp enzym amylase Môi trường Czapek – Dox thạch + 1% tinh bột 3.6 Môi trường A2: Môi trường cảm ứng tổng hợp enzym protease Môi trường Czapek – Dox thạch + 1% Casein 3.7 Môi trường A3: Môi trường cảm ứng tổng hợp enzym protease Môi trường Czapek – Dox thạch + 1% fibrin 3.8 Thuốc thử Lugol KI 2g Iod tinh thể 1g Nước cất 300 ml 66 Hoà g KI vào ml nước, sau thêm g Iod,chờ cho Iod tan hết thêm nước cất vừa đủ 300 ml 3.9 Thuốc thử Folin Na2WO4.2H2O 100 g Dung dịch acid phosphoric 85% 50 ml Li2SO4 150 g Na2MoO4.2H2O 25 g HCl đặc 100 ml Dung dịch Brom vài giọt Nước cất thêm đến lít 67 ... thành phần axit amin thi t yếu hàm lượng cần thi t Protein đậu nành loại đậu thoả mãn yếu tố này, có nghĩa chứa đựng tất loại thi t yếu với hàm lượng cần thi t, tương đương với protein thịt động... axit amin thi t yếu là: trytophan, threonine, isoleucine, valine, lysine, methionine, phenylalanine leucine Cơ thể cần tất loại axit amin đồng điều chỉnh tỷ lệ với Nếu chất axit amin thi u, thứ... amin thi t yếu Nếu thực phẩm hội đủ hai yếu tố đánh giá cao phẩm Phần lớn thực phẩm đậu nành thuộc loại tiêu hóa dễ dàng Yếu tố thứ hai xác định phẩm chất protein hội đủ thành phần axit amin thi t