MỞ ĐẦU Hiện nay, sự gia tăng dân số cùng với sự phát triển nhanh chóng của ngành công nghiệp làm gia tăng lượng chất thải ra môi trường. Vì vậy, môi trường sống ngày càng bị ô nhiễm với mức độ nghiêm trọng. Sinh vật và nhất là các loài thuỷ sản sống trong môi trường ô nhiễm bị ảnh hưởng đến sự sinh trưởng, phát triển. Không những vậy, các độc chất sẽ tích tụ trong cơ thể chúng và sẽ rất nguy hiểm nếu con người ăn phải thức ăn có nhiễm độc chất. Vì thế, vấn đề nghiên cứu sự tích luỹ và đào thải độc chất cũng như ảnh hưởng của độc chất đến sự sinh trưởng phát triển của các loài thuỷ sản là hết sức quan trọng và đã được các nhà khoa học quan tâm nghiên cứu. Trong những thập niên gần đây, các nhà khoa học trên thế giới đã quan tâm nghiên cứu về sự tích luỹ và đào thải kim loại nặng cũng như sự ảnh hưởng của kim loại nặng đến hàm lượng sinh hóa (gluco, cortisol, glutathion, lipit, …) trong cơ thể sinh vật nhằm phản ánh phản ứng của cơ thể trước sự thay đổi của môi trường sống. Việt Nam là quốc gia đang phát triển nên vấn đề xử lý chất thải chưa được quan tâm đúng mức dẫn đến việc ô nhiễm môi trường là không thể tránh khỏi, nhất là ô nhiễm các kim loại nặng không có vai trò sinh học nhưng rất độc đối với con người như Cd, Pb và As. Các loài thuỷ sản sống trong môi trường ô nhiễm bị ảnh hưởng đến sản lượng và chất lượng. Trong các loài thuỷ sản, cá Điêu hồng là loài rất được ưa chuộng làm thức ăn do chất lượng thịt cá và giá thành hợp lý. Tuy nhiên, việc đánh giá phản ứng của cá Điêu hồng do ảnh hưởng của kim loại Cd, Pb và As trong môi trường ô nhiễm và sự tích luỹ, đào thải các kim loại này chưa được nghiên cứu. Do đó, nghiên cứu sinh chọn đề tài: “Nghiên cứu quá trình tích luỹ - đào thải và ảnh hưởng của các kim loại nặng (As, Cd, Pb) đến hàm lượng cortisol trong cá Điêu hồng (Oreochromis sp.)” nhằm mục đích giải quyết các vấn đề sau: - Tìm ra ngưỡng độc cấp tính (LC 50 trong 96 giờ) của từng kim loại Cd, Pb và As để đánh giá độc tính của từng kim loại đối với cá Điêu hồng. - Tìm ra ảnh hưởng của các kim loại (Cd, Pb, As) trong nước ô nhiễm đến hàm lượng cortisol trong cá. Đây là yếu tố chỉ mức độ căng thẳng sinh lý và oxy hóa của cá sống trong nước ô nhiễm kim loại nặng. Từ đó có thể đề xuất sử dụng cá làm chỉ thị sinh học để phát hiện kịp thời ô nhiễm nguồn nước do kim loại nặng. - Nghiên cứu quy luật hấp thu và đào thải kim loại nặng (Cd, Pb, As) trong gan, mang và thịt cá Điêu hồng sống trong môi trường ô nhiễm trên cơ sở đó khuyến cáo người nuôi cá có hướng nuôi thích hợp nhằm cung cấp nguồn cá sạch ra thị trường để đảm bảo sức khoẻ người tiêu dùng. Nội dung nghiên cứu của luận án 1. Xác định ngưỡng độc cấp tính trong 96 giờ của Cd, Pb, As đối với cá Điêu hồng. Dựa trên giá trị LC 50 trong 96 giờ, lựa chọn nồng độ kim loại nặng phù hợp để tiến hành các nghiên cứu tiếp theo. 2. Nghiên cứu quy luật tích luỹ và đào thải kim loại nặng trong cá Điêu hồng nuôi trong nguồn nước ô nhiễm và sau đó nuôi trong nguồn nước sạch. 3. Nghiên cứu ảnh hưởng của kim loại nặng trong nước đến sự thay đổi hàm lượng cortisol trong cá.
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ NGUYỄN QUỐC THẮNG NGHIÊN CỨU QUÁ TRÌNH TÍCH LUỸ - ĐÀO THẢI VÀ ẢNH HƯỞNG CỦA CÁC KIM LOẠI NẶNG (As, Cd, Pb) ĐẾN HÀM LƯỢNG CORTISOL TRONG CÁ ĐIÊU HỒNG (OREOCHROMIS SP.) LUẬN ÁN TIẾN SĨ HOÁ HỌC Tp Hồ Chí Minh năm 2018 iii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CÁM ƠN …………………………………………………………………….ii MỤC LỤC… iii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT vi DANH MỤC BẢNG BIỂU .vii DANH MỤC HÌNH ẢNH viii MỞ ĐẦU…… CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 Giới thiệu kim loại nặng Cd, Pb As 1.1.1 Nguồn gốc gây ô nhiễm kim loại nặng nước 1.1.2 Đợc tính kim loại nặng 1.1.3 Con đường xâm nhập kim loại nặng vào sinh vật 1.1.4 Khả tích lũy sinh học 1.1.5 Ảnh hưởng kim loại nặng lên sinh vật 1.1.6 Khả giải đợc tính kim loại nặng 1.1.7 Tổng quan về asen 10 1.1.8 Tổng quan về cadimi 16 1.1.9 Tổng quan về chì 20 1.2 Hóc-môn cortisol 22 1.2.1 Khái niệm về hóc-môn 22 1.2.2 Phân loại hóc-môn 23 1.2.3 Cơ chế tác dụng hóc-môn 23 1.2.4 Nhịp sinh học hóc-môn 23 1.2.5 Hóc-môn cortisol 24 1.3 Giới thiệu về cá Điêu hồng 29 1.3.1 Nguồn gốc cá Điêu hồng 29 1.3.2 Đặc điểm cá Điêu hồng 30 iv 1.4 Kết luận về nghiên cứu tổng quan 31 1.4.1 Tình hình nghiên cứu và ngoài nước về ảnh hưởng kim loại nặng lên cá Điêu hồng… 31 1.4.2 Nhiệm vụ đặt 32 CHƯƠNG PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 33 2.1 Đối tượng nghiên cứu 33 2.1.1 Cá…… 33 2.1.2 Kim loại 33 2.1.3 Cortisol 33 2.2 Phương pháp nghiên cứu 33 2.2.1 Quy trình nghiên cứu 34 2.2.2 Phương pháp lập thực nghiệm 35 2.2.3 Nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ Cd, Pb và As nước đến cá Điêu hồng………… ….37 2.3 Các phương pháp phân tích 38 2.3.1 Phân tích cortisol 38 2.3.2 Phân tích tổng hàm lượng Cd và Pb cá 39 2.3.3 Phân tích tổng hàm lượng As cá 40 2.3.4 Phân tích cadimi, chì, asen hữu 41 2.3.5 Đánh giá các quy trình phân tích 46 2.4 Xử lý kết quả thực nghiệm 47 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 48 3.1 Đánh giá phương pháp phân tích 48 3.3.1 Đánh giá phương pháp định lượng cortisol 48 3.1.2 Đánh giá phương pháp định lượng Cd cá Điêu hồng 50 3.1.3 Đánh giá phương pháp định lượng Pb cá Điêu hồng 51 3.1.4 Đánh giá phương pháp định lượng As cá Điêu hồng 52 3.2 Nghiên cứu về asen 53 3.2.1 Nghiên cứu ngưỡng đợc cấp tính asen 53 3.2.2 Nghiên cứu đợc mãn tính (sub-chronic) As cá Điêu hồng 55 v 3.3 Nghiên cứu về Cd 70 3.3.1 Ngưỡng đợc cấp tính Cd 70 3.3.2 Nghiên cứu đợc mãn tính (sub-chronic) Cd cá Điêu hồng 72 3.4 Nghiên cứu về chì 87 3.4.1 Ngưỡng độc cấp tính Pb 87 3.4.2 Nghiên cứu độc mãn tính (sub-chronic) Pb cá Điêu hồng 89 3.5 So sánh ngưỡng độc hại cấp, quy luật tích lũy, đào thải rối loạn nợi tiết 102 3.6 Tích lũy kim loại nặng thịt cá tươi so với giới hạn cho phép cảnh báo nguy cơ……… 105 KẾT LUẬN… 108 ĐỀ XUẤT…… 110 CÁC CÔNG TRÌNH LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN ĐÃ CƠNG BỐ 111 TÀI LIỆU THAM KHẢO 112 PHỤ LỤC…… 126 vi DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT RP-HPLC: Sắc ký lỏng cao áp pha đảo DAD: Diode array detector LH: Luteinizing Hormon ACTH: Adrenocorticotropic hormon CRH: Corticotropin-releasing hormon ATP: Adenosine triphosphat LD50: Liều lượng gây chết 50% cá thể nghiên cứu LC50: Nồng độ gây chết 50% cá thể nghiên cứu 96-h LC50: Ngưỡng đợc cấp tính gây chết 50% cá thể nghiên cứu 96 MT: Metallothionein AsB: Asenobetain DMA: Dimetyl asen MMA: Monometyl asen LOD: Giới hạn phát LOQ: Giới hạn định lượng ppm: Nồng độ phần triệu ppb: Nồng độ phần tỉ SPSS: Statistical Package for Social Sciences vii DANH MỤC BẢNG BIỂU Bảng 2.1 Điều kiện phân phân tích Cd, Pb ICP-OES .39 Bảng 2.2 Điều kiện phân phân tích As ICP-MS .40 Bảng 2.3 Điều kiện phân tích các dạng hóa học asen kỹ thuật ghép nối HPLC-UV-HG-AAS 44 Bảng 3.1 Các thông số đánh giá phương pháp định lượng cortisol 49 Bảng 3.2 Các thông số đánh giá phương pháp định lượng Cd 50 Bảng 3.3 Các thông số đánh giá phương pháp phân tích Pb 51 Bảng 3.4 Các thông số đánh giá phương pháp phân tích As 52 Bảng 3.5 Ảnh hưởng As nước đến trọng lượng cá Điêu hồng 55 Bảng 3.6 Dạng hóa học asen gan và thịt cá Điêu hồng ô nhiễm 63 Bảng 3.7 Sự thay đổi trọng lượng cá Điêu hồng sau 10 ngày ngưng ô nhiễm As 65 Bảng 3.8 Phần trăm As đào thải sau 10 ngày cá ô nhiễm sống nước .66 Bảng 3.9 Ảnh hưởng Cd nước đến trọng lượng cá Điêu hồng 72 Bảng 3.10 Hàm lượng Cd dạng phức với MT so sánh với hàm lượng Cd tổng gan và thịt cá ô nhiễm .79 Bảng 3.11 Sự thay đổi trọng lượng cá ô nhiễm sau 10 ngày sống nước 81 Bảng 3.12 Phần trăm Cd đào thải sau 10 ngày cá ô nhiễm sống nước 81 Bảng 3.13 Ảnh hưởng Pb nước ô nhiễm đến khối lượng cá Điêu hồng 89 Bảng 3.14 Dạng hóa học chì gan và thịt cá nhiễm 95 Bảng 3.15 Sự thay đổi trọng lượng cá Điêu hồng sau 10 ngày ngưng ô nhiễm 96 Bảng 3.16 Phần trăm Pb đào thải sau 10 ngày cá ô nhiễm sống nước 98 Bảng 3.17 Lượng kim loại nặng vào thể hàng tuần qua chế độ ăn cá ô nhiễm .107 viii DANH MỤC HÌNH ẢNH Hình 1.1 Sơ đồ biến đổi các dạng asen sinh vật .14 Hình 1.2 Công thức cấu tạo cortisol 24 Hình 1.3 Con đường tổng hợp cortisol 25 Hình 1.4 Cá Điêu hồng 30 Hình 2.1 Sơ đồ quy trình nghiên cứu .34 Hình 2.2 Sơ đồ bố trí thí nghiệm 36 Hình 2.3 Sơ đồ thời gian lấy mẫu .38 Hình 2.4 Sơ đồ phân tích liên tục các dạng hóa học asen kỹ thuật HPLCUV-HG-AAS 45 Hình 3.1 Sắc ký đồ phân tích cortisol chuẩn 50 Hình 3.2 Ảnh hưởng nồng đợ As nước đến lượng cá chết 96 53 Hình 3.3 Đồ thị ước lượng LC50 As 96 cá Điêu hồng 54 Hình 3.4 Hình ảnh mang cá đối chứng và mang cá sau 20 ngày nhiễm asen 56 Hình 3.5 Tích lũy As mang cá theo thời gian 56 Hình 3.6 Tích lũy As gan cá theo thời gian .57 Hình 3.7 Tích lũy As thịt cá theo thời gian 58 Hình 3.8 Quy luật tích lũy As cá sau 20 ngày sống nước nhiễm 59 Hình 3.9 Tỷ lệ giữa nồng độ As nước và tích lũy As cá sau 20 ngày sống nước ô nhiễm 60 Hình 3.10 Sắc ký đồ chuẩn các dạng hóa học asen 62 Hình 3.11 Sắc ký đồ dạng hóa học asen mẫu cá chuẩn CMR 62 Hình 3.12 Sắc ký đồ dạng hóa học asen a) thịt cá và b) gan cá Điêu hồng sống nước ô nhiễm asen 63 Hình 3.13 Sự thay đổi hàm lượng As cá ô nhiễm sau 10 ngày sống nước .66 Hình 3.14 Ảnh hưởng As nước đến thay đổi hàm lượng cortisol huyết tương cá 67 ix Hình 3.15 Sự thay đổi hàm lượng cortisol huyết tương cá ô nhiễm so với cá đối chứng theo thời gian 68 Hình 3.16 Sự thay đổi hàm lượng cortisol huyết tương cá ô nhiễm sau 10 ngày sống nước 69 Hình 3.17 Ảnh hưởng nồng độ Cd nước đến số lượng cá thí nghiệm chết 96 71 Hình 3.18 Đồ thị ước tính giá trị LC50 96 Cd cá Điêu hồng 71 Hình 3.19 Hình ảnh mang cá đối chứng và mang cá sau 20 ngày nhiễm cadimi 73 Hình 3.20 Tích lũy Cd mang cá theo thời gian .74 Hình 3.21 Tích lũy Cd gan cá theo thời gian .75 Hình 3.22 Quá trình xâm nhập Cd vào bên thể 76 Hình 3.23 Tích lũy Cd thịt cá theo thời gian 76 Hình 3.24 Quy luật tích lũy Cd cá Điêu hồng sau 20 ngày sống nước ô nhiễm 77 Hình 3.25 Tỷ lệ giữa tích lũy Cd cá sau 20 ngày sống nước ô nhiễm và nồng độ Cd nước 78 Hình 3.26 Sự thay đổi hàm lượng Cd cá ô nhiễm sau 10 ngày sống nước .82 Hình 3.27 Cơ chế loại bỏ Cd 83 Hình 3.28 Ảnh hưởng Cd đến thay đổi hàm lượng cortisol huyết tương cá sống nước ô nhiễm 84 Hình 3.29 Đợ giảm hàm lượng cortisol cá ô nhiễm so với cá đối chứng ngày thứ 4, 12 và 20 kể từ lúc bắt đầu sống nước ô nhiễm Cd 85 Hình 3.30 Hàm lượng cortisol huyết tương cá ngày thứ 20 ô nhiễm và ngày thứ 10 ngày ô nhiễm Cd 86 Hình 3.31 Ảnh hưởng nồng đợ Pb nước đến lượng cá chết 96 87 Hình 3.32 Đồ thị ước lượng đợc cấp tính Pb cá Điêu hồng .88 Hình 3.33 Hình ảnh mang cá đối chứng và mang cá sau 20 ngày nhiễm chì .90 Hình 3.34 Tích lũy Pb mang cá theo thời gian 91 Hình 3.35 Tích lũy Pb gan cá theo thời gian .92 x Hình 3.36 Tích lũy Pb thịt cá theo thời gian 93 Hình 3.37 Quy luật tích lũy Pb cá sau 20 ngày sống nước ô nhiễm 94 Hình 3.38 Tỷ lệ giữa lượng Pb tích lũy cá sau 20 ngày cá sống nước ô nhiễm và lượng Pb nước 95 Hình 3.39 Sự thay đổi hàm lượng Pb cá sau 10 ngày sống nước 97 Hình 3.40 Ảnh hưởng Pb nước đến thay đổi hàm lượng cortisol huyết tương cá 99 Hình 3.41 Sự khác biệt về lượng cortisol huyết tương cá ô nhiễm và cá đối chứng ngày thứ 4, 12 và 20 kể từ lúc bắt đầu sống nước nhiễm Pb 100 Hình 3.42 Sự thay đổi hàm lượng cortisol huyết tương cá ô nhiễm Pb sau 10 ngày sống nước 101 Hình 3.43 Hàm lượng kim loại nặng cá ô nhiễm so sánh với giới hạn cho phép tối đa 106 MỞ ĐẦU Hiện nay, gia tăng dân số với phát triển nhanh chóng ngành cơng nghiệp làm gia tăng lượng chất thải mơi trường Vì vậy, mơi trường sống ngày bị ô nhiễm với mức độ nghiêm trọng Sinh vật nhất loài thuỷ sản sống môi trường ô nhiễm bị ảnh hưởng đến sinh trưởng, phát triển Không những vậy, các độc chất tích tụ thể chúng rất nguy hiểm người ăn phải thức ăn có nhiễm đợc chất Vì thế, vấn đề nghiên cứu tích luỹ và đào thải đợc chất ảnh hưởng độc chất đến sinh trưởng phát triển loài thuỷ sản quan trọng và nhà khoa học quan tâm nghiên cứu Trong những thập niên gần đây, các nhà khoa học giới quan tâm nghiên cứu về tích luỹ và đào thải kim loại nặng ảnh hưởng kim loại nặng đến hàm lượng sinh hóa (gluco, cortisol, glutathion, lipit, …) thể sinh vật nhằm phản ánh phản ứng thể trước thay đổi môi trường sống Việt Nam quốc gia phát triển nên vấn đề xử lý chất thải chưa quan tâm mức dẫn đến việc ô nhiễm môi trường không thể tránh khỏi, nhất ô nhiễm kim loại nặng khơng có vai trò sinh học rất đợc người Cd, Pb và As Các loài thuỷ sản sống môi trường ô nhiễm bị ảnh hưởng đến sản lượng chất lượng Trong loài thuỷ sản, cá Điêu hồng loài rất ưa chuộng làm thức ăn chất lượng thịt cá giá thành hợp lý Tuy nhiên, việc đánh giá phản ứng cá Điêu hồng ảnh hưởng kim loại Cd, Pb As môi trường ô nhiễm tích luỹ, đào thải kim loại này chưa nghiên cứu Do đó, nghiên cứu sinh chọn đề tài: “Nghiên cứu quá trình tích luỹ đào thải và ảnh hưởng của kim loại nặng (As, Cd, Pb) đến hàm lượng cortisol cá Điêu hồng (Oreochromis sp.)” nhằm mục đích giải vấn đề sau: 168 Phụ lục 68 Sự sai khác giữa hàm lượng Pb mang cá sau 12 ngày ô nhiễm Multiple Comparisons Dependent Variable: Hàm lượng chì mang cá sau 12 ngày ô nhiễm Dunnett T3 95% Confidence Interval (I) Nồng độ (J) Nồng độ Mean Std Sig Pb ô nhiễm Pb ô nhiễm Difference (I-J) Error Lower Upper Bound Bound Đối chứng 0,12 0,18 0,33 0,12 -3,654000* 0,089213 0,001 -4,22658 -3,08142 0,18 -4,762000* 0,083432 0,000 -5,28573 -4,23827 0,33 -4,994000* 0,048955 0,000 -5,23260 -4,75540 Đối chứng 3,654000* 0,089213 0,001 3,08142 4,22658 0,18 -1,108000* 0,116640 0,003 -1,61873 -0,59727 0,33 -1,340000* 0,095082 0,003 -1,85021 -0,82979 Đối chứng 4,762000* 0,083432 0,000 4,23827 5,28573 0,12 1,108000* 0,116640 0,003 0,59727 1,61873 0,33 -,232000 0,089680 0,270 -0,69842 0,23442 Đối chứng 4,994000* 0,048955 0,000 4,75540 5,23260 0,12 1,340000* 0,095082 0,003 0,82979 1,85021 0,18 0,232000 0,089680 0,270 -0,23442 0,69842 * The mean difference is significant at the 0,05 level 169 Phụ lục 69 Sự sai khác giữa hàm lượng Pb mang cá sau 20 ngày ô nhiễm Multiple Comparisons Dependent Variable: Hàm lượng chì mang cá sau 20 ngày ô nhiễm Dunnett T3 (I) Nồng độ Pb ô nhiễm Đối chứng 0,12 0,18 0,33 (J) Nồng độ Mean Pb ô nhiễm Difference (I-J) Std Error 95% Confidence Interval Sig Lower Bound Upper Bound 0,12 -7,818667* 0,058428 0,000 -8,07580 -7,56153 0,18 -8,117667* 0,124806 0,000 -8,89853 -7,33680 0,33 -8,217000* 0,069243 0,000 -8,54306 -7,89094 Đối chứng 7,818667* 0,058428 0,000 7,56153 8,07580 0,18 -0,299000 0,126460 0,349 -1,05789 0,45989 0,33 -0,398333* 0,072182 0,026 -,72559 -0,07108 Đối chứng 8,117667* 0,124806 0,000 7,33680 8,89853 0,12 0,299000 0,126460 0,349 -0,45989 1,05789 0,33 -0,099333 0,131806 0,950 -0,80921 0,61054 Đối chứng 8,217000* 0,069243 0,000 7,89094 8,54306 0,12 0,398333* 0,072182 0,026 0,07108 0,72559 0,18 0,099333 0,131806 0,950 -0,61054 0,80921 * The mean difference is significant at the 0,05 level 181 Phụ lục 70 Kết quả kiểm định sai khác giữa hàm lượng As cá sau 10 ngày ngưng ô nhiễm Paired Samples Test Paired Differences 95% Confidence Interval of the Difference Sig (2- T df 0,419000 0,134330 0,044777 0,315745 0,522255 9,358 0,000 0,322111 0,099615 0,033205 0,245540 0,398682 9,701 0,000 0,204000 0,096563 0,032188 0,129775 0,278225 6,338 0,000 Mean Std Deviation Std Error Mean Lower tailed) Upper Hàm lượng As thịt cá ngày 20 ô Pair nhiễm - Hàm lượng As thịt cá ngày 10 ngưng ô nhiễm Hàm lượng As gan cá ngày 20 ô Pair nhiễm - Hàm lượng As gan cá ngày 10 ngưng ô nhiễm Hàm lượng As mang cá ngày Pair 20 ô nhiễm - Hàm lượng As mang cá ngày 10 ngưng ô nhiễm 182 Phụ lục 71 Kết quả kiểm định sai khác giữa hàm lượng Cd cá sau 10 ngày ngưng ô nhiễm Paired Samples Test Paired Differences 95% Confidence Std Sig (2- T df 0,117111 0,027922 0,009307 0,095649 0,138573 12,583 0,000 Pair ô nhiễm - Hàm lượng Cd gan cá 0,629667 0,150127 0,050042 0,514269 0,745064 12,583 0,000 9,406 0,000 Mean Std Deviation Error Interval of the tailed) Difference Mean Lower Upper Hàm lượng Cd thịt cá ngày 20 ô Pair nhiễm - Hàm lượng Cd thịt cá ngày 10 ngưng ô nhiễm Hàm lượng Cd gan cá ngày 20 ngày 10 ngưng ô nhiễm Hàm lượng Cd mang cá ngày Pair 20 ô nhiễm - Hàm lượng Cd mang cá ngày 10 ngưng ô nhiễm 0,477444 0,152277 0,050759 0,360394 0,594495 183 Phụ lục 72 Kết quả kiểm định sai khác giữa hàm lượng Pb cá sau 10 ngày ngưng ô nhiễm Paired Samples Test Paired Differences 95% Confidence Std Sig (2- T df 0,121667 0,054642 0,018214 0,079665 0,163668 6,680 0,000 1,058111 0,236226 0,078742 0,876532 1,239690 13,438 0,000 2,112667 0,999654 0,333218 1,344265 2,881069 6,340 0,000 Mean Std Deviation Error Interval of the tailed) Difference Mean Lower Upper Hàm lượng Pb thịt cá ngày 20 ô Pair nhiễm - Hàm lượng Pb thịt cá ngày 10 ngưng ô nhiễm Hàm lượng Pb gan cá ngày 20 ô Pair nhiễm - Hàm lượng Pb gan cá ngày 10 ngưng ô nhiễm Hàm lượng Pb mang cá ngày 20 Pair ô nhiễm - Hàm lượng Pb mang cá ngày 10 ngưng ô nhiễm 184 Phụ lục 73 Kết quả kiểm định sai khác giữa hàm lượng cortisol cá ô nhiễm As so với cá đối chứng Paired Samples Test Paired Differences 95% Confidence Mean Pair Pair Pair Pair Pair Hàm lượng cortisol cá đối chứng ngày – Hàm lượng cortisol cá ô nhiễm 1,0 mgAs/L ngày Hàm lượng cortisol cá đối chứng ngày – Hàm lượng cortisol cá ô nhiễm 1,5 mgAs/L ngày Hàm lượng cortisol cá đối chứng ngày – Hàm lượng cortisol cá ô nhiễm 3,0 mgAs/L ngày Hàm lượng cortisol cá đối chứng ngày 12 – Hàm lượng cortisol cá ô nhiễm 1,0 mgAs/L ngày 12 Hàm lượng cortisol cá đối chứng ngày 12 – Hàm lượng cortisol cá ô nhiễm 1,5 mgAs/L ngày 12 Std Deviation Std Error Mean Interval of the t df -6,530 Difference Lower Sig (2tailed) Upper -11,1667 4,1889 1,7101 -15,5626 -6,7707 0,001 -18,8667 4,5005 1,8373 -23,5897 -14,1437 -10,269 0,000 -26,5500 5,3780 2,1956 -32,1939 -20,9061 -12,093 0,000 -24,5833 3,0446 1,2430 -27,7785 -21,3882 -19,778 0,000 -9,0833 3,6897 1,5063 -12,9554 0,002 -5,2113 -6,030 185 Phụ lục 73 (tiếp theo) Kết quả kiểm định sai khác giữa hàm lượng cortisol cá ô nhiễm As so với cá đối chứng Paired Samples Test Paired Differences 95% Confidence Mean Pair Pair Pair Pair Hàm lượng cortisol cá đối chứng ngày 12 – Hàm lượng cortisol cá ô nhiễm 3,0 mgAs/L ngày 12 Hàm lượng cortisol cá đối chứng ngày 20 – Hàm lượng cortisol cá ô nhiễm 1,0 mgAs/L ngày 20 Hàm lượng cortisol cá đối chứng ngày 20 – Hàm lượng cortisol cá ô nhiễm 1,5 mgAs/L ngày 20 Hàm lượng cortisol cá đối chứng ngày 20 – Hàm lượng cortisol cá ô nhiễm 3,0 mgAs/L ngày 20 Std Deviation Std Error Mean Interval of the t df Difference Lower Upper Sig (2tailed) -4,8667 4,8702 1,9882 -9,9776 0,2443 -2,448 0,058 6,4167 3,9179 1,5995 2,3051 10,5282 4,012 0,010 9,03333 3,72433 1,52045 5,12488 12,94178 5,941 0,002 5,06099 2,06614 4,80548 15,42785 4,896 0,004 10,1166 186 Phụ lục 74 Kết quả kiểm định sai khác giữa hàm lượng cortisol cá ô nhiễm Cd so với cá đối chứng Paired Samples Test Paired Differences 95% Confidence Mean Pair Pair Pair Pair Pair Hàm lượng cortisol cá đối chứng ngày – Hàm lượng cortisol cá ô nhiễm 0,66 mgCd/L ngày Hàm lượng cortisol cá đối chứng ngày – Hàm lượng cortisol cá ô nhiễm 1,0 mgCd/L ngày Hàm lượng cortisol cá đối chứng ngày – Hàm lượng cortisol cá ô nhiễm 2,0 mgCd/L ngày Hàm lượng cortisol cá đối chứng ngày 12 – Hàm lượng cortisol cá ô nhiễm 0,66 mgCd/L ngày 12 Hàm lượng cortisol cá đối chứng ngày 12 – Hàm lượng cortisol cá ô nhiễm 1,0 mgCd/L ngày 12 Std Deviation Std Error Mean Interval of the t df Difference Lower Sig (2tailed) Upper 17,2333 1,3456 0,5493 15,8212 18,6455 31,371 0,000 21,4000 0,8532 0,3483 20,5046 22,2954 61,436 0,000 22,3333 2,1210 0,8659 20,1075 24,5592 25,792 0,000 26,3333 1,1535 0,4709 25,1228 27,5439 55,917 0,000 27,8000 0,6261 0,2556 27,1429 28,4571 108,762 0,000 187 Phụ lục 74 (tiếp theo) Kết quả kiểm định sai khác giữa hàm lượng cortisol cá ô nhiễm Cd so với cá đối chứng Paired Samples Test Paired Differences 95% Confidence Mean Pair Pair Pair Pair Hàm lượng cortisol cá đối chứng ngày 12 – Hàm lượng cortisol cá ô nhiễm 2,0 mgCd/L ngày 12 Hàm lượng cortisol cá đối chứng ngày 20 – Hàm lượng cortisol cá ô nhiễm 0,66 mgCd/L ngày 20 Hàm lượng cortisol cá đối chứng ngày 20 – Hàm lượng cortisol cá ô nhiễm 1,0 mgCd/L ngày 20 Hàm lượng cortisol cá đối chứng ngày 20 – Hàm lượng cortisol cá ô nhiễm 2,0 mgCd/L ngày 20 Std Deviation Std Error Mean Interval of the t df Difference Lower Sig (2tailed) Upper 30,5333 1,2078 0,4931 29,2659 31,8008 61,926 0,000 32,8000 1,1171 0,4561 31,6276 33,9724 71,919 0,000 35,5667 1,0671 0,4356 34,4468 36,6865 81,643 0,000 37,9667 1,1183 0,4566 36,7930 39,1403 83,159 0,000 188 Phụ lục 75 Kết quả kiểm định sai khác giữa hàm lượng cortisol cá ô nhiễm Pb so với cá đối chứng Paired Samples Test Paired Differences Mean Pair Pair Pair Pair Pair Hàm lượng cortisol cá đối chứng ngày – Hàm lượng cortisol cá ô nhiễm 0,12 mgPb/L ngày Hàm lượng cortisol cá đối chứng ngày – Hàm lượng cortisol cá ô nhiễm 0,18 mgPb/L ngày Hàm lượng cortisol cá đối chứng ngày – Hàm lượng cortisol cá ô nhiễm 0,33 mgPb/L ngày Hàm lượng cortisol cá đối chứng ngày 12 – Hàm lượng cortisol cá ô nhiễm 0,12 mgPb/L ngày 12 Hàm lượng cortisol cá đối chứng ngày 12 – Hàm lượng cortisol cá ô nhiễm 0,18 mgPb/L ngày 12 Std Deviation Std Error Mean 95% Confidence Interval of the t df Difference Lower Sig (2tailed) Upper 2,4333 2,4873 1,0154 -0,1769 5,0436 2,396 0,062 8,3333 3,7071 1,5134 4,4430 12,2237 5,506 0,003 10,4667 2,9656 1,2107 7,3545 13,5789 8,645 0,000 14,1667 1,1877 0,4849 12,9202 15,4131 29,217 0,000 24,9000 0,9274 0,3786 23,9268 25,8732 65,770 0,000 189 Phụ lục 75 (tiếp theo) Kết quả kiểm định sai khác giữa hàm lượng cortisol cá ô nhiễm Pb so với cá đối chứng Paired Samples Test Paired Differences 95% Confidence Mean Pair Pair Pair Pair Hàm lượng cortisol cá đối chứng ngày 12 – Hàm lượng cortisol cá ô nhiễm 0,33 mgPb/L ngày 12 Hàm lượng cortisol cá đối chứng ngày 20 – Hàm lượng cortisol cá ô nhiễm 0,12 mgPb/L ngày 20 Hàm lượng cortisol cá đối chứng ngày 20 – Hàm lượng cortisol cá ô nhiễm 0,18 mgPb/L ngày 20 Hàm lượng cortisol cá đối chứng ngày 20 – Hàm lượng cortisol cá ô nhiễm 0,33 mgPb/L ngày 20 Std Deviation Std Error Mean Interval of the t df Difference Lower Sig (2tailed) Upper 29,5667 2,0057 0,8188 27,4619 31,6715 36,109 0,000 25,2833 2,8053 1,1453 22,3394 28,2273 22,077 0,000 36,9167 0,9642 0,3936 35,9048 37,9285 93,785 0,000 43,0333 2,1342 0,8713 40,7937 45,2730 49,392 0,000 190 Phụ lục 76 Kết quả kiểm định sai khác giữa hàm lượng cortisol cá sau 10 ngày ngưng ô nhiễm As Paired Samples Test Paired Differences Mean Std Deviation Std 95% Confidence Interval Error of the Difference Mean Lower Upper t df Sig (2tailed) Hàm lượng cortisol cá ô nhiễm 1,0 Pair mgAs/L ngày thứ 20 – Hàm lượng cortisol -0,4667 3,7087 1,5141 -4,3587 3,4254 -0,308 0,770 0,7000 6,2351 2,5455 -5,8433 7,2433 0,275 0,794 Pair mgAs/L ngày thứ 20 – Hàm lượng cortisol 13,2500 6,5256 2,6641 6,4018 20,0982 4,974 0,004 cá ngày 10 ngưng ô nhiễm Hàm lượng cortisol cá ô nhiễm 1,5 Pair mgAs/L ngày thứ 20 – Hàm lượng cortisol cá ngày 10 ngưng ô nhiễm Hàm lượng cortisol cá ô nhiễm 3,0 cá ngày 10 ngưng ô nhiễm 191 Phụ lục 77 Kết quả kiểm định sai khác giữa hàm lượng cortisol cá sau 10 ngày ngưng ô nhiễm Cd Paired Samples Test Paired Differences Mean Std Deviation Std Error Mean 95% Confidence Interval of the Difference Lower t df Sig (2tailed) Upper Hàm lượng cortisol cá ô nhiễm 0,66 Pair mgCd/L ngày thứ 20 – Hàm lượng cortisol cá ngày 10 ngưng ô nhiễm -5,8000 0,8198 0,3347 -6,6603 -4,9397 -17,331 0,000 -1,5333 0,2066 0,0843 -1,7501 -1,3166 -18,183 0,000 -0,7333 0,4033 0,1647 -1,1566 -0,3101 -4,454 0,007 Hàm lượng cortisol cá ô nhiễm 1,0 Pair mgCd/L ngày thứ 20 – Hàm lượng cortisol cá ngày 10 ngưng ô nhiễm Hàm lượng cortisol cá ô nhiễm 2,0 Pair mgCd/L ngày thứ 20 – Hàm lượng cortisol cá ngày 10 ngưng ô nhiễm 192 Phụ lục 78 Kết quả kiểm định sai khác giữa hàm lượng cortisol cá sau 10 ngày ngưng ô nhiễm Pb Paired Samples Test Paired Differences Mean Std Deviation Std Error Mean 95% Confidence Interval of the Difference Lower Upper t df Sig (2tailed) Hàm lượng cortisol cá ô nhiễm 0,12 Pair mgPb/L ngày thứ 20 – Hàm lượng -3,0167 1,9467 0,7947 -5,0596 -0,9737 -3,796 0,013 2,5097 1,0246 -7,0671 -1,7995 -4,327 0,008 1,4511 0,5924 -3,9395 -0,8938 -4,079 0,010 cortisol cá ngày 10 ngưng ô nhiễm Hàm lượng cortisol cá ô nhiễm 0,18 Pair mgPb/L ngày thứ 20 – Hàm lượng -4,4333 cortisol cá ngày 10 ngưng ô nhiễm Hàm lượng cortisol cá ô nhiễm 0,33 Pair mgPb/L ngày thứ 20 – Hàm lượng -2,4167 cortisol cá ngày 10 ngưng ô nhiễm 193 ... tâm nghiên cứu Trong những thập niên gần đây, các nhà khoa học giới quan tâm nghiên cứu về tích luỹ và đào thải kim loại nặng ảnh hưởng kim loại nặng đến hàm lượng sinh hóa (gluco, cortisol, ... tính kim loại cá Điêu hồng - Tìm ảnh hưởng các kim loại (Cd, Pb, As) nước ô nhiễm đến hàm lượng cortisol cá Đây là yếu tố mức độ căng thẳng sinh lý oxy hóa cá sống nước nhiễm kim loại nặng. .. 1.1 Giới thiệu kim loại nặng Cd, Pb As 1.1.1 Nguồn gốc gây ô nhiễm kim loại nặng nước 1.1.2 Đợc tính kim loại nặng 1.1.3 Con đường xâm nhập kim loại nặng vào sinh vật