XÁC ĐỊNH LD50 CỦA EDWARDSIELLA ICTALURI TRÊN CÁ LĂNG NHA (Mystus wyckioides) BẰNG PHƯƠNG PHÁP NGÂM

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP XÁC ĐỊNH LD50 CỦA EDWARDSIELLA ICTALURI TRÊN CÁ LĂNG NHA (Mystus wyckioides) BẰNG PHƯƠNG PHÁP NGÂM Họ tên sinh viên: NGUYỄN XN HỒNG Ngành: Ni Trồng Thủy Sản Chun ngành: Ngư Y Niên khóa: 2008 - 2012 Tháng 07/2012 XÁC ĐỊNH LD50 CỦA EDWARDSIELLA ICTALURI TRÊN CÁ LĂNG NHA (Mystus wyckioides) BẰNG PHƯƠNG PHÁP NGÂM Tác giả NGUYỄN XUÂN HỒNG Khóa luận đệ trình để đáp ứng u cầu cấp kỹ sư ngành Nuôi Trồng Thủy Sản chuyên ngành Ngư Y Giáo viên hướng dẫn TS NGUYỄN HỮU THỊNH KS TRUYỆN NHÃ ĐỊNH HUỆ Tháng 07/2012 i LỜI CẢM ƠN Tôi xin chân thành cảm ơn: Cha mẹ gia đình ln bên cạnh, động viên hỗ trợ tinh thần lẫn vật chất cho suốt trình học tập tạo điều kiện thuận lợi cho hồn thành khóa luận tốt nghiệp Ban Giám hiệu trường Đại Học Nông Lâm TPHCM Ban chủ nhiệm khoa Thủy Sản trường Đại Học Nông Lâm tất q thầy tận tình truyền đạt kiến thức quý báu cho suốt thời gian học tập trường Đặc biệt, xin gửi lời biết ơn sâu sắc đến Thầy Nguyễn Hữu Thịnh tận tình hướng dẫn, giúp đỡ tơi suốt q trình thực luận văn tốt nghiệp Tơi xin gửi lời cảm ơn đến chị Truyện Nhã Định Huệ, bạn Trại Thực Nghiệm khoa Thủy Sản trường Đại Học Nơng Lâm thành phố Hồ Chí Minh, tập thể lớp DH08NY chia sẽ, nhiệt tình giúp đỡ động viên tơi hồn thành luận văn Mặc dù cố gắng để thực đề tài hạn chế thời gian kiến thức nên luận văn tránh khỏi thiếu sót Tơi mong nhận thơng cảm đóng góp ý kiến q thầy bạn để đề tài hoàn chỉnh ii TÓM TẮT Đề tài nghiên cứu: “Xác định LD50 Edwardsiella ictaluri cá lăng nha (Mystus wyckioides) phương pháp ngâm” tiến hành từ ngày 07/05/2012 đến ngày 05/06/2012 phòng thí nghiệm Bệnh Học Thủy Sản phòng gây bệnh thực nghiệm thuộc khoa Thủy Sản, trường Đại học Nơng Lâm thành phố Hồ Chí Minh Thí nghiệm với lần lặp lại bố trí theo kiểu hoàn toàn ngẫu nhiên với liều gây bệnh NT1, NT2, NT3, NT4, NT5 mật độ vi khuẩn x 104 cfu/mL, x 105 cfu/mL, x 106 cfu/mL, x 107 cfu/mL, x 108 cfu/mL lô đối chứng (không gây bệnh) Kết thu sau 14 ngày thí nghiệm, vi khuẩn phân lập từ cá bệnh vi khuẩn Edwardsiella ictaluri Biểu bệnh tích, tỷ lệ cá chết tích lũy liều LD50 thí nghiệm: - Biểu bệnh tích bên ngồi phổ biến cá bệnh là: xuất huyết vây, đuôi, hậu môn, tuột nhớt, mang nhạt màu; tỷ lệ xuất huyết vây, cao (30,77%) tuột nhớt thấp (12,8%) Trong đó, bệnh tích bên phổ biến gan nhạt màu, sưng, có đốm trắng hoại tử, mềm nhũn, lách thận sưng, tích dịch xoang bụng; tỷ lệ gan nhạt màu, sưng cao (43,39%) gan có đốm trắng hoại tử thấp (12,82%) - Tỷ lệ cá chết tích lũy mật độ vi khuẩn: cfu/mL, x 104 cfu/mL, x 105 cfu/mL, x 106 cfu/mL , x 107 cfu/mL x 108 cfu/mL theo thứ tự 3,33%, 46,67%, 66,67%, 80%, 86,67% 96,67% - Mật độ vi khuẩn gây chết 50% cá thí nghiệm (LD50) tính theo phương pháp Reed – Muench (1938) 1,2 x 105 cfu/mL iii MỤC LỤC Đề Mục Trang TRANG TỰA i LỜI CẢM ƠN ii TÓM TẮT iii MỤC LỤC iv DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT viii DANH SÁCH CÁC HÌNH ix DANH SÁCH CÁC BẢNG x DANH SÁCH CÁC BIỂU ĐỒ SƠ ĐỒ xi Chương MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục tiêu đề tài 1.3 Nội dung đề tài Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Đặc điểm sinh học cá lăng nha 2.1.1 Phân loại 2.1.2 Nguồn gốc phân bố 2.1.3 Đặc điểm hình thái 2.1.4 Điều kiện môi trường sống 2.1.5 Đặc điểm dinh dưỡng 2.1.6 Đặc điểm sinh trưởng 2.1.7 Đặc điểm sinh sản 2.1.8 Phân biệt đực 2.2 Một số nghiên cứu cá lăng 2.2.1 Ngoài nước 2.2.2 Trong nước iv 2.2.3 Bệnh thường gặp cá lăng nha 2.2.3.1 Bệnh trùng bánh xe 2.2.3.2 Bệnh nấm thuỷ mi 2.2.3.3 Bệnh rận cá 2.2.3.4 Bệnh trắng đuôi 2.3 Một số nghiên cứu Edwardsiella ictaluri 2.3.1 Phân loại 2.3.2 Quá trình phát nghiên cứu Edwardsiella ictaluri 2.3.3 Một số nghiên cứu LD50 Edwardsiella ictaluri 10 2.4 Các phương pháp gây cảm nhiễm nhân tạo cho cá 11 2.4.1 Phương pháp tiêm 11 2.4.2 Phương pháp ngâm 11 2.4.3 Phương pháp nuôi chung 11 2.4.4 Phương pháp đường tiêu hóa 12 2.4 Sơ Lược Về LD50 12 2.4.1 Các yếu tố ảnh hưởng đến LD50 12 Chương VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 13 3.1 Thời Gian Và Địa Điểm Nghiên Cứu 13 3.2 Vật Liệu Nghiên Cứu 13 3.2.1 Dụng cụ 13 3.2.2 Hóa chất mơi trường 13 3.2.2.1 Hóa chất 13 3.2.2.2 Mơi trường 14 3.2.3 Đối tượng thí nghiệm 14 3.2.3.1 Cá thí nghiệm 14 3.2.3.2 Vi khuẩn 14 3.3 Phương Pháp Nghiên Cứu 14 3.3.1 Phương pháp bố trí thí nghiệm 16 v 3.3.1.1 Bố trí hệ thống thí nghiệm 16 3.3.1.2 Phương pháp tăng sinh vi khuẩn 17 3.3.1.3 Phương pháp pha loãng vi khuẩn 18 3.3.1.4 Phương pháp xác định mật độ vi khuẩn bình tăng sinh gốc 18 3.3.1.5 Phương pháp gây bệnh thực nghiệm 19 3.3.1.6 Chăm sóc quản lí sau gây bệnh 21 3.3.2 Phương pháp kiểm tra triệu chứng bệnh tích 21 3.3.2.1 Kiểm tra triệu chứng bệnh tích bên ngồi 21 3.3.2.2 Kiểm tra bệnh tích bên 22 3.3.3 Phương pháp cấy phân lập vi khuẩn 22 3.3.4 Phương pháp cấy vi khuẩn 22 3.3.5 Phương pháp định danh sơ 22 3.3.5.1 Phương pháp nhuộm Gram 23 3.3.5.2 Thử nghiệm Catalase 23 3.3.5.3 Thử nghiệm oxidase 24 3.3.6 Định danh vi khuẩn kit định danh Nam Khoa 24 3.3.6.1 Sơ lược kit IDS 14 GNR 24 3.3.6.2 Cách thực 25 3.3.6.3 Cách đọc kết 26 3.3.6.4 Phương pháp tính điểm để tra bảng định danh 27 2.3.7 Phương pháp kiểm tra kí sinh trùng cá 28 2.3.8 Phương pháp xem mô bệnh học 29 2.3.9 Phương pháp xác định LD50 29 2.3.10 Phương pháp xử lí số liệu 29 Chương KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 30 4.1 Các Chỉ Tiêu Môi Trường 30 4.1.1 Nhiệt độ 30 4.1.2 pH 30 vi 4.1.3 Hàm lượng ôxy hòa tan 31 4.1.4 Hàm lượng NH3 31 4.2 Kết gây nhiễm vi khuẩn Edwardsiella ictaluri 31 4.2.1 Kết kiểm tra ký sinh trùng 31 4.2.2 Kết phân lập định danh vi khuẩn từ mẫu cá bệnh 31 4.2.2.1 Đặc điểm khuẩn lạc vi khuẩn 31 4.2.2.2 Kết phân lập vi khuẩn 32 4.2.2.3 Kết định danh sơ 33 4.2.2.4 Kết định danh kit định danh Nam Khoa 33 4.2.3 Kết phân lập vi khuẩn cá sống sau 14 ngày gây nhiễm 34 4.2.4 Triệu chứng bệnh tích 35 4.2.5 Kết mơ bệnh học 37 2.6 Tỷ lệ cá chết 40 4.2.7 Kết LD50 43 Chương KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 45 5.1 Kết luận 45 5.2 Đề nghị 45 TÀI LIỆU THAM KHẢO 46 PHỤ LỤC 48 vii DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT BHIA Brain Heart Infusion Agar BHIB Brain Heart Infusion Broth CFU Colony Forming Unit NMSL nước muối sinh lí cm centimeter ctv cộng tác viên DO Dissolve Oxygen pH potential of hydrogen g gram kg kilogram LD50 Lethal Dose 50 % M Mean mg milligram mL milliliter mm millimeter o degree Celsius pd proportionate distance SE Standard Error µm micrometer ppm parts per million ppt parts per thousand ESC Enteric Septicemia of Catfish C viii DANH SÁCH CÁC HÌNH Nội dung Trang Hình 2.1 Hình dạng bên ngồi cá lăng nha Hình 2.2 Phân biệt cá lăng nha đực Hình 3.1 Hệ thống bể composite bố trí thí nghiệm 17 Hình 3.2 Phương pháp pha lỗng vi khuẩn 18 Hình 3.3 Dụng cụ gây bệnh thực nghiệm 20 Hình 3.4 Bể trữ nước dụng cụ siphon đáy 21 Hình 4.1 Khuẩn lạc vi khuẩn E ictaluri phân lập từ cá bệnh 32 Hình 4.2 Nhuộm Gram vi khuẩn E ictaluri 33 Hình 4.3 Kết định danh E ictaluri kit IDS 14 GNR 33 Hình 4.4 Bệnh tích bên ngồi cá lờ đờ cá chết 36 Hình 4.5 Bệnh tích cá lờ đờ cá chết 37 Hình 4.6 Mơ gan cá khỏe 38 Hình 4.7 Mơ gan cá bệnh 38 Hình 4.8 Mơ thận cá khỏe 39 Hình 4.9 Mơ thận cá bệnh 39 ix thí nghiệm chúng tơi q nhỏ thời gian ngâm vi khuẩn lâu cá lăng nha giống nhạy cảm với vi khuẩn E ictaluri 4.2.7 Kết LD50 Sau 14 ngày theo dõi thí nghiệm ghi nhận tỷ lệ cá chết, thấy cá lăng nha gây bệnh bắt đầu chết nhiều ngày thứ thứ 8, cá chết đến ngày thứ 10 khơng chết Tuy nhiên, tiếp tục theo dõi hết ngày thứ 14 tính LD50 Trong thí nghiệm chúng tơi tiến hành tính LD50 cơng thức Reed – Muench (1938) Kết LD50 thí nghiệm tính theo cơng thức Reed – Muench (1938) 1,2 x 105 cfu/mL/cá có trọng lượng cỡ 2,1 – 2,3 g/con thể qua bảng 4.5 Bảng 4.5 Tỷ lệ sống chết cá thí nghiệm nồng độ pha loãng Nghiệm Độ pha Tổng Số cá Số cá chết Số cá Số cá sống Tỷ lệ phần thức lỗng số cá chết tích lũy sống tích lũy trăm (%) NT1 10-4 30 14 14 16 38 26,9 NT2 10-3 30 19 33 11 22 60,0 NT3 10-2 30 24 57 11 83,8 NT4 10-1 30 26 83 94,3 NT5 100 30 29 112 1 99,1 Pd = (60 – 50) / (60 – 26,9) = 0,3 lgLD50 = lg10-3 + lg10-1 x pd = - 3,3 LD50 = 10-3,3 Liều gây chết 50% = 2,3 x 108 x 10-3,3 = 1,2 x 105 cfu/mL 43 Qua kết xác định LD50 vi khuẩn E ictaluri cá lăng nha giống cỡ 2,1 – 2,3 g/con cách tính Reed – Muench (1938) 1,2 x 105 cfu/mL Kết so với kết nghiên cứu Nguyễn Lê Mai Trâm (2008), cho gây cảm nhiễm vi khuẩn E ictaluri phương pháp ngâm cá tra (Pangasianodon hypophthalmus) cỡ – g/con 2,43 x 105 cfu/mL Kết cao đôi chút so với kết tính LD50 chúng tơi thực cá lăng nha Ngồi ra, chúng tơi so sánh kết với nghiên cứu Lý Đức Trọng (2010), tiến hành gây bệnh thực nghiệm phương pháp gây nhiễm qua đường tiêu hóa vi khuẩn E ictaluri cá tra (Pangasianodon hypophthalmus) cỡ 10 – 25 g/con 1,04 x 107 cfu/mL Điều cho thấy LD50 cá lăng nha gây bệnh phương pháp ngâm thấp so với LD50 cá tra gây bệnh phương pháp bơm vi khuẩn qua đường tiêu hóa 44 Chương KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 5.1 Kết luận Các yếu tố môi trường phù hợp với điều kiện sống phát triển cá lăng nha thí nghiệm Triệu chứng bệnh tích phổ biến cá bệnh bao gồm: Cá bơi lờ đờ, tách đàn, tuột nhớt, xuất huyết vây, đuôi, hậu môn, nắp mang, đường bên, gan nhạt màu, sưng, có đốm trắng hoại tử, mềm nhũn, lách thận sưng, xuất huyết tích dịch xoang bụng Tuy nhiên, bệnh tích đốm trắng gan xuất với tần suất thấp cá bệnh (12,82%) Mô gan, thận cá bệnh bị biến đổi cấu trúc, tế bào bị biến dạng, xuất nhiều vùng xuất huyết Tỷ lệ cá chết trung bình nghiệm thức tăng theo liều gây bệnh từ NT1 – NT5 nghiệm thức đối chứng ĐC 46,67%, 63,33%, 80,0%, 86,67%, 96,67% 3,3% LD50 vi khuẩn E ictaluri cá lăng nha cỡ 2,1 - 2,3 g/con tính cơng thức Reed – Muench (1938) 1,2 x 105 cfu/mL 5.2 Đề nghị Sau kết thúc thí nghiệm, chúng tơi đưa số đề nghị sau: - Khảo sát LD50 vi khuẩn E ictaluri cá lăng nha cỡ lớn khoảng từ 10 g/con trở lên - Cần tiếp tục khảo sát LD50 vi khuẩn E ictaluri phương pháp khác tiêm, nuôi chung, cho ăn 45 TÀI LIỆU THAM KHẢO TÀI LIỆU TIẾNG VIỆT Nguyễn Hữu Thịnh Lưu Thị Thanh Trúc, 2009 Thực hành chẩn đoán bệnh động vật thủy sản Khoa Thủy Sản, Đại Học Nông Lâm TP Hồ Chí Minh Nguyễn Văn Cơng, 2003 Phương pháp thống kê nuôi trồng thủy sản Trường Đại Học Nông Lâm thành phố Hồ Chí Minh Ngơ Trọng Lư Thái Bá Hổ, 2005 Kỹ thuật nuôi thủy đặc sản nước Nhà Xuất Bản Nơng Nghiệp Đồn Văn Dũng, 2008 Kỹ thuật ương cá lăng nha (Mystus wyckioides) giai đoạn từ ngày tuổi đến 34 ngày tuổi LVTN Khoa Thủy Sản, Trường Đại Học Nông Lâm Tp.HCM Lê Văn Thống, 2008 Đánh giá khả gây cảm nhiễm Edwardsiella ictaluri số loài cá nước cá tra, cá rô đồng, cá điêu hồng, cá trê, cá lăng nha cá chép LVTN Khoa Thủy sản, Trường Đại Học Nông Lâm Tp.HCM Lê Đại Quan, 2004 Khảo sát ảnh hưởng thức ăn lên tăng trưởng cá lăng nha (Mystus wyckioides Chaux Fang, 1949) LVTN Khoa Thủy sản, Trường Đại Học Nông Lâm Tp.HCM Nguyễn Lê Mai Trâm, 2008 Xác định LD50 (Lethal dose 50%) vi khuẩn Edwardsiella ictaluri cá tra (Pangasianodon hypophthalmus Sauvage, 1878) LVTN Khoa Thủy sản, Trường Đại Học Nông Lâm Tp.HCM Lý Đức Trọng, 2010 Xác định LD50 (Lethal dose 50%) Edwardsiella ictaluri cá tra (Pangasianodon hypophthalmus Sauvage, 1878) phương pháp gây nhiễm qua đường tiêu hóa LVTN Khoa Thủy sản, Trường Đại Học Nông Lâm Tp.HCM 46 TÀI LIỆU TIẾNG NƯỚC NGOÀI J.P Hawke, R.M Durborow, R.L Thune And A.C.Camus, 1998 ESC-Enteric Septicemia of Catfish SRAC Publication, No 477 (Southern Regional Aquaculture Center) 10 J A Plumb, V Hilge, 1987 Susceptibility of European catfish (Silurus glanis) to Edwardsiella ictaluri Journal of Applied Ichthyology, Vol 3, No 1: 45 – 48 11 D V Baxa, J M Groff, A Wishkovsky, R P Hedrick, 1990 Susceptibility of nonictalurid fishes to experimental infection with Edwardsiella ictaluri Diseases of aquatic organisms, Vol 8: 113 – 117 12 Walter J Rainboth, 1996 Fishes of the Campodian Mekong Food and Agriculture Organization of the United Nations, page 139 – 144 TÀI LIỆU TỪ INTERNET 13 http://vietbao.vn/Khoa-hoc/Nhan-giong-thanh-cong-mot-loai-ca-lang-hiem 14 http://tepbac.com/species/full/20/Ca-lang-nha.htm 15 http://unilongs.com.vn/index.php/2011/03/nuoi-c-lang-nha-trong-long-be 16 http://www.kinhtenongthon.com.vn/Story/khoahoccn/tienbo/2008/9/14779.html 17 http://www.vietlinh.com.vn/library/aquaculture_fish/langnha.htm 47 PHỤ LỤC Phụ lục Bảng theo dõi cá chết 14 ngày thí nghiệm Tổng Thời gian theo dõi thí nghiệm (14 ngày) NT 10 11 12 13 14 ĐC1 ĐC2 1/30 ĐC3 1 NT1.1 NT1.2 NT1.3 NT2.1 NT2.2 1 NT2.3 NT3.1 NT3.2 NT3.3 2 1 NT4.1 NT4.2 3 NT4.3 1 NT5.2 1 NT5.3 1 19/30 1 NT5.1 14/30 4 24/30 1 2 26/30 29/30 48 Phụ lục Bảng theo dõi yếu tố môi trường 14 ngày thí nghiệm Các tiêu theo dõi Ngày Nghiệm thức Nhiệt độ (oC) pH NH3 DO (mg/L) (mg/L) Sáng Chiều ĐC 27 27 0,004 NT1 27 28 0,004 NT2 27,5 28 0,004 NT3 27,5 28 7,3 0,004 7,5 NT4 27 27 0,003 NT5 27 28 0,004 ĐC 28 28 NT1 27 27,5 NT2 27 27 NT3 27 27 NT4 27 27 NT5 27 28 ĐC 27 27,5 0,004 NT1 27 27 0,004 NT2 27 28 0,004 7,5 NT3 28 28,5 0,004 NT4 27,5 28 0,004 NT5 27,5 28 0,004 ĐC 28 28 NT1 27,5 28 NT2 27,5 28 NT3 27,5 28 49 NT4 27 27 NT5 27 27 ĐC 27,5 28 0,004 NT1 28 28,5 0,004 NT2 28 28,5 0,004 NT3 28 28,5 0,004 7,5 NT4 27 28 0,004 NT5 28 28,5 0,004 ĐC 28 28 NT1 27 27,5 NT2 27 27,5 NT3 27 27 NT4 28 28 NT5 27 27,5 ĐC 28 28,5 7,3 0,004 NT1 27 27 0,004 NT2 27 27,5 0,004 7,5 NT3 27 27 0,004 NT4 28 28 7,5 0,004 NT5 28 28 0,004 ĐC 27,5 28 NT1 28 28,5 NT2 28 28,5 NT3 28 28 NT4 27,5 27,5 NT5 28 28,5 ĐC 28 28 0,005 NT1 27,5 28 0,004 50 10 11 12 NT2 28 28 0,004 NT3 28 28,5 0,004 NT4 28 28 0,004 NT5 28 28,5 0,004 ĐC 28 28,5 NT1 28 28 NT2 27,5 28 NT3 28 28,5 NT4 27,5 28 NT5 28 28 ĐC 28 28 0,003 7,5 NT1 27,5 28 0,004 NT2 28 28,5 0,004 NT3 28,5 28,5 0,004 NT4 27.5 28 0,004 NT5 28 28 0,004 ĐC 28 28 NT1 27,5 28 NT2 28 28 51 Phụ lục Kết xử lý thống kê so sánh tỷ lệ cá chết nghiệm thức One-way ANOVA: ĐC, NT1, NT2, NT3, NT4, NT5 Source DF SS MS F P Factor 18520 3704 30.29 0.000 Error 12 1467 122 Total 17 19988 S = 11.06 R-Sq = 92.66% R-Sq(adj) = 89.60% Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev Level N Mean StDev ĐC 0.33 0.58 NT1 46.67 5.77 NT2 63.33 20.82 NT3 80.00 10.00 NT4 86.67 11.55 NT5 96.67 5.77 + -+ -+ -+ ( -* -) ( -* -) ( -* -) ( -* -) ( -* -) ( -* -) + -+ -+ -+ 35 70 52 105 Phụ lục Tần suất xuất bệnh tích bên bên 62 cá lờ đờ cá chết Bệnh tích Ngày bên Gan nhạt màu, sưng Thận sưng Lách sưng, nhạt màu Gan có đốm trắng, nhũn 10 11 12 13 14 3 - - - - 3 0 0 - - - - 0 2 - - - - 0 2 0 - - - - Ghi chú: (-) không quan sát bệnh tích Bệnh tích bên ngồi Xuất huyết vây, Xuất huyết hậu môn Xuất huyết bụng,trướng bụng Mang nhạt màu Tuột nhớt Ngày 10 11 12 13 14 4 1 - - - - 0 1 - - - - 3 1 0 - - - - 2 2 0 - - - - 2 0 - - - - 53 Phụ lục Bảng theo dõi bệnh tích phân lập vi khuẩn từ cá lờ đờ cá chết 14 ngày thí nghiệm Ngày Nghiệm thức Biểu bên Xoang bụng Cấy phân lập Tạo thành khuẩn lạc NT5.1 Cụt đuôi, mang nhạt màu, xh hàm Nm S - Td có có NT5.2 Xh tia vây, đi, hàm, bụng, mang nhạt màu Nm Nm S Xh có khơng NT5.3 Đứt đi, Xh tia vây Nm S - Td - NT4.2 Xh vây, hậu môn, mang, nắp, mang nhạt màu S, Nm S - Xh có NT3.3 Đứt râu,Xh hàm Bt S - Bt - NT3.1 Tuột nhớt khoang bụng, cuống Xh S - Bt có không NT5.1 Xh vây, nắp mang,tuột nhớt Nm S - Td có khơng NT5.2 Xh vây,bụng Nm S Td - NT5.3 Xh nắp mang, bụng, vây hậu môn, tuột nhớt khoang Sn Bt Bt Bt có khơng Nm Nm, S Bt S - Td Td có khơng Nm Bt - Td - NT3.1 NT3.2 Biểu bên Gan Thận Lách NT5.1 Xh đuôi, tuột nhớt đuôi Đứt vây đi,xh hàm dưới, nắp mang Xh bụng,tia vây,mòn đuôi,mang, nhạt màu 54 không NT3.1 Xh bụng hàm, mang,vây NT4.2 Xh tia vây NT3.2 Bt Bt - Bt có có Nm, S S, mủ - Td, Xh có có Xh mang, vây S S - Bt - NT5.3 Bt Bt Bt Bt Bt có khơng NT5.2 Xh bụng, hoại tử da,vây, nắp mang S mủ,Nm, S, mủ S Xh có có NT4.1 Bt NT4.3 ĐC3 Xh tia vây Bt - - - - - Bt Bt Bt Bt có NT5.1 Xh bụng Nm, S S - Td - Nm, mềm nhũn, vùng trắng Nm, S Nm Td có có khơng NT4.1 Xh cuống đi, vây, hậu mơn NT3.1 Xh vây ,nắp mang, bụng Nm Bt - Bt có NT2.1 NT5.2 Bt Bt Bt Bt Bt - Xh đuôi vây ,tuột nhớt,hàm, bụng trướng S Bt - Td có NT4.2 Xh vây - - - - - NT3.2 NT5.3 Xh vây bụng, ngực,nắp mang Xh vây hậu môn,đuôi bụng,nắp mang Nm, S S S Nm Bt Td Bt có có 55 khơng có khơng có NT4.1 Tuột nhớt - - - - - NT3.1 Bt - - - - - NT5.3 Xh vây, bụng, cụt đuôi Nm Bt - Bt có NT4.3 Đốm trắng vùng đầu Bt BT - BT - Mềm nhũn,Sn Mềm, Sn - Td,Xh có có NT3.3 Xh tồn thân, miệng,tuột nhớt đi, mòn vây Mềm, có vùng trắng Sn - Td,bong bong phình to có có Hơi Nm Bt - Bt có có Bt - Bt có khơng - Td, vỡ túi mật có có NT4.2 NT2.1 Tuột nhớt khoang bụng, Xh hàm, vây ngực, vây bụng NT2.2 Bt NT4.1 Xh vây, nắp mang, hậu môn lồi, mủ vùng đầu Nm, S Bt S, đốm trắng NT4.3 Mang Nm, Xh quanh miệng, hoại tử da Nm, mềm nhũn Nm - Td - NT1.1 Tuột nhớt cuống đuôi Bt - Bt có khơng NT1.2 Cụt đi, Xh hậu mơn, nắp mang Bt Nm, S, mềm nhũn S Nm Bt có khơng NT1.3 Xh vây nhẹ Bt Bt Bt Bt - NT2.2 NT2.3 Bt Tuột nhớt, bụng trướng, xh nắp mang Nm Bt Bt Bt có Xh thân,đầu, đi,tuột nhớt,nổi mủ vùng đầu,tuột nhớt,mang Nm có 56 có NT3.3 Xh miệng, tuột nhớt Bt Bt - - có khơng NT4.3 Xh tồn thân, cuống Nm S S Td có có NT1.1 NT1.2 NT1.3 Xh miệng, vây nhẹ Bt Bt Hơi S Nm, Sh Nm Hơi S - Td Td có khơng NT2.1 Xh vây, hậu mơn Nm Nm - Bt - NT2.2 Xh vây, hậu môn, đuôi, đường bên - - - - - NT2.3 Xh vây, hậu môn, đuôi, đường bên Nm, S S - Td có NT4.1 Xh vây, lở loét, - - - - Mềm nhũn, Sn Bt - Nm, S, đốm mủ Bt - - Td, Xh Bt - có có - Nm, Sh Nm, S - có khơng Mềm nhũn Sn Nm, đốm trắng - Bt Xh, Td, túi mật sưng to có có NT4.2 NT5.3 NT1.1 NT1.1 Xh tồn thân, hậu môn lồi xuất huyết Bt - NT1.3 Xh vây ngực, đuôi 10 NT4.3 Xh gốc râu, tia vây,đuôi đường bên có có khơng Ghi chú: (Xh) xuất huyết, (Bt) bình thường, (Td) tích dịch, (Nm) nhạt màu, (S/Sn) sưng/sưng nặng, (-) không cấy/không quan sát 57