ẢNH HƯỞNG CỦA MANNAN OLIGOSACCHARIDE (MOS) TRONG CHẾ PHẨM ACTIGEN LÊN SỰ CẢI THIỆN HỆ MIỄN DỊCH KHÔNG ĐẶC HIỆU CỦA CÁ TRA (Pangasianodon hypophthalmus) Họ và tên sinh viên: NGÔ LÂM TRUNG NGUYÊN Ngành: NUÔI TRỒNG THỦY SẢN Chuyên ngành: NGƯ Y Niên khóa: 200

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP ẢNH HƯỞNG CỦA MANNAN OLIGOSACCHARIDE (MOS) TRONG CHẾ PHẨM ACTIGEN LÊN SỰ CẢI THIỆN HỆ MIỄN DỊCH KHÔNG ĐẶC HIỆU CỦA CÁ TRA (Pangasianodon hypophthalmus) Họ tên sinh viên: NGÔ LÂM TRUNG NGUYÊN Ngành: NUÔI TRỒNG THỦY SẢN Chuyên ngành: NGƯ Y Niên khóa: 2008 – 2012 Tháng 07/2012 Ảnh hưởng Mannan Oligosaccharide (MOS) chế phầm Actigen lên cải thiện hệ miễn dịch không đặc hiệu cá tra (Pangasianodon hypophthalmus) TRANG TỰA Tác giả NGÔ LÂM TRUNG NGUN Khóa luận đệ trình để đáp ứng yêu cầu cấp Kỹ sư Nuôi Trồng Thủy Sản chuyên ngành Ngư Y Giáo viên hướng dẫn: PGS - TS LÊ THANH HÙNG ThS HỒ THỊ TRƯỜNG THY Tháng 07 năm 2012 i LỜI CẢM TẠ Để hồn thành tốt khóa luận, tơi xin gởi lời cảm ơn chân thành đến: Ban giám hiệu trường Đại học Nông Lâm Tp.HCM, Ban chủ nhiệm khoa Thủy sản, tất quý thầy cô giáo tận tình dạy dỗ truyền đạt kiến thức cho tơi suốt khoảng thời gian học trường Đặc biệt, xin gởi lời cảm ơn sâu sắc đến thầy Lê Thanh Hùng, cô Hồ Thị Trường Thy, cô Truyện Nhã Định Huệ Võ Thị Thanh Bình tận tình giúp đỡ, hướng dẫn động viên tơi suốt trình thực đề tài Xin chân thành cảm ơn chị Đào Ngọc Thủy, anh Lê Hồng Ngọc, anh em trại cũ khoa thủy sản trường Đại học Nông Lâm Tp.HCM, tất bạn lớp DH08NY đồng hành giúp đỡ khoảng thời gian qua Và xin gởi lời tri ân chân thành đến ba mẹ, người nuôi nấng dạy dỗ tôi, tạo cho tơi sức mạnh để phấn đấu đường học tập, cảm ơn anh chị em tất bạn bè quanh cổ vũ, động viên lúc tơi phải gặp khó khăn Cuối cùng, chân thành cảm ơn công ty Alltech cung cấp chế phẩm MOS (Actigen) để tơi thực đề tài Do có hạn chế mặt thời gian mặt kiến thức nên khóa luận khơng thể tránh khỏi thiếu sót, khuyết điểm Rất mong nhận ý kiến đóng góp q thầy bạn để khóa luận hồn thiện Thành phớ Hờ Chí Minh, tháng 07 năm 2012 Ngô Lâm Trung Nguyên ii TÓM TẮT Đề tài nghiên cứu “Ảnh hưởng Mannan Oligosaccharide (MOS) chế phẩm Actigen lên cải thiện hệ miễn dịch không đặc hiệu cá tra (Pangasianodon hypophthalmus)” tiến hành Trại thực nghiệm Thủy Sản (trại cũ), phịng thí nghiệm Bệnh Học Thủy Sản, khoa Thủy Sản, trường Đại học Nơng Lâm Tp Hồ Chí Minh từ tháng 8/2011 đến tháng 3/2012 Thí nghiệm bố trí theo kiểu khối hồn tồn ngẫu nhiên Thí nghiệm tiến hành nhằm đánh giá ảnh hưởng Mannan Oligosaccharide (MOS) có chế phẩm Actigen lên cải thiện sức khỏe cá tra Thí nghiệm gồm nghiệm thức (NT ĐC, NT A1, NT A2, NT A3) với tỷ lệ bổ sung MOS (Actigen) vào thức ăn khác lần lược 0; 0,4; 0,8 1,2 g/kg thức ăn tiến hành cho cá tra ăn thời gian 10 tuần Sau đó, chúng tơi tiến hành thu mẫu máu cá tra để kiểm tra lượng bạch cầu lysozyme máu Tiếp theo cá cảm nhiễm với vi khuẩn Edwardsiella ictaluri Kết thu được: - Lượng bạch cầu máu cá tăng theo thứ tự NT ĐC, NT A1, NT A3, NT A2 Trong đó, khác biệt NT A2 NT A3 so với NT ĐC có ý nghĩa mặt thống kê khác biệt cách tương đối so với NT A1 Còn NT A2 NT A3 hồn tồn khơng có sai khác Bên cạnh NT A2 có tác dụng làm tăng số lượng bạch cầu rõ rệt NT A3 làm tăng số lượng bạch cầu cách đáng kể Kết luận: bổ sung MOS (Actigen) từ 0,8 g/kg thức ăn trở lên (đến 1,2 g/kg thức ăn) giúp làm tăng số lượng bạch cầu máu cá tra sai khác (tăng) có ý nghĩa mặt thống kê so với NT ĐC - Hoạt lực lysozyme huyết máu cá tăng theo thứ tự NT ĐC, NT A2, NT A1, NT A3 Trong đó, khác biệt NT A3 so với NT ĐC có ý nghĩa mặt thống kê Bên cạnh đó, NT A3 so với NT A2 NT A1 có sai khác cách tương đối mặt thống kê iii Kết luận: bổ sung MOS (Actigen) đến mức 1,2 g/kg thức ăn giúp làm tăng hoạt lực lysozyme máu cá tra sai khác (tăng) có ý nghĩa mặt thống kê so với NT ĐC - Cảm nhiễm với vi khuẩn E ictaluri: tỉ lệ cá sống nghiệm thức tăng dần theo thứ tự NT ĐC, NT A1, NT A2, NT A3 Trong đó, NT A3 có tỉ lệ sống cao Đồng thời khác biệt NT A3 so với NT ĐC, NT A1 có ý nghĩa khác biệt cách tương đối so với NT A2 mặt thống kê Kết luận: bổ sung MOS (Actigen) đến mức 1,2 g/kg thức ăn giúp làm tăng tỉ lệ sống cá tra gây cảm nhiễm với vi khuẩn E ictaluri nồng độ 1x106 CFU/mL sai khác (tăng) có ý nghĩa mặt thống kê so với NT ĐC Tóm lại, thí nghiệm cho thấy lượng MOS (Actigen) bổ sung mang lại hiệu tối ưu cá tra 1,2 g/kg thức ăn Ở mức này, sai khác số lượng bạch cầu máu cá, hoạt lực lysozyme huyết khả chống lại vi khuẩn Edwardsiella ictaluri gây cảm nhiễm 1x106 CFU/mL cá tra có ý nghĩa mặt thống kê so với NT ĐC (P < 0,05) iv MỤC LỤC Đề mục Trang TRANG TỰA i LỜI CẢM TẠ ii TÓM TẮT iii MỤC LỤC v DANH SÁCH CHỮ VIẾT TẮT viii DANH SÁCH CÁC BẢNG ix DANH SÁCH CÁC HÌNH x DANH SÁCH CÁC BIỂU ĐỒ xi Chương GIỚI THIỆU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục tiêu đề tài Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Đặc điểm sinh học cá tra 2.1.1 Phân loại 2.1.2 Phân bố 2.1.3 Đặc điểm hình thái 2.1.4 Điều kiện môi trường sống 2.1.4.1 Hàm lượng oxy hoà tan 2.1.4.2 pH 2.1.4.3 Nhiệt độ 2.1.4.4 Độ mặn 2.1.5 Đặc điểm dinh dưỡng 2.1.6 Đặc điểm sinh trưởng 2.1.7 Đặc điểm sinh sản 2.2 Sơ lược bệnh Gan thận mủ vi khuẩn Edwardsiella ictaluri gây cá tra 2.2.1 Lịch sử bệnh 2.2.2 Vi khuẩn Edwardsiella ictaluri 2.2.2.1 Phân loại v 2.2.2.2 Đặc điểm sinh lý, sinh hoá 2.2.2.3 Chuẩn đoán 2.2.2.3 Dịch tể bệnh 2.2.4 Dấu hiệu bệnh lý 10 2.2.4.1 Triệu chứng 10 2.2.4.2 Bệnh tích đại thể 10 2.2.4.3 Bệnh tích vi thể 10 2.2.5 Phòng bệnh 10 2.2.6 Trị bệnh 11 2.2.7 Một số đối tượng cảm nhiễm khác vi khuẩn Edwardsiella ictaluri 11 2.3 Prebiotic 11 2.3.1 Saccharomyces cerevisiae 12 2.3.2 Mannan oligosaccharide (MOS) 13 2.3.2.1 Giới thiệu MOS 13 2.3.2.2 Cấu trúc chế hoạt động MOS 14 2.3.2.3 Tác động MOS 15 2.3.3 Những nghiên cứu khảo nghiệm MOS động vật thuỷ sản 17 2.3.4 MOS chế phẩm Actigen 19 Chương VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 21 3.1 Thời gian địa điểm 21 3.2 Vật liệu 21 3.2.1 Vật liệu 21 3.2.2 Dụng cụ hoá chất 21 3.2.2.1 Thí nghiệm 1: Khảo sát ảnh hưởng MOS (Actigen) lên khả miễn dịch không đặc hiệu cá tra 21 3.2.2.2 Thí nghiệm 2: Khảo sát ảnh hưởng MOS (Actigen) lên khả đề kháng cá tra vi khuẩn Edwardsiella ictaluri 22 3.2.3 Nguồn nước 23 3.2.4 Thức ăn 23 3.3 Phương pháp nghiên cứu 23 vi 3.3.1 Thí nghiệm 1: Khảo sát ảnh hưởng MOS (Actigen) lên khả miễn dịch không đặc hiệu cá tra 23 3.3.1.1 Phương pháp bố trí thí nghiệm cho cá tra ăn thức ăn bổ sung MOS (Actigen) 23 3.3.1.2 Kiểm tra số lượng bạch cầu máu cá 24 3.3.1.3 Phân tích lysozyme 26 3.3.2 Thí nghiệm 2: Khảo sát ảnh hưởng MOS (Actigen) lên khả đề kháng cá tra vi khuẩn Edwardsiella ictaluri 27 3.3.2.1 Bố trí thí nghiệm 27 3.3.2.2 Phương pháp chuẩn bị huyền dịch vi khuẩn 27 3.3.2.3 Phương pháp gây bệnh thực nghiệm 28 3.3.2.4 Phương pháp theo dõi thí nghiệm 30 3.3.2.5 Xét nghiệm kiểm tra vi khuẩn gây bệnh 31 3.3.3 Phương pháp xử lý số liệu 31 Chương KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 32 4.1 Các yếu tố chất lượng nước thời gian tiến hành thí nghiệm 32 4.1.1 Các yếu tố môi trường nước trình thí nghiệm (10 tuần) cho cá ăn thức ăn có chứa MOS (Actigen) 32 4.1.2 Các yếu tố mơi trường nước q trình gây cảm nhiễm cá với vi khuẩn E ictaluri 32 4.2 Ảnh hưởng MOS (Actigen) lên khả miễn dịch không đặc hiệu cá tra sau 10 tuần nuôi thí nghiệm sử dụng thức ăn bổ sung MOS (Actigen) 33 4.2.1 Số lượng bạch cầu máu cá 33 4.2.2 Hoạt lực lysozyme huyết máu cá 34 4.3 Ảnh hư ởng MOS (Actigen) lên khả đề kháng cá tra vi khuẩn Edwardsiella ictaluri 36 Chương KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 40 5.1 Kết luận 40 5.2 Đề nghị 40 TÀI LIỆU THAM KHẢO 41 PHỤ LỤC 47 vii DANH SÁCH CHỮ VIẾT TẮT µm: micrometer ADG: Average Daily Gain BHIA: Brain Heart Infusion Agar BHIB: Brain Heart Infusion Broth BKC: Benzalkonium Chloride CFU: Colony Forming Unit cm: centimeter ctv: cộng tác viên DO: Dissolved Oxygen EDTA: Ethylen Diamin Tetra Acetat ELISA: Enzyme-Linked Immunosorbent Assay ESC: Enteric Septicemia of Catfish g: gram IDS 14 GNR: Indentification System with 14 biochemical reationsfor Indentification of non fastidious Gram Negative Rods kg: kilogram mg: milligram mL: milliliter mm: millimeter NA: Nutrient Agar NH3: Ammonia NT: nghiệm thức o C: degree Celsius OD: Optical Density PCR: Polymerase Chain Reaction pH: Potential of hydrogen TN: thí nghiệm TSA: Tryptic Soy Agar viii DANH SÁCH CÁC BẢNG Bảng Nội dung Trang Bảng 2.1: Các đặc điểm sinh hóa E.ictaluri (Bùi Quang Tề, 2006) Bảng 2.2: Khả kết dính mầm bệnh MOS 16 Bảng 4.1: Biên độ dao động yếu tố môi trường thời gian 10 tuần cho cá thí nghiệm ăn thức ăn có bổ sung MOS (Actigen) 32 Bảng 4.2: Số lượng bạch cầu đếm mẫu máu cá tra thí nghiệm 33 Bảng 4.3: Hoạt lực lysozyme huyết cá thí nghiệm 35 Bảng 4.4: Tỷ lệ sống cá tra sau 14 ngày gây cảm nhiễm vi khuẩn E ictaluri 38 ix 13/12/2011 14/12/2011 15/12/2011 16/12/2011 17/12/2011 18/12/2011 19/12/2011 20/12/2011 2,00 3,50 29,00 30,00 6,50 7,00 2,00 3,00 29,00 30,00 6,50 7,00 0.008 2,00 5,00 29,00 30,00 6,50 7,00 0.008 2,00 4,50 29,00 30,00 6,50 7,00 0.007 2,00 4,00 29,00 30,50 6,50 7,00 0.008 2,50 2,50 29,00 30,00 6,50 7,00 2,50 4,50 29,00 30,50 6,50 7,00 2,50 3,50 29,00 30,00 6,50 7,00 2,00 3,00 29,00 30,00 6,50 7,00 2,00 3,00 29,00 30,00 6,50 7,00 2,00 5,00 29,00 30,00 6,50 7,00 2,00 4,50 29,00 30,00 6,50 7,00 2,00 4,00 29,00 30,50 6,50 7,00 2,00 2,00 29,00 30,00 6,50 7,00 0.006 1,50 2,50 29,00 30,00 6,00 6,50 0.008 3,00 3,00 29,00 30,00 6,50 7,00 0.009 1,50 2,00 29,00 30,00 6,00 7,00 0.01 1,50 3,00 28,50 29,50 6,50 7,00 1,50 4,00 29,00 30,00 6,00 6,50 3,50 4,00 29,00 30,00 6,00 6,50 1,50 2,50 29,00 30,00 6,50 7,00 1,50 3,50 29,00 30,00 6,50 7,00 1,00 3,50 29,50 31,00 6,50 7,00 3,00 4,00 29,00 30,00 6,50 7,00 1,50 2,00 29,00 30,00 6,50 7,00 2,00 2,50 29,00 30,00 6,50 7,00 1,50 3,00 29,00 30,00 6,50 7,00 3,00 4,50 28,50 30,00 6,00 6,50 1,50 2,00 29,00 30,00 6,50 7,00 2,00 3,50 29,00 29,00 6,50 7,00 49 0.006 21/12/2011 22/12/2011 23/12/2011 24/12/2011 25/12/2011 26/12/2011 27/12/2011 2,00 4,00 29,00 29,00 6,50 7,00 0.009 2,00 4,50 29,00 29,00 6,00 6,50 0.01 1,00 2,00 29,00 29,00 6,50 7,00 0.008 1,50 2,00 29,00 31,00 6,50 7,00 0,50 2,00 29,00 31,00 6,50 7,00 1,50 2,50 28,50 31,00 6,00 6,50 0,50 2,00 29,50 31,00 6,00 6,50 2,00 2,50 29,00 31,00 6,50 7,00 1,50 3,00 29,00 31,00 6,00 6,50 3,00 4,50 28,50 31,00 6,00 6,50 1,50 2,00 29,00 31,00 6,50 7,00 2,00 2,50 30,50 32,00 6,00 6,50 0.005 1,50 2,50 30,00 31,00 6,00 6,50 0.006 2,50 3,50 29,00 30,00 6,00 6,50 0.004 0,50 2,00 31,00 32,00 6,50 7,00 0.006 1,00 3,00 31,00 31,50 6,50 7,00 0,50 3,00 31,00 31,50 6,50 7,00 1,00 3,50 30,00 31,00 6,00 7,00 1,50 1,50 31,00 32,00 7,00 7,50 0,50 3,00 29,50 30,00 6,50 7,00 0,50 2,50 29,50 31,00 6,50 7,00 1,50 3,50 29,00 29,50 6,00 6,50 1,00 2,00 29,50 30,00 6.50 7,00 1,00 2,50 30,00 31,00 7,00 7,50 1,00 2,50 30,00 31,00 7,00 7,00 1,00 2,50 29,00 30,00 6,50 7,00 1,00 2,50 30,00 30,00 7,00 7,50 0,50 2,50 30,00 31,00 7,00 7,00 0.006 0,50 2,50 30,00 31,00 6,50 7,00 0.006 0,50 3,00 29,00 30,00 6,50 7,00 0.007 50 28/12/2011 29/12/2011 30/12/2011 31/12/2011 02/01/2012 03/01/2012 04/01/2012 05/01/2012 0,50 2,50 30,00 31,00 6,50 7,00 1,50 2,50 29,00 29,50 7,00 7,00 1,50 2,00 29,50 30,00 6,50 7,00 1,50 2,50 29,00 29,00 6,50 7,00 1,50 2,00 29,50 30,00 6,50 7,00 1,50 3,00 29,50 30,00 6,50 7,00 1,50 2,50 29,50 30,00 6,00 6,50 1,50 2,50 29,00 29,50 6,00 7,00 1,50 2,50 30,00 30,50 6,50 7,00 2,50 3,50 30,00 31,00 6,50 7,00 0.004 1,00 3,00 30,00 31,00 6,00 6,50 0.004 1,50 3,00 29,00 30,00 6,00 6,50 0.005 2,50 3,50 30,00 31,00 6,50 7,00 0.007 1,50 2,50 30,00 30,00 6,50 7,00 1,00 2,00 30,00 30,50 6,00 6,50 1,00 2,50 29,00 30,00 6,50 7,00 1,50 2,50 30,00 30,00 6,50 7,00 0,50 2,00 28,50 29,00 6,50 6,50 1,50 2,00 28,00 29,00 6,50 7,00 0,50 1,50 28,00 29,00 6,00 6,50 0,50 1,50 29,00 29,00 6,50 7,00 0,50 2,50 29,00 30,00 6,50 7,00 0.005 0,50 1,50 29,00 30,00 6,50 7,00 0.004 0,50 3,00 29,00 29,00 6,50 7,00 0.004 0,50 1,50 29,00 30,00 6,50 7,00 0.008 1,50 2,50 29,00 29,50 6,50 7,00 1,00 1,50 29,00 30,00 6,50 7,00 1,00 2,00 28,50 29,00 6,50 7,00 1,50 2,00 29,00 30,00 6,50 7,00 1,00 2,50 29,00 30,00 6,50 6,50 51 0.007 06/01/2012 07/01/2012 08/01/2012 09/01/2012 10/01/2012 11/01/2012 12/01/2012 1,00 2,50 29,00 30,00 6,50 7,00 1,00 2,50 29,00 30,00 6,00 6,50 1,00 2,00 30,00 30,50 6,50 7,00 1,00 2,50 30,00 31,00 6,50 7,00 1,00 1,50 30,00 30,50 6,50 6,50 0.006 1,50 3,50 29,00 30,50 6,00 6,00 0.006 2,50 3,00 30,00 31,00 6,50 7,00 0.004 1,50 2,50 30,00 31,00 6,50 7,00 0.005 2,00 3,00 30,00 31,00 6,50 7,00 1,50 2,50 30,00 30,00 6,50 7,00 1,00 2,50 30,00 31,00 6,50 7,00 1,50 2,00 30,00 30,00 6,50 7,00 1,00 2,00 30,00 30,00 6,50 7,00 1,00 2,00 29,00 29,50 6,50 7,00 1,00 2,00 30,50 31,00 6,50 7,00 1,00 2,00 29,00 30,00 6,50 7,00 1,00 2,00 29,00 30,00 6,50 6,50 1,00 2,00 28,00 29,00 6,50 7,00 1,00 2,00 30,00 30,00 6,50 6,50 1,50 2,50 29,00 29,00 6,50 7,00 0.004 1,00 2,00 29,00 29,00 6,50 7,00 0.005 1,50 2,50 28,00 28,50 6,50 7,00 0.009 1,50 2,50 29,00 29,00 6,50 7,00 0.01 1,00 3,00 29,00 30,00 6,50 7,00 1,00 2,50 29,00 30,00 6,50 7,00 1,00 2,50 29,00 30,00 6,50 7,00 1,00 2,00 29,00 30,00 6,50 7,00 1,50 1,50 28,00 29,00 6,50 6,50 1,00 1,50 27,50 29,00 6,00 6,50 1,00 1,50 27,00 29,00 6,00 6,50 52 13/01/2012 14/01/2012 15/01/2012 16/01/2012 17/01/2012 18/01/2012 19/01/2012 20/01/2012 1,00 2,00 28,00 28,00 6,00 6,50 1,50 3,50 29,00 29,50 7,00 7,00 0.009 1,00 3,00 29,00 29,50 6,50 6,50 0.009 1,00 2,50 28,50 29,00 6,50 6,50 0.005 1,00 2,50 29,00 29,50 6,50 6,50 0.012 1,00 3,50 29,50 30,50 6,50 7,00 0,50 3,00 29,00 30,50 6,50 7,00 0,50 2,50 28,00 29,50 6,50 7,00 0,50 3,00 29,50 30,50 6,00 6,50 1,00 3,50 30,00 30,50 7,00 7,50 0,50 3,00 30,00 30,50 6,50 7,00 1,00 2,50 29,00 30,00 6,50 7,00 1,00 2,00 30,50 30,50 6,00 6,50 1,00 4,50 30,00 31,00 7,00 7,00 0,50 4,00 30,00 31,00 6,50 7,00 0,50 3,50 29,00 30,00 6,50 7,00 0,50 4,00 30,50 31,00 7,00 7,50 1,00 2,00 30,00 30,00 7,00 7,00 0.017 1,00 2,00 30,00 30,00 6,50 7,00 0.018 1,00 2,50 29,00 30,00 7,00 7,00 0.023 1,00 2,00 30,50 30,00 7,00 7,00 0.015 1,00 2,00 30,00 30,50 7,00 7,00 1,00 2,00 30,00 30,50 6,00 7,00 1,00 2,00 29,50 30,00 6,00 7,00 1,00 3,00 30,50 31,00 7,00 7,00 1,50 3,00 30,00 31,00 7,00 7,00 1,00 2,00 30,00 30,50 6,00 6,50 1,00 2,50 29,00 30,00 6,50 7,00 1,50 2,50 30,50 31,00 6,50 6,50 1,00 3,00 30,00 30,50 6,50 7,00 53 0.009 21/01/2012 22/01/2012 23/01/2012 24/01/2012 25/01/2012 26/01/2012 27/01/2012 1,50 2,50 30,00 30,00 6,00 7,00 0.01 1,00 2,50 29,00 30,00 6,50 7,00 0.011 1,00 3,00 30,00 31,00 6,50 7,00 0.009 1,50 2,50 30,00 30,50 6,00 6,50 2,00 3,00 30,00 30,50 6,00 6,50 1,00 2,00 29,50 30,00 6,00 7,00 1,50 2.50 30,50 31,00 6,00 6,50 1,50 2,50 29,00 30,00 6,50 7,00 1,50 3,00 29,00 31,00 6,50 7,00 1,00 2,50 29,00 30,00 6,50 7,00 1,50 2,50 29,50 31,00 6,50 7,00 1,50 3,00 30,00 30,50 6.5 7,00 2,00 3,00 30,00 30,50 6,00 6,50 2,00 3,50 29,00 30,00 6,00 7,00 1,50 3,00 30,50 31,00 6,50 7,00 1,50 3,50 30,00 30,50 6,50 7,00 0.006 1,50 3,50 30,00 30,50 6,50 7,00 0.013 1,50 3,00 29,00 30,00 6,50 7,00 0.008 1,50 4,00 30,00 31,00 6,50 7,00 0.009 1,50 4,00 30,00 30,50 6,50 7,00 1,00 4,50 30,00 30,50 6,00 6,50 1,00 4,00 29,00 30,00 6,50 7,00 1,50 4,00 30,00 30,50 6,50 7,00 1,50 3,50 30,00 30,50 6,50 7,00 1,50 3,00 30,00 30,50 6,50 7,00 1,50 3,00 29,00 30,00 6,50 7,00 1,50 3,00 30,00 30,50 6,50 7,00 1,50 2,00 28,50 30,00 6,50 7,00 0.026 1,00 2,00 29,00 30,00 6,50 7,00 0.014 2,00 2,50 29,00 30,00 6,00 6,50 0.011 54 28/01/2012 10 29/01/2012 30/01/2012 31/01/2012 01/02/2012 02/02/2012 03/02/2012 04/02/2012 1,50 2,50 29,00 30,50 7,00 7,00 1,50 4,00 30,00 30,50 6,50 7,00 1,00 4,50 30,00 30,50 6,00 6,50 1,00 4,00 29,00 30,00 6,50 7,00 1,50 4,00 30,00 30,50 6,50 7,00 1,50 2,50 29,00 30,00 6,50 7,00 1,50 3,00 29,00 31,00 6,50 7,00 1,00 2,50 29,00 30,00 6,50 7,00 1,50 2,50 29,50 31,00 6,50 7,00 1,50 3,00 30,00 30,50 6,50 7,00 2,00 3,00 30,00 30,50 6,00 6,50 2,00 3,50 29,00 30,00 6,00 7,00 1,50 3,00 30,50 31,00 6,50 7,00 1,50 3,50 30,00 30,50 6,50 7,00 0.01 1,50 3,50 30,00 30,50 6,50 7,00 0.01 1,50 3,00 29,00 30,00 6,50 7,00 0.01 1,50 4,00 30,00 31,00 6,50 7,00 0.013 1,00 3,00 30,00 30,50 6,50 7,00 1,50 2,50 30,00 30,00 6,00 7,00 1,00 2,50 29,00 30,00 6,50 7,00 1,00 3,00 30,00 31,00 6,50 7,00 1,50 2,50 30,00 30,50 6,00 6,50 2,00 3,00 30,00 30,50 6,00 6,50 1,00 2,00 29,50 30,00 6,00 7,00 1,50 2,50 30,50 31,00 6,00 6,50 1,50 2,50 29,00 30,00 6,50 7,00 0.014 1,50 3,00 29,00 31,00 6,50 7,00 0.008 1,00 2,50 29,00 30,00 6,50 7,00 0.011 1,50 2,50 29,50 31,00 6,50 7,00 0.009 1,50 3,00 30,00 30,50 6,50 7,00 55 0.012 05/02/2012 06/02/2012 07/02/2012 2,00 3,00 30,00 30,50 6,00 6,50 2,00 3,50 29,00 30,00 6,00 7,00 1,50 3,00 30,50 31,00 6,50 7,00 1,50 3,00 30,00 31,00 7,00 7,00 1,00 2,00 30,00 30,50 6,00 6,50 1,00 2,50 29,00 30,00 6,50 7,00 1,50 2,50 30,50 31,00 6,50 6,50 1,00 3,00 30,00 30,50 6,50 7,00 1,50 2,50 30,00 30,00 6,00 7,00 1,00 2,50 29,00 30,00 6.50 7,00 1,00 3,00 30,00 31,00 6,50 7,00 1,50 2,50 30,00 30,50 6,00 6,50 0.009 2,00 3,00 30,00 30,50 6,00 6,50 0.01 1,00 2,00 29,50 30,00 6,00 7,00 0.01 1,50 2,50 30,50 31,00 6,00 6,50 0.01 56 PHỤ LỤC 2: Bảng kết đếm bạch cầu Nghiệm thức SL Bạch cầu (TB/mm3) ĐC1 91890 A1.1 90090 A2.1 121600 A3.1 123200 ĐC2 63790 A1.2 90940 A2.2 99610 A3.2 91460 ĐC3 63670 A1.3 70680 A2.3 75140 A3.3 81860 ĐC4 98370 A1.4 87840 A2.4 108500 A3.4 100010 57 PHỤ LỤC 3: Kết đo giảm mật độ quang phân tích Lysozyme NT Sau phút Sau phút Sự giảm mật độ quang Hoạt lực Lysozyme ĐC1 0,572 0,526 0,046 115,000 A1.1 0,656 0,603 0,053 132,500 A2.1 0,615 0,559 0,056 140,000 A3.1 0,651 0,591 0,060 150,000 ĐC2 0,647 0,601 0,046 115,000 A1.2 0,623 0,542 0,081 202,500 A2.2 0,662 0,606 0,056 140,000 A3.2 0,698 0,629 0,069 172,500 ĐC3 0,700 0,652 0,048 120,000 A1.3 0,672 0,617 0,055 137,500 A2.3 0,700 0,652 0,048 120,000 A3.3 0,677 0,616 0,061 152,500 ĐC4 0,704 0,654 0,050 125,000 A1.4 0,698 0,639 0,059 147,500 A2.4 0,688 0,640 0,048 120,000 A3.4 0,704 0,631 0,073 182,500 58 PHỤ LỤC 4: Kết theo dõi số cá chết tích lũy sau gây cảm nhiễm với Edwardsiella ictaluri Lượng Ngày thí nghiệm 10 11 12 13 14 lũy (con) NT ĐC1 chết tích 1 20 10 1 20 1 ĐC4 10 1 24 A1.1 2 19 A1.2 A1.3 A1.4 2 3 1 1 A2.4 2 1 18 A3.1 2 19 1 2 ĐC2 ĐC3 A2.1 1 A2.2 A2.3 A3.2 A3.3 A3.4 1 5 59 19 20 19 23 19 18 19 16 19 15 PHỤ LỤC 5: Tỉ lệ cá sống q trình thí nghiệm (%) Ngày TN 10 11 12 13 14 ĐC 100 100 100 98 88 65 35 27 22 20 17 17 17 17 A1 100 100 100 100 92 79 56 35 27 22 20 19 19 19 A2 100 100 100 98 90 75 53 41 34 30 27 26 26 26 A3 100 100 100 99 96 85 59 46 39 33 31 31 31 31 60 PHỤ LỤC 6: Kết xử lý thống kê phần mềm SAS V.8 Bạch cầu Dependent Variable: bachcau Sum of Source DF Squares Mean Square F Value Pr > F Model 1366.202169 455.400723 Error 12 3369.553625 280.796135 Corrected Total 15 4735.755794 1.62 R-Square Coeff Var Root MSE bachcau Mean 0.288487 18.38080 16.75697 Source DF Anova SS 1366.202169 treatment 91.16563 Mean Square F Value Pr > F 455.400723 1.62 The ANOVA Procedure Duncan's Multiple Range Test for bachcau Alpha 0.05 Error Degrees of Freedom 12 Error Mean Square 280.7961 Number of Means Critical Range 0.2363 25.82 27.02 27.75 Means with the same letter are not significantly different Duncan Grouping Mean N treatment A 101.21 A2 A 99.13 A3 B A 84.89 A1 B 79.43 ĐC 61 0.2363 PHỤ LỤC 7: Kết xử lý thống kê phần mềm SAS V.8 Lysozyme Dependent Variable: Lysozyme Sum of Source DF Squares Mean Square Model 5416.796875 1805.598958 Error 12 4335.937500 361.328125 Corrected Total 15 9752.734375 F Value Pr > F 5.00 R-Square Coeff Var Root MSE Lysozyme Mean 0.555413 13.38342 19.00863 Source DF Anova SS 5416.796875 treatment 142.0313 Mean Square F Value Pr > F 1805.598958 5.00 The ANOVA Procedure Duncan's Multiple Range Test for Lysozyme Alpha 0.05 Error Degrees of Freedom 12 Error Mean Square 361.3281 Number of Means Critical Range 29.29 30.65 31.48 Means with the same letter are not significantly different Duncan Grouping Mean N treatment A 164.38 A3 B A 155.00 A1 B A 130.00 A2 B 118.75 ĐC 62 0.0178 0.0178 PHỤ LỤC 8: Kết xử lý thống kê phần mềm SAS V.8 Số liệu cảm nhiễm gây bệnh Dependent Variable: camnhiem Sum of Source DF Squares Mean Square F Value Pr > F Model 499.000000 166.333333 Error 12 628.000000 52.333333 Corrected Total 15 1127.000000 3.18 R-Square Coeff Var Root MSE camnhiem Mean 0.442768 31.11474 7.234178 Source DF Anova SS 499.0000000 treatment 23.25000 Mean Square F Value Pr > F 166.3333333 3.18 The ANOVA Procedure Duncan's Multiple Range Test for camnhiem Alpha 0.05 Error Degrees of Freedom 12 Error Mean Square 52.33333 Number of Means Critical Range 11.15 11.67 11.98 Means with the same letter are not significantly different Duncan Grouping Mean N treatment A 31.000 A3 B A 26.000 A2 B 19.000 A1 B 17.000 ĐC 63 0.0633 0.0633 ... năm 2012 Ngô Lâm Trung Nguyên ii TÓM TẮT Đề tài nghiên cứu ? ?Ảnh hưởng Mannan Oligosaccharide (MOS) chế phẩm Actigen lên cải thiện hệ miễn dịch không đặc hiệu cá tra (Pangasianodon hypophthalmus)? ??.. .Ảnh hưởng Mannan Oligosaccharide (MOS) chế phầm Actigen lên cải thiện hệ miễn dịch không đặc hiệu cá tra (Pangasianodon hypophthalmus) TRANG TỰA Tác giả NGÔ LÂM TRUNG NGUN Khóa... (Actigen) cá tra Trước y? ?u cầu đặt tăng cường sức đề kháng cải thiện tỷ lệ sống để nâng cao hiệu kinh tế cá tra, đề tài ? ?Ảnh hưởng Mannan Oligosaccharide (MOS) chế phẩm Actigen lên cải thiện hệ