Nghiên cứu tách chiết tinh dầu từ lá Quất (Đồ án tốt nghiệp)

Nghiên cứu tách chiết tinh dầu từ lá Quất (Đồ án tốt nghiệp)Nghiên cứu tách chiết tinh dầu từ lá Quất (Đồ án tốt nghiệp)Nghiên cứu tách chiết tinh dầu từ lá Quất (Đồ án tốt nghiệp)Nghiên cứu tách chiết tinh dầu từ lá Quất (Đồ án tốt nghiệp)Nghiên cứu tách chiết tinh dầu từ lá Quất (Đồ án tốt nghiệp)Nghiên cứu tách chiết tinh dầu từ lá Quất (Đồ án tốt nghiệp)Nghiên cứu tách chiết tinh dầu từ lá Quất (Đồ án tốt nghiệp)Nghiên cứu tách chiết tinh dầu từ lá Quất (Đồ án tốt nghiệp)Nghiên cứu tách chiết tinh dầu từ lá Quất (Đồ án tốt nghiệp)Nghiên cứu tách chiết tinh dầu từ lá Quất (Đồ án tốt nghiệp)Nghiên cứu tách chiết tinh dầu từ lá Quất (Đồ án tốt nghiệp)Nghiên cứu tách chiết tinh dầu từ lá Quất (Đồ án tốt nghiệp)Nghiên cứu tách chiết tinh dầu từ lá Quất (Đồ án tốt nghiệp)

L I C - i

DANG M C CÁC CH VI T T T - ii

DANH M C B NG - ii

DANH M C HÌNH TH - iii

L I M U -1

T NG QUAN -2

1.1 Gi i thi u chung v cây Qu t - 2

1.1.1 Ngu n g c và phân b - 2

1.1.2 Các vùng Vi t Nam tr ng nhi u Qu t - 2

m th c v t - 2

1.1.4 Công d ng c a cây Qu t - 3

1.2 T ng quan v tinh d u - 4

1.2.1 Khái ni m v tinh d u - 4

1.2.2 Phân lo i các thành ph n có trong tinh d u - 4

1.2.3 Tính ch t v t lý và hóa h c chung c a tinh d u - 7

1.2.4 Vai trò c a tinh d i s ng th c v t - 7

1.2.5 Sinh t ng h p tinh d th c v t -10

1.2.6 ng d ng c a tinh d u -13

n xu t tinh d u -13

t lôi cu c -14

-17

t -17

p -18

1.3.2.3 Ph -18

-19

1.5.1 Tình hình nghiên c u trên th gi i -20

1.5.2 Tình hình nghiên c c -21

U - 22

ng nghiên c u -22

2.1.1 Nguyên li u chính -22

2.1.2 D ng c - thi t b - hóa ch t -22

u -23

2.2.1 Chu n b nguyên li u -23

t -23

2.2.3 D ki n quy trình tách chi t tinh d u t lá Qu t -24

2.2.4 B trí thí nghi m -26

2.2.4.1 Thí nghi ng NaCl b c ngâm, chi t -26

2.2.4.2 Thí nghi nh t l c/nguyên li u -27

2.2.4.3 Thí nghi nh th i gian ngâm mu i -28

2.2.4.4 Thí nghi nh th t -30

ng m trong nguyên li u Qu t -31

nh các ch s hóa-lý và nh danh các c u t thành ph n c a tinh d u -31

nh t l kh ng tinh d u -32

lý s li u -32

K T QU NGHIÊN C U VÀ TH O LU N - 33

3.1 K t qu nh ng c ngâm, chi t -33

3.2 K t qu nh t l c/nguyên li u (v/w) thích h p -34

3.3 K t qu nh th c thích h p -36

3.4 K t qu nh th t thích h p -37

3.7 K t qu nh t l kh ng tinh d u -41

3.8 K t qu t c nh các ch s lý- hóa c a s n ph m -41

3.8.1 Mô t tính ch t c m quan s n ph m -41

3.8.2 K t qu nh các ch s hóa- lý c a s n ph m -42

3.9 K t qu nh thành ph n hóa h c c a tinh d u -43

3.10 giá thành s n ph m trong phòng thí nghi m -46

K T LU N VÀ KI N NGH - 47

1 K t lu n -47

2 Ki n ngh -47

TÀI LI U THAM KH O - 48

ng d n và t o m u ki n thu n l i nh t cho em trong su t quá trình th c hi n

Trung tâm Phân tích thí nghi m th c hành, ng s 2 Nguy , Q.1, TP H Chí Minh.

nhi u ý ki n quý báu, giúp em hoàn thi n t t tài t t nghi p này.

Nha Trang, ngày 20 tháng 6

Sinh viên th c hi n

PHAN ANH QU C

L I M U

Tinh d u thiên nhiên hi n nay là m t s n ph m khá thông d ng trên th ng

c ng d i ph bi n trong nhi u l c ph c

ph m, y h c, m ph m và m t s l c khác…

Hi n nay, có nhi chi t rút tinh d u t th c v

t lôi cu n, d th c hi n và cho hi u xu t thu

h i tinh d i cao Tinh d c s d ng ph bi

d ch u, có tác d ng tr c m, gi m stress và thanh nhi t…Qu t thu c h Citrus

ông trình nào c nghiên c u sâu v ng th i t n d ng ngu n nguyên

li u r ti s n xu t tinh d u có giá tr kinh t cao c s ng ý c a Khoa Công Ngh Th c Ph i s ng d n c a TS V ã nghiên c u và th c

hi tài:“Nghiên c u tách chi t tinh d u t lá Qu t”.

M u c tài là xây d ng quy trình công ngh thích h p cho

vi c chi t xu t tinh d u t lá Qu t b t lôi cu c

Do ki n th c và kinh nghi m nghiên c u còn h n ch c

u ki n th c nghi m, ngu n kinh phí eo h p nên m ã r t c g tài này không tránh kh i nh ng thi u sót R c s ch b o c a quý th y cô c ng

12Sinh viên th c hi n

PHAN ANH QU C

T NG QUAN

1.1 Gi i thi u chung v cây Qu t [19]

Qu Mi à t , danh pháp hai ph : Citrus japonica

- Các t nh mi n Nam Trung B : Bình nh, Khánh Hòa, Phú Yên…

- Các t nh Tây Nam B : TP.H Chí Minh, Long An, Ti n Giang…

1.1.3 m th c v t [18]

- Cây g nh , phân cành nhi u,có th t o dáng d dàng

- ình tròn hay ovan, nh n bóng, hình nêm g c, có thu h p hay lõm

nh nguyên

- Thân hình tròn, th ng không có gai, hoa m c chùm, màu tr ng,

nh hoa nhi u dính nhau g c và ng nh hoa

- Qu hình c u hay hình tr ng, có th lõm Qu có màu xanh khi còn non và màu vàng sáng khi chín Qu có 3-7 múi có 2-3 h t, h

- R c c n c gieo t h t; r chùm n c chi t hay giâm R qu t

1.1.4 Công d ng c a cây Qu t [17]

Qu t là cây c p, tán lá xanh th m, qu màu vàng da cam sáng r c,

c nhi ng trong ngày T t

Không nh ng v t xong các b ph n c a cây Qu t còn có tác

- Hoa Qu t: Có tính ôn, v cay, ng ng, có tác d t

- Trái Qu t: t có v chua ng t tính m vào hai kinh t và v

có tác d ng xúc ti n ch ng y t c, dùng ch a các ch ng ho do

ng v y t dày, b ng n i hòn c c, nôn m a,

n sau khi sinh b ng, gi c, gi u…

- H t Qu t: Có v chua cay tính bình, dung ch a các b nh v m t, viêm h ng,

tiêu h ch…

- Lá Qu t: Có v ng tính l nh, vào các kinh, can t và ph có tác d u

- R Qu t: Có v chua cay tính m có tác d ng ch dày nôn ra th

n c ngh n, m n nh t…

1.2 T ng quan v tinh d u [2 ,5, 8, 14, 15]

1.2.1 Khái ni m v tinh d u

Tinh d u là nh ng ch t mùi có trong m t s b ph n c a cây c( t, r , c , v cây, hoa, lá, qu , d u, nh ng v t (túi tinh d u) Tinh

d u có trong các ngu n nguyên li u trên v i n r t khác nhau, có th i t

ph n tri n ph Kh ng phân t c a các h p ch t có trong tinh d u vào kho ng 300 amu Khác v i các lo i d (glycerid, acid béo), tinh d u

i d

thành ph n chính c a các lo i tinh d u là các h p ch t c

c u t o t isopren (C5H8) n i v i nhau theo quy t c “ u n i v ”

N u có nhi isopren thì c g i là sesquiterpenoid ( ng v i

isopren), diterpenoid ( ng v i isopren), triterpenoid ( ng v i

T l các thành ph n riêng l có th i r t l n tùy theo gi ng cây tr ng,

u ki n canh tác, mùa v và các b ph n khác nhau c a cây tuy nhiên s ng c a các thành ph i trong ph m vi loài

1.2.2.3 Phân lo i theo b n ch t hóa h c [14]

Có nhi u cách phân lo i tinh d u theo b n ch t hóa h

lo i

Các h p ch t trong tinh d c chia thành các nhóm:

- Monoterpen m ch h (ví d : myrcen, ocimen).

- Monoterpen m ch vòng (ví d : p-cymen, pinen, sabinen).

- Sesquiterpen m ch h (ví d : farnesen).

- Sesquiterpen m ch vòng (ví d : copaen, humulen).

- Sesquiterpen m ch vòng b oxy hóa on, spathulenol)

- Các h p ch (ví d : indol)

Hình 1.4 Công th c hóa h c c a m t s h p ch ng có trong tinh d u

1.2.3 Tính ch t v t lý và hóa h c chung c a tinh d u [5, 14]

V màu s c, tinh d ng không màu ho c có màu vàng nh t M t s ít tinh

d u có màu (ví d : tinh d u ng i c u có u qu có màu nâu s m) là

do s có m t c a các h p ch c lôi kéo theo tinh d u trong quá trình chi t

xu t (ví d : màu xanh do có chlorophyll, màu vàng do có carotenoid,…) Còn mùi và

v c a tinh d u ch y u gây ra do các c u t b oxy hóa

1.2.3.2 Tính ch t hóa h c

Các thành ph n trong tinh d u là các h p ch t terpenoid (t c các hydrocarbon không no) nên chúng d b th y phân (nh t là nhi cao) và b phân h y b i ánh sáng thành các h p ch t khác Vì v ng b o qu n tinh d u trong nh ng

l s m màu, có mi ng nh y nút k

1.2.4 Vai trò c a tinh d i s ng th c v t [16]

V v vai trò c a tinh d i s ng c ã c p t i trong

r t nhi u công trình nghiên c u Theo quan ni c trình bày trong các công trình khác nhau, vai trò c a tinh d c quy t trong các n :

Theo Ph X Tanaxienco, 1985:

- B o v cây kh ng c a sâu b nh

- Che ph các v cây g

- n các b nh do n m

u qu c a các ph n ng enzym

Theo Charabot cho r ng tinh d ò nh t d tr trong cây, nó

có kh n chuy n các ph n khác nhau c a cây, t c s

Theo Coxtrisep X P (1937) cho r ng tinh d u có th c x p vào 2 nhóm ch

- Nhóm các tinh d u có ch c cây s d ng trong quá trình sinh ng

- Nhóm các tinh d u không có ch c cây s d ng,

n ch là các ch t ti t c c tích l ch a tinh

d u

m này, các thành ph n c a tinh d c tích ltuy n ti t không có vai trò sinh lý trong ho ng s ng c a cây Trong khi

ng, tinh d u th c v t chính là s n ph m c a quá trình t ng h p và

hóa tinh d s ng, Mutxtiatse (198 ã ch ng minh r ng, các thành ph n tinh d c tích l n ti t không ph i là các ch t ti t c nh mà còn tham

gia tích c c vào quá trình trao i ch t c a cây; do v y thành ph n hóa h c c a tinh

ho t tính sinh h c Trong thành ph n c a tinh d u, có th g p hàng lo t các ch t kh i nguyên nói trên: các acid h ng g p g m: acid acetic, acid valerianic, acid

ng v i chúng; ngoài ra còn th ng g p các

là nh ng h p ch t liên quan t i nhi u ki u c u trúc hóa h c khác nhau và tham gia vào các h th ng hóa khác nhau Trong thành ph n tinh d u còn th ng th y các h p

Hi n nay, các b ng ch y u t p trung vào s tham gia c a các thành ph n tinh d u trong quá trình trao i ch t, có ngh à tinh d u tham gia vào các quá trình sinh lý hóa bên trong t bào Và nhi u k t qu nghiên c u g ã ch ng minh r ng, m t s d ng terpenoid c a tinh d

ng có m t trong h u h s ng t t c các m ti n hóa khác nhau, tcác vi sinh v t, các loài th c v t b c th p, th c v t b n c ng v t c

c hình thành t 2,3 ho c nhi u phân t isopren (C5H6) và isopren l i là m t trong nh ng h p ch t o thành các carotenoid, các steroid

và cao su Các k t qu nghiên c u ti ã xác nh n r ng, quá trình sinh t ng h p trong m th c v u b t ngu n t h p ch u là acid acetic qua các s n

phosphat B ng th c nghi ã ch c các chu i carbon trong các phân t geraniol, linalool, farnesol và nerolidol là nh ng s n ph m trung gian ch y u trong quá trình sinh t ng h p các terpenoid có ho t tính sinh h , hocmon steroid, acid m t, các vitamin D, vitamin K, vitamin E, các carotenoid, các

ch ng thu c nhóm giberilin…M t s h p ch ng g p trong thành ph n c a tinh d linalool, farnesol, nerolidol…luôn có m t trong h u h t các ho ng s ng c a cây

1.2.5 Sinh t ng h p tinh d th c v t [16]

Hi n t n t i hai gi thuy t v quá trình t ng h p và tích l u:

- M t s tác gi cho r ng tinh d c t ng h p các t bào không ph thu c

c u trúc ti t và chuy n d n vào tuy n ti m này, c u trúc ti c coi

m nh n vai trò tích l n ph c a gi thuy t trên ch y u d a trên các k t qu quan sát th y s có m t c a m t s gi t tinh d u và m t s men tham gia vào quá trình t ng h p tinh d u các t bào n m ngoài tuy n ti t Liên quan t i githuy t nói trên, nhi u nhà khoa h ã ch ng minh m i liên quan tr c ti p gi a tinh

d u v i các h p ch t h c v t: lignin, glucosid …

- Nh i các p n nghiên c u hi i, h u h t các tác

tích l m này, các t bào ti t (n m trong thành ph n c u trúc

ti t) làm nhi m v t ng h p tinh d u, và theo m c v n chuy n, t p trung c u trúc chuyên bi t g i là khoang ch a tinh d u B ng ch ng c a

gi thuy c các tác gi nêu ra b i s có m t t c các h men tham gia

t ng h p tinh d u trong các t bào c a c u trúc ti n nay h

nghiên c u nào nghi ng gi thuy t này, tuy nhiên không ít v liên quan còn ch

c sáng t c h t, khi th a nh n vai trò sinh h c c a tinh d u trong

i s ng th c v ng th i c a nh n có s v n chuy n tinh d u t trong c u trúc ti tham gia vào các quá trình chuy n hóa, v y t i sao không có s v n chuy c l i?.

làm sáng t s nh khu c a các ph n ng V d th a nh n là s t ng h p tinh d u

là m t quá trình bao g m hàng lo t các ph n ng hóa h c Tùy theo m ph c t p

c a c u trúc, m i h p ch t có th ph i tr i qua nhi u ph n ng hóa h c khác nhau

quan t có th bao g m m t h th m b o cho m t lo t ph n ng x y ra

- M t s tác gi khác l xu t gi thuy t “dây chuy n ph n ng” Theo quan

qua các ph n ng nhi khác nhau Gi thuy t này d a trên s có m t r t

h n ch các h men T nh ng s li u trên, các nhà nghiên

v thu h i và v n chuy n các h p ch t tinh d u t i khoang ch a

m a th c v n phát tri n khác nhau, các quá trình t ng h p và bi i c a tinh d u x u này gi i thích s

khác bi t v ng và thành ph n tinh d u t a cùng m t cây

ho c ng khác nhau trong quá trình phát sinh cá th

Quá trình t ng h p tinh d u khi n ch t ch b i h th ng gen, tuy nhiên ho t hóa các t h p gen l i có m i liên quan khá ch t ch v i u ki n ngo i

c nh Vì v y, quá trình t ng h p tinh d u trong cây là k t qu c a hi u ng “ki u gen –

ng” Nguyên li u cho quá trình sinh t ng h p tinh d u trong cây t ã

c th a nh n là các s n ph m c a quá trình quang h p và s t ng h p tinh d u c

ch x u ki c chi u sáng Song g i ta c ã ch ng

c r ng quá trình t ng h p tinh d u c x y ra c u ki n

ng h p này rõ ràng nguyên li u cho quá trình

t ng h p là các s n ph m trung gian c a quá trình hô h p

S t ng h p tinh d u trong cây là m t quá trình vô cùng ph c t à

v còn nhi u tranh cãi và c n ph i nghiên c u ti p t c trong th i gian t i

Hình 1.5 Hình nh s t p trung c a tinh d u trong lá

1.2.6 ng d ng c a tinh d u [5]

1.2.6.1 Trong công ngh th c ph m

Tinh d u gi vai trò quan tr ng trong công ngh s n xu t các lo i bánh k o,

th c u ng M c dù s d ng v ng vô cùng nh i nh ng d ng khác nhau, tinh

d ã góp ph n t i th u ng, làm cho chúng thêm ph n

c a nó, trong công nh th c ph m c ã xu t hi ng s d ng tinh d

m t ch t b o qu n th c ph m t nhiên và an toàn thay cho các ch t b o qu n t ng h p

1.2.6.2 Trong y h c

Tinh d u là lo c ph c s d ng nhi u nh t trong y h c c truy n M i

lo i tinh d u có thành ph n hóa h c và c u ph n chính khác nhau nên nh ng ho t tính

thích d ch tiêu hóa, d ch d dày, d ch ru t và d ch m t Vì v u chthành thu c ch a tr các b nh v ng hô h p, tu n hoàn, tiêu hóa, ch ng, nôn m a, xoa bóp các ch m m t m i và kích thích ho ng c p Ví

kinh, gây c m giác l nh và gi i ch c dùng làm ch ph m cao xoa,

d u xoa; tinh d p eugenol dùng làm thu c sát trùng, thu c gi m

t dùng trong vi m th i; tinh d u thu c h cam quýt dùng làm thu c kích thích tiêu hóa, tr c m

1.2.6.3 Trong công nghi p s n xu t m ph m

Ngày nay, ngành công nghi p m ph m phát tri n r t m nh, tinh d u không

nh c s d ng tr c ti p trong các spa cao c p mà chúng còn là ngu n nguyên

ng pháp chi t xu t tinh d u thông d t, chi p ngâm và ép.

c s c th m th u vào các mô nguyên li hòa tan, khu ch tán và lôi

cu n theo các h p ch t h n tinh d u D t s g p l nh

t i ng sinh hàn và và phân tách thành 2 l p (l p tinh d u bên trên và

l c i) trong h th S khu ch tán s d dàng khi t bào

ch a tinh d ng do nguyên li u ti p xúc v c bão hòa trong m t

th i gian nh ng h p các mô th c v t có các h p ch

nh a, acid béo dây dài m ch th ng) thì quá trình ch t ph c th c hi n trong

m t th i gian dài vì nh ng h p ch t này làm gi m áp su a h th ng và làm cho s khu ch tán tr

1.3.1.2 Nh ng y u t chính ng n hi u su t tinh d u

a) S khu ch tán

Ngay c khi nguyên li c làm v v n thì ch có m t s mô ch a tinh d u b

v và cho tinh d u thoát t c lôi cu

Rechenberg, nhi sôi c c ph n l n tinh d u còn l i trong các mô th c v t s

c hòa tan vào trong n c có s n trong t bào th c v t Dung d ch này s th m th u

d n ra b m t nguyên li u và b c cu òn n c s th m th u vào nguyên

li u theo chi c l i và tinh d u l i ti p t c b hòa tan vào l c này Quy trình này l p l n khi tinh d u trong các mô thoát ra ngoài h t

Vì các c u ph n trong tinh d c theo nguyên t c nói

ng nh ng h p ch t nào d hòa tan trong n c s c lôi cu n

c

b) S th y phân

Nh ng c u ph n este trong tinh d u d b th y phân cho ra acide và alcol khi

n nóng trong m t th i gian dài v h n ch hi ng này, s

c ph c th c hi n trong m t th i gian càng ng n càng t t

c) Nhi

Nhi cao s làm phân h y tinh d n thi t ph c quá nhi t (trên 1000C) nên th c hi n vi n cu i cùng c a s

c t, sau khi các c u ph n d ã lôi cu t Th c ra, h u h t các tinh d u

u kém b i tác d ng c a nhi t nên v là làm sao cho th i gian ch u nhicao c a tinh d u càng ng n càng t t

liên quan v i nhau và quy v ng c a nhi , s khu ch tán,

- Không hi u qu i v i nh ng nguyên li ng tinh d u th p

- Ch ng tinh d u có th b nh h ng n u trong tinh d u có nh ng c u

ph n d b phân h y

- Không l c các lo i nh a và sáp có trong nguyên li ng

- òn m ng tinh d i l n.

- Nh ng tinh d u có nhi ng cho hi u su t r t kém

1.3.2

c a trên hi ng th m th u, khu ch tán và hòa tan

c a tinh d u có trong các mô nguyên li u khi ti p xúc v i dung môi h

t ra kém hi u qu

c ngâm trong dung môi h

h thu h i dung môi, ph n còn l i là h n h p tinh d u và

c g i là tinh d u cô k t (g i là “concrete oil”) Dùng c n tuy i hòa tan

“concrete oil” r l n sáp s c tách lo i, ph n d ch còn l t lôi cu thu tinh d u tinh khi t (g i là

à hai d ng s n ph m chính c a chhành trên th ng

a Yêu c u c a dung môi chi t

Y u t quan tr ng nh t cho s thành công c m ch t và

c tính c a dung môi s d t c n ph c nh ng yêu c u sau:

Hòa tan hoàn toàn và nhanh chóng các c u ph

li u

Hòa tan kém các h p ch a d u có trong nguyên li u.Không có tác d ng hóa h c v i tinh d u

Không bi n ch t khi s d ng l i nhi u l n

Hoàn toàn tinh khi t, không có mùi l òn thi t b , không t o thành h n h p n v nh t kém

Nhi sôi th p vì khi ch t dung d thu h i dung môi, nhi sôi cao s n ch ng tinh d u

Ngoài ra, c n có thêm nh ng y u t ph p, ngu n cung c p d tìm, …

ng thì không có dung môi nào th a mãn t t c nh u ki n k trên

h p ph ch Các khay có th x p ch ng lên nhau, trên m t khay x u nguyên

li yên trong kho ng t 12-72 gi tùy t ng lo i nguyên li u, sau

p nguyên li u m h p ph t 10-15 l n cu c ch t béo có

c ch t béo v trích ly tinh d l nh

-100 lo i b h t ch t béo b kéo theo r i áp su t th thu tinh

ph i d ng tinh d c (“essence concentrée”) dùng trong m ph m

a trên hi ng h p th ch i các lo i d u béo

c ngâm trong d ã tinh ch trong m t thi t b c làm nóng b

c 45-600C trong th i gian t 1-2h Sau m i l n ngâm, v t hoa ra cho vào máy v y thu h i d u và cho ti p nguyên li u m i vào M i m dung môi có th dùng

chi t 10-15 l n D ã bão hòa ch c v i etanol r i cô d i

1.3.2.4. (Expression hay Cold Pressing)

ng cho các lo c li ng tinh d u cao và

t bào ch a tinh d u ph n v thu c chi Citrus.

Nguyên li u chi t c trích tinh d u b ng cách ép nhi ng s d ng các lo i máy ép tr c vít vô t n ho c c i ép dùng nêm (gi i d u béo)

Ph c là m t h n h p g m tinh d u và d ch cùi có th d dàng tách b ng cách

c mu i bão hòa, tinh d u s n i lên trên có kéo theo m t ph n sáp và

nh a Dùng etanol 75 - 800 hòa tan tinh d u, làm l lo i b sáp Sau khi

i áp su t th lo i b etanol ta có s n ph m tinh d u có l n m t ít nh a

trong phòng thí nghi m

i ta còn s d i trong vi c ly trích tinh d t hay chi i s h tr b i vi sóng, b i siêu

âm, k thu t vi chi t pha r n (SPME: Solid phase micro-extraction), k thu t chi t siêu

t i h n (SFE: Supercritical fluid extraction), chi t k t h p v t (SDE:

Simultaneous distillation extraction),…Tuy nhiên, t và thi t b ph c t

- (Bouquet): là ph c còn l i sau khi lóng, g n thu tinh d u

t lôi cu c c a các lo i tinh d u có giá tr cao và

có th xem nh t s n ph m trong công ngh u

- Nh a d u t nhiên (Resinoid): D c thu tr c ti p t ph n g c a

- Cao tinh d u (Pomade): là ch t béo ch a ch c

p

tinh d u Lo i hydrosol này ch a các c u t ch c và m t ít tinh

d u kém tan nên v n còn mùi th

Ngoài ra, còn có các d ng s n ph c hoa ph i h p gi a tinh d u thiên nhiên v i hay tinh d u t ng h p ho c bán t ng h p hòa tan trong c n, ngoài ra còn có

c a tinh d u h Citrus thu nh c b ng các k thu t tách chi t hi ã

(2001) và Napapor Thavanapong thu i h c Silpakorn, Thái

ã nghiên c u v tinh d i b nh;

Atti-ã nghiên c u ki n tcho vi c chi t tinh d u chanh b c (HD) và chi t b ng CO2 siêu t i h n (CO2-SFC); M M Ahmad, Salim-ur-rehman, F M

ã nghiên c u tinh ch t lý h c c a tinh d u chi t t

v c a các lo i Citrus khác nhau.

1.5.2 Tình hình nghiên c c [2, 3, 5, 6]

Công trình nghiên c u “Kh o sát tinh d u v trái gi ng Citrus h Rutaceae” c a Nguy n Minh Hoàng (2006) hay “Tách tinh d u và alkaloid t

qu Qu t (Citrus japonica Thumb.)” c a Nguy n Th Lý và c ng s …

Tr nh Hoàng Hi u, Nguy n Th Th o Trân, Lê Ng c Th ch (2009) “Kh o sát tinh d u v trái và lá t c (Fortunella japonica “) - c t

c gia TP.H tài này ti n hành kh o sát tinh d u vtrái và lá t c, trên nhi u l c: hi u su t t

trích, ch s v t lý và hoá h c, thành ph n hóa h c và ho t tính sinh h c

tài t t nghi i h c “Nghiên c u chi t xu t tinh d u t v i (Citrus grandis (L.) Osbeck var grandis) b

NGHIÊN C U

ng nghiên c u

2.1.1 Nguyên li u chính

Nguyên li u s d ng tách tinh d u trong nghiên c u này là: lá Qu t

(Citrus japonica Thumb) có ngu n g c t các t c thu mua

- Cân k thu t 1 mg (Shimadzu, Nh t)

- Cân k thu t 1 g (Vi t Nam)

- Cân phân tích 0,1 mg (Satorius, Nh t)

- B t tinh d ng, có h u Clevenger dùng cho

- Buret, pipet, bình tam giác, c c th y tinh

- H th ng s c ký khí ghép kh i ph hai l n v i thi t b GC model G3440A

c a hãng Agilent (Agilent, USA) ghép v i detector MS/MS model QuattromicroTMGC c a hãng Waters (USA)

polyetylen c h n ch s xâm nh p c a không khí R u b o

qu n nhi -200C cho n khi nghiên c u

tách tinh d u ra kh i nguyên li u th c v c

này là nhi sôi c a h n h p s th sôi c a các c u t thành ph n Do

c các c u t tinh d u s c tách ra nhi thnhi sôi c c, vì v y s h n ch s bi n tính hóa h c (s oxy hóa, nhi t phân ) các c u t tinh d u Trong quá trình ch c s c th m th u vào các mô nguyên li hòa tan, khu ch tán và lôi cu n theo các h p ch t h

thành ph n tinh d u D t s và phân tách thành 2 l p (l p tinh d u bên trên và l c i) trong h th S khu ch tán s ddàng khi t bào ch a tinh d ng do nguyên li u ti p xúc v c bão hòa trong m t th i gian nh ng h p các mô th c v t có các h p ch t khó

a, acid béo dây dài m ch th ng) thì quá trình t ph c

th c hi n trong m t th i gian dài vì nh ng h p ch t này làm gi m áp su

- Không hi u qu i v i nh ng nguyên li ng tinh d u th p

- Ch ng tinh d u có th b ng n u trong tinh d u có nh ng c u ph n

d b phân h y

- Không l c các lo i nh a và sáp có trong nguyên li ng ch t

t có giá tr )

- Nh ng tinh d u có nhi ng cho hi u su t r t kém

2.2.3 D ki n quy trình tách chi t tinh d u t lá Qu t

Hình 2.2. quy trình d ki n tách chi t tinh d u t lá Qu t

Na2SO4khanLàm khan

2.2.4 B trí thí nghi m

M Theo tham kh o tài li u, NaCl có tác d ng t t trong quá trình tách, chi t tinh d u vì: NaCl có tác d m th u c c trong t bào,

c u t tinh d u kém phân c c v c Nh u s d dàng tách ra trong quá trình ch t Nên chúng tôi ti n hành lô thí nghi m này, nh m

i có tác d ng t t trong quá trình tách chi t tinh d u lá Qu t hay không

Cách ti n hành:

L y 100g nguyên li ã x lý cho vào máy xay ng

c c t v i t l c/nguyên li c ch n lô thí nghi m này là: 6/1 (v/w) Thêm NaCl vào các n bi n thiên l t là: 0%, 2,5%, 5%, 7,5% 10% (w/v) Sau , xay nguyên li u trong 2 phút Ti p t c chuy n toàn b nguyên li ã xay vào bình

H n h p sau khi gia nhi t s ng sinh hàn T inh d u s

sau khi g p l phân li thành 2 l p: l p trên là tinh d u, l p phía

c nhi u n hi u su t thu h i tinh d u

phân li tinh d u trong nguyên li t y u t quan tr ng n hi u

qu c a quá trình ch t và nó c nh th i gian c t t

ng mu i b sung thích h p thí nghi m th nh t, các thí nghi m này c ti n hành v c/nguyên li u i theo các t l : 3/1; 4/1; 5/1; 6/1; 7/1; 8/1

Cách ti n hành: L y 100g nguyên li ã x lý cho vào máy xay, thêm vào

tích) và so sánh th tích tinh d c các n ên T

ch n t l c/nguyên li u thích h p

thí nghi c b trí th hi i hình 2.4

2.2.4.3 Thí nghi nh th i gian ngâm mu i

M Th i gian ngâm là m t y u t quan tr ng n th tích tinh

ng NaCl thích h p, t l c/nguyên li u thích

h p, mu c s c ngâm chung v i nguyên li u Chúng tôi ti n hành lô thí nghi nh th c mu i.Thí nhi c ti n hành v i các th i gian

b trí thí nghi ình 2.5

Cách th c hi n:

L y 100g nguyên li ã x lý cho vào máy xay ng

c c t và NaCl v i t l c/nguyên li u và n NaCl thích h ã ch n Xay trong 2 phút Chuy n toàn b nguyên li ã xay vào bình c u c a h th t

sau khi g p l nh ng sinh hàn c th tích tinh d u tách ra trên và so sánh T n th i gian ngâm mu i thích h p

M Th t có vai trò quy ng tinh d u thu h i N u

g c t trong th i gian quá ng n thì l ng tinh d t hoàn toàn hay

nó v n còn t n t i trong các t bào ti t, do v y s làm gi m th tích tinh d c

c l t quá th i gian t ì v a t n th i gian, v a t g

Phân li

Ti n hành

c các thông s t ng NaCl, t l c/nguyên

li u, th i gian c mu i Chúng tôi ti p t c ti n hành lô thí nghi nh

Thí nghi m ti t nguyên li u v i các kho ng th i gian bi n thiên

t 10 phút, 20 phút, 30 phút…th i gian t b u tính khi có gi t tinh d u

ng ng xi phông, ph i chú ý ng xuyên theo dõi và c sau 10 phút ghi

l i th tích tinh d n khi th y th tích tinh d c bên ng

Phát hi n s có m t c a các c u t có trong tinh d u lá Qu t t i Trung tâm D ch

v Phân tích Thí nghi m Thành ph H Chí Minh (s 02 Nguy , Qu n 1, Tp.HCM) trên thi t b s c ký khí – ghép kh i ph Vi nh danh các thành ph n trong tinh d c th c hi n b ng cách dùng ph n m t s so sánh các

ph full-MS và MS/MS c a t ng c u t tách ra trên s v i các ph chu n có

h n thành 2 pha riêng bi t: Pha n m phía trên là tinh d c c

th tích tinh d u trên có v tích R i ti nh t l kh i

ng tinh d u tách chi c

T l kh ng tinh d u thu h c tính theo công th c:

% 100

NL

TD TD

m

d V

: T l kh ng tinh d u thu h i tinh d u (%)

K T QU NGHIÊN C U VÀ TH O LU N

K t qu thí nghi c th hi n hình 3.1(b ng PL 3.1)

0.7 0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 0

ng thinh d u gi òn 0,3ml hay chi m t l kh ng 0,28%(w/w) so

v c dùng mu i là không có hi u qu trong vi c thu h i tinh

d u lá

Nhìn chung, mu i có tác d ng t t trong quá trình ch òn tùy vào lo i nguyên li u s d i v i lá Qu t có m t s

ý nh u lá có t l hòa tan trong c n 900 Do ph n tinh d u lá

Qu t có ch a nhi u g c phân c c nên khi cho mu i vào s

hòa tan các c u t này và làm gi m th tích tinh d a, tinh

d u lá Qu t có ch a nhi u h p ch t este có kh nhi

th p nên vi c cho mu i vào s u này là không c n thi t vì nó s y s phân h y các c u t này và làm t ng tinh

d u có th thu h i Vì v y, trong quá trình ch t tinh d u lá Qu t s không