Nghiên cứu sự phân bố, tồn dư một số kháng sinh thường dùng ở gà và sử dụng chế phẩm Actiso làm tăng khả năng đào thải, góp phần đảm bảo vệ sinh an toàn thực phẩm

Header Page of 128 BỘ GIÁO DỤC VÀ ðÀO TẠO TRƯỜNG ðẠI HỌC NÔNG NGHIỆP HÀ NỘI HỒ THỊ THU HÀ NGHIÊN CỨU SỰ PHÂN BỐ, TỒN DƯ MỘT SỐ KHÁNG SINH THƯỜNG DÙNG Ở GÀ VÀ SỬ DỤNG CHẾ PHẨM ACTISO LÀM TĂNG KHẢ NĂNG ðÀO THẢI, GÓP PHẦN ðẢM BẢO VỆ SINH AN TOÀN THỰC PHẨM LUẬN ÁN TIẾN SĨ NÔNG NGHIỆP Chuyên ngành: Bệnh lý học chữa bệnh vật nuôi Mã số: 62 62 50 01 Người hướng dẫn: GS.TS ðậu Ngọc Hào PGS.TS Lê Thị Ngọc Diệp HÀ NỘI, 2012 luan van thac si - luan van kinh te - khoa luan - tai lieu -Footer Page of 128 Header Page of 128 i LỜI CAM ðOAN Tơi xin cam đoan: cơng trình khoa học tơi, số liệu kết nghiên cứu luận án trung thực chưa cơng bố cơng trình khác Tơi xin cam ñoan: giúp ñỡ cho việc thực ñề tài nghiên cứu hồn thành luận án cảm ơn Các thơng tin trích dẫn luận án xác rõ nguồn gốc Hà Nội, ngày tháng năm Tác giả Hồ Thị Thu Hà luan van thac si - luan van kinh te - khoa luan - tai lieu -Footer Page of 128 Header Page of 128 ii LỜI CẢM ƠN Trong suốt q trình thực đề tài hồn thành luận án, tơi ln nhận giúp ñỡ nhiều tổ chức cá nhân Nhân dịp xin cảm ơn Ban Giám hiệu, Viện ðào tạo Sau ðại học, Ban Chủ nhiệm khoa Thú y trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội, Trung tâm kiểm nghiệm thuốc thú y trung ương I ñã tạo điều kiện cho tơi theo học chương trình đào tạo Nghiên cứu sinh trường Tôi xin chân thành cảm ơn Trung tâm kiểm nghiệm thuốc thú y trung ương I, Cục thú y Hà Nội ñã hỗ trợ kinh phí để tơi thực đề tài nghiên cứu Tơi xin cảm ơn tập thể cán phòng Dược Trung tâm kiểm nghiệm thuốc thú y trung ương I; khoa vi sinh viện kiểm nghiệm thuốc trung ương Bộ y tế; trung tâm kiểm tra vệ sinh thú y trung ương I, môn Nội chẩn – Dược – ðộc chất nhiệt tình giúp đỡ, tạo điều kiện thuận lợi để tơi hồn thành đề tài nghiên cứu ðặc biệt, tơi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc ñến thầy hướng dẫn khoa học GS TS ðậu Ngọc Hào; PGS TS Lê Thị Ngọc Diệp trực tiếp hướng dẫn, giúp đỡ tơi q trình thực đề tài hồn thành luận án Tơi ln biết ơn gia đình, bạn bè đóng góp cơng sức, động viên, giúp đỡ tơi hồn thành ñề tài nghiên cứu luận án Hà Nội, ngày tháng năm Tác giả Hồ Thị Thu Hà luan van thac si - luan van kinh te - khoa luan - tai lieu -Footer Page of 128 Header Page of 128 iii MỤC LỤC Lời cam ñoan i Lời cảm ơn ii Mục lục iii Danh mục chữ viết tắt vii Danh mục bảng ix Danh mục hình xiii MỞ ðẦU Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Một số hiểu biết kháng sinh 1.1.1 ðịnh nghĩa kháng sinh 1.1.2 Phân loại kháng sinh 1.1.3 Nguyên tắc sử dụng thuốc kháng sinh 1.1.4 Tồn dư kháng sinh nguy liên quan ñến diện chúng thực phẩm 1.1.5 Lợi ích tác hại việc sử dụng kháng sinh thức ăn chăn nuôi 1.2 Một số hiểu biết Enrofloxacin 11 16 1.2.1 Tính chất cấu trúc hố học Enrofloxacin 16 1.2.2 Hoạt phổ kháng khuẩn 16 1.2.3 Cơ chế tác dụng Enrofloxacin 17 1.2.4 Tương tác 17 1.2.5 Kháng thuốc 17 1.2.6 Ứng dụng ñiều trị Enrofloxacin 17 1.3 Kháng sinh Oxytetracyclin luan van thac si - luan van kinh te - khoa luan - tai lieu -Footer Page of 128 18 Header Page of 128 iv 1.3.1 Lịch sử 18 1.3.2 Tính chất cấu trúc hoá học Oxytetracyclin 18 1.3.3 Tác dụng dược lí 19 1.3.4 Ứng dụng điều trị 20 1.4 Dược liệu Actiso 21 1.4.1 Mô tả Actiso 21 1.4.2 Thành phần hoá học Actiso 21 1.4.3 Tác dụng dược lí cơng dụng 22 1.5 Tình hình nghiên cứu ngồi nước 28 1.5.1 Tình hình nghiên cứu tồn dư kháng sinh sản phẩm chăn ni Việt Nam 28 1.5.2 Tình hình nghiên cứu nước ngồi kháng sinh nhóm Tetracyclin nhóm Quinolon 32 Chương NỘI DUNG, NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 36 2.1 Nội dung nghiên cứu 36 2.2 ðịa ñiểm thời gian nghiên cứu 36 2.3 Nguyên liệu 37 2.3.1 ðối tượng nghiên cứu 37 2.3.2 Giống vi khuẩn thí nghiệm 37 2.3.3 Thuốc dùng thí nghiệm 37 2.3.4 Hóa chất, dung mơi môi trường nuôi cấy vi khuẩn 37 2.3.5 Dụng cụ thí nghiệm 38 2.4 Phương pháp nghiên cứu 38 2.4.1 Khảo sát tình hình sử dụng thuốc kháng sinh số sở chăn nuôi gà Hà Nội vùng phụ cận luan van thac si - luan van kinh te - khoa luan - tai lieu -Footer Page of 128 38 Header Page of 128 v 2.4.2 Nghiên cứu phân bố, tồn dư kháng sinh Oxytetracyclin (OTC) Enrofloxacin (ENRO) huyết tương, cơ, gan, thận gà ảnh hưởng chế phẩm Actiso 10% ñến tồn dư OTC ENRO huyết tương, cơ, gan, thận gà 40 2.4.3 Ứng dụng thử nghiệm chế phẩm Actiso 10% chăn nuôi gà thịt 2.5 Phương pháp xử lí số liệu Chương KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 45 49 50 3.1 Kết nghiên cứu tình hình sử dụng kháng sinh chăn ni gà 50 3.1.1 Kết điều tra tình hình chăn ni gà thịt trang trại Hà Nội vùng phụ cận năm 2009 50 3.1.2 Kết điều tra tình hình sử dụng kháng sinh chăn nuôi gà thịt trang trại Hà Nội vùng phụ cận năm 2009 52 3.1.3 Kết ñiều tra loại kháng sinh ñã sử dụng trang trại chăn nuôi gà tập trung Hà Nội vùng phụ cận năm 2009 55 3.1.4 Kết phân tích kháng sinh thức ăn chăn nuôi gà thịt trang trại chăn nuôi gà tập trung Hà Nội vùng phụ cận 3.2 57 Kết nghiên cứu phân bố, tồn dư kháng sinh huyết tương, cơ, gan, thận gà thí nghiệm 59 3.2.1 Kết nghiên cứu phân bố Oxytetracyclin (OTC), Enrofloxacin (ENRO) huyết tương gà thí nghiệm 60 3.2.2 Kết nghiên cứu tồn dư Oxytetracyclin (OTC), Enrofloxacin (ENRO) cơ, gan, thận gà thí nghiệm luan van thac si - luan van kinh te - khoa luan - tai lieu -Footer Page of 128 68 Header Page of 128 3.3 vi Kết nghiên cứu ảnh hưởng chế phẩm Actiso 10% ñến phân bố, tồn dư kháng sinh huyết tương, cơ, gan, thận gà thí nghiệm 84 3.3.1 Kết nghiên cứu ảnh hưởng Actiso 10% ñến phân bố Oxytetracyclin (OTC), Enrofloxacin (ENRO) huyết tương gà thí nghiệm 84 3.3.2 Kết nghiên cứu ảnh hưởng Actiso 10% ñến tồn dư Oxytetracyclin (OTC), Enrofloxacin cơ, gan, thận gà thí nghiệm 3.4 100 Kết ứng dụng thử nghiệm chế phẩm Actiso 10% chăn nuôi gà thịt 115 3.4.1 Kết nghiên cứu sử dụng kháng sinh Oxytetracyclin Actiso 10% phòng bệnh thương hàn gà sở chăn ni gà thực địa 115 3.4.2 Kết ứng dụng ñiều trị bệnh thương hàn gà kháng sinh Enrofloxacin Actiso 10% KẾT LUẬN VÀ ðỀ NGHỊ 119 123 Kết luận 123 ðề nghị 124 Danh mục cơng trình cơng bố có liên quan ñến luận án 125 Tài liệu tham khảo 126 Phụ lục 144 luan van thac si - luan van kinh te - khoa luan - tai lieu -Footer Page of 128 Header Page of 128 vii DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT ATCC : American Type Cultures Collection CFU : Colony Forming Unit CPTA : Chi phí thức ăn CTC : Chlortetracycline C perfringens : Clostridium perfringens DNA : Deoxyribonucleic Acid EC : European Commission E coli : Escherichia coli EDTA : Disodium Ethylene Diamine Tetraacetate Dihydrat ENRO : Enrofloxacin EU : European Union FAO : Food and Agriculture Organization HPLC : High Perfoman Liquid Chromatoghraphy l : litre µg : microgram ml : milliliters µl : microlitre MRL : Maximum Residue Limit NADH : nicotinamide adenine dinucleotide NADPH : nicotinamide adenine dinucleotide phosphate NCTC : National collection of type cultures OIE : Office International des Epizooties OTC : Oxytetracyclin ppb : parts per billion luan van thac si - luan van kinh te - khoa luan - tai lieu -Footer Page of 128 Header Page of 128 viii ppm : parts per million RNA : Ribonucleic Acid S.pneumoniae : Streptococcus pneumoniae S pyogenes : Streptococcus pyogenes TACN : Thức ăn chăn nuôi TC : tetracycline TCN : Tiêu chuẩn ngành TCVN : Tiêu chuẩn Việt Nam US : United States VSV : Vi sinh vật WHO : World Health Organization luan van thac si - luan van kinh te - khoa luan - tai lieu -Footer Page of 128 Header Page 10 of 128 ix DANH MỤC CÁC BẢNG STT 2.1 Tên bảng Trang Phương pháp phân tích kháng sinh mẫu thức ăn chăn ni gà 2.2 Bố trí thí nghiệm phòng bệnh thương hàn gà trang trại chăn ni gà thịt 2.3 55 Kết phân tích kháng sinh thức ăn chăn nuôi gà thịt trang trại chăn nuôi gà thịt Hà Nội vùng phụ cận 3.5 54 ðiều tra loại kháng sinh ñã sử dụng trang trại chăn nuôi gà tập trung Hà Nội vùng phụ cận năm 2009 3.4 51 ðiều tra tình hình sử dụng kháng sinh trang trại chăn nuôi gà Hà Nội vùng phụ cận năm 2009 3.3 49 ðiều tra tình hình chăn ni gà thịt trang trại Hà Nội vùng phụ cận năm 2009 3.2 46 Bố trí thí nghiệm sử dụng Enrofloxacin ñiều trị bệnh thương hàn gà 3.1 39 57 Hàm lượng Oxytetracyclin (OTC) huyết tương gà ñược bổ sung OTC ngày thời ñiểm sau ngừng sử dụng kháng sinh 3.6 60 Hàm lượng Oxytetracyclin (OTC) huyết tương gà ñược bổ sung OTC ngày thời ñiểm sau ngừng sử dụng kháng sinh 3.7 62 Hàm lượng Enrofloxacin (ENRO) huyết tương gà ñược bổ sung ENRO ngày thời ñiểm sau ngừng sử dụng kháng sinh luan van thac si - luan van kinh te - khoa luan - tai lieu -Footer Page 10 of 128 65 Header Page 165 of 128 SẮC KÍ ðỒ KHÁNG SINH OXYTETRACYCLIN TRONG NỘI TẠNG GÀ Hình Sắc kí đồ Oxytetracyclin đùi gà sau ngừng kháng sinh ngày luan van thac si - luan van kinh te - khoa luan - tai lieu -Footer Page 165 of 128 Header Page 166 of 128 Hình Sắc kí đồ Oxytetracyclin lườn gà sau ngừng kháng sinh ngày luan van thac si - luan van kinh te - khoa luan - tai lieu -Footer Page 166 of 128 Header Page 167 of 128 Phụ lục PHIẾU ðIỀU TRA CƠ SỞ CHĂN NUÔI GÀ Ghi chú: Bản câu hỏi ñiều tra dùng ñể ñiều tra việc sử dụng kháng sinh chăn nuôi gà Chỉ dùng cho mục đích nghiên cứu Các số liệu thơng tin thu thập thơng qua điều tra đảm bảo tính bí mật Chỉ trả lời câu hỏi phù hợp khơng có ngoại lệ khác Tên sở:………….………Mã số………………ðịa chỉ: …………………………… Loại gà: Gà thịt: Gà ñẻ: Gà con: Than dự lớp tập huấn chăn ni gà: Có Khơng Số năm kinh nghiệm chăn nuôi gà (năm): Nguồn thức ăn chăn nuôi: 100% TACN Kết hợp Sử dụng kháng sinh chăn ni : có khơng khơng biết Quy mơ trang trại (số gà vào thời điểm điều tra): Mục đích sử dụng: tăng trọng phòng bệnh trị bệnh kết hợp phòng trị bệnh Loại kháng sinh thường sử dụng: 1…………………………………………… 7………………………………………… 2………………………………………… 8………………………………………… 3………………………………………… 10 11 Lựa chọn kháng sinh ñiều trị dựa vào: kinh nghiệm người ni khuyến cáo kỹ thuật nhà sản xuất đơn thuốc 10 Liều lượng dựa vào: ñơn thuốc khuyến cáo kỹ thuật nhà sản xuất kinh nghiệm luan van thac si - luan van kinh te - khoa luan - tai lieu -Footer Page 167 of 128 Header Page 168 of 128 11 Ngừng sửdụng thuốc trước xuất thịt dựa vào khuyến cáo kỹ thuật nhà sản xuất kinh nghiệm không ngừng 12 Phối hợp kháng sinh dựa vào: ñơn thuốc khuyến cáo kỹ thuật nhà sản xuất kinh nghiệm Ngày thu thập thông tin……/……/……… Trân trọng cảm ơn! Người điều tra (kí tên) luan van thac si - luan van kinh te - khoa luan - tai lieu -Footer Page 168 of 128 Header Page 169 of 128 Phụ lục GIỚI HẠN TỒN DƯ TỐI ðA CỦA KHÁNG SINH TRONG SẢN PHẨM ðỘNG VẬT Bảng Giới hạn tồn dư tối ña kháng sinh thịt, mỡ , trứng sữa (Theo FAO/WHO – ALINORM 97/31A Appendix V, US) [131] Kháng sinh Thịt mỡ (µg/kg) 60 Trứng (µg/l) - Sữa (µg/l) - 100 200 100 100-200 100 50 Dexamethasone 0,5 - 0,3 Streptomycin 500 - 200 Fenbendazone 100 - 100 Gentamycin 500 500 500 - - 100 - 25 Chloramphenicol - - - Furazolidon - - - Enrofloxacin - - - Olaquindox - - - Flumequin - - - Dimitridazon - - - Azaperone Chlotetracyclin Tetracyclin Oxytetracyclin Cypermethrin Carbadox Sulfadimidin luan van thac si - luan van kinh te - khoa luan - tai lieu -Footer Page 169 of 128 Header Page 170 of 128 Bảng Giới hạn tồn dư tối ña cho phép quan tổ chức quy định Canada [130] Kháng sinh Lồi ñộng vật Albendazole Ampicillin Trâu, bò Trâu, bò lợn Amprolium Gà Apramycin Arsanilic Lợn Gà Lợn Ceftiofur Lợn Chlortetracycline Trâu, bò Gà Lợn Danofloxacin Trâu, bò Enrofloxacin Trâu, bò Oxytetracycline Gà Cơ quan MRL (ppm) Gan Mô bào Sữa Cơ Gan thận Trứng Thận Cơ Gan Trứng Cơ Gan Cơ Gan mỡ Thận Thận Cơ Gan Thận Da mỡ Cơ Gan Thận Mỡ Cơ Gan Thận Cơ Gan Cơ Gan Thận 0.2 0.01 0.01 0.5 1.0 7.0 0.1 0.5 2.0 0.5 0.5 2.0 1.0 2.0 5.0 6.0 1.0 1.0 4.0 1.0 1.0 2.0 4.0 0.2 0.07 0.07 0.4 0.02 0.07 0.2 0.6 1.2 luan van thac si - luan van kinh te - khoa luan - tai lieu -Footer Page 170 of 128 Header Page 171 of 128 Phụ lục MỘT SỐ KHÁNG SINH BỔ SUNG VÀO THỨC ĂN CHO LỢN ðỂ TĂNG TRỌNG, PHỊNG VÀ ðIỀU TRỊ BỆNH (Quy định FDA Tài liệu từ Cục công nghiệp khoa học ngũ cốc Hoa Kì – Medicated Feed Additives for Swine) Tên kháng sinh Liều sử dụng Mục đích sử dụng Thời gian ngừng sử dụng trước giết mổ 10 -50 g/tấn Thúc đẩy phát triển tăng hiệu Khơng sử dụng thức ăn 50-100 g/tấn Ngăn chặn bệnh ñường tiêu hố, Khơng trì tăng trọng có mặt Chlortetracyclin bệnh viêm teo mũi 100-200 g/tấn ðiều trị bệnh ñường tiêu hố, Khơng giảm thiểu bệnh Leptospira 200 g/tấn Giảm thiểu đào thải mầm bệnh Khơng Leptospira, giảm tỉ lệ sảy thai, giảm tỉ lệ chế Erythromycin 9,25-64,75 Tăng trọng lượng, tăng hiệu Không g/tấn sử dụng thức ăn Penicillin 10-50 g/tấn Tăng trọng lượng, tăng hiệu Không sử dụng thức ăn 20 g/tấn Tăng trọng lượng Không 40 g/tấn Kiểm soát bệnh hồng lị Lincomycin 100 g/tấn ðiều trị bệnh hồng lị ngày 200 g/tấn Làm giảm thiểu bệnh ngày Mycoplasma hypopneumonia 20 g/tấn Tăng trọng lượng, tăng hiệu Không Tiamulin sử dụng thức ăn 35 g/tấn Kiểm soát bệnh hồng lị ngày 100 g/tấn ðiều trị bệnh hồng lị ngày 10-100 g/tấn Tăng trọng lượng, tăng hiệu Không sử dụng thức ăn Tylosin 40-100 g/tấn Ngăn chặn bệnh hồng lị Khơng Khơng 100 g/tấn Duy trì tăng trọng lượng, tăng hiệu thức ăn tình trạng có mặt bệnh viêm teo mũi luan van thac si - luan van kinh te - khoa luan - tai lieu -Footer Page 171 of 128 Header Page 172 of 128 Apramycin Vigriniamycin 150 g/tấn 10 g/tấn 5/tấn 25 g/tấn Bacitracin Zin 100 g/tấn 10-50 g/tấn Bambermycin g/tấn Cacbadox 10-25 g/tấn 50 g/tấn Fenbendazol Hygromycin B Ivermectin 10-80 g/tấn 3-12 ngày 12 g/tấn 300 g/tấn Thiabendazol 45-90 g/tấn Kiểm soát bệnh Colibacilosis 28 ngày chủng E.coli mẫn cảm gây Tăng trọng lượng, tăng hiệu Khơng sử dụng thức ăn Kiểm sốt bệnh hồng lị, sử dụng trang trại có tiền sử bệnh hồng lị ðiều trị bệnh hồng lị Cho lợn ñang phát triển lợn thịt, tăng trọng lượng tăng hiệu sử dụng thức ăn Tăng trọng lượng, tăng hiệu sử dụng thức ăn Tăng trọng lượng, tăng hiệu sử dụng thức ăn Kiểm sốt bệnh hồng lị, bệnh đường tiêu hố Salmonella Phòng trị sán phổi, ấu trùng, sán dày, ấu trùng sán thận Phòng trị bệnh sán tròn Phòng trị bệnh sán đường tiêu hố, thận, phổi Ngăn chặn điều trị sán luan van thac si - luan van kinh te - khoa luan - tai lieu -Footer Page 172 of 128 Không Không Không Không 70 ngày 70 ngày Không 15 30 ngày Header Page 173 of 128 Phụ lục So sánh kháng sinh OTC liều bổ sung khác sau 1, 2, 3, 5, ngày ngừng sử dụng Liều OTC 100ppm, 500ppm sau ngày ngừng sử dụng thận ANOVA Table for HL Row exclusion: So lieu.svd DF Sum of Squares Lieu luong Residual Mean Square F-Value P-Value Lambda Pow er 9.741 9.741 1910.788