Phân lập và bảo quản giống nấm sò từ mũ nấm (Khóa luận tốt nghiệp)

Phân lập và bảo quản giống nấm sò từ mũ nấm (Khóa luận tốt nghiệp)Phân lập và bảo quản giống nấm sò từ mũ nấm (Khóa luận tốt nghiệp)Phân lập và bảo quản giống nấm sò từ mũ nấm (Khóa luận tốt nghiệp)Phân lập và bảo quản giống nấm sò từ mũ nấm (Khóa luận tốt nghiệp)Phân lập và bảo quản giống nấm sò từ mũ nấm (Khóa luận tốt nghiệp)Phân lập và bảo quản giống nấm sò từ mũ nấm (Khóa luận tốt nghiệp)Phân lập và bảo quản giống nấm sò từ mũ nấm (Khóa luận tốt nghiệp)Phân lập và bảo quản giống nấm sò từ mũ nấm (Khóa luận tốt nghiệp)Phân lập và bảo quản giống nấm sò từ mũ nấm (Khóa luận tốt nghiệp)Phân lập và bảo quản giống nấm sò từ mũ nấm (Khóa luận tốt nghiệp)Phân lập và bảo quản giống nấm sò từ mũ nấm (Khóa luận tốt nghiệp)Phân lập và bảo quản giống nấm sò từ mũ nấm (Khóa luận tốt nghiệp)Phân lập và bảo quản giống nấm sò từ mũ nấm (Khóa luận tốt nghiệp)

I H C THÁI NGUYÊN I H C NÔNG LÂM - - MINH HU tài: KHÓA LU N T T NGHI H o IH C : Chính quy Chuyên ngành : Công ngh sinh h c Khoa : CNSH - CNTP Khóa h c : 2011 - 2015 Thái Nguyên - 2015 I H C THÁI NGUYÊN I H C NÔNG LÂM - - MINH HU tài: KHÓA LU N T T NGHI H o IH C : Chính quy Chuyên ngành : Công ngh sinh h c L p : K43 - CNSH Khoa : CNSH - CNTP Khóa h c : 2011 - 2015 Gi ng d n : Thái Nguyên - 2015 i Lâm i cs ng ý c a Ban Giám hi ng, Ban Ch nhi m khoa Công ngh Sinh h c-Công ngh Th c ph m, th i gian th c t th c hi n hành Phân l p b o qu n gi ng n m sò t m K t thúc th i gian th c t p t i Phòng Thí nghi m lên men thu c Khoa Công ngh Sinh h c-Công ngh Th c ph nghi tài t t c k t qu il ic thành t i Ban Giám hi i h c Nông Lâm Thái Nguyên, Ban Ch nhi m Khoa Công ngh Sinh h c-Công ngh Th c ph m th y cô giáo u ki n t t nh t cho em su t th i gian th c t p Em xin bày t lòng bi b n th n tình ch ng d n em th i gian th c hi Cu i cùng, em xin c tài u ki n v t ch t t t nh t có th ln ch d a tinh th n cho em trình th c t p, c em th i gian v a qua Do th i gian th c hi thi u sót, em r t mong nh b tài có h n nên khơng th cs c nhi u n chân thành t th y cô c hoàn thi Em xin chân thành c Sinh viên Minh Hu ii DANH M C B NG Trang B ng 2.1: So sánh m t s thành ph n có nh ng lo i n m B ng g p 10 ng vitamin ch t khoáng 10 B ng 2.3: Th ng kê s Vi t Nam 23 B ng 3.1:Công th ng không ch a khoai tây 27 B ng 3.2:Công th ng không ch a peptone 27 B ng 3.3: Công th ng khơng có ch a Glucose 28 B ng 3.4: Công th ng không ch a cám g o 28 B ng 3.5: Cơng th ng khơng có ch B ng 3.6: Công th ng t ng h p 29 28 B ng 4.1: So sánh s phát tri n s i n m sò theo cơng th ng khác 36 iii DANH M C CÁC HÌNH Trang Hình 2.1: Chu k phát tri n c a n m Hình 2.2: Hình d ng n m sò Hình 2.3: N m c r ch b ch 19 Hình 2.4: Quy trình s n xu t n m sò 20 Hình 4.1: K t qu phân l p n m sò b ng ni c y m nh mơ lõi 33 Hình 4.2: Phân l p n m sò chai thóc 34 Hình 4.3: K t qu c y chuy n n m sò 35 Hình 4.4: S i n m sò phân l p chai thóc 37 Hình 4.5: qu th n m sò sau 25 ngày ni c t 39 iv DANH M C T VI T T T C: Carbon N: Nito SA: Sunphat amôn DAP: Diamôn phosphat P: Phospho K: kali Ca: Canxi nh Mg: Magie Fe: S t Zn: K m Mn: Mangan v M CL C P 1: M U tv 1.2.M tài 1.3 M c tiêu c ti n c tài hoa h c c ti n P 2: T NG QUAN NGHIÊN C U khoa h c c tài 2.1.1 Gi i thi u chung 2.1.2 N m sò 2.1.3 Giá tr ng c a n m sò 2.1.4 Giá tr c li u c a n m sò 10 2.1.5 Giá tr kinh t c a n m sò 11 2.1.6 Ni c y n m sò s n xu t n m sò 12 2.2 Tình hình s n xu t n m Vi t Nam th gi i 22 2.2.1 Tình hình nghiên c u th gi i 22 2.2.2 Tình hình nghiên c P NG, N c 23 P NGHIÊN C U 24 ng ph m vi nghiên c u 24 ng nghiên c u: N m sò (Pleurotus spp) 24 3.1.2 Hóa ch t, nguyên li u, d ng c thi t b s d ng 24 3.1.3 Ph m vi nghiên c u 24 m th i gian ti n hành 25 m ti n hành thí nghi m 25 3.2.2 Th i gian ti n hành thí nghi m 25 vi 3.3 N i dung nghiên c u ch tiêu theo dõi 25 3.3.1 N i dung nghiên c u 25 3.3.2 Các ch tiêu theo dõi 25 u 25 p n m sò 25 pháp t o gi ng c ng thóc sau s i n m lan kín m t th ch 26 3.4.3 L a ch ng t 27 3.4.4 Gi gi ng n m 30 i ng c p 31 P 4: K T QU VÀ TH O LU N 33 p n m sò 33 o gi ng c ng thóc sau s i n m lan kín m t th ch 34 4.3 L a ch ng t 36 4.5 S n xu t n m sò quy mơ phòng thí nghi m 38 P 5: K T LU N VÀ KI N NGH 40 5.1 K t lu n 40 5.2 Ki n ngh 40 TÀI LI U THAM KH O I Ti ng vi t II Ti ng anh 1 N l a ch t nh ng lo i th c ph c nhi s d ng hàng ngày ts t lo Cây n m có thành ph ng r gluxit, axit amin, vitamin, ch h i tin c y m có ho t ch t sinh ng, axit nucleic, cellulose, vita n m có tác d ng làm thu ng kh c phòng ch ng kh n d ch c máu, gi , thu c tr tim, làm gi c b gan, b d dày, h m linh chi, m t n d ng m ng huy t, ch ng phóng x ng, n c s n xu t n m c s n ph m ph li , bã mía làm nguyên li u cho s n xu t n m, góp ph n b o v ch nhi ng N m sò hay g i n vùng c c tr ng r ng rãi c s n xu t n nhu c u th nhi u i yêu c u k thu t ph c t p M t khác, l i mang l i giá tr n ng - h n ng r c bi t, d a ng, l i ích kinh t c a ngh nuôi tr ng n m r t l n n u c m r ng quy mô cơng nghi p V i m c tiêu tìm hi u, h c t p k thu c Công ngh sinh h c v vi c nghiên c u phát tri n ngh nuôi tr ng n m (n m sò nói riêng ni tr ng n m nói chung), chúng tơi ti n hành nghiên c n m sò t tài p b o qu n gi ng tài ti n hành th i gian sáu tháng, t ng i h c Nông Lâm Thái nguyên, thành ph Thái Nguyên, t nh Thái Nguyên - Nghiên - -P - - Nghiên c p n ng áp d ng cho phân l p gi ng n m khác, bao g m c gi ng n m hoang d i - B o qu n gi ng n m sò phân l thu c ph c v cho nghiên c u c Công ngh sinh h Khai thác ti ng v th c ph m c a gi ng n m sò, ng nhu c u th 27 Dùng que c y v ch m t ô vuông th ch kho ng cm2 có s i n m m c dày, chuy n m nh th Nuôi c h u ki n khơng có ánh sáng, nhi ng m i phòng Theo dõi, ki m tra sau ho c ngày nuôi c y 3.4.3.1 Các công th ng B ng 3.1:Công th ng không ch a khoai tây Tên hóa ch t ng(g/l) Xu t x Peptone Trung Qu c Glucose 20 Vi t Nam Agar 20 Vi t Nam Cám g o 25 Vi t Nam 200 Vi t Nam B ng 3.2:Công th ng không ch a peptone Tên hóa ch t ng(g/l) Xu t x Khoai tây 200 Vi t Nam Glucose 20 Vi t Nam Agar 20 Vi t Nam Cám g o 25 Vi t Nam 200 Vi t Nam 28 B ng 3.3: Cơng th ng khơng có ch a Glucose Tên hóa ch t ng(g/l) Xu t x Khoai tây Vi t Nam Peptone 20 Trung Qu c Agar 20 Vi t Nam Cám g o 25 Vi t Nam 200 Vi t Nam B ng 3.4: Công th ng khơng ch a cám g o Tên hóa ch t ng(g/l) Xu t x Khoai tây Vi t Nam Peptone 20 Trung Qu c Agar 20 Vi t Nam Glucose 20 Vi t Nam 200 Vi t Nam B ng 3.5: Cơng th ng khơng có ch Tên hóa ch t ng(g/l) Xu t x Khoai tây Vi t Nam Peptone 20 Trung Qu c Agar 20 Vi t Nam Glucose 20 Vi t Nam Cám g o 25 Vi t Nam 29 B ng 3.6: Công th ng t ng h p Tên hóa ch t ng(g/l) Xu t x Khoai tây Vi t Nam Peptone 20 Trung Qu c Agar 20 Vi t Nam Glucose 20 Vi t Nam Cám g o 25 Vi t Nam 200 Vi t Nam Công th 3.4.3.2 Chu n b ng ch ch a thóc ng Cân xác riêng bi t t ng thành ph n hóa ch t c c y theo công th ng nuôi công th c 7) Chu n b bình tam giác 250ml, cho hóa ch t v a cân vào bình, b c chi t khoai tây ng gi , ch t l c l y d ch chi t) tinh khu pH = n hóa ch t tan h 6,5 Công th c ch u ch nh ng có pH th p Có th pH lên cao b ng dung d ch NaOH 0,1N Sau chu nhi y u ch nh c kh trùng 1210C, 30 phút c r a s ch, s y khô, h p kh trùng nhi 1210 y khô b ng t s y 700C 20 phút, sau trình s y, ch nhi ho c c t vào t nhi h th p, có th s d ng m dùng d n [6] c ti n hành t c b o khơng có vi khu n t p nhi ng M m n m kho ng 20ml c 30 ng n p h p petri [6] Ch t i th hành gói h p petri vào gi y báo t h i, ti n m 12 gi c xu tránh nh ng gi t ng [6] Sau ki m tra, n không b nhi ng c s d ng cho thí nghi Cơng th ng s ch ch c chu n b riêng n tách v ngu i chuy n vào bình th 1210 p kh trùng ngu i 3.4.3.3 phát tri n c a s i n m sò cơng th Thao tác c y chuy ng c ti n hành t c kim lo i ng n l u que c y r c, ch a s i n m, c y chuy ngu i c kho ng cm2, khơng khí Dùng que c y c t l y mi ng th a công th công th c t i công th ng t c h p kh trùng M i công th c môi i Công th chu n b nhi t c ti c theo ph n chu n b ng m c 3.4.3.2 Ni c y u ki n khơng có ánh sáng, nhi Do có th có cơng th ,v phòng ng khơng thích h p, s i n m phát tri n ch m ho c không m c, sau kho ng ngày nuôi c y, quan sát th y s i n m m c kh i m nh th c c y vào ti a khu n l c 3.4.4 M m b o cho vi c nghiên c u lâu dài, ta c n ph i ti n hành c y gi gi ng Trong nghiên c u này, gi ng n m sò sau phân l b o qu ng th ch nghiêng c 31 Thành ph c chu n b công th c kh ng s i vào ng nghi m có nút bơng, chi ng kho ng 30 - 35 mm Ti n hành kh trùng b ng n i n c 3.4.3.2 Khi trình kh trùng k t thúc, nghiêng kho ng 250 t c y vô trùng Ch th ch ng nghi ngu t gi t N ng khơng có bi u hi n b r i ro nhi m ng s c c y chuy n gi ng n m sau phân l p Khi s i n m lan h t b m t th ch, ng th ch nghiêng s ng 40C) [2] c c t gi vào t l 3.4.5 Gi ng n c phân l ng th ch, s cc y ng thóc, g i gi ng c p (gi ng g c) Gi ng c p s cc y t o thành th qu phòng thí nghi th c chu n b th t gi ng c p c ti n b cơng ng (chai thóc) Chai thóc sau kh trùng s C y m nh th ch vào chai thóc, gi ngu i u ki n khơng có ánh sáng, nhi t phòng Theo dõi ki m tra theo chu k ngày l n [2] Bên c n c chu n b gi ng n m c t cho c tr n theo t l m 70- 80%, kh trùng c y gi ng c y vào chai thóc Gi ng g c có th cc t o th qu n m Vi c kh c ti n hành theo hình th c kh trùng pasteur ho c kh trùng n i h u ki ng, nhi tài t t nghi ng kho ng 60 - 700 c mc t 32 t kho ng 70 - 80% (n m ch t tay s c r k tay) vào túi nilon ch u nhi t ho c chai th u ki nt o thành th qu ) Ti 1210C, at, 30 phút Gi ng n m c c kh trùng cc t t c y vơ trùng Ni phòng t i cho t i s i n m m c kín b m t Cu i cùng, b ch (chai) n m s ni có ánh sáng Vi hè n ng nóng c trì l c chuy u ki n u ki n mùa 33 4.1 P p có tên g y m nh mơ M nh mô lõi c a th qu , bao g m ph n g c ph n lõi c n u có th s d phân l p Trong thí nghi m này, th qu n m sò c xé d c t m t i g c th qu Các m nh mô ph n cu ng c l y b ng kéo ho c dao vô trùng c ng th ch c ch ng minh phù h p v i nhi u lo i n m linh chi, n m sò A B Hình 4.1: K t qu phân l p n m sò b ng ni c y m nh mơ lõi A: S i n m b u m c t m nh mô sau ngày nuôi c y B: S i n m lan r ng, bao ph b m K t qu sau phân l p cho th cho k t qu t t Do th qu ch sau ngày nuôi c y y m nh mô n m c t o nên t t h p h s i n m c p nên s i n m t n t i th qu g u ki n thích h p c ng th ch khoai tây, s có th phát tri n tr l i Sau ngày nuôi c y, có th quan sát th y s i n m b u m c t m nh mô n m b ng m ng (Hình 34 4.1.A) Sau ngày nuôi c y, h s i n m lan r ng, t o thành vòng tròn ng tâm, lan r ng t v trí c y m nh mơ (Hình 4.1.B) Màu s c s i n m tr ng u i màu su t trình sau phân l p c y gi ng c p u cho th y khơng có s nhi m t p c a nh ng lo i n m m c ph bi n phòng thí nghi c xanh, m n 4.2 c phân l p n u ki n h n ch v hóa ch t, d ng c , m u n m l y t th qu mô lõi th qu n c chuy n tr c ti khơng có ánh sáng, nhi u ki n kho ng 250C Theo dõi m nh mô n m sau - ngày nuôi c y K t qu cho th y h s i n tr y m nh u, có màu y m nh mơ (Hình 4.2) Tuy nhiên, nhìn chung i gian m c c a s i n m dài Hình 4.2: Phân l p n m sò chai thóc 35 Q trình c y chuy l c ti n hành t c a quanh mi kim lo a h s i n m, que c y a k ng n l cc i ng n n M nh th ch mang s i n m ng m i Sau ngày th có th c s i n m m c xung quanh m nh th ch (Hình 4.3) A B Hình 4.3: K t qu c y chuy n n m sò A: N m sò sau c y chuy n ngày B: N m sò sau c y chuy n ngày Vi c c y chuy n c c trì liên t c s i n m phát tri n ph kín b m t th ch, n u khơng s i n m có th b già ch t, ho c s i n m có th phát tri m vi sinh v t Gi ng n m sò sau phân l p, n u không xu t hi n lo i m c xanh, m gi c lo i vi khu n, s l nh (nhi c c y sang ng th ch nghiêng c t kho ng 40C).Th t i vài tháng (Nguy n Xuân Thu n, 2009)[6] có th lên 36 4.3 u ng phù h p nh t cho vi c phân l p nuôi s i n m sò, cơng th c thi t k n m K t qu so sánh s phát tri n c a s i ng sau: B ng 4.1: So sánh s phát tri n s i n m sò theo cơng th c ng khác Công th c môi Môi Môi ng ng Môi ng Môi ng Môi ng ng Mơi ng Bán kính khu n l c 2,41 2,37 1,70 2,24 2,73 1,74 : cm) Sau ngày ni c y, s i n m ng có s phát tri n khác nhau, h u h t t o thành m t khu n l c tròn l n, có tâm v trí c y m nh th ch gi ng c tri n xa nh t c ng tròn t ng tròn.Giá tr bán kính trung bình c 1, s 2, s 4, s l n so v nh c ng s s m phát ng s l n ng s phân l ng s 1, s 2, s s c n m sò, có th s d ng công th c môi ng s ng d chu n b nh t không c n ph i s d ng t i gi thu d ch chi t khoai tây Môi ng s có s phát tri n s i n m t t nh tv i 37 ng s 1, s s c ch u ki n phòng thí nghi ng phân l p nuôi c y gi ng n m sò ng s c c y chai th y tinh, vi c bán kính khu n l c không thu n l i Th i gian nuôi c y s i n nhiên, nh u ki n bên ngồi phòng thí nghi m, n ng vơ trùng, s d ng s v n có th thu nh n m sò (Hình 4.4) Hình 4.4: S i n m sò phân l p chai thóc mb c c gi ng 38 c kh trùng b ng n i h p Gi ng c p c u ki t i, nhi u ki n ni c c gi c phòng phòng Sau n m m c lan tr ng b ch ti n hành tháo b ch phòng kho ng 25 300C, ánh sáng bóng râm (trong phòng thí nghi m) Qu th n m b u phát m khơng khí kho ng 90%, nhi tri p ánh sáng m qu th phát tri n t t nh t (ánh sáng ngồi tr i bóng râm) Sau 25 ngày ni c y, thu nh Theo lí thuy t, th qu s tr c th qu m c t b n có d ng san hơ, d ng dùi tr ng, d ng ph u, d ng ph u l ch, d ng l c bình D ng san hô: qu th m i t o thành d ng s i m nh hình chum D ng dùi tr kh ng kính cu cu ng b n gi ng D ng ph t hi n d ng r ng gi a ph u D ng ph u l ch: cu ng l n nhanh m t bên u l ch so v i v D ng l c bình: cu ng ng ng n ti p t c phát tri n [11] Hình nh 4.5 hình nh th qu n m sau 25 ngày c hình thái trung gian gi a d ng dùi tr ng d ng ph t có t 39 Hình 4.5: qu th n m sò sau 25 ngày ni c t 40 m c, p thành cơng gi ng n m sò, khơng nhi m t p lo i n m nh v m t hình thái qua l n c y truy n, phát tri n t t c y t s n xu t - - - Ti p t o thành th qu n m sò - C i ti n quy trình phân l p s n xu ngân hàng gi ng, nghiên c u c i thi n h n h n hóa vi c xây d ng t có th thu nh n th qu m - S d ng quy trình ph n l p n m sò cho q trình phân l p n m dai hoang d i m Thái Nguyên a bàn Xã Quy t Th ng, Thành ph Thái Nguyên, t nh ), Công ngh nuôi tr ng n m t p 2, Nxb Nông 1.Nguy nghi p, Hà N i 2.Nguy n H ng(2004), N khoa h c công ngh nuôi tr ng, 2005, Nxb Nông Nghi p, Hà N i S 3.Tr d ng vi sinh v t có ích t p 1, Nxb Nơng Nghi p, Hà N i -KT Hà N i 4.Lê Xuân Thám(2010), 5.Lê Duy Th ng(2001), s ng d n tr ng n m, Nxb Nông nghi p 6.Nguy n Xuân Thu n (2009), S t tr ng n m, câu l c b n qu c gia xuân th y 7.Vi n Nghiên c u Sinh thái Chính sách Xã h o Th c hành Nông dân Nông nghi p Sinh thái 8.Lê Lý Thùy Trâm (2007), Bài gi ng n m ng 9.Tr n Th L H ng, Hu nh Th Kim Cúc, Tr n Th c, Nguy n Th Nguyên, Vu Th Mùi(2011), ng n m sò, 10 Centro De Biosciencias et al (2012), Self-pasteurized substrate for growing oyster mushrooms (Pleurotus spp), Mexico III Tài li u internet 11 http://s1.doc.edu.vn/jh2i1fkjb33wa7b577g9lou48iyvfkz6/swf/2013/12/1 5/do_an_ky_thuat_trong_nam_bao_ngu_xam_tren_mat_cua.lHQ3KyI3C D.swf ... m sò 20 Hình 4.1: K t qu phân l p n m sò b ng ni c y m nh mơ lõi 33 Hình 4.2: Phân l p n m sò chai thóc 34 Hình 4.3: K t qu c y chuy n n m sò 35 Hình 4.4: S i n m sò. .. 2.1.2 N m sò 2.1.3 Giá tr ng c a n m sò 2.1.4 Giá tr c li u c a n m sò 10 2.1.5 Giá tr kinh t c a n m sò 11 2.1.6 Ni c y n m sò s n xu t n m sò ... d ng cho phân l p gi ng n m khác, bao g m c gi ng n m hoang d i - B o qu n gi ng n m sò phân l thu c ph c v cho nghiên c u c Công ngh sinh h Khai thác ti ng v th c ph m c a gi ng n m sò, ng nhu