Giáo trình bệnh tôm

MỤC LỤC TRANG CHƯƠNG NHỮNG KHÁI NIỆM & PHƯƠNG PHÁP CƠ BẢN NGHIÊN CỨU BỆNH TÔM I Nguyên nhân điều kiện phát sinh bệnh tôm nuôi 1 Vật chủ Tác nhân gây bệnh Môi trường II Phương pháp thu bảo quản mẫu chẩn đốn bệnh tơm Thu mẫu 2 Chuyển mẫu đến phòng thí nghiệm 3 Bảo quản mẫu III Phương pháp phát bệnh tôm nuôi Phải theo dõi thông tin môi trường quản lý ao nuôi Quan sát dấu hiệu bệnh bên thể tơm IV Phương pháp chẩn đốn bệnh Những phương pháp phòng thí nghiệm Phương pháp phân lập định danh vi khuẩn .9 Phương pháp mô học 10 Phương pháp tạo phản ứng chuỗi nhờ polymerase (PCR) 10 CHƯƠNG BỆNH VIRUS I Bệnh MBV II Bệnh đầu vàng III Bệnh đốm trắng .12 13 14 CHƯƠNG BỆNH VI KHUẨN I Bệnh phát sáng II Bệnh Vibrio III Bệnh đốm nâu, đốm đen IV Bệnh vi khuẩn dạng sợi .17 18 18 20 CHƯƠNG BỆNH NẤM VÀ NGUYÊN SINH ĐỘNG VẬT I Bệnh nấm Mycosis 22 II Bệnh vi sinh vật bám 22 CHƯƠNG BỆNH DO CÁC NGUYÊN NHÂN KHÁC I Bệnh mang (mang đen, mang đỏ, phồng nắp mang) II Bệnh hoại III.Bệnh cong thân IV Bệnh lột xác không thành công TÀI LIỆU THAM KHẢO .24 .25 25 26 Những khái niệm phương phápcơ nghiên cứu bệnh tôm CHƯƠNG 1: NHỮNG KHÁI NIỆM & PHƯƠNG PHÁP CƠ BẢN NGHIÊN CỨU BỆNH TÔM I Nguyên nhân điều kiện phát sinh bệnh tôm nuôi Tùy tác giả đề cập bệnh có từ ngữ riêng để diễn tả vấn đề khác Định nghĩa bệnh sau dựa theo "Quản lý sức khỏe tôm ao nuôi" Viện Nghiên cứu Sức khỏe Thủy động vật (AAHRI) Thái lan, xuất năm 1998: "Bất kỳ bất bình thường cấu tạo chức thể sinh vật gọi bệnh Điều có nghĩa bệnh khơng phát sinh lây nhiễm mầm bệnh mà vấn đề môi trường dinh dưỡng gây ra" Bệnh thường phát sinh kết hợp nhiều yếu tố bệnh truyền nhiễm không đơn nhiễm virus hay vi khuẩn Thực diện mầm bệnh mơ khơng có nghĩa mầm bệnh ngun nhân gây bệnh Phần lớn nguyên nhân gây bệnh biến đổi xấu môi trường gây tổn thương đến thể làm giảm khả kháng bệnh tơm Trong lúc mầm bệnh sẵn có mơi trường nhân hội xâm nhập vào thể tôm Do cần phải xem xét vật chủ, mầm bệnh môi trường để xác định nguyên nhân gây bệnh nhằm có biện pháp phòng ngừa xử lý thích hợp Vật chủ Vật chủ tôm, cá hay vật nuôi khác nhạy cảm có tính đề kháng loại bệnh Tính nhạy cảm hay đề kháng vật chủ tùy thuộc vào chế bảo vệ thể vật ni, lứa tuổi hay kích cỡ vật ni, khác lồi điều kiện dinh dưỡng vật nuôi Tác nhân gây bệnh Tác nhân gây bệnh phân làm ba loại tác nhân lý học, tác nhân hóa học tác nhân sinh học - Tác nhân lý học: thay đổi đột ngột yếu tố môi trường nhiệt độ, độ mặn hay pH Tác nhân phóng xạ tia cực tím từ mặt trời tác nhân lý học, vv - Tác nhân hóa học: chất độc, nhiễm mơi trường, điều kiện dinh dưỡng không cân bằng, thiếu vitamin, sử dụng thuốc hay hóa chất liều, vv - Tác nhân sinh học: virus, vi khuẩn, nấm, nguyên sinh động vật số lớn động vật không xương sống khác xem tác nhân sinh học Đây tác nhân gây bệnh quan trọng vật nuôi thường xem xét vật nuôi bị bệnh Chúng thường gọi tác nhân lây nhiễm hay tác nhân gây lây bệnh Tác nhân lây nhiễm có hai đặc tính có khả truyền nhiễm trực tiếp sinh sôi nảy nở thể vật chủ Tác nhân lây nhiễm có mơi trường nước, sinh vật bị nhiễm bệnh, sinh vật truyền bệnh, cá thể bố mẹ thức ăn Phương thức lây truyền chúng theo hai cách truyền nhiễm ngang (trực tiếp hay không trực tiếp) truyền nhiễm dọc (từ hệ bố mẹ truyền cho hệ con) Môi trường Những biến đổi bất lợi môi trường ngồi tự nhiên hay ao ni thường làm cho vật nuôi bị sốc, thể suy yếu dần khả đề kháng tạo điều kiện cho mầm bệnh xâm nhập phát triển thể gây bệnh Do đó, việc quản lý tốt mơi trường nuôi yếu tố quan trọng nghề nuôi thủy sản “Sốc” nhân tố nguy hiểm cho sức khỏe tơm ni Các nhân tố có tác động tiêu cực đến vật nuôi vận chuyển, lưu giữ, nuôi mật độ cao, điều kiện môi trường không thuận lợi thường gọi nhân tố gây sốc II Phương pháp thu bảo quản mẫu chẩn đoán bệnh tơm Thu mẫu Để việc chẩn đốn bệnh nhanh xác, nên đến địa điểm thu mẫu sớm có dấu bệnh để thu mẫu gần chết Hiện nay, tóm tắt cách thu mẫu tiêu chuẩn chủ yếu dựa vào lý thuyết thực tế Nên đến tận nơi để quan sát ghi nhận dấu hiệu bệnh cách thực tế, hỏi cụ thể người ni tình hình bệnh xảy ra, triệu chứng bệnh lý hay tỉ lệ chết Việc tổng hợp thông tin quan trọng nhằm làm cở cho việc chẩn đoán Một hệ thống lưu trữ tập hợp thông tin theo thứ tự mẫu thu phòng thí nghiệm cần thiết Mỗi trường hợp cần có phiếu xét nghiệm hoàn chỉnh theo biểu mẫu nhằm cung cấp thông tin liên quan loại bệnh nghiên cứu ngồi trường phòng thí nghiệm Bước thu mẫu để chẩn đoán bệnh quan sát tổng quát quần thể, sau kiểm tra cá thể (ít 10 mẫu có dấu hiệu bệnh lý) Nên chọn mẫu gần chết, mẫu có dấu hiệu bệnh rõ ràng Mẫu gần chết mẫu tốt để chẩn đốn bệnh thường mẫu tiềm ẩn nhiều loại bệnh, vi khuẩn, virus ký sinh trùng Đối với mẫu chết, đặc biệt mẫu cá, thường hạn chế việc chẩn đoán bệnh cách xác cá chết lồi vi khuẩn vi khuẩn gây bệnh phát triển nhanh nội quan nhớt cá gây khó khăn cho việc phân lập vi khuẩn gây bệnh Các bước thu mẫu để tìm hiểu nguyên nhân gây bệnh là: - Thu thập thơng tin có liên quan thời điểm vật ni bị chết Tìm hiểu điều kiện ao ương yếu tố lý học Đo yếu tố môi trường (Oxy, nhiệt độ, pH, độ mặn) Quan sát mẫu tôm bệnh tôm khỏe Ghi nhận thông tin từ chỗ người nuôi điểm: nên thu thập thông tin vụ nuôi từ nhiều hộ nuôi để làm sở tổng hợp nguyên nhân xảy bệnh Những thơng tin thường nói lên ảnh hưởng, chiều hướng bệnh trở ngại hộ nuôi khác khu vực lân cận, đặc biệt ao ni có nguồn giống Các thơng tin cần thu thập là: - Vị trí trại nuôi Chi tiết nguồn nước cung cấp Kế hoạch nông hộ Chu kỳ sản xuất Công việc ngày Thức ăn Xử lý nước thải Bệnh trở ngại khác Trở ngại Lời khuyên Thu mẫu tôm chết: Số lượng mẫu tối thiểu cần thu khoảng 10 mẫu với dấu hiệu bệnh lý rõ ràng Mẫu tơm chết thường có màu tối, bơi lờ đờ mặt nước Một vấn đề quan trọng cần cân nhắc thu mẫu tránh gây sốc vật ni Trong tình có tơm chết khơng có dấu hiệu bệnh lý cần dựa vào thông tin từ người nuôi nhờ giúp đỡ nhà nghiên cứu môi trường hay độc tố Trong nhiều trường hợp, thành cơng việc giải tình trạng dịch bệnh khu vực ni nhờ vào thơng tin có sẵn kinh nghiệm thực tế Chuyển mẫu đến phòng thí nghiệm Phương pháp chuyển mẫu sống: Mẫu vật chứa bao nylon (2 lớp) với lượng nước khoảng 20-30 % thể tích bao có bơm oxy Mỗi túi chứa cá thể (100g/cá thể) với kích cỡ mẫu vật nhỏ chuyển nhiều cá thể vận chuyển đến phòng thí nghiệm vòng 12 - 24 Cá thể có kích thước lớn nên dùng dụng cụ vận chuyển có kích cỡ lớn để tránh gây sốc làm xây xát Bên cạnh đó, mẫu vật chết chuyển phương pháp Trường hợp sử dụng bao nylon có bơm oxy nên giữ lạnh Điều quan trọng phải làm lạnh mẫu nhanh sau thu mẫu Trong trường hợp thu mẫu thời tiết nóng cần làm lạnh mẫu ao Chuyển mẫu đến phòng thí nghiệm xử lý vòng 24 Bảo quản mẫu Tùy theo yêu cầu phân tích thời gian trữ mà ta có số phương pháp sau:  Làm lạnh: Trữ mẫu ngăn lạnh hay thùng có chứa nước đá nhằm làm ngưng phát triển vi khuẩn tế bào khác mà không gây tượng vỡ tế bào (tế bào máu)  Đông lạnh: Đông lạnh mẫu tủ đông lạnh hay nitơ lỏng Phương pháp có nhược điểm làm dấu hiệu bệnh lý mô mẫu vật nhiên đông lạnh không làm chết tế bào vi khuẩn virus Cần thực thao tác đông lạnh nhanh để tránh nhiễm vi khuẩn khác  Cố định mẫu hóa chất: Thường dùng phương pháp cho nghiên cứu mơ học Q trình cố định mẫu nhanh, mô tế bào giữ ngun Các mẫu vật có kích thước nhỏ ngấm hóa chất nhanh định hình tốt Những mẫu vật lớn cần cắt nhỏ với độ dày khoảng 3-4mm Hóa chất thường sử dụng để cố định mẫu tơm dung dịch Davidson’s có cơng thức sau: 95% ethyl alcohol Formalin Acid acetic Nước cất 30ml 20ml 10ml 30ml  Làm khô: lấy giọt máu để lên lame kính, làm khơ gửi đến phòng thí nghiệm để phân tích Ví dụ: để mẫu máu khơng khí 1-2 ngày cho khơ, nhúng vào methanol tuyệt đối phút để khô Mẫu giữ lâu III Phương pháp phát bệnh tôm nuôi Nếu phát thấy tơm ni ao bị nhiễm bệnh q trễ áp dụng biện pháp chữa trị Điều cần thiết quản lý tốt ao ni cho dịch bệnh khơng có hội bùng nổ Việc phát bệnh khó khăn, trừ có tượng tơm chết hàng loạt Dấu hiệu bệnh thường xuất số cá thể ao nuôi người nuôi cần phải quan sát tôm nuôi thường xuyên nhằm xác định bệnh giai đoạn sớm để có biện pháp kịp thời trước sản xuất bị ảnh hưởng nghiêm trọng Tơm thích lên mặt ao hay ven bờ nước có hàm lượng oxy cao Trong nhiều trường hợp để tránh hàm lượng chất độc cao đáy ao Khi tôm bị bệnh bị tác động xấu từ môi trường, chúng thường lên mặt nước tập trung ven bờ dấu hiệu nghiêm trọng Vì cần phát sớm dấu hiệu khác thường qua sàng ăn chài Kiểm tra ao nuôi vào ban đêm lúc sáng sớm quan trọng tôm bệnh lên mặt nước ven bờ nhiều vào lúc Khi thấy tôm tập trung ven bờ nên kiểm tra đáy ao để biết số tôm chết, khu vực đặt máy sục khí, ao nơi tích cặn bã quanh cống Phải theo dõi thơng tin môi trường quản lý ao nuôi bao gồm: - Chất lượng nước đặt biệt hàm lượng oxy hòa tan, pH nhiệt độ Những biến động thời tiết mưa lớn Tình trạng đáy ao Sự phát triển tảo Quản lý nước - Xử lý nước Sục khí Quan sát dấu hiệu bệnh bên ngồi thể tơm Những dấu hiệu bệnh lý bên ngồi thể tơm ni thường khơng cung cấp thông tin định tác nhân gây bệnh Phức tạp dấu hiệu bệnh lý nhiều tác nhân gây cộng với biến đổi bất lợi yếu tố môi trường Việc chẩn đoán bệnh đơn dựa vào dấu hiệu bên ngồi khơng xác mà cần phải thực với kết chẩn đoán khác Các bước quan sát dấu hiệu bệnh tiến hành sau:  Quan sát bể Chọn cá thể có dấu hiệu bệnh rõ ràng hay cá thể chết vào bể nước có sục khí có độ mặn ao ni Trong trường hợp tôm bị ảnh hưởng môi trường xấu bình phục sau khoảng hai đồng hồ dấu hiệu mang có màu đen hay xám biến  Màu sắc thể: Hiện tượng đỏ thân hay đỏ phụ tôm nuôi nhiều tác nhân gây bệnh khác gây nên Cũng có trường hợp nhiều tác nhân gây bệnh kết hợp gây nên tình trạng Mặc dù vậy, dấu hiệu đỏ thân hay đỏ phụ giúp cho người chẩn đoán đề xuất khả xác định tác nhân gây bệnh nhanh xác Thí dụ: tơm giai đoạn ấu trùng tác nhân gây bệnh đỏ thân vi khuẩn, hậu ấu trùng tơm lớn ngun nhân bao gồm vi khuẩn (chủ yếu nhóm Vibrio), virus đặc biệt virus gây bệnh đốm trắng nhân tố gây sốc Sự xuất đốm trắng vỏ thường tôm bị nhiễm virus đốm trắng Tuy nhiên, đốm trắng vỏ tơm nguyên nhân có liên quan đến pH hay ảnh hưởng hàm lượng canxi nước Muốn xác định cách xác nguyên nhân gây tượng đốm trắng vỏ tơm, cần phải tiến hành bước kiểm tra chẩn đóan phòng thí nghiệm (PCR, mô bệnh học ) Hiện tượng vỏ tôm có màu xanh hậu biến động xấu môi trường nuôi thành phần sắc tố có thức ăn tơm ni Mặt khác, có trường hợp tượng vỏ tơm có màu xanh tôm bị nhiễm virus gây bệnh hoại tử quan tạo máu quan lập biểu mô, xuất huyết ruột hay thiếu astaxanthin Hiện tượng đầu vàng thường tôm bị bệnh gan tụy hay bị nhiễm virus gây bệnh đầu vàng Tuy nhiên có tơm bị nhiễm virus lại khơng có dấu hiệu đầu vàng Cho nên việc quan sát dấu hiệu bệnh, việc xác định tác nhân gây bệnh quan trọng Thịt tơm có màu trắng đục khác với bình thường trắng hay trắng mờ có liên quan đến xuất huyết ruột, teo bị nhiễm vi bào tử trùng  Màu sắc mang Hiện tượng mang tơm có màu nâu hay đen nhiều ngun nhân gây nên, quan sát dấu hiệu bên ngồi khơng thể kết luận điều Lập tiêu tươi quan sát kính hiển vi việc phải làm để xác định nguyên nhân gây tượng Nguyên nhân thơng thường hàm lượng oxy hồ tan nước thấp tơm bị bẩn nước có nhiều chất hữu cơ, thức ăn thừa hay tảo Nếu nguyên nhân sau thả tơm vào bể nước vòng tơm hoạt động bình thường trở lại màu nâu hay đen mang tôm biến Hiện tượng mang tơm có màu nâu xuất ao có tượng phát quang mạnh vào ban đêm Màu sắc mang tôm trường hợp giống với trường hợp tôm bị ảnh hưởng hàm lượng oxy hoà tan thấp Nếu hàm lượng oxy hoà tan nước nằm giới hạn cho phép tôm chết nhanh với tỉ lệ cao ngun nhân gây nên tượng mang tơm có màu nâu gan tụy bị nhiễm độc tố sinh vi khuẩn Vibrio harveyi Trong trường hợp gan tụy bị nhiễm khuẩn mức độ hay vừa mang có màu nâu khơng dễ tìm thấy tế bào vi khuẩn máu, mơ hay mang trường hợp tôm nhiễm khuẩn nặng Hàm lượng oxy hòa tan nước thấp làm cho mang tơm có màu nâu nhạt nâu đỏ tượng biến nhanh chóng cho tôm vào bể nước Nhưng hàm lượng oxy hòa tan nước thấp kéo dài ao có nhiều chất vẩn hữu cơ, thức ăn thừa, bùn tảo tơm ngày yếu khả tự làm mang Điều làm cho mang tôm ngày bẩn có màu nâu sẫm Sự tiết hắc tố (melanin) hoạt động men phenol oxidase (PO) lên hợp chất hữu thơm amino acid tyrosine tạo sắc tố màu nâu đen Khi diện mức độ thấp chúng có màu nâu mức độ cao chúng có màu đen Hắc tố tiết tác động vi sinh vật (vi khuẩn hay nấm), nhân tố gây sốc mơi trường (hàm lượng oxy hòa tan thấp) chế độ dinh dưỡng (thiếu Vitamin C) Trong trường hợp hàm lượng oxy hòa tan thấp quan sát tiết hắc tố cách lập tiêu tươi mẫu mang quan sát thấy mang có màu nâu đỏ Sự thay đổi màu sắc không xuất vỏ máu dịch mơ Khác với tượng mang có màu nâu sinh vật bám hay chất vẩn nước thường thấy vỏ Trong trường hợp tôm bị nhiễm khuẩn mãn tính, bị thương hay bị sốc kéo dài hắc tố tích tụ ngày nhiều gây nên vết thương có màu nâu nhạt, nâu thẫm hay đen mô Vi khuẩn gây bẩn tôm thường vi khuẩn dạng sợi, diện nhóm vi khuẩn dạng sợi với số lượng lớn dấu hiệu lột xác kéo dài tôm hay chất lượng môi trường xấu Các vi khuẩn gây bẩn thường biến tôm lột xác Nhiễm khuẩn mãn tính vi khuẩn Vibrio hay lồi vi khuẩn phân hủy kitin khác có khả gây nên tiết hắc tố mang tôm tích tụ máu vị trí bị nhiễm khuẩn Những chổ bị nhiễm khuẩn thường có màu đen vỏ hay vỏ Hiện tượng mang tơm có màu xanh thường tảo lục tảo lam gây nên Trong trường hợp sau thả tôm vào bể nước vòng tơm hoạt động bình thường trở lại màu xanh mang tôm biến  Phụ Phụ tôm dễ bị tổn thương nuôi mật độ cao tôm thường hay công lẫn Những chổ bị tổn thương phụ đường xâm nhập vi khuẩn, nấm ký sinh trùng vào thể tơm Sự có mặt sinh vật gây tượng xuất huyết kèm theo tiết hắc tố Nếu loại bỏ nguyên nhân gây tổn thương quản lý tốt môi trường nuôi với chế độ dinh dưỡng hợp lý tôm phục hồi nguyên vẹn phụ lần lột xác  Lớp biểu bì Sự thay đổi màu sắc thấy lớp biểu bì da Hắc tố tiết lớp biểu bì thường biến tơm lột xác thay lớp biểu bì tác nhân gây nhiễm loại bỏ Sự tiết hắc tố thường có liên quan đến bệnh nấm fusarium, bệnh mycobacterium, nhiễm Taura syndrome virus thiếu Vitamin C  Cơ Mơ tơm có có màu nâu hay đen rõ (bệnh Vibrio-mảng đen, nấm mycosis, vi khuẩn mycobacterium) Biểu có hay khơng có liên quan đến lớp biểu bì phía nhiều trường hợp nhìn thấy rõ loại bỏ lớp biểu bì Rõ ràng khơng phải lúc tôm tiết hắc tố phản ứng tự vệ để chống lại xâm nhập vi sinh vật Nhiễm vi bào tử trùng làm cho tơm có màu trắng đục Trong trường hợp đòi hỏi phải phân tích mơ bệnh học để việc xác định ngun nhân Có người ta thấy thịt tôm sú nuôi ao có vệt đen chúng khơng biểu rõ lột vỏ chế biến phát Màu đen lên rõ sau tơm nấu chín thường làm cho tôm giá trị thương phẩm Nguyên nhân tượng chưa xác định  Túi tinh Ở tôm bị bệnh đen túi tinh, túi tinh có màu nâu hay đen Bệnh gây chết tôm thường sinh tinh trùng không bình thường  Tăng trưởng chậm hay tơm bị còi Khi thấy tơm có dấu hiệu tăng trưởng chậm hay bị còi phài xét đến tác động tác nhân gây bệnh truyền nhiễm ao nuôi Những tác nhân không gây bùng nổ bệnh làm cho tơm chậm lớn Tăng trưởng chậm có xuất với tượng chủy bị cong Ở tơm sú tăng trưởng chậm bất thường có nhiều khả có liên quan đến việc tơm bị nhiễm virus Parvo gây bệnh gan tụy  Dị dạng Những dấu hiệu bất thường hình dạng thể hay phụ tơm tác nhân gây bệnh truyền nhiễm, điều kiện môi trường bất lợi hay chế độ dinh dưỡng khơng hợp lý Có yếu tố tác động đến tôm trình lột xác để lại hậu sau tôm lột xác Trong nhiều trường hợp, ấu trùng, hậu ấu trùng hay tôm trưởng thành lột bỏ hết lớp vỏ cũ kết có làm cho tôm chết Trong điều kiện hàm lượng oxy hòa tan thấp tơm bị sốc mạnh, bụng bị teo lại Nếu tình trạng kéo dài làm trắng tôm chết Những trở ngại trình lột xác ấu trùng hậu ấu trùng thường gây nên tình trạng tơm bị dị dạng dễ quan sát mắt thường Quan sát tơm kính hiển vi bước để xác định nguyên nhân Trong nhiều trường hợp nguyên nhân tơm thiếu lecithin nên lột xác không thành công chết  Mềm vỏ Vỏ tơm cứng nhờ có calcium carbonate (CaCO 3) Sau lột, vỏ mềm phải vài cứng hoàn toàn Trong thời gian tôm dễ bị tổn thương bị tơm khác ăn thịt Ngồi tự nhiên, chúng tìm cách tự bảo vệ trình lột xác cách vùi đáy hay trốn hốc đá Tuy nhiên chúng làm điều điều kiện ao ni Q trình làm cứng vỏ thường bị ảnh hưởng yếu tố thủy hoá, dinh dưỡng hay mầm bệnh Hiện tượng mềm vỏ tơm thường có liên quan đến virus gây hội chứng Taura tượng hoại tử gan tụy  Màu sắc độ đầy ruột Ruột đầy màu sắc ruột thường quan sát nhằm đánh giá tình trạng sức khoẻ tơm ni Bình thường bụng tơm có màu trắng quan sát dễ dàng ruột đầy hay rỗng để biết tơm ăn nhiều, hay khơng ăn Trong trường hợp tôm không ăn cần phải xác định nguyên nhân Ruột tơm có màu trắng thường có liên quan đến nhiễm virus Baculor gây hoại tử ruột Bệnh virus Chẩn đốn Phòng bệnh III Bệnh đốm trắng gan tụy chuyển màu vàng sưng Sau 1-2 ngày, tôm bắt đầu lờ đờ mặt nước ven bờ chết với mức độ tăng dần Tỉ lệ tơm chết lên đến 100% vòng 3-5 ngày sau bệnh bộc phát Bệnh thường kết hợp với tượng tảo nở hoa, đáy ao nuôi xấu, mật độ nuôi cao ảnh hưởng thuốc trừ sâu  Dựa dấu hiệu bệnh  Quan sát mẫu máu nhuộm thuốc nhuộm Giêm sa kinh hiển vi  Nhuộm Hematoxylin Eosin  Kỹ thuật lai phân tử  Kỹ thuật tạo phản ứng chuổi nhờ polymerase (PCR)  Chọn tôm giống tốt không nhiễm bệnh đầu vàng  Loại bỏ tôm bệnh  Tẩy trùng ao ương nuôi kênh cấp nước thật triệt để trước ni  Xử lý nước kỹ trước nuôi chlorine 25 ppm Hạn chế thay nước nuôi xử lý nước thải chlorine Tác nhân Virus hình trứng, có màng bao, virion có (~ 130 x 280 nm) Nuclocapsit xoắn ốc (~ 65 x 330 nm), Hệ gen ADN sợi xoắn kép dạng vòng lớn (~305 kbp) Hai loại protein màng bao VP28 VP 29 loại nucleocapsit protein VP15, VP24 VP 26 Họ Nemaviridae giống Whispovirus Virus gây bệnh đốm trắng có khả gây bệnh nhiều loài giáp xác làm tổn thương nhiều loại tế bào thể ký chủ có quan sinh dục Phân bố Trung Quốc, Nhật Bản, Thái Lan, Indonesia, Philipin, Đài Loan, Việt Nam Loài nhiễm bệnh Giai đoạn nhiễm Các lồi tơm, cua biển Bệnh virus Dấu hiệu bệnh Chẩn đốn Phòng bệnh Các giai đoạn từ mysis đến tôm bố mẹ Đặc biệt, tôm từ 4-15g/con mẫn cảm với bệnh đốm trắng Tơm có nhiều đốm trắng khoảng 0,5 - 3mm xuất bên vỏ, vỏ đầu ngực đốt bụng thứ sau lan khắp thể tơm Tơm bị nhiễm bệnh bơi lờ đờ, lên mặt hay bám vào bờ ao Phụ bị gãy Tôm giảm ăn Virus gây bệnh đốm trắng thường bộc phát thành dịch  Dựa vào dấu hiệu bệnh  Nhuộm mẫu biểu mô hay vỏ, mang, dày thuốc nhuộm Giêmsa, phát tế bào rỗng  Nhuộm phận biểu mô, tuyến râu, quan tạo bạch cầu hay tim thuốc nhuộm Hematoxilin Eosin  Kỹ thuật lai phân tử  Kỹ thuật tạo phản ứng chuổi nhờ polymerase (PCR)     Chọn tôm giống tốt không nhiễm bệnh đốm trắng Loại bỏ tôm bệnh Tẩy trùng ao ương ni kênh cấp nước thật triệt để Xử lý nước kỹ trước nuôi chlorine 25 ppm Hạn chế thay nước nuôi xử lý nước thải chlorine Tôm bị bệnh đốm trắng (Trích Quản lý sức khỏe ao ni tơm, 2002 Lightner, 1996) Bệnh vi khuẩn CHƯƠNG 3: BỆNH VI KHUẨN I Bệnh phát sáng Tác nhân Do vi khuẩn Vibrio đặc biệt V harveyi gây Bệnh thường xuất môi trường nước giàu dinh dưỡng, nhiều chất hữu cơ, xác bã xuất quanh năm Trong sản xuất giống, mầm bệnh lây truyền chủ yếu từ ruột tôm mẹ cho ấu trùng q trình sinh sản Lồi nhiễm bệnh Phổ biến lồi tơm biển tơm cành xanh Giai đoạn nhiễm bệnh Chủ yếu giai đoạn tôm ương trại trứng, ấu trùng, tôm bột Phân bố Phổ biến vùng nước lợ Triệu chứng Tơm nhiễm bệnh bị yếu, thân có màu trắng đục Tôm chết thường lên mặt nước hay ven mé bờ Tôm nhiễm bệnh nặng bỏ ăn, lắng xuống đáy bể, quan sát vào ban đêm thấy tượng phát sáng, tôm chết hàng loạt nhanh đến 80-100% Cơ hay máu tôm chết có nhiều vi khuẩn hình que, di động Gan tụy nơi bị hoại nặng làm chức tiêu hóa gây chết Chẩn đốn Dựa vào dấu hiệu bệnh Phân lập vi khuẩn môi trường phát quang Phòng trị Phòng bệnh: Xử lý nước ương chlorine 20-25 ppm Tránh tượng môi trường nước giàu dinh dưỡng, nhiều chất hữu cơ, xác bã Chọn tôm mẹ tôm giống không nhiễm vi khuẩn phát sáng Trị bệnh: dùng thuốc đặc trị bệnh phát sáng 17 II Bệnh Vibrio Tác nhân Chủ yếu Vibrio parahaemolyticus, V alginolitycus, V harveyi số loài khác thuộc giống Vibrio Loài nhiễm bệnh Tất lồi tơm biển, tơm xanh cua Giai đoạn nhiễm bệnh Giai đoạn ấu trùng, tôm bột, giống trưởng thành Phân bố Phổ biến vùng nước lợ Triệu chứng Tôm nhiễm bệnh thường bơi lội phương hướng, phận vỏ, phụ chân, râu mang bị nhiễm khuẩn có màu đen đỏ hay đỏ nâu, vỏ bị ăn mòn, có màu trắng đục Ấu trùng nhiễm bệnh thường có màu đen đỉnh phụ bộ, tôm bỏ ăn, ruột rỗng Tôm chết dần, chết 100% Chẩn đoán Dựa vào dấu hiệu Phân lập vi khuẩn mơi trường TCBS Phòng trị Phòng bệnh: Tẩy trùng bể, ao nuôi kỹ, quản lý môi trường tốt, hạn chế gây sốc thương tích cho tơm Trị bệnh: Đối với ấu trùng tôm bột, dùng formaline 10-25 ppm, erythromycine 0,5-1,3 ppm, oxytetracyline 1-10 ppm Đối với tôm lớn, dùng oxytetracyline 1,5 g/kg thức ăn III Bệnh đốm nâu, đốm đen Tác nhân Vi khuẩn nhóm Vibrio, Aeromonas, Flavobacterium Pseudomonas gây bệnh Các vi khuẩn có khả tiết nhiều loại men làm ăn mòn vỏ biểu mơ tơm Các yếu tố khác môi trường dơ bẩn, tôm bị sốc, bị thương tích, mật độ dày, chăm sóc quản lý nguyên nhân cho bệnh phát sinh Loài nhiễm bệnh Tất lồi tơm biển, tơm cành xanh Giai đoạn Tất giai đoạn ấu trùng, tôm bột, giống tôm lớn Phân bố Khắp nơi Triệu chứng - Vỏ giáp, phụ mang tơm có đốm hay mãng nâu hay đen, đơn độc hay tạo thành đám rộng - Dưới vỏ xuất vết phồng chứa dịch keo nhờn, bệnh nặng vỏ bị ăn mòn, lở loét đến lớp biểu bì - Các phụ râu, chân, càng, chủy bị ăn mòn có vết đen - Những vết lở loét tạo hội cho mầm bệnh khác công vi khuẩn dạng sợi, nấm, nguyên sinh động vật tảo làm bệnh thêm trầm trọng - Bệnh lây lan nhanh nhiễm bệnh 100% số lượng tơm Tơm nhiễm bệnh ăn, bơi lờ đờ, thăng bằng, khó lột xác thường bị dính vào vỏ cũ lột gây nên tượng phụ bộ, dị tật hay bị chết Nếu tơm bị bệnh nhẹ sau lột lớp vỏ cũ thay vỏ tơm trở lại bình thường, bệnh nặng để lại vết thương vỏ - Tôm nhiễm bệnh trở nên mẫn cảm với sốc môi trường, dễ ăn Đối với ấu trùng, đốm đen thường bắt đầu mặt lưng đốt bụng thứ bị thương tích trình búng giật ngược va chạm vào thành bể Chẩn đốn Phòng trị  Dựa vào dấu hiệu bệnh  Phân lập vi khuẩn môi trường chọn lọc Phòng bệnh: Giữ mơi trường ni tốt, đầy đủ dinh dưỡng Tránh gây sốc hay thương tích cho tơm, ni mật độ q dày Trị bệnh: Có thể dùng thuốc kháng sinh đặc trị IV Bệnh vi khuẩn dạng sợi Tác nhân Do vi khuẩn Leucothrix sp gây Các tế bào vi khuẩn có hình trụ, dài khoảng 3m với sợi tơ dài đến khoảng 5mm Sợi tơ khơng màu Vi khuẩn dính vào bề mặt vật rắn, có tính cử động, hiếu khí Ngồi số vi khuẩn dạng sợi khác Thiothrix sp Flexibacter sp., Cytophaga sp., Flavobacterium sp Cũng xuất Các vi khuẩn sống tự hay hội sinh bề mặt vật chủ Ngoài ra, điều kiện nuôi nước ao giàu dinh dưỡng tạo điều kiện cho bệnh xuất Loài nhiễm bệnh Tất lồi tơm biển, tơm hùm, tơm cành xanh cua biển Giai đoạn nhiễm bệnh Tất giai đoạn phát triển tôm Phân bố Rộng khắp, nước hay lợ, mặn Triệu chứng Ở trứng nhiễm bệnh vi khuẩn bám thành thảm dày vỏ, làm cản trở hô hấp hay nở trứng Ở ấu trùng tôm bột, vi khuẩn dạng sợi phát triển bề mặt thể, lông phụ Ở tôm lớn, vi khuẩn diện lông tơ chân đuôi, chân bụng, chân ngực, vảy râu, phụ miệng mang Tôm nhiễm bệnh nặng mang có màu vàng đến xanh tùy theo loại rong tảo mắc vào đám vi khuẩn Vi khuẩn dạng sợi làm cản trở hô hấp, lột vỏ, bắt mồi, hoạt động tôm, gây chậm lớn hay gây chết tơm Bệnh gây chết 80% hay hơn, vòng vài ngày đến vài tuần Chẩn đốn Xét nghiệm trực tiếp mẫu tươi kính hiển vi Mẫu ấu trùng, phụ chân, râu, mang tơm giống tơm lớn Phòng trị Phòng bệnh: Giữ mơi trường ni tốt, dinh dưỡng tốt Trị bệnh: Thuốc tím (KMnO4) 2,5-5ppm giờ; Formaline 1025ppm; Chloramine T 5ppm; Oxytetracyline 100ppm; Neomycine 10ppm; Streptomycine 1-4ppm Vi khuẩn phát quang môi trường Luminescen Vi khuẩn dạng sợi thân tơm (Trích Quản lý sức khỏe ao nuôi tôm, 2002) Bệnh nấm nguyên sinh động vật CHƯƠNG 4: BỆNH NẤM VÀ NGUYÊN SINH ĐỘNG VẬT I Bệnh nấm Mycosis Tác nhân Chủ yếu nấm Legenidium sp gây Ngoài loài khác thường kết hợp Sirolpidium sp., Haliphthoros sp., Atkinsiella sp Nguồn mang lây bệnh nấm cho ấu trùng ương ni bố mẹ, nước ni hay ấu trùng bị nhiễm bệnh Loài nhiễm bệnh Tất lồi tơm biển Giai đoạn Chủ yếu trứng ấu trùng Tuy nhiên, tôm giống tơm trưởng thành bị thương tích bị nhiễm nấm nguồn lây bệnh cho trứng ấu trùng qua trình sinh sản Triệu chứng Nấm phát triển thành mạng lưới khắp bề mặt trứng, thể phụ ấu trùng Sau nấm ăn sâu vào thay phần ấu trùng Trứng ấu trùng tôm bị nhiễm nấm Mycosis chết nhanh từ 20 -100% vòng 48-72 Chẩn đốn Sợi nấm có màu xanh vàng nhạt Nấm có phần ăn vào trứng hay mơ ấu trùng có phần ống nhơ Vật chủ phản ứng lại xâm nhập nấm cách tiết sắc tố melanin có màu đen Phòng trị Nên xử lý tôm bố mẹ trước cho đẻ Vệ sinh bể ương chlorine 500ppm, formaline 50ppm chất tẩy 50ppm Có thể dùng Formaline 10ppm để trị II Bệnh vi sinh vật bám Tác nhân Bệnh vài nhóm hay nhiều nhóm sinh vật gây vi khuẩn dạng sợi, nấm, nguyên sinh động vật hay tảo Các mầm bệnh phát sinh từ mơi trường ni, lây từ bố mẹ cho trứng qua trình sinh sản hay từ trứng cho ấu trùng qua trình ấp nở Các yếu tố khác muối sắt, chất vẩn, bùn, mùn bã kết hợp gây Loài nhiễm bệnh Tất lồi tơm biển Giai đoạn Tất giai đoạn phát triển tôm Triệu chứng Tôm nhiễm bệnh khắp bề mặt thể dơ bẩn sinh vật bám Tùy loài sinh vật bám mà thể, mang hay phụ tơm có màu khác màu rong tảo rong tảo bám, màu bùn đen chất bùn hữu làm bẩn, màu trắng đục nguyên sinh động vật bám Tôm nhiễm bệnh có triệu chứng lờ đờ ln di chuyển mặt hay tập trung mé ao Chẩn đoán Dựa vào triệu chứng, quan sát hoạt động tôm Quan sát trứng mẫu tươi phận mang, phụ bộ, râu chân, kính hiển vi Phòng trị Giữ mơi trường ni tốt, màu nước tốt, chất cặn bã hữu Xử lý tôm bố mẹ, giống trước nuôi Xử lý trứng Artemia trước cho nở Xử lý bể ương 25-250ppm vòng cho tơm lớn 10ppm cho ấu trùng Ấu (Trích Quản lý sức khỏe ao nuôi tôm, 2002) Bệnh nguyên nhân khác CHƯƠNG 5: BỆNH DO CÁC NGUYÊN NHÂN KHÁC I Bệnh mang (mang đen, mang đỏ, phồng nắp mang) Tác nhân Bệnh mang nhiều nguyên nhân tác động Bệnh yếu tố vô sinh nhiễm độc kim loại nặng như: Cadium, đồng, Permanganate Kali; ao bị phèn; nước đáy ao dơ bẩn với hàm lượng nitrate, Nitrite, Amonia H2S cao; nhiễm độc Ozon; nhiễm dầu thô hay thuốc trừ sâu; trình trạng thiếu oxy kéo dài Các yếu tố hữu sinh virus, vi khuẩn, nấm, protozoa, tảo công gây bệnh mang tôm Bệnh đen mang tôm thiếu vitamin C Giáp xác chân (Isopoda) thường ký sinh mang giáp xác làm phồng mang đen mang Tùy theo nguyên nhân mà bệnh có thề khác đen mang (chủ yếu dơ ao), mang đỏ (chủ yếu thiếu Oxy), mang vàng phồng lên (do phèn), mang có màu xanh nâu tảo lục hay tảo khuê Lồi nhiễm bệnh Tất lồi tơm biển, tơm hùm, tôm xanh, cua biển Giai đoạn Chủ yếu giai đoạn tôm, cua giống trưởng thành Triệu chứng Giai đoạn nhẹ, mang tơm có chấm nâu, đen Bệnh nặng, tồn mang có màu nâu đen, bị hoại tử Mang đen phản ứng tiết sắc tố melanine thể mầm bệnh Các vi khuẩn, nấm, protozoa, tảo hay sinh vật hội cơng vào mang mang có màu sắc đặc trưng Mang bị phồng lên hay có màu đỏ Tơm cua bị bệnh, mang bị tổn thương, hô hấp bị ảnh hưởng nghiêm trọng, môi trường thiếu oxy Tôm cua bỏ ăn, lờ đờ Tôm cua bị bệnh chết rải rác đến 80-90% hay giảm chất lượng thương phẩm Phân bố Rộng khắp Chẩn đoán Quan sát dựa vào dấu hiệu mang mắt thường kính hiển vi Các bước cấy vi khuẩn cần thiết Ngồi ra, chẩn đốn ngun nhân cách đánh giá môi trường, điều kiện nuôi Phòng trị Dựa vào ngun nhân để có biện pháp xử lý thỏa đáng Cần cải thiện điều kiện môi trường nuôi dinh dưỡng II Bệnh hoại Tác nhân Chủ yếu sốc môi trường nhiệt độ độ mặn thay đổi đột ngột, Oxy thấp, mật độ cao, sinh vật bám Loài nhiễm bệnh Tất lồi tơm biển Giai đoạn Tất giai đoạn chủ yếu từ PL, tôm giống đến trưởng thành Triệu chứng Tơm bệnh có vùng trắng đục bụng sưng lên, sau lở loét, đặc biệt đốt bụng thứ 4,5 Đôi phụ bị hoại Cũng có trường hợp tượng bị hoại đốt đi, sau hoại dần lên phần đầu Các vi khuẩn nấm, protozoa sau công vào vết thương làm bệnh trở nên trầm trọng Tơm cân điều hòa thẩm thấu, bỏ ăn Tơm chết với số lượng không đáng kể đến 100% đàn Phân bố Rộng khắp Chẩn đốn Quan sát tơm bệnh mắt thường hay quan sát mẫu kính hiển vi Xét nghiệm phương pháp mô học mẫu bị hoại tử Phòng trị Dựa vào nguyên nhân gây bệnh để có biện pháp xử lý phương pháp cải thiện mơi trường hay cải thiện chăm sóc quản lý hay dùng hóa chất trị Để phòng nên tránh làm sốc tôm III Bệnh cong thân Tác nhân Khi tôm bị yếu suy dinh dưỡng hay môi trường bất lợi với việc gây sốc tơm lúc trời nóng Lồi nhiễm bệnh Hầu hết lồi tơm biển Giai đoạn Tôm giống tôm trưởng thành Triệu chứng Khi bị sốc tôm búng đuôi thể bị cong mà khơng duỗi bình thường trở lại Tơm bệnh nhẹ bơi lội với tình trạng "lưng gù" Tuy nhiên, bệnh nặng tôm thường nằm nghiêng bên Vài tơm bệnh phục hồi gây khó khăn cho tôm lột xác, bơi lội bắt mồi Phân bố Rộng khắp Chẩn đoán Dựa vào triệu chứng bệnh Phòng trị Cung cấp dầy đủ thức ăn, tránh gây sốc hay động tơm lúc trời nóng IV Bệnh lột xác không thành công Tác nhân Không rõ, ương tôm môi trường nước bệnh tăng 20-30% so với nước xanh Có lẽ chất lượng nước nước xanh tốt Cũng thiếu Leucithin Có liên quan hoại vỏ với bẩy lột vỏ Nước ương nuôi với hàm lượng đạm (N) cao trở ngại cho lột vỏ Loài nhiễm bệnh Các lồi tơm cua Giai đoạn Hậu ấu trùng, giống tôm cua lớn Triệu chứng Xuất thường cuối giai đoạn ấu trùng đầu giai đoạn Pl Khi lột xác, phụ thường bị vỏ dính, khơng lột Có lột bị dị dạng phụ bộ, hay bị chết sau lột xong Trong số ấu trùng giai đoạn cuối hay giai đoạn đầu Pl chết, có 85% bị bẫy lột xác hay dị dạng phụ Có thể gây chết 30% ấu trùng Phân bố Rộng khắp Phòng trị Cho ăn thêm đậu nành hay thức ăn có nhiều leucithin với chất lượng nước tốt giảm bệnh Tăng cường Artemia Tôm bị đen mang Tôm bị cong thân TÀI LIỆU THAM KHẢO Ellis, A.E (1985) Fish and Shellfish Pathology Academic press London Sindermann C.J and D.V Lightner 1988 Disease diagnosis and Control in North American Aquaculture Elsevier Scientific Publisher 431p Shariff, M., R.P Subasinghe and J R Arthur, 1992 Disease in Asian Aquaculture I Fish Health Section, Asian Fisheries Society, Manila, Philippines Quản lý sức khỏe ao nuôi tôm Khoa Thủy Sản, Đại học Cần Thơ dịch 2002 Barrow, G I and R K A Feltham (1993) Covan and Steel’s Manual for the Identification of Medical Bacteria nd edn Cambridge University Press Cambridge Tower, K.J and A Cockayne (1993) Molecular Method for Microbial Identification and Typing Chapman & Hall, London Lightner, D.V 1996 (Ed.), A handbook of shrimp pathology and diagnostic Procedures for disease of cultured Penaeid shrimp World Aquaculture Society, Baton Rouge, LA, USA Bản tin tôm, số 32, trang 12 Bản tin tôm, số 52, trang 14 10 Bản tin tôm, số 51, trang 10 11 Bản tin tôm, số 23, trang 15 12 Bản tin tôm, số 30, trang 10 13 Bản tin tôm, số 25, trang 12 14 Hảo, N.V., 2000 Một số vấn đề kỹ thuật nuôi tôm sú công nghiệp Nhà xuất nông nghiệp TPHCM 15 Hảo, N.V., 1995 Bệnh tôm số hiểu biết cần thiết biện pháp phòng trị Nhà xuất nơng nghiệp TP HCM 16 Nhiên, N N., 1992 Phương pháp nghiên cứu vi sinh vật gây bệnh tôm cá 17 Nho, N.T., N.A Tuấn, T.K Thường, 1994 Hướng dẫn kỹ thuật nuôi tôm sú 18 Phẩm, L Đ, 1992 Vi sinh vật nguồn nứơc, quan hệ chúng với bệnh tôm cá 19 Manual of diagnostic Tests for Aquatic Animals, 2003 http://www.oie.int 28 ... sánh trước đến trình tự thức, vv Bệnh virus CHƯƠNG 2: BỆNH VIRUS Bệnh virus xuất nhiều gây thiệt hại nghiêm trọng cho nghề nuôi tôm Châu Á bệnh đầu vàng bệnh đốm trắng Năm 1986, bệnh đầu vàng... trúc mô mức độ hiển vi mô bệnh học chuyên môn hẹp phương thức mô học đề cập tới q trình phát triển bệnh Mơ bệnh học kỹ thuật quan trọng nghiên cứu bệnh tôm nhiều trường hợp bệnh chẩn đốn phương pháp... phương phápcơ nghiên cứu bệnh tôm CHƯƠNG 1: NHỮNG KHÁI NIỆM & PHƯƠNG PHÁP CƠ BẢN NGHIÊN CỨU BỆNH TÔM I Nguyên nhân điều kiện phát sinh bệnh tôm nuôi Tùy tác giả đề cập bệnh có từ ngữ riêng để