Xây dựng quy trình công nghệ sản xuất một số chế phẩm sinh học và đánh giá hiệu quả tác dụng của các chế phẩm này đối với việc chăn nuôi lợn

Trên thế giới, chăn nuôi lợn là ngành kinh doanh lớn, thịt lợn chiếm 40% tổng lượng các loại thịt (thịt bò 31%, thịt gia cầm23%, thịt cừu 6%). ở Việt Nam, chăn nuôi lợn là nghề truyền thống của hàng triệu hộ dân, thịt lợn chiếm 70% tổng lượng các loại thịt tiêu thụ hàng ngày trên thị trường. [1] Trong những năm gần đây, với xu hướng đa dạng hoá vật nuôi trên các địa bàn sản xuất, trong phạm vi cả nước, ngành chăn nuôi lợn đã có những bước phát triển không ngừng. Sản phẩm từ thịt lợn không những đã đáp ứng nguồn thực phẩm cho nhu cầu tiêu dùng trong cả nước mà còn xuất khẩu thu ngoại tệ cho kinh tế quốc dân. Đến cuối năm 2000, đàn lợn của nước ta đã có khoảng 20,2 triệu con, tăng 1,65 lần so với năm 1990, trung bình 6,5%/năm. Hiện đang cung cấp cho thị trường tiêu thụ 1,4 triệu tấn thịt/năm.[14] [15] Tuy nhiên giá thành thịt lợn của chúng ta sản xuất đang cao hơn so với thị trường quốc tế và trong khu vực. Nguyên do các chi phí tiêu tốn thức ăn quá lớn và những thiệt hại do dịch bệnh xảy ra.[3] Thiệt hại này phải kể đến bệnh tiêu chảy ở lợn con. Bảo vệ lợn con khỏi tiêu chảy và giảm lượng thức ăn tiêu tốn là góp phần nâng cao hiệu quả chăn nuôi lợn, đảm bảo cung cấp con giống có chất lượng tốt cho chăn nuôi ở giai đoạn sau. Vì vậy các nhà khoa học trên thế giới đã tập trung nhiều công sức nghiên cứu để tìm ra giải pháp khống chế hữu hiệu. Trong đó xu hướng sử dụng chế phẩm sinh học được đặc biệt khuyến khích áp dụng. Không chỉ giới hạn trong mục đích phòng trị bệnh, tăng trọng và giảm lượng thức ăn tiêu tốn, việc sử dụng chế phẩm sinh học còn có nhiều ý nghĩa quan trọng khác đối với môi trường và sức khoẻ cộng đồng: để hạn chế tồn dư kháng sinh trong thực phẩm, giảm thiểu sự ô nhiễm môi trường chăn nuôi, hạn chế tính đa kháng thuốc của vi sinh vật, đảm bảo sự ổn định trạng thái cân bằng của môi trường sinh thái. Chế phẩm sinh học được sử dụng thường được sản xuất từ một số vi sinh vật có lợi như vi khuẩn probilactic. Những vi khuẩn này có tác dụng kích thích tiêu hóa, hấp thụ thức ăn có tác dụng kim hãm sự phát triển của vi sinh vật gây bệnh. Xuất phát từ những yêu cầu thực tiễn của ngành chăn nuôi lợn trên cơ sở ứng dụng các kết quả nghiên cứu của các tác giả đi trước ở trong và ngoài nước, chúng tôi tiến hành nghiên cứu đề tài: “Xây dựng quy trình công nghệ sản xuất một số chế phẩm sinh học và đánh giá hiệu quả tác dụng của các chế phẩm này đối với việc chăn nuôi lợn”, Mục tiêu của đề tài : 1.xây dựng quy trình công nghệ sản xuất một số chế phẩm sinh học dùng trong chăn nuôi lợn . 2. đánh giá hiệu quả kinh tế xã hội của việc sử dụng 4 chế phẩm sinh học : EM.Bokashi cho ăn , EM1 dạng dung dịch , Probiotic và khoáng thể lòng đỏ trứng gà được gây miễn dịch trong chăn nuôi lợn .

Lời cảm ơn Trớc tiên, em xin cảm ơn xởng sản xuất thực nghiệm thuốc thú y-ViệnThú y quốc gia, đã giúp em hoàn thành khoá luận này.

Em xin bày tỏ lòng cảm ơn sâu sắc tới TS Hoàng Văn Hoan – Giám

đốc xởng sản xuất thực nghiệm thuốc thú y, ngời đã tận tình hớng dẫn em hoànthành bản luận văn này

Đồng thời để hoàn thành khoá luận, em đã nhận đợc sự giúp đỡ, chỉbảo tận tình của BSTY Phạm Thị Tuyết và các cán bộ trong phòng kỹ thuậtthực nghiệm – Viện Thú y quốc gia

Em xin cảm ơn các thầy cô giáo trong khoa công nghệ sinh học – Viện

đại học Mở HN đã trang bị cho em kiến thức cơ bản trong quá trình học tập

Cuối cùng, em xin bày tỏ tình cảm chân thành nhất tới gia đình, bạn bè

và ngời thân đã hết lòng giúp đỡ, động viên em hoàn thành khoá luận này

Hà Nội, ngày 28 tháng 4 năm 2006

Sinh viên

Hán Thị Hơng

L.Acidophillus : Lactobacillus acidophillus.

L.casei :Lactobacillus casei

Mục lục

mở đầu 1

I Tổng quát tài liệu 8

1 Vi khuẩn lactic 8

1.1 Đặc điểm hình thái, sinh lý chung của vi khuẩn lactic 8

1.2 Phân loại nuôi cấy 10

1.2.1 Nuôi cấy lactic điển hình 10

1.2.2 Nuôi cấy lactic không điển hình 12

1.3 Nhu cầu dinh dỡng 14

1.3.1 Nguồn Cacbon 14

1.3.2 Nguồn Nitơ 14

1.3.3 Nguồn nhu cầu về vitamin 15

1.3.4 Nhu cầu về các hợp chất vô cơ 15

1.3.5 Nhu cầu về một số chất hữu cơ khác 16

1.4 Một số yếu tố ảnh hởng tới quá trình nuôi cấy lactic 16

1.4.1 ảnh hởng của oxy 16

1.4.2 ảnh hởng của nhiệt độ 17

1.4.3 ảnh hởng của PH 17

1.4.4 ảnh hởng của áp suất thẩm thấu 18

1.4.5 ảnh hởng của axit lactic đến hoạt động sống của Vi sinh vật 18

2 Những nghiên cứu về vi khuẩn probiotic 18

2.1 Những nghiên cứu về vi khuẩn probiotic 18

2.2 Chủng vi khuẩn lactic điển hình có đặc tính Probiotic và ứng dụng của nó – Lactobacillus Lactobacillus 19

3 Vai trò của các vi khuẩn lactic và probiotic đối với động vật 21

3.1 Cơ chế hoạt động của vi khuẩn lactic trong ruột 21

3.1.1 Hệ vi khuẩn đờng ruột của động vật 21

3.1.2 Sự tơng tác giữa các vi khuẩn trong đờng ruột 21

3.1.3 Cơ chế hoạt động của vi khuẩn lactic trong ruột 22

3.1.4 Chỉ tiêu lựa chọn vi khuẩn lactic làm chế phẩm probiotic 26

4 Chế phẩm probiotic 26

5 Chế phẩm EM- vi sinh vật hữu hiệu 27

6 Chế phẩm kháng thể khác loài bài từ lòng đỏ trứng gà 29

6.1 Một số đặc điểm của chế phẩm 29

6.2 Tác dụng, vai trò và ứng dụng của chế phẩm đối với lợn con 29

7 Bệnh tiêu chảy ở lợn con 31

II.Nguyên Vật liệu và phơng pháp nghiên cứu 33

1 Nguyên lệu ngiên cứu 33

2.Nội dung Phơng pháp nghiên cứu 33

2.1 Quy trình công nghệ sản xuất chế phẩm EM dạng bột 33

2.2 Quy trình công nghệ sản xuất chế phẩm EM dạng dung dịch để phun nền chuồng 35

2.3 Quy trình công nghệ sản xuất chế phẩm Probiotic dạng bột 36

2.4 Quy trình công nghệ sản xuất kháng thể khác loài 37

2.5.Đánh giá hiệu quả sử dụng các chê phẩm sinh học trong chăn nuôi lợn 2.5.1.Đánh giá hiệu quả chế phẩm EM.Bokashi cho ăn 2.5.2.Đánh giá hiệu quả chế phẩm EM dạng dung dịch phun nền chuồng 2.5.3.Đánh giá hiệu quả chế phẩm Probiotic 2.5.4.Đánh giá hiệu quả kháng thể lòng đỏ trứng gà đợc gây miễn dịch2 .38

Error! Bookmark not defined.3 Phơng pháp bố trí thử nghiệm chế phẩm 38

3.1 Đánh giá hiệu quả tác dụng của chế phẩm EM Bolashi khi bổ sung vào thức ăn của lợn 38

3.2 Đánh giá tác dụng hiệu quả của chế phẩm sinh học Probiotic 39

3.3 Đánh giá chế phẩm kháng thể khác loài 39

3.4 Đánh giá hiệu quả tác dụng chế phẩm EM 1 dùng phun nền chuồng40 III Kết quả và thảo luận 41

1 Chế phẩm EM BoKaShi dạng cho ăn 41

1.1 Một số đặc điểm của EM BoKaShi 41

1.2 Kết quả theo dõi chỉ tiêu tăng trọng 42

1.3 Kết quả theo dõi tỷ lệ tiêu chảy ở lợn con cai sữa 44

1.4 Hiệu quả của EM BoKashi đối với chỉ tiêu: tiêu tốn thức ăn của lợn 44 2 Chế phẩm: Probitoic 45

2.1 Một số đặc điểm của chế phẩm Probiotic 45

2.2 Kết quả theo dõi chỉ tiêu tăng trọng 45

2.3 Kết quả theo dõi bệnh tiêu chảy ở lợn con cai sữa 46

2.4 Hiệu quả của Probiotic đối với chỉ tiêu tiêu tốn thức ăn của lợn 47

3 Chế phẩm kháng thể khác loài lòng đỏ trứng gà trong phong, trị bệnh phân trắng ở lợn con theo mẹ 48

3.1 Một số đặc điểm của kháng thể khác loài 48 3.2 Kết quả theo dõi bệnh phân trắng ở lợn con theo mẹ trong phòng

và trị bệnh bằng kháng thể khác loài 49

3.2.1 Kháng thể khác loài trong phòng bệnh 493.2.2 Kháng thể khác loài trong trị bệnh phân trắng ở lợn con theo

mẹ 50

4 Chế phẩm EM dạng dung dịch dùng phun nền chuồng 51

4.1 Một số đặc điểm của chế phẩm 51 4.2 Kết quả nghiên cứu sự biến đổi một số chỉ tiêu thành phần không khí môi trờng chăn nuôi 51

IV Kết luận và đề nghị 54 Tài liệu tham khảo 55

mở đầu

Trên thế giới, chăn nuôi lợn là ngành kinh doanh lớn, thịt lợn chiếm40% tổng lợng các loại thịt (thịt bò 31%, thịt gia cầm23%, thịt cừu 6%) ởViệt Nam, chăn nuôi lợn là nghề truyền thống của hàng triệu hộ dân, thịt lợnchiếm 70% tổng lợng các loại thịt tiêu thụ hàng ngày trên thị trờng [1]

Trong những năm gần đây, với xu hớng đa dạng hoá vật nuôi trêncác địa bàn sản xuất, trong phạm vi cả nớc, ngành chăn nuôi lợn đã có nhữngbớc phát triển không ngừng

Sản phẩm từ thịt lợn không những đã đáp ứng nguồn thực phẩm chonhu cầu tiêu dùng trong cả nớc mà còn xuất khẩu thu ngoại tệ cho kinh tếquốc dân

Đến cuối năm 2000, đàn lợn của nớc ta đã có khoảng 20,2 triệu con,tăng 1,65 lần so với năm 1990, trung bình 6,5%/năm Hiện đang cung cấp chothị trờng tiêu thụ 1,4 triệu tấn thịt/năm.[14] [15]

Tuy nhiên giá thành thịt lợn của chúng ta sản xuất đang cao hơn sovới thị trờng quốc tế và trong khu vực Nguyên do các chi phí tiêu tốn thức ănquá lớn và những thiệt hại do dịch bệnh xảy ra.[3] Thiệt hại này phải kể đếnbệnh tiêu chảy ở lợn con

Bảo vệ lợn con khỏi tiêu chảy và giảm lợng thức ăn tiêu tốn là góp phầnnâng cao hiệu quả chăn nuôi lợn, đảm bảo cung cấp con giống có chất lợng tốtcho chăn nuôi ở giai đoạn sau Vì vậy các nhà khoa học trên thế giới đã tậptrung nhiều công sức nghiên cứu để tìm ra giải pháp khống chế hữu hiệu.Trong đó xu hớng sử dụng chế phẩm sinh học đợc đặc biệt khuyến khích ápdụng Không chỉ giới hạn trong mục đích phòng trị bệnh, tăng trọng và giảmlợng thức ăn tiêu tốn, việc sử dụng chế phẩm sinh học còn có nhiều ý nghĩaquan trọng khác đối với môi trờng và sức khoẻ cộng đồng: để hạn chế tồn dkháng sinh trong thực phẩm, giảm thiểu sự ô nhiễm môi trờng chăn nuôi, hạnchế tính đa kháng thuốc của vi sinh vật, đảm bảo sự ổn định trạng thái cânbằng của môi trờng sinh thái Chế phẩm sinh học đợc sử dụng thờng đợc sảnxuất từ một số vi sinh vật có lợi nh vi khuẩn probilactic Những vi khuẩn này

có tác dụng kích thích tiêu hóa, hấp thụ thức ăn có tác dụng kim hãm sự pháttriển của vi sinh vật gây bệnh

Xuất phát từ những yêu cầu thực tiễn của ngành chăn nuôi lợn trên cơ

sở ứng dụng các kết quả nghiên cứu của các tác giả đi trớc ở trong và ngoài

n-ớc, chúng tôi tiến hành nghiên cứu đề tài: “Xây dựng quy trình công nghệ sảnxuất một số chế phẩm sinh học và đánh giá hiệu quả tác dụng của các chếphẩm này đối với việc chăn nuôi lợn”,

Mục tiêu của đề tài :

1.xây dựng quy trình công nghệ sản xuất một số chế phẩm sinhhọc dùng trong chăn nuôi lợn

2 đánh giá hiệu quả kinh tế xã hội của việc sử dụng 4 chế phẩmsinh học : EM.Bokashi cho ăn , EM1 dạng dung dịch , Probiotic và khoáng thểlòng đỏ trứng gà đợc gây miễn dịch trong chăn nuôi lợn

I Tổng quát tài liệu

1 Vi khuẩn lactic

Năm 1878 Lister phân lập thành công vi khuẩn lactic đầu tiên và đặttên là Bacterium lactic (hiện nay là Streptococcus) Về sau các nhà khoa họcliên tiếp phân tích đợc nhiều loại vi khuẩn lactic khác nhau.[11]

Các vi khuẩn lactic đợc xếp chung vào họ lactobacteriaceae (theo khoáphân loại Bergey) Mặc dù nhóm vi khuẩn này không đồng nhất về mặt hìnhthái (gồm cả các vi khuẩn dạng que ngắn, dài, lẫn các vi khuẩn hình cầu),song về mặt sinh lý chúng lại tơng đối đồng nhất Tất cả đều là các vi khuẩnGram dơng, không tạo bào tử (kể cả Sporo lactobacillus in ulinus) và hầu hếtkhông di động, kích thớc và hình dạng của vi khuẩn đều khác nhau ở cácgiống Sự thay đổi hình dạng kích thớc thờng xảy ra trong quá trình sinh trởng

và phụ thuộc vào môi trờng nuôi cấy

Vi khuẩn lactic sinh trởng trong điều kiện yếm khí và vi hiếu khí, khảnăng hô hấp của chúng bị giới hạn vì chúng thiếu Xitocrom – Lactobacillus là yếu tố cầnthiết cho quá trình hô hấp Chúng là những vi khuẩn yếm khí không bắt buộc.Năng lợng cần thiết cho sinh trởng và phát triển có đợc qua quá trình phân giảihyđratcacbon, đồng thời bài tiết ra axit lactic.Vi khuẩn lactic có nhu cầu vềdinh dỡng rất phức tạp: không một đại diện nào của nhóm này sống trên môitrờng muối khoáng thuần thiết chứa glucoza và NH4+ Đa số chúng cần hàngloạt các vitamin nh: riboflavin, thiamin, axit pantoteic, axit folic, biotin, axitnicotinic và các nhóm axit amin Vì vậy ngời ta thờng nuôi vi khuẩn lactictrên các môi trờng phức tạp có cha dịch cà chua, pepton, nớc chiết thịt, caonấm men và muối khoáng

1.1 Đặc điểm hình thái, sinh lý chung của vi khuẩn lactic

Tuỳ theo hình dạng tế bào mà ngời ta chia vi khuẩn lactic thành dạnghình cầu, hình que, kích thớc thay đổi tuỳ từng loài khác nhau

Bảng 1: Đặc điểm hình thái sinh lý chung của vi khuẩn lactic

Các chỉ tiêu Đặc điểm hình thái

Khuẩn lạc Hình dạng Tròn lồi, mép mỏng và trơn

Màu sắc Vàng kem, vàng nhạt

Tế bào Hìn dạng Cầu khuẩn hoặc trực khuẩn

Các sắp xếp Tạo chuỗiNhuộm màu Gram dơngSinh bào tử Không sinh bào tửSinh truởng

ở

Nhiệt độ 100C-450C

Vi khuẩn lactic chia làm 4 chi:

 Giống Streptococcus có tế bào hình tròn hoặc hình ovan đờng kínhkhoảng 0,5-1μm, sắp xếp riêng biệt cặp đôi hoặc thành chuỗi dài Tuynhiên theo Orla-Tensen(1942), một số chủng của loài này có thể códạng hơi giống trực khuẩn vì có kích thớc chiều dài lớn hơn chiều rộng,chẳng hạn nh Streptococus lactic

 Giống Leuconostoc có dạng hình hơi dài hoặc hinh ovan, đờng kính từ0,5-0,8 μm và chiều dài khoảng 1,6 μm Đôi khi chúng có dạng hơitròn, chiều dài khoảng1-3 μm, sắp xếp thành chuỗi và không tạo thành

đám tập trung

 Giống Lactobacillus có dạng hình que Đây là dạng vi khuẩn lactic phổbiến nhất Hình dạng chúng thay đổi từ hình cầu méo ngắn cho đếnhình que dài

Lactobacillus plantarum có dạng hình que, kích thớc 0,7-1,1 μm đến 8μm, sắp xếp thành chuỗi hoặc đứng riêng rẽ

3-Lactobacillus casei có dạng hình que ngắn hoặc que dài, tế bào hìnhque mảnh, đôi khi hơi cong, sắp xếp thành cặp hay chuỗi

Tất cả sự khác nhau về hình thái tế bào đều phụ thuộc vào môi trờng và

điều kiện nuôi cấy

1.2 Phân loại nuôi cấy

Quá trình nuôi cấy của vi khuẩn lactic đợc chia làm 2 loại: nuôi cấy lac

điển hình và nuôi cấy lactic không điển hình

1.2.1 Nuôi cấy lactic điển hình

Nuôi cấy lactic điển hình thực tế chỉ xuất hiện axit lactic Các vi khuẩnlactic đồng hình phân giải glucoz theo con đờng EMP( Embden-Meyerhof-Parnas)

 Streptococcus lactic: Là song cầu khuẩn, gây nuôi cấy giữa tự nhiên,yếm khí tuỳ tiện, nuôi cấy glucoza tạo trong môi trờng 0,8-0,18% axitlactic Nguồn nitơ cung cấp cho vi khuẩn này là pepton, nhiệt độ tối ucho chúng phát triển là 100C, nhiệt độ cao nhất là 400C, nhiệt độ tối u là30-350C Một số chủng tạo thành bacteriocin ở dạng nizin [5]

 Streptococcus cremoris: Tế bào có hình cầu và kếp thành chuỗi dài, a

ẩm tạo ít axit trong môi trờng Nhiệt độ thích hợp cho phát triển là

250C, tối thiểu là 100C và tối đa là 360C Khi sử dụng đợc phối hợp vớiStrep Lactic Một số chủng thuộc giống Diplococcus sinh bacterioxin ởdạng diplocoxin [5]

 Streptococcus chermophillus: Hình cầu, kết thành chuỗi dài, phát triểntốt ở 40– Lactobacillus500C, tích tụ khoảng 1% axit Dùng phối hợp với trực khuẩnlactic để chế biến sữa chua nói chung và các dạng đặc biệt, sữa chuanấu chín và phomat.[5]

 Lactobacterium delbrukii: là trực khuẩn lớn 2– Lactobacillus7 μm x 0,4– Lactobacillus 0,5μm,trong quá trình phát triển chúng có khả năng tạo sợi dài 100 μm x 1000

μm Có lẽ đây là giống vi khuẩn lactic duy nhất đồng hoá đợc tinh bột

Nó không nuôi cấy và đồng hoá đợc lactoza Nhiệt độ phát triển tốithiểu là 180C, tối đa là 550C, nhiệt độ tối u là 45– Lactobacillus500C Khả năng tạoaxít trong môi trờng khoảng 2,5% axit

 Lactobactrium Casein: Trực khuẩn nhỏ, thờng ở dạng chuỗi dài hoặcngắn Nhiệt độ phát triển thích hợp là 30– Lactobacillus350C Chúng có khả năngtích tụ trong môi trờng 1,5% axit Trực khuẩn này đợc dùng trong chếbiến phomat, nhờ có hoạt tính proteaza nên có thể thuỷ phân casein củasữa đến axit amin.[5]

 Lactobacillus acidophillus: Trực khuẩn dài, chịu nhiệt độ tối thích chosinh trởng là 37-400C, tối thiểu là 200C Trong sữa nó tích tụ tới 2,2%axit Trực khuẩn này đợc phân lập từ phân của trẻ em mới đẻ, dùngtrong sản xuất sữa L.acidophillus, có khả năng sinh Bactuioxin, có hoạttính ức chế các vi sinh vật gây bệnh Một số chủng có khả năng tạomàng nhầy.[5]

 Lactobacillus bullqaricus: Trực khuẩn tròn, đôi khi ở dạng hạt, thờngkết thành chuỗi dài, không nuôi cấy đờng Saccaroza Đây là một giống

a nhiệt, nhiệt độ tối thích cho phát triển là 40-450C, tối thiểu là 15-200C

Nó tạo thành axit mạnh, tích tụ ở trong sữa tới 2,5-3,5% axit Dùng đểchế biến sữa chua phơng nam, sữa ngựa.[5]

 Lactobacillus plautarum: Trực khuẩn nhỏ, thờng kết đôi hoặc chuỗi.Nhiệt độ thích hợp cho phát triển là 300C Tích tụ tới1,3% axit Giốngnày thấy chủ yếu trong muối chua rau da.[5]

1.2.2 Nuôi cấy lactic không điển hình

Nuôi cấy lactic không điển hình, các sản phẩm cuối cùng khá đa dạng:axit lactic, etanol, axit axetic và CO2 Các vi khuẩn lactic nuôi cấy không điểnhình phân giải glucoza theo con đờng pentophosphat (PP) ở giai đoạn đầu:

C6H12O6 CH3– Lactobacillus CHOH– Lactobacillus COOH + CH3– Lactobacillus CH2– Lactobacillus OH +

CO2

 Lactobacterium hassicec Fermentatac: Thờng thấy chúng trong dịchnuôi cấy chua rau cải Khi nuôi cấy rau cải chua tạo thành axit lactic,axit axetic, rợu và CO2

 Lactobacterium Lycopersici: là trực khuẩn Gr+, sinh hơi tế bào tạothành chuỗi hay đơn Có khi tạo thành từng đôi một Khi nuôi cấy tạothành rợu, CO2, axit lactic và axit axetic Chúng có khả năng tạo bào tử

Tế bào sinh dỡng thờng chết ở 70-800C

Sơ đồ lên men lactic(nuôi cấy) đồng hình và dị hình đợc thể hiện tronghình 1

Lên men lactic đồng hình

Glucoza

Glucoza – Lactobacillus 6 – Lactobacillus P

Fructoza – Lactobacillus 6 – Lactobacillus P

Fructoza – Lactobacillus 1,6 – Lactobacillus di – Lactobacillus P

Lên men lactic dị hình

Glucoza

Glucoza – Lactobacillus 6 – Lactobacillus P

Axit 6 – Lactobacillus P gluconic

Riboluza – Lactobacillus 5 – Lactobacillus P

Đihyđro xiaxton – Lactobacillus P Glyxeraldehyt – Lactobacillus 3 – Lactobacillus P Axetyl – Lactobacillus P

Axit 1,3 - di - p glyxeric Axit axetic

Axit 3 - p glyxeric

Axit 2 - đi - p glyxeric

Axit photpho Etol pyruvic

Axit Pyruvic

Vi khuẩn lactic có thể sử dụng đợc các hyđratcacbon nh các loại đờnghexore, glucoza, fructoza, maltoza, galactoza, sacaroza, lactoza Và các pholySaccasit ( Tinh bột, dextrin) làm cơ chất sản sinh ra năng lợng, tạo ra các tiềnchất hay quá trình oxy hoá khử, biến đổi những tiền chất thành những sảnphẩm cuối cùng để xây dựng tế bào, đồng thời tích tụ trong môi trờng các sảnphẩm sinh tổng hợp Ngoài ra vi khuẩn lactic còn sử dụng các a.a nh: axitglutamic, arginin, tirozin làm nguồn cung cấp năng lợng.

Các loại vi khuẩn khác nhau đòi hỏi các nguồn các bon khác nhau

Rỉ đờng là nguồn nguyên liệu thích hợp cho nuôi cấy lactic Rỉ đờng ờng có 40-60% chất khô, trong đó chủ yếu là Saccaroza (46-58%), ngoài racòn có các vitamin: B1, B2…

th-1.3.2 Nguồn Nitơ

Vi khuẩn lactic cần nitơ để xây dựng tế bào Tất cả các thành phần quantrọng của tế bào đều chứa nitơ Tuy nhiên hầu hết các loài vi khuẩn lactickhông thể sinh tổng hợp đợc các chất hữu cơ phức tạp có chứa nitơ mà phải sửdụng nguồn nitơ có sẵn trong môi trờng Chỉ có một số ít loài vi khuẩn có khảnăng sinh tổng hợp đợc các chất nitơ từ nguồn nitơ vô cơ [12] Theo nhu cầunguồn nitơ có thể chia vi khuẩn lactic thành 3 nhóm:

- Nhóm các phức hợp axit amin

- Nhóm phát triển tốt trên cystein các muối amon

- Nhóm phát triển tốt trên cystein và các muối anion

Nguồn nitơ thờng dùng là axit amin, pepton, các men… Trong thực tếsản xuất để tăng hiệu quả kinh tế ngời ta có thể dùng các nguyên liệu rẻ tiềngiàu axít am và vitamin nh bắp cải, giá đỗ…

1.3.3 Nguồn nhu cầu về vitamin

Các vi khuẩn lactic đặc biệt là loài lactobacillus rất cần vitamin cho sựphát triển Các vitamin có vai trò là các enzym trong quá trình trao đổi chấtcủa tế bào Rất ít vi khuẩn lactic có khả năng sinh tổng hợp vitamin Do vậynguồn vitamin thờng bổ sung vào môi trờng dới dạng nớc khoai tây, ngô, càrốt, giá đỗ, dịch tự phân nấm men…

Tất cả các trực khuẩn lactic đều cần có axit pantonic, biotin, axitnicotic, các vi khuẩn nuôi cấy dị hình rất cần thiamin, chúng không cần inozit,cholin, axit n-amino benzoic Trong môi trờng có mặt axit oleic nhu cầu biotincủa lactobacillus fermentum mất đi

Các loài lactobacillus, Streptocaccus có nhu cầu vitamin nhóm B đặcbiệt lớn do chúng cần thiết cho sự kích thích sinh trởng [12] Tuy nhiên nhucầu vitamin còn bị ảnh hởng bởi nhiều yếu tố nh thành phần môi trờng, PH,nhiệt độ nuôi cấy, lợng CO2 ban đầu và thế oxy hoá khử của môi trờng

1.3.4 Nhu cầu về các hợp chất vô cơ

Để đảm bảo quá trình sinh trởng và phát triển, vi khuẩn lactic rất cầnnhiều các hợp chất vô cơ nh: Cu, K, S, Mn, Mg… Trong đó đặc biệt quantrọng là Mn Chính Mn ngăn cản quá trình tự phân của tế bào và nớc cần thiếtcho quá trình sống bình thờng của vi khuẩn này Đối với lactobacillus thì

Mn2+, Mg2+, Fe2+ có tác động tích cực lên sự phát triển và sản sinh axit lactic.Một vài enzym có sự tham gia của các ion kim loại này có cấu trúc tâm hoạt

động nh trờng hợp của photpho fructokinase Nhìn chung Mn và Mg đóng vaitrò chủ yếu sau:

- Tham gia cấu trúc và đảm bảo chức năng hoạt động của các enzym

- Giải độc tế bào bởi sự có mặt của oxy

- Mn tham gia vào việc ổn định Ribôxôm

- Mg2+ là chất hoạt động trong quá trình nuôi cấy lactic bằng cách giúp

vi khuẩn sử dụng tốt hơn các loại đờng.[7]

1.3.5 Nhu cầu về một số chất hữu cơ khác

Ngoài a.a và vitamin, vi khuẩn lactic còn có nhu cầu lớn về các hợp chấthữu cơ nh: bazơ nitơ, axit hữu cơ, axit amin, nhằm thúc đẩy quá trình sinh tr-ởng của vi khuẩn lactic.

1.4 Một số yếu tố ảnh hởng tới quá trình nuôi cấy lactic.

1.4.1 ảnh hởng của oxy

Vi khuẩn lactic là loài hô hấp tuỳ tiện nhng chủ yếu kỵ khí và vi hiếukhí Chúng có khả năng oxy hoá nhiều chất nhờ sử dụng oxy hoạt tính củamột số hợp chất và sự có mặt của hê flavaprotein

Quan hệ giữa các loài vi khuẩn với độ hiếu khí của môi tr ờng làkhác nhau

Trong điều kiện kỵ khí nghiêm ngặt làm trực khuẩn nuôi cấy dị hìnhchậm phát triền còn trực khuẩn nuôi cấy đồng hình sinh trởng giảm 10%, nuôicấy giảm 23% Các cầu khuẩn nuôi cấy dị hình nuôi cấy arabioza đạt tới tối utrong điều kiện kỵ khí Còn các loài không sử dụng đợc pentose thì phát triểnrất kém trong điều kiện này

Trong quá trình nuôi cấy lactic, nếu lợng oxy lớn sẽ gây ngộ độc vikhuẩn lactic, enzym lactatdehyđrogenlare bị vô hoạt, do đó quá trình tạo axitlactic không xảy ra Đồng thời sự có mặt của oxy tạo điều kiện cho nấm mốcphát triển và axit lactic trong dịch nuôi cấy bị oxy hoá thành axit cacbonic Vìvậy đối với các sản phẩm muối chua nếu không nén chặt thì sẽ tiêu hao nhiềuhơn do các quá trình oxy hoá, mực tích luỹ axit cũng giảm do sự hoạt động vàphát triển của axit lactic bị hạn chế.[8]

1.4.2 ảnh hởng của nhiệt độ

Hoạt động của vi khuẩn lactic chịu ảnh hởng rất lớn của nhiệt độ.Khoảng nhiệt độ phát triển của vi khuẩn lactic rất rộng: 15-450C Các loài cónhiệt độ tối u trong khoảng 40-450C gọi là vi khuẩn a nhiệt Các loài có nhiệt

độ tối u trong khoảng 20-400C đợc gọi là vi khuẩn a ấm Nhiệt độ ảnh hởng rấtlớn đến tốc độ các phản ứng enzym trong quá trình nuôi cấy lactic

1.4.3 ảnh hởng của PH

PH có ảnh hởng rất lớn đến sự phát triển của vi khuẩn lactic và hệenzym của chúng Mỗi enzym đều có vùng PH tối u mà tại đó hoạt lực của

chúng là cao nhất Nếu PH không thích hợp, vi khuẩn lactic có thể bị kémphát triển hay bị tiêu diệt.

Các vi khuẩn lactic có PH tối u cho sự phát triển là 5,5-6,2 vớilactobacillus; 5,5-6,5 với prediocaccus; 6,3-6,5 với leuconostoc

Tuy nhiên giá trị PH cuối cùng mà các vi khuẩn lactic có thể chịu đựng

đợc là rất khác nhau: lactobaciluf có thể chịu đợc PH 3,2-3,5; leuconostoc cóthể chịu đợc PH thấp nhất là 5

Trong quá trình nuôi cấy lactic, axit sinh ra lúc đầu có tác dụng ức chếcác vi sinh vật khác, khi lợng axit tích luỹ đủ lớn thì chính vi khuẩn lacticcũng bị ức chế

1.4.4 ảnh hởng của áp suất thẩm thấu

Màng tế bào của vi khuẩn là màng bán thấm nên nồng độ có ảnh hởngrất lớn đến khả năng phát triển của tế bào Nếu trong môi trờng có nồng độ đ-ờng quá cao sẽ dẫn đến tế bào bị mất nớc, dẫn đến khô sinh lý, co nguyên sinhchất nếu tình trạng kéo dài [6] Phần lớn các tế bào của vi khuẩn lactic bị ứcchế ở nồng độ đờng lớn hơn 25%, tuy nhiên nếu có thể làm tăng khả năngchịu áp suất thẩm thấu bằng cách bổ sung lợng ion K+, đờng, axit amin haycác sản phẩm tơng tự.[12]

1.4.5 ảnh hởng của axit lactic đến hoạt động sống của Vi sinh vật

Trong quá trình nuôi cấy, vi khuẩn lactic sẽ tích tụ axit lactic làm giảm

PH, ức chế vi khuẩn gấy thối vì phần lớn các vi khuẩn gây thối chỉ thích nghivới môi trờng trung tính hay kiềm và kiềm yếu Vi khuẩn lactic có sức đềkháng cao và có khả năng ức chế sự phát triển của vi khuẩn đờng ruột nhờ khảnăng tạo axit lactic.Vi khuẩn lactic có khả năng chịu đơc môi trờng có độ axitcao nhng khi PH giảm tới một mức độ nào đó sẽ ức chế vi khuẩn lactic ở PHthấp hơn 2,5 các vi khuẩn lactic chậm phát triển dần và bị ức chế

2 Những nghiên cứu về vi khuẩn probiotic

2.1 Những nghiên cứu về vi khuẩn probiotic

Vi khuẩn lactic đã đợc ứng dụng từ hàng trăm năm nay trong các sảnphẩm nuôi cấy, gần đây một số loài còn đợc sử dụng nh vi khuẩn trợ sống(probiotic) bổ sung vào thức ăn gia súc Đối với động vật khoẻ mạnh, khu hệ

vi sinh vật luôn ở trạng thái ổn định Thế nhng trạng thái này có thể bị phá vỡ

bởi các yếu tố bên trong và bên ngoài cơ thể, chẳng hạn nh những biến đổi độtngột của chính bản thân động vật nuôi hay những biến đổi của môi trờng xungquanh gây tác động mạnh đến chúng, các nguồn thức ăn lại nhiễm vi khuẩngâ bệnh hay chúng vừa trải qua điều trị kháng sinh Để phục hồi cho trạng tháicân bằng của khu hệ đờng ruột một giải pháp đợc quan tâm đặc biệt hiện nay

là bổ sung các vi sinh vật hữu ích sống vào thức ăn chăn nuôi nhằm tăng cờng

sự chuyển hoá thức ăn, duy trì trạng thái cân bằng của khu hệ vi khuẩn đờngruột Những sản phẩm vi khuẩn sống này còn gọi là Probiotic

Năm 1974 Parker đã đa ra định nghĩa: Probiotic là những chế phẩm visinh vật sống góp phần cân bằng hệ vi sinh vật đờng ruột Năm 1989 cũngchính ông đã bổ nghĩa: Những chế phẩm vi sinh vật sống có lợi đối với độngvât bởi sự cải thiện, cân bằng hệ vi sinh vật đờng ruột [7] Định nghĩa bổsung này đã nhấn mạnh tầm quan trọng của vi sinh vật nh một thành phần cầnthiết của chế phẩm Probiotic

Ngày càng có nhiều công trình chứng minh tác dụng của Probiotic.Theo Dr Weiss Probiotic hỗ trợ enzym tiêu hoá trong quá trình tiêu hoá thức

ăn Enzym tiêu hoá nh Proteare, Amylasc và Lipase hoạt động trên thức ăn, nóchuyển hoá những thức ăn từ dạng phức tạp thành dạng đơn giản để con ngời

dễ sử dụng tạo năng lợng Không có enzym thì bộ máy tiêu hoá không thể tiêuhoá thức ăn và xử lý cặn bã Điều quan trọng là vi khuẩn Probiotic và enzymhoạt động cùng nhau để đảm bảo cho bộ máy tiêu hoá hoạt động trôi chảy.Bằng cách này enzym đã đảm bảo cho bộ máy tiêu hoá có vị trí quan trọnghơn và giúp hấp thụ tốt thức ăn

Có thể nói Probiotic vô cùng quan trọng đối với hệ tiêu hoá Sự mất cânbằng của vi sinh vật đờng ruột thờng gây nên bệnh ung th ruột kết Ăn nhữngthức ăn có giá trị dinh duỡng cha vi khuẩn Probiotic có thể giúp đỡ chốngbệnh tật hoặc ngăn cản sự xâm nhập của bệnh tật Vi sinh vật ruột già giúptiêu hoá, bảo vệ trớc sự xâm nhập của vi khuẩn gây bệnh và tăng khả năngmiễn dịch

2.2 Chủng vi khuẩn lactic điển hình có đặc tính Probiotic và ứng dụng của nó – Lactobacillus Lactobacillus

Lactobacillus là vi khuẩn Gr+, hình que kích thớc tế bào 0,7-1,1 μm đến3-8 μm, không sinh bào tử, phát triển tốt nhất ở PH 5-7, nhiệt độ thích hợp 37-

400C, ở nhiệt độ < 150C và > 450C hầu nh không phát triển

Lợi ích của lactobacillus acidophillus đợc biết đến từ năm 1920 khiCheoplin và Rettger phát hiện ra sự sống sót của L acidophillus trong hệ đờngruột của con ngời, kể từ đó L acidophillus đợc sử dụng nhiều trong các sảnphẩm nuôi cấy nh sữa, phomat, thịt… Tuy nhiên trong vài thập kỷ gần đâyLactobacillus còn đợc xem nh là vi khuẩn Probiotic có lợi cho đờng ruột TheoWySong Lactobacillus sản sinh ra axit lactic tạo môii trờng không thuận lợikìm hãm sự phát triển của trên 25 loài vi sinh vật có hại, Lactobacillus cũngkhử hoạt tính của aircinogenic đờng ruột, o-glucouroniclase và nitroreductase,các sản phẩm cấy Cactobacillus tăng sức đề kháng, giảm bệnh tật, ngoài ranhững sản phẩm chứa Lactobacillus còn có vị ngọt, thơm nên kích thích tiêuhoá, tăng cờng quá trình trao đổi chất, tăng sản lợng của vật nuôi Cũng theoWySong Lactobacillus platarum tổng hợp amino axit nh lysine, tăng số l-ợngbạch cầu và kháng thể giúp vật thể chống lại bệnh tật Lactobacillus sửdụng Carbohydrates làm môi trờng phát triển trong khi đó vi sinh vật gây bệnh

sử dụng Protein là cơ chất Bằng cách giảm số lợng vi sinh vật gây bệnhLactobacillus đã góp phần tạo nên một số lợng đáng kể Protein Giảm số lợnglớn vi khuẩn gây thối Giảm bớt sự tác động của virut gây bệnh giộp da Sảnsinh ra vitamin B nh B1, B6, B12, axit folic, niacin, những chất này đống vai trò

là chất xúc tác sinh học giúp chuyển hoá thức ăn đồng thời giảm sự căngthẳng Lactobacillus sản sinh ra chất kháng Cholesterrol, làm giảmCholesterrol trong máu, ngăn sự phát triển của nấm men Cadida albicans Mộtnghiên cứu ở phòng thí nghiệm chống ng th của trờng đại học Nebraska đãnhận định Lactobacillus sản sinh ra một chất kháng sự hoạt động của các khối

u và ngăn cản sự phát triển của các khối u

Lactobacillus bulgaricus không có tác dụng cân bằng nhng lại có tácdụng bảo vệ hệ đờng ruột, đợc sử dụng phổ biến trong các sản phẩm nuôicấy

Lactobacillus Casei ngăn cản sự phát triển có hại trong ruột non.Lactobacillus brevis là vi khuẩn lactic quan trọng tổng hợp nên vitamin D vàK.[7]

3 Vai trò của các vi khuẩn lactic và probiotic đối với động vật

3.1 Cơ chế hoạt động của vi khuẩn lactic trong ruột

3.1.1 Hệ vi khuẩn đờng ruột của động vật

ỏ động vật vừa mới sinh ra, ruột và dạ dày không có vi khuẩn, vài giơsau khi sinh ra mới thấy một vài loại vi khuẩn và từ đó chúng bắt đầu sinh sản.Các vi khuẩn xuất hiện lúc đầu thờng là E.coli, Enterococcus và Clostridium.Sau đó khi Lactobacillus xuất hiện thì số lợng Enterococcus và Clostridiumgiảm hẳn và Bifidobacterium, lactobacillus trở nên chiếm u thế

Một điều thú vị là phần lớn các loài động vật có một quá trình chung về

sự thiết lập khu hệ đờng ruột E.coli, Enterococcus chiếm u thế ngay khi sinh

đáng lẽ chúng phải là loại sinh trởng dễ dàng trong đờng ruột, nhng chúng đãkhông chiếm u thế ở giai đoạn sau của chu kỳ sống Điều này chứng tỏ việcchung sống với động vật chủ là yêu cầu trớc tiên cho việc thiết lập nên khu hệ

vi sinh vật đờng ruột

3.1.2 Sự tơng tác giữa các vi khuẩn trong đờng ruột

Đã có nhiều nghiên cứu về mối quan hệ đối kháng giữa các vi khuẩntrong đó có sự tác động của một số vi khuẩn nhất định vào khả năng sống haysinh trởng của các động vật khác Sự cạnh tranh về chất dinh dỡng là mộttrong những kiểu đối kháng

Những biến đổi về PH và thế oxy hóa khử, sản phẩm của H202 và H2Saxit hữu cơ và các kháng sinh là những nhân tố gây ảnh hởng đến sự sinh tr-ởng của vi khuẩn H2S sinh ra bởi vi khuẩn kỵ khí chúng kìm hãm sự sinh tr-ởng của E.coli Điều này có thể giải thích một thực tế rằng số lợng E.colitrong ruột già của ngời và động vật chỉ bằng một phần nghìn số lợng vi khuẩn

kỵ khí có trong đó

Trong mối quan hệ cộng sinh loại vi khuẩn này sinh ra những chất dinhdỡng cần thiết cho loại vi khuẩn khác, hay chúng làm thay đổi PH và thế oxyhóa khử Đôi khi một số chất không sử dụng đợc bởi một thành viên nhng lại

đợc sử dụng khi kết hợp các thành viên với nhau dới tác dụng của Enzym [9]

Sau sự sinh sản của vi khuẩn hiếu khí, một môi trờng kỵ khí đã đợc tạo

ra ở phần trên của bộ máy tiêu hóa Vi khuẩn hiếu khi sinh trởng và tiêu thụ

hết oxy đi xuống phần dới của bộ máy tiêu hóa, làm môi trờng càng kỵ khíhơn và vi khuẩn kỵ khí trở nên chiếm u thế [9].

3.1.3 Cơ chế hoạt động của vi khuẩn lactic trong ruột

Vi khuẩn lactic sản sinh nhiều loại thực phẩm trao đổi chất có thể tác

động đến vi sinh vật khác trong đờng ruột Hơn nữa axit axetic đợc tiết ratrong quá trình nuôi cấy dị hình và H20 có thể gây ngộ độc cho các vikhuẩn khác

Các axit mật lại khử liên kết nhờ vi khuẩn lactic Có thể là tác nhân ứcchế một số vi khuẩn lactic c chú trong ruột non và ruột kết Bên cạnh tác độngvào quá trình trao đổi cholesterol và axít mật Vi khuẩn lactic còn có vai tròlàm giảm sự sinh sản ra các hợp chất nitơ có hại

ở lợn con cho ăn sữa nuôi cấy bởi L acidophillus, lợng amin trong ruộtsinh ra ít hơn so với lợn không đợc xử lý và chính sản sinh ra amin cũng thay

đổi từ ruột non tới manh tràng Các Enzym trong phân có khả năng sinh ung

th nh : B gluconidare, nitroductase, aroreductase giảm đi ở ngời dùngL.aicidophillus trong khẩu phần ăn hàng ngày Vi khuẩn lactic đợc ăn vào ruột

đã sản sinh và giải phóng ra các enzym thuỷ phân, chúng có thể hỗ trợ tiêuhoá cho động vật nuôi, đặc biệt trong giai đoạn đầu đời của bê con và lợn[9]

Một số kết quả nhiên cứu cho thấy rằng Lactobacillus cũng có thể gópphần vào quá trình tiêu hoá các hydrat cacbon phức tạp hơn Lactoxa Cham vàcộng sự đã phân lập đợc ba chủng Lactobacillus từ diều gà có hoạt tính thuỷphân tinh bột Chủng có hoạt tính thuỷ phân tinh bột tốt nhất là L acidophillus

đã sản sinh ra mantoza và một chút ít glucoza từ amino pectin Các sản phẩm

có hoạt tính thuỷ phân glucan cũng có thể rất có hiểu quả đối với thức ăn củagia cầm và của lợn có dài mạch và yếu mạch, bởi vì các enzym của vật nhkhông thể thuỷ phân đợc β – Lactobacillus D – Lactobacillus glucan, nh vậy nó hỗ trợ sự tiêu hoá tinhbột.[9]

Nhiều tác giả đã công bố những kết quả nghiên cứu rất đáng khích lệkhi cho rằng vi khuẩn lactic có thể hỗ trợ hệ miễn dịch cả trên bề mặt lớp chấtnhày cũng nh toàn bộ hệ thống Thí nghiệm nghiên cứu ảnh hởng của enzymfaccium nh một chủng đơn lẻ đối với chuột nuôi trong điều kiện vô trùng đãcho thấy số lợng salmonella (đợc đa qua đờng tĩnh mạch) trong lá lách giảm

đáng kể Điều này chỉ ra có sự đáp ứng của hệ thống miễn dịch

Khi cho chuột ăn hai chủng L.acidophillus va L.casei qua đờng miệng

đã làm tăng chức năng thực bào của đại thực bào ở chuột Lessard và Brisson

đã cho lợn con ăn sữa nuôi cấy bởi một hỗn hợp các L.bacillus và quan sátthấy một sự tăng chút ít nồng độ IgG huyết thanh L.casei đợc đa vào ruột qua

đờng miệng đã làm tăng sự sản sinh IgA trong khoang ruột, đã giúp cho màngnhày chống lại Salmonella tupphimurium

Những kết quả nghiên cứu trên cho thấy vi khuẩn lactic thực sự đã đónggóp vào quá trình miễn dịch [7]

Bảng 2 Tính chất đối kháng đối với vi khuẩn gây thối và gây bệnh trong ruột

nghiên cứuLợn con L.lactis Giảm E.coli trong phân MuralidharaLợn con L.reuteri Giảm pH và E.coli trong ruột UnderdahlLợn con S.faeclis Tăng vi khuẩn lactic, giảm

salmonella

OzavaTrâu bò L.acidophillus Kiềm chế E.coli Gilliand

Bảng 3 Lợi ích của vi khuẩn lactic có đặc tính probiotic đối với quá trình

chuyển hoá các chất ở động vật chủ

Vật chủ Vi khuẩn có đặc

tính probiotic

nghiêncứuLợn con L.acidophillus Giảm cholesterol trong

Ngời L.acidophillus Giảm sự sản sinh các hợp

chất tiềm năng gây ung th

Goldin

Chuột L.bulgaricus Các enzym thuỷ phân hỗ

trợ tiêu hoá

GarivieLợn, gà L.acidophillus Hỗ trợ tiêu hoá

3.1.4 Chỉ tiêu lựa chọn vi khuẩn lactic làm chế phẩm probiotic

Để tạo ra một chế phẩm probiotic lý tởng cần phải chú ý các chỉ tiêusau

- Vi khuẩn đợc chọn phải là chủng không gây bệnh đại diện cho khu hệ

đờng ruột thông thờng, đặc trng nhất cho vật chủ và giữ đợc hoạt tính của nótrong môi trờng có độ axit cao trong dạ dày và nồng độ muối mật cao trongruột non

- Chủng vi khuẩn lactic tốt phải có khả năng sinh trởng nhanh và trao

đổi chất tốt, tồn tại với số lợng lớn trong ruột

- Chủng probiotic lý tởng là chủng có thể bám đợc vào bề mặt biểu mô,

nh vậy có thể lu chú ở một số phần của bộ máy tiêu hoá

- Vi khuẩn lactic đợc chọn phải sinh ra axit hữu cơ một cách có hiệuquả và có thể có tính kháng khuẩn, chống lại các vi khuẩn có hại

- Chế phẩm probiotic phải dễ sản xuất, sinh trởng đợc khi nuôi cấy ởqui mô lớn, giữ đợc khả năng sống trong thời gian bảo quản và giá thành phảihợp lý để sử dụng trong chăn nuôi

Nó có khả năng cải thiện sự cân bằng vi sinh vật đờng ruột, tăng cờngsức khoẻ cho con ngời và vật nuôi Chế phẩm có hoạt tính sinh học cao, antoàn Nó có khả năng tiêu diệt vi sinh vật có hại, bổ sung vi sinh vật có ích,duy trì trạng thái cân bằng của khu hệ vi sinh vật đờng ruột Ngoài ra chếphẩm còn có khả năng tăng cờng hệ miễn dịch, chống ung th đại tràng, giảmthiểu cholesterol trong máu

Những kết quả nghiên cứu cơ bản và ứng dụng của chế phẩm probioticgần đây tập trung mạnh vào việc phát triển chăn nuôi gia súc, gia cầm ở cáctrang trại Đặc biệt đã có nhiều công trình khoa học chứng minh về tác dụngphòng chống bệnh tật và kích thích tăng trởng của chế phẩm probiotic Bair[6] đã bổ sung một chủng lactobacillus vào thức ăn cho lợn và kết quả làmtăng trọng lợng lợn ở giai đoạn đầu và giai đoạn sinh trởng, tăng 8,4% so vớimẫu đối chứng

Nhìn chung, những nghiên cứu ứng dụng chế phẩm probiotic có tácdụng đáng kể đến hiệu quả chuyển hoá thức ăn, hạn chế bệnh và làm tăngtrọng đối với vật nuôi

- Chế phẩm EM dạng nớc để phun nền chuồng với hàm lợng 1lít chếphẩm/100 m2 bề mặt Gồm nhiều loài vi sinh vật probiotic có trong chế phẩmgốc EM nh nhóm sacharomyces, lactobacillus, các vi khuẩn quang hợp có lợivới mật độ 105-106 CFU/g trong môi trờng dịch đờng thích hợp.

- Chế phẩm EM dạng Bokashi bổ sung vào thức ăn gồm nhiều loài sinhvật probiotic có trong chế phẩm gốc EM nh: Nhóm sacharomyces,lactobacillus, các vi khuẩn quang hợp có lợi với mật độ 105-106 CFU/g tronghỗn hợp bột ngũ cốc nh bột ngô, cám gạo, rỉ đờng và nớc sạch

EM dạng nớc và Bokashi đã đợc giới thiệu ở Việt Nam trong nhữngnăm gần đây, do GS TS Higa ngời Nhật phát minh ra Tác dụng của EM rấtrộng rãi trên nhiều lĩnh vực nh trồng trọt, bảo vệ thực vật, bảo vệ môi trờngtrong chăn nuôi thú y

Do đặc điểm của EM là chế phẩm vi sinh vật nên sử dụng trong nôngnghiệp là rất thích hợp ở nhiều nớc trên thế giới, đặc biệt là các nớc khu vựcChâu á nh Pakistan, Thái Lan, Trung Quốc, Triều Tiên đã sử dụng chế phẩmnày ở phạm vi công nghiệp

Đề tài nghiên cứu ứng dụng chế phẩm này ở Việt Nam do PGS TS.Nguyễn Quang Thạch làm chủ nhiệm đã triển khai trên nhiều lĩnh vực [7]

 Tác dụng và vai trò của EM đối với vật nuôi và môi trờng

a) EM dạng nớc tác dụng nên môi trờng

Sự phát triển ồ ạt của các vi sinh vật có trong chế phẩm tạo nên sự cạnhtranh sinh tồn với các vi khuẩn có hại khác trong môi trờng chuồng trại Các

vi khuẩn có hại sẽ bị tiêu diệt do thiếu môi trờng sống Các vi khuẩn E.coli vàClostridium perfringens giảm đáng kể có ý nghĩa rất lớn trong vệ sinh môi tr-ờng, giảm thiểu mầm bệnh có thể gây bệnh đờng tiêu hoá cho vật nuôi đồngthời EM1 dạng nớc có tác dụng làm giảm nồng độ khí CO2, H2S và NH3 đángkể

Sản phẩm đợc ứng dụng rộng rãi trong môi trờng chăn nuôi gia súc, giacầm và cả môi trờng nuôi trồng thuỷ sản

Nh đã biết chăn nuôi hiện nay đang là nguồn thu nhập quan trọng củacác hộ nông dân cá thể Do điều kiện địa d chật hẹp và nuôi với mật độ cao vì