NGHIÊN CỨU HIỆU QUẢ KÝ SINH CỦA NẤM Paecilomyces spp. ĐỐI VỚI RỆP SÁP GIẢ Dysmicoccus sp. GÂY HẠI TRÊN CÂY KHÓM TẠI TỈNH TIỀN GIANG

NGHIÊN CỨU HIỆU QUẢ KÝ SINH CỦA NẤM Paecilomyces spp. ĐỐI VỚI RỆP SÁP GIẢ Dysmicoccus sp. GÂY HẠI TRÊN CÂY KHÓM TẠI TKHẢO SÁT KHẢ NĂNG ĐỐI KHÁNG CỦA MỘT SỐ DÒNG NẤMPAECILOMYCES SPP. VÀ TRICHODERMA SPP VỚI TUYẾNTRÙNG BƯỚU RỄ (MELOIDOGYNE SPP.) TRONG ĐIỀU KIỆNIN VITRO VÀ NHÀ LƯỚIỈNH TIỀN GIANG

KHOA NÔNG HỌC

  

Đề tài:

NGHIÊN C ỨU HIỆU QUẢ KÝ SINH CỦA

NẤM Paecilomyces spp ĐỐI VỚI RỆP SÁP GIẢ

TẠI TỈNH TIỀN GIANG

NGHIÊN C ỨU HIỆU QUẢ KÝ SINH CỦA NẤM

Paecilo-myces sp p ĐỐI VỚI RỆP SÁP Dysmicoccus sp GÂY HẠI

TRÊN CÂY KHÓM T ẠI TỈNH TIỀN GIANG

Tác giả:

LÊ THANH HIỀN

Khóa lu ận được đệ trình để hoàn thành yêu cầu cấp bằng kỹ sư nông nghiệp ngành Bảo vệ thực vật

Giảng viên hướng dẫn

TS VÕ THỊ THU OANH Cán bộ hướng dẫn ThS TRẦN THỊ MỸ HẠNH

Thành phố Hồ Chí Minh, tháng 07/2012

L ỜI CẢM ƠN

Trong suốt quá trình học tập và thực hiện đề tài này, ngoài sự nỗ lực của bản thân tôi đã nhận được sự động viên, giúp đỡ nhiệt tình của gia đình, thầy cô, bạn bè Cho phép tôi xin bày tỏ lời cảm ơn chân thành đến:

Ơn dưỡng dục sinh thành của cha mẹ, cha mẹ đã tạo mọi điều kiện thuận lợi cho tôi được đi học và có được kết quả như ngày hôm nay

Ban giám hiệu trường Đại học Nông Lâm Tp Hồ Chí Minh, Ban Chủ Nhiệm khoa Nông Học, Quý thầy cô giảng viên đã tạo điều kiện trong suốt quá trình học tập và nghiên cứu tại trường của tôi

Tiến sĩ Võ Thị Thu Oanh và thạc sĩ Trần Thị Mỹ Hạnh đã tận tình hướng dẫn, quan tâm, động viên và giúp đỡ tôi trong thời gian nghiên cứu thực hiện luận văn này

Ban lãnh đạo và cán bộ Viện Cây ăn quả miền Nam, các anh chị phòng Bảo vệ

thực vật, bộ môn Côn trùng đã tạo điều kiện thuận lợi cho tôi trong suốt thời gian làm thí nghiệm tại cơ quan

Gia đình anh Nguyễn Văn Huệ, xã Tân Lập 1, huyện Tân Phước tỉnh Tiền Giang

đã nhiệt tình hỗ trợ và giúp đỡ tôi thực hiện các thí nghiệm ngoài đồng

Cùng gia đình, bạn bè đã tận tình giúp đỡ, cung cấp thông tin tài liệu và động viên tôi trong quá trình học tập và thực hiện luận văn tốt nghiệp này

Thủ Đức, ngày 20 tháng 7 năm 2012

Lê Thanh Hiền

TÓM T ẮT

Đề tài “Nghiên cứu hiệu quả ký sinh của nấm Paecilomyces spp đối với rệp sáp

Dysmicoccus sp trên cây khóm t ại tỉnh Tiền Giang” được tiến hành tại Viện Viện Cây

ăn quả miền Nam xã Long Định huyện Châu Thành tỉnh Tiền Giang, thời gian từ tháng 2 năm 2012 đến tháng 6 năm 2012 Mục đích nghiên cứu xác định khả năng ký sinh của

một số dòng nấm Paecilomyces spp đối với rệp sáp Dysmicoccus sp gây hại trên cây

khóm Thí nghiệm được bố trí trong phòng thí nghiệm, nhà lưới và đồng ruộng để chọn ra dòng nấm Paecilomyces spp ký sinh có hiệu quả đối với rệp sáp Dysmicoccus sp trong

điều kiện phòng thí nghiệm và nhà lưới để áp dụng vào thực tế sản xuất

Kết quả: Ở điều kiện phòng thí nghiệm, cả 6 dòng nấm Paecilomyces spp đều có

khả năng rệp sáp Dysmicoccus sp., trong đó 2 dòng nấm ký sinh tốt nhất là Paecilomyces

spp phân lập từ đất cây cúc (P.cúc) và Paecilomyces spp phân lập từ rầy chổng cánh

(P.RCC1) với khả năng kiểm soát 72,51 – 86,32% rệp sáp tuổi 2 Tỷ lệ nấm mọc ra bên

ngoài cơ thể rệp sáp trong điều kiện phòng thí nghiệm của 2 dòng Paecilomyces spp này

và dòng nấm Paecilomyces spp phân lập từ đất trồng cây vú sữa (P.VS) sau 3- 5 ngày

theo dõi là 85,99% và 79,24%

Trong điều kiện nhà lưới, ở 11 NSP dòng nấm Paecilomyces spp phân lập từ rầy

chổng cánh (P.RCC1) đạt hiệu quả kiểm soát 99,24% rệp sáp tuổi 2,với tỷ lệ rệp sáp chết đạt 87,97%

Trên thực tế đồng ruộng, nấm Paecilomyces spp phân lập từ rầy chổng cánh

(P.RCC1) có hiệu quả sau 2 lần phun với khả năng kiểm soát 78,49% rệp sáp ở lần phun

thứ nhất, lần phun thứ 2 đạt 90,96%

M ục lục

Trang tựa i

Lời cám ơn ii

Tóm tắt iii

Mục lục iv

Danh sách các bảng vi

Danh sách các hình vii

Danh sách các bảng phụ lục viii

Danh sách các chữ viết tắt, ký hiệu ix

Chương I: Mở đầu 1

1.1 Đặt vấn đề 1

1.2 Mục đích, yêu cầu, giới hạn đề tài 2

1.2.1 Mục đích 2

1.2.2 Yêu cầu 2

1.2.3 Giới hạn đề tài 2

Chương II: Tổng quan 3

2.1 Nguồn gốc và tình hình sản xuất dứa ở Việt Nam 3

2.2 Giới thiệu về bệnh héo khô đầu lá (wilt) 3

2.2.1 Nhận diện bệnh héo khô đầu lá (wilt) 4

2.2.2 Nguyên nhân gây bệnh héo khô đầu lá (wilt) 5

2.3 Giới thiệu về rệp sáp Dysmicoccus sp gây hại trên khóm 6

2.3.1 Đặc điểm hình thái, sinh học và cách gây hại của rệp sáp Dysmicoccus sp 6

2.3.2 Những nghiên cứu về biện pháp phòng trừ rệp sáp Dysmicoccus sp 8

2.4 Giới thiệu về nấm Paecilomyces spp 9

2.4.1 Nguồn gốc và phân loại nấm Paecilomyces spp 9

2.4.2 Đặc điểm hình thái, sinh học của nấm Paecilomyces spp 10

2.5 Các nghiên cứu ứng dụng về nấm Paecilomyces spp 11

2.5.1 Các nghiên cứu trong nước về nấm Paecilomyces spp 11

2.5.2 Các nghiên cứu ngoài nước về nấm Paecilomyces spp 12

Chương III: Vật liệu và phương pháp 14

3.1 Thời gian, địa điểm nghiên cứu 14

3.1.1 Thời gian nghiên cứu 14

3.1.2 Địa điểm nghiên cứu 14

3.2 Vật liệu thí nghiệm 14

3.3 Nội dung nghiên cứu 15

3.4 Phương pháp nghiên cứu 15

3.4.1 Khảo sát khả năng ký sinh rệp sáp Dysmicoccus sp của các dòng nấm Paecilomyces spp thu được trong điều kiện phòng thí nghiệm 15

3.4.2 Khảo sát hiệu quả ký sinh của nấm Paecilomyces spp đối với rệp sáp Dysmicoccus sp trong điều kiện nhà lưới 17

3.4.3 Khảo sát hiệu quả ký sinh của nấm Paecilomyces spp đối với rệp sáp Dysmicoccus sp ở điều kiện ngoài đồng 19

3.5 Xử lý số liệu 21

Chương IV: Kết quả và thảo luận 22

4.1 Khảo sát khả năng ký sinh rệp sáp Dysmicoccus sp của các dòng nấm Paecilomyces spp thu được trong điều kiện phòng thí nghiệm 22

4.1.1 Khả năng gây chết rệp sáp Dysmicoccus sp của các dòng nấm Paecilomyces spp thu được trong điều kiện phòng thí nghiệm 22

4.1.2 Khả năng ký sinh rệp sáp Dysmicoccus sp của các dòng nấm Paecilomyces spp thu được trong điều kiện phòng thí nghiệm 25

4.2 Khảo sát hiệu quả của nấm Paecilomyces spp đối với rệp sáp Dysmicoccus sp trong điều kiện nhà lưới 28

4.3 Khảo sát hiệu quả của nấm Paecilomyces spp đối với rệp sáp Dysmicoccus sp trong điều kiện ngoài đồng 30

Chương V: Kết luận và đề nghị 32

5.1 Kết luận 32

5.2 Đề nghị 33

TÀI LIỆU THAM KHẢO 34

PHỤ LỤC 39

DANH SÁCH CÁC B ẢNG

Bảng 3.1: Các dòng nấm Paecilomyces spp sử dụng trong nghiên cứu 14

Bảng 3.2: Các nghiệm thức trong thí nghiệm ở điều kiện phòng thí nghiệm 16

Bảng 3.3: Các nghiệm thức trong thí nghiệm ở điều kiện nhà lưới 18

Bảng 3.4: Các nghiệm thức trong thí nghiệm ở điều kiên ngoài đồng 19

Bảng 4.1: Hiệu quả ký sinh của các dòng nấm Paecilomyces spp đến tỷ lệ chết của rệp sáp Dysmicoccus sp trong điều kiện phòng thí nghiệm 22

Bảng 4.2: Mật số rệp sáp sống ở các nghiệm thức thí nghiệm 24

Bảng 4.3: Hiệu lực của các dòng nấm Paecilomyces spp khảo nghiệm ký sinh rệp sáp Dysmicoccus sp trong điều kiện phòng thí nghiệm 25

Bảng 4.4: Tỷ lệ mọc nấm Paecilomyces spp trên cơ thể rệp sáp sau khi rệp sáp chết của 6 dòng nấm khảo nghiệm trong phòng thí nghiệm 26

Bảng 4.5: Ảnh hưởng của nấm Paecilomyces spp ký sinh đến tỷ lệ rệp sáp chết ở điều kiện nhà lưới 29

Bảng 4.6: Mật số rệp sáp sống ở các nghiệm thức nấm trong điều kiện nhà lưới 29

Bảng 4.7: Độ hữu hiệu của 2 dòng nấm Paecilomyces spp và thuốc Prodife trong phòng trừ rệp sáp ở điều kiện nhà lưới 30

Bảng 4.8: Mật số rệp sáp sống ở các nghiệm thức thí nghiệm ở điều kiện ngoài đồng 31

Bảng 4.9: Khả năng kiểm soát rệp sáp Dysmicoccus sp của nấm Paecilomyces spp RCC1 và thuốc Rholam 50WP ở điều kiện ngoài đồng 31

DANH SÁCH CÁC HÌNH

Hình 3.1: Thu rệp sáp Dysmicoccus sp.ngoài đồng 15

Hình 3.2: Chọn rệp cái trưởng thành 16

Hình 3.3: Thả rệp cái trưởng thành lên quả bí đỏ 15

Hình 3.4: Đặt quả bí đỏ đã thả rệp vào lồng nuôi để nhân sinh khối 16

Hình 3.5: Phương pháp trồng khóm trong thí nghiệm 2 18

Hình 4.1: Ảnh hưởng của 6 dòng nấm Paecilomyces spp ký sinh đến số rệp sáp chết ở các thời điểm theo dõi 22

Hình 4.2: Rệp sáp chết ở nghiệm thức P.VS 27

Hình 4.3: Nấm P.VS mọc ra ngoài cơ thể ở ngày thứ 3 sau khi rệp sáp chết 27

Hình 4.4: Rệp sáp chết ở nghiệm thức P.TH 27

Hình 4.5: Nấm P.TH mọc ra ngoài cơ thể ở ngày thứ 6 sau khi rệp sáp chết 27

Hình 4.6: Rệp sáp chết ở nghiệm thức P.cúc 28

Hình 4.7: Nấm P.cúc xuất hiện ra ngoài cơ thể ngày thứ 4 sau khi rệp sáp chết 28

DANH SÁCH CÁC B ẢNG PHỤ LỤC

Phụ lục 1: Bảng xử lý thống kê tỷ lệ rệp sáp chết trong thí nghiệm phòng thí nghiệm 39

Phụ lục 3: Bảng xử lý thống kê lệ rệp sáp chết trong thí nghiệm nhà lưới 49

Phụ lục 4: Bảng mật số rệp sáp chết trong thí nghiệm ngoài đồng 58

DANH SÁCH CÁC CH Ữ VIẾT TẮT, KÝ HIỆU

BVTV: Bảo vệ thực vật

Ctv: cộng tác viên

NSP: Ngày sau phun

P.cúc: Paecilomyces spp phân lập từ đất trồng cây cúc

P.L: Paecilomyces spp nguồn từ Nhật

P.RCC1: Paecilomyces spp phân lập từ rầy chổng cánh Long Hưng Tiền Giang (1) P.RCC2: Paecilomyces spp phân lập từ rầy chổng cánh Long Hưng Tiền Giang (2)

P.VS: Paecilomyces spp phân lập từ đất trồng cây vú sữa

P.TH: Paecilomyces spp phân lập từ rầy chổng cánh

TP: Trước khi phun

và ctv 2006) Tuy nhiên diện tích canh tác loại cây trồng này đang giảm dần do nhiều nguyên nhân, trong đó chủ yếu là do bệnh héo khô đầu lá wilt gây ra, làm sản lượng khóm rơi vào tình trạng “cung không đủ cầu” Rệp sáp là vector lan truyền bệnh, do đó để quản

lý bệnh wilt thì chủ yếu tập trung quản lý rệp sáp gây hại trên cây khóm Hiện nay, các

biện pháp phòng trừ rệp sáp chủ yếu là sử dụng các loại thuốc hoá học, nhưng phương pháp này kém hiệu quả và làm ảnh hưởng đến sức khỏe con người Một số nghiên cứu về

biện pháp sinh học cho thấy, việc áp dụng cân bằng sinh thái trong biện pháp phòng trừ

rệp sáp gặp rất nhiều khó khăn do loài này sống cộng sinh với kiến (Nguyễn Văn Huỳnh

và Lê Thị Sen, 2003)

Bằng cách nào có thể bảo vệ tốt các vườn khóm, an toàn cho sức khỏe người tiêu dùng mà vẫn đảm bảo năng suất và phẩm chất trái Một trong những phương pháp có khả năng giải quyết được những vấn đề trên là sử dụng nấm ký sinh côn trùng Phương pháp này không những đảm bảo an toàn cho sức khỏe con người mà còn dễ áp dụng trên diện rộng, một trong những loài được ghi nhận có hiệu quả phòng trừ cao là nấm Paecilomyces spp

Xuất phát từ thực tế trên, đề tài: “Nghiên cứu hiệu quả ký sinh của nấm

Paecilo-myces spp đối với rệp sáp Dysmicoccus sp gây hại trên cây khóm tại tỉnh Tiền Giang”

được thực hiện

1.2 Mục đích, yêu cầu, giới hạn đề tài

1.2.1 Mục đích

- Xác định khả năng ký sinh của một số dòng nấm Paecilomyces spp đối với rệp sáp

Dysmicoccus sp gây hại trên cây khóm

- Chọn ra dòng nấm Paecilomyces spp ký sinh có hiệu quả đối với rệp sáp Dysmicoccus

sp trong điều kiện phòng thí nghiệm và nhà lưới để áp dụng vào thực tế sản xuất

1.2.2 Yêu cầu

- Theo dõi, so sánh khả năng ký sinh rệp sáp Dysmicoccus sp của các dòng nấm

Paeci-lomyces spp trong điều kiện phòng thí nghiệm

- Theo dõi, so sánh và đánh giá hiệu quả của nấm Paecilomyces spp và thuốc Rholam

50WP đối với rệp sáp Dysmicoccus sp trong điều kiện nhà lưới và ngoài đồng

1.2.3 Giới hạn đề tài

Thời gian thực hiện đề tài trong vòng 4 tháng nên các thí nghiệm chỉ được thực

hiện một lần, kết quả thu được chỉ có ý nghĩa bước đầu Cần có những nghiên cứu sâu hơn với qui mô lớn hơn sát với thực tế sản xuất

Chương II

2.1 Nguồn gốc và tình hình sản xuất khóm ở Việt Nam

Theo Baker và Collins (1939) thì nguồn gốc cây dứa có thể là miền Nam Brazin Bắc Achentina và Paragoay vì ở đó có nhiều dạng dứa hoang dại Hiện nay cây dứa được

trồng ở phạm vi vĩ độ 30, tập trung nhất là 22 Trừ Châu Âu, hầu hết các châu khác đều

có trồng dứa:

- Châu Mỹ: Hawai, Cuba, Equador, Giamaica, Barazin, Hoa Kỳ, Poctorico v.v…

- Châu Úc: Queensland - Châu Phi: Nam Phi, Ghinê, Rcunion, Gana, Tandania

- Châu Á: Mã Lai, Indonêxia, Trung Quốc, Thái Lan, Philippin, Pakistan, Việt Nam

Ở Việt Nam đến hết năm 2005 cả nước có 47.400 ha trong đó ở miền Bắc 18.400

ha, miền Nam 28.900 ha, các tỉnh vùng Đồng bằng sông Cửu Long có diện tích dứa rất lớn (chiếm 43,67% so cả nước) Riêng tỉnh Tiền Giang có 10.100 ha (21,31%), Kiên Giang 7.000 ha (14,77%), Hậu Giang 1.400 ha (2,95%) Trong khi đó cả miền Bắc chỉ chiếm 38,82% Năng suất bình quân cả nước 12,85 tấn/ha, riêng miền Bắc 12,06 tấn, các tỉnh đồng bằng sông Cửu Long 13,80 tấn (Vũ Quốc Việt và ctv 2006)

2.2 Giới thiệu về bệnh héo khô đầu lá (bệnh wilt)

Bệnh héo khô đầu lá (wilt) được ghi nhận đầu tiên vào năm 1910, nhưng từ khô (wilt) được sử dụng bao gồm tất cả các triệu chứng khô dẫn đến chết hệ thống rễ Đến năm 1912 bệnh được ghi nhận chỉ ở một vài vườn Nhưng đến 1920, cả đồng dứa đều bị

bệnh Đến 1925, Horner báo cáo từ Hawaii cho rằng có sự tác động giữa khô đầu lá, rệp sáp với kiến và đề nghị phòng trừ kiến Sau đó Illingworth (1931) cho rằng rệp sáp là tác nhân gây bệnh và cho rằng kiến là vật có ích

Hơn 50 năm nghiên cứu, bệnh héo khô đầu lá dứa được xem là liên hệ với sự chích hút của rệp sáp và do sự tiết độc tố từ rệp sáp khi chúng chích hút trên cây Giả thuyết này

được hỗ trợ thêm khi quan sát mối quan hệ giữa mật số rệp sáp hiện diện và tỷ lệ cây nhiễm bệnh héo khô đầu lá bằng cách khống chế số lượng rệp sáp trên từng cây khỏe Giả thuyết này về sau được bổ sung bằng cách quan sát cây khỏe không trở nên nhiễm bệnh khi chúng được chủng bởi các nguồn rệp sáp từ cây không nhiễm bệnh Bệnh xảy ra nếu rệp sáp được nuôi trên cây nhiễm bệnh trước đó Vì vậy, một giả thuyết khác cho rằng rệp sáp tác nhân truyền bệnh Bằng chứng đầu tiên do Singh và Sastry (1974) báo cáo là bệnh

do virus gây ra và được truyền bởi rệp sáp Họ báo cáo là khi rệp sáp được nuôi trên cây khỏe khi chuyển chúng sang cây khỏe khác thì không có một triệu chứng nào xuất hiện, trong khi đó khi rệp sáp được thả lên cây bệnh 24 – 28 giờ rồi chuyển sang cây khỏe, thì triệu chứng đầu tiên xuất hiện vào ngày 40 – 50 sau khi chủng Với kết quả này, họ đã loại bỏ giả thuyết do độc tố và cho rằng bệnh là do virus gây ra, virus này được truyền qua rệp sáp Họ đặt tên bệnh là héo khô đầu lá virus (pineapple wilt virus)

Bệnh héo khô đầu lá dứa - rệp sáp được truyền qua rệp sáp: Dysmicoccus brevipes

CK1, D neobrevipes, Pseudococcus brevipes Ngay cả một rệp sáp cũng có thể truyền

bệnh, tuy nhiên để bảo đảm 100% truyền bệnh cần ít nhất 20 rệp sáp (Singh và Sastry, 1974) Cây chủng bệnh biểu hiện triệu chứng sau 50 đến 60 ngày Bird (1954) quan sát

thấy rằng chỉ một con rệp sáp D brevipes có thể truyền bệnh hiệu quả nếu chúng được đặt

trên cây khoẻ trong 24 giờ Sether và ctv (1998) báo cáo rằng tất cả các giai đoạn của D

neobrevipes có thể truyền bệnh hiệu quả Tuy nhiên khả năng truyền bệnh giảm khi rệp sáp già hơn

2.2.1 Nhận diện bệnh héo khô đầu lá (wilt)

Mô tả theo Nguyễn Văn Huỳnh và Lê Thị Sen, 2003

Triệu chứng điển hình của bệnh là khô và héo lá bắt đầu từ chóp hướng xuống, kết hợp với màu đỏ vàng của cây bị héo khô, chúng được nhóm thành 4 giai đoạn sau:

1 Giai đoạn 1: Vàng đồng đến đỏ xuất hiện trên lá thứ ba, thứ tư, rìa lá phản chiếu từ bên trong, chóp lá của những lá chưa hướng cong xuống Cây chưa lộ triệu chứng nhỏ hơn bình thường

2 Giai đoạn 2: Lá biểu hiện màu hồng sáng và vàng, mất sức trương, chóp lá nâu sáng, thỉnh thoảng cong chóp lá và hoại ở phần cuối chóp lá

3 Giai đoạn 3: Vòng lá thứ tư và thứ năm cong xuống, mép lá chuyển sang vàng hoặc

hồng, chóp lá cong hướng lên, cây nhỏ hơn bình thường

4 Giai đoạn 4: Lá ở chồi hướng thẳng đứng nhưng mất cường lực, đỉnh lá cong úp lại nâu

và khô, màu xanh tối với những mãng màu hồng, lá ngoài rủ xuống, rễ cây hoàn toàn thối rữa, cây khô và chết

Vào mùa mưa, màu đỏ của lá bệnh đặc trưng, thường biểu hiện màu vàng nâu, trên

lá thường có các vết hoại thư lớn Trước khi lá thay đổi màu sắc đã có sự ngừng tăng trưởng của bộ rễ và dần dần bộ rễ bị hư Trong trường hợp bị nhiễm nặng, cây gần như

chết hoàn toàn, tuy nhiên cây bị bệnh wilt bao gồm cả sự tiêu hủy bộ rễ và cây bị khô

2.2.2 Nguyên nhân gây b ệnh héo khô đầu lá (wilt)

Bệnh do virus PMWaV (Pineapple Mealybug Wilt associated Virus) gây ra, chúng lan truyền từ vụ này sang vụ khác bằng nguồn giống đã bị nhiễm bệnh từ cây mẹ ở vụ trước, hoặc thông qua môi giới truyền bệnh là rệp sáp Bệnh thường xuất hiện và gây hại nặng trong các tháng mùa khô ở các tỉnh phía Nam (Lê Văn Bé, 2011)

Rệp sáp là vector truyền virus từ cây này sang cây khác Kết quả thí nghiệm lây truyền bệnh trên dứa Cayene bằng rệp môi giới cho thấy với ngưỡng mật độ 10 rệp nhiễm bệnh trên một cây sẽ làm cho cây khóm bị nhiễm bệnh Thời gian ủ bệnh (từ khi thả rệp đến lúc cây bắt đầu có biểu hiện triệu chứng bệnh) là 3,5 – 4 tháng (nguồn: Chi cục bảo

vệ thực vật thành phố Hồ Chí Minh, 2010)

Kiến là tác nhân phát tán rệp sáp Trên ruộng bị bệnh héo khô đầu lá thường có

mặt kiến và rệp sáp Khi có cả hai đối tượng này (virus và rệp sáp) trên cây khóm thì triệu chứng héo khô đầu lá thể hiện ra ngoài Khi có một yếu tố (hoặc virus hoặc rệp sáp) hiện

diện trên cây khóm thì triệu chứng không thể hiện ra ngoài (Lê Văn Bé, 2011)

Do vậy, muốn phòng trừ bệnh héo khô đầu lá có hiệu quả thì phải quản lý tốt tor truyền bệnh, đồng nghĩa với việc quản lý rệp sáp và kiến lây lan trên đồng ruộng

vec-2.3 Giới thiệu về rệp sáp Dysmicoccus sp gây hại trên khóm

Rệp sáp (Dysmicoccus sp.) hại khóm còn có tên là Pseudococcus sp., là một loài côn trùng thuộc họ Pseudococcidae (Rệp sáp phấn), bộ Homoptera (Cánh đều) (Nguyễn

Văn Huỳnh và Lê Thị Sen, 2003)

Loài này xuất hiện phổ biến ở hầu hết vùng nhiệt đới và cận nhiệt đới Tại châu Á,

hiện diện chủ yếu ở Campuchia, Trung Quốc, Ấn Độ, Indonesia, Nhật, Malaysia, Paskistan, Philippines, Singapore, Srilanka, Việt Nam (Nguyễn Thị Thu Cúc, 2000)

Rệp sáp Dysmicoccus sp thuộc loài đa ký chủ, tấn công trên 100 giống cây trồng

thuộc 53 họ (Ben-Dov, 1994) Nhưng đặc biệt, chúng thích sống trên cây khóm hơn các cây trồng khác Ở các tỉnh Đồng bằng sông Cửu Long, do thời tiết khô và nóng ẩm nên loài này phát triển và gây hại khá nặng nề trên 5 tỉnh có diện tích trồng khóm nhiều nhất khu vực là Kiên Giang, Tiền Giang, Cà Mau, Cần Thơ, Long An (Lê Quốc Điền, 2011)

2.3.1 Đặc điểm hình thái, sinh học và cách gây hại của rệp sáp Dysmicoccus sp

Đặc điểm hình thái

Con trưởng thành hình bầu dục dài khoảng 3 mm, rộng 1,5 - 3 mm, không cánh, thân mềm, xung quanh có nhiều sợi tua sáp trắng, bên ngoài phủ một lớp bột sáp trắng, có nhiều vân ngang theo ngấn đốt cơ thể nhất là các đốt bụng Mặt dưới cơ thể phẳng, có màu hồng, nếu gạt lớp phấn ra mặt trên lưng cũng có màu hồng Xung quanh cơ thể có 17 cặp tua cerarii rất rõ ràng, riêng cặp tua đốt cuối bụng dài và thẳng hơn các cặp khác

Trứng hình bầu dục nhỏ, màu trắng trong Rệp non đến tuổi 2 bắt đầu có lớp sáp trắng bao phủ, kích thước cơ thể 1,5 – 2 mm (Nguyễn Thị Chắt, 2001)

Đặc điểm sinh học

Rệp sáp có khả năng sinh sản theo lối trinh sản, sinh trưởng phát triển nhanh, đặc biệt trong thời tiết nóng và ẩm Vòng đời từ 40 - 60 ngày nên có nhiều lứa nối tiếp gây hại quanh năm (thường có khoảng 6 - 7 lứa/ năm), nhất là các tháng mùa khô hạn (Nguyễn

Thị Chắt, 2001)

Trứng được đẻ thành bọc, trong bọc các trứng xếp chồng lên nhau, phía ngoài bọc

có lớp sáp bông trắng bao phủ Rệp sáp thường đẻ trứng ở phía chân các lá già, cổ rễ sát thân cây Rệp non sau khi nở bò đi tìm chỗ thích hợp để định vị sinh sống, thường là ở

gốc cây, cuống quả gần mặt đất, sau lần lột xác thứ nhất chuyển sang màu hồng nhạt, chưa có lớp phấn bao phủ, hoạt động nhanh nhẹn (Nguyễn Thị Chắt, 2001)

Rệp non đến tuổi 2 bắt đầu di chuyển chậm chạp và thường tìm các nơi kín đáo để sinh sống Rệp sáp thường sống cộng sinh với kiến đen Khi bài tiết, rệp thải ra một chất dịch có độ đường rất cao làm thức ăn cho kiến vì thế kiến giúp rệp di chuyển từ cây này sang cây khác bằng cách tha chúng đi phát tán khắp các bộ phận non, đây chính là con đường lây lan bệnh virus (bệnh wilt) từ cây bệnh sang cây khỏe Rệp sáp tấn công trên tất

cả các bộ phận của cây khóm như: rễ, chồi, thân, lá và quả non (Nguyễn Thị Chắt, 2001)

Cách gây h ại

Cả ấu trùng và thành trùng thường sống tập trung dưới gốc cây khóm, nhưng đôi khi cũng di chuyển cả lên lá, trái Rệp sáp tập trung chích hút dưới gốc rễ làm cả hệ thống

rễ bị hư, cây héo rất giống triệu chứng do bệnh gây ra Ngoài ra, nước bọt do rệp sáp tiết

ra trong khi chích hút làm nghẽn mạch dẫn nhựa, cây bị héo Hơn nữa, việc di chuyển nước lên trên khó khăn cũng làm cho bộ rễ bị hư và toàn cây bị héo khô; trái nhỏ, mất

phẩm chất Sự thiệt hại thay đổi với tuổi cây, hom giống, điều kiện đất đai, điều kiện tưới tiêu nước và kỹ thuật canh tác Cây bị rệp sáp gây hại phát triển kém, nếu cho trái được thì những trái này thường nhỏ, bị chín háp, chua và cuối cùng bị khô Ngoài ra rệp sáp còn thu hút nấm bồ hóng sống ký sinh trên cây làm ảnh hướng đến khả năng quang hợp (Nguyễn Thị Chắt, 2003)

Quan trọng hơn cả là trong quá trình chích hút rệp sáp còn truyền virus gây bệnh khô đầu lá hay còn gọi là bệnh wilt trên khóm (Lê Quốc Điền, 2011)

2.3.2 Những nghiên cứu về biện pháp phòng trừ rệp sáp Dysmicoccus sp

Biện pháp canh tác

Singh và Sastry (1974) nghiên cứu sự ảnh hưởng của từng mức độ phân bón NPK

và khoảng cách trồng đến tỷ lệ bệnh trên đồng 42,7% bệnh được ghi nhận trên lô với NPK 4g, 0g và 2,5 g trên cây Bệnh giảm dần khi nâng hàm lượng đạm Bệnh ít nhất trên

lô có NPK là 16g, 6g và 10g trên cây

Theo Bose và Mitra (1990), phòng trị rệp sáp bằng cách diệt nguồn trứng, tiêu hủy các cành bị nhiễm rệp, hạn chế rệp lên cây, hạn chế kiến bằng cách đào kênh rạch xung quanh vườn, làm hàng rào cản hạn chế sự di chuyển của kiến

+ Chỉ sử dụng những loại thuốc trừ sâu ít tổn hại đến thiên địch

+ Khi phát hiện có sự hiện diện của rệp sáp, có thể sử dụng dầu khoáng DC-Tron Plus (nồng độ 0,5%), hoặc các loại như Ofen, Supracide, Trebon,…để phòng trị Cần lưu

ý sử dụng luân phiên các loại thuốc hóa học khác nhau để tránh tình trạng rệp sáp quen thuốc

Theo Vũ Quang Giảng (2008) báo cáo thuốc Visher 25ND và Vibasa 50ND có hiệu quả tương đối cao với rệp sáp nâu Để phòng trừ rệp sáp mềm nâu cần áp dụng các biện pháp canh tác như tỉa cành, chồi vượt làm cho cây thông thoáng và hạn chế nguồn lây nhiễm Khi phun thuốc cần phun ngửa tay để thuốc dễ tiếp xúc với rệp sáp mềm nâu sẽ có hiệu quả cao hơn

Bi ện pháp sinh học

Các biện pháp sinh học chủ yếu là sử dụng các loài côn trùng có ích làm thiên dịch Theo Nguyễn Thị Chắt (2005) ghi nhận rệp sáp Dysmicoccus sp có 12 loài thiên địch, trong đó có 9 loài thiên địch ăn mồi, 2 loài nấm ký sinh và 1 loài ong ký sinh

Biện pháp này cũng khá phổ biến và tỏ ra hữu hiệu để phòng trị rệp sáp trên khóm

ở một số nước hiện nay bằng bọ rùa Nephus bilucenarius và Scymnus uncinatus bach và ctv, 1988), Ong ký sinh Encyrtids và mu ỗi Cecidomyid (nguồn trích: Nguyễn Thị

(Rohr-Chắt, 2005)

Theo Vũ Thị Nga (2007) nghiên cứu về biện pháp phòng trừ rệp sáp giả trên mãng

cầu xiêm cho thấy khả năng sử dụng bọ rùa 2 chấm vàng Scymnus bipunctatus đạt hiệu

quả đến 95,77% vào thời điểm sau 3 ngày thả ấu trùng bọ rùa và 98,85% đối với chuồn chuồn cỏ xanh (bọ mắt vàng) Chrysopa sp để hạn chế số lượng rệp sáp Dysmicoccus sp

gây hại mãng cầu xiêm

Các thí nghiệm tại Ấn Độ báo cáo sử dụng thiên địch Leptomastix dactylopii How,

Anagyrus agraenis Saraswat, A mizai Agarwal và Coccidoxnoides peregrinus cũng hạn

thử nghiệm khả năng ký sinh, một số kết quả nghiên cứu cho thấy Paecilomyces spp là

một trong những loài nấm ký sinh trên rệp sáp có hiệu quả (Liang, 1981b)

2.4 Giới thiệu về nấm Paecilomyces spp

2.4.1 Nguồn gốc và phân loại nấm Paecilomyces spp

Theo hệ thống phân loại nấm của Anisworth (1966, 1970, 1971) thì nấm

Paecilo-myces thu ộc ngành phụ lớp nấm bất toàn Deuteromycetes, giống Paecilomyces

Giới: Nấm

Trên thế giới, nấm Paecilomyces có khoảng 31 loài, trong đó có thể kể đến là

Pae-cilomyces javanicus, PaePae-cilomyces tenuipes, PaePae-cilomyces amoeneroseus, PaePae-cilomyces lilacinus, (Samson, 1974) Paecilomyces có phổ ký sinh côn trùng rộng, cả vùng nhiệt đới Loài nấm này được thu thập từ đất ở Nam Phi, Nepal, Nhật Bản, Brazil và Mỹ Liang (1981b) đã phân lập được nấm Paecilomyces spp., nấm này có thể ký sinh trên nhiều loài

thuộc bộ cánh cứng, bộ cánh nửa cứng, bộ cánh màng, bộ cánh vẩy và bộ hai cánh

2.4.2 Đặc điểm hình thái, sinh học của nấm Paecilomyces spp

Nấm Paecilomyces spp được phân loại vào nhóm nấm bất toàn Deuteromyceter,

Paecilomyces spp cũng được phân loại vào chi Isarioidea, là chi bao gồm các loại nấm

có quá trình sinh trưởng và phát triển còn sơ khai, kém hoàn thiện Hình dạng của

Paeci-lomyces spp là một sợi nấm dài và phức tạp, trên đó có nhiều sợi nấm Sợi nấm là cấu trúc một chùm sợi tỏa ra từ một nhánh Sợi nấm có khả năng sinh sản gọi là Conidio-phores Từ điểm cuối của một nhánh, ngay vị trí của bào tử, sản sinh ra nhiều nhánh, từ nhánh mới bào tử mọc và sẽ phát triển khi gặp môi trường thích hợp, có đủ chất dinh

dưỡng Một quần thể nấm Paecilomyces spp khi gặp môi trường thạch chứa mạch nha sẽ

phát triển rất nhanh, đạt kích thước 5 - 7 cm trong vòng 14 ngày ở nhiệt độ 250

C Lúc đầu khuẩn lạc Paecilomyces spp có màu trắng nhưng sau đó khi bào tử hình thành khuẩn lạc

Paecilomyces spp sẽ chuyển sang màu đỏ rượu nho, hồng tím, những hypha sinh trưởng

sẽ trở nên trong suốt, phẳng và rộng 2,5 - 4,0 µm, Conidiophores sản sinh từ những hypha

bị chìm trong chất thạch dài khoảng 400 - 600 µm hoặc cũng có thể sản sinh từ những hypha nổi phía trên với độ dài bằng một nửa, các nhánh sản sinh từ một phần cơ bản của

sợi nấm bị phình to ra, đâm thành một cổ nhánh rõ ràng và cứ thế lớn lên Các bào tử nấm thay đổi từ hình elip sang hình thoi, từ trơn nhẵn sang xù xì (nguồn trích: Trần Kiều Lâm, 2010)

Nấm Paecilomyces spp rất cần dưỡng chất trong quá trình phát triển, nếu thiếu dưỡng chất sẽ làm giảm khả năng gây bệnh đối với côn trùng Nhiệt độ và ẩm độ cũng

ảnh hưởng tới sự hình thành và phát triển của bào tử nấm Paecilomyces Nhiệt độ thấp sẽ

làm tăng khả năng sinh bào tử của nấm và có lợi cho việc duy trì sự sống của nấm, tuy nhiên ẩm độ cao sẽ có lợi cho bào tử nảy mầm và sự sinh trưởng của sợi nấm Nấm ký sinh côn trùng nói chung rất cần có ánh sáng cho sự phát triển và nấm Paecilomyces spp

cũng không ngoại lệ Ánh sáng là nhân tố không thể thiếu trong sự hình thành bào tử của

nấm Paecilomyces spp (Trần Văn Mão, 2002)

Triệu chứng biểu hiện nhiễm nấm của côn trùng

Khi bị bệnh nấm, côn trùng ngưng vận động từ 2 - 3 ngày, thậm chí một tuần, trước khi nấm phát triển dày đặc trong toàn bộ cơ thể côn trùng, khi vật chủ chết, bào tử

nấm sẽ mọc bao quanh bên ngoài làm cho cơ thể côn trùng có màu tím, thân hơi cứng lại, sau đó cơ thể khô và chỉ còn lại lớp vỏ (Padmaja, 2006)

2.5 Các nghiên cứu ứng dụng về nấm Paecilomyces spp

2.5.1 Các nghiên cứu trong nước về nấm Paecilomyces spp

Theo một số kết quả nghiên cứu Paecilomyces là một trong những loài nấm ký

sinh trên rệp sáp Phạm Thanh Hùng (2007) đã ghi nhận kết quả điều tra nấm ký sinh tại các vườn cây ăn trái với kết quả như sau: tình hình rệp sáp bị nấm ký sinh tại vườn dâu tại

ấp Mỹ Ái, xã Mỹ Khánh, huyện Phong Điền, TP Cần Thơ khá cao (89%), với nhiệt độ

290C và ẩm độ 73% là điều kiện rất thuận lợi cho nấm ký sinh phát triển trên rệp sáp Kết quả phân lập nấm ký sinh trên rệp sáp tại vườn dâu là nấm Paecilomyces spp Thử nghiệm

trong phòng thí nghiệm nhận thấy chủng nấm Pae - RS cho hiệu lực ký sinh rệp sáp nhanh

và kéo dài đến 11 ngày sau khi phun, đạt 91,25% Đồng thời Pae - RS cho tỷ lệ mọc nấm cao nhất (90,07%)

Theo Huỳnh Ngọc Hài và ctv (2008) đã phân lập được nấm Paecilomyces spp

trên rệp sáp vú sữa và trên rầy chổng cánh Paecilomyces spp có hiệu quả diệt rệp sáp đạt

70 - 76 % ở thời điểm sau 11 ngày chủng nấm

Từ năm 2010 đến nay, nhóm nghiên cứu nấm ký sinh côn trùng - Viện Bảo vệ thực

vật đã tiến hành điều tra, thu thập và phân lập được một số loài nấm ký sinh tự nhiên trên sâu hại Trên ve sầu hại cà phê ở Đắk Lắk đã xác định được nấm Paecilomyces cicadae

(Miquel) Samson ký sinh trên sâu non

Kết quả đánh giá bước đầu cho thấy nấm Paecilomyces spp đạt hiệu quả phòng trừ

rầy nâu từ 75 - 80 % trong điều kiện nhà lưới Nấm Paecilomyces cicadae có hiệu quả

phòng trừ ve sầu hại cà phê đạt từ 50 - 60 % trên đồng ruộng tại Đắk Lắk Bốn loài nấm

lần đầu tiên phát hiện và xác định được ở Việt Nam trong đó đã có hai loài thuộc chi

Pae-cilomyces là PaePae-cilomyces cicadae Samson, PaePae-cilomyces spp đã bước đầu chứng minh tiềm năng ký sinh sâu hại của loại nấm này ở Việt Nam

Năm 2011, Phạm Văn Nhạ và ctv điều tra được từ năm 2009, có 23 chủng nấm ký sinh trên rệp sáp hại cà phê trong đó có 8 chủng loại khó giám định đến loài Kết quả

giám định bằng phương pháp AND đã phát hiện mẫu BR16 là loài Paecilomyces cicadae

Những phát hiện trên đưa ra nhiều hướng nghiên cứu mới về nấm Paecilomyces spp., có

thể áp dụng để phòng trừ rệp sáp trên đối tượng cây trồng khác như cây ăn quả, đặc biệt là

rệp sáp Dysmicoccus sp đang là mối nguy hại cho diện tích canh tác khóm khá lớn ở các

tỉnh phía Nam

2.5.2 Các nghiên cứu ngoài nước về nấm Paecilomyces spp.

Một số loài nấm ký sinh trên rệp sáp được biết đến ở nhiều nơi trên thế giới

Paeci-lomyces spp là lo ại nấm ký sinh đang được nghiên cứu rộng rãi Một số dòng nấm

Paeci-lomyces spp được đánh giá là có ích trong phòng trừ một số loài côn trùng gây hại và cả

tuyến trùng Paecilomyces fumosoroceus được ghi nhận có khả năng ký sinh côn trùng

gây hại, trong khi đó Paecilomyces lilacinus có khả năng ký sinh tuyến trùng Theo Jtala

(1981) và Dunn (1982), Paecilomyces lilacinus có khả năng ký sinh trứng tuyến trùng gây

bướu rễ (Meloidogyne spp.) ( nguồn trích: Trần Kiều Lâm, 2010)

Theo Osborne và ctv (1990) cho rằng Paecilomyces fumosoroseus có khả năng gây chết loài Bemisia tabaci và Bemisia argentifolii trong vòng 24 - 48 giờ nhờ tiết ra các

độc tố gây hại

Tại Đài Loan, Tzean (1997) đã phân lập và mô tả loài nấm Paecilomyces

breviramosus Bissett, ký sinh trên bọ cánh phấn, như sau: Ký chủ được bao phủ bởi một sợi nấm màu trắng hơi vàng, cấu tạo như dạng bột Trên các cành bào tử, xuất hiện các tế bào nhô lên hình cầu, hình elip hoặc hình trụ, kích thước 3,2 - 5,6 x 2,8 - 4,8 micron Các

tế bào này tiếp tục phân nhánh, tăng 1 - 5 lần các tế bào ban đầu hoặc hình thành bọc bào

tử Các bọc bào tử mịn, kích thước 3,2 - 2,5 × 2 - 3,2 micron có hình cầu cơ bản, sau đó phát triển thành một cổ dài và mỏng Bào tử hình trứng tới elip, thường không đối xứng, đôi khi hình dạng như quả chanh, có cấu tạo đơn bào kích thước 2,4 - 3,2 x 1,6 - 2,1

micron Paecilomyces carneus được tìm thấy trong đất và phân lập tại tỉnh Hồ Nam, Trung Quốc, cũng được đánh giá là có khả năng ký sinh bọ cánh phấn Bào tử của nó đã được sử dụng để kiểm soát 2, 5 và 6 thế hệ bọ cánh phấn, tiêu diệt được 47 - 81% sau 12 ngày (Pu và Li, 1996)

Paecilomyces cateniannulatus, được tìm thấy chủ yếu trên các loại côn trùng thuộc

bộ Lepidoptera Cành bào tử ngắn, phát sinh chủ yếu từ các sợi nấm trên không Bào tử

nhỏ, hình bầu dục đến elip, 2 - 3,5 x 1 - 1,5 micron, các chuỗi conidial thường nằm sát nhau và kết lại tạo thành một vòng không đều Nấm này được phân lập từ nhiều loại côn trùng ở Quý Châu (Liang, 1981a) và An Huy (Huang ctv., 2002) Gần đây, loài nấm này được phân lập từ một số côn trùng chết ở tỉnh Vân Nam và đất ở Bắc Kinh (Liang, 1981b)

Chương III

3.1 Th ời gian và địa điểm nghiên cứu

3.1.1 Thời gian nghiên cứu

- Đề tài đã được thực hiện từ tháng 08/02 đến tháng 08/6 năm 2012

3.1.2 Địa điểm nghiên cứu

- Phòng thí nghiệm côn trùng, bộ môn Bảo vệ thực vật - Viện Cây ăn quả miền Nam, xã Long Định, huyện Châu Thành, tỉnh Tiền Giang

- Các thí nghiệm ngoài đồng thực hiện tại xã Tân Lập 1, huyện Tân Phước, tỉnh Tiền Giang

3.2 V ật liệu thí nghiệm

- Nấm Paecilomyces spp đã được Viện Cây ăn quả miền Nam phân lập từ nhiều nguồn

khác nhau

Bảng 3.1: Các dòng nấm Paecilomyces spp sử dụng trong nghiên cứu

Stt Dòng nấm Ký hiệu Nguồn thu thập Địa điểm thu mẫu

P VS

P RCC2 P.L P.TH

Rầy chổng cánh Đất cây cúc Đất cây vú sữa

Rầy chổng cánh _

Rầy chổng cánh

Long Hưng - Tiền Giang

Tiền Giang

Tiền Giang Long Hưng - Tiền Giang

Nhật

Tiền Giang

- Rệp sáp Dysmicoccus sp được thu ngoài đồng tại huyện Tân Phước tỉnh Tiền Giang

- Cây khóm con giống Queen 1; Ruộng trồng khóm

- Thức ăn nuôi rệp sáp trong phòng thí nghiệm: bí đỏ

- Thuốc Rholam 50WP, nước cất, cồn

- Nhà lưới, lồng nuôi rệp, khoai tây, hộp nhựa, cân điện tử, bút thước, máy ảnh, máy tính, bình phun thuốc, dây nilong, khay nhựa, dụng cụ cần thiết khác,

3.3 Nội dung nghiên cứu

Khảo sát khả năng ký sinh rệp sáp Dysmicoccus sp của các dòng nấm

Paecilomyces spp thu được trong điều kiện phòng thí nghiệm

Khảo sát hiệu quả ký sinh của nấm Paecilomyces spp đối với rệp sáp Dysmicoccus

sp trong điều kiện nhà lưới

Khảo sát hiệu quả ký sinh của nấm Paecilomyces spp đối với rệp sáp Dysmicoccus

sp trong điều kiện ngoài đồng

3.4 Phương pháp nghiên cứu

3.4.1 Khảo sát khả năng ký sinh rệp sáp Dysmicoccus sp của các dòng nấm

Paecilomyces spp thu được trong điều kiện phòng thí nghiệm

Hình 3.1: Thu rệp sáp

Dysmicoccus sp ngoài đồng

Hình 3.3: Thả rệp cái trưởng thành

lên quả bí đỏ

- Chuẩn bị nguồn rệp sáp: Rệp được thu ngoài đồng mang về phòng thí nghiệm tiến hành nuôi nhân tạo, cụ thể như sau: Rệp được thu về bằng cách nhổ cây khóm có rệp sáp ký sinh mang về phòng thí nghiệm, tách từng bẹ lá bắt rệp sáp trưởng thành thả lên quả bí đỏ, sau đó đặt vào lồng nuôi rệp để nhân sinh khối Chọn những con rệp sáp tuổi 2 khỏe mạnh, tiến hành thí nghiệm

B ảng 3.2: Các nghiệm thức trong thí nghiệm ở điều kiện phòng thí nghiệm

Stt Nghiệm thức Ký hiệu Cách xử lý

1 Đối chứng nước sạch

2 Paecilomyces spp (1) P RCC1 Thả 30 con rệp sáp tuổi 2 lên củ khoai

tây đặt vào hộp nhựa có lót bông tẩm

và giấy lọc giữ ẩm, sau đó phun chế phẩm nấm ký sinh

Pha chế phẩm nấm 40 g/ 10 lít nước, phun ướt đều củ khoai tây

- Tiến hành khảo sát hiệu quả ký sinh của 6 dòng nấm Paecilomyces spp đối với rệp sáp

trên khóm Thí nghiệm được bố trí hoàn toàn ngẫu nhiên với 7 nghiệm thức và 3 lần lặp lại, mỗi lần lặp lại là 1 hộp nhựa chứa 30 con rệp sáp tuổi 2

Sơ đồ bố trí thí nghiệm

Chỉ tiêu theo dõi:

+ Ghi nhận số lượng rệp sáp sống/ tổng số rệp sáp trên mỗi hộp ở các thời điểm 1, 3,

5, 7, 9, 11, 13 ngày sau khi xử lý

+ Ghi nhận số rệp sáp chết có mọc nấm/ tổng số rệp sáp chết trên mỗi hộp theo từng ngày

Tiến hành trồng khóm từ chồi cuống mang từ ngoài đồng về, chăm sóc sau 7 tuần

và thả rệp bắt đầu phun thuốc làm thí nghiệm

Giá thể trồng khóm gồm: tro trấu, trấu, xơ dừa được trộn với tỷ lệ 1:1:1, đặt trong

chậu nhựa với đường kính 15 cm x 10 cm

Hình 3.5: Trồng khóm trong chậu để thực hiện thí nghiệm 2 Chọn dòng nấm P Cúc và P RCC1 ở thí nghiệm 1, tiến hành khảo sát hiệu quả trong điều kiện nhà lưới Thí nghiệm được bố trí hoàn toàn ngẫu nhiên với 4 nghiệm thức

và 4 lần lặp lại, mỗi lần lặp lại là 1 chậu khóm có chứa 50 con rệp sáp tuổi 2

Bảng 3.3: Các nghiệm thức trong thí nghiệm ở điều kiện nhà lưới

Stt Nghiệm thức Hoạt chất và nguồn gốc Cách xử lý

1 Rholam 50WP Emamectin Benzoate Pha 0,75 g/ lít nước

2 P RCC1 Phân lập từ rầy chổng cánh Pha 0,5 g/ 250 ml nước,

phun ướt đều cây khóm con

3 P Cúc Phân lập từ đất cây cúc

4 Đối chứng nước sạch

Chỉ tiêu theo dõi:

Đặt chậu khóm lên khay nhựa, nhổ cây khóm con lên, đếm mật số rệp sáp sống trên toàn bộ cây và rễ khóm Ghi nhận số lượng rệp sáp sống/ tổng số rệp sáp trên mỗi chậu ở các thời điểm 3, 5, 7, 9, 11 ngày sau khi xử lý

3.4.3 Khảo sát hiệu quả ký sinh của nấm Paecilomyces spp đối với rệp sáp

Dysmi-coccus sp ở điều kiện ngoài đồng

- Tiến hành chọn dòng nấm P.RCC1 ký sinh rệp sáp hiệu quả ở thí nghiệm 2 để

khảo sát ở điều kiện ngoài đồng Thí nghiệm được bố trí theo thể thức hoàn toàn ngẫu nhiên với 3 nghiệm thức và 7 lần lặp lại, 30 cây dứa/ lần lặp lại Diện tích 6m2

/ lần lặp lại,

mật độ trồng 20 x 40 cm

B ảng 3.4: Các nghiệm thức trong thí nghiệm ở điều kiên ngoài đồng

Stt Nghiệm thức Hoạt chất và nguồn gốc Phun 2 lần và cách xử lý

1 Đối chứng nước sạch Phun nước ướt đều cây

2 P.RCC1 Phân lập từ rầy chổng cánh Pha 0,5 g/ 250 ml nước

3 Rholam 50WP Emamectin Bezoate Pha 7,5g / 10 lít nước

Sơ đồ bố trí thí nghiệm

Chỉ tiêu theo dõi

+ Ghi nhận mật số rệp sáp/ cây dứa ở các thời điểm lấy chỉ tiêu Mỗi nghiệm thức chọn

ngẫu nhiên 2 cây/ lần lặp lại và đếm mật số rệp sáp trên cây Thu mẫu theo kiểu tịnh tiến

so với cây lấy chỉ tiêu ban đầu

S ơ đồ phương pháp lấy chỉ tiêu ngoài đồng

Th ời điểm theo dõi

- Trước khi phun thuốc

- 7 ngày sau khi phun thuốc lần 1

- 7 ngày sau khi phun thuốc lần 2

Công thức tính cho thí nghiệm 3, được tính theo công thức Henderson – Tilton:

Độ hữu hiệu(%) = {1-[(Ta x Cb)/ (Tb x Ca)]}x 100 Ta: số rệp sáp sống ở nghiệm thức thuốc sau xử lý

Tb: số rệp sáp sống ở nghiệm thức thuốc trước xử lý

Ca: số rệp sáp sống ở nghiệm thức đối chứng sau xử lý

Cb: sống ở nghiệm thức đối chứng trước xử lý

Tất cả số liệu đã được tính toán bằng phần mềm Microsoft Excel Các số liệu được chuyển đổi sang arsin trước khi xử lý thống kê bằng phần mềm MSTATC

C hương IV

4.1 Khảo sát khả năng ký sinh rệp sáp Dysmicoccus sp của các dòng nấm

Paecilomyces spp thu được trong điều kiện phòng thí nghiệm

4.1.1 Khả năng gây chết rệp sáp Dysmicoccus sp của các dòng nấm Paecilomyces spp thu được trong điều kiện phòng thí nghiệm

Hình 4.1: Ảnh hưởng của 6 dòng nấm Paecilomyces spp ký sinh đến số rệp sáp chết ở

các thời điểm theo dõi

Bảng 4.1: Hiệu quả ký sinh của các dòng nấm Paecilomyces spp đến tỷ lệ chết của rệp sáp Dysmicoccus sp trong điều kiện phòng thí nghiệm

Ghi chú: Các giá tr ị trong cùng 1 cột có mẫu tự theo sau giống nhau thì không khác biệt có

ý nghĩa về mặt thống kê; (*):mức ý nghĩa 5%; (**): mức ý nghĩa 1%; ns: không có ý nghĩa

th ống kê; NSP: ngày sau phun

Ở thời điểm 1NSP tất cả các nghiệm thức thí nghiệm đều khác biệt không có ý nghĩa về mặt thống kê

Ở thời điểm 3NSP các nghiệm thức thí nghiệm đều khác biệt có ý nghĩa về thống

kê so với nghiệm thức đối chứng

Ở thời điểm 5 NSP, nấm Paecilomyces spp ở các nghiệm thức bắt đầu có sự khác

biệt với nhau và khác biệt rất có ý nghĩa về mặt thống kê so với nghiệm thức đối chứng Các dòng nấm ký sinh tốt nhất có ý nghĩa về mặt thống kê so với các nghiệm thức khác

là P.cúc (30,29 %), P.L (27,43 %) và P.TH (28,85%) ngoại trừ nghiệm thức P.RCC1 (24,03%)

Thời điểm 7 NSP, nghiệm thức cho hiệu quả ký sinh tốt nhất vẫn là P cúc (41,80%) có mức ý nghĩa a, khác biệt rất có ý nghĩa về mặt thống kê so với các nghiệm