Khao sat thanh phan hoa hoc cua cao ethyl acetate cua cay thu lu canh (physalis agulata l )

KHOA CƠNG NGHỆ BỘ MƠN CƠNG NGHỆ HĨA HỌC LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC KHẢO SÁT THÀNH PHẦN HÓA HỌC CAO ETHYL ACETATE CỦA CÂY THÙ LÙ CẠNH (PHYSALIS AGULATA L.) THUỘC CHI PHYSALIS, HỌ CÀ (SOLANACEAE) Cán hướng dẫn TS Tôn Nữ Liên Hương Sinh viên thực hiện Nguyễn Trương Thúy An MSSV: 2112117 Lớp Kỹ thuật hóa học – K37 Khoa Cơng Nghệ – Trường Đại học Cần Thơ Nội dung báo cáo Mục tiêu đề tài Tổng quan Thực nghiệm, kết Kết luận kiến nghị Mục tiêu đề tài Nghiên cứu thành phần hóa học Thù lù cạnh Cô lập xác định cấu trúc hóa học 01 hợp chất cao ethyl acetate Khảo sát hoạt tính sinh học cao chiết Thử hoạt tính kháng vi sinh vật kiểm định Tổng quan Giới thiệu chung Thù lù cạnh Tên khoa học: Physalis angulata L Quả Thù lù cạnh Hoa Thù lù cạnh Lá Thù lù cạnh Cây Thù lù cạnh Tổng quan Công dụng Thù lù cạnh Ở Việt Nam Trị bệnh sốt siêu vi, sốt xuất huyết, sởi, hồng ban, thủy đậu, bệnh tay chân miệng,…1 Trên giới Được sử dụng chữa bệnh nhiễm trùng bổ sung vào pháp đồ trị liệu ung thư bệnh bạch cầu, điều trị bệnh tiểu đường, thấp khớp, cầm máu,… Đỗ Huy Bích ctv, 2006 Cây thuốc động vật làm thuốc Việt Nam Tập II Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật Hà Nội Trang 792-793 Salgado, E.R et al., 2013 Physalis angulata L (Bolsa Mullaca): A Review of its Traditional Uses, Chemistry and Pharmacology Boletín Latinoamericano y del Caribe de Plantas Medicinales y Aromáticas, 12: 431-445 Tổng quan Tình hình nghiên cứu Thù lù cạnh  Ngoài nước: Đã có nhiều nghiên cứu thành phần hóa học hoạt tính sinh học Thù lù cạnh công bố 1-3 Salgado, E.R et al., 2013 Physalis angulata L (Bolsa Mullaca): A Review of its Traditional Uses, Chemistry and Pharmacology Boletín Latinoamericano y del Caribe de Plantas Medicinales y Aromáticas, 12: 431-445 Soares, M.B et al., 2003 Inhibition of macrophage activation and lipopolysaccaride-induced death by seco-steroids purified from Physalis angulata L .European Journal of Pharmacol, 459: 107-112 Sharma, N et al., 2015 A Pharmacological comprehensive review on ‘Rassbhary’ Physalis angulata (L.) International Journal of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences, 7: 30-34 Tổng quan Thành phần hóa học Các hợp chất tự nhiên có giá trị Thù lù cạnh 1-3 Withagulatin Physalin Physagulin -Chứa số hợp chất: anthocyanin, withaminimin, withangulatin steroid -Quan trọng whitasteroid (physalin A-K, U, V, W; physagulin A-G; physangulide) Ngoài ra, có chlorogenic acid, choline, myricetin, phygrine,… Damu, A.G., et al., 2007 Isolation, Structures, and Structure-Cytotoxic Activity Relationships of Withanolides and Physalin from Physalis angulata Journal of Natural Products, 70: 1146-1152 Yannai, S., 2004 Dictionary of Food Compounds with CD-ROM Additive, Flavors, and Ingredients Chapman and Hall New York 1109-1111 Kuo, P.C., et al., 2006 Physanolide A, a Novel Skeleton Steroid, and Other Cytotoxic Principles from Physalis angulata Organic Letters, 8: 2953-2956 Tổng quan Tình hình nghiên cứu Thù lù cạnh  Trong nước: Tại Việt Nam, chưa nghiên cứu thành phần hóa học hoạt tính sinh học Thù lù cạnh xuất Salgado, E.R et al., 2013 Physalis angulata L (Bolsa Mullaca): A Review of its Traditional Uses, Chemistry and Pharmacology Boletín Latinoamericano y del Caribe de Plantas Medicinales y Aromáticas, 12: 431-445 Soares, M.B et al., 2003 Inhibition of macrophage activation and lipopolysaccaride-induced death by seco-steroids purified from Physalis angulata L .European Journal of Pharmacol, 459: 107-112 Sharma, N et al., 2015 A Pharmacological comprehensive review on ‘Rassbhary’ Physalis angulata (L.) International Journal of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences, 7: 30-34 Thực nghiệm, kết Phương tiện nghiên cứu Hóa chất: -Dung mơi (PE, DC, EtOAc, n-BuOH, MeOH,…) -Silica gel (Merck),… Thiết bị dụng cụ: -Máy cô quay chân không, -Lọ thủy tinh, becher, bình chiết, đũa thủy tinh, bếp điện, cân điện tử, ống mao quản,… Phương pháp nghiên cứu • Phương pháp lập hợp chất • Phương pháp xác định cấu trúc hóa học hợp chất • Phương pháp xác định hoạt tính sinh học Thực nghiệm, kết 10 Sơ đồ tổng quát qui trình thực Sấy 55ºC, nghiền mịn Bột (2,3 kg) MeOH, 24h Cao tổng (94 g) Lá, thân, tươi Chiết lỏng-lỏng Cao PE Cô quay đuổi dung môi Cao C Phổ nghiệm Xác định cấu trúc Cao Ea (7 g) Sắc kí cột, TLC Phân lập chất XIN CHÂN THÀNH CẢM ƠN QUÝ THẦY CÔ VÀ CÁC BẠN ĐÃ CHÚ Ý LẮNG NGHE 28 29 Khảo sát cao ethyl acetate Phân đoạn Dung môi giải ly cột Kết sắc ký lớp mỏng * Khối lượng (g) I PE:Ea (1:1) Kéo vệt, vết tròn, rõ màu hồng cam Rf = 0,58 1,98 II PE:Ea (1:1) Kéo vệt, có nhiều vết 0,151 III PE:Ea (4:6) Kéo vệt có nhiều vết, nhiều tạp, vết rõ 0,53 IV PE:Ea (3:7) Nhiều vết, có vệt màu: xanh Rf = 0,67; vết vàng Rf = 0,86 0,6; vết hồng Rf = 0,5, vệt tím nhạt V PE:Ea (3:7) Vệt dài nhiều vệt màu 0,48 VI PE:Ea (2:8) Kéo vệt, có vệt rõ: màu xanh Rf =0,52; màu 0,127 hồng Rf = 0,2 VII PE:Ea (1:9) Kéo vệt, vệt màu không rõ VIII Ea (100%) Vệt dài nhiều màu Melớp (100%) *Sắc ký mỏng với hệ vệt dung môi giải ly không DC:Me (85:15) IX Kéo nhiều màu tách biệt 1,129 0,41 30 1.34 Thực nghiệm, kết 31 Khảo sát phân đoạn I Phân Dung môi đoạn giải ly SKC I.1 PE:Ea (9:1) Kết sắc ký lớp mỏng Kéo vệt, có vết màu hồng cam Khối lượng (g) 0,189 phía đầu, Rf = 0,2 * I.2 PE:Ea (8:2) Kéo vệt nhiều màu không rõ ** I.3 PE:Ea (7:3) Kéo vệt dài không rõ ** I.4 Me (100%) Vết không rõ ràng, kéo vệt, có vết màu vàng, Rf = 0,25 ** * Hệ dung môi giải ly DC 100%, ** Hệ dung môi giải ly DC:MeOH (8:2) 0,568 0,31 0.912 Thực nghiệm, kết 32 Khảo sát phân đoạn I.1 Phân Dung môi giải Dung môi Kết SKLM Khối đoạn ly sắc ký cột giải ly SKLM Dung mơi giải ly DC 100% lượng (g) vết tròn màu hồng cam 0,109 I.1.1 DC 100 % C 100% đôi, Rf = 0,5-0,6, bắt UV254 I.1.2 DC 100 % C 100% Hiện vết màu hồng nhạt, kéo 0,076 vệt đầu đuôi, màu không đồng I.1.3 DC 100 % C 100% Vết màu tím mờ, kéo vệt đầu đuôi 0,013 Thực nghiệm, kết Sắc ký lớp mỏng phân đoạn I.1.1 sau lên cột tách lần giải ly với hệ dung môi C 100% 33 34 z –CH= carbon carbon –OCH– carbon >CH– carbon–CH3 carbon –OCH2– carbon –CH2– carbon >C=O carbon >C= carbon >C< KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN Kết thử hoạt tính kháng vi sinh vật kiểm định nồng độ thử nghiệm ban đầu 200 µg/ml; dịch chiết từ cao Ea biểu hoạt tính kháng chủng vi sinh vật kiểm định 35 Các hợp chất tiêu biểu Thù lù cạnh Cấu trúc 3D Physalin Physalin B Tổng hợp Physalin Sinh tổng hợp Physalin Withagulatin Physalin Physagulin ... chế cao phân đoạn Cao tổng methanol Chiếc với dung môi petroleum ether Dịch Dịch lại lại Chiếc với dicholoromethane Chiếc với ethyl acetate Thực nghiệm, kết 13 Quá trình điều chế cao ethyl acetate. .. trên, lớp nước tiếp tục chiết với Ea Cô quay thu hồi dung môi thu 7g cao Ea H x100  7,23% 94 13 Thực nghiệm, kết 14 Quá trình khảo sát cao ethyl acetate Cao Ea Rcột = 10 cm, 50 g silica gel SKC... đầu 200 µg/ml; dịch chiết từ cao Ea biểu hoạt tính kháng chủng vi sinh vật kiểm định 24 25 Kết lu n kiến nghị • Kết lu n: - Phân lập hợp chất từ dịch chiết cao ethyl acetate: physalin B - Kết thử