Bai 7 XÉT NGHIỆM DẤU ẤN HUYẾT THỐNG DNA

Liệt kê được các ứng dụng của kỹ thuật xác định dấu ấn DNA 2.. Giải thích được nguyên tắc xác định dấu ấn DNA bằng phương pháp RFLP và Phân tích vi vệ tinh 3.. Đọc được kết quả xác định

BÀI 7 : DẤU ẤN DNA

I Mục tiêu

1 Liệt kê được các ứng dụng của kỹ

thuật xác định dấu ấn DNA

2 Giải thích được nguyên tắc xác định

dấu ấn DNA bằng phương pháp RFLP

và Phân tích vi vệ tinh

3 Đọc được kết quả xác định dấu ấn

DNA bằng phương pháp RFLP và Phân

tích vi vệ tinh

Đại cương kỹ thuật xác định dấu ấn DNA

Hồ sơ DNA (hay còn gọi là dấu ấn DNA) là một kỹ thuật được phát triển bởi khoa học pháp y, nhằm phục vụ xác định, phân biệt các cá nhân dựa vào những đặc điểm DNA riêng biệt Kỹ thuật này được sử dụng trong xác định huyết thống, điều tra hình sự, khảo cổ vv…

Hình 1 : Lấy mẫu DNA phục vụ điều tra hình sự

Mặc dù DNA của người này và người khác giống nhau đến 99,9%, sự khác biệt còn lại vẫn đủ để phân biệt chính xác cá nhân này và các nhân khác (trừ trường hợp những người sinh đôi cùng trứng) Kỹ thuật dấu ấn DNA sử dụng những đoạn DNA có độ lặp cao nhưng chiều dài thì rất thay đổi từ người này đến

người khác trong dân số Hai người bất kỳ trong dân số có rất rất ít khả năng có cùng tính chất về những đoạn DNA có độ lặp cao này

Nguyên tắc

Để thực hiện phương pháp này trước tiên cần lấy được DNA của cá nhân cần xác định Phương pháp thường được sử dụng nhất là lấy tế bào niêm mạc má bằng tăm bông

Nếu việc lấy mẫu này không thực hiện được, một số phương pháp khác có thể được sử dụng để lấy mẫu máu, nước bọt, tinh dịch vv…Những vật dụng cá nhân cũng có thể giúp thu được, tóc, lông, các tế bào da…

Máu hoặc tinh trùng hoặc những mô sinh thiết lưu trữ trong các ngân hàng máu, ngân hàng tinh trùng, khoa giải phẫu bệnh của các bệnh viện vv…cũng là nguồn mẫu đáng tinh cậy Trong trường hợp không thể lấy bất cứ mẫu nào của đương sự, người thân của đương sự cũng có thể cung cấp mẫu và chút ít cho việc phân tích Để tạo hồ sơ DNA hoặc phân tích dấu ấn DNA, nhiều kỹ thuật được sử dụng Sau đây là chi tiết về 2 phương pháp thường được sử dụng nhất

1 RFLP

Hình 2 : Hình ảnh điện di DNA

Đây là phương pháp đầu tiên được sử dụng để xác định dấu ấn DNA, phương pháp này kết hợp cắt đoạn DNA bằng các enzyme cắt giới hạn sau đó điện di

và chụp hình ảnh điện di qua kỹ thuật - Hình ảnh điện di của đương sự sẽ được so sánh với những hình ảnh điện di sẵn có (ví dụ so sánh kết quả của người con với người cha giả định, hoặc so sánh kết quả của người bị tình nghi với kết quả của mẫu máu thu được trên hiện trường vụ án )

Kỹ thuật này cồng kềnh phức tạp, công việc phân tích chậm và đòi hỏi nhiều giờ làm việc Hiện nay phương pháp này đã được thay thế bởi những phương pháp dựa trên nền tảng PCR

Hình 3: Xác định dấu ấn DNA bằng phương pháp RFLP

Phương pháp phân tích vi vệ tinh

Phương pháp này dùng kỹ thuật PCR để phóng đại những đoạn DNA có tính lặp lại cao Thường sử dụng nhất là các STR, là các vệ tinh có chiều dài rất dao động giữa các cá nhân trong một quần thể

Trong bộ DNA của mỗi người sẽ có 2 phiên bản của cùng một STR, một phiên bản nhận từ mẹ và một phiên bản nhận từ cha Nếu chúng ta quan sát 16 STR khác nhau và đối chiếu với hồ sơ DNA của người mẹ và hồ sơ DNA của người cha giả định, chúng ta có thể xác định quan hệ huyết thống cha con vô cùng chính xác.Trong trường hợp này một phiên bản STR sẽ trùng với STR nhận từ

mẹ, phiên bản còn lại chắc chắn sẽ được di truyền từ người cha sinh học Trong trường hợp điều tra hình sự những mẫu DNA lấy được từ hiện trường sẽ được phân tích STR và so sánh với dấu ấn DNA của tất cả những người bị tình nghi

Phân tích kết quả

1 RFLP

2 Phân tích vi vệ tinh