ĐỀ CƯƠNG MÔN VI SINH VẬT THÚ Y 1

HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA THÚ Y ĐỀ CƯƠNG MÔN VI SINH VẬT THÚ Y Câu 1: Đặc tính sinh học tụ cầu khuẩn Staphylococcus aureus? Trả lời: Tụ cầu khuẩn: Staphylococcus aureus a Hình thái : - Vi khuẩn hình cầu, đường kính 0,7-1 pm - Khơng sinh nha bào giáp mơ, khơng có lơng, không di động - Trong bệnh phẩm VK xếp thành đơi, đám nhỏ hình chùm nho - VK bắt màu Gram + b Đặc tính ni cấy : - Sống hiếu khí kỵ khí tùy tiện - Nhiệt độ thích hợp : 32 - 37°C, pH : 7,2 - 7,6 Môi trườne Nước thịt Đặc điểm Sau 5-6h VK làm đục, sau 24h môi trường rât đục, lăng cặn nhiêu, khơng có màng Thạch thường Sau 24h khuẩn lạc to dạng S, mặt ướt, bờ đêu nhăn, VK sinh săc tố nên khuẩn lạc có màu vàng thẫm loài tụ cầu gây bệnh (aureus) trăng (albus), vàng chanh(citreus) lồi tụ cầu có độc lực thấp, khơng gây bệnh Thạch máu Sau 24h vi khuẩn mọc tốt, khuẩn lạc dạng S Tụ cầu loại gây bệnh gây tượng dung huyết MT Sapman Phân lập kiểm tra độc lực tụ cầu Môi trường từ màu đỏ (pH= 8,4) sang màu vàng (pH= 6,8) tụ cầu gây bệnh Môi trường ko đổi màu ko gây bệnh MT Gelatin Cấy VK theo đường chích sâu, ni nhiệt độ 200C, sau 2-3 ngày gelatin bị tan chảy trơng giống dạng hình phễu - Trên mơi trường thạch máu : Tụ cầu có loại độc tố có khả làm tan hồng cầu số loài ĐV gọi dung huyết tố : a, p, ỗ, Y c Đặc tính sinh hóa : - Dễ mọc mơi trường ni cấy thông thường _ - Chuyển hóa đường:Lên men đường sau : + Glucoz + Levuloz + Lactoz + Manit + Saccaroz - Phản ứng catalaza (+) d Sức đề kháng: - Kém với nhiệt độ: 70° /1h, 800 /10-30phút, 100° C sau vài phút - Các chất sát trùng thông thường diệt VK nhanh chóng - Ở nơi khơ VK sống 200 ngày - VK có sức đề kháng nhiệt độ lạnh e Khả gây bệnh: *) Trong tự nhiên: - Tụ cầu thường kí sinh da người gia súc, có 30% người khỏe mang Staphylococcus aureus da, niêm mạc Khi sức đề kháng thể giảm có tổn thương da, niêm mạc, VK xâm nhập gây bệnh - Nhiễm trùng tụ cầu có nhiều biểu khác nhau: + Mưng mủ, apse, viêm cơ, viêm vú + Nhiễm trùng huyết, bại huyết + Hình thành độc tố ruột gây ngộ độc thực phẩm + Mức độ cảm nhiễm gia súc: Ngựa> bò> chó> lợn> cừu Ngồi người cảm nhiễm Chim ko mắc bệnh *) Trong phòng TN: - Thỏ cảm nhiễm nhất, tiêm 1-2 ml canh khuẩn tụ cầu 24h vào TMtai, sau 36-48h thỏ chết chứng huyết nhiễm mủ, mổ khám thấy nhiều ổ apxe phủ tạng - Nếu tiêm da cho thỏ gây áp xe da f Cấu trúc kháng nguyên: - kháng nguyên polysaccarit vách phức hợp mucopeptide - axit teichoic Khi gặp kháng thể tương ứng gây nên phản ứng ngưng kết SV: KHUẤT MINH THANH K58TYA khuatminhthanh@gmail.com Email: HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA THÚ Y - kháng nguyên protein (protein A) thành phần vách phía ngồi g Các chất tụ cầu gây bệnh tiết ra: - Các độc tố: +) Độc tố dung huyết: ( Hemolysin) + Dung huyết tố anpha ( a) : gây tan hồng cầu thỏ, hoại tử da gây chết Loại dung huyết tố có hầu hết tụ cầu độc + Dung huyết tố bêta ( P) : gây dung giải hồng cầu cừu + Dung huyết tố đenta ( ô) : gây dung giải hồng cầu người, thỏ, cừu, ngựa gây hoại tử da + Dung huyết tố gamma ( Y) : không dung giải hồng cầu ngựa +) Nhân tố diệt bạch cầu : + Bạch cầu tính di động, hạt nhân bị phá hủy, vai trò quan trọng chế sinh bệnh tụ cầu +) Độc tố ruột : Có loại, có loại biết : + Độc tố ruột A : tạo chủng phân lập trình nhiễm độc thức ăn + Độc tố ruột B : tạo chủng phân lập bệnh nhân viêm ruột - Các enzyme : + Men đông huyết tương ( Coagulaz) + Men làm tan tơ huyết ( Fibrinolyzin hay Staphylokinaz) + Men Deoxyribonucleaz: thủy phân axit dezoxyribonucleic gây thương tổn tổ chức + Men Hyaluronidaz: tác dụng men Penixilinaz làm cho penixilin tác dụng, chế kháng penixilin Câu 2: Chẩn đoán vi khuẩn học bệnh Staphylococcus gây ra? Gồm có bước: - Lấy bệnh phẩm: +) Phải tuân thủ quy tắc tuyệt đối vô trùng để tránh nhiễm VK khác +) Dùng tăm lấy mủ dịch viêm ổ mủ vết thương hở +) Dùng bơm tiêm hút mủ ổ apxe - Kiểm tra hình thái kính hiển vi: +) Làm tiêu bản, đem nhuộm Gram quan sát kính hiển vi +) Nếu tụ cầu: VK hình cầu, bắt màu Gram dương, tụ lại thành đám hình chùm nho - Ni cấy vào mơi trường thích hợp: +) Bệnh phẩm ni cấy vào mơi trường nước thịt, thạch máu, thạch Sapman - Tiêm ĐV thí nghiệm: +) Dùng thỏ để gây bệnh +) Để xác định tụ cầu gây bệnh phải dựa vào tính chất sau: + Lên men đường manit + Sinh sắc tố + Có dung huyết tố anpha + Có men Coagulaz + Một số trường hợp phát Dezoxyribonucleaz Fibrinolyzin Câu 3: Đặc tính sinh học Streptococcus suis? Trả lời: Liên cầu khuẩn: Streptococcus suis Hình thái: - VK hình cầu bầu dục, đường kính 0,5 - Am - VK xếp thành chuỗi ngắn có 6-8 VK, có chuỗi 12 VK - Bắt màu Gram + - Không sinh nha bào, không di động, đơi có lớp giáp mơ mỏng bên ngồi VK Đặc tính ni cấy: - VK hiếu khí hay yếm khí tùy tiện( mơi trường thiếu O2 phát triển mạnh) - Thường kí sinh đường ruột gia súc - Nhiệt độ thích hợp: 370C; pH= 7,2-7,4 Môi trường Đặc điểm Nước thịt Sau nuôi cấy 24h, mơi trường suốt,đáy ống có cặn,khơng có mùi đặc biệt Thạch thường Sau nuôi cấy 24h, VK hình thành khuẩn lạc dạng S, khuẩn lạc nhỏ, tròn, lồi, bóng, màu xám Đường kính khuẩn lạc: 1-2 mm VK xếp thành chuỗi ngắn Sau nuôi cấy 24h, VK phát triển tôt, khuẩn lạc dạng S to môi trường thạch thường Những chủng Thạch máu (thỏ,ngựa,cừu ) gây bệnh có độc tơ, gây dung huyết, mơi trường thạch máu làm tan máu: týp p > týp a > týp Y - Trong môi trường thạch máu quan sát được: + Týp anpha (a): Khuẩn lạc bao quanh vòng hồng cầu nguyên hình màu xanh, xa khuẩn lạc chút có vòng tan máu Liên cầu dung huyết nhóm anpha, độc lực không cao SV: KHUÀT MINH THANH K58TYA khuatminhthanh@gmail.com Email: HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA THÚ Y + Týp bêta (P): Bao quanh KL vòng tan máu hồn tồn st có bờ rõ ràng Liên cầu dung huyết nhóm bêta, độc lực cao + Týp gamma (Y): Xung quanh KL ko có thay đổi nào, hồng cầu giữ màu hồng nhạt Liên cầu khơng có khả dung huyết, thường VK khơng gây bệnh Đặc tính sinh hóa: - Chuyển hóa đường: Lên men đường sau: + Glucoz + Saccaroz + Lactoz + Salixin + Trêhaloz - Không lên men đường sau: + Mannit + Inulin - Phản ứng sinh hóa khác: + Indol: (-)+ Khơng làm đơng vón huyết tương ( Coagulaz - ) + H2S: (-) Cấu trúc kháng nguyên: a KN thân (O) b KN giáp mô (K) c KN bám dính (H) - Là KN năm ngồi màng - Năm pili( lông) VK - Năm lớp màng TB sơ VK có KN giáp mơ - Bám chặt vào TB vật chủ - Có vai trò định độc lực gây bệnh VK chia làm 22 nhóm VK từ A đến V Các chất liên cầu tiết ra: a Độc tô: - Liên cầu nhóm A sinh độc tơ mà chất chúng Protein thường độc tơ gây nơt ban đỏ da - Dung huyết tô: +) Streptolysin O: Đóng vai trò quan trọng, hầu hết loại liên cầu làm tan máu có độc tơ + Dễ độc tô Oxy kháng thể thể (antistreptolysin O) + Định lượng kháng thể antistreptolyzin O có giá trị chẩn đốn bệnh liên cầu gây +) Streptolysin S: ko có ý nghĩa quan trọng, nhiều loại VK sản sinh độc tô + Khơng bị hoạt tính Oxy, có tính kháng ngun yếu nên khơng có ý nghĩa chẩn đoán bệnh b Enzyme: - Men làm tan tơ huyết ( streptokinaz): + Do liên cầu nhóm A, C, G sinh ra, làm tan tơ huyết + Tính kháng ngun cao, kích thích thể hình thành kháng thể ( antistreptokinaz) - Streptodornaz: + Làm lỏng mủ đặc liên cầu độc tạo nên + Có loại A, B, C, D chúng có tác dụng có mặt ion Mg2+ - Hyaluronidaz: + Thủy phân axit hyaluronic chất mô liên kết, giúp VK dễ lan tràn + Kích thích thể hình thành kháng thể đặc hiệu dùng chẩn đốn bệnh - Diphotpho-Pyridin-Nucleotidaz + Các liên cầu A, C, G làm chết bạch cầu - Proteinaz: + Phân hủy protein, tiêm liều cao gây thương tổn tim Sức đề kháng: SV: KHUẤT MINH THANH K58TYA khuatminhthanh@gmail.com Email: HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA THÚ Y Liên cầu khuẩn có sức đề kháng với nhiệt độ hóa chất - Nhiệt độ: 700C/ 35-40ph, 100% 1ph - Các chất sát trùng thông thường dễ tiêu diệt liên cầu Tính gây bệnh: a Trong tự nhiên: - Chúng cư trú họng ruột, số có khả gây bệnh: - Ở người: nhiễm khuẩn Eczema, mưng mủ phủ tạng, viêm họng, mẩn đỏ - Ở ĐV: chứng mưng mủ, bệnh biến chung hay cục bộ( viêm vú) + Ở ngựa: bệnh viêm hạch truyền nhiễm Adenitis Equorum + Ở bò: bệnh viêm buồng vú truyền nhiễm bò sữa, bệnh bại liệt bê + Ở dê: chứng nung mủ, viêm vú, viêm phổi ngoại tâm mạc b Trong phòng thí nghiệm: - Thỏ ĐVTN dễ cảm thụ - Tiêm vào da cho thỏ: Áp xe nơi viêm - Tiêm vào tĩnh mạch hay phúc mạc: thỏ chết nhanh nhiễm khuẩn huyết - Có thể dùng chuột nhắt để gây bệnh Câu 4: Đặc tính sinh học trực khuẩn Đóng dấu lợn? Trả lời: Trực khuẩn đóng dấu lợn: Erysipelothrix rhusiopathiae a Hình thái: - Trực khuẩn nhỏ, thẳng, có cong, kích thước —1,5 X 0,2 — 0,4 /Ấm - VK khơng có lơng, khơng di động, khơng hình thành nha bào giáp mô, sinh sản trực phân, sống hiếu khí - Từ canh khuẩn già bệnh phẩm lợn mắc bệnh mạn tính thấy VK có hình sợi tơ dài, cong queo - Trong bệnh phẩm VK đứng riêng lẻ hay đơi một, có nằm bạch cầu - Bắt màu Gram +, nhuộm với tất thuốc nhuộm kiềm Anilin b Đặc tính ni cấy: - VK hiếu khí( sinh trưởng mơi trường yếm khí), nhiệt độ thích hợp 37°C, pH: 7,2 — 7,6 sau 24h, môi trường đục trong, lắc có vân mây bay trở lại cũ, đáy ống có Mơi trường cặn trắng nhày màu tro Nếu cho thêm đường glucozo 10% huyết vào mơi trường VK nước thịt mọc tốt Chú ý: nuôi lâu nước thịt ra, có giống lại làm mơi trường vẩn đục có mùi thối Thạch thường sau 24h, VK hình thành khn lạc nhỏ, bóng láng( dạng S) hình tròn, rìa gọn, giọt sương Thạch máu Không dung huyết, sau 24 — 48h, thấy xuất khn lạc nhỏ, tròn, óng ánh hạt sương Thạch huyết 10% Môi trường packer Thạch lỏng Gelatin khuân lạc nhỏ li ti, giống hạt sương, màu xanh lơ nhạt, nhìn qua ánh sáng thấy khuẩn lạc to có màu xanh lơ rõ, khuẩn lạc nhỏ có màu lơ nhạt hình thành khuẩn lạc nhỏ mịn, dạng S khuẩn lạc dạng R, to hơn, bề mặt không đục VK phát triển tốt, ko di động Cấy sâu nuôi 280C sau ngày đường cấy chích sâu thấy VK mọc ngang lông nhỏ màu xanh tro giống hình bàn chải rửa ống nghiệm Gelatin ko tan chảy, để lâu, mặt gelatin xung quanh vết cấy khơ c Đặc tính sinh hóa: - Chuyển hóa đường: Phản ứng thử MT đường có 10% huyết thị màu andrat xanh bromotymon + Lên men đường: glucoz, galactoz, levuloz, mannoz + Không lên men đường: saccaroz, mantoz, arabinoz, xyloz, dechtrin, mantion, socbiton, dunxiton, glyxeron, inositon, trihaloz, inulin, xalixin - Phản ứng sinh hóa: + Phản ứng MR: - + + Phản ứng VP: - + Indol: Sinh H2S: + + Không sinh ure, không gây dung huyết + Catalase: d Sức đề kháng: SV: KHUÀT MINH THANH K58TYA khuatminhthanh@gmail.com Email: HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA THÚ Y - Vk sông 17-35 năm môi trường dịch thể nút kín miệng ơng nghiệm - Trong phủ tạng lợn chết: tháng; lợn chết chôn đất: tháng - Sấy khô Vk chết tuần - Chỗ ẩm, tơi 37 C: sơng tháng - Có ánh sáng mặt trời sông 12 ngày - Nhiệt độ cao dễ dàng giết VK: canh khuẩn đun 700C/ phút; 1000C chết Thịt có VK cắt dày 15 cm phải nấu sôi 100 C/ 2h30ph chưa diệt VK - Những chất hóa học sát trùng thông thường diệt Vk: clorua vôi 1%, NaOH 5%, axit pheic 1% e Tính gây bệnh: - Trong tự nhiên: + Lợn đặc biệt lợn con, lợn 3-4 tháng tuổi năm tuổi mẫn cảm + Loài chim cảm thụ mức độ nặng nhẹ theo thứ tự: Bồ câu, gà, vịt, ngan, ngỗng, vẹt, sáo, chim sẻ + Triệu chứng chim: mào tái, suy nhược, ỉa chảy Bệnh tích: xuất huyết niêm mạc bắp thịt, gan lách tụ máu, sưng to + Trâu, bò, dê, chó mắc + Người mắc: sôt cao, nôt đỏ da, đầu khớp xương hạch sưng - Trong phòng thí nghiệm: + Chuột bạch: cảm thụ Tiêm S.C chuột canh khuẩn 24h với liều 0,3-0,4 ml sau từ 2-6 ngày tuổi chuột bị bại huyết chết, trước chết chuột sợ ánh sáng, viêm sưng giác mạc Bệnh tích: phổi sưng, tụ máu, lách sưng, gan màu tro, nát + Bồ câu: mẫn cảm Tiêm S.C I.M canh khuẩn 24h liều 1ml Sau -4 ngày chết Trước chết: chân bại, thở khó Bệnh tích: chỗ tiêm sưng tụ máu, tim sưng, viêm ngoại tâm mạc có tích nước, gan thận viêm tụ máu Có thể tăng độc lực VK qua tiêm truyền nhiều lần qua bồ câu + Thỏ: cảm thụ Tiêm vi khuẩn vào I.V, thỏ chết sau 3-6 ngày, kết ko chắn Câu 5: Chấn đoán vi khuẩn học bệnh trực khuẩn Đóng dấu lợn? Trả lời: a Lấy bệnh phẩm: - Thể cấp mạn tính lấy máu tim lách - Bại huyết lấy gan, thận - Mắc bệnh cấp tính bại huyết mà khơng chết, chuyển sang thể mạn tính lấy tủy sương ( tôt đôt sông 3-5) b Kiểm tra băng KHV: - Lấy bệnh phẩm làm tiêu nhuộm gram Vrait thấy VK ngắn, nhỏ, tập trung nhiều bạch cầu - Ở lợn mắc bệnh mạn tính VK có hình sợi dài c Ni cấy vào mơi trường thích hợp: - Dùng bệnh phẩm cấy vào môi trường Packer tôt - Nếu bệnh phẩm đem nghiền với nước sinh lý tiêm S.C bồ câu ( khơng I.M) sau phân lập VK lấy từ máu tim gan bồ câu chết Ni cấy vào mơi trường quan sát tính chất mọc, thử phản ứng sinh hóa: VP, MR, Indol, H2S d Tiêm ĐVTN: - Tiêm canh khuẩn hay bệnh phẩm S.C cho chuột bạch, S.C hay I.M cho bồ câu, theo dõi triệu chứng, thời gian chết mổ khám xem bệnh tích Câu 6: Chẩn đốn huyết học bệnh Đóng dấu lợn? Câu 7: Đặc tính sinh học Pasteurella multocida? Trả lời: Tụ huyết trùng: Pasteurella multocida Hình thái: + Cầu trực khuẩn nhỏ, hình trứng hình bầu dục, đầu tròn, kích thước 0,25 - 0,4 x 0,4 - 1,5 |im, + Khơng có lơng, khơng di động, khơng có nha bào hình thành lớp giáp mơ mỏng thể vật bệnh, khó thấy - Bắt màu Gram - Tiêu làm từ bệnh phẩm thấy VK bắt màu xẫm đầu (do tốc độ sinh sản lớn) nên gọi VK lưỡng cực - Tiêu từ canh trùng thấy VK đứng riêng lẻ thành chuỗi ngắn Đặc tính ni cấy: - VK khí yếm khí tùy tiện, nhiệt độ thích hợp 37 C, pH: 7,2 - 7,4 Mọc yếu môi trường thơng thường, mơi trường có bổ sung huyết máu VK mọc tốt + Mơi trường nước thịt: sau cấy 24h, môi trường đục vừa, lắc có vẩn sương mù lại mất, đáy ống nghiệm có cặn nhầy, mặt mơi trường có lớp màng mỏng Mơi trường có mùi đặc biệt giống mùi nước dãi khô + Môi trường thạch thường: hình thái khuẩn lạc dạng S nhỏ, suốt long lanh hạt sương, mặt khuẩn lạc vồng Trong môi trường P.multocida phát triển thành dạng khuẩn lạc sau: ++ Dạng S: Khuẩn lạc dạng trơn, bóng láng, long lanh, mặt vồng, có dung quanh sắc cầu vồng, dạng khuẩn lạc có độc lực 0 SV: KHUẤT MINH THANH K58TYA khuatminhthanh@gmail.com Email: HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA THÚ Y mạnh, tạo thành lớp giáp mơ nhiều loại khuẩn lạc dạng xù xì ++ Dạng R: Khuẩn lạc thường dẹt, có rìa nhám xù xì, trơn nhám, có dung quanh màu xanh, dạng khuẩn lạc có độc lực yếu ++ Dạng M: Khuẩn lạc nhày ướt, có kích thước to nhất, có rìa nhẵn, dung quanh sắc cầu vồng yếu dạng S + Môi trường thạch máu: VK không dung huyết, phát triển tốt, khuẩn lạc to thạch thường Thường dùng để nhân giữ giống VK + Môi trường nước thịt pepton: Sau 24h VK làm đục môi trường, vài ngày sau môi trường trở nên trong, đáy có cặn nhày, lắc khó tan + Mơi trường thạch có huyết huyết cầu tố: Gồm: thạch martin: 100ml, huyết cầu tố cừu dê 1/10: 1ml, huyết bò, cừu dê: 4ml Sau 24h, quan sát khuẩn lạc KHV thị giác có hệ số giác X20 góc chiếu ánh sáng đèn 450, khuẩn lạc có tượng phát huỳnh quang, tùy theo độc lực VK mà màu sắc huỳnh quang khuẩn lạc khác nhau: ++ Nếu VK có độc lực cao: màu xanh mạ chiếm 2/3 diện tích khuẩn lạc phía đèn, 1/3 lại có màu vàng cam Khuẩn lạc gọi dạng Fg ( Fluorescent green) ++ Nếu VK có độc lực vừa: khuẩn lạc có 1/3 diện tích có màu xanh mạ, 2/3 màu vàng cam Gọi dạng Fo (F orange) ++ Nếu VK có độc lực yếu: khuẩn lạc không phát huỳnh quang, dạng Fn (No Fluorescent) Hiện tượng phát huỳnh quang xem rõ sau nuôi cấy 24h, để lâu sau 72h huỳnh quang Chỉ áp dụng với P.boviseptica P.suiseptica Với P.aviseptica, chủng có độc lực cao khuẩn lạc phát huỳnh quang dạng Fo + Mơi trường gelatin: Dọc theo đường cấy trích sâu, VK mọc thành khuẩn lạc mịn, hình hạt, khơng làm tan chảy gelatin Đặc tính sinh hóa: - Chuyển hóa đường: + Lên men đường ko sinh hơi: glucoz, saccaroz, mannit, sozbit, xylo + Không lên men đường: lactoz, maltoz, arabino, rammo, salixin, dunxid, adonit - Các phản ứng sinh hóa khác: + Indol: + H2S: +, + VP: + Catalaz: + + MR: + Oxydaz: + Thành phần kháng nguyên: - P.multocida phức tạp cấu trúc loại kháng nguyên thay đổi Gồm loại kháng nguyên: kháng nguyên giáp mô (K) kháng nguyên thân (O) - Kháng nguyên thân (O): + Đóng vai trò quan trọng q trình hình thành miễn dịch vật + Phức hợp protein - lipit - polysaccarit + Đóng vai trò quan trọng việc gây bệnh VK - Kháng nguyên giáp mô (K) : + Tránh thực bào kháng thể + Chia nhóm theo paster Kí hiệu : A, B, D, E, F + VK sinh khuẩn lạc dạng S tạo kháng nguyên K + Cấu tạo thành phần: Protein + polysaccarit + lipopolysaccarit + Có khả gắn kết với thụ thể hồng cầu Tính gây bệnh VK a Trong tự nhiên : - P.multocida gây chứng bại huyết kèm theo tụ huyết, xuất huyết cho gia súc, gia cầm - P.boviseptica gây bệnh THT cho trâu, bò với triệu chứng thủy thũng sưng hạch hầu, viêm phổi Bệnh từ trâu, bò lây sang ngựa Ở nước ta trâu nặng bò Trong ổ dịch thấy trâu, bò rừng, hươu nai, sơn dương, lợn thỏ rừng mắc bệnh - P.suiseptica gây bệnh THT cho lợn, lợn - tháng tuổi mắc nhiều, vật bị bệnh thường có bệnh tích : phổi viêm có nhiều vùng gan hóa, viêm ngoại tâm mạc có tích nước, hạch hầu viêm, thủy thũng Bệnh lợn lây sang trâu, bò gà - P Aviseptica gây bệnh THT cho gia cầm, gà vịt thường bị bệnh hay gây vụdịch lớn, giết chết nhiều Bệnh tích chủ yếu tim sưng, viêm ngoại tâm mạc, có tích nước, mỡ vành tim xuấthuyết, gan tụ máu, có hoại tử điểm băng đầu mũi kim, đầu đinh ghim, màu vàng nhạt - VK có khả gây bệnh cho người, nhiễm trùng cục bộ, bị ĐV bệnh cắn, cào vết thương bị nhiễm khuẩn b Trong phòng TN : - Chuột bạch thỏ cảm nhiễm : + Với thỏ : tiêm da, phúc mạc tĩnh mạch canh trùng 24h, thỏ chết sau 24 - 48h Bệnh tích thể : nơi tiêm tụ máu, lồng ngực tích đầy nước, lách sưng to, phổi sưngtụ máu, khí quản xuất huyết Sức đề kháng : SV: KHUÀT MINH THANH K58TYA khuatminhthanh@gmail.com Email: HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA THÚ Y - VK THT dễ bị tiêu diệt sức nóng, ánh sáng mặt trời chất sát trùng - VK bị diệt đun 580C/20ph, 800C/10ph, 1000C chết - Ánh sáng MT chiếu trực tiếp, diệt VK canh trùng sau ngày - Trong tổ chức ĐV bệnh bị nát VK sông - tháng chất sát trùng thơng thường diệt VK nhanh chóng : axit phenic 5%, crezit 3%, nước vôi 1%, formol 2% - VK sông lâu sinh sản đất ẩm thiếu ánh sáng có nhiều mi nitrat chất hữu - Trong chuồng nuôi súc vật đồng cỏ VK sơng hàng tháng có hàng năm Câu 8: Chẩn đoán vi khuẩn học bệnh tụ huyết trùng gà? a Lấy bệnh phẩm : - Có thể lấy máu tim, gan, lách, tủy xương, phổi, dịch thủy thủng b Kiểm tra băng KHV : - Tiến hành lấy bệnh phẩm, làm thành tiêu bản, nhuộm Gram Nếu có P.multocida, vi khuẩn nhỏ, ngắn hình trứng, bắt màu thẫm hai đầu, Gram âm, khơng nha bào, khơng có lơng, có giáp mơ khó phát thấy xem nhuộm Trường hợp bệnh mạn tính hay bệnh phẩm thơi khó phát VK KHV, cần đem bồi dưỡng môi trường tiêm ĐVTN c Ni cấy vào mơi trường thích hợp: - Cấy vào mơi trường ni cấy thích hợp, quan sát tính chất mọc xác định phản ứng sinh hóa cần thiết, khả không dung huyết d Tiêm ĐVTN: - Dùng thỏ hay chuột bạch để tiêm - Nếu bệnh phẩm có P.multocida sau tiêm 24 - 48h vào da hay phúc mạc, ĐV chết với bệnh tích tụ huyết, xuất huyết - Mổ khám quan sát bệnh tích Câu 9: Đặc tính sinh học VK brucella? Trả lời: a Hình thái tính chất bắt màu: - Trực khuẩn nhỏ, đầu tròn kích thước 0,6 - 1,5 x 0,5 - 0,7 |im - Khơng di động, khơng sinh nha bào, có giáp mơ - Bắt màu gram b Đặc tính ni cấy: - Vi khuẩn hiếu khí, nhiệt độ thích hợp 370C, pH: 6,8 - 7,4 - VK mọc tốt môi trường cho thêm huyết thanh, máu, gan Mọc chậm môi trường nuôi cấy thông thường _ Môi trường nước thịt Đục đều, có váng nhỏ mặt, sau lắng cặn lầy nhầy đáy Môi trường thạch nước gan Khuẩn lạc hạt sương, tròn, lồi, ướt, khơng có màu sắc Mơi trường thạch huyết đứng Mơi trường khoai tây Mơi trường gelatin c Đặc tính sinh hóa: - Khơng lên men đường Cấy theo đường trích sâu, sau 3-6 ngày cách mặt thạch 0,5 cm trở xuống VK mọc theo đường cấy 1-2 cm, khuẩn lạc màu trắng, trắng xám Sau 40h, VK mọc thành khuẩn lạc màu nâu Không làm tan chảy gelatin SV: KHUẤT MINH THANH K58TYA khuatminhthanh@gmail.com Email: HỌC VIỆN NƠNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA THÚ Y - Có khả phân giải ure nhờ men ureaz - Có khả năg sinh H2S dựa vào tính chất ức chế thuốc nhuộm đặc biệt: Thionin vfa fucsin phân biệt loại brucella d Cấu trúc kháng nguyên: - Có phức hợp kháng nguyên: + Kháng nguyên A kháng nguyên M, typ có tượng ngưng kết chéo + Tỉ lệ kháng nguyên A kháng nguyên M typ Brucella khác e Miễn dịch: - Brucellosis có khả miễn dịch, gia súc người mắc bệnh brucella khỏi khơng mắc bệnh lại - Miễn dịch chống Brucella miễn dịch qua trung gian tế bào, lympho T đại thực bào đóng vai trò thể đáp ứng miễn dịch thể - Các yếu tố: opsonin, ngưng kết tố, kháng thể kết hợp bổ thể hạn chế tác hại VK f Sức đề kháng: - VK có sức đề kháng tương đối cao, điều kiện 00C/8 tháng - Ở 600C/30ph, 75°C/5-10ph, đun sôi VK bị diệt ngay( khử trùng sữa 700C/30ph) - Trong nước VK sống từ 5-6 tháng, sữa 6-8 tháng, lông 1,5-4 tháng, phân 45 ngày - Các chất sát trùng thông thường diệt VK dễ dàng: Axit phenic, focmon 4% diệt VK từ vài phút đến 1h, nước vơi tơi 5%/2h g Tính gây bệnh: - Trong tự nhiên: + Ô chứa VK: dê, cừu, bò, trâu, lợn, chó, thú rừng, lồi chim, lồi chuột + Bệnh truyền từ đực sang gây sảy thai Con đực, VK xâm nhập vào tuyến sinh dục mắc bệnh thể ẩn + Người mắc chăm sóc ĐV bị sảy thai, tay bị nhiễm VK đưa vào niêm mạc miệng chiếm 70% 30% uống sữa tươi, ăn phó mát tươi bò, dê, cừu, lây ăn rau tươi bị nhiễm khuẩn - Trong phòng thí nghiệm: + ĐVCT: chuột lang, thỏ, khỉ, chuột nhắt + Gây bệnh tiêm bệnh phẩm hay canh khuẩn S.C hay phúc mạc Sau tiêm gây nhiễm khuẩn huyết, xuất sớm + Nếu tiêm vào phúc mạc sau 10-15 ngày theo độc lực thấy hạch bẹn sưng, nung mủ, tổn thương khớp, xuất mụn lao, nang lao giả lách, gan, hạch, phổi Câu 10: Chẩn đoán bệnh xảy thai truyên nhiễm Brucellosis phản ứng ngưng kết? Câu 11: Đặc tính chung giống Salmonella vê hình thái, ni cây, sinh hóa, độc tố? Trả lời: Hình thái: - Salmonella trực khuẩn hình gậy ngắn, hai đầu tròn, kích thước 0,4 - 0,6 x - |im - Khơng hình thành giáp mơ nha bào - Đa số lồi Salmonella có khả di động mạnh có 7-12 lơng xung quanh thân( trừ S.gallinarum pullorum) - VK nhuộm màu với thuốc nhuộm thông thường - Bắt màu Gram -, bắt màu toàn thân đậm hai đầu Tính chất ni cấy: Salmonella vừa hiếu khí vừa kỵ khí khơng bắt buộc, dễ ni cấy, nhiệt độ 37°C, — 42°C, pH= 7,6, phát triển pH: — - Salmonella gây bệnh gia súc, sinh trưởng tôt điều kiện hiếu khí, điều kiện kỵ khí Môi trường nước thịt cấy vài đục nhẹ, sau 18h đục đêu, nuôi lâu đáy ơng nghiệm có cặn, mơi trường có màng mỏng Môi trường thạch thường Vk mọc thành khuân lạc tròn, sáng xám, nhẵn bóng, lơi lên giữa, nhỏ trắng khuẩn lạc E Coli ( đường kính: —1,5 mm) Thạch pepton Sau 1-2 ngày khuẩn lạc hình thành bờ chất dính lầy nhầy xung quanh Thỉnh thoảng có thấy khuẩn lạc dạng R, nhám, mặt khơng bóng, khơng đêu, mờ.(S.paratyphi B, S.cholerae suis) - Không làm tan chảy gelatin Đặc tính sinh hóa: - Chuyển hóa đường: MT kiểm tra MT nước thịt pepton cho thêm loại đường với tỉ lệ 0,5% chất thị màu xanh bromotymon, tím bromocrezon, đỏ phenon SV: KHUẤT MINH THANH K58TYA khuatminhthanh@gmail.com Email: HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA THÚ Y + Phần lớn Salmonella lên men đường có sinh hơi: glucoz, mannit, mantoz, galactoz, levuloz, arabinoz, xyloz, dechtrin, dunxit, ramnoz, Một sô lên men ko sinh hơi: S.typhi suis, S.typhi, S cholerae suis( ko lên men arabinoz) + Tất Salmonell ko lên men: lactoz, saccarroz - MT có kali xyanua: tất Salmonella ko mọc - Khử cacboxyn: lyzyn, octinin, acginin - Không phân giải urê - Indon, VP: - Phân giải xanh metylen - Catalaz, MR: + ( trừ S.cholerae suis, S gallinarum - pullorum) - H2S: + ( trừ S.paratyphi A, S.typhi suis, S.abortus equi) - Dùng môi trường đặc biệt EMB, Kauffman, SS, để phân lập Sal Độc tô: a Nội độc tô: + Rất mạnh, liều thích hợp I.V giết chết chuột bạch, chuột lang 48h Bệnh tích: ruột non sung huyết, mảng payer phù nề, hoại tử + Độc tô ruột gây ngộ độc thần kinh, gây hôn mê, co giật, nội độc tơ có hai loại: gây sung huyết mụn lt b Ngoại độc tơ: + Hình thành điều kiện invitro ni cấy kị khí + Ngoại độc tô tác dụng vào thần kinh ruột + Chế giải độc tô băng cách trộn focmon 5% để 370C 20 ngày Khi tiêm cho thỏ tạo kháng thể ngưng kết nên thỏ có khả trung hòa với độc tơ VK Câu 12: Cấu trúc kháng nguyên giống Salmonella? Cấu trúc kháng nguyên Salmonella gồm: - Kháng nguyên O - Kháng nguyên H - Kháng nguyên vỏ K Kháng nguyên O: - Rất phức tạp, tìm thấy 65 yếu tơ khác Một Salmonella có nhiều yếu tơ yếu tơ - Chia thành 34 nhóm: A, B, Ci, C2, C3, - Mỗi nhóm VK có KN O cấu tạo sơ thành phần định kí hiệu băng sơ La mã + Yếu tơ đặc hiệu: lồi có + Yếu tơ ko đặc hiệu: chung cho vài lồi Ví dụ: Nhóm A: ( II, IX, XII) Yếu tô đặc hiệu: II ; Yếu tô ko đặc hiệu: XII Nhóm B: ( I, IV, XII, XXVII) yếu tô đặc hiệu: IV; yếu tô ko đặc hiệu: XII Nhóm D: ( I, IX, XII) yếu tơ đặc hiệu: IX; yếu tô ko đặc hiệu: XII Kháng nguyên H: - Chỉ có Salmonella có lông ( trừ S.gallinarium - pullorum) - Kháng nguyên H chia làm pha ( Phase): + Pha có tính chất đặc hiệu, gồm 28 loại KN lơng biểu thị chữ mẫu Latinh thường: a, b, c, d, f g, h, z + Pha ko có tính chất đặc hiệu, ngưng kết với loại khác( đơi gặp Escherichia) biểu thị chữ số Ả rập 1,2,3,4,5,6 hay chữ Latinh thường e,n,x Kháng nguyên vỏ K: - Kháng nguyên K Salmonella ko phức tạp, có Kn vỏ biết KN Vi có typ S.typhi S.para typhi KN Vi gặp KT Vi gây nên tượng ngưng kết chậm xuất hạt nhỏ - Bản chất KN Vi phức hợp gluxit - lipid - polypeptide gần giống KN O, KN Vi không tham gia vào trình gây bệnh Câu 13: Đặc tính sinh học trực khuẩn E.coli? Trả lời: Escherichia coli a Hình thái: - Trực khuẩn hình gậy ngắn, kích thước - x 0,6 |im - Trong thể, có hình trực khuẩn đứng riêng lẻ xếp thành chuỗi ngắn - Trong canh khuẩn già có trực khuẩn dài - |im - Phần lớn di động có lơng xung quanh thân, số khơng di động - VK khơng sinh nha bào, có giáp mô SV: KHUÀT MINH THANH K58TYA khuatminhthanh@gmail.com Email: HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA THÚ Y b Tính chất bắt màu: - Bắt màu Gram -, bắt màu sẫm hai đầu, khoảng nhạt - Lấy VK từ khuẩn lạc nhầy để nhuộm có giáp mơ, soi tươi ko có - Dưới KHV điện tử E.coli có nhân, khối tối nằm nguyên sinh chất màu sáng c.Đặc tính ni cấy: Trực khuẩn hiếu khí yếm khí tùy tiện, sinh trưởng — 40°C, nhiệt độ thích hợp 37°C, pH: 7,2 — 7,4; phát triển 5,5 — Môi trường nước thịt phát triển tốt, mơi trường đục, có cặn màu tro nhạt lăng xng đáy, đơi có màu xám nhạt mặt mơi trường, mơi trường có mùi phân thối Mơi trường thạch thường sau 24h, hình thành khn lạc tròn, ướt, khơng suốt, màu tro trăng nhạt, lồi đường kính — mm Ni lâu khuẩn lạc trở thành gần nâu nhạt mọc rộng ra, quan sát dạng R M Môi trường Mule Kopman ( Muller Kauffman), Môi trường lục Malasit Môi trường Endo Môi trường EMB Môi trường thạch SS Môi trường Vinson-Blai E.Coli không mọc E.coli không mọc E.coli có khuẩn lạc màu đỏ E.colicó khuẩn lạc tím đen E Coli có khuẩn lạc đỏ E Coli bị ức chê d Đặc tính sinh hóa: - Chuyển hóa đường: + Lên men sinh đường: fructoz, glucoz, levuloz, galactoz, xyloz, ramnoz, maniton, mannit, lactoz + Không lên men: andonit, inozit - Các phản ứng khác: + Sữa: đông sau 24 - 72h 370C + Gelatin, huyết đơng, lòng trắng trứng đơng: khơng tan chảy + H2S: + VP: - + MR: + + Indon: + + Khử nitrat thành nitrit + Có men decacboxylaz với lyzin, denitin, acginin glutamic e.Cấu trúc kháng nguyên: - Kháng nguyên O: I, II, III, IV, có gần 150 typ + Tính chất giống kháng nguyên O vi khuẩn đường ruột khác + Kháng nguyên K bao phủ kín kháng nguyên O nên Vk ko gây ngưng kết với kháng nguyên O tương ứng - Kháng nguyên H: + Chỉ có pha biểu thị số: 1, 2, 3, - Kháng nguyên K: gồm loại KN: L, A, B + Kháng nguyên L: ngăn ko cho tượng ngưng kết O VK sống xảy 100 0C/1h bị phá hủy + Kháng nguyên A: Ngăn tượng ngưng kết O, gây nên tượng phình vỏ 1200C/2h bị phá hủy + Kháng nguyên B: ngăn không cho ngưng kết O, 1000C/1h bị phá hủy phần Gồm B1, B2, B3, B4, B5 *) Trong 28 typ huyết phổ biến có chủng gây bệnh: O111B4, O86B7, O55B6, O26B6, O127B8, O128B12, 408 145 f Sức đề kháng: - E.coli không chịu nhiệt độ, đun 550C/1h, 600C/30ph, 1000C chết - E.coli bị chất sát trùng thông thường diệt: axit phenic, biclorua thủy ngân, focmon, hydroperoxit 10/00 SV: KHUẤT MINH THANH K58TYA khuatminhthanh@gmail.com 10 Email: HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA THÚ Y - Mơi trường bên ngồi E.coli độc tồn tháng g Tính gây bệnh: - E.coli có sẵn ruột ĐV, tác động gây bệnh sức đề kháng vật giảm sút( chăm sóc, ni dưỡng, cảm lạnh, cảm nắng) - Bệnh E.coli xảy bệnh truyền nhiễm kế phát sở thiếu vitamin mắc bệnh virus kí sinh trùng - E.coli gây bệnh gia súc đẻ - ngày - ngày - Bệnh Colibacillosis E.coli gây ngựa, bê, cừu, lợn gia cầm non Biểu bệnh bê 3-12 ngày tuổi: sốt cao, tháo phân, tháo dạ, phân lúc đầu vàng đặc sệt, mùi chua, sau chuyển sang màu trắng xám, thối, dính máu, bê ỉa nhiều lần rặn nhiều - Gia cầm: tháo dạ, phân xanh hôi thối, có tượng viêm kết mạc mắt, viêm cuống phổi, viêm niêm mạc mũi làm GC thở khó - Lợn con: giống bê, lây lan cho ổ ổ khác ĐV lớn: VK gây bệnh viêm phúc mạc, gan, thận, bàng quang, túi mật, bầu vú, khớp xương - Người, trẻ em tuổi: Vk gây viêm dày ruột, gây nhiễm độc, viêm túi mật, bàng quang, đường niệu sinh dục viêm não, đơi nhiễm khuẩn huyết trầm trọng *) Trong phòng TN: Tiêm S.C chuột bạch, chuột lang, thỏ viêm cục bộ, liều lớn gây bại huyết, giết chết vật Câu 14: Đặc tính sinh học trực khuẩn phó thương hàn lợn? Trả lời: a Hình thái: - Salmonella cholerae suis ( Bacillus cholerae suis) trực khuẩn hình gậy ngắn, hai đầu tròn, kích thước 0,4 - 0,6 x - |im - Khơng hình thành giáp mơ nha bào - Có khả di động mạnh có 7-12 lơng xung quanh thân - VK nhuộm màu với thuốc nhuộm thông thường - Bắt màu Gram - Bắt màu toàn thân đậm hai đầu b Tính chất ni cấy: Salmonella cholerae suis vừa hiếu khí vừa kỵ khí khơng bắt buộc, dễ ni cây, nhiệt độ 37°C, 42°C, pH= 7,6, phát triển pH: - - Salmonella gây bệnh gia súc, sinh trưởng tốt điều kiện hiếu khí, điều kiện kỵ khí Mơi trường nước thịt Mơi trường thạch thường Thạch pepton cấy vài đục nhẹ, sau 18h đục đêu, ni lâu đáy ống nghiệm có cặn, mơi trường có màng mỏng Vk mọc thành khuẩn lạc tròn, sáng xám, nhăn bóng, lôi lên giữa, nhỏ trắng khuẩn lạc E Coli ( đường kính: -1,5 mm) Sau 1-2 ngày khuẩn lạc hình thành bờ chất dính lầy nhầy xung quanh Thỉnh thoảng có thấy khuẩn lạc dạng R, nhám, mặt khơng bóng, khơng đêu, mờ - Khơng làm tan chảy gelatin c.Tính biến dị: - Trong mơi trường ni cấy, Sal biến dị khuẩn lạc kháng nguyên: SV: KHUẤT MINH THANH Email: khuatminhthanh@gmail.com 11 + Biến dị khuẩn lạc S thành R: VK có khuẩn lạc dạng S có kháng nguyên O đặc hiệu chủng qua thời gian nuôi cấy, VK phát sinh biến dị khuẩn lạc thành dạng R KN O khơng đặc hiệu + Biến dị khuẩn lạc O thành H: ảnh hưởng axit phenic VK lông sinh biến dị nên VK KN O - Biến chủng Sal.cholerae suis chủng Kunzendorf khơng có KN lơng pha 1( phâ đặc hiệu): S VI, VII:-1,5 d Đặc tính sinh hóa: - Chuyển hóa đường: MT kiểm tra MT nước thịt pepton cho thêm loại đường với tỉ lệ 0,5% chất thị màu xanh bromotymon, tím bromocrezon, đỏ phenon + Lên men đường không sinh hơi: glucoz, mannit, mantoz, galactoz, levuloz, arabinoz, xyloz, dechtrin, dunxit, ramnoz, + Ko lên men: lactoz, saccarroz A - Email: KầkamnỆha®ầ@gmml.com 11 HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA THÚ Y - Indon, VP, MR: - Catalaz: + - H2S: + - Dùng môi trường đặc biệt EMB, Kauffman, SS, để phân lập Sal E Sức đề kháng: - Sal tồn nước thường tuần, nước đá 2-3 tháng Trong xác ĐV chết chôn bùn 2-3 tháng - Nhiệt độ: Đề kháng yếu: 500C/1h; 700/20ph; 1000/5ph, khử theo phương pháp Pasteur bị tiêu diệt - Ánh sáng mặt trời chiếu trực tiếp: sau 5h nước trong; 9h nước đục - Các chất sát trùng thơng thường dễ phá hủy VK hồn tồn: Phenon 5%, HgCl 1/500, formon 1/500 diệt 15-20 phút Các chất cristal violet, lục malachit, natri hyposunfit, dixitrat, muôi mật gây độc cho E.coli ko ảnh hưởng Sal - Thịt ướp nồng độ muôi 29% sông 4-8 tháng t0:6-120C - Xử lý miếng thịt nhiễm trùng băng hơ lửa hay nướng ảnh hưởng Sal bên e Cấu tạo kháng nguyên: - Cấu trúc kháng nguyên S.VI, VII: c-1,5 - Kháng nguyên thân O: VI, VII - Kháng nguyên tiêm mao H: + Pha 1: c + Pha 2:1,5 f Độc tô: - Nội độc tô: + Rất mạnh, liều thích hợp I.V giết chết chuột bạch, chuột lang 48h Bệnh tích: ruột non sung huyết, mảng payer phù nề, hoại tử + Độc tô ruột gây ngộ độc thần kinh, gây hôn mê, co giật, nội độc tơ có hai loại: gây sung huyết mụn lt - Ngoại độc tơ: + Hình thành điều kiện invitro ni cấy kị khí + Ngoại độc tô tác dụng vào thần kinh ruột + Chế giải độc tô băng cách trộn focmon 5% để 370C 20 ngày Khi tiêm cho thỏ tạo kháng thể ngưng kết nên thỏ có khả trung hòa với độc tơ VK g Tính gây bệnh: - Trong tự nhiên: + VK theo thức ăn nước ng vào đường tiêu hóa + Gây bệnh thương hàn phó thương hàn cho lợn, bò, gà, người, vịt, sơ ĐV khỏe mạnh điều kiện sức đề kháng ĐV giảm sút, VK xâm nhập vào máu nội tạng gây bệnh Sự giảm sút SĐK thời tiết,chăm sóc ni dưỡng, mắc bệnh truyền nhiễm + Gây bệnh phó thương hàn cho lợn từ - tháng tuổi tỷ lệ tử vong 25% có đến 95%, mạn tính gây chết + Bệnh đơn thuần: vật sôt, tháo phân, mùi tanh, thơi đặc biệt, dính vào khoeo, + Bệnh tích: lách sưn to, dai cao su, gan tụ máu hoại tử, niêm mạc dày ruột viêm đỏ, tụ máu có có nơt lt - Trong phòng thí nghiệm: chuột bạch cảm nhiễm nhất, chuột lang, thỏ cảm nhiễm + Tiêm canh khuẩn S.C phúc mạc, chỗ tiêm S.C phát sinh thủy thũng, sưng mủ, loét, sau 4-5 ngày 8-10 ngày vật gầy dần chết Bệnh tích: tụ máu, lách sưng, viêm ruột, bệnh kéo dài gan lách có điểm hoại tử - Tính gây miễn dịch: + Sau khỏi bệnh tiêm vacxin, thể ĐV sản sinh miễn dịch tương đối dài Trong dịch thể ĐV miễn dịch xuất ngưng kết tố, kết tủa tố, kháng thể kết hợp với bổ thể Kháng nguyên O có gây đáp ứng MD rõ rệt, KN H ko có khả năg Câu 15: Chẩn đoán huyết học bệnh thương hàn gà phản ứng ngưng kết nhanh phiến kính? Trả lời: - Dùng phản ứng ngưng kết để phát gà mắc bệnh hay gà mang vi khuẩn làm lây lan bệnh Ở đàn gà tiến hành gà - tháng tuổi Phản ứng tiến hành - tháng 1đợt, đượt - lần cách - tuần lễ ảnh hưởng hoạt lực VK - Phản ứng tiến hành sau: + Chuẩn bị - phiến kính, làm gạch men trắng chia ô + Dùng ống hút, nhỏ từ - giọt kháng nguyên lên ô nhỏ giọt máu gà nghi( dùngque cấy bạch kim có vòng cấy thích hợp, đường kính - mm cho tỉ lệ máu với kháng nguyên 1/5) + Lấy máu cách chọc kim lên chóp mào gà, dùng kéo cắt chóp mào gà, lấy máu tĩnh mạch cánh + Sau trộn hỗn dịch máu với kháng nguyên nước sinh lý giọt máu gà khỏe đối chứng dương gồm kháng nguyên kháng huyết chuẩn SV: KHUÀT MINH THANH K58TYA khuatminhthanh@gmail.com Email: 12 HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP HÀ NỘI KHOA THÚ Y - Phản ứng dương tính: thấy có tượng ngưng kết hạt bông, trông thấy mắt thường - Phản ứng âm tính: hỗn dịch coa màu trộn máu kháng nguyên, không xuất hạt ngưng kết Câu 16: Đặc tính sinh học trực khuẩn nhiệt thán Bacillus anthracis? Trả lời: Trực khuẩn nhiệt thán: Bacillus anthracis Hình thái: - Trực khuẩn to, đầu bằng, kích thước: - 1,5 x - |im - Khơng có lơng, khơng có khả di động - Bắt màu gram (+): màu tím xếp thành chuỗi - Khả sinh nha bào hình thành ngồi gia súc bệnh Sinh nha bào khơng làm thay đổi kích thước - VK có khả sinh giáp mơ: Có thể bao bọc 1,2 tế bào đứng cạnh a Điều kiện hình thành nha bào: - Đủ oxy - Môi trường nghèo chất dinh dưỡng - Nhiệt độ thích hợp: 37 C - Độ ẩm thích hợp - Độ pH thích hợp: pH: - - Điều có vi khuẩn thể động vật Để nhuộm nha bào,dùng phương pháp Zichl - Nielsen b Điều kiện hình thành giáp mơ: - Giáp mơ có chất protit, polyme D- glutamic.Giáp mơ hình thành trongcơ thể súc vật mơi trường có 20% huyết - Giáp mô yếu tố độc lực vi khuẩn, giúp VK tránh thực bào - Giáp mô đề kháng cao với thối rữa cấu trúc vi khuẩn Giáp mơ có chứa kết tủa tố ngun giú p cho q trình chẩn đốn, muốn nhuộm giáp mô dùng phương pháp Hiss Giáp mô : Kết tủa tố nguyên A Kích thích thể A Đáp ứng miễn dịch A Kết tủa tố Tạo phức hợp kháng nguyên không tan Nuôi cấy : - Hiếu khí, dễ ni cấy, nhiệt độ thích hợp : 37 C, (12 - 420C), pH : 7,2 - 7,4; (6 - 9) A - Môi trường nước thịt : 18 - 24h có sợi bơng lơ lửng dọc ống nghiệm, lắng xuống đáy thànhcặn,có mùi thơm bánh bích quy bơ - Môi trường thạch thường : khuẩn lạc dạng R, to, nhám, xù xì, đường kính - mm - Môi trường thạch máu : VK không gây dung huyết, mọc tốt môi trường thạch thường, khuẩn lạc dạng S nhiều dạng R - Mơi trường gelatin : Cấy chích sâu, ni 28 C sau - ngày, VK mọc thành nhánh ngang trông giống tùng lộn ngược Đặc tính sinh hóa : - Khả lên men đường : lên men ko sinh đường: glucoza, mantoza, saccaroza, manit - Các phản ứng khác : +Indol: + H2S: - + MR: + - + VP: + Sức đề kháng: - VK đề kháng với nhiệt độ hóa chất: 60 C/15ph; 75 C/2ph - Trong xác chết thối, chết sau ngày - Nha bào có sức đề kháng: Formol 3% sau 2h nha bào tiêu diệt ( tính độc formol % ) Nước vôi pha đặc sau 48h diệt nha bào - Trên gia súc vật có nha bào ngâm vơi, muối nha bào tồn - Dùng formol 10% / 4h30ph để khử trùng da - Tồn lâu tự nhiên: 20 - 35 năm, nguồn lây bệnh nguy hiểm 5.Kháng nguyên: a Kháng nguyên vỏ: K - Có giáp mơ VK nhiệt thán, có cấu tạo hóa học polypeptit, polyme axit D - glutamic, phương diện miễn dịch, KN K bán KN b Kháng nguyên thân: O 0 0 SV: KHUÀT MINH THANH K58TYA khuatminhthanh@gmail.com Email: 13 HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA THÚ Y - Có thân VK nhiệt thán, cấu tạo polyozit, phương diện miễn dịch, KN O bán KN c Kháng nguyên phức hợp hòa tan - Cấu tạo Nucleoproteit, KN hoàn toàn, gây miễn dịch tiêm 6.Tính gây bệnh: a Trong tự nhiên: - Những lồi ĐV ăn cỏ trâu, bò, ngựa, dê, cừu, lạc đà, hươu nai, mẫn cảm, thường bại huyết mà chết + Lợn, chó cảm nhiễm, thường bị bệnh cục họng hạch + Loài chim không cảm nhiễm + Người cảm nhiễm thường gặp3thể lâm sàng: thể da, thể ruột, thể phổi ++ Thể da: VK xâm nhập vào da, chỗ xâm nhập xuất nốt phỏng, đen hoại tử gọi nốt mủ ác tính Hay gặp, mức độ bệnh nhẹ ++ Thể phổi: người bị mắc bệnh hít phải nha bào nhiệt thán Ít gặp hơn, mức độ nặng ++ Thể ruột: người mắc bệnh ăn phải thịt gia súc mắc bệnh nhiệt thán Ít gặp, mức độ nặng - Có đường truyền bệnh chính: + Qua đường tiêu hóa: ăn phải nhabào lẫn thức ăn nước uống Ở người ăn thịt gia súc ốm bệnh + Qua da: da bị tổn thương giới côn trùng mang mầm bệnh đốt phải Trong trường hợp vai trò ruồi, nhặng, ve mòng lớn Ở người hay gặp: cơng nhân thuộc da,lò sát sinh, bác sỹ thú y + Qua đường hô hấp: hít phải nha bào Ở người làm nghề thuộc da, cắt xén lông cừu, chế biến len sợi - Bệnh nhiệt thán phát quanh năm hay gặp mùa nóng ẩm, tháng mưa nhiều vào mùa ngập lụt lúc nha bào có điều kiện phát tán - Ở miền núi bệnh hay phát vào mùa hanh khô cỏ, gia súc gặm cỏ sát đất ăn phải nha bào, mặt khác vào mùa khô, nước cạn nên thường tập trung nhiều nha bào ao tù nước đọng, gia súc uống nước uống phải nha bào - Bệnh thường xảy vùng gọi vùng nhiệt thán, nơi súc vật bị bệnh mà phương pháp xử lý môi trường không tốt nên nha bào có điều kiện tồn lưu cữu để bệnh lây lan - Trong tự nhiên nha bào đóng vai trò quan trọng q trình truyền bệnh - Ở nơi chơn súc vật chết bệnh nơi nhiễm chất tiết súc vật ốm máu, phân, nước tiểu, VK nhiệt than hình thành nha bào tồn thời gian dài, giun đất ăn phải nha bào đùn lên mặt đất theo phân Khi mưa xuông, nha bào theo nước mưa phát tán xa bám vào cỏ, ĐV ăn phải nha bào, vào đường tiêu hóa niêm mạc bị tổn thương( dị vật, thức ăn cứng, kí sinh trùng.) nha bào qua vết thương vào máu mọc thành VK mà gây bệnh b Trong phòng thí nghiệm: - Chuột lang, chuột bạch, thỏ dễ cảm nhiễm - Tiêm da canh khuẩn hay bệnh phẩm sau 12h vật bị sôt, nơi tiêm bị thủy thũng; sau 24h vật mệt nhọc, khó thở, nhiệt độ hạ xng 30 - 280C sau - ngày chết - Bệnh tích: + Nơi tiêm thủy thũng, có chất keo nhày lòng trắng trứng + Hạch lympho sưng đỏ, thủy thũng xung quanh + Máu đen, đặc, khó đơng + Lá lách sưng to, nhũn bùn + Tất quan tụ máu, bàng quang tích nước tiểu đỏ Câu 17: Chẩn đoán VK học bệnh nhiệt thán? a Lấy bệnh phẩm: - Do tính chất nguy hiểm bệnh, lấy bệnh phẩm phải tiến hành KT cẩn thận để tránh rơi vãi môi trường gây nhiễm, VK nhanh chóng hình thành nha bào, khó diệt - Với GS nghi mắc nhiệt thán tuyệt đôi không mổ SV: KHUÀT MINH THANH K58TYA khuatminhthanh@gmail.com Email: 14 HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA THÚ Y - Nếu vật sơng lấy máu TM tai, trước lấy máu phải sát trùng băng cồn iod 5%, đợi khô, đâm kim thẳng vào TM cho máu chảy thẳng vào ông nghiệm Sau lấy máu xong, sát trùng kỹ chỗ lấy máu băng cồn iod 5% - Nếu vật chết cắt lấy mẩu da tai cho vào lọ, sát trùng đôt vết cắt - Trường hợp cần thiết lấy lách: dùng cồn sát trùng vùng gian sườn sô bêntrái, dùng dao rạch đường nhỏ, lấy panh kẹp lách, lôi ra, cắt mẩu nhỏ cho vào lọ nút kín - Đơt kĩ chỗ mổ dùng bơng tẩm cồn iod 5% nút kín chỗ mổ b Làm tiêu bản, nhuộm Gram tìm VK: - Nếu bệnh phẩm máu: làm tiêu bản, cô định băng cồn etylic, sau nhuộm giemsa - Nếu bệnh phẩm lách: làm tiêu bản, cô định băng nhiệt, nhuộm gram - Sau nhuộm: + Trực khuẩn nhiệt thán to, đầu vuông, đứng riêng lẻ thành chuỗi ngắn, có giáp mơ bao bọc xung quanh, bắt màu gram dương c.Nuôi cấy bệnh phẩm vào môi trường: - Môi trường nước thịt, thạch thường, thạch máu quan sát tính chất mọc d Tiêm ĐVTN: - Phương pháp quan trọng chẩn đoán bệnh - Dùng chuột lang hay chuột bạch để gây bệnh - Nếu bệnh phẩm tươi, đem nghiền pha với nước sinh lý cấy vào nươc thịt, nuôi 24h 37 0C tiêm vào da mặt đùi chuột - Nếu bệnh phẩm thơi có tạp khuẩn khía da bụng bơi - Bệnh phẩm có VK, chuột chết sau - ngày Mổ khám thấy nơi tiêm thủy thũng cục bộ, có chất keo nhày giơng lòng trắng trứng Hạch lympho sưng đỏ, thủy thũng, máu đen, đặc khó đơng, lách sưng to, mềm, tất quan tổ chức tụ máu, bàng quang chứa đầy nước tiểu đỏ Câu 18: Trình bày phản ứng kết tủa Ascoli để chẩn đoán bệnh nhiệt thán? a Ngun lý: - Trong giáp mơ VK có kháng ngun gọi kết tủa tơ ngun có khả kích thích thể động vật sản sinh kháng thể đặc hiệu gọi kết tủa tô Khi kết tủa tô nguyên gặp kết tủa tô tạo phức hợp kháng nguyên kháng thể chất cặn khơng tan - Ứng dụng: với lồi VK có nha bào b Các bước chuẩn bị: - Chuẩn bị kháng nguyên nghi: + bệnh phẩm lách, đem nghiền nhỏ, cho vào 10 phần nước sinh lý, đun sôi cách thủy 15 - 20 phút, để nguội, lọc kỹ, ly tâm lấy nước + Bệnh phẩm da, lông, xương, đem hấp ướt 1200C 30 phút để khử trùng, cắt nhỏ, cho vào 10 phần nước sinh lý, để tủ lạnh 50C 24h, lọc kỹ, lấy nước - Chuẩn bị kháng nguyên âm: + lấy gan, lách gia súc khỏe để chế kháng nguyên âm, cách làm tương tự kháng nguyên nghi - Chuẩn bị kháng thể: kháng thể huyết kháng nhiệt thán chế cách gây tối miễn dịch cho ngựa c.Tiến hành: - Dùng ống nghiệm nhỏ, ống làm thí nghiệm, ống làm đối chứng - Cho 0,5ml kháng nguyên nghi vào ống thứ 1, 0,5ml kháng nguyên âm vào ống thứ - Dùng ống hút có đầu nhỏ dài hút huyết kháng nhiệt thán cho vào ống 0,5ml, ý phải cho đầu hút sát đáy ống nghiệm từ từ thả huyết kháng nhiệt thán xuống, huyết đội kháng nguyên lên Để yên 10 - 15 phút phòng thí nghiệm đọc kết + Phản ứng dương tính: nơi tiếp xúc hai lớp kháng nguyên kháng thể xuất vòng kết tủa màu trắng, chứng tỏ bệnh bệnh phẩm có mặt kháng ngun + Phản ứng âm tính: khơng xuất vòng kết tủa màu trắng Có thể làm phản ứng kết tủa khuếch tán đĩa thạch phiến kính thạch để chẩn đốn nhiệt thán Câu 19: Đặc tính sinh học trực khuẩn uốn ván Từ đề biện pháp phòng trị bệnh? Trả lời: Trực khuẩn uốn ván: Clostridium tetani Đặc tính sinh học: a.Hình thái tính chất bắt màu - Trực khuẩn to, ngắn, thẳng cong, đầu tròn, kích thước 0,5 - 0.8 x - |im - Trong tổ chức, canh khuẩn đứng riêng lẻ, có chuỗi ni cấy SV: KHUẤT MINH THANH K58TYA khuatminhthanh@gmail.com Email: 15 HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA THÚ Y KHOA THÚ Y - Trong canh khuẩn già từ 36h trở lên mủ Vk có hình gậy, đầu có nha bào - VK có khả di động nhanh có nhiều lơng xung quanh thân, đình hoạt động có oxy nguyên tử - Bắt màu gram + nuôi cấy lâu có số trở thành gram -, có màng bọc VK bắt màu nha bào vòng rỗng đầu VK b Đặc tính ni cấy: - VK yếm khí tuyệt đối, nhiệt độ thích hợp 370C, pH: 7,2 - 7,4 không cần nguồn dinh dưỡng lớn chuyển hóa đơn giản. MT Brewer Vk phát triển MT có chất khử oxy natri thioglycolat glutathion MT nước thịt gan yếm khí MT thạch máu glucoz Thạch đứng VF Sau 2-4h mơi trường vẩn đục đều, có mùi thối hay mùi sừng cháy, để lâu đóng cặn đáy, nước bên trong, MT có óc làm đen óc VK làm dung huyết, có khuẩn lạc nhám hình sợi tơ dài bắt chéo tóc rối, khuẩn lạc có loại hình nhện nhỏ, tròn, nhẵn bóng Khuẩn lạc hình thành vẩn bơng màu trắng đục, VK sinh nên môi trường bị nứt, vỡ nút bơng bị đẩy lên c Đặc tính sinh hóa: - Chuyển hóa đường: sinh amoniac nên trung hòa mơi trường + Lên men đường sinh hơi: glucoz, levuloz, galactoz, saccaroz, arabinoz - Các phản ứng khác: + H2S: + + Indon: + + NH3: + + Gelatin tan chảy chậm sữa đông chậm c Độc tố: - Ngoại độc tố tan môi trường hay thể dịch mạnh, liều gây chết tối thiêu cho 1g thể chuột bạch ng, 0,83 ng chuột lang - Tetanoslysin: tan HC thỏ, người, ngựa, hoại tử - Tetanospasmin: độc tố TK, gây triệu chứng bệnh uốn ván - Chế độc tố nuôi giống VK nước thịt gan, máu 370C, lọc lấy độc tố vào ngày thứ 15 sau cấy - Độc tố bị phá hủy 650C/5ph, 600/20ph, ánh sáng mặt trời sau 15-18h Cồn, nước mật diệt độc tố, focmon, iot làm độc tính độc tố giữ tính kháng nguyên Dùng focmon 4% giải độc tố uốn ván tháng d Sức đề kháng: - Đề kháng yếu với nhân tố lý, hóa, đun sơi 1000C/5ph giết chết VK - Ở thể nha bào, VK có sức chống đỡ mạnh, đun 1000C/ - 3h, axit phenic 15%/5h, focmon 3%/ 24h giết Ánh sáng trực tiếp tháng giết nha bào - Sự sấy khô bảo tồn nha bào lâu, phơi khô gỗ sau 11 năm sống, chỗ tối nha bào tồn 10 năm e Tính gây bệnh: - TKUV gây bệnh độc tố hình thành thể bị nhiễm trùng *) Trong tự nhiên: - Ngựa, cừu, dê, bò, người dễ mắc; lợn, chó, mèo mắc; gia cầm ko mẫn cảm - Ở người: nơi bị thương, bị căng đau, nhai, mặt bị căng co thắt, gáy, lưng cứng đờ tới thành ngực, bụng chi làm cho lưng cổ uốn cong, ván bị cong - Gia súc: cứng cổ, cứng hàm, khó thở, cong, lưng thẳng, bốn chân thẳng cứng gỗ, bắp thịt hằn dõ - Bệnh xảy nha bào UV nhiễm vào vết thương VK tiết ngoại độc tố VK vết thương( mủ, chất keo nhày) khơng có quan khác - Hai điều kiện cần để nha bào phát triển thành VK: yếm khí, khơng bị thực bào *) Trong phòng thí nghiệm: - ĐVCN: chuột bạch con, thỏ, chuột lang - Tiêm S.C, I.M sau ngày thấy vật cứng đi, chân móng chân duỗi thẳng, bắp thịt co quắp, sau ngày chết đủ liều - Thỏ, chuột lang sau - 10 ngày chết Phòng trị bệnh: a Phòng bệnh - Bằng giải độc tố huyết kháng độc tố uốn ván SV: KHUẤT MINH THANH K58TYA khuatminhthanh@gmail.com Email: 16 HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA THÚ Y - Bệnh UV có tính chất vùng - Gia súc thường hay bị bệnh sau phẫu thuật, đặc biệt sau thiến, cần phòng ngừa chặt chẽ sau phẫu thuật - Tiêm S.C 1ml giải độc tố trước thiến tháng sau phẫu thuật lần - Con vật bị thương, trước phẫu thuật tiêm 15000-30000UI cho GS lớn, 3000-6000 GS nhỏ - Kháng huyết nên dùng sớm không để 12h sau bị thương - Gia súc lớn tiêm 1ml giải độc tố, GS nhỏ tiêm 0,5 ml giải độc tố - Hiệu lực miễn dịch ngựa 3-6 tháng, GS khác năm b Điều trị: - Nguyên tắc: phối hợp trung hòa độc tố tiêu diệt tác nhân gây bệnh ngăn chặn biểu thần kinh cách ức chế TKTW + Xử lý vết thương ngoại khoa: mở rộng vết thương, căt bỏ tổ chức hoại tử, rửa chất giầu oxy: thuốc tím, nước oxy già + Tiêm kháng độc tố + Dùng kháng sinh để giết VK + Ức chế TK thuốc an thần, thuốc làm giãn thuốc trợ tim Câu 20: Đặc tính sinh học trực khuẩn Lao? Trả lời: Trực khuẩn Lao: Mycobacterium tubercullosis a Hình thái tính chất bắt màu: - Trực khuẩn hình gậy mảnh, cong, có kích thước 0,2 - 0,5 x 1,5 - 5ụm - Đầu tròn, ko có lơng, ko có nha bào, ko có giáp mơ - Canh khuẩn non Vk lao xếp thành chuỗi cong chữ S, canh khuẩn già có hình sợ i, có nhánh - VK bắt màu khơng đều, có hạt tròn mầu sẫm xếp với nhau, có khoảng sáng - Vk có nhiều lipit, phức hợp lipit axit béo chất sáp làm cho VK khó thấm nước, có tính kháng cồn, kháng axit nên khó nhuộm màu Dùng phương pháp nhuộm Ziehl Nielsen VK bắt màu đỏ xanh b Đặc tính ni cấy: - Trực khuẩn lao loại hiếu khí, yếm khí mọc thưa cằn, nhiệt độ 37°C, pH: 6,7 - - Môi trường nuôi cấy VK lao phải giàu chất dinh dưỡng, nhiều muối khoáng có glyxerin VK lao sinh trưởng chậm, sớm sau - tuần mọc _ Môi trường nước thịt glyxerin sau cấy 10 - 15 ngày, VK mọc, mặt có màng mỏng dính lại với nhau, nước thịt suốt, lắc có mảnh nhỏ chìm xuống đáy thành hình đậu trắng Mơi trường thạch glyxerin ( — 3%) Môi trường khoai tây glyxerin (5%) Môi trường Lovensten ( Loweinstein) sau cấy - 10 ngày hình thành khuẩn lạc khơ hình hạt nhỏ, hay vảy khô trắng xám, thành cục bướu thơ dính chặt vào mơi trường VK mọc hình thành khuẩn lạc hình vảy khơ, hình hạt, dân dân đơng lại thành lớp dày khơng đêu, hình bướu, màu xám nhạt VK mọc sau khoảng tháng tạo thành khuẩn lạc khơ, nhăn nheo trơng giống hình súp lơ c Sinh sản: - Sinh sản theo phương thức nảy chồi nấm - Sinh sản theo kiểu trực phân: VK dài ra, phân chia thắt lại thành VK mới, xảy chậm 24h lần d Sức đề kháng: - Đề kháng với nhiệt độ tia tử ngoại: 650C/15ph; 70-800C/5-10ph Tia tử tiêu diệt nhanh chóng - Đề kháng cao với hóa chất có chất sáp bảo vệ: axit phenic 5% diệt Vk 24h, focmon 1%/12h, NaOH 2% tác dụng tôt - Ánh sáng mặt trời làm độc lực 8h Ở chỗ tôi: phân sông tháng, đờm sông đến vài tháng - Trong bụi, đất, nước, sông vài ngày tới vài tháng e Tính gây bệnh: *) Trong tự nhiên: - M.t.humanus: typ lao người gây bệnh lao cho người như: lao phổi, lao xương, khớp, thận, ruột, quan sinh dục, da, màng não, tủy, Có thể gây lao chó, mèo, bò, vượn - M.t.bovinus: typ lao bò, gây bệnh cho bò, người, lợn, chó, mèo - M.t.avium: typ lao gia cầm gây bệnh gia cầm, người, lợn, chó SV: KHUẤT MINH THANH K58TYA khuatminhthanh@gmail.com Email: 17 HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA THÚ Y - Đường xâm nhập: + Hô hấp: mầm bệnh dính vào bọt nước lơ lửng khơng khí, phân đờm khơ đi, mầm bệnh dính vào hạt bụi GS khỏe hít phải + Tiêu hóa: Bê, lợn Mầm bệnh từ thể bị lao thải lẫn vào thức ăn, nước uông, GS khỏe ăn phải nên bị lây + Bệnh lây qua bú sữa, núm nhau, đường sinh dục mầm bệnh tử cung hay dọc đường dẫn tinh vào *) Trong phòng thí nghiệm: - Chuột lang: mẫn cảm typ lao người bò + Tiêm S.C sau 6-10 ngày hạch lâm ba chỗ tiêm sưng, 8-12 ngày tuần vật chết + Mổ khám: hạch sưng, mủ chất keo đặc, lách sưng to gấp 10 lần, hình thùy, màu vàng, gan sưng to có hạt, tụ máu có đơm vàng lách, phổi có hạt Typ gà làm cho phát bệnh cục - Thỏ: mẫn cảm typ lao bò, gà + Tiêm S.C sau 3-10 tuần thỏ chết mắc lao toàn thân + Typ lao người gây bệnh cục Câu 21: Dùng phản ứng dị ứng để phát lao bò( nguyên lý, phương pháp tiêm nội bì) ? Trả lời: a Nguyên lý: - Khi VK lao xâm nhập vào thể, kích thích thể sinh kháng thể đặc hiệu, có kháng thể tế bào, kháng thể chất gây dị ứng lao, chất gặp VK lao hay chất chiết VK lao gây nên phản ứng dị ứng theo kiểu mẫn - Nếu người, ĐV có phản ứng dị ứng bị nhiễm VK lao - Để phát dị ứng lao, người ta dùng VK lao hay chất chiết từ VK lao, chất chiết từ VK lao thường sử dụng Tuberculin b Chiết Tuberculin: - Trong nước lọc canh khuẩn nuôi cấy Vk lao có Tuberculin, thành phần hóa học gồm: Anbumin, nucleoprotein, lipit, polyozit - Có loại : + Tuberculin thơ: Ni VK MT nước thịt Glyxer in 6-8 tuần, lấy nước lọc môi trường đun 1000C/1h, cô đặc 800C 1/10 thể tích ban đầu, thu Tuberculin thơ có nhiều tạp chất nên làm phản ứng dễ gây tượng dương tính giả + Tuberculin tinh chế: từ Tuberculin thô loại bỏ hết tạp chất giữ lại thành phần protein 1ít polysaccarit - Phát lao GS: tuberculin chiết từ typ lao bò, typ lao GC là: TbPPDM, TbPPDA - Phát lao người: tuberculin chiết từ typ lao người SV: KHUÀT MINH THANH K58TYA khuatminhthanh@gmail.com Email: 18 HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA THÚ Y KHOA THÚ Y c Phương pháp tiến hành: - Làm theo phương pháp: tiêm da, nhỏ mắt, tiêm da - Khi tiêm Tuberculin vào da người hay ĐV có nhiễm khuẩn sau 48-72h nơi tiêm xuất phản ứng dị ứng đặc hiệu da Biểu hiện: nơi tiêm xuất nốt sần, sung huyết, có cứng rõ Nếu người ĐV chưa mắc lao ko có biểu - Phát lao bò: *) Phương pháp tiêm da: - Tiêm mũi vào da bên cổ với loại Tuberculin: TbPPDM, TbPPDA nhằm xác định chủng lao gây nhiễm thuộc typ lao GC hay typ lao bò Mycobacterium khác bò - Cắt lơng vị trí tiêm, rửa nước sinh lý đo độ dày da - Liều tiêm cho mũi 0,2 ml + 0,2 ml TbPPDM tương đương 3500 đv + 0,2 ml TbPPDA tương đương 2500 đv Vị trí tiêm mũi: + Mũi cổ bên phải, cách xương bả vai phía trước 10 cm, tiêm TbPPDM cách M + ũi mũi phía trước 10 cm, tiêm TbPPDA cổ bên tráo, cách xương bả vai + Mũi phía trước 10 cm, tiêm TbPPDA cách mũi phía trước 10 cm, tiêm + Mũi TbPPDM - Sau tiêm tính độ dày da trung bình mũi tiêm loại TbPPDM mũi tiêm TbPPDA trước sau tiêm 72h + Mức tăng độ dày da sau loại TbPPDM loại TbPPDA + Hiệu số mức tăng độ dày da loại TbPPDM - TbPPDA - Kết quả: +) Với loại TbPPDM: + Phản ứng dương tính: độ dày da > 3,5 mm , đường kính chỗ tiêm lớn 20 mm Mức tăng độ dày da > mm + Phản ứng nghi ngờ: độ dày da 2,5 - 3,4 mm , đường kính chỗ tiêm 10 - 19 mm + Phản ứng âm tính: độ dày da < 2,5 mm , đường kính chỗ tiêm < 10 mm +) Với loại TbPPDA: + Phản ứng dương tính: độ dày da > mm , đường kính chỗ tiêm lớn 20 mm Mức tăng độ dày da > mm + Phản ứng nghi ngờ: độ dày da - 4,9 mm , đường kính chỗ tiêm 10 - 19 mm + Phản ứng âm tính: độ dày da < 3mm , đường kính chỗ tiêm < 10 mm - Sau 45-60 ngày làm lại phản ứng *) Phương pháp nhỏ mắt: - Cột gia súc vào nơi tránh gió lùa, nhỏ 3-4 giọt khuẩn tố tuberculin vào kết mạc mắt, sau 4h, đọc kết - Phản ứng dương tính: Kết mạc mắt có mủ, kết mạc mắt sưng đỏ rõ rệt, mí mắt có thấm chất nước tích tụ lại có chất dính hay mủ đặc - Phản ứng nghi ngờ: Kết mạc mắt sưng, màu đỏ khơngrõ rệt, có nước mắt chảy - Phản ứng âm tính: khơng có thay đổi - Phản ứng ngi ngờ sau 2-7 ngày làm lại phản ứnglần thứ mắt *) Phương pháp tiêm da: - Kiểm tra thân nhiệt ngày trước thử, nhiệt độ khơng q 38,60C tiêm da cổ 1ml Tuberculin, sau 6h 2h lấy nhiệt độ lần, thường 12-16h sau nhiệt độ lên đến mức cao - Phản ứng dương tính: Nhiệt độ tăng bình thường 0,50C trở lên, vật mệt, ăn, chỗ tiêm sưng - Phản ứng nghi ngờ: nhiệt độ tăng từ 0,1 đến 0,50C - Phản ứng âm tính: khơng có thay đổi - Ít dùng thực tế khơng mẫn cảm *) Phát lao cho khác: _ P lao hát Tiêm tuberculin từ chủng lao bò vào da Tiêm 0,1ml tuberculin vào da gốc tai lợn, cho lợn sau 24 - 48h độ dày da >5mm dương tính Phản ứng nhạy 3-9 tuần lễ sau nhiễm bệnh Phát lao Tiêm tuberculin GC, tiêm 0,1 - 0,2 ml vào da yếm gà( mào gà) Sau 36-48h, độ dày da tăng lên cho gà _ 2-3mm chỗ tiêm sưng cứng phản ứng dương tính SV: KHUÀT MINH THANH K58TYA khuatminhthanh@gmail.com Email: 19 HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA THÚ Y Phát laoTiêm tuberculin người, tiêm 0,1 ml vào da Sau 48-72h, chỗ tiêm có nốt sần, cứng cho người đường kính nốt sần > 10mm coi dương tính Câu 22: Đặc tính sinh học Leptospira? Trả lời: Trực khuẩn xoắn khuẩn: Leptospira a Hình thái tính chất bắt màu: - Có 212 serotyp Leptospira, hình thái loại xoắn khuẩn nhỏ, mỏng, kích thước: - 20 x 0,1 - 0,2 |im - Hai đầu uốn cong tựa móc câu, có nhiều vòng lượn sát nhau, di động mạnh - Khó bắt màu phương pháp nhuộm thông thường, nhuộm Môrôsôp xoắn khuẩn bắt màu nâu đen, nhuộm giemsa: xoắn khuẩn bắt màu đỏ tím b Đặc tính ni cấy: - Vk hiếu khí, nhiệt độ thích hợp 28 - 300C, pH kiềm: 7,2 - 7,4 - Leptospira mọc môi trường nhân tạo thông thường, môi trường nuôi cấy phảichothêm - 10 % huyết tươi MT Terskich, Korthoff, EMJH - Trong môi trường Terskich, sau cấy - ngày xoắn khuẩn mọc, khoảng tuần, môi trường đục nhẹ, có vẩn khói lắc - Cấy vào màng niệu đệm phôi thai gà 10 ngày tuổi, sau cấy ngày phơi gà chết, bệnh tích khơng điển hình c Cấu tạo kháng nguyên: - Hiện biết có 60 chủng leptospira - Leptospira có loại kháng nguyên: xảy phản ứng chéo + Một kháng nguyên chính: tác dụng định với thân nó, trở thành kháng nguyên phụ xoắn khuẩn khác + Một kháng nguyên phụ trở thành kháng nguyên xoắn khuẩn - Chẩn đoán huyết dùng 12 chủng, nước ta dùng chủng để sản xuất vacxin 12 chủng là: L.australis; L.autumnalis; L.bataviae; L.canicola; L.grippotyphosa; L.hebdomadis; L.icterohemorrhagiae; L.mitis; L.poi; L.pomosa; L.saxrobing; L.sejroe chủng dùng là: L.bataviae; L.canicola; L.grippotyphosa ; L.icterohemorrhagiae; L.mitis; L.pomosa d Sức đề kháng: - Leptospira tương đối yếu so với xoắn khuẩn khác có sức đề kháng cao - Nhiệt độ: Leptospira nhạy cảm: 560C/10ph, 600C/5ph, -300C không chết, 40C gan chuột lang sống 26 ngày ko giảm độc lực - Nhạy cảm với độ pH axit, dày sau 10ph chết, Leptospira không mọc môi trường axit - Các chất sát trùng thơng thường diệt xoắn khuẩn nhanh chóng: axit phenic 0,5%/5ph, focmon 0, 25%/5ph, axit sunfuric 0,05%/10ph, biclorua thủy ngân 1/2000 sau 10-15 ph leptospira bị ngừng di động tan dần - Nước muối: dung dịch 2,8%/15ph Penixillin tác dụng tốt với Leptospira e Tính gây bệnh: *) Trong tự nhiên: - Gây bệnh cho bò, chó( nhiều nhất), ngựa, cừu, dê, lợn, mèo, báo, người mắc súc vật truyền qua - Các ổ chứa tự nhiên: + Ô chứa thường xuyên: chủ yếu loài gặm nhấm, gồm tất loại chuột, đặc biệt chuột lớn, chủ yếu L.bataviae + Ô chứa không thường xuyên: Chủ yếu GS, thải ngồi qua nước tiểu lúc có lúc khơng + Ơ chứa thiên nhiên: Chủ yếu thú rừng: cầy, cáo, nhím, thải ngồi qua nước tiểu, từ truyền cho GS người - Với GS: Gây bệnh sau: L.icterohemorrhagiae, L.canicola, L.pomona, L.mitis, L.bataviae, - Với người: L icterohemorrhagiae L grippotyphosa - Bệnh gây mang tính nghề nghiệp như: công nhân vệ sinh cống rãnh, công nhân chăn nuôi, bsty, Biểu hiện: Sốt cao, đau cơ, mệt mỏi, mắt đỏ ngàu có có xuất huyết, da vàng, anbumin niệu, viêm màng não - Đường lây: qua chỗ xây sát da niêm mạc, qua da niêm mạc *) Trong phòng thí nghiệm: - ĐVCT: chuột lang( non), thỏ non, chuột bạch, chuột - Tiêm leptospirs vào xoang bụng S.C để gây bệnh Sau 2-3 ngày chuột sốt, nhiệt độ cao 40,5 - 41,50C ngày, vật gày, niêm mạc mắt da có màu vàng, xuất huyết, sau - 12 ngày thân nhiệt hạ, chuột chết - Bệnh tích điển hình: vàng da, niêm mạc, phủ tạng, gan sưng to, lấy nước xoang bụng, máu tim, gan, thận kiểm tra thấy xoắn khuẩn Câu 23: Chẩn đoán Leptospira phản ứng ngưng kết tan với kháng nguyên sống phiến kính ? SV: KHUẤT MINH THANH K58TYA khuatminhthanh@gmail.com Email: 20 HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA THÚ Y Trả lời: a Nguyên lý phản ứng: - Khi trộn huyết GS nghi mắc Leptospirosis với hỗn dịch canh khuẩn Leptospira, huyết có kháng thể Leptosipra ngưng kết chụm lại hình hay hình mạng nhện, hay cụm nhỏ Nếu huyết có nhiều kháng thể Leptospira bắt đầu bị ngưng kết, sau tan thành mảnh nhỏ, nên phản ứng gọi phản ứng ngưng kết tan - Dùng kháng nguyên chủng Leptospira sống, thực phản ứng phiến kính đọc kết KHV có tụ quang đen b Chuẩn bị: - Kháng thể nghi: Lấy máu GS nghi mắc bệnh khoảng 2ml để đơng, chắt lấy huyết thanh, pha lỗng huyết với nước sinh lý thành nồng độ 1/200 ( nên lấy máu từ ngày thứ sau vật ốm) - Kháng nguyên: Là canh khuẩn chủng Leptospira, xoắn khuẩn phải khỏe, hình thái rõ, có từ 150-300 xoắn khuẩn vi trường Thường dùng 12 chủng Leptospira, chủng giữ nuôi cấy riêng môi trường Terskich hay EMJH, kháng nguyên giữ nhiệt độ 200C, sau 7-15 ngày phải cấy chuyển sang môi trường Terskich mới(EMJH mới) sau tháng phải tiếp đời qua chuột lang lần c Tiến hành phản ứng: - Mỗi mẫu huyết dùng phiến kính, phiến kính chia làm ô Tất 12 ô cho 12 chủng tiến hành chẩn đốn nhiều mẫu huyết lúc, mẫu dùng phiến kính, ghi thứ tự phiến kính: 1, 2, góc phiến kính bên phải, góc bên trái phiến kính ghi số mẫu huyết cần chẩn đốn - Nhỏ lên giọt huyết pha loãng, cho vào ô giọt canh khuẩn chủng Leptospira Dùng đũa thủy tinh vô trùng trộn đều, để nhiệt độ phòng thí nghiệm 15-20 ph Đọc kết KHV có tụ quang đen d Kết quả: - Để đánh giá kết người ta dùng kí hiệu: + L tượng tan xoắn khuẩn + L+ ngưng kết yếu, có từ 3-5 cụm ngưng kết, có nhiều xoắn khuẩn tự + L++ ngưng kết yếu, có từ 6-12 cụm ngưng kết, có nhiều xoắn khuẩn tự + L+++ ngưng kết vừa, có 20-30 cụm ngưng kết hình nhện, có xoắn khuẩn tự + L++++ ngưng kết xảy mạnh, có 30 cụm ngưng kết hình nhện, ko có xoắn khuẩn tự - Phản ứng dương tính: Ô có ngưng kết mức L+++ trở lên kháng ngun tạm coi chủng gây bệnh - Phản ứng âm tính: Khơng có ngưng kết, bơi rời rạc - Do đặc điểm Leptospira có kháng nguyên chung dễ gây tượng ngưng kết chéo chủng, chủng Leptospira gây bệnh cho hiệu giá kháng thể cao chủng Leptospira khác - Muốn xác định chủng gây bệnh chắn phải pha loãng huyết cao nũa: 1/400, 1/80 0, 1/1600, 1/3200 làm lại phản ứng ngưng kết với chủng Leptospira vừa ngưng kết + Bò, lợn, chó: hiệu giá từ 1/400 trở lên chủng coi gây bệnh, 1/200 nghi ngờ + Ngựa: hiệu giá từ 1/800 trở lên chủng coi gây bệnh, 1/400 nghi ngờ - Nếu nghi ngờ sau 7-10 ngày lấy máu lần để làm phản ứng Câu 43: Kể tên phương pháp chẩnđoán bệnh: Newcastle, dại, dịch tả lợn, viêm gan vịt, cúm gia câm, Gumboro, Đóng dấu lợn? Chẩn đốn virus học: - Newcaste - Dại - Dịch tả lợn - Viêm gan vịt - Cúm gia cầm - Gumboro Chẩn đoán vi khuẩn học: Đóng dấu lợn Chẩn đốn huyết học: a Newcastle: - Phản ứng ngưng kết HC gà hay phản ứng HA - Phản ứng ngăn trở ngưng kết HC gà hay phản ứng HI b Dại: - Miễn dịch huỳnh quang trực tiếp gián tiếp c Dịch tả lợn: SV: KHUÀT MINH THANH K58TYA khuatminhthanh@gmail.com Email: 21 HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA THÚ Y - Thí nghiệm trung hòa thỏ - Phản ứng kết tủa khuếch tán thạch - Phản ứng ngưng kết gián tiếp HC - Phản ứng miễn dịch huỳnh quang d Viêm gan vịt: - Phản ứng trung hòa - Phản ứng kết hợp bổ thể - Phản ứng AGP - Phản ứng ELISA e Cúm GC: - Phản ứng HA - Phản ứng HI - Phản ứng ELISA - Phản ứng trung hòa - Kĩ thuật IF f Gumboro: - Phản ứng kết tủa khuếch tán thạch AGP - Phản ứng trung hòa virus - Phản ứng miễn dịch đánh dấu ELISA g Đóng dấu lợn: Phản ứng ngưng kết: - Phản ứng ngưng kết nhanh phiến kính - Phản ứng ngưng kết ơng nghiệm - Phản ứng ngưng kết nhanh với máu h PRRS: - Phản ứng ELISA - Phản ứng kháng thể huỳnh quang gián tiếp ( IFA) - Phản ứng PCR phân tích từ máu lấy giai đoạn đầu bệnh để xác định có mặt virus SV: KHUÀT MINH THANH K58TYA khuatminhthanh@gmail.com Email: 22 ... tượng phình vỏ 12 00C/2h bị phá h y + Kháng nguyên B: ngăn không cho ngưng kết O, 10 00C/1h bị phá h y phần Gồm B1, B2, B3, B4, B5 *) Trong 28 typ huyết phổ biến có chủng g y bệnh: O 111 B4, O86B7,... trường, vài ng y sau môi trường trở nên trong, đ y có cặn nh y, lắc khó tan + Mơi trường thạch có huyết huyết cầu tố: Gồm: thạch martin: 10 0ml, huyết cầu tố cừu dê 1/ 10: 1ml, huyết bò, cừu dê:... chữ số Ả rập 1, 2,3,4,5,6 hay chữ Latinh thường e,n,x Kháng nguyên vỏ K: - Kháng nguyên K Salmonella ko phức tạp, có Kn vỏ biết KN Vi có typ S.typhi S.para typhi KN Vi gặp KT Vi g y nên tượng ngưng