Nghiên cứu kỹ thuật phân lập và nuôi trồng nấm da báo tại trường đại học nông lâm thái nguyên

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM - NGUYỄN THỊ TRANG Tên đề tài: NGHIÊN CỨ Kỹ THUẬT PHÂN LẬP VÀ NUÔI TRỒNG NẤM DA BÁO TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÁI NGUYÊN KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Hệ đào tạo : Chính Quy Chuyên ngành : Công nghệ sinh học Khoa : CNSH - CNTP Khóa học : 2011 - 2015 Thái Nguyên – năm 2016 ĐạI HọC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM - NGUYỄN THỊ TRANG Tên đề tài NGHIÊN CỨ Kỹ THUẬT PHÂN LẬP VÀ NUÔI TRỒNG DA BÁO TẠI TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÁI NGUYÊN KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Hệ đào tạo : Chính Quy Chuyên ngành : Công nghệ sinh học Khoa : CNSH - CNTP Khóa học : 2011 - 2015 Giảng viên hƣớng dẫn : ThS Vi Đại Lâm Thái Nguyên – năm 2016 LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành luận văn này, bên cạnh cố gắng nỗ lực thân, em Ďã nhận Ďƣợc Ďộng viên giúp Ďỡ lớn nhiều cá nhân tập thể Em xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới: Các thầy cô Khoa Công nghệ Sinh học – Công nghệ Thực phẩm trƣờng Đại học Nông lâm Thái Nguyên Ďã tận tình giúp Ďỡ, tạo Ďiều kiện tốt cho em hoàn thành khóa luận tốt nghiệp Mặc dù Ďã có nhiều cố gắng Ďể thực Ďề tài cách hoàn chỉnh nhất, xong buổi Ďầu làm quen với công tác nghiên cứu khoa học, tiếp cận với thực tế sản xuất nhƣ hạn chế thời gian làm thí nghiệm kinh nghiệm nên không tránh khỏi thiếu sót Ďịnh mà thân chƣa thấy Ďƣợc Em mong nhận Ďƣợc góp ý quý thầy cô bạn Ďể khóa luận Ďƣợc hoàn thiện Em xin chân thành cảm ơn! Thái Nguyên, ngày tháng năm 2016 Sinh viên Nguyễn Thị Trang LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam Ďoan rằng, số liệu kết nghiên cứu khóa luận trung thực Tôi xin cam Ďoan rằng, giúp Ďỡ cho việc thực khóa luận Ďã Ďƣợc cảm ơn thông tin trích dẫn chuyên Ďề Ďã Ďƣợc ghi rõ nguồn gốc Thái Nguyên, ngày tháng năm 2016 Sinh viên Nguyễn Thị Trang DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 2.1 Nồng Ďộ số dạng muối khoáng cần cho nấm 17 Bảng 4.1: Kết nghiên cứu ảnh hƣởng môi trƣờng nuôi cấy Ďến tốc Ďộ phát triển hệ sợi 29 Bảng 4.2: Ảnh hƣởng giá thể tới việc tạo meo giống 31 Bảng 4.3 Kết nghiên cứu ảnh hƣởng giá thể tới việc tạo thể 33 DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 2.1: Quả thể nấm Da báo 13 Hình 4.1: Thể nấm Da báo thu nhận 26 Hình 4.2: Sợi nấm Da báo sau ngày nuôi cấy 27 Hình 4.3: Sợi nấm Da báo sau lần cấy truyền thứ 20 28 Hình 4.4: Meo nấm mọc dạng nguyên liệu khác 28 Hình 4.5: Thể nấm Da báo sau tháng nuôi cấy 29 Hình 4.6 Sự phát triển sợi nấm Da báo môi trƣờng nuôi cấy khác sau 120h: 31 Hình 4.7: Sự phát triển nấm giá thể thóc 32 Hình 4.8: Meo nấm với lớp che ánh sáng 32 Hình 4.9: Quả thể nấm Da báo 34 MỤC LỤC Phần MỞ ĐẦU 1 Đặt vấn Ďề 1.3 Mục tiêu 1.4 Ý nghĩa khoa học ý nghĩa thực tiễn Ďề tài 1.4.1 Ý nghĩa khoa học 1.4.2 Ý nghĩa thực tiễn Phần TỔNG QUAN NGHIÊN CỨU 2.1 Cơ sở khoa học Ďề tài 2.1.1 Giới thiệu chung 2.1.2 Một vài Ďặc Ďiểm nấm hoang dại 2.1.3 Nấm Da báo 2.2 Các giai Ďoan phát triển nấm 10 Bảng 2.1 Nồng Ďộ số dạng muối khoáng cần cho nấm 12 2.3 Tình hình nghiên cứu nƣớc 13 2.3.1 Tình hình nghiên cứu giới 13 2.3.2 Tình hình nghiên cứu nƣớc 14 Phần ĐỐI TƢỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 15 3.1 Đối tƣợng phạm vi nghiên cứu 15 3.2 Địa Ďiểm thời gian nghiên cứu 15 3.3 Hóa chất thiết bị nghiên cứu 15 3.4 Nội dung nghiên cứu 16 3.5 Phƣơng pháp nghiên cứu 16 3.5.1 Phƣơng pháp thu nhận xử lý mẫu 16 3.5.2 Phƣơng pháp phân lập 16 3.5.3 Phƣơng pháp lựa chọn môi trƣờng phân lập tối ƣu 17 3.5.4 Phƣơng pháp làm meo nấm 19 3.5.5 Phƣơng pháp làm giá thể tạo thể 21 3.5.6 Phƣơng pháp bảo quản meo giống 22 Phần KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 23 4.1 Phân lập nấm Da báo phƣơng pháp nuôi cấy mảnh mô 23 4.1.1 Kết thu nhận xử lý mẫu 23 4.1.2 Kết phân lập mảnh mô 24 4.1.3 Meo nấm 25 4.1.4 Kết trình tạo thể 27 4.2 Nghiên cứu môi trƣờng tối ƣu 28 4.2.1 Kết lựa chọn môi trƣờng phân lập tối ƣu 28 4.2.2 Kết lựa chọn môi trƣờng làm meo giống tối ƣu 31 4.2.3 Kết làm meo giống với lớp che ánh sáng 32 4.2.4 Kết nghiên cứu ảnh hƣởng giá thể tới việc tạo thể nấm 33 PHẦN KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 35 5.1 Kết luận 35 5.2 Kiến nghị 35 TÀI LIệU THAM KHảO 36 Phần MỞ ĐẦU Đặt vấn đề Nấm sản phẩm có nhiều tiềm mặt dƣợc liệu, thực phẩm ứng dụng liên quan Ďến môi trƣờng sinh thái Nấm có nhiều chất dinh dƣỡng, thơm ngon Ďƣợc ví nhƣ loại rau thịt tốt cho sức khỏe với thành phần giàu vitamin protein, nhiều chất xơ chứa lƣợng chất béo thấp, thích hợp với ngƣời có chế Ďộ ăn kiêng chống béo phì Các nấm dƣợc liệu Ďƣợc cho Ďặc Ďiểm quan trọng có ý nghĩa việc Ďiều trị bệnh gan, huyết áp, chống lão hóa Nhiều loại nấm ví dụ nhƣ nấm Hƣơng, nấm Thƣợng hoàng, nấm Linh chi…Ďƣợc nhắc Ďến nhiều việc tìm hƣớng Ďiều trị cho bệnh hiểm nghèo nhƣ HIV, ung thƣ [11] Hệ sợi nấm sản xuất nhiều loại enzyme ngoại bào mà phân hủy sử dụng chất thải có chất lignocellulose làm giảm mức Ďộ ô nhiễm môi trƣờng hệ sợi nấm Ďƣợc cho Ďóng vai trò Ďáng kể việc phục hồi lại khu vực bị ô nhiễm Trên giới nhiều nƣớc Ďã phát triển nhiều loại nấm ăn, nhƣ nấm sò, nấm mỡ nhƣ Ďối tƣợng canh tác có giá trị dinh dƣỡng cao Những lọai nấm Ďƣợc nuôi trồng phổ biến thƣờng xuyên thƣờng dễ trồng, tận dụng nguồn nguyên liệu có sẵn nhƣ rơm rạ, bã mía, mùn cƣa Điều kiện nuôi trồng không phức tạp thiết bị Ďể trì Ďiều kiện tối ƣu dễ tìm kiếm, Ďơn giản có giá thành thấp Ở Việt Nam sản phẩm từ nấm Ďƣợc ƣa chuộng, nhiều loại nấm có giá thành cao nhƣ Đông trùng hạ thảo, nấm Lim xanh, nấm Hƣơng Số lƣợng loại nấm ăn phổ biến nhƣ nấm Sò hay nấm Rơm chƣa Ďủ Ďể Ďáp ứng nhu cầu ngƣời dân Vì lĩnh vực nuôi trồng sản xuất nấm có nhiều hứa hẹn cần Ďƣợc Ďẩy mạnh nghiên cứu phát triển, vừa cải tiến giống nấm sẵn có, Ďồng thời thúc Ďẩy việc phân lập giống nấm hoang dại có giá trị Nhiều loại nấm hoang dại Ďƣợc ngƣời dân sử dụng làm thực phẩm ngon nhƣng Ďang dần Ďi, ví dụ nhƣ nấm Da báo số loại nấm khác… Nấm Da báo loại nấm dễ tìm, bắt gặp nhiều tỉnh miền núi phía Bắc nhƣ Tuyên Quang, Thái Nguyên, Lạng Sơn, nhƣng ngày khan Ďiều kiện thời tiết thất thƣờng tình trạng thu hái cách tự phát Theo ngƣời dân, nấm Da báo có vị ngọt, ngon, số lƣợng thƣờng sử dụng theo kinh nghiệm Điều dẫn tới nghi vấn tác Ďộng nấm tới thể ngƣời mà mắt thƣờng không quan sát Ďƣợc Ďồng thời cho thấy tiềm phát triển loại giống nấm ăn cho thị trƣờng ẩm thực hƣớng nghiên cứu dƣợc liệu Mặc dù giới có nhiều gợi ý vai trò thực phẩm khả ngăn cản phát triển khối u nấm Da báo nhƣng Việt Nam thông tin khoa học chi tiết loại nấm Năm 2015 Nấm Da báo Ďã Ďƣợc nhóm nghiên cứu gồm ThS Vi Đại Lâm, Kỹ sƣ Đinh Văn Thiện sinh viên Nguyễn Thị Trang trƣờng Đại học Nông Lâm Thái Nguyên phân lập thành công giai Ďoạn Ďầu Tuy nhiên trình phân lập giống nấm chƣa ổn Ďịnh, loại môi trƣờng Ďiều kiện thích hợp cho nấm phát triển hạn chế Xuất phát từ nhu cầu thực tiễn ngƣời dân, nhằm bảo tồn tìm kiếm tiềm ứng dụng nấm Da báo, Ďồng thời xây dựng, cải tiến quy trình phân lập giống nấm có ý nghĩa mặt khoa học ứng dụng, tiến hành thực Ďề tài nghiên cứu “Nghiên cứu kỹ thuật phân lập nuôi trồng nấm da báo trương Đại học Nông Lâm Thái Nguyên” 1.2 Mục đích đề tài - Xây dựng tối ƣu hóa quy trình phân lập nuôi trồng nấm da báo 24 4.1.2 Kết phân lập mảnh mô Mảnh mô nấm sau cắt dao lam Ďƣợc nuôi môi trƣờng khoai tây, Ďiều kiện nhiệt Ďộ khoảng 30-32°C, ánh sáng Ở ngày thứ rìa mảnh mô xuất sợi nấm nhỏ, trắng, dài khoảng mm Sau ngày nuôi cấy, sợi nấm từ rìa mảnh mô phát triển rộng, Ďều xung quanh mảnh mô Sau khoảng tới 10 ngày nuôi cấy, sợi nấm bao phủ kín bề mặt Ďĩa thạch (Hình 4.2 ) Hình 4.2: Hệ sợi nấm Da báo sau ngày nuôi cấy Trong trình phân lập Ďầu tiên, tỉ lệ nhiễm vi khuẩn, nấm mốc cao Điều Ďƣợc giải thích yếu tố khách quan nhƣ Ďiều kiện không khí nóng ẩm, khả kiểm soát Ďiều kiện vật lý nhƣ nhiệt Ďộ, Ďộ ẩm, ánh sang chƣa Ďƣợc chặt chẽ Bên cạnh Ďó, Ďiều kiện thời tiết giai Ďoạn làm thí nghiệm có Ďộ ẩm cao, Ďiều tạo Ďiều kiện cho vi sinh vật phát triển, tăng nguy nhiễm vào trình phân lập 25 Sau thu nhận mẫu, thể nấm thƣờng Ďƣợc xử lý cồn 700 trƣớc phân lập Ďể giảm thiểu rủi ro nhiễm từ vi sinh vật bám bề mặt thể Tuy nhiên bề mặt nấm thƣờng có nhiều khe rãnh, phiến nấm thƣờng khó tiếp xúc với dung dịch cồn, tiềm ẩn rủi ro nhiễm Thao tác kỹ ngƣời tiến hành thí nghiệm có tác Ďộng Ďịnh tới kết phân lập Giống nấm Da báo phân lập Ďƣợc sau cấy truyển nhiều lần có biến Ďổi hình thái Sau nhiều ngày nuôi cấy không thấy xuất màu nấm mốc vàng, mốc xanh chứng tỏ sợi giống nấm Da báo không bị nhiễm nấm mốc nhƣng sợi nấm trở nên mảnh bông, cấy meo nấm cho khả phát triển kém, không tạo Ďƣợc thể Điều gợi ý khả giống cấy truyền nhiều lần bị thoái hóa biến Ďổi, quy trình giữ giống gốc cần Ďƣợc tối ƣu hóa Ďề tài nghiên cứu tƣơng lai (Hình 4.3) Hình 4.3: Hệ sợi nấm Da báo sau lần cấy truyền thứ 20 4.1.3 Meo nấm Nhƣ Ďã biết, meo nấm giống nấm Ďƣợc cấy giá thể giàu dinh dƣỡng nhƣ hạt ngũ cốc, mùn cƣa trộn chất dinh dƣỡng, có vai trò trung 26 gian truyền sợi nấm giống cung cấp chất dinh dƣỡng cho sợi nấm phát triển giai Ďoạn Ďầu tiên Thóc nguyên liệu phổ biến cho giai Ďoạn làm meo giống có Ďầy Ďủ chất dinh dƣỡng, có lớp vỏ cứng không bị nát nhiệt Ďộ cao dễ kiếm Quá trình chuẩn bị thóc Ďơn giản dễ dàng tách rời, meo thóc dễ cấy vào cổ nút kích thƣớc nhỏ, nhờ làm tăng tốc Ďộ cấy giống, giảm rủi ro nhiễm Hình 4.4: Meo nấm mọc dạng nguyên liệu khác A: Cám gạo B: Thóc Hình ảnh cho thấy phát triển hệ sợi nấm Ďều nhanh Meo nấm không bị nhiễm loại nấm khác, vi sinh vật…Meo nấm có màu Ďồng nhất, sợi phát triển Ďều, meo nấm vết loang lổ, mùi thơm Ďặc trƣng, mùi chua Tuy nhiên, vào thời Ďiểm nắng nóng năm (tháng tới tháng 8), meo nấm làm thóc hay bị ƣớt nát Nguyên nhân nƣớc từ hạt thóc thoát không khí túi nilong ngƣng tụ thành giọt, rơi trở lại thóc, Ďiều làm cho Ďộ ẩm thóc không Ďều Bên cạnh Ďó, vi sinh vật nhƣ vi khuẩn, nấm mốc, nhiễm vào túi meo thóc làm 27 hỏng nát hạt thóc Vấn Ďề Ďƣợc xử lý cách khử trùng nồi hấp bổ xung bột CaCO3 theo tỉ lệ 1- 1,5% , việc sử dụng CaCO3 có tác dụng cân Ďộ ẩm, giẩm Ďộ chua 4.1.4 Kết trình tạo thể Tùy vào loại nấm mà chúng có thời gian tạo thể khác nhƣ nấm sò thời gian tạo thể ngắn khoảng 35-40 ngày Còn nấm Da báo , thời gian thể chƣa Ďƣợc xác Ďịnh rõ Trong nghiên cứu này, bịch nấm Da báo Ďƣợc ƣơm sợi bóng râm có anh sáng yếu, nhiệt Ďộ từ 28-330C Nấm cho thể sau tháng nuôi cấy Thể non có lớp vảy trắng bao phủ bề mặt, trƣởng thành thể mở rộng, kích thƣớc thể Ďồng Ďều với Ďƣờng kính từ 15-20 cm Hình 4.5: Thể nấm Da báo sau tháng nuôi cấy Để tránh nấm bị chết Ďộ ẩm cao thấp, trình tƣới nấm giai Ďoạn Ďƣợc khuyến khích sử dụng hệ thống phun sƣơng, ƣơm sợi phun tƣới tƣờng phòng nuôi, không phun trực tiếp vào bịch Một số trƣờng hợp hay gặp thể có nhiều vết Ďen, loang lổ, bịch 28 phôi nấm mềm, bóp dễ vỡ Điều bên bịch có Ďộ ẩm lớn, hầu hết sai sót trình chăm sóc Phần Ďa số bịch nấm giai Ďoạn Ďầu không mọc Nguyên nhân giá thể bị nhiễm nấm mốc, vi sinh vật Các sợi nấm phát triển chậm, thời gian nấm ăn kín bịch lâu nấm bị khô, thiếu nƣớc Ďộ ẩm Những nguyên liệu chƣa Ďƣợc ủ kỹ cho hệ sợi phát triển tốt nhờ nguồn tinh bột cung cấp Ďóng bịch nhƣng nấm không sử dụng Ďƣợc cellulose tƣơi nên không cho thể 4.2 Nghiên cứu môi trƣờng tối ƣu 4.2.1 Kết lựa chọn môi trường phân lập tối ưu Môi trƣờng phân lập tối ƣu có vai trò quan trọng việc thu nhận khai thác giống nấm gốc Môi trƣờng tối ƣu việc thích hợp cho nấm phát triển cần thích hợp với Ďiều kiện thí nghiệm nguyên liệu pha chế môi trƣờng cần chứa Ďầy Ďủ hàm lƣợng dinh dƣỡng dễ thu nhận, giá thành không tốn Các loại môi trƣờng khác Ďƣợc Ďánh giá nghiên cứu Ďƣợc trình bày nhƣ bảng 4.1: Bảng 4.1: Kết nghiên cứu ảnh hƣởng môi trƣờng nuôi cấy đến tốc độ phát triển hệ sợi sau 120 nuôi cấy PDA Môi trƣờng (khoai tây) CDA (Ngô) Môi CWA trƣờng (Nƣớc gạo dừa ) 65.02 74.45 BDA (Giá Ďỗ) Kích thƣớc đƣờng kính trung bình (mm) 65.40 60.35 70.65 29 CT (công thức) Đƣờng kính TB NL (Nhắc lại) khuẩn lạc 1 64.2 65.4 66.6 60.1 2 65.65 55.3 64.3 64.66 3 66.1 73.4 76.45 73.5 69.4 70.05 72.5 CV% 1.52 LSD05 4.8 Ảnh hưởng môi trườngnuôi cấy đến tốc độ phát triển hệ sợi Kết cho thấy tốc Ďộ phát triển sợi nấm Da báo tốt môi trƣờng nƣớc dừa Tốc Ďộ phát triển hệ sợi nhanh Ďồng nghĩa với trình chuẩn bị giống cho kịp thời vụ tiến hành nhanh hơn, Ďáp ứng Ďƣợc nhu cầu ngƣời tiêu dùng nhanh chu kỳ quay vòng nấm nhanh Vì môi trƣờng nƣớc dừa Ďƣợc chọn môi trƣờng thạch tốt cho 30 trình phân lập Môi trƣờng Ďƣợc sử dụng cho trình khởi Ďộng giống trình nhân nhanh quy trình sản xuất sau Hình 4.6 Sự phát triển hệ sợi Da báo môi trường nuôi cấy khác sau 120h: (A): Môi trường dịch chiết khoai tây (PDA) (B): Môi trường dịch chiết giá đỗ (BDA) (C): Môi trường nước dừa (CWA) (D): Môi trường dịch chiết ngô (CDA) 31 4.2.2 Kết lựa chọn môi trường làm meo giống tối ưu Môi trƣờng meo Ďƣợc sử dụng nhƣ yếu tốt trung chuyển sợi nấm từ giống phòng thí nghiệm sang chất sản xuất tạo thể quả, Ďồng thời nhằm làm tăng số lƣợng tơ nấm cho tơ nấm dần thích nghi với Ďiều kiện môi trƣờng Trong nghiên cứu có loại chất Ďƣợc thử nghiệm Ďánh giá (Bảng 4.2) Bảng 4.2: Ảnh hƣởng giá thể tới việc tạo meo giống Ngày Cơ chất 15 20 25 Thóc Mọc + + + Trấu Mọc - - - Mùn cƣa keo Mọc - - - Cành khô nhỏ Mọc - - - Cám gạo Mọc - - - Ghi chú: (+) Mọc tốt (-) không mọc nhiễm Từ bảng 4.2 cho thấy phát triển hệ sợi nấm chịu ảnh hƣởng lớn từ nguồn chất khác Nguyên liệu làm meo nấm tốt Ďƣợc Ďánh giá thời Ďiểm thóc (hình 4.7) Trƣớc khử trùng thóc Ďƣợc ngâm qua Ďêm Ďể tăng Ďộ ẩm, hạt thóc không xếp kín trình khử trùng Ďƣợc cho hiệu Nguồn chất cám gạo, cành cây, mùn cƣa, trấu cho kết ban Ďầu tốt, nhiên Ďây loại chất có kết bị nhiễm cao Điều cho thấy tầm quan trọng kỹ thuật khử trùng Những nguồn chất thƣờng chứa nhiều yếu tố gây nhiễm nhƣ bào tử hay sợi nấm mốc bám sẵn bề mặt, chí ăn sâu vào chất Phƣơng pháp khử trùng thông thƣờng tốt chất có Ďủ Ďộ ẩm, áp suất at, nƣớc tạo nhiệt Ďộ 1210C, tiêu diệt tất 32 tác nhân gây nhiễm Tuy nhiên khối lƣợng chất lớn, dày Ďặc, khả thẩm thấu nƣớc nhiệt Ďộ có hạn Do Ďể khử trùng tốt cần gia tăng thời gian cải tiến quy trình khử trùng chất Điều không Ďƣợc khuyến khích gây tốn cần thời gian lâu dài Hình 4.7: Sự phát triển nấm giá thể thóc 4.2.3 Kết làm meo giống với lớp che ánh sáng Meo nấm thƣờng Ďƣợc nuôi Ďiều kiện không ánh sáng tối ánh sáng làm tổn hại sợi nấm làm nấm thể không Ďúng kế hoạch dự trù Việc trang bị thêm cho meo giống lớp giấy che ánh sáng phần giúp cho sợi nấm phát triển an toàn Trong trình nghiên cứu, lớp giấy Ďƣợc tráng thêm lớp môi trƣờng dinh dƣỡng, sợi nấm phát triển kín lớp giấy bổ sung thóc chất khác Nhƣ nấm tiếp xúc phát triển ăn sâu vào chất từ nhiều phía, rút ngắn Ďƣợc thời gian chuẩn bị meo Ďồng thời giúp nấm phát triển lấn át loại vi khuẩn xâm nhiễm Tỉ lệ chai thóc giống bị nhiễm bổ xung lớp giấy che ánh sáng 12/50, tƣơng 33 ứng 24% Trong lớp giấy che sáng tỉ lệ meo thóc bị hỏng 26/50, tƣơng ứng 52% tổng số chai giống tiến hành thí nghiệm Điều gợi ý phƣơng pháp làm meo giống mới, nhiên việc chuẩn bị lớp chắn sáng có phủ lớp dinh dƣỡng thời gian tƣơng lai cần nghiên cứu cải tiến Ďể thuận tiện cho việc ứng dụng vào thực tiễn sản xuất Hình 4.8: Meo nấm với lớp che ánh sáng 4.2.4 Kết nghiên cứu ảnh hưởng giá thể tới việc tạo thể nấm Nấm Da báo Ďƣợc trồng thử nghiệm với loại nguyên liệu sẵn có trƣờng ĐH Nông Lâm Thái Nguyên với mục Ďích tìm nguồn nguyên liệu rẻ với số lƣợng lớn, nhằm xây dựng quy trình nuôi cấy thực tiễn phù hợp với Ďối tƣơng sinh viên mà mở rộng hộ nông dân sau Có loại nguyên liệu Ďƣợc lựa chọn nhƣ bảng 4.3 34 Bảng 4.3 Kết nghiên cứu ảnh hƣởng giá thể tới việc tạo thể Đƣờng kính STT Thời gian thể Mùn cƣa gỗ tạp+ tinh bột cám gạo, nƣớc cháo(25%) tháng thể 15 -20 mm Không thể Trấu Nhiễm Cành nhỏ Sự tạo thành thể cho thấy việc cung cấp Ďiều kiện tối ƣu chất dinh dƣỡng vào giá thể quan trọng Trong công thức Ďánh giá chất công thức mùn cƣa gỗ tạp (các loại mùn cƣa trộn lẫn xƣởng cƣa) + tinh bột (25%) Ďạt kết tốt nhất, thời gian ngắn Ďể tạo thể Còn công thức trấu cho thấy phát triển hệ sợi, không cho thấy thể Ďƣợc tạo thành Cơ chất cành nhỏ bị nhiễm 100% mốc xanh, không cho thể Hình 4.9: Quả thể nấm Da báo 35 PHẦN KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 5.1 Kết luận - Đã phân lập thành công giống nấm Da báo - Đã lựa chọn Ďƣợc môi trƣờng phân lập tối ƣu môi trƣờng thạch dừa - Giá thể Ďể làm meo giống mùn cƣa gỗ tạp (không chứa chất Ďộc, tinh dầu) bổ xung 50% tinh bột - Giá thể tạo thể mùn cƣa gỗ tạp + 50% cơm cho thấy việc tạo thể tốt nguồn nguyên liệu nghiên cứu 5.2 Kiến nghị Tiếp tục nghiên cứu kỹ thuật nuôi trồng nấm Da báo số nguyên liệu nhƣ bã mía, xơ dừa, thân ngô…Ďể tạo thêm Ďa dạng nguồn nguyên liệu nuôi trồng cho ngƣời dân Tiếp tục nghiên cứu trình tạo thể nấm Da báo nguồn nguyên liệu khác 36 TÀI LIệU THAM KHảO Afrida S1, Tamai Y, Watanabe T, Osaki M (2014 ) Biobleaching of Acacia kraft pulp with extracellular enzymes secreted by Irpex lacteus KB-1.1 and Lentinus tigrinus LP-7 using low-cost media , World J Microbiol Biotechnol., 30(8):2263-71 Dulay RM (2014), Proximate composition and functionality of the culinarymedicinal tiger sawgill mushroom, Lentinus tigrinus (higher Basidiomycetes), from the Philippines, Int J Med Mushrooms,16(1):85-94 Hoàng Thanh Tú, Trịnh Tam Kiệt (2009) Nghiên cứu đặc điểm sinh học nấm phễu da báo LENTINUS TIGRTNUS(BULL.) FR, Di truyền học ứng dụng – Chuyên san Công nghệ sinh học, số Kent H McKnight ( 1987), Peterson field guides-Mushroom, Library of Congress cataloging in publication data Nor Adila Mhd Omar (2011), Nutritional Composition, Antioxidant Activities, and Antiulcer Potential of Lentinus squarrosulus (Mont.) Mycelia Extract, Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine, Article ID 539356, pages Rich Milton R Dulay cộng (2012), Optimization of Culture Conditions for Mycelial Growth and Basidiocarp Production of Lentinus tigrinus (Bull.) Fr., A New Record of Domesticated Wild Edible Mushroom in the Philippines, PHILIPP AGRIC SCIENTIST, Vol 95 No 3, 278–285 Sapan Kumar Sharma cộng (2015), The genus Lentinus (Basidiomycetes) from India - an annotated checklist, Journal of Threatened Taxa, 7(11): 7843–7848 37 Stella T1, Covino S, Křesinová Z, D'Annibale A, Petruccioli M, Čvančarová M, Cajthaml T (2013) Chlorobenzoic acid degradation by Lentinus (Panus) tigrinus: in vivo and in vitro mechanistic studyevidence for P-450 involvement in the transformation, J Hazard Mater 2013 Sep 15;260:975-83 Subhadip Mahapatra (2013), Fungal Exopolysaccharide: Production, Composition and Applications, Microbiol Insights 10 Th.S Nguyên Minh Khang (2010), Công nghệ nuôi trồng nấm, Nhà xuất Nông nghiệp 11 Xu L1, Wang H, Ng T (2012) A laccase with HIV-1 reverse transcriptase inhibitory activity from the broth of mycelial culture of the mushroom Lentinus tigrinus J Biomed Biotechnol BALANCED ANOVA FOR VARIATE ÐKTRCKL FILE TRANG4 11/ 5/17 15: :PAGE VARIATE V003 ÐKTRCKL LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 358.130 89.5324 12.85 0.001 * RESIDUAL 10 69.6994 6.96994 * TOTAL (CORRECTED) 14 427.829 30.5592 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TRANG4 11/ 5/17 15: :PAGE MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 ÐKTRCKL 65.4000 60.3500 65.0200 74.4500 70.6500 SE(N= 3) 1.52424 5%LSD 10DF 4.80294 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TRANG4 11/ 5/17 15: :PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE ÐKTRCKL GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 67.174 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 5.5280 2.6401 3.9 0.0007 | | | | .. .ĐạI HọC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM - NGUYỄN THỊ TRANG Tên đề tài NGHIÊN CỨ Kỹ THUẬT PHÂN LẬP VÀ NUÔI TRỒNG DA BÁO TẠI TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÁI NGUYÊN KHÓA... tiến quy trình phân lập giống nấm có ý nghĩa mặt khoa học ứng dụng, tiến hành thực Ďề tài nghiên cứu Nghiên cứu kỹ thuật phân lập nuôi trồng nấm da báo trương Đại học Nông Lâm Thái Nguyên 1.2... học chi tiết loại nấm Năm 2015 Nấm Da báo Ďã Ďƣợc nhóm nghiên cứu gồm ThS Vi Đại Lâm, Kỹ sƣ Đinh Văn Thiện sinh viên Nguyễn Thị Trang trƣờng Đại học Nông Lâm Thái Nguyên phân lập thành công giai