1. Đặt vấn Ďề
4.1.2. Kết quả phân lập mảnh mô
Mảnh mô nấm sau khi cắt bằng dao lam Ďƣợc nuôi trên môi trƣờng khoai tây, Ďiều kiện nhiệt Ďộ khoảng 30-32°C, ít ánh sáng. Ở ngày thứ 3 tại rìa các mảnh mô xuất hiện các sợi nấm nhỏ, trắng, dài khoảng 1 mm. Sau 5 ngày nuôi cấy, sợi nấm từ rìa mảnh mô phát triển rộng, Ďều ra xung quanh của mảnh mô. Sau khoảng 9 tới 10 ngày nuôi cấy, sợi nấm bao phủ kín bề mặt Ďĩa thạch (Hình 4.2 ).
Hình 4.2: Hệ sợi nấm Da báo sau 9 ngày nuôi cấy
Trong quá trình phân lập Ďầu tiên, tỉ lệ nhiễm vi khuẩn, nấm mốc cao. Điều này có thể Ďƣợc giải thích bởi những yếu tố khách quan nhƣ Ďiều kiện không khí nóng ẩm, khả năng kiểm soát các Ďiều kiện vật lý nhƣ nhiệt Ďộ, Ďộ ẩm, ánh sang vẫn chƣa Ďƣợc chặt chẽ. Bên cạnh Ďó, Ďiều kiện thời tiết trong giai Ďoạn làm thí nghiệm có Ďộ ẩm cao, Ďiều này tạo Ďiều kiện cho các vi sinh vật phát triển, tăng nguy cơ nhiễm vào quá trình phân lập.
Sau khi thu nhận mẫu, thể quả nấm thƣờng Ďƣợc xử lý bằng cồn 700 trƣớc khi phân lập Ďể giảm thiểu rủi ro nhiễm từ các vi sinh vật bám trên bề mặt thể quả. Tuy nhiên bề mặt nấm thƣờng có nhiều khe rãnh, giữa các phiến nấm thƣờng khó tiếp xúc với dung dịch cồn, vì vậy vẫn tiềm ẩn các rủi ro nhiễm. Thao tác và các kỹ năng của ngƣời tiến hành thí nghiệm cũng có những tác Ďộng nhất Ďịnh tới kết quả phân lập.
Giống nấm Da báo phân lập Ďƣợc sau khi cấy truyển nhiều lần có những biến Ďổi về hình thái. Sau nhiều ngày nuôi cấy không thấy xuất hiện màu của nấm mốc vàng, mốc xanh chứng tỏ sợi giống nấm Da báo không bị nhiễm nấm mốc. nhƣng sợi nấm trở nên mảnh và bông, khi cấy trên meo nấm cho khả năng phát triển kém, không tạo Ďƣợc thể quả. Điều này gợi ý về khả năng giống cấy truyền nhiều lần sẽ bị thoái hóa hoặc biến Ďổi, vì vậy quy trình giữ giống gốc cũng cần Ďƣợc tối ƣu hóa trong những Ďề tài nghiên cứu trong tƣơng lai (Hình 4.3).
Hình 4.3: Hệ sợi nấm Da báo sau lần cấy truyền thứ 20