Tổng hợp và thử tác dụng kháng tế bào ung thư của 5 arylidenthiazolidin 2,4 dion mang nhóm thế propargyl 3,4,5 trimethoxybenzyl ở vị trí số 3

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI NG T NG HỢ H NG T N TH TR NG À TH À T C D NG NG THƯ C 5-ARYLIDENTHIAZOLIDIN-2,4-DI N NG NH TH R RG 3,4,5-TRIMETHOXYBENZYL TR ẬN ĂN THẠC Ĩ DƯỢC HỌC HÀ NỘI 2017 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI NG T NG HỢ H NG T 5- R N TH TR NG À TH À T C D NG NG THƯ C IDENTHI NG NH IDIN-2 4-DI N TH R RG 3,4,5-TRIMETHOXYBENZYL TR CHUY N NGÀNH C NG NGH D C PH M VÀ BÀO CHẾ THU C MÃ S : 60720402 Ng ih ng n kho h : G T HÀ NỘI 2017 N Hả N ỜI CẢ Trong trình h đỡ quý báu ủ N tập, nghiên ứu, nhận đ ợ nhiều giúp thầy ô giáo, nhà kho h ùng đồng nghiệp, gi đình, bạn bè L i đầu tiên, xin gửi l i ảm ơn hân thành biết ơn sâu sắ đến G T N Hả N , ng i thầy trự tiếp h ng n, hỉ bảo tạo m i điều kiện tốt giúp đỡ tơi suốt q trình nghiên ứu Đồng th i, ũng xin gửi l i ảm ơn t i T N hạ Thế Hả – b môn H ế – b môn D ợ Lự ng D ợ ,T i thầy tận tình hỉ bảo, h Đ ng n, giúp đỡ tơi hồn thành luận văn Tôi ũng xin gửi l i ảm ơn đến thầy ô giáo viên B h môn H D ợ - tr ng Đại h nh hị kỹ thuật D ợ Hà N i, kho D ợ - Đại Quố gi Chungbuk - Hàn Quố giúp đỡ, tạo điều kiện thuận lợi ho tơi thự luận văn Trong q trình thự luận văn, ũng nhận đ ợ nhiều giúp đỡ, tình ảm q báu ủ mơn H Hoà D ợ , đặ ă biệt â , Đoà hD bạn, em nh m tổng hợp b nh Lê Công Huân, em N , ng ă H â , i hi sẻ buồn vui, đồng hành tơi suốt q trình th i gi n nghiên ứu Cuối ùng, xin đ ợ gửi l i ảm ơn sâu sắ đến bố m , gi đình, bạn bè, đồng nghiệp đ ng viên, khí h lệ tơi suốt q trình h ứu tập, nghiên C ỜI CẢ C C N C D NH C C C CH C C DANH C C C ẢNG D NH C C C H NH D NH CC C HI I TT T Đ Đ T ẤN Đ CHƯ NG I: T NG Tá N ụng sinh h ủ -benzyli enthi zoli in- , - ion n hất Tá ụng kháng tế bào ung th Tá ụng hống đái tháo đ Tá ụng kháng khu n, kháng nấm 18 Tá ụng sinh h ủ ng 10 ombret st tin Ph ơng pháp tổng hợp n hất 20 n hất ủ thi zoli in-2,4-dion 22 1.3.1 Phản ứng ng ng tụ aldol 23 1.3.2 Phản ứng nhân 24 CHƯ NG II NG HƯ NG H ÊN ẬT I NGHIÊN C THI T NỘI D NG À 27 2.1 NGUYÊN V T LI U, THIẾT B 27 H hất 27 2.1.2 Thiết bị, ụng ụ 28 NỘI DUNG NGHI N CỨU 28 Tổng hợp h h 28 Thử hoạt tính sinh h PH 29 NG PHÁP NGHI N CỨU 30 Tổng hợp h h , thử tinh khiết kh ng định ấu trú 30 Thử hoạt tính gây đ tính tế bào 31 2.3.3 Docking 35 CHƯ NG III: 3.1 H T Ả NGHIÊN C 36 H C 36 Tổng hợp h h 37 Ki m tr đ tinh khiết 50 Kh ng định ấu trú 51 KẾT QUẢ TH HOẠT T NH SINH H C 62 3.3 DOCKING 64 CHƯ NG I ÀN ẬN 65 4.1 T NG H P H H C 65 Phản ứng ng ng tụ giữ thi zoli in- , - ion l ehy tổng hợp n hất 2a-2j 65 Phản ứng nhân: tổng hợp hất 3a-3e, 4a-4j 66 KH NG Đ NH CẤU TR C 68 Phổ hồng ngoại 68 4.2 Phổ khối l ợng 70 Phổ ng h ng t hạt nhân 71 HOẠT T NH SINH H C 78 Hoạt tính sinh h ãy 78 Hoạt tính sinh h ãy 80 4.4 DOCKING 82 T ẬN À I N NGH 85 KẾT LU N 85 KIẾN NGH 85 TÀI I H TH HẢ 86 C 92 D NH 13 C-NMR H-NMR C C C CH C C Phổ ng h ng t hạt nhân Magnetic Resonance) HI I TT T rbon ( C-Nuclear Phổ ng h ng t hạt nhân proton (1H-Nuclear Magnetic Resonance) AcOH Acid acetic ADR Adriamycin AsPC-1 Tế bào ung th tụy ng CA-4 Combretastatin A4 CA-4DP Combretastatin A4 dinatri phosphat Cd1 Cyclin D1 Cd2 Cyclin D2 CDK4 Cy lin phụ thu kin se CDK2 Cy lin phụ thu kin se CTPT Công thứ phân tử DCM Dicloromethan DMF N,N-dimethylformamid DMSO-d6 Dimethyl sulfoxid deutri hóa FBS Huyết th nh bào th i bò (Fet l Bovine Serum) GURAV Tế bào ung th miệng EtOH Ethanol M-32 i Tế bào u nguyên bào thần kinh IR Phổ hồng ngoại (Infr re spe trometry) IC50 Nồng đ ứ J Hằng số t ơng tá (Hz) HOP62 Tế bào ung th phổi K562 Tế bào ung th bạ h ầu hế 0% KB Tế bào ung th vòm h ng KLPT Khối l ợng phân tử MCF-7 Tế bào ung th vú MS Phổ khối l ợng (M ss spe trometry) NCI-H23 Tế bào ung th phổi ng PC-3 Tế bào ung th tiền liệt tuyến ng PP Rγ Peroxisom proliferator gamma PTP1B Protein tyrosin phosphatase 1B SAHA Acid suberoylanilid SW620 Tế bào ung th đại tràng ng TLC Sắ ký l p mỏng (Thin L yer Chrom togr phy) Tnc Nhiệt đ n ng hảy U937 Tế bào ung th bạ h ầu i i i D NH T TT C C C ẢNG ả Trang Bảng Chỉ số lý h hiệu suất tổng hợp ủ hất 2a-e 39 Bảng Chỉ số lý h hiệu suất tổng hợp ủ hất Bảng Chỉ số lý h hiệu suất tổng hợp ủ hất 2f-j Bảng Chỉ số lý h hiệu suất tổng hợp ủ hất 4a-j 50 Bảng Giá trị Rf nhiệt đ n ng hảy (tn ) ủ -e 42 n 45 51 hất tổng hợp đ ợ Bảng Kết phân tí h phổ IR ủ n hất tổng hợp 53,54 đ ợ Bảng Kết phân tí h phổ MS ủ n hất tổng hợp 55 đ ợ Bảng Kết phân tí h phổ 1H-NMR ủ n hất tổng 56-59 hợp đ ợ Bảng Kết phân tí h phổ 13C-NMR ủ n hất 59-63 tổng hợp đ ợ 10 Bảng Kết thử hoạt tính gây đ tế bào ủ ãy 63 11 Bảng Kết thử hoạt tính gây đ tế bào ủ ãy 64 12 Bảng Giá trị logP ủ 13 Bảng Kết o king ủ hất 2a-2e, 3a-3e hất 4a, 4c, 4d, 4g 81 83 TT Hình 1.1 T D NH h h Cá n hất ứ C C C H NH Trang hế tế bào ung th nghiên D n hất ((Z)-5-(4-((E)-3-oxo-3-(thiophen-2-yl) ứu ủ Vij y Hình prop- -enyl)benzyli ene)- , -thi zoli in- , ione) nghiên ứu ủ Hình vup ti Hai hợp hất 2a 2b nghiên ứu ủ Boisbrun Hình Cá hất nghiên ứu ủ leg on Sh nkar Hình Hợp hất 3c nghiên ứu ủ tá giả Nguy n 4 Hải N m Hình Chất nđ ng - ( - minoethyl) - - ( -phenyl- propyli en) -thi zoli in- , - ion nghiên ứu ủ K i Liu Hình Cá n hất thi zoli in-2,4-dion tá hế ứ ụng theo hế hu i tín hiệu R f MEK ERK PI3K/Akt Hình Cá n hất tổng hợp nghiên ứu ủ Lâm 10 Thị Hị Hình 1.9 Cấu tạo ủ TZD đ ng đ ợ nghiên ứu 12 ụng ủ 12 10 Hình 1.10 Kết tá n hất TZD đ ng huyết mỡ máu 11 Hình Tác dụng TZD PPAR-γ 12 Hình 1.12 Cấu trú ủ TZD liên qu n đến ấu trú 14 ủ 14 PPAR-γ 13 Hình H i hợp hất nghiên ứu ủ Sh shik n 15 p tt n 14 Hình 1.15 ng H i hợp hất hiệu lự điều trị mạnh nghiên 18 ứu ủ Br h t 15 Hình Cá hợp hất hiệu lự mạnh nghiên ứu 18 Yakaiah Chinthala 16 Hình Hợp hất - (2-bromobenzyl) -5- (4-metansulfonyl- 20 benzyliden) -thiazolidin-2,4- dion nghiên ứu ủ Cleiton Diniz B rros 17 Hình Cá hợp hất nghiên ứu ủ N vin B P tel 21 Imr n H Kh n 18 Hình 1.18 Cấu trú ombret st tin 19 Hình Phổ đồ hồng ngoại ủ hất 3a 71 20 Hình Phổ đồ khối l ợng ủ hất 4c 72 21 Hình Phổ đồ ng h ng t hạt nhân proton ủ hất 3a 74 22 Hình Phổ đồ ng h ng t hạt nhân proton ủ hất 4a 77 23 Hình Cá trung tâm 22 khả lkyl h ủ 80 propargyl thiazolidin-2,4-dion 24 Hình Mơ hình t ơng tá giữ α, β tubulin 84 combretastin CA-4 25 Hình Mơ hình t ơng tá giữ re eptor tubulin hất 4a, 885 4c, 4d, 4g h 13 : Phổ hồng ngoại hất 4h h 13 : Phổ khối l ợng MS hất 4h PL43 h 13 : Phổ ng h ng t hạt nhân 1H-NMR hất 4h h 13 : Phổ ng h ng t hạt nhân 1H-NMR hất 4h (m r ng) PL44 h 13 : Phổ ng h ng t hạt nhân 13C-NMR hất 4h h 13 : Phổ ng h ng t hạt nhân 13C-NMR hất 4h (m r ng) PL45 ng h ng t hạt nhân 13C-NMR hất 4h (m r ng) h 13 : Phổ h 14 : Phổ hồng ngoại hất 4i PL46 h 14 : Phổ khối l ợng MS hất 4i h 14 : Phổ ng h ng t hạt nhân 1H-NMR hất 4i PL47 h 14 : Phổ ng h ng t hạt nhân 1H-NMR hất 4i (m r ng) h 14 : Phổ ng h ng t hạt nhân 1H-NMR hất 4i (m r ng) PL48 h 14 : Phổ ng h ng t hạt nhân 13C-NMR hất 4i h 14 : Phổ ng h ng t hạt nhân 13C-NMR hất 4i (m r ng) PL49 ng h ng t hạt nhân 13C-NMR hất 4i (m r ng) h 14 : Phổ h 15 : phổ hồng ngoại hất 4j PL50 h h 15 : phổ khối l ợng MS hất 4j c 15c: Phổ ng h ng t hạt nhân 1H-NMR hất 4j PL51 h 15 : Phổ ng h ng t hạt nhân 1H-NMR hất 4j (m r ng) h 15 : Phổ ng h ng t hạt nhân 1H-NMR hất 4j (m r ng) PL52 h 15 : Phổ ng h ng t hạt nhân 1C-NMR hất 4j h 15 : Phổ ng h ng t hạt nhân 1C-NMR hất 4j (m r ng) PL53 ng h ng t hạt nhân 1C-NMR hất 4j (m r ng) h 15 : Phổ h 16: Hình ảnh o king ủ hất 4a PL54 h 17: Hình ảnh o king ủ hất 4c h 18: Hình ảnh o king ủ hất 4d PL55 h 19 Hình ảnh o king ủ hất 4g PL56 PL57 ... C6H3 3h: Ar = 4-Br-2-F C6H3 3c: Ar = 2-Cl -5- NO2 C6H3 3i: Ar = 4-Br -3- F C6H3 3d: Ar = 4-Cl -3- NO2 C6H3 3j: Ar = 2,4- di-NO2 C6H3 3e: Ar = 2 ,3- di-OH C6H3 3k: Ar = 2-furyl 3f: Ar = 2-OH -5- NO2 C6H3 3m:... Cá 3g, 3l khả hống lại òng tế bào ung th phổi ( hất 3a, 3b, ) v i IC 50 lần l ợt 38 , 37 , 45, 36 , 30 µM [7] O Ar O N S OH O 3a: Ar = 2-Cl C6H4 3g:Ar = 3 ,5- di-Br-4-OH C6H2 3b: Ar = 2 ,3- di-Cl C6H3... hành tổng hất tổng hợp đ ợ òng tế bào ung th ổ tử ung (HeL ), ung th đại trự tràng (HT- ), ung th phổi ( ), ung th vú (MCF- ) Cá hất 3a, 3c, 3e, 3f, 3g, 3j, 3l, 3m ho thấy tá ụng đáng k v i IC50