Điều tra đa dạng sinh học trữ lượng và khảo sát hàm lượng tinh dầu một số loài thảo đậu khấu tại tỉnh bắc kạn

PHAN THỊ GIANG Mã sinh viên: 1201136 ĐIỀU TRA ĐA DẠNG SINH HỌC, TRỮ LƢỢNG VÀ KHẢO SÁT HÀM LƢỢNG TINH DẦU MỘT SỐ LOÀI THẢO ĐẬU KHẤU TẠI TỈNH BẮC KẠN KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƢỢC SĨ PGS

TẠI TỈNH BẮC KẠN

KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƢỢC SĨ

HÀ NỘI – 2017

PHAN THỊ GIANG

Mã sinh viên: 1201136

ĐIỀU TRA ĐA DẠNG SINH HỌC, TRỮ LƢỢNG VÀ KHẢO SÁT HÀM LƢỢNG TINH DẦU MỘT SỐ LOÀI THẢO ĐẬU KHẤU

TẠI TỈNH BẮC KẠN

KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƢỢC SĨ

PGS.TS Trần Văn Ơn Nơi thực hiện:

Bộ môn Thực Vật

HÀ NỘI - 2017

Với tất cả lòng biết ơn và kính trọng, tôi xin chân thành cảm ơn PGS TS Trần Văn Ơn (Bộ môn Thực Vật – Đại học Dược Hà Nội) là người thầy đã luôn theo sát giúp đỡ tôi suốt khoảng thời gian dài tại bộ môn Thực Vật, truyền cho tôi nhiệt huyết, hướng dẫn tôi thực hiện khóa luận này

Tôi cũng xin gửi lời cảm ơn tới:

ThS Nghiêm Đức Trọng, người luôn giúp đỡ tôi trong quá trình điều tra, hướng dẫn và truyền cho tôi cảm hứng ngay từ những ngày đầu tiên tiếp xúc với Thực Vật;

Các thầy cô cùng các chị kỹ thuật viên của Bộ môn Thực Vật đã cho tạo điều kiện thuận lợi để tôi thực hiện khóa luận ở Bộ môn và luôn cho tôi cảm thấy

Bộ môn như một gia đình;

Các cán bộ chi cục Kiểm lâm và người dân tỉnh Bắc Kạn đã nhiệt tình giúp

đỡ cho quá trình điều tra, cũng như chia sẻ những kinh nghiệm sử dụng cây thuốc rất quý báu cho tôi

Cuối cùng, tôi xin cảm ơn gia đình của tôi, nơi cho tôi động lực và luôn tạo cho tôi điều kiện tốt nhất để hoàn thành khóa luận này

Hà Nội, ngày 11 tháng 5 năm 2017

Sinh viên

Phan Thị Giang

Trang

ĐẶT VẤN ĐỀ 1

CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 2

1.1 CHI ALP INIA ROXB .2

1.1.1 Đặc điểm hình thái và sinh thái .2

1.1.2 Chi Alpinia ở Việt Nam 3

1.2 ĐIỀU KIỆN TỰ NHIÊN CỦA TỈNH BẮC KẠN VÀ XÃ XUÂN LẠC .9

1.2.1 Điều kiện tự nhiên của tỉnh Bắc Kạn 9

1.2.2 Xã Xuân Lạc (huyện Chợ Đồn, tỉnh Bắc Kạn) 10

CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 12

2.1 NGHIÊN CỨU TÍNH ĐA DẠNG SINH HỌC 12

2.1.1 Nguyên liệu nghiên cứu 12

2.1.2 Phương pháp nghiên cứu 12

2.2 XÁC ĐỊNH TRỮ LƯỢNG 13

2.2.1 Nguyên liệu nghiên cứu 13

2.2.2 Phương pháp nghiên cứu 13

2.3 XÁC ĐỊNH HÀM LƯỢNG VÀ THÀNH PHẦN TINH DẦU 16

2.3.1 Nguyên liệu nghiên cứu 16

2.3.2 Phương pháp nghiên cứu 16

2.4 ĐIỀU TRA TRI THỨC SỬ DỤNG, CHẾ BIẾN VÀ THỊ TRƯỜNG THẢO ĐẬU KHẤU TẠI TỈNH B ẮC KẠN 18

CHƯƠNG III: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 19

3.1 ĐA DẠNG LOÀI THẢO ĐẬU KHẤU TẠI TỈNH BẮC KẠN 19

3.1.1 Riềng mãnh hải (Alpinia menghaiensis S Q Tong & Y M Xia)19 3.1.2 Riềng dài lông mép (Alpinia blepharocalyx var glabrior (Hand.-Mazz.) T.L Wu.) 24

3.1.3 Riềng nhiều hoa (Alpinia polyantha D Fang.) 29

THẢO ĐẬU KHẤU TẠI TỈNH BẮC KẠN 38

3.1.1 Hàm lượng tinh dầu quả 38

3.1.2 Thành phần tinh dầu 39

3.4 TRI THỨC SỬ DỤNG, CHẾ BIẾN VÀ THỊ TRƯỜNG THẢO ĐẬU KHẤU TẠI TỈNH BẮC KẠN 41

3.4.1 Tri thức sử dụng Thảo đậu khấu 41

3.4.2 Tri thức chế biến Thảo đậu khấu 41

3.4.3 Thị trường dược liệu Thảo đậu khấu tại Bắc Kạn 42

3.4.1 Về phương pháp nghiên cứu 43

3.4.2 Về đa dạng loài Thảo đậu khấu tại tỉnh Bắc Kạn 45

3.4.3 Về điều tra trữ lượng một số loài Thảo đậu khấu tại xã Xuân Lạc 46

3.4.4 Về hàm lượng và thành phần tinh dầu một số loài Thảo đậu khấu 46

3.4.5 Về thị trường dược liệu Thảo đậu khấu 47

KẾT LUẬN 48

KIẾN NGHỊ 49

TÀI LIỆU THAM KHẢO

PHỤ LỤC 1:CÁC BIỂU ĐIỀU TRA, BẢNG MÃ HÓA THÔNG TIN SỬ

DỤNG TRONG ĐỀ TÀI

PHỤ LỤC 2: KHÓA PHÂN LOẠI CHI ALPINIA Ở TRUNG QUỐC

PHỤ LỤC 3: DỮ LIỆU NGHIÊN CỨU

PHỤ LỤC 4: MỘT SỐ HÌNH ẢNH KHU VỰC NGHIÊN CỨU

PHỤ LỤC 5: PHIẾU GIÁM ĐỊNH TÊN KHOA HỌC VÀ GIẤY CHỨNG

NHẬN MÃ SỐ TIÊU BẢN

GC-MS: Hệ thống sắc ký khí kết hợp khối phổ

A.: Alpinia

KIP: Người dân địa phương có kinh nghiệm thu hái các loài Thảo đậu khấu

tại nơi điều tra

NCCT: Người cung cấp tin

STT: Số thứ tự

STT Tên bảng Trang

Bảng 1.1 Danh sách các loài Alpinia ở Việt Nam 3

Bảng 3.1 Số liệu phân tích cụm quả của loài Alpinia menghaiensis S

Q Tong & Y M Xia

34

Bảng 3.2 Số liệu phân tích cụm quả của loài Alpinia blepharocalyx

var glabrior (Hand.-Mazz.) T.L Wu

STT Tên hình Trang

Hình 2.1 Nguyên liệu Thảo đậu khấu nghiên cứu 16 Hình 3.1 Alpinia menghaiensis S Q Tong & Y M Xia 20 Hình 3.2 Đặc điểm hình thái của A menghaiensis S Q Tong & Y

ĐẶT VẤN ĐỀ

Chi Riềng (Alpinia Roxb.) là một chi lớn, gồm khoảng 250 loài, phân bố ở

vùng nhiệt đới và cận nhiệt đới Châu Á, một số ít ở Australia và quần đảo Thái Bình Dương, tạo thành một chi phổ biến và phức tạp về thực vật nhất của họ Zingiberaceae [1] Ở Việt Nam, đến nay đã xác định có 34 loài, trong đó có nhiều

loài được sử dụng làm thuốc trong Y học cổ truyền như Thảo đậu khấu (Alpinia

hainanensis K.Schum.), Riềng nếp (Alpinia galanga L Willd), Ích trí (Alpinia oxyphylla Miq.),

Theo Đỗ Tất Lợi [15], Thảo đậu khấu là hạt phơi hay sấy khô của cây Thảo

đậu khấu (Alpinia hainanensis K Schum.), được sử dụng trong Y học cổ truyền để

chữa dạ dày lạnh đau, nôn ra nước chua, nôn mửa, tả lỵ Tuy nhiên, trong thực tế tại tỉnh Bắc Kạn, dược liệu Thảo đậu khấu được thu mua từ nhiều loài khác nhau thuộc

chi Alpinia Những loài này có đặc điểm hình thái khác hoàn toàn loài đã được mô

tả trước đó (Alpinia hainanensis K Schum.)

Từ lý do trên, đề tài “Điều tra đa dạng sinh học, trữ lượng và khảo sát

hàm lượng tinh dầu một số loài Thảo đậu khấu ở tỉnh Bắc Kạn” đã được tiến

hành với những mục tiêu sau:

1 Xác định tính đa dạng ở bậc loài của một số loài mang tên Thảo đậu khấu

CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN

1.1 CHI ALPINIA ROXB

1.1.1 Đặc điểm hình thái và sinh thái

Chi Alpinia gồm khoảng 250 loài, phân bố ở vùng nhiệt đới và cận nhiệt

đới Châu Á, một số ít ở Australia và quần đảo Thái Bình Dương [1], [5], [6], [7]

Các loài Alpinia thuộc loại thân thảo, cao khoảng 0,5-3 (4) m Thân rễ

khỏe, bò dưới đất Lá hình mác hẹp hoặc hình elip, thường có mũi nhọn, không cuống hoặc cuống ngắn Cụm hoa dạng bông hoặc hình chùy ở ngọn thân, khi non thường được bao bởi 1-3 lá bắc (thường gọi là lá bắc tổng bao, nhưng rụng sớm) Các nhánh của cụm hoa gần như không có, có khi rất ngắn mang một hoa hoặc có

độ dài đáng kể (hiếm khi mang nhánh nhỏ) và mang nhiều hoa Các lá bắc của nhánh lớn như lá bắc con của hoa, hoặc rất nhỏ hoặc không có lá bắc Trong các trường hợp, lá bắc đều rất dễ rụng Các lá bắc con của hoa có hình ống, cái này lồng vào cái khác, hoặc bằng phẳng hoặc hình lõm, thường lớn hơn các lá bắc bọc ngoài, hiếm khi rất nhỏ Cuống hoa thường ngắn hơn lá bắc của hoa Đài hoa hình ống Tràng hoa dính thành ống ngắn, trên chia 3 thùy có hình trứng, lõm, dạng tù, màu trắng hoặc hồng Bao phấn hình thuẫn, trung đới dày, có mào hoặc không Nhị ngắn, gắn lồng vào giữa hai nhụy và cánh môi hoặc không Nhị lép bên 2, tiêu giảm thành dạng dùi, dạng răng hay tiêu giảm hoàn toàn Cánh môi to, trắng hoặc vàng

và thường có sọc tía tạo màu sặc sỡ, dài hơn nhụy và các thùy của tràng hoa, thường

có dạng thuẫn, chia thành hai thùy lõm có dạng thuyền Bầu thường hình cầu hoặc không; chia ba ô, noãn có số lượng không xác định Quả nang chứa nhiều hạt, được bao bởi một lớp áo hạt

Thân rễ chi Alpinia sinh trưởng khá nhanh Từ một chồi giống ban đầu,

chúng có thể phân nhánh, đâm chồi, tăng sinh khối, phát triển thành một bụi lớn chỉ

trong một vài năm Các loài trong chi Alpinia thường thích nghi với điều kiện ẩm,

được che bóng và nhiệt độ không quá cao (khoảng 27-30oC về ban ngày và 17-18o

C

về ban đêm) Chúng sinh trưởng dưới tán rừng thứ sinh, rừng cây bụi, rừng tre, khe núi, thung lung hoặc ven vìa rừng,

1.1.2 Chi Alpinia ở Việt Nam

1.1.2.1 Tính đa dạng và phân loại

Hiện nay, có 34 loài đã đƣợc phát hiện ở Việt Nam, trong đó có 26 loài đƣợc dùng làm thuốc, rau ăn, cho tinh dầu, làm gia vị và làm cảnh [1], [10], [11], [12], [18] (Bảng 1.1)

Bảng 1.1: Danh sách các loài Alpinia ở Việt Nam (xếp theo thứ tự tên khoa

(Lour.) Horan

Riềng lông

STT Tên khoa học Tên Việt Nam Giá trị sử

dụng

Giá trị sử dụng: M: Cây làm thuốc, F: Cây ăn được; E: Cây cho tinh dầu, S: Cây

làm gia vị, Cây làm cảnh: O

Nhằm hỗ trợ việc giám định tên khoa học, năm 2011, trong công trình nghiên cứu của mình, Nguyễn Quốc Bình đã xây dựng khóa phân loại 31 loài trong

chi Alpinia ở Việt Nam [1] Hầu như tất cả các đặc điểm hình thái cơ quan dinh

dưỡng và cơ quan sinh sản đã được sử dụng để xây dựng khóa phân loại (Khung1)

Khung 1: Khóa phân loại 31 loài trong chi Alpinia ở Việt Nam [1]

1A Phần phụ trung đới không kéo dài thành mào

2A Cụm hoa dạng chùy

3A Lá bắc con dạng vảy, dài dưới 1mm

4A Cụm hoa nhiều nhánh……… 1 A globosa 4B Cụm hoa không phân nhánh……… 2.A officinarum

3B Lá bắc con không dạng vảy, dài hơn 1mm

5A Lá bắc con không mở đến gốc, dạng phễu hay ống

6A Cánh môi hình trứng ngược, dài 4-5 mm, đầu xẻ thành 3 thùy; vòi

nhụy lép hình nón tù, sần sùi……….…… ….3 A conchigera

6B Cánh môi hình trái xoan, dài 8-10 mm, đầu xẻ thành 2 thùy nông; vòi

nhụy lép hình trái xoan hẹp, dạng bản dày ……… 4 A siamensis

5B Lá bắc con mở đến gốc, không dạng phễu hay ống

7A Đầu ống đài chia thành 4 thùy……… 5 A menghaiensis

7B Đầu ống đài chia thành 3 thùy

8A Lá bắc tiêu giảm hay dài đến 1mm

9A Mặt dưới phiến lá có lông

10A Cụm hoa phân nhánh; nhị lép mảnh, dài đến 4mm 6 A macroura

10B Cụm hoa không phân nhánh; nhị lép tiêu bản thành dạng thể chai

……… …7 A malaccensis

9B Mặt dưới phiến lá nhẵn ( trừ mép và mép đầu phiến lá có gai hay

lông)

11A Đài hoa xẻ xiên xuống 1 bên

12A Cuống lá không có; thùy tràng dài 1,5-1,8 cm 8 A gagnepainii

12B Cuống lá dài 1-2 cm; thùy tràng dài 3 – 3,5 cm …9 A zerumbet

11B Đài hoa không xẻ xiên xuống 1 bên

13A Ống đài dài 0,8 – 1 cm……… 10 A breviligulata 13B Ống đài dài 1,8-2 cm……… …11 A velutina

8B Lá bắc dài hơn 1mm

14A Đài hoa dạng ống, dài 7-8 mm; cánh môi màu trắng, đầu xẻ sâu

xuống ½ chiều dài thành 2 thùy……….… 12 A galanga

14B Đài hoa dạng phễu, dài 1,5-2 cm; cánh môi màu vàng, có nhiều

đốm đỏ, đầu chia 3 thùy không rõ……… 13 A mutica

2B Cụm hoa dạng chùm hay dạng bông

15A Cụm hoa dạng chùm

16A Lá bắc con tiêu giảm; ống đài dài 0,8-1,2 cm

17A Mặt trên lá không có sọc xanh- trắng và xanh sẫm xen kẽ; cánh môi

dài 1,8 -2,5 cm; chỉ nhị dài 2-2,3 cm……… 14 A oxyphylla

17B Mặt trên lá có sọc xanh- trắng và xanh sẫm xen kẽ; cánh môi dài 1- 1,2

cm; chỉ nhị dài 0,8 – 1cm……… … … 15 A pumila

16B Lá bắc con dài 2-4 cm; ống đài dài 1,8 -3 cm

18A Cuống lá dài 4-8 cm; thùy tràng dài 1,8-2 cm … 16 A kwangsiensis

18B Cuống lá dài 0,5-2 cm; thùy tràng dài 2,5-3 cm

19A Lá bắc dài 4-4,5 cm; ống tràng dài 1-1,2 cm; chỉ nhị dài 1,3-1,5

20B Mặt dưới phiến lá nhiều lông; cánh môi dài gần bằng thùy tràng

21A Cuống lá dài 2,5- 4,5 cm; cụm hoa bông gần như hình

trụ……….………… ….20 A pinnanensis

21B Cuống lá dài đến 1cm; cụm hoa bông, dạng gần tròn hay hình

nón … ……….… 21 A strobiliformis

1B Phần phụ trung đới kéo dài thành mào

22A Đầu ống đài chia thành 4 thùy răng; cánh môi chia 4 thùy… 22 A hirusta

22B Đầu ống đài chia thành 2-3 thùy dạng răng; cánh môi không chia thành 4 thùy

23A Lá bắc màu đỏ tươi, đầu ống đài chia thành 2 thùy dạng

răng……… 23 A purpurata

23B Lá bắc không có màu đỏ tươi; đầu ống đài chia thành 2 thùy dạng răng 24A Cuống lá không có hay dài dưới 1 cm

25A Quả hình thoi, có 10-12 cạnh nổi……….…24 A oxymitra

25B Quả hình bầu dục hay hình cầu, không có cạnh nổi

26A Lá bắc con cỡ 1,2-1,4 x 0,8-1 cm, bao 2-3 hoa… 25 A calcicola 26B Lá bắc con cỡ 0,2-0,4 x 0,1-0,2 cm, bao 1 hoa…26 A oblongiflora

24B Cuống lá dài trên 1 cm

27A Lá bắc dài 4-6 cm; cánh môi nguyên…… … 27 A phuthoensis

27B Lá bắc dài dưới 4 cm hay tiêu giảm; cánh môi xẻ 2 hay 3 thùy

28A Lưỡi lá dài dưới 1cm……… …28 A intermedia

28B Lưỡi lá dài trên 1 cm

29A Lá bắc con dài 0,7-0,8 cm; thùy tràng dài 1-1,2 cm………

…… ……… 29 A maclurei

29B Lá bắc con dài 1,2-3,5 cm; thùy tràng dài 1,5-3,8 cm

30A Lá bắc con dài 1,2-1,4 cm; đài dài 0,8-0,9 cm; thùy tràng dài

1,5-1,8 cm ……… ……… ….30 A tonkinensis

30B Lá bắc con dài 3- 3,5 cm; đài dài 2-2,5 cm; thùy tràng dài 3,2-3,8

cm….……… 31 A latilabris

1.1.2.2 Thành phần hóa học của tinh dầu của một số loài Alpinia

Hầu như tất cả các loài trong họ Zingiberaceae nói chung và chi Alpinia nói

riêng đều có chứa tinh dầu với hàm lượng khác nhau Theo các công trình nghiên

cứu đã công bố từ các bộ phận khác nhau của các loài Alpinia (như lá, hoa, thân rễ,

hạt…) Tinh dầu của các loài trong chi này có giá trị cao nên được ứng dụng làm

mỹ phẩm, dược phẩm, y học, [16]

Theo nghiên cứu của Phan Minh Giang và các cộng sự, tinh dầu quả của

Riềng rừng (Alpinia globosa (Lour) Horaninov.) cho thành phần chính gồm các

chất Flavokawin B, β-sitosterol, stigmasterol, alpinetin, dihydroxy-1,7-diphenyl-1- heptene, β-D-fructofurannose, β-D-fructopyranose và 2-O-methyl β-D- fructofurannose [22]

(3S,5S)-trans-3,5-Loài Alpinia chinensis Rosc ở Hương Trà, Thừa Thiên Huế đã được nghiên

cứu về tinh dầu các bộ phận rễ, thân rễ, thân, lá và hoa Thành phần hóa học chính gồm 1,8-cineol (thân rễ 26,8 %; rễ 3,2 %), α-humulen (thân rễ 9,3 %; rễ 6,2 %), β-bisabolen (thân 47,9 %; lá 47,9 %; thân rễ 24,8 %; hoa 17,1 %; rễ 10,4 %),

caryopheyllen oxit (thân rễ 0,4%; rễ 13,2%) [19]

Tinh dầu hạt của Alpinia blepharocalyx K Schum có hàm lượng 0,11%

gồm 15 chất, thành phần hóa học chính gồm Geranyl axetat (24,71 %), m-cymen

(13,76 %), α–thujen (5,47 %), Linalol (4,02%), Cislinalol oxit (3,67 %), Trans –

linalol oxit (3,12 %), Farnesol (1,99 %) [7]

Tinh dầu thân rễ Riềng nếp (Alpinia galanga (L.) Willd.) có chứa các hợp

chất: d- pinen, cineol (20-30%), camphor, methyl cinamat (48%) [23]

Theo Văn Ngọc Hướng và các cộng sự [13] thành phần hóa học chính trong

tinh dầu thân rễ, lá, thân, hạt của cây Alpinia hainanensis K Schum ở Việt Nam

gồm: 1,8-cineol (lá 14,4%; thân rễ 13,4%), fenchon (lá 23%; thân rễ 25,1%; hạt 0,4%), linalol (lá 1,4%; thân rễ 13,4%), citronellol (hạt 10,5%) và geraniol (lá 25%; thân rễ 13%; hạt 31,2%)

Tinh dầu của Alpinia zerumbet (Pers.) Burtt & R M Smith chủ yếu là

trong thân rễ với hàm lượng chừng 0,35-0,7% Tinh dầu trong thân rễ của Gừng gió chủ yếu là Zerumbon (48,3-72,3%), α-humulen (4,2-18,8%) và 1,8-cineol (0,8-6,8%) Các thành phần còn lại (khoảng trên 30 hợp chất) có hàm lượng nhỏ hoặc chỉ ở dạng vết [16]

1.1.2.3 Công dụng và tác dụng của một số loài Alpinia

Ở Việt Nam, nhiều loài mang tên Riềng (Alpinia Roxb.) được sử dụng để

làm gia vị và làm thuốc kích thích tiêu hóa, giúp ăn ngon, chữa đầy hơi, các chứng đau bụng do lạnh, bụng đầy trướng, nôn mửa, tiêu chảy, sốt rét do hàn hoặc sốt rét, sốt nóng, đau răng và các chứng trúng gió, chuột rút [10]

Các loài Alpinia được sử dụng làm thuốc trong Y học cổ truyền như Riềng dài lông mép (Alpinia blepharocalyx K Schum.), Riềng hải nam (Alpinia

hainanensis K Schum), Riềng nếp (Alpinia galanga (L.) Willd.), Sẹ (Alpinia globosa (Lour.) Horan.), Ích trí (Alpinia oxyphylla Miq.),…

1.2 ĐIỀU KIỆN TỰ NHIÊN CỦA TỈNH BẮC KẠN VÀ XÃ XUÂN LẠC

1.2.1 Điều kiện tự nhiên của tỉnh Bắc Kạn

Ví trí địa lý: Bắc Kạn nằm ở trung tâm nội địa vùng Đông Bắc Bắc Bộ Việt

Nam, có địa giới tiếp giáp với 4 tỉnh: Phía Bắc giáp các huyện Bảo Lạc, Nguyên Bình, Thạch An, tỉnh Cao Bằng; phía Đông giáp các huyện Tràng Định, Bình Gia, tỉnh Lạng Sơn; phía Tây giáp các huyện Na Hang, Chiêm Hóa, Yên Sơn, tỉnh Tuyên Quang; phía Nam giáp các huyện Võ Nhai, Phú Lương, Định Hóa, tỉnh Thái Nguyên [30]

Địa hình: Bắc Kạn có địa hình núi cao, cao hơn các tỉnh xung quanh và bị

chi phối bởi các mạch núi cánh cung kéo dài từ Bắc đến Nam ở hai phía Tây và Đông của tỉnh Trong đó, cánh cung Ngân Sơn nối liền một dải chạy suốt từ Nặm Quét (Cao Bằng) dịch theo phía Đông tỉnh Bắc Kạn đến Lang Hít (phía Bắc tỉnh Thái Nguyên) uốn thành hình cánh cung rõ rệt Đây là cánh cung đóng vai trò quan trọng trong địa hình của tỉnh, đồng thời là ranh giới khí hậu quan trọng Dãy núi này

có nhiều đỉnh núi cao như đỉnh Cốc Xô (1.131m), đỉnh Phia Khao (1.061m),… Cánh cung sông Gâm kéo dài dọc theo phía Tây của tỉnh Khu vực này có nhiều đỉnh núi cao thấp khác nhau, trong đó có đỉnh Phja Boóc (1.502m) Xen giữa hai cánh cung là nếp lõm thuộc hệ thống thung lũng các con sông

Khí hậu: Bắc Kạn nằm hoàn toàn trong vành đai nhiệt đới khu vực gió mùa

Đông Nam Á Khí hậu chia thành 2 mùa rõ rệt: Mùa mưa nóng ẩm từ tháng 5 đến tháng 10, chiếm 70 - 80% lượng mưa cả năm; mùa khô từ tháng 11 đến tháng 4 năm sau, lượng mưa chỉ chiếm khoảng 20 - 25% tổng lượng mưa trong năm Do nằm giữa hai hệ thống núi cánh cung miền Đông Bắc nên Bắc Kạn chịu ảnh hưởng mạnh của khí hậu lục địa châu Á, thời tiết lạnh về mùa đông, đồng thời hạn chế ảnh hưởng mưa bão về mùa hạ

Sông ngòi: Mạng lưới sông ngòi Bắc Kạn tương đối phong phú nhưng đa số

là các nhánh thượng nguồn với đặc điểm chung là ngắn, dốc, thủy chế thất thường Bắc Kạn là đầu nguồn của 5 con sông lớn của vùng Đông Bắc là sông Lô, sông

Gâm, sông Kỳ Cùng, sông Bằng, sông Cầu

Ngoài hệ thống sông ngòi, Bắc Kạn còn nổi tiếng với hồ Ba Bể Đây là một trong những hồ kiến tạo đẹp và lớn nhất Việt Nam, được hình thành từ một vùng đá vôi bị sụt xuống do nước chảy ngầm đã đục rỗng lòng khối núi Diện tích mặt hồ khoảng 500ha, là nơi hợp lưu của ba con sông Tả Han, Nam Cương và Cho Leng

Hồ có ba nhánh thông nhau nên gọi là Ba Bể

Tài nguyên thiên nhiên:

Tài nguyên đất: Bắc Kạn có nhiều loại đất khác nhau, nhưng chủ yếu là hai

loại đất chính: 1) Đất feralit màu vàng nhạt trên núi trung bình (FH) chiếm 13,38% diện tích, phân bố trên tất cả các đỉnh núi cao trên 700 m, trên nền đá mắcma axit kết tinh chua, đá trầm tích và biến chất Tầng đất mỏng, đá nổi nhiều, đất ẩm và có tầng thảm mục khá dày; 2) Đất feralit điển hình vùng đồi núi và núi thấp (Ff – Fk): chiếm 71,62% diện tích, phân bố tập trung ở Ba Bể, bắc Chợ Đồn và Na Rì (Khu vực Kim Hỷ)… Khu vực núi đá vôi thường rất ít đất trong các hang hốc, tầng đất mỏng màu đen, đất rất tốt;

Về cơ cấu sử dụng đất: Diện tích được khai thác hiện chiếm hơn 60%, trong đó: Đất nông nghiệp có 30.509 ha, chiếm 6,28% diện tích tự nhiên; Đất lâm nghiệp có rừng 366.722 ha, chiếm 70% diện tích tự nhiên Diện tích chưa sử dụng còn khá lớn

Tài nguyên rừng:

Tài nguyên rừng của tỉnh khá đa dạng, phong phú Ngoài khả năng cung cấp gỗ, tre, nứa còn nhiều loại động vật, thực vật quý hiếm, có giá trị và được coi là một trung tâm bảo tồn nguồn gen thực vật của vùng Đông Bắc

1.2.2 Xã Xuân Lạc (huyện Chợ Đồn, tỉnh Bắc Kạn)

1.2.2.1 Điều kiện tự nhiên

Vị trí địa lý: Xã Xuân Lạc là một xã vùng cao nằm ở phía Bắc của huyện

Chợ Đồn, cách trung tâm huyện 36km Bắc giáp xã Đà Vị (Na Hang, Tuyên Quang), xã Nam Mẫu (Ba Bể) Đông giáp xã Nam Cường, xã Đồng Lạc Nam giáp

xã Bản Thi Tây giáp xã Sơn Phú (Na Hang, Tuyên Quang) [29 ], [18] Tổng diện

tích tự nhiên của xã Xuân Lạc là 6,044 ha Trong đó Diện tích rừng tự nhiên là 3,626 ha, Rừng gỗ là 2,594 ha, Rừng hỗn giao là 857.01 ha, đất trống là 652 ha

Địa hình: Xã Xuân Lạc mang đặc điểm chung của các địa phương vùng núi

Đông Bắc: Độ cao trung bình từ 400 - 800m so với mực nước biển Địa hình đa dạng, phức tạp, chủ yếu là đồi núi (chiếm trên 88% tổng diện tích) xen kẽ thung lũng, ruộng bậc thang nhỏ hẹp Các dãy núi cao, có độc dốc lớn, hướng núi không đồng nhất

Sông ngòi: Trên địa bàn có nhiều khe suối nhỏ, hợp thành sông Ti Hồng –

một trong ba dòng sông chảy vào Hồ Ba Bể Nguồn nước sông suối tự nhiên dồi dào được người dân tận dụng trong sản xuất, gieo trồng Tuy nhiên vào những ngày mưa to, nước lớn thường xảy ra hiện tượng lũ quét, tiềm ẩn nhiều mối đe dọa với đời sống và sản xuất của người dân

1.2.2.2 Điều kiện kinh tế, xã hội

Xã Xuân Lạc được chia thành 14 thôn bản: Nà Dạ, Bản Eng, Bản Tưn, Bản Khang, Bản Ó, Bản Puổng, Bản Hỏ, Bản He, Pù Lùng 1, Pù Lùng 2, Tà Han, Khuổi Sáp, Nà Bản, Cốc Slông

Dân số trong toàn xã hiện có 3.371 người, trong đó, dân tộc Mông có 1.790 người, chiếm 53%; dân tộc Tày có 1.157 người, chiếm 34%; còn lại là dân tộc Dao (8%), Nùng (4%) và Kinh (1%) Từ nhiều đời nay, người dân địa phương sống chủ yếu dựa vào sản xuất nông lâm nghiệp, trong đó hầu hết người dân đều canh tác cây lương thực (lúa, ngô), rau màu và cây lâm nghiệp (mỡ)

CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

2.1 NGHIÊN CỨU TÍNH ĐA DẠNG SINH HỌC

2.1.1 Nguyên liệu nghiên cứu

Mẫu tươi, khô bao gồm thân, hoa, quả, hạt, lá, rễ từ cây trưởng thành của một số loài Thảo đậu khấu được thu tại các tuyến điều tra với người dân địa phương tại 4 huyện: Na Rì, Chợ Đồn, Ngân Sơn và Ba Bể của tỉnh Bắc Kạn

2.1.2 Phương pháp nghiên cứu

- Được thực hiện bằng 2 phương pháp: 1) Phỏng vấn bán cấu trúc tại 2 xã Lạng San, huyện Na Rì và xã Xuân Lạc, huyện Chợ Đồn [9] và 2) Điều tra theo tuyến với 8 tuyến tại 4 huyện: Na Rì (Lương Thành, Nà Hiu), Chợ Đồn (Xuân Lạc, Bản Thi), Ngân Sơn (Thuần Mang, Thượng Quan) và Ba Bể (Bành Trạch, Mỹ Phương) [2], được thu vào tháng 7-10/2016 (mùa quả) và tháng 4/2017 (mùa hoa)

- Xử lý mẫu: Các mẫu được xử lý, ép, sấy khô, làm tiêu bản theo các kỹ thuật tiêu bản thông thường [9] và lưu trữ tại Phòng tiêu bản Bộ môn Thực vật - Trường ĐH Dược Hà Nội (HNIP), số hiệu phòng tiêu bản từ HNIP/18495/17, HNIP/18496/17 và HNIP/18497/17

- Mô tả đăc điểm hình thái: Quan sát mô tả, đo, đếm số lượng và kích thước các bộ phận cơ quan dinh dưỡng và cơ quan sinh sản

- Làm tiêu bản: Rễ và lá của các mẫu được cắt, tẩy và nhuộm kép theo phương pháp làm tiêu bản vi học thực vật [17] Tiêu bản được soi qua kính hiển vi Kruss, chụp ảnh lại bằng hệ thống tích hợp với kính hiển vi và máy ảnh

- Xác định tên khoa học: Tên khoa học được xác định bằng phương pháp

so sánh hình thái, dựa vào các tài liệu về thực vật chí Việt Nam [10], Nghiên cứu phân loại họ Gừng (Zingiberaceae) ở Việt Nam [1], Thực vật chí Trung Quốc (Flora of China) [28], Some new Taxa of Zingiberaceae from Kwangsi 2 [21], The Plant List [31] và các tiêu bản lưu tại các phòng tiêu bản của Vườn cây thuốc

Quảng Tây (GXMG), Viện Thực vật Quảng Tây (IBK), Vườn Thực vật nhiệt đới Xishuangbanna (HITBC), với sự giúp đỡ của chuyên gia phân loại của Bộ môn Thực vật

2.2 XÁC ĐỊNH TRỮ LƯỢNG

2.2.1 Nguyên liệu nghiên cứu

Nguyên liệu nghiên cứu điều tra trữ lượng bao gồm các mẫu chùm quả tươi, khô, số gốc cây non, số gốc cây trưởng thành, số cụm hoa của một số loài Thảo đậu khấu tại xã Xuân Lạc, huyện Chợ Đồn, tỉnh Bắc Kạn

2.2.2 Phương pháp nghiên cứu

Được thực hiện bằng phương pháp điều tra theo tuyến [2] với người cung cấp tin quan trọng (KIP) Mục tiêu của các chuyến điều tra bao gồm: Xác định số lượng gốc cây trưởng thành/cụm gốc, số lượng cụm quả/ cụm gốc, số cây tái sinh/ cụm gốc, ghi lại tọa độ của vị trí có Thảo đậu khấu trong tuyến điều tra Để từ đó, xác định tổng số cụm quả của một số loài trên tổng diện tích của mỗi tuyến điều tra Các bước thực hiện bao gồm:

- Xác định địa điểm và tuyến thu mẫu: Để đảm bảo tính khách quan trong

quá trình điều tra, tuyến điều tra được thiết kế theo các địa hình và thảm thực vật khác nhau (tuyến núi cao, ven rừng, rừng thứ sinh, ven suối, rừng trồng, vv) Tổng cộng có 3 tuyến điều tra đã được thực hiện cùng với 2 KIP Độ dài quãng đường tuyến điều tra được xác định sử dụng thiết bị định vị GPS có độ chính xác cao có chức năng tính toán xác định quãng đường di chuyển

- Thu thập thông tin: Trong suốt tuyến đường di chuyển, điều tra viên kết

hợp cùng với thành viên nhóm quan sát về 2 phía tuyến đường đi mỗi bên 5m, ghi lại các thông tin của từng loài Thảo đậu khấu theo bảng biểu (Phụ lục 1.3), bao gồm

2 phần: (1) Thông tin về tuyến điều tra: tên tuyến, chiều dài tuyến điều tra, ngày điều tra, tên của KIP; (2) thông tin về cây thuốc: đặc điểm nhận dạng, mã, số lượng gốc cây trưởng thành/cụm gốc, số lượng cụm quả/cụm gốc, số cây tái sinh/cụm gốc

- Xử lý và phân tích thông tin: Toàn bộ dữ liệu điều tra tại tuyến được mã

hóa và nhập vào phần mềm máy tính Microsoft Excel 2010 Sử dụng các hàm trong Microsoft Excel để tính toán các giá trị sau:

(i) Xác định tổng khối lượng quả tươi/chùm và tỷ lệ hạt khô/quả tươi

- Xác định Trung bình tổng khối lượng quả tươi trên mỗi chùm: Tách quả từ

mỗi chùm quả Thảo đậu khấu, sử dụng Cân phân tích để xác định khối lượng tổng khối lượng quả tươi của mỗi chùm Thực hiện ít nhất 3 mẫu và tính trung bình

- Xác định tỷ lệ tươi/khô: Cân chính xác khoảng 100g quả tươi, ghi lại số

liệu, khối lượng cân Sau đó, tiến hành phơi khô các mẫu (khoảng 3-5 nắng) Dược liệu Thảo đậu khấu khô có hàm ẩm dao động trong khoảng 3-10 % Cân khối lượng quả khô của từng mẫu Xác định tỷ lệ quả tươi/quả khô theo công thức:

A=

Trong đó:

 A là tỷ lệ quả tươi/quả khô

 mbđ là khối lượng quả tươi ban đầu, được tính bằng gam (g)

 ms là khối lượng quả sau khi phơi khô, được tính bằng gam (g)

Thực hiện ít nhất với 3 mẫu và tính trung bình

- Xác định tỷ lệ hạt khô/quả tươi: Cân chính xác 100g quả khô Thảo đậu

khấu, bóc vỏ để riêng hạt Sau đó, cân chính xác tổng khối lượng hạt khô sau khi bóc vỏ

Xác định tỷ lệ hạt/quả theo công thức:

Trong đó:

 B là tỷ lệ hạt khô/quả tươi

 A là tỷ lệ quả tươi/quả khô

 m2 là khối lượng hạt sau khi bóc vỏ, được tính bằng gam (g)

 m1 là khối lượng quả khô ban đầu, được tính bằng gam (g)

Thực hiện ít nhất 3 mẫu và tính trung bình

(ii) Xác định trữ lượng dược liệu: Dựa vào các kết quả phía trên, tính được

khối lượng trung bình quả tươi/ chùm (hạt khô) và tổng số cụm quả của mỗi loài trên tổng diện tích tuyến điều tra Do đó, xác định được tổng khối lượng quả tươi (hạt khô) của mỗi loài trên tổng diện tích ô nghiên cứu

Trong đó, diện tích ô tuyến nghiên cứu được xác định là [chiều dài tuyến điều tra (m) x 10 (m)]

Khối lượng quả tươi (hạt khô) Thảo đậu khấu thu được tương ứng với diện tích khảo sát (kg) bằng tổng khối lượng quả tươi (hạt khô) của toàn bộ các loài Thảo đậu khấu nghiên cứu tại xã Xuân Lạc

Trữ lượng quả tươi Thảo đậu khấu tại xã Xuân Lạc được tính theo công thức:

TLT =

Trong đó:

 TLT là trữ lượng quả tươi Thảo đậu khấu trên toàn xã Xuân Lạc (kg)

 M là tổng khối lượng quả tươi Thảo đậu khấu thu được tương ứng với diện tích khảo sát (kg)

 St là tổng diện tích rừng tự nhiên của xã Xuân Lạc (ha)

 S là tổng diện tích khảo sát của 3 tuyến điều tra (ha)

Trữ lượng hạt khô Thảo đậu khấu tại xã Xuân Lạc được tính theo công thức:

TLK= TLK × B Trong đó:

 TLK là trữ lượng hạt tươi Thảo đậu khấu trên toàn xã Xuân Lạc (kg)

 TLT là trữ lượng quả tươi Thảo đậu khấu trên toàn xã Xuân Lạc (kg)

 B là tỷ lệ hạt khô/quả tươi

- Xác định Định mức thu hái của một số loài Thảo đậu khấu tại Bắc Kạn :

Do Thảo đậu khấu là loài có khả năng tái sinh bằng chồi rất mạnh mẽ, ngoài ra Thảo đậu khấu còn có khả năng tái sinh bằng hạt Trên thực tế, người dân chỉ thu hái quả nên ít ảnh hưởng sự tồn tại và sinh trưởng của cây, nên đề xuất định mức thu hái của cây Thảo đậu khấu là 80% so với trữ lượng Thảo đậu khấu tại xã Xuân Lạc

2.3 XÁC ĐỊNH HÀM LƯỢNG VÀ THÀNH PHẦN TINH DẦU

2.3.1 Nguyên liệu nghiên cứu

Hạt phơi khô từ quả gần chín của 3 loài Thảo đậu khấu thu tại tỉnh Bắc Kạn (BK-01, BK-02 và BK-03) và dược liệu Thảo đậu khấu được mua ở Lãn Ông (quận Hoàn Kiếm, thành phố Hà Nội) (LÔ-01, LÔ-02) (Hình 2.1)

Hình 2.1: Nguyên liệu Thảo đậu khấu 2.3.2 Phương pháp nghiên cứu

2.3.2.1 Xác định hàm lượng tinh dầu

Đối với từng mẫu: Quả sau khi thu hái được phơi khô, bóc vỏ và thu được dược liệu Thảo đậu khấu Dược liệu được xay thô và bảo quản trong túi nilon kín, tránh ánh sáng Cân chính xác khoảng 100g bột dược liệu cho vào bình cầu dung

tích 500 ml Bổ sung khoảng 300 ml nước cất, để thấm ẩm dược liệu trong khoảng

30 phút trước khi tiến hành cất tinh dầu

Sử dụng bộ định lượng tinh dầu nhẹ hơn nước Bộ phận đem định lượng được làm sạch, hong ở nơi thoáng gió Đun bình đến sôi, sau đó điều chỉnh tốc độ cất sao cho được 2 – 3ml dịch cất trong một phút Cất đến khi thể tích tinh dầu không tăng lên nữa (khoảng 3 – 4giờ) Ngừng cất, để bộ cất trở về nhiệt độ phòng Đọc thể tích tinh dầu [3], [14]

Song song tiến hành xác định hàm ẩm của mẫu bằng phương pháp sấy đến khối lượng không đổi Sấy ở nhiệt độ 1050C, trong 1 giờ, cho đến khi khối lượng chênh lệch giữa 2 lần cân không quá 0,5 mg [3]

Độ ẩm (X) của mẫu thử, tính bằng phần trăm theo công thức sau:

Trong đó :

 m1 là khối lượng của mẫu thử trước khi sấy, tính bằng gam;

 m2 là khối lượng mẫu thử sau khi sấy, tính bằng gam

Hàm lượng tinh dầu trong mẫu khô tuyệt đối được xác định theo công thức:

Trong đó:

 V: Thể tích tinh dầu đọc được sau khi cất tinh dầu (ml)

 m: Khối lượng nguyên liệu (g)

 H: Hàm ẩm dược liệu

 X1: Hàm lượng tinh dầu (%)

Tiến hành cất mỗi mẫu 3 lần, lấy kết quả trung bình

2.3.2.2 Nghiên cứu định tính - định lượng các thành phần trong tinh dầu

Bằng phương pháp sắc ký khí kết hợp khối phổ (GC/MS), được tiến hành tại Bộ môn Dược liệu - Trường Đại học Dược Hà Nội, trên Hệ thống GC: 7890A,

%100.1

21

m

m m

hệ thống MS: 5975C của Agilent Technologies, cột sắc ký: Agilent 19091S – 433: 325oC: 30m x 250 µm x 0,25 µm

Mẫu sau khi sắc kí được so sánh với ngân hàng phổ để xác định các cấu tử

có mặt trong thành phần của tinh dầu

2.4 ĐIỀU TRA TRI THỨC SỬ DỤNG, CHẾ BIẾN VÀ THỊ TRƯỜNG THẢO ĐẬU KHẤU TẠI TỈNH BẮC KẠN

Được thực hiện bằng phương pháp phỏng vấn bán cấu trúc: dựa trên phiếu phỏng vấn (Phụ lục 1.2) Tổng cộng có 30 người cung cấp tin (NCCT) đã được phỏng vấn tại 2 xã Lạng San (huyện Na Rì) và xã Xuân Lạc (huyện Chợ Đồn) (Phụ lục 1.1) [9]

Phỏng vấn bán cấu trúc: là phương pháp phỏng vấn trên cơ sở sử dụng

một sườn thông tin cần phỏng vấn, có thể là một danh mục các câu nói hay chủ đề được cập trong buổi phỏng vấn, còn thứ tự câu hỏi và cách đặt câu hỏi được thay đổi theo đối tượng phỏng vấn Có thể tiến hành phỏng vấn sâu “NCCT” tại địa phương [9]

NCCT là những người am hiểu về cây thuốc trong khu vực, thường là các

thầy lang đứng tuổi, tự nguyện cung cấp thông tin [9] Ngoài ra tùy vào khu vực điều tra, NCCT có thể được lựa chọn là những người buôn bán, thu mua, thu hái dược liệu,

Tiêu chuẩn lựa chọn người cung cấp tin trong phỏng vấn bán cấu trúc, bao gồm:

- Độ tuổi dao động từ 15-80 tuổi, khỏe mạnh, phát triển bình thường

- Có khả năng nói và hiểu tiếng Kinh

- Đang sinh sống hoặc làm việc tại 2 xã Lạng San (huyện Na Rì) và xã Xuân Lạc (huyện Chợ Đồn)

CHƯƠNG III: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN

3.1 ĐA DẠNG LOÀI CÂY THẢO ĐẬU KHẤU TẠI TỈNH BẮC KẠN

Có 3 loài Thảo đậu khấu đã được phát hiện ở khu vực tỉnh Bắc Kạn bao

gồm: Alpinia menghaiensis S.Q Tong & Y.M Xia., Alpinia blepharocalyx var

glabrior (Hand.-Mazz.) T.L Wu và Alpinia polyantha D Fang

3.1.1 Riềng mãnh hải (Alpinia menghaiensis S Q Tong & Y M Xia)

3.1.1.1 Đặc điểm hình thái

Cây cao 2-3,5 (4) m Lá có cuống dài 6,5-7 cm; phiến lá cỡ 70-100 x 10-14

cm, mặt trên lá nhẵn, mặt dưới lá có lông Lưỡi nhỏ dài 0,7-1,2 cm, có lông, xẻ sâu thành 2 thùy không đều nhau Cụm hoa dạng chùy, dài 20-38 cm; thường chỉ có 1 vài nhánh phía dưới có 2 hoa do đó cụm hoa nhìn rất giống dạng chùm, mỗi nhánh

có 1-2 hoa, các hoa xếp sít nhau; có lông màu nâu vàng bao phủ Lá bắc dài 4 mm hoặc hơn; lá bắc con màu nâu, khô xác, dài 3-3,5 cm, mép có lông ngắn Đài hàn liền thành ống, dài 1,8-2 cm, có màu nâu hồng, xẻ sâu một bên, đầu chia 4 răng ngắn; mặt ngoài và mép đài có nhiều lông ngắn Tràng 3, dính nhau ở dưới thành ống tràng màu trắng, dài 1-1,2 cm; các thùy đều có màu trắng, mép có lông Thùy giữa hình trứng dài 3-4 cm, 2 thùy bên hình elip, dài 1,8-2 cm Cánh môi dài 4-4,5

cm, rộng 3,8-4,3 cm; đầu xẻ 2 thùy, màu vàng có sọc đỏ, mép không trắng, ở giữa

có màu chín quả mơ (vàng cam) Bộ nhị 1, chỉ nhị dài 1,4- 1,6 cm, màu vàng nhạt; bao phấn dài 1,2 cm, không kéo dài thành mào Nhị lép bên màu đỏ, dài 3-6 mm

Bộ nhụy 3 lá noãn dính nhau tạo thành bầu hình cầu, màu nâu vàng, có nhiều lông; vòi nhụy màu trắng, dài khoảng 3,5 cm; núm nhụy màu trắng, có lông mi; 2 tuyến mật màu vàng, nằm trên bầu, dài khoảng 4 mm Chỉ nhị dài 1,4- 1,6 cm, màu vàng nhạt Bao phấn dài 1,2 cm, không kéo dài thành mào Nhị lép bên màu đỏ, dài 3-6

mm Bầu hình cầu, màu nâu vàng, có nhiều lông Quả hình cầu, có nhiều lông, đường kính 2,8- 3,5 cm, khi chín thường có lá bắc con tồn tại, mỗi quả thường có có 48-54 hạt

Cây mọc rải rác trong rừng thứ sinh, ven sườn núi, núi đá vôi Cây ra hoa

tháng 4, có quả tháng 5-8

Hình 3.1: Alpinia menghaiensis S Q Tong & Y M Xia

(a) thân khí sinh mang lá, (b) cụm hoa, (c) hoa, (d) lá bắc con, (e) ống đài, (f) tràng

hoa, (g) cánh môi, (h) bộ nhụy, (i) bộ nhị, (j) cụm quả, (k) quả, (l) quả (từ trái

sang): cắt ngang, cắt dọc, (m): hạt, (n) hạt (từ trái sang): cắt dọc, cắt ngang

Hình 3.2: Đặc điểm hình thái của A.menghaiensis S Q Tong & Y M Xia

(a) dạng sống, (b) lưỡi nhỏ, (c) đỉnh lá, (d) gốc lá, (e) mặt dưới lá, (f) mặt trên

lá, (g) cụm hoa, (h) lá bắc với hoa, (i) cấu tạo hoa (từ trái sang): lá bắc, lá bắc con, đài, tràng, cánh môi, nhị, ống hoa bổ dọc, bộ nhụy, (j) nhị lép dính với ống đài, (k) bầu với hai tuyến mật, (i) núm nhụy có lông, (m) cụm quả, (n) lá bắc con và quả, (o)

nhánh mang hai quả, (p) quả cắt ngang và cắt dọc, (q) hạt

3.1.1.2 Đặc điểm vi phẫu

a) Đặc điểm vi phẫu rễ

Vi phẫu tiết diện tròn cấu tạo chia thành 2 phần gồm phần vỏ và phần trụ giữa Phần vỏ gồm: Biểu bì (2), gồm có 1 hàng tế bào xếp đều đặn nhau ngoài cùng mang lông hút (1); Ngoại bì (3), cấu tạo bởi 3 lớp tế bào có kích thước lớn hơn tế bào biểu bì xếp đều đặn nhau Mô mềm vỏ (5), gồm rất nhiều tế bào kích thước và hình thù đa dạng sắp xếp lộn xộn nhau Tế bào tiết (4), sắp xếp rải rác trong mô mềm vỏ Nội bì (6), gồm 1 hàng tế bào xếp đều đặn nhau, các tế bào có thành dày lên ở 3 cạnh tạo thành hình chữ U Phần trụ giữa gồm: Trụ bì (7), gồm 2 hàng tế bào dẹt, kích thước hàng ngoài bằng tế bào nội bì, kích thước hàng trong nhỏ hơn Gỗ (8), cấu tạo bởi các mạch gỗ nhỏ ở phía ngoài và lớn dần vào bên trong Libe (9), gồm các tế bào có kích thước đa dạng, bó libe xếp xen kẽ với các bó gỗ Mô mềm ruột (10), cấu tạo bởi các tế bào có kích thước và hình thù đa dạng, xếp lộn xộn nhau

Hình 3.3: Vi phẫu rễ của A.menghaiensis S Q Tong & Y M Xia

1 Lông hút; 2 Biểu bì; 3 Ngoại bì; 4 Tế bào tiết; 5 Mô mềm vỏ; 6 Nội bì; 7 Trụ

bì; 8 Gỗ; 9 Libe; 10 Mô mềm ruột b) Đặc điểm vi phẫu lá

Gân chính mặt trên lõm, mặt dưới lồi tròn Biểu bì trên (2), cấu tạo bởi 1 hàng tế bào hình chữ nhật xếp đều đặn nhau, phía ngoài mang lông che chở đơn bào (1) Mô mềm (3), gồm những tế bào hình đa giác, kích thước không đều, sắp xếp lộn xộn nhau Bó libe gỗ cấp 1 kích thước không đều, xếp thành 2 hàng: hàng trên

là các bó có kích thước nhỏ, hàng dưới là các bó có kích thước lớn nằm sát biểu bì dưới Mỗi bó gồm gỗ (4) ở trên, libe (5) ở dưới; gỗ gồm mạch gỗ nhỏ, không đều, sắp xếp lộn xộn, mô mềm gỗ hình đa giác, xếp khít nhau, vách cellulose; Mô cứng (6), xếp thành vòng khép kín xung quanh bó libe gỗ Biểu bì dưới (7), cấu tạo bởi 1 hàng tế bào hình chữ nhật xếp đều đặn nhau, phía ngoài mang lông che chở đơn bào (1)

Hình 3.4: Vi phẫu lá của A.menghaiensis S Q Tong & Y M Xia

1 Lông che chở đơn bào; 2 Biểu bì trên; 3 Mô mềm; 4 Gỗ; 5 Libe; 6 Mô cứng;

3 thùy Tràng 3, dính nhau ở dưới thành ống tràng màu trắng, dài 1-1,2 cm Thùy giữa có kích thước 3,6 x 3,5cm, mặt ngoài màu hồng nhạt hoặc trắng, mặt trong màu trắng, mép có lông; 2 thùy bên có kích thước 3,3 x 1,5 cm, mặt trong màu trắng, mặt ngoài có mép màu hồng nhạt và có lông Cánh môi có kích thước 4,5 x 4,3 cm; phía trên màu vàng đậm, có các tia sọc đỏ, đầu gần như không xẻ, ở giữa màu đỏ, mép màu vàng nhạt Chỉ nhị màu đỏ, dài 1,3 cm Bao phấn dài 1,5-1,6 cm; không kéo dài thành mào; 2 nhị lép bên màu đỏ, dài 6-8 mm Vòi nhụy màu trắng, dài 4 cm; núm nhụy màu trắng, có lông Tuyến mật màu vàng, dài khoảng 3 mm, nằm trong ống đài Quả hình cầu, đường kính 1,5-2 cm, có nhiều lông, khi chín màu

đỏ Mỗi quả có khoảng 36-42 hạt, hạt khi chín có vỏ màu nâu vàng

Mọc rải rác trong rừng thứ sinh, ven sườn núi, dưới tán rừng Cây ra hoa tháng 4-6, có quả tháng 6-8

Hình 3.5: A blepharocalyx var glabrior (Hand.-Mazz.) T.L Wu

(a) thân khí sinh mang lá, (b) cụm hoa, (c) hoa, (d) lá bắc con, (e) ống đài, (f) tràng

hoa, (g) cánh môi, (h) bộ nhị, (i) bộ nhụy, (j) cụm quả, (k) quả, (l) quả cắt dọc, (m)

quả cắt ngang (n) hạt.

Hình 3.6: Một số đặc điểm hình thái của A blepharocalyx var glabrior

(Hand.-Mazz.) T.L Wu

(a) dạng sống, (b) rễ, (c) lưỡi lá (d) mặt dưới lá (e) mặt trên lá, (f) cụm hoa, (g) hoa, (h) cấu tạo hoa (từ trái sang): lá bắc con, đài, tràng, cánh môi dính với hai nhị lép bên, nhị, ống hoa bổ dọc, bộ nhụy,( i) lá bắc con, (j) đài, (k) tràng, (l) cánh môi dính với hai nhị lép, (m) núm nhụy có lông, (n) bầu với hai tuyến mật, (o) nh ị lép bên dính với ống tràng, (p) bầu cắt ngang, (q) bộ nhị và ống tràng (r) cụm quả, (s)

quả, (t) quả cắt ngang và cắt dọc, (u),(v) hạt.

3.1.2.2 Đặc điểm vi phẫu

a) Đặc điểm vi phẫu rễ

Vi phẫu tiết diện tròn cấu tạo chia thành 2 phần gồm phần vỏ và phần trụ giữa Phần vỏ gồm: Biểu bì (2), gồm có 1 hàng tế bào xếp đều đặn nhau ngoài cùng mang lông hút (1); Ngoại bì (3), cấu tạo bởi 2 lớp tế bào có kích thước bằng tế bào biểu bì xếp đều đặn nhau Mô mềm vỏ (5), gồm rất nhiều tế bào kích thước và hình thù đa dạng sắp xếp lộn xộn nhau Tế bào tiết (4), sắp xếp rải rác trong mô mềm vỏ Nội bì (6), gồm 1 hàng tế bào xếp đều đặn nhau, các tế bào có thành dày lên ở 3 cạnh tạo thành hình chữ U Phần trụ giữa gồm: Trụ bì (7), gồm 2 hàng tế bào dẹt kích thước nhỏ hơn tế bào nội bì Gỗ (8), cấu tạo bởi các mạch gỗ nhỏ ở phía ngoài

và lớn dần vào bên trong Libe (9), gồm các tế bào có kích thước đa dạng, bó libe xếp xen kẽ với các bó gỗ Mô mềm ruột (10), cấu tạo bởi các tế bào có kích thước

và hình thù đa dạng, xếp lộn xộn nhau

Hình 3.7: Vi phẫu rễ của A blepharocalyx var glabrior (Hand.-Mazz.) T.L

Wu

1 Lông hút; 2 Biểu bì; 3 Ngoại bì; 4 Tế bào tiết; 5 Mô mềm vỏ; 6 Nội bì; 7 Trụ

bì; 8 Gỗ; 9 Libe; 10 Mô mềm ruột

gỗ gồm mạch gỗ nhỏ, không đều, sắp xếp lộn xộn, mô mềm gỗ hình đa giác, xếp khít nhau, vách cellulose Mô cứng (5) xếp thành vòng khép kín xung quanh bó libe

gỗ Biểu bì trên (6), cấu tạo bởi 1 hàng tế bào hình chữ nhật xếp đều đặn nhau, phía ngoài không mang lông che chở

Hình 3.8: Vi phẫu lá của A blepharocalyx var glabrior (Hand.-Mazz.) T.L

Wu

1 Biểu bì trên; 2 Mô mềm; 3 Gỗ; 4 Libe; 5 Mô cứng; 6 Biểu bì dưới

3.1.3 Riềng nhiều hoa (Alpinia polyantha D Fang.)

3.1.3.1 Đặc điểm hình thái

Thân rễ bò, thân giả cao 1,5-4 (4,6) m Bẹ lá có sọc nổi chạy dọc, nhiều lông Phiến lá cỡ 50-100 x 15-20 cm; mặt trên phiến lá nhẵn, xanh đậm, có lông ở gân lá; mặt dưới có lông trắng mịn; gốc phiến lá hình nêm, đầu nhọn; cuống lá dài 4-8 cm

có lông Lưỡi lá dài 1,5-2 cm, xẻ thành 2 thùy khá đều nhau, có nhiều lông Cụm hoa dạng chùy, cỡ 30-54 x 7-10 cm; phân nhiều nhánh, các nhánh dài 1-3 cm, mỗi nhánh 5-8 hoa Lá bắc tổng bao hình mác rộng, cỡ 25-27-×5-5.5 cm, lá bắc hình mác cỡ 1-1,2 x 0,3-0,4 cm Đài màu đỏ, dài 0,8-1,4 cm, xẻ sâu xuống một bên Cánh môi hình trứng cỡ 1,6-2,3 x 1,6-2,2 cm, màu vàng nhạt, hai bên gần gốc có các sọc ngang màu đỏ tía, đầu cánh môi xẻ xuống 2-3 mm thành 2 thùy nhọn Chỉ nhị dài 1,8-2,2 cm, màu vàng nhạt; bao phấn dài 8-12 mm, mào bao phấn dài cỡ 1,8-2 mm Bầu hình cầu, màu xanh, có lông ngắn Quả hình cầu, có lông ngắn, đường kính 1-1,5 cm, khi chín màu đỏ, có đài tồn tại, mỗi quả có 12-14 hạt

Mọc rải rác trong rừng thứ sinh, rừng hỗn giao tre nứa, dưới tán rừng, ven suối ẩm Cây ra hoa tháng 4-6, có quả tháng 6-10

Hình 3.9: Alpinia polyantha D Fang

(a) thân khí sinh mang lá, (b) cụm quả, (c) nhánh quả, (d) quả cắt dọc

Hình 3.10: Đặc điểm hình thái của A polyantha D Fang

(a) dạng sống, (b) rễ, (c) lưỡi lá, (d) mặt dưới lá, (e) mặt trên lá, (f) cụm hoa và

lá, (g) cấu tạo cụm hoa (từ trái sang): lá bắc tổng bao, cụm hoa, (h) cụm hoa, (i) cấu tạo nhánh hoa: nhánh hoa, lá bắc, hoa (j) cấu tạo hoa (từ trái sang): lá đài, bầu với tràng và nhụy, cánh môi, nhị, (k) cụm quả, (l) nhánh mang quả, (m)

quả có đài tòn tại, (n) quả cắt ngang và cắt dọc, (o) cấu tạo hạt

3.1.3.2 Đặc điểm vi phẫu

a) Đặc điểm vi phẫu rễ

Vi phẫu tiết diện tròn cấu tạo chia thành 2 phần gồm phần vỏ và phần trụ giữa Phần vỏ gồm: Biểu bì (2), gồm có 1 hàng tế bào xếp đều đặn nhau ngoài cùng mang lông hút (1); Ngoại bì (3), cấu tạo bởi 3 lớp tế bào có kích thước lớn hơn tế bào biểu bì xếp đều đặn nhau Mô mềm vỏ (5), gồm rất nhiều tế bào kích thước và hình thù đa dạng sắp xếp lộn xộn nhau Tế bào tiết (4), sắp xếp rải rác trong mô mềm vỏ Nội bì (6), gồm 1 hàng tế bào xếp đều đặn nhau, các tế bào có thành dày lên ở 3 cạnh tạo thành hình chữ U Phần trụ giữa gồm: Trụ bì (7) , gồm 2 hàng tế bào dẹt kích thước nhỏ hơn tế bào nội bì Gỗ (8), cấu tạo bởi các mạch gỗ nhỏ ở phía ngoài và lớn dần vào bên trong Libe (9), gồm các tế bào có kích thước đa dạng, bó libe xếp xen kẽ với các bó gỗ Mô mềm ruột (10), cấu tạo bởi các tế bào có kích thước và hình thù đa dạng, xếp lộn xộn nhau

Hình 3.11: Vi phẫu rễ của A polyantha D Fang

1 Lông hút; 2 Biểu bì; 3 Ngoại bì; 4 Tế bào tiết; 5 Mô mềm vỏ; 6 Nội bì; 7 Trụ

bì; 8 Gỗ; 9 Libe; 10 Mô mềm ruột