Tổng hợp và thử độc tính tế bào ung thư của một ố dẫn chất thể n3 của 2 (2 trifluoromethoxyphenyl) 3 h quinazolin 4 on

BỘ Y TẾ TRƯ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI ỘI DƯƠNG MẠNH QUÂN Mã sinh viên: 1201484 TỔNG ỔNG HỢP VÀ V THỬ Ử ĐỘC TÍNH TẾ BÀO UNG THƯ CỦA ỦA MỘT SỐ DẪN ẪN CHẤT THẾ N3 CỦA ỦA 2-(2TRIFLUOROMETHOXYPHENYL)-3HTRIFLUOROMETHOXYPHENYL) QUINAZOLIN ON QUINAZOLIN-4-ON KHÓA LUẬN LU TỐT NGHIỆP DƯỢC ỢC SĨ HÀ NỘI – 2017 BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI DƯƠNG MẠNH QUÂN Mã sinh viên: 1201484 TỔNG HỢP VÀ THỬ ĐỘC TÍNH TẾ BÀO UNG THƯ CỦA MỘT SỐ DẪN CHẤT THẾ N3 CỦA 2-(2TRIFLUOROMETHOXYPHENYL)-3HQUINAZOLIN-4-ON KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ Người hướng dẫn: TS Văn Thị Mỹ Huệ TS Lê Nguyễn Thành Nơi thực hiện: Bộ mơn Hóa hữu cơ-Đại học Dược Hà Nội Trung tâm Nghiên cứu Phát triển thuốc-Viện Hóa sinh biển-Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam HÀ NỘI – 2017 LỜI CẢM ƠN Để hồn thành khóa luận tốt nghiệp thời hạn, đạt mục tiêu đề ra, thời gian vừa qua, em nhận giúp đỡ tận tâm từ thầy cơ, bạn bè ngồi trường Đại học Dược Hà Nội Nhân dịp này, em xin bày tỏ lòng biết ơn tới: TS.Văn Thị Mỹ Huệ, cô thường xuyên động viên, giúp đỡ, tạo điều kiện cho em thực đề tài TS Lê Nguyễn Thành, Trung tâm Nghiên cứu Phát triển thuốc – Viện Hóa Sinh Biển–Viện Hàn lâm Khoa học Cơng nghệ Việt Nam, thầy theo dõi giúp đỡ em q trình làm khóa luận Các thầy giáo Bộ mơn Hóa Hữu truyền đạt kiến thức quý báu suốt thời gian em học tập trường tạo tảng giúp em thực tốt nhiệm vụ khóa luận tốt nghiệp Các anh chị cán Trung tâm Nghiên cứu Phát triển thuốc, phịng Nghiên cứu cấu trúc – Viện Hóa học – Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam giúp đỡ em trình thực nghiệm Cuối cùng, em xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới gia đình, bạn bè quan tâm, giúp đỡ, tạo điều kiện để em tập trung hồn thành khóa luận tốt nghiệp hạn, thu kết mong muốn Hà Nội, ngày 18tháng5 năm 2017 Sinh viên Dương Mạnh Quân MỤC LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, SƠ ĐỒ ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN .3 1.1 Hoạt tính kháng ung thư dẫn chất 6-alkylamino 2(substituted phenyl)quinazolin-4-on 1.2 Hoạt tính kháng ung thư dẫn chất N3 quinazolin-4(3H)-on 1.3 Phương pháp tổng hợp dẫn chất N3 quinazolin-4(3H)-on 16 1.3.1 Phản ứng quinazolin-4(3H)-on với dẫn chất halogen 16 1.3.2 Phản ứng tổng hợp từ 2-arylindol muối amoni amin 16 1.3.3 Phản ứng ngưng tụ dẫn chất benzamide amin bậc với acid formic 17 1.3.4.Phản ứng tổng hợp từ Benzo[d]-[1,3] oxazin-4-on 18 CHƯƠNG 2: NGUYÊN LIỆU, THIẾT BỊ, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .19 2.1 Nguyên vật liệu, thiết bị 19 2.2 Thiết bị thí nghiệm 19 2.3 Nội dung nghiên cứu 20 2.4 Phương pháp nghiên cứu 20 2.3.1 Phương pháp tổng hợp 20 2.3.2 Phương pháp tinh chế xác định cấu trúc 20 CHƯƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 24 3.1 Tổng hợp hóa học 24 3.1.1.Tổng hợp dẫn chất trung gian 6-diethylamino-2-(2trifluoromethoxy-phenyl) quinazolin-4-on 25 3.1.2.Tổng hợp dẫn chất N3của 6-diethylamino-2-(2trifluoromethoxy-phenyl)quinazolin-4-on (4a-d) 25 3.2 Kiểm tra độ tinh khiết, khẳng định cấu trúc 29 3.2.1 Kiểm tra độ tinh khiết 29 3.2.2 Khẳng định cấu trúc 31 3.3 Thử hoạt tính gây độc tế bào ung thư 36 CHƯƠNG 4: BÀN LUẬN 38 4.1 Về tổng hợp hóa học 38 4.1.1 Tổng hợp dẫn chất trung gian 6-diethylamino-2-(2trifluoromethoxy-phenyl) quinazolin-4-on 38 4.1.2 Tổng hợp dẫn chất N3 2-(2-trifluoromethoxy-phenyl) quinazolin-4-on 39 4.2 VỀ XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC 41 4.2.1.Phổ khối lượng MS: 41 4.2.2.Phổ hồng ngoại IR: 42 4.2.3 Phổ cộng hưởng từ hạt nhân proton (1H-NMR) 43 4.2.3 Phổ cộng hưởng từ hạt nhân 13C (13C-NMR) 45 4.3 Về hoạt tính kháng tế bào ung thư 47 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 51 TÀI LIỆU THAM KHẢO 52 DANH MỤC PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT 13 C-NMR Phổ cộng hưởng từ nhân 13C H-NMR Phổ cộng hưởng từ nhân 1H Ar Aryl CDCl3 Cloroform-D CTPT Công thức phân tử d Doublet Đ.v.c Đơn vị carbon dd Doublet of doublet DMAC N,N-dimethyl acetamid DMSO Dimethyl sulfoxid ED50 (effective dose) Liều có tác dụng với 50% cá thể EGFR (epidermal growth factor receptor) Thụ thể yếu tố phát triển biểu bì Et Ethyl EtOAc Ethylacetat IC50 (half maximal inhibitory concentration) nồng độ ức chế tối đa 50% cá thể IR Phổ hồng ngoại KLPT Khối lượng phân tử m Multiplet Me Methyl MS Phổ khối lượng s Singlet SKLM Sắc ký lớp mỏng t Triplet Tonc Nhiệt độ nóng chảy TT Thứ tự DMF Dimethylformamid DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 :Sự gia tăng hoạt tính kháng ung thư dẫn chất có nhóm N3 nghiên cứu El-Azab (2010) 11 Bảng 1.2: So sánh hoạt tính dẫn chất (XXII) với chất chuẩn Methotrexat 5-Florouracil 14 Bảng 2.1:Nguyên vật liệu dùng nghiên cứu 19 Bảng 1: Kết tổng hợp dẫn chất 4a-d 29 Bảng 3.2: Giá trị Rf Tnc dẫn chất 4a-d 30 Bảng 3.3: Kết phân tích phổ khối lượng dẫn chất 4a-d 31 Bảng 4: Số liệu phổ IR dẫn chất 4a-d 33 Bảng 3.5: Số liệu phổ 1H-NMR dẫn chất 4a-d 34 Bảng 3.6: Số liệu phổ 13C-NMR dẫn chất 4a-d 35 Bảng 3.7: Kết thử hoạt tính gây độc tế bào 4a-d dòng tế bào ung thư người 37 Bảng 4.1: Phổ 1H-NMR dẫn chất (3) 38 Bảng 2:Số liệu phổ NMR dẫn chất 5a: 40 DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, SƠ ĐỒ HÌNH VẼ Hình 1.1: Dẫn chất 2,3-dihydro-2-phenyl-4-quinazolinon Hình 1.2: Các dẫn chất với nhóm khác vòng phenyl nghiên cứu Mulakayala Hình 3: Cấu trúc nhóm hợp chất 6-alkylamino- 2,3-dihydro-3’methoxy-2-phenyl-4-quinazolinon Hình 4: Cấu trúc hợp chất 6-pyrolidin-(3’-methoxy-phenyl)-4quinazolinon (IV) Hình 1.5: Cấu trúc nhóm hợp chất 2-aryl-4-quinazolinon nghiên cứu Mann-Jen Hour (năm 2001) Hình 6: Cấu trúc dẫn chất với nhóm methoxy vị trí 3’ có hoạt tính cao nghiên cứu Mann-Jen Hour(2001) Hình 7: Cấu trúc dãy 6-Pyrrolidinyl-2-(2-substituted phenyl)-4quinazolinon Hình 8: Một số 2-arylquinazolinon IXa-c có hoạt tính tốt Hình 1.9: Khung cấu trúc dẫn chất quinazolinon với nhóm 6diethylamino nhóm vịng phenyl Hình 1.10: Cấu trúc dẫn chất 6-diethylamino-2-(2-trifluoromethoxy phenyl)3H-quinazolinon Hình 1.11: Cấu trúc dẫn chất N3 quinazolin-4-on nghiên cứu Hao Wu (2010) Hình 12: Các dẫn chất N3 nghiên cứu Rhee HK 10 Hình 13: Cấu trúc dẫn chất N3 quinazolinon có hoạt tính tốt nghiên cứu Deepak Kumar 11 Hình 14: Cấu trúc dẫn chất N3 thể hoạt tính kháng ung thư tốt nghiên cứu Ramesh cộng (2015) 12 Hình 15: Cấu trúc dẫn chất N3 nghiên cứu Nehad A El Sayed (2016) 13 Hình 16: Cấu trúc dẫn chất N3 nghiên cứu Ahmed Kamal cộng 13 Hình 1.17: Cấu trúc dẫn chất 2-(2-(4-substituted piperazine-1-yl)-5phenylthiazol-4-yl)-3-aryl quinazolinon nghiên cứu Ritesh N Sharma Rasik Ravani 14 Hình 18: Cấu trúc dẫn chất N3 có khả kháng ung thư tốt nghiên cứu Mohammad Mahdavi 15 Hình 19: Cấu trúc hoạt tính dẫn chất N3 2-phenyl quinazolin-4-on nghiên cứu Ahmed M Alafeefy Abdelkader E Ashour 16 Hình 1: Phổ khối lượng chất 4a 42 Hình 2: Phổ đồ hồng ngoại chất 4a 43 Hình 4.3: Phổ cộng hưởng từ hạt nhân proton (1H-NMR) chất 4a 44 Hình 4:Phổ cộng hưởng từ hạt nhân proton (1H-NMR) chất 5a 45 Hình 4.5: Phổ cộng hưởng từ hạt nhân 13C (13C-NMR) chất 4a 46 Hình 6:Phổ cộng hưởng từ hạt nhân 13C (13C-NMR) chất 5a 47 Hình 7: Mơ hình tương tác dẫn chất 6-diethylamino-2-(2trifluoromethyl phenyl) quinazolin-4(3H)-on với phức hợp topo-AND 48 Hình 8: Cấu trúc dẫn chất 6-diethylamino-2-(2-trifluoromethyl phenyl) quinazolin-4(3H)-on 48 Hình 9: Mơ hình tương tác dẫn chất dẫn đường (3): 6-diethylamino-2(2-trifluoromethoxy phenyl) quinazolin-4(3H)-on với phức hợp topo-AND 49 Ph ụ lục 5: Ph ổ HN M R Ph ụ lục 6: Phổ 13 C N MR Ph ụ lục 7: Phổ MS chấ t 4b Ph ụ lục 8: Ph ổ IR củ a Phụ lục 9: Phổ H- NM R chất 4c P h ụ lụ c 10 : P hổ 13 Phụ lục 11: Phổ MS chất 4c Ph ụ lụ c 12 : Ph ổ IR Phụ lục 13: Phổ H- NM R chất 4d Ph ụ lục 14: Ph ổ 13 C N M Ph ụ lục 15: Ph ổ M S củ Ph ụ lục 16: Ph ổ IR chấ Phụ lục 17: Phổ H- NM R chất trun g gian Phụ lục 18: Phổ H- NM R 5a Phụ lục 19: Phổ 13 C- NM R 5a ... 46 7 ,49 46 8 ,2 [M +H] + C2 0H2 0F3N3O2 4b 39 1 ,39 3 92, 1 [M +H] + 4c C2 1H2 2F3N3O2 40 5, 42 40 4 ,2 [M -H] - C2 7H2 6F3N3O3 4d 49 7, 52 49 8,1 [M +H] +  Phổ h? ??ng ngoại (IR) Phổ h? ??ng ngoại ghi máy Shimadzu Bộ mơn H? ?a... làm chất dẫn đường, khóa luận: ? ?Tổng h? ??p thử độc tính tế bào ung thư số dẫn chất N3 2- (2trifluoromethoxy phenyl)- 3H- quinazolin- 4- on. ” tiến h? ?nh với mục tiêu sau: 1 .Tổng h? ??p số dẫn chất N3 2- (2- trifluoromethoxyphenyl)- 3Hquinazolin -4- on. .. 3? ??); 7,18 ( 1H, d, J= Hz, H7 ); 3, 49 -3, 47 ( 4H, q, J= 7Hz, 2CH2-N6); 3, 39 ( 3H, s, CH3 -N3) ; 1 , 23 ( 6H, t, J=7Hz, 2CH3CH2-N6) 34 7,60 ( 1H, d, J=7,5Hz, H6 ’); 7,57-7, 52 ( 2H, m, H8 , H5 ); 7, 43 - 7 ,38 ( 3H,