Nghiên cứu một số phương pháp tách chiết ADN từ dấu vết máu trên các vật mang là vải sau khi bị giặt bằng xà phòng trong các vụ án hình sự phục vụ công tác giám định ADN (LV thạc sĩ)

Nghiên cứu một số phương pháp tách chiết ADN từ dấu vết máu trên các vật mang là vải sau khi bị giặt bằng xà phòng trong các vụ án hình sự phục vụ công tác giám định ADN (LV thạc sĩ)Nghiên cứu một số phương pháp tách chiết ADN từ dấu vết máu trên các vật mang là vải sau khi bị giặt bằng xà phòng trong các vụ án hình sự phục vụ công tác giám định ADN (LV thạc sĩ)Nghiên cứu một số phương pháp tách chiết ADN từ dấu vết máu trên các vật mang là vải sau khi bị giặt bằng xà phòng trong các vụ án hình sự phục vụ công tác giám định ADN (LV thạc sĩ)Nghiên cứu một số phương pháp tách chiết ADN từ dấu vết máu trên các vật mang là vải sau khi bị giặt bằng xà phòng trong các vụ án hình sự phục vụ công tác giám định ADN (LV thạc sĩ)Nghiên cứu một số phương pháp tách chiết ADN từ dấu vết máu trên các vật mang là vải sau khi bị giặt bằng xà phòng trong các vụ án hình sự phục vụ công tác giám định ADN (LV thạc sĩ)Nghiên cứu một số phương pháp tách chiết ADN từ dấu vết máu trên các vật mang là vải sau khi bị giặt bằng xà phòng trong các vụ án hình sự phục vụ công tác giám định ADN (LV thạc sĩ)Nghiên cứu một số phương pháp tách chiết ADN từ dấu vết máu trên các vật mang là vải sau khi bị giặt bằng xà phòng trong các vụ án hình sự phục vụ công tác giám định ADN (LV thạc sĩ)Nghiên cứu một số phương pháp tách chiết ADN từ dấu vết máu trên các vật mang là vải sau khi bị giặt bằng xà phòng trong các vụ án hình sự phục vụ công tác giám định ADN (LV thạc sĩ)

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM VIỆN SINH THÁI VÀ TÀI NGUYÊN SINH VẬT ĐẶNG THỊ THU GIANG NGHIÊN CỨU MỘT SỐ PHƢƠNG PHÁP TÁCH CHIẾT ADN TỪ DẤU VẾT MÁU TRÊN CÁC VẬT MANG LÀ VẢI SAU KHI BỊ GIẶT BẰNG XÀ PHÒNG TRONG CÁC VỤ ÁN HÌNH SỰ PHỤC VỤ CÔNG TÁC GIÁM ĐỊNH ADN LUẬN VĂN THẠC SĨ SINH HỌC HÀ NỘI – 2015 Số hoá Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM VIỆN SINH THÁI VÀ TÀI NGUYÊN SINH VẬT ĐẶNG THỊ THU GIANG NGHIÊN CỨU MỘT SỐ PHƢƠNG PHÁP TÁCH CHIẾT ADN TỪ DẤU VẾT MÁU TRÊN CÁC VẬT MANG LÀ VẢI SAU KHI BỊ GIẶT BẰNG XÀ PHÒNG TRONG CÁC VỤ ÁN HÌNH SỰ PHỤC VỤ CÔNG TÁC GIÁM ĐỊNH ADN Chuyên ngành: Sinh học thực nghiệm Mã số: 60 42 01 14 LUẬN VĂN THẠC SĨ SINH HỌC Ngƣời hƣớng dẫn khoa học: PGS.TS Nguyễn Văn Hà HÀ NỘI - 2015 Số hoá Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn Luận văn cao học Đặng Thị Thu Giang LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành bản luâ ̣n văn này xin bày tỏ lòng cảm ơn sâu sắ c tới Đại tá, PGS.TS Nguyễn Văn Hà - Phó giám đốc T rung tâm giám đinh ̣ Sinh học Pháp lý - Viê ̣n Khoa ho ̣c hiǹ h sự - Bô ̣ Công an đã rấ t tâ ̣n tiǹ h hướng dẫn suố t quá trin ̀ h nghiên cứu hoàn thành bản luâ ̣n văn Tôi xin chân thành cảm ơn Lañ h đa ̣o Viện Khoa học hình , Lãnh đạo Trung tâm đồng nghiệp Trung tâm giám đinh ̣ Sinh ho ̣c Pháp lý Viê ̣n Khoa ho ̣c hin ̀ h sự - Bô ̣ Công an đã đô ̣ng viên, giúp đỡ rất nhiều trình làm luận văn Tôi cũng xin chân thành cảm ơn các thầ y cô giáo th uô ̣c Viê ̣n Sinh thái Tài nguyên sinh vật , Viện Công nghệ Sinh học đã tâ ̣n tiǹ h truyề n đa ̣t kiế n thức và giúp đỡ suố t quá triǹ h ho ̣c tâ ̣p Cuố i cùng xin bày tỏ lòng biế t ơn đế n gia điǹ h và ba ̣n bè , đã đô ̣ng viên, góp ý tạo điều kiện cho suốt thời gian học tập nghiên cứu Hà Nội, ngày tháng năm 2015 Học viên Đặng Thị Thu Giang Số hoá Trung tâm Học liệu – ĐHTN K17 - Viện Sinh thái tài nguyên sinh vật http://www.lrc.tnu.edu.vn Luận văn cao học Đặng Thị Thu Giang MỤC LỤC MỞ ĐẦU 1 Tính cấp thiết việc nghiên cứu đề tài Mục tiêu nghiên cứu 3 Đối tượng phạm vi nghiên cứu 4 Nội dung nghiên cứu Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài Chƣơng TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Lịch sử giám định gen khoa học hình 1.2 Nhận thức chung về dấu vết máu khoa học hình 1.2.1 Khái niệm về máu 1.2.2 Cơ sở khoa học giám định dấu vết máu 1.3 Ảnh hưởng xà phòng lên dấu vết máu 1.4 Phát dấu vết máu vật mang vải sau bị giặt xà phòng 11 1.4.1 Mục đích 11 1.4.2 Phương pháp thu lượm dấu vết máu vật mang vải 12 1.4.3 Giám định định hướng dấu vết máu xác định tính đặc hiệu loài 12 1.5 Tách chiết ADN từ dấu vết máu 15 1.6 Định lượng ADN 16 1.7 Khuếch đại ADN (PCR) 17 1.8 Những khó khăn nâng cao hiệu PCR chất lượng ADN 21 1.9 Kỹ thuật điện di 22 1.9.1 Nguyên lý kỹ thuật điện di 22 1.9.2 Nguyên lý điện di máy giải trình tự gen ABI Prism 3130 Genetic Analyzer 23 1.10 Phân tích dấu vết ADN bị lẫn 23 1.11 Vấn đề nhiễm ADN 24 Số hoá Trung tâm Học liệu – ĐHTN K17 - Viện Sinh thái tài nguyên sinh vật http://www.lrc.tnu.edu.vn Luận văn cao học Đặng Thị Thu Giang 1.12 Tình hình nghiên cứu nước nước lĩnh vực nghiên cứu đề tài 26 CHƢƠNG VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 28 2.1 Vâ ̣t liê ̣u 28 2.1.1 Thiế t bi ̣ máy móc 28 2.1.2 Dụng cụ 28 2.2 Hóa chất 29 2.3 Phương pháp nghiên cứu 29 2.3.1 Phương pháp thu lượm dấu vết máu vật mang vải 29 2.3.2 Phương pháp giám định định hướng dấu vết máu 29 2.3.3 Phương pháp miễn dịch khuếch tán kép – Ouchterlony 30 2.3.4 Phương pháp tách chiết ADN từ dấu vết máu 31 2.3.5 Định lượng ADN 34 2.3.6 Phương pháp PCR 36 2.3.7 Kỹ thuật điện di máy điện di mao dẫn(Capillary Electrophoresis - CE) 36 2.4 Thiết kế bố trí thí nghiệm 37 2.4.1 Các mẫu khảo nghiệm tạo 37 2.4.2 Các mẫu tạo ký hiệu 1A, 1B, 1C, 2A, 2B, 3A, 3B, 4A, 4B, 5A, 5B, 5C, 6A, 6B, 7A, 7B, tiến hành bước thí nghiệm sau: 43 2.4.3 Tách chiết ADN dung dịch Chelex 5% kít PrepFiler 44 2.4.4 Thử nghiệm kết tách chiết kít PrepFiler mẫu từ vụ án cụ thể 44 CHƢƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 47 3.1 Kết nghiên cứu 47 3.1.1 Kết xác định định hướng dấu vết máu thu từ vụ án với dung dịch phenolphthalein 47 Số hoá Trung tâm Học liệu – ĐHTN K17 - Viện Sinh thái tài nguyên sinh vật http://www.lrc.tnu.edu.vn Luận văn cao học Đặng Thị Thu Giang 3.1.2 Kết xác định protein loài sử dụng kỹ thuật khuếch tán miễn dịch kép theo Ouchterlony 47 3.1.3 Kết thực nghiệm tách chiết phương pháp sử dụng chelex 5% tách chiết kít PrepFiler 47 3.1.4 Kết tách chiết phương pháp PrepFiler ứng dụng vào mẫu vụ án thực tế 56 3.1.5 Hình ảnh điện di số mẫu thực nghiệm, mẫu án thực tế 58 3.2 Thảo luận kết nghiên cứu 66 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 67 TÀI LIỆU THAM KHẢO 69 Số hoá Trung tâm Học liệu – ĐHTN K17 - Viện Sinh thái tài nguyên sinh vật http://www.lrc.tnu.edu.vn Luận văn cao học Đặng Thị Thu Giang DANH MỤC CÁC TƢ̀ VIẾT TẮT ADN (DNA) : Axit deoxyribonucleic ARN : Axit ribonucleic LR : Likelihood Ratio (tỉ lệ khả dĩ) RFU : Relative Flourescence Units (đơn vị huỳnh quang tương đối) RFLP : Restriction fragment Length Polymorphism (đa hình chiều dài đoạn cắt giới hạn) PCR : Polymerase Chain Reaction (phản ứng nhân bội gen) ProK : Proteinaza K STR : Short Tandem Repeat (đoạn lặp lại ngắn) VNTR : Variable Number Tandem Repeats (đoạn lặp có độ dài trung bình) KHHS : Khoa học hình Số hoá Trung tâm Học liệu – ĐHTN K17 - Viện Sinh thái tài nguyên sinh vật http://www.lrc.tnu.edu.vn Luận văn cao học Đặng Thị Thu Giang DANH MỤC CÁC BẢNG, HÌNH MINH HỌA Bảng 1.1: Thành phần thể tích phản ứng PCR 36 Bảng 1.2: Các thành phần hóa chất sử dụng để điện di mao quản 37 Bảng 2.1: Kết định lượng ADN tách chiết chelex 5% 48 Bảng 2.2: Chất lượng ADN tách chiết chelex 5% 50 Bảng 2.3: Kết định lượng ADN tách chiết kít PrepFiler 52 Bảng 2.4: Chất lượng ADN tách chiết kít PrepFiler 54 Bảng 3.1: Kết định lượng ADN với mẫu máu vải bị giặt vụ án cụ thể 56 Bảng 3.2: Chất lượng ADN thu từ dấu vết máu bị giặt vụ án cụ thể 57 Hình 4.1: Biểu đồ kết điện di mẫu 1A, lần thực nghiệm 1.1 58 Hình 4.2: Biểu đồ kết điện di mẫu 1B, lần thực nghiệm 1.2 59 Hình 4.3: Biểu đồ kết điện di mẫu 6B, lần thực nghiệm 1.2 60 Hình 4.4: Biểu đồ kết điện di mẫu MA1.1 61 Hình 4.5: Biểu đồ kết điện di mẫu MA2.1 62 Hình 4.6: Biểu đồ kết điện di mẫu MA2.2 63 Hình 4.7: Biểu đồ kết điện di mẫu MA3.2 64 Hình 4.8: Biểu đồ kết điện di mẫu MA4.2 65 Số hoá Trung tâm Học liệu – ĐHTN K17 - Viện Sinh thái tài nguyên sinh vật http://www.lrc.tnu.edu.vn Luận văn cao học Đặng Thị Thu Giang MỞ ĐẦU Tính cấp thiết việc nghiên cứu đề tài Phân tích dấu vết ADN trở thành phần thiếu công tác giám định hình nói chung giám định dấu vết sinh học nói riêng công cụ quan trọng cho nhà điều tra phá án Thông qua phân tích ADN có thể truy nguyên, nhận dạng cá thể vụ án hình sự, tìm tung tích nạn nhân, người mất tích vụ cháy, vụ tai nạn, thảm họa… xác định quan hệ huyết thống Mỗi năm Viện Khoa học hình nhận hàng trăm trưng cầu giám định ADN từ vụ án, chủ yếu từ dấu vết máu, tinh trùng, tóc, tế bào, xương, mô tổ chức thể, móng tay móng chân… Thống kê năm 2014 Viện Khoa học hình có 421 vụ án yêu cầu giám định ADN, đó số lượng trưng cầu giám định ADN từ dấu vết máu 146 vụ số vụ án có dấu vết máu vật mang vải quần áo, chăn ga, gối đệm… 54 vụ với 144 mẫu cần giám định, số đó có nhiều vụ án vật mang dấu vết máu vải đưa đến giám định tình trạng qua ngâm giặt xà phòng, dấu vết vật mang không nguyên vẹn, giảm đáng kể về số lượng chất lượng ADN Gây khó khăn rất lớn công tác giám định Trong vụ án hình việc khẳng định dấu vết máu nạn nhân để lại quần áo đối tượng gây án hay máu đối tượng bám dính vật mang vải để lại trường nguồn chứng rất quan trọng, thủ phạm có thể vô tình hay cố ý dùng hóa chất xà phòng, chất tẩy rửa để giặt quần áo, hay vật mang vải có bám dính dấu vết máu đó Vì vậy việc tách chiết ADN từ dấu vết máu gặp rất nhiều khó khăn Do chất tẩy rửa tác động lên dấu vết phá hủy rửa trôi dấu vết Trong thực tế gặp trường hợp vậy mà áp dụng phương pháp tách chiết thông thường dấu vết máu có chất lượng tốt tỉ lệ thành K17 - Viện Sinh thái tài nguyên sinh vật Luận văn cao học Đặng Thị Thu Giang công rất thấp Hơn phải tách chiết, PCR, chạy điện di nhiều lần gây tốn hóa chất mất rất nhiều thời gian, mặt khác lượng dấu vết thường không nhiều nên đòi hỏi phải có phương pháp tách chiết hiệu để tránh sử dụng hết dấu vết mà không cho kết phân tích ADN dẫn đến không góp phần giải vụ án Trong thực tế vụ án có dấu vết máu vật mang vải theo lời khai đối tượng qua ngâm giặt xà phòng thực tế giám định quan sát mắt thấy vật mang dấu vết tương đối sạch, lượng dấu vết bám dính vật mang mờ nhạt với phương pháp tách chiết thông thường dùng chelex 5% không cho hiệu cao với lý do: - Lượng ADN tách chiết không đủ để thực phản ứng PCR - Không loại bỏ hết chất ức chế ảnh hưởng đến chất lượng ADN - Hình ảnh điện di kém: Mất alen, nhiều alen lặp ảnh hưởng đến việc phân tích kiểu gen Trong trình giải vụ án thực tế thấy nhiều dấu vết máu để lại vật mang nguồn chứng nhất không tách chiết ADN có chứa đó để phân tích giám định vụ án vào bế tắc Trước tình hình đó, chúng thấy việc nghiên cứu thử nghiệm phương pháp tách chiết khác dấu vết máu vật mang vải sau bị giặt xà phòng rất cần thiết, nhằm tạo quy trình ổn định tách chiết ADN từ dấu vết máu vật mang vải bị giặt xà phòng vụ án, góp phần giải yêu cầu thực tế đặt ra, góp phần hoàn thiện quy trình giám định ADN loại dấu vết khó thường gặp có giá trị Vì vậy việc tiến hành triển khai đề tài: “Nghiên cứu số phương pháp tách chiết ADN từ dấu vết máu vật mang vải sau bị giặt xà phòng vụ án hình phục vụ công tác giám định ADN” yêu cầu cấp thiết K17 - Viện Sinh thái tài nguyên sinh vật Luận văn cao học Đặng Thị Thu Giang 3.1.4 Kết tách chiết phương pháp PrepFiler ứng dụng vào mẫu vụ án thực tế Sau trình thực nghiệm tách chiết phương pháp PrepFiler chúng tiến hành thử lại kết mẫu lấy từ vụ án rõ Số lượng mẫu mẫu máu người quần áo bị giặt vụ án thực tế Áp dụng phương pháp tách chiết kít PrepFiler vào mẫu án vụ án có mẫu mẫu máu người quần áo bị giặt gửi trưng cầu giám định Viện Khoa học hình sự, cho kết bảng 3.1 thể Phân tích thấy: nồng độ ADN thu thấp nhất 0,13 ng/µl, cao nhất 2,2 ng/µl, với hiệu tách vậy đủ để thực phản ứng PCR lưu mẫu theo nguyên tắc bảo toàn dấu vết hình Bảng 3.1 Kết định lượng ADN với mẫu máu vải bị giặt vụ án cụ thể STT Tên mẫu Nồng độ ADN (ng/µl) MA1.1 2,20 MA1.2 1.22 MA2.1 0,15 MA2.2 0,13 MA3.1 1,67 MA3.2 1.42 MA4.1 2,00 MA4.2 1.20 K17 - Viện Sinh thái tài nguyên sinh vật 56 Luận văn cao học Đặng Thị Thu Giang Sau trình định lượng, tiến hành PCR chạy điện di phân tích kết máy giải trình tự gen để đánh giá chất lượng ADN thu phương pháp tách chiết dùng kít PrepFiler với số: số lượng locus bị mất alen, chiều cao TB peak, tỷ lệ peak bị lỗi, kết thể bảng 3.2 Hình thái peak sau điện di thể chất lượng ADN thu sau tách chiết PCR, cho thấy chất lượng ADN tốt, kiểu gen mẫu có rất locus bị mất alen, chiều cao peak từ 370 đến 2330 (rfu), tỷ lệ peak bị lỗi không đáng kể từ 3,5% đến 7,0% Như vậy, kiểu gen thu từ dấu vết máu người vật mang vải số vụ án sau tách chiết kít PrepFiler cho kết tốt, đủ để sử dụng truy nguyên cá thể, làm chứng có độ tin cậy cao, thuyết phục, giúp ích cho công tác điều tra phá án Bảng 3.2: Chất lượng ADN thu từ dấu vết máu bị giặt vụ án cụ thể Số lƣợng locus Chiều cao TB peak STT Tỷ lệ peak bị alen (RFU) bị lỗi (%) MA1.1 2330 MA1.2 1324 MA2.1 370 7,0 MA2.2 450 3,5 MA3.1 1260 MA3.2 1189 MA4.1 1250 MA4.2 600 K17 - Viện Sinh thái tài nguyên sinh vật 57 Luận văn cao học Đặng Thị Thu Giang 1.5 Hình ảnh điện di số mẫu thực nghiệm, mẫu án thực tế Sau hình ảnh điện di số mẫu thực nghiệm số mẫu vụ án thực tế Sau tách chiết kít PrepFiler, nhân bội kít Identifiler Direct (hãng ABI, Mỹ) chạy điện di máy phân tích gen ABI – 3130, phân tích kết theo hệ Identifiler phần mềm GeneMapper ID v3.2 Hình 4.1: Biểu đồ kết điện di mẫu 1A, lần thực nghiệm 1.1 K17 - Viện Sinh thái tài nguyên sinh vật 58 Luận văn cao học Đặng Thị Thu Giang Hình 4.2: Biểu đồ kết điện di mẫu 1B, lần thực nghiệm 1.2 K17 - Viện Sinh thái tài nguyên sinh vật 59 Luận văn cao học Đặng Thị Thu Giang Hình 4.3: Biểu đồ kết điện di mẫu 6B, lần thực nghiệm 1.2 K17 - Viện Sinh thái tài nguyên sinh vật 60 Luận văn cao học Đặng Thị Thu Giang Hình 4.4: Biểu đồ kết điện di mẫu MA1.1 K17 - Viện Sinh thái tài nguyên sinh vật 61 Luận văn cao học Đặng Thị Thu Giang Hình 4.5: Biểu đồ kết điện di mẫu MA2.1 K17 - Viện Sinh thái tài nguyên sinh vật 62 Luận văn cao học Đặng Thị Thu Giang Hình 4.6: Biểu đồ kết điện di mẫu MA2.2 K17 - Viện Sinh thái tài nguyên sinh vật 63 Luận văn cao học Đặng Thị Thu Giang Hình 4.7: Biểu đồ kết điện di mẫu MA3.2 K17 - Viện Sinh thái tài nguyên sinh vật 64 Luận văn cao học Đặng Thị Thu Giang Hình 4.8: Biểu đồ kết điện di mẫu MA4.2 K17 - Viện Sinh thái tài nguyên sinh vật 65 Luận văn cao học Đặng Thị Thu Giang Thảo luận kết nghiên cứu Đề tài đươ ̣c tiế n hành nghiên cứu thực nghiê ̣m sở các trang thiế t bị phòng thí nghiệm Trung tâm giám định Sinh học pháp lý , Viê ̣n Khoa học hình - Bô ̣ Công an Đề tài đã định hướng áp dụng thêm mô ̣t phương pháp tách chiết dấu vết máu phục vụ việc giám định đó phương pháp dùng kít PrepFiler Để tạo quy trình giám định chuẩn phù hợp với điều kiê ̣n có phòng thí nghiệm So sánh với phương pháp tách chiế t ADN từ dấu vết máu thông thường dùng chelex 5% chúng nhận thấy: - Nế u sử du ̣ng phươ ng pháp tách chiết kít PrepFiler tách chiết mẫu máu vật mang vải bị giặt xà phòng tạo thực nghiệm thử lại mẫu vụ án cụ thể đều cho kế t quả rấ t tố t (nồng độ thấp nhất 0,13 ng/µl, cao nhất 2,2 ng/µl), lươ ̣ng ADN thu đươ ̣c hoàn toàn đủ để thực bước t iế p theo : Định lượng PCR, lượng ADN lại đủ lưu để có thể thực lặp lại, kiểm tra đối chiếu kết - Hình ảnh điện di c ho thấ y với mẫu tạo thực nghiệm số mẫu vụ án trưng cầu Viện Khoa học hình sự, chất lượng ADN thu từ tách chiết kít PrepFiler không bị mất alen locus gen, cân peak alen locus locus với nhau, tỷ lệ peak lỗi không có không đáng kể Kết thu đáng tin cậy, đủ để truy nguyên cá thể làm chứng vụ án hình Kế t quả nghiên cứu đề tài góp phầ n giải quyế t nhanh chóng, xác kịp thờ i yêu cầ u thực tiễn đă ̣t với công tác giám đinh ̣ ADN ta ̣i Viê ̣n Khoa học hình - Bộ Công an, viê ̣c đưa quy trình giám đinh ̣ chi tiế t cho tách chiết ADN từ dấu vết máu vật mang vải bị giặt xà phòng quy trình ứng du ̣ng trực tiế p giám đinh ̣ các vu ̣ án thực tế cho thấ y đề tài hoàn thành tốt mục tiêu đề ứng dụng trực tiếp vào thực tiễn phòng thí nghiệm Viện Khoa học hình - Bộ Công an K17 - Viện Sinh thái tài nguyên sinh vật 66 Luận văn cao học Đặng Thị Thu Giang KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Kết luận Sau đề tài nghiên cứu hoàn thiện có thể rút số kết luận sau: Xác định phương pháp tách chiết ADN tối ưu nhất từ dấu vết máu người vật mang vải bị giặt xà phòng phù hợp với điều kiện giám định có Viện Khoa học hình - Bộ Công an đó phương pháp tách chiết sử dụng kít PrepFiler Từ kết nghiên cứu đề tài, góp phần rút ngắn thời gian, tiết kiệm chi phí tách chiết lượng ADN hiệu nhất nhờ lựa chọn đúng phương pháp phù hợp dấu vết máu vật mang vải sau bị giặt xà phòng vụ án hình Ứng dụng phương pháp tách chiết phù hợp để tách chiết thành công ADN dấu vết máu vật mang vải sau bị giặt xà phòng vụ án hình Giúp truy nguyên cá thể, có để xác định tội phạm, nguồn chứng để giải vụ án hình Hoàn thiện quy trình tách chiết ADN từ dấu vết máu người vật mang vải bị giặt xà phòng thường gặp vụ án hình Tạo tiền đề để tiến hành thực nghiệm tách chiết mẫu sinh học khác phục vụ công tác giám định gen hình Kiến nghị Sau thực đề tài chúng có kiến nghị sau: Vật mang dấu vết yếu tố có tác động rất lớn tới chất lượng dấu vết máu đó cần có nghiên cứu tác động số vật mang tiêu biểu lên chất lượng dấu vết phục vụ giám định sinh học, đặc biệt giám định gen điều kiện Việt Nam K17 - Viện Sinh thái tài nguyên sinh vật 67 Luận văn cao học Đặng Thị Thu Giang Nên đầu tư kinh phí để có thể nghiên cứu tối ưu hóa phương pháp tách chiết, tinh loại mẫu sinh học khác thân tóc, tổ chức thể người biến tính, bị ngâm foocmol, tối ưu hóa phương pháp PCR Để hoàn thiện quy trình giám định ADN loại mẫu có chất lượng K17 - Viện Sinh thái tài nguyên sinh vật 68 Luận văn cao học Đặng Thị Thu Giang TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu Tiếng Việt Đặng Đức Trạch, Nguyễn Đình Hương, Phạm Mạnh Hùng, Ponsmand K.W, Wrigt P.E (1987), Miễn dịch học, Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật Đỗ Đình Rãng (2012), Hóa học hữu 2, Nhà xuất Giáo dục Hà Quốc Khanh, Nguyễn Văn Hà (2007), Giáo trình giám định ADN, Viện Khoa học hình - Bộ Công an Hồ Huỳnh Thùy Dương (2001), Sinh học phân tử Nhà xuất Y học Lê Đình Lương, Phan Cự Nhân (2003), Cơ sở di truyền học, Nhà xuất Giáo dục Lê Như Lĩnh (1999), Nghiên cứu tách chiết ADN từ tế bào máu và tế bào thể dùng cho giám định sinh học hình sự, Đề tài khoa học cấp Ngô Tiến Quý (2008), Bảo vệ và khám nghiệm trường, Nhà xuất Công an Nhân dân Ngô Tiến Quý (2013), Phát hiện, thu, bảo quản, nghiên cứu và giám định dấu vết sinh vật, Nhà xuất Công an Nhân dân Nguyễn Văn Hà (2011), Nghiên cứu tối ưu hóa phương pháp tách chiết và tinh ADN ti thể từ răng, xương người phục vụ giám định ADN ti thể điều kiện Việt Nam, Đề tài nghiên cứu khoa học cấp 10 Trịnh Tuấn Toàn (2011), Nghiên cứu và ứng dụng phương pháp giám định định hướng dấu vết máu dung dịch phenolphthalein Việt Nam, Đề tài nghiên cứu khoa học cấp 11 Võ Thị Thương Lan (2011), Sinh học phân tử tế bào và ứng dụng, Nhà xuất Giáo dục K17 - Viện Sinh thái tài nguyên sinh vật 69 Luận văn cao học Đặng Thị Thu Giang Tài liệu Tiếng Anh 12 Gill P, Whitaker J, Flaxman C, Brown N, Buckleton J: An investigation of the rigor of interpretation rules for STRs derived from less than 100 pg of DNA Forensic Sci Int 2000, 112:17-40 13 Gilbert N: Science in court: DNA’s identity crisis Nature 2010, 464:347-348 14 Kloosterman AD, Kersbergen P: Efficacy and limits of genotyping low copy number (LCN) DNA samples by multiplex PCR of STR loci J Soc Biol 2003, 197:351-359 15 Gaines ML, Wojtkiewicz PW, Valentine JA, Brown CL: Reduced volume PCR amplification reactions using the AmpFlSTR Profiler Plus kit J Forensic Sci 2002, 47:1224-1237 16 Smith PJ, Ballantyne J: Simplified low-copy-number DNA analysis by post-PCR purifiaction J Forensic Sci 2007, 52:820-829 K17 - Viện Sinh thái tài nguyên sinh vật 70 ... Nghiên cứu số phương pháp tách chiết ADN từ dấu vết máu vật mang vải sau bị giặt xà phòng vụ án hình phục vụ công tác giám định ADN yêu cầu cấp thiết K17 - Viện Sinh thái tài nguyên sinh vật Luận... việc nghiên cứu thử nghiệm phương pháp tách chiết khác dấu vết máu vật mang vải sau bị giặt xà phòng rất cần thiết, nhằm tạo quy trình ổn định tách chiết ADN từ dấu vết máu vật mang vải bị giặt. .. đệm… sau bị giặt xà phòng vụ án cụ thể mẫu khảo nghiệm Kết nghiên cứu giúp đưa nhận định với phương pháp tách chiết tối ưu nhất dấu vết máu vải bị giặt xà phòng, phục vụ tốt nhất công tác giám