BAO CAO DUOC LIEU sắc ký lớp mỏng

L/O/G/O NHÓM : LỚP ĐH DƯỢC BÁO CÁO DƯỢC LIỆU www.trungtamtinhoc.edu.vn NỘI DUNG: A Tổng quát SKLM B Chuẩn bị trước SKLM C D E F www.trungtamtinhoc.edu.vn Hệ dung môi dùng SKLM Các bước tiến hành SKLM Ứng dụng, công dụng SKLM Các tượng cách khắc phục A TỔNG QUÁT VỀ SKLM: I Phương pháp sắc ký: Khái niệm phương pháp sắc ký: Sắc ký phương pháp phân tách lý-hóa chất tách khỏi hỗn hợp dựa “phân bố” liên tục chúng pha, pha không chuyển động (pha tĩnh) pha chuyển động (pha động) dịch chuyển qua pha tĩnh theo phương xác định www.trungtamtinhoc.edu.vn I TỔNG QUÁT VỀ SKLM: I Phương pháp sắc ký: Hiệu dụng: Sắc ký phương pháp hữu hiệu để tách chất khỏi hỗn hợp, hỗn hợp phức tạp thành phần khác hàm lượng hỗn hợp dịch chiết hợp chất từ cỏ www.trungtamtinhoc.edu.vn A TỔNG QUÁT VỀ SKLM: I Phương pháp sắc ký: Các yếu tố quan trọng hệ thống sắc ký: 3.1 Pha tĩnh: www.trungtamtinhoc.edu.vn A TỔNG QUÁT VỀ SKLM 3.1.1 Cơ chế phân tách: Khả phân tách pha tĩnh phụ thuộc nhiều vào mức độ tiếp xúc pha tĩnh với mẫu thử pha động Yếu tố liên quan nhiều tới diện tích bề mặt riêng mật độ pha tĩnh Mật độ pha tĩnh cao, khả tạo cân pha lớn, hệ phân tách tốt Trong đó, chế phân bố hấp phụ sử dụng chủ yếu www.trungtamtinhoc.edu.vn A TỔNG QUÁT VỀ SKLM 3.1.2 Pha tĩnh Thông dụng dùng sắc ký hấp phụ Silica gel Sắc ký pha thuận thường dùng sắc ký lớp mỏng kĩ thuật sắc ký cột cổ điển hay cải tiến Chất lỏng sử dụng pha tĩnh chất phân cực ( phân bố pha thuận ) hay không phân cực (phân bố pha đảo ) www.trungtamtinhoc.edu.vn A TỔNG QUÁT VỀ SKLM II Phương pháp SKLM: Lịch sử phát Năm 1906, nhà bác học Nga Mikhail Tswett (18721919) cho dung dịch sắc tổ thực vật (Clorophyl Xanthophyl ) ete dầu hỏa lên cột nhồi bột mịn Calci carbonat, ông thấy sắc tố bị hấp phụ đầu cột Hình 1: Mikhail Tswett (1872-1919) www.trungtamtinhoc.edu.vn A TỔNG QUÁT VỀ SKLM Khi cho dung môi nguyên chất (ete dầu hỏa) lên cột, sắc tố di chuyển cột từ xuống dưới, sắc tố có tốc độ riêng, tách thành vùng hay vòng màu xếp chồng lên nhau, hình thành hệ mà Tsvet gọi sắc đồ Ông đặt tên cho phương pháp tách sắc ký (chromato-graphy) Theo hình dạng pha tĩnh , người ta xếp sắc ký lớp mỏng vào nhóm sắc ký mặt phẳng (planar choromatography – PC) www.trungtamtinhoc.edu.vn A TỔNG QUÁT VỀ SKLM II Phương pháp SKLM: Khái niệm: Sắc ký lớp mỏng kỹ thuật tách chất tiến hành cho pha động di chuyển qua pha tĩnh đặt hỗn hợp chất cần tách 1: Nắp hộp 2: Bản mỏng 3: Thang dung môi 4: Dung môi www.trungtamtinhoc.edu.vn Hình 2:SKLM E ỨNG DỤNG VÀ CÔNG DỤNG CỦA SKLM I ỨNG DỤNG CỦA SẮC KÍ LỚP MỎNG: Án định lượng – định lượng: Có cách để định lượng chất vết sắc ký: Tách chiết chất phân tích vết sắc ký dung môi thích hợp Sau làm dịch chiết phải định lượng chất kỹ thuật thích hợp (phổ hấp phụ, huỳnh quang…) Phương pháp dùng có nhiều trở ngại nhiều thời gian www.trungtamtinhoc.edu.vn E ỨNG DỤNG VÀ CÔNG DỤNG CỦA SKLM  Định lượng trực tiếp mỏng: đo điện tích hay cường độ màu vết sắc ký Hiện dùng hai kỹ thuật: Densitometer: chiếu chùm tia vào vết sắc ký đo cường độ hấp thụ huỳnh quang Xử lý ảnh với camera kỹ thuật số www.trungtamtinhoc.edu.vn E ỨNG DỤNG VÀ CÔNG DỤNG CỦA SKLM Hiện người ta đưa vào thị trường tráng lớp pha tỉnh mỏng với bột mịn, có kích thước hạt 5µm độ đồng cao Khi dùng độ nhạy độ phân giải tăng cường vì:    Vết sắc ký nhỏ Thời gian sắc ký ngắn Lượng dung môi www.trungtamtinhoc.edu.vn E ỨNG DỤNG VÀ CÔNG DỤNG CỦA SKLM II CÁC CÔNG CỤ CỦA SẮC KÝ LỚP MỎNG: Để công bố đặc điểm hợp chất cừa chiết tách cô lặp Để công bố đặc điểm hợp chất, bên cạnh số liệu phô rmn, đặc tính vật lý, lực triển quang…cũng cần giá trị Rf- hợp chất Muốn đo Rf: Sử dụng thước đo khoảng đường di chuyển hợp chất dung môi thực toán chia, kết Rf luôn nhỏ www.trungtamtinhoc.edu.vn E ỨNG DỤNG VÀ CÔNG DỤNG CỦA SKLM       Loại mỏng silicagel aluminz hang Mẻck Hoạt động lúc sử dụng tùy theo thời gian lấy mẫu Độ đầy Thay đổi thành phần dung môi dung ly Kỹ thuật giải ly Lượng mẫu chấm kên nhiều hay it www.trungtamtinhoc.edu.vn E ỨNG DỤNG VÀ CÔNG DỤNG CỦA SKLM II CÁC CÔNG CỤ CỦA SẮC KÝ LỚP MỎNG: 2.Để kiểm tra xem hai hợp chất có giống không? Có thể sử dụng Rf để so sánh hai hợp chất có giống không? Muốn kết luận hai hợp chất có giống hay không, phải đáp ứng lúc hai điều kiện sau:   Về Rf hai chất so sánh Về màu sắc hai vết loại thuốc thử www.trungtamtinhoc.edu.vn E ỨNG DỤNG VÀ CÔNG DỤNG CỦA SKLM II CÁC CÔNG CỤ CỦA SẮC KÝ LỚP MỎNG: Để tìm hiểu sơ tính chất mẫu chất khảo sát: 3.1 Biết số hợp chất có hỗn hợp mẫu ban đầu 3.2 Để kiểm tra độ tinh khiết hợp chất 3.3 Biết sơ thành phần phần trăm hợp chất có mẫu ban đầu 3.4 Biết sơ qua tính phân cực thành phần hợp chất có mẫu www.trungtamtinhoc.edu.vn E ỨNG DỤNG VÀ CÔNG DỤNG CỦA SKLM II CÁC CÔNG CỤ CỦA SẮC KÝ LỚP MỎNG: Để chuẩn bị cho việc sắc ký cột: 4.1 Tìm hệ dung môi bắt đầu cho sắc ký cột: Trước tiên phải sử dụng SKLM để dò tìm hệ dung môi giải ly cho phù hợp Với hỗn hợp mẫu chất kết phản ứng tổng hợp hữu Chọn hệ dung môi đẩy hợp chất cần quan tâm lên vị trí với: Rf = 0.2 - 0.3 4.2 Theo dõi trình sắc ký cột www.trungtamtinhoc.edu.vn E ỨNG DỤNG VÀ CÔNG DỤNG CỦA SKLM II CÁC CÔNG CỤ CỦA SẮC KÝ LỚP MỎNG: Để theo dõi diễn tiến phản ứng tổng hợp hữu cơ: Có phản ứng hóa học Sử dụng sắc ký lớp mỏng để the dõi phản ứng theo thời gian Để kiểm tra hơp chất có bền: Hơp chất tính chất bị thay đổi yếu tố bắt buộc phải vết đường chéo Để cô lập hợp chất Ưu điểm sắc ký lớp mỏng điều chế so với sắc ký cột: nhanh, dễ tìm dung môi thích hợp để giải ly tách tốt chất www.trungtamtinhoc.edu.vn F CÁC HIỆN TƯỢNG NGOẠI Ý THƯỜNG GẶP TRONG SKLM www.trungtamtinhoc.edu.vn CÁC HIỆN TƯỢNG NGOẠI Ý THƯỜNG GẶP TRONG SKLM www.trungtamtinhoc.edu.vn CÁC HIỆN TƯỢNG NGOẠI Ý THƯỜNG GẶP TRONG SKLM www.trungtamtinhoc.edu.vn CÁC HIỆN TƯỢNG NGOẠI Ý THƯỜNG GẶP TRONG SKLM www.trungtamtinhoc.edu.vn F Các tượng ngoại ý thường gặp cách khắc phục www.trungtamtinhoc.edu.vn L/O/G/O Thank You! www.themegallery.com www.trungtamtinhoc.edu.vn ... , người ta xếp sắc ký lớp mỏng vào nhóm sắc ký mặt phẳng (planar choromatography – PC) www.trungtamtinhoc.edu.vn A TỔNG QUÁT VỀ SKLM II Phương pháp SKLM: Khái niệm: Sắc ký lớp mỏng kỹ thuật tách... tĩnh thông dụng sắc ký lớp mỏng Silica gel với chế phân tách hấp phụ www.trungtamtinhoc.edu.vn A TỔNG QUÁT VỀ SKLM II Phương pháp SKLM: Hệ dung môi: Với sắc ký lớp mỏng, đặc biệt sắc ký hấp phụ,... II Phương pháp SKLM: So sánh với phương pháp khác nhóm sắc ký mặt phẳng (sắc ký giấy ) So với sắc ký giấy, thời gian triển khai sắc ký lớp mỏng nhanh hơn, lượng mẫu phân tích cần hơn, khả phân