NẤM côn TRÙNG tại vườn QUỐC GIA cát TIÊN NGUỒN tài NGUYÊN QUÝ CHO các ỨNG DỤNG SINH học

Hội nghị Khoa học kỷ niệm 35 năm Viện Khoa học Công nghệ Việt Nam – Hà Nội, ngày 26/10/2010 NẤM CÔN TRÙNG TẠI VƯỜN QUỐC GIA CÁT TIÊN: NGUỒN TÀI NGUYÊN QUÝ CHO CÁC ỨNG DỤNG SINH HỌC Lê Tấn Hưng, Võ Thị Hạnh, Lê Thị Bích Phượng, Trần Thạnh Phong, Trương Thị Hồng Vân, Somsak Sivichai Viện Sinh học Nhiệt đới 9/621 Xa lộ Hà Nội, Linh Trung, Thủ Đức Email: letanhung@itb.ac.vn Tóm tắt / Abstract: Nấm côn trùng nhóm nấm đặc trưng giới nấm nghiên cứu ứng dụng y học cổ truyền Trung Quốc, sản xuất thuốc chữa bệnh chất có hoạt tính sinh học Đặc biệt, nhiều loài nhóm ứng dụng rộng rãi đấu tranh sinh học kiểm soát côn trùng sâu hại trồng Các đợt khảo sát năm 2007 cho thấy Vườn Quốc gia Cát Tiên có đa dạng chủng loại nhóm nấm Tổng cộng 259 mẫu nấm thu thập Sơ định danh hình thái dựa hệ thống phân loại cho thấy có tổng cộng 41 loài ghi nhận thuộc 17 chi bao gồm Akanthomyces, Aschersonia, Beauveria, Conoideocrella, Cordyceps, Gibellula, Hirsutella, Hymenostilbe, Hypocrella, Isaria, Metarhizium, Moelleriella, Nomuraea, Ophiocordyceps, Paecilomyces, Torrubiella Verticillium Có đến 85% số mẫu thu có 15% mẫu thu mặt đất Kết thu nhận có 29 loài có hình thức sinh sản vô tính 12 loài có hình thức sinh sản hữu tính côn trùng nhện ghi nhận ký chủ của loài Tổng cộng 149 loài phân lập bảo quản nguồn nguyên liệu sinh học quý giá cho ứng dụng sau Entomopathogenic fungi which belong to particular fungal group have been interested in research and application in traditional Chinese medicines, drug and bioactive compound production Many species of this fungal group have been widely used as biological control agents of insect pests Surveys in 2007 recorded that Cat Tien National Park of Vietnam has a diverse number of entomopathogenic fungal species 259 fungal specimens were collected and 41 species that belong to 17 fungal genera have been identified including Akanthomyces, Aschersonia, Beauveria, Conoideocrella, Cordyceps, Gibellula, Hirsutella, Hymenostilbe, Hypocrella, Isaria, Metarhizium, Moelleriella, Nomuraea, Ophiocordyceps, Paecilomyces, Torrubiella and Verticillium Regarding to fungal distribution, 85% specimens were found on leaves of forest plants while only 15% specimens were on forest floor In addition, the number of anamorphic species was 29 and teleomorphic species was 12, and arthropod Orders were recorded as hosts of these fungal entomopatogens In laboratory, 149 cultures were successfully isolated and preserved, these will be the potential biological materials for further research and application Tiểu ban: Khoa học sống Mở đầu Trong tự nhiên, mối quan hệ nấm với côn trùng loài chân khớp khác cộng sinh đến ký sinh gây hại Thuật ngữ “entomogenous fungi” sử dụng khoa học dùng để loài nấm sống thể côn trùng Theo tác giả Evan (1988) [1], loài nấm chia làm bốn nhóm Nhóm cộng sinh bao gồm loài sống ký chủ mang lại lợi ích định lẫn nhau; nhóm nội ký sinh bao gồm loài sống bên đường tiêu hóa nhóm ngoại ký sinh bao gồm loài sống bám bên lớp biểu bì ký chủ, hai nhóm khả tiêu diệt ký chủ; nhóm ký sinh gây hại bao gồm loài nấm trực tiếp gián tiếp gây chết cho ký chủ Thuật ngữ “nấm côn trùng” (insect-pathogenic fungi hay entomopathogenic fungi) dùng để giới hạn loài nấm lây nhiễm côn trùng khỏe mạnh, gây hại tiêu diệt ký chủ (Samson cộng sự, 1988) [2] Ngoài ra, loài nấm ký sinh gây hại nhện loài chân khớp khác xếp vào nhóm nấm côn trùng cách thức xâm nhập, gây độc cho ký chủ, sinh sản, sinh bào tử tương tự Nấm côn trùng thiên địch phổ biến loài chân khớp khắp giới xem đối tượng kiểm soát sinh học (Hajek St Leger, 1994; Shah Pell, 2003) [3-4] Nhóm nấm có phân bố rộng, phân bố tính đa dạng loài nấm côn trùng tùy thuộc vào điều kiện môi trường, tính đa dạng loài côn trùng tình trạng ký chủ (Hajek and St Leger, 1994) [3] Khu vực có khí hậu nhiệt đới hay ôn đới, đặc biệt nước nhiệt đới có ẩm độ không khí cao, có đa dạng phong phú loài côn trùng điều kiện lý tưởng cho nấm côn trùng phát triển Nhiều loài nấm côn trùng ứng dụng rộng rãi đấu tranh sinh học kiểm soát dịch hại, phổ biến loài Beauveria bassiana, Metarhizium anisopliae Normurea rileyi Theo McCoy (1990) [5], tiêu chí quan trọng để loài nấm côn trùng sử dụng làm thuốc trừ sâu sinh học bao gồm (1) khả gây độc cho ký chủ cao, (2) có tác dụng nhanh, (3) có phổ ký chủ rộng, (4) có tính ổn định nuôi cấy bảo quản, (5) dễ dàng lên men chìm, (6) dễ kiểm soát phân tích số lượng, (7) an toàn cho người Theo Taborsky (1992) [6], ứng dụng sử dụng Metarhizium anisopliae cho đấu tranh sinh học thực vào năm 1888 Krassilstchik Tại Việt Nam, nhiều nghiên cứu thành công việc sử dụng nấm côn trùng phòng trị loại côn trùng sâu hại trồng, điển nấm Metarhizium anisopliae Beauveria bassiana ứng dụng phòng trừ mối nhà (Nguyễn Dương Khuê, 2005) [7], sâu khoang hại cải xanh (Võ Thị Thu Oanh cộng sự, 2005) [8], sâu hại đậu tương đậu xanh (Phạm Thị Thùy cộng sự, 2005) [9], rầy mềm loài sâu hại lúa (Trần Văn Hai cộng sự, 2006; Nguyễn Thị Lộc cộng sự, 2002) [10-11] Trong y học cổ truyền, Ophiocordyceps sinensis (tên cũ Cordyceps sinensis, tiếng Việt gọi “Đông Trùng, Hạ Thảo”) sử dụng thuốc trị bệnh bồi bổ thể từ 1000 năm qua nước châu Á, đặc biệt Trung Quốc Nhật Bản Đây loài nấm sống ký sinh sâu bướm thuộc loài Thitarodes armoricanus, tìm thấy vùng núi có độ cao từ 3000-5000 m Trung Quốc, Ấn Độ, Nepal Bhutan Trong y học cổ truyền Trung Quốc, “Đông Trùng, Hạ Thảo” dùng để chữa bệnh phổi hô hấp, thận, gan, tim mạch; trị bệnh yếu sinh lý cao huyết áp; trị rối loạn miễn dịch chống ung thư (Zhou cộng sự, 1998a,b) [12-13] Nấm côn trùng ứng dụng sản xuất thuốc trị bệnh, chất có hoạt tính sinh học enzym Cyclosporine loại thuốc chống thải hồi cấy ghép quan sản xuất từ nấm Tolyplocadium inflatum, loài vô tính nấm Cordyceps subsessilis Các nghiên cứu công bố rằng, cordycepin, hoạt chất có “Đông Trùng, Hạ Thảo” chất có hoạt tính sinh học khác sản xuất từ số loài nấm côn trùng Hội nghị Khoa học kỷ niệm 35 năm Viện Khoa học Công nghệ Việt Nam – Hà Nội, ngày 26/10/2010 (Hung cộng sự, 2009; Rukachaisirikul cộng sự, 2004; Isaka cộng 2001; Kittakoop cộng sự, 1999) [14-17] Trên giới có 750 loài nấm côn trùng ghi nhận có nhiều loài công bố Theo nghiên cứu, phần lớn số loài nấm côn trùng ghi nhận châu Á, đó, Thái Lan có số lượng chủng loại phong phú với 321 loài ghi nhận (Hywel-Jones, 2002) [18], nhiên chưa có công bố thức đa dạng phân bố nhóm nấm nước khu vực, đặc biệt Việt Nam Nghiên cứu đánh giá đa dạng phân bố loài nấm côn trùng khu vực phía nam Vườn Quốc gia Cát Tiên, mẫu nấm côn trùng thu thập, định danh, phân lập bảo quản nguồn nguyên liệu quý giá cho nghiên cứu ứng dụng sau Vật liệu phương pháp 2.1 Địa điểm phương pháp thu mẫu Việc thu mẫu thực bốn khu vực bao gồm khu vực từ văn phòng đến tuyến Bằng Lăng (Khu vực 1), tuyến Bằng Lăng (Khu vực 2), tuyến Cây gõ Bác Đồng (Khu vực 3), km dọc theo đường từ khu Thác Trời đến Bàu Sấu (Khu vực 4) vườn Quốc gia Cát Tiên, Huyện Tân Phú, Tỉnh Đồng Nai Thời gian khảo sát từ ngày đến ngày tháng năm 2007 Mẫu nấm thu được bảo quản riêng biệt hộp nhựa ký hiệu số thứ tự ITB (viết tắt “Institute of Tropical Biology”) 2.2 Phân lập sơ định danh Việc phân lập thực nhà khách Vườn Quốc gia sau buổi thu mẫu Mẫu quan sát trực tiếp kính hiển vi soi Olympus SZ60 Một bào tử tách hòa tan giọt nước vô trùng phiến kính, sau dùng que cấy chuyển qua môi trường thạch khoai tây dextrose (PDA) có bổ sung 100 mg/L kháng sinh ChlortetracyclineHCL Chloramphenicol, nuôi cấy qua đêm Sau 5-8 nuôi cấy, bào tử nẩy chồi quan sát kính hiển vi soi nổi, bào tử đơn không bị nhiễm khuẩn nấm men tách kim nhọn chuyển sang đĩa PDA khác, đĩa cấy 8-10 điểm tương ứng với 8-10 bào tử Các đĩa sau bảo quản phòng thí nghiệm quan sát kính hiển vi ngày, loại bỏ phần nhiễm thu khuẩn lạc khiết Việc phân loại, định danh mẫu đến mức độ chi loài thực phương pháp hình thái học dựa đặc điểm ký chủ, màu sắc, loại bào tử, kích thước hình dạng bào tử,… sau so sánh dựa tài liệu khóa phân loại xuất (Samson cộng sự, 1988; Kobayashi, 1982; Tzean cộng sự, 1997; Luangsa-ard cộng sự, 2007) [2, 19-21] Kết thảo luận 3.1 Thu thập mẫu nấm côn trùng vườn Quốc gia Cát Tiên Tổng cộng 259 mẫu nấm thu thập thời gian khảo sát Số lượng mẫu thu khu vực khác (Hình 1), đó, tổng số mẫu thu Khu vực 73, Khu vực 156, Khu vực 16, Khu vực 14 Số lượng mẫu khác khu vực không phản ánh đa dạng phân bố nấm côn trùng khu vực Trong nghiên cứu này, số lượng mẫu thu khu vực nhiều địa hình dể khảo sát thời gian tập trung thu mẫu nhiều Các mẫu nấm côn trùng thu được phân bố hai môi trường sống (sinh cảnh) mặt đất bụi Tổng số mẫu thu mặt đất 39 (tương ứng với tỉ lệ Tiểu ban: Khoa học sống 15%) tổng số mẫu thu rừng 220 (tương ứng với tỉ lệ 85%) (Hình 2) Các yếu tố ngoại cảnh bao gồm sinh vật phi sinh vật có ảnh hưởng lớn đến tiếp xúc, lây nhiễm, phát triển bào tử nấm ký chủ Các yếu tố phi sinh vật bao gồm ẩm độ, nhiệt độ, điều kiện chiếu sang…, yếu tố sinh vật bao gồm mật độ bào tử nấm, mật độ đa dạng côn trùng (ký chủ), diện vi sinh vật khác… Độ đa dạng dày đặc tán Vườn Quốc gia Cát Tiên môi trường sống lý tưởng loài côn trùng đồng thời tạo điều kiện thuận lợi cho nấm côn trùng phát triển Theo quan sát, mặt đất khu vực thu mẫu không lớp rụng bao phủ Lớp rụng mặt đất môi trường sống nhiều loài côn trùng nơi che chắn điều kiện ngoại cảnh bất lợi cho côn trùng bào tử nấm phát triển Do đó, có mẫu nấm côn trùng thu mặt đất khu vực 3.2 Các loài nấm côn trùng Vườn Quốc gia Cát Tiên Kết sơ phân loại định danh hình thái so sánh với tài liệu phân loại cho thấy tổng số 259 mẫu thu được, có tất 17 Chi nấm côn trùng ghi nhận bao gồm Akanthomyces, Aschersonia, Beauveria, Conoideocrella, Cordyceps, Gibellula, Hirsutella, Hymenostilbe, Hypocrella, Isaria, Metarhizium, Moelleriella, Nomuraea, Ophiocordyceps, Paecilomyces, Torrubiella Verticillium Tất chi ghi nhận thuộc ngành Ascomycota, Hypocreales giới Nấm Số lượng mẫu thu chi khác (Hình 3), mẫu Aschersonia thu nhiều với 72 mẫu (chiếm tỉ lệ 27,8%) Isaria (12,7%), Ophiocordyceps (11,2%), Gibellula (10,8%), hai loài hữu tính (teleomorph) Aschersionia Moelleriella Hypocrella có tỉ lệ 10,4% 10,0% Hai chi biết đến ứng dụng đấu tranh sinh học Beauveria Metarhizium tìm thấy, nhiên thu mẫu Beauveria ba mẫu Metarhizium Ngoài có mẫu thu xác định tên mẫu cũ bị nhiễm loại nấm khác Trong 17 chi, có tổng cộng 41 loài nấm côn trùng ghi nhận Danh sách tên loài liệt kê chi tiết Bảng Kết cho thấy chi Aschersonia có số lượng loài cao với loài Các loài hữu tính Aschersonia Hypocrella Moelleriella loài có ký chủ đặc hiệu rệp sáp (bộ Homoptera) sống bám mặt Trên thực tế, số loài nấm côn trùng nhiều việc thu mẫu lặp lại nhiều lần năm, mùa mưa mùa khô nhiều khu vực khác Vườn Quốc gia Cát Tiên Số loài sinh sản vô tính (anamorph) ghi nhận có khác biệt so với số loài sinh sản hữu tính (teleomorph) (Hình 4) Sự khác biệt vô tính hữu tính phương thức hình thành bào tử Trong nghiên cứu này, tất loài vô tính có hình thành đính bào tử loài hữu tính hình thành nang bào tử Tổng số loài vô tính ghi nhân 29 bao gồm tất loài thuộc chi Akanthomyces, Aschersonia, Beauveria, Gibellula, Hirsutella, Hymenostilbe, Isaria, Metarhizium, Nomuraea, Paecilomyces Verticillium; tổng số loài hữu tính ghi nhận 12 gồm tất loài thuộc chi Conoideocrella, Cordyceps, Hypocrella, Moelleriella, Ophiocordyceps Torrubiella 3.3 Mối quan hệ nấm ký chủ Kết khảo sát cho thấy có tám côn trùng nhện ghi nhận ký chủ loài nấm côn trùng Vườn Quốc gia Cát Tiên bao gồm Araneida, Blattaria, Coleoptera, Hemiptera, Homoptera, Hymenoptera, Lepidoptera Mantodea (Bảng 1) Kết cho thấy số loài có ký chủ đặc hiệu ký sinh lài họ hàng gần loài côn trùng Ophiocordyceps unilateralis ký sinh loài kiến (Camponotus leonardi, Hymenoptera), loài thuộc chi Isaria ký sinh sâu bướm (bộ Lepidoptera), loài thuộc chi Aschersonia, Hypocrella Moelleriella có ký chủ rệp sáp (bộ Homoptera), loài thuộc chi Gibellula Nomuraea ký sinh nhện (Bộ Araneae) Hội nghị Khoa học kỷ niệm 35 năm Viện Khoa học Công nghệ Việt Nam – Hà Nội, ngày 26/10/2010 Số mẫu nấm ký sinh côn trùng thuộc Homoptera thu nhiều với tổng cộng 131 mẫu, tiếp đến Hymenoptera (39 mẫu) Aranaea (38 mẫu), có mẫu có ký chủ thuộc Blattaria Mantodea (số liệu hiện) Kết nghiên cứu không phản ánh đa dạng ký chủ số loài, nhiên có nhiều loài nấm côn trùng có ký chủ đa dạng thuộc nhiều côn trùng khác (Inglis cộng sự, 2001) [22], ví dụ Metarhizium spp., Beauveria spp Paecilomyces spp Các loài thuộc chi Paecilomyces tìm thấy ký chủ thuộc Coleoptera, Homoptera, Lepidoptera, Orthoptera, etc (Kwong, 2003) [23] Hình 1: Số lượng mẫu thu bốn khu vực khảo sát Hình 2: Sự khác biệt số lượng tỉ lệ mẫu hai môi trường sống khác Hình 3: Số lượng mẫu số lượng phân lập chi nấm côn trùng Hình 4: Sự khác biệt số lượng chi, loài vô tính hữu tính 3.4 Phân lập bảo quản giống Việc phân lập thực sau thu mẫu thực địa, số mẫu phân lập sau phòng thí nghiệm 149 mẫu phân lập thành công tổng số 259 mẫu thu Số lượng mẫu phân lập chi thể Hình Kết cho thấy Aschersonia có số lượng phân lập nhiều tiếp đến Isaria, Gibellula, Moelleriella Hypocrella Có tổng số 22 mẫu nấm Ophiocordyceps unilateralis thu thập (số liệu hiện) nhiên mẫu phân lập thành công Các báo cáo công bố bào tử nang loài nầy phát triển môi trường nuôi cấy Tiểu ban: Khoa học sống thông thường mà cần phải có môi trường dinh dưỡng đặc biệt (Kocharin Wongsa, 2006; Wongsa cộng sự, 2005) [24-25] Tất mẫu nấm côn trùng phân lập được bảo quản 10% glycerol tủ lạnh sâu điều kiện nhiệt độ -80 oC Đây nguồn giống có giá trị cho việc nghiên cứu ứng dụng sau Bảng Các loài nấm côn trùng ký chủ tương ứng ghi nhận STT 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 Tên loài Akanthomyces pistillariiformis Akanthomyces sp Aschersonia badia Aschersonia confluens Aschersonia marginata Aschersonia oxystoma Aschersonia placenta Aschersonia samoensis Aschersonia sp Beauveria sp Conoideocrella tenuis Cordyceps sp Gibellula pulchra Gibellula sp.1 Gibellula sp.2 Hirsutella brunneipunctata Hirsutella citriformis Hirsutella formicarum Hirsutella saussurei Hirsutella sp Hymenostilbe aurantiaca Hypocrella calendulina Hypocrella luteola Hypocrella siamensis Isaria javanica Isaria sp Isaria tenuipes Metarhizium sp.1 Metarhizium sp.2 Metarhizium sp.3 Moelleriella raciborskii Moelleriella sp Nomuraea atypicola Ophiocordyceps brunneipunctata Ophiocordyceps myrmecophila Ophiocordyceps unilateralis Paecilomyces cinnamomeus Paecilomyces lilacinus Torrubiella sp.1 Torrubiella sp.2 Verticillium sp Ký chủ Lepidoptera Araneae Homoptera Homoptera Homoptera Homoptera Homoptera Homoptera Homoptera Hymenoptera Homoptera Mantodea Araneae Araneae Araneae Coleoptera Hemiptera Hymenoptera Hymenoptera Không xác định Hymenoptera Homoptera Homoptera Homoptera Lepidoptera Lepidoptera Lepidoptera Blattaria Hemiptera Homoptera Homoptera Homoptera Araneae Coleoptera Hymenoptera Hymenoptera Homoptera Hemiptera Araneae Hemiptera Hemiptera Hội nghị Khoa học kỷ niệm 35 năm Viện Khoa học Công nghệ Việt Nam – Hà Nội, ngày 26/10/2010 Kết luận Vườn Quốc gia Cát Tiên có đa dạng chi, loài nấm côn trùng với tổng số 41 loài thuộc 17 chi ghi nhận Nấm côn trùng phân bố chủ yếu bụi, ký sinh ký chủ thuộc tám côn trùng khác Đa số loài ghi nhận trạng thái vô tính Số lượng mẫu nấm phân lập tương lai nguồn nguyên liệu quý giá cho nghiên cứu ứng dụng sinh học Lời cảm ơn Tác giả xin chân thành cảm ơn Viện Sinh học Nhiệt đới Trung tâm Kỹ thuật di truyền Công nghệ sinh học Quốc gia Thái Lan (BIOTEC) cung cấp tài phương tiện để hoàn thành nghiên cứu A B C D E F G H I J K L M N O Hình 6: Một số hình ảnh nấm côn trùng ký sinh rệp sáp Vườn Quốc gia Cát Tiên A: Aschersonia badia; B: Aachersonia marginata; C: Aschersonia samoensis; D: Aschersonia oxystoma; E: Aschersonia placenta; F: Aschersonia confluens; G: Hypocrella siamensis; H: Moelleriella raciborskii; I: Hypocrella calendulina; J: Paecilomyces cinnamomeus; K: Conoideocrella tenuis; L: Moelleriella sp.; M: Khuẩn lạc Moelleriella sp mọc môi trường PDA; N: Bào tử nang Moelleriella sp.; O: Bào tử nang Moelleriella sp nẩy mầm môi trường sinh bào tử thứ cấp AA C C 61 mm 1cm 1cm mm mm DBDB 51mm cm mm Tiểu ban: Khoa học sống A B D C E F J G J M K H I K L N Hình 6: Một số hình ảnh nấm côn trùng ký sinh ký chủ khác A: Ophiocordyceps unilateralis, B: Ophiocordyceps myrmecophila; C: Torrubiella sp.2; D: Isaria sp.; E: Paecilomyces lilacinus: F: Isaria tenuipes; G: Gibellula sp.2; H: Gibellula pulchra; I: Gibellula sp.1; J: Nomuraea atypicola; K: Hirsutella formicarum: L: Metarhizium sp.; M: Akanthomyces pistillariiformis; N: Hirsutella citriformis Hội nghị Khoa học kỷ niệm 35 năm Viện Khoa học Công nghệ Việt Nam – Hà Nội, ngày 26/10/2010 Tài liệu tham khảo Evans, H.C 1988 Coevolution of entomogenous fungi and their insect hosts In: K.A Pirozynski and D.L Hawksworth (eds.): Coevolution of Fungi with Plants and Animals, Academic Press, London, pp 149–171 Samson, R.A., H.C Evans, and J.P Latgé 1988 Atlas of Entomopathogenic Fungi Springer-Verlag, Berlin Heidelberg, New York 187pp Hajek, A.E and R.J St Leger 1994 Interactions between fungal pathogens and insect hosts Annu Rev Entomol 39 293-322 Shah, P.A and J.K Pell 2003 Entomopathogenic fungi as biological control agents Appl Microbiol Biotech 61: 413-423 McCoy, C.W 1990 Entomogenous fungi as microbial pesticides, pp 139-159 In R.R Baker, and P.E Dunn (eds.), New Directions in Biological Control Alan R Liss, New York pp 139-159 Taborsky, V 1992 Small-scale processing of microbial pestcides FAO Agric Service Bull 96 Food and Agriculture Organization of the United Nations Rome Nguyễn Dương Khuê, 2005 Sử dụng nấm Metarhizium anisopliae Sorok phòng trừ mối nhà (Coptotetrmes formosanus Shiraki) theo phương pháp lây nhiễm Hội nghị côn trùng học toàn quốc lần thứ Hà Nội 11-12/04/2005 Trang 409 – 414 Võ Thị Thu Oanh, Lê Đình Đôn, Bùi Cách Tuyến 2007 Đặc điểm sinh học khả gây bệnh nấm Metarhizium anisopliae (Metsch.) Sorokin đối vời sâu khoang (Spodoptera litura F.) hại rau cải xanh (Brassica juncea L.) Tạp chí KHKT Nông Lâm nghiệp, số 1&2 Đại học Nông Lâm Tp HCM Trang 58-63 Phạm Thị Thùy, Trần Văn Huy, Nguyễn Duy Mạn 2005 Nghiên cứu hoàn thiện công nghệ sản xuất thuốc trừ sâu vi nấm Beauveria Metarhizium để phòng trừ sâu hại đậu tương đậu xanh Hà Tĩnh năm 2003-2004 Hội nghị công nghệ sinh học toàn quốc Hà Nội 11-12/4/2005 Trang 494 -497 10 Trần Văn Hai, Trịnh Thị Xuân, Phạm Kim Sơn, 2006 Tạo sinh khối thử nghiệm hiệu lực số loại nấm ký sinh sâu ăn tạp rầy mềm hại rau cải TP Cần Thơ Tạp chí nghiên cứu khoa học, trường ĐHCT 11 Nguyễn Thị Lộc, Võ Thị Bích Chi, Nguyễn Thị Nhàn, Phạm Quang Hưng, Huỳnh Văn Nghiệp, Vũ Tiến Khang Nguyễn Đức Thành 2002 Nghiên cứu, sản xuất ứng dụng hai chế phẩm sinh học để quản lý loài sâu hại lúa Viện lúa ĐBSCL Trang 274 – 295 12 Zhu, J.S., G.M Halpern, and K Jones 1998a The scientific rediscovery of an ancient Chinese herbal medicine: Cordyceps sinensis Part I J Altern Complement Med 4(3): 289-303 13 Zhu, J.S., G.M Halpern, and K Jones 1998b The scientific rediscovery of an ancient Chinese herbal medicine: Cordyceps sinensis Part II J Altern Complement Med 4(4): 429-457 14 Hung, L.T., S Keawsompong, V.T Hanh, S Sivichai and N.L Hywel-Jones 2009 Effect of Temperature on Cordycepin Production in Cordyceps militaris Thai Journal of Agricultural Science 42(4): 219-225 15 Rukachaisirikul, V., S Pramjit, C Pakawatchai, M Isaka, and S Supothina 2004 10membered macrolides from the insect pathogenic fungus Cordyceps militaris BCC 2816 J Nat Prod 67: 1953-1955 16 Isaka, M., P Kongsaeree, and Y Thebtaranonth 2001 Bioxanthracenes from the insect pathogenic fungus Cordyceps pseudomilitaris BCC 1620, II Structure elucidation J Antibiot 54(1): 36-43 Tiểu ban: Khoa học sống 17 Kittakoop, P., J Punya, P Kongsaeree, Y Lertwerawat, A Jintasirikul, M Tanticharoen, and Y Thebtaranonth 1999 Bioactive naphthoquinones from Cordyceps unilateralis Phytochemistry 52(3): 453-457 18 Hywel-Jones, N.L 2002 The importance of invertebrate-pathogenic fungi from the tropics Trop Mycol 2: 133-144 19 Kobayashi, Y 1982 Keys to the taxa of the genera Cordyceps and Torrubiella Trans Mycol Soc Jpn 23:329–364 20 Tzean, S S., L S Hsieh W J Wu 1997 Atlas of Entomopathogenic Fungi from Taiwan Council of Agriculture, Executive Yuan, Taiwan, R O C 214pp 21 Luangsa-ard, J.J., Tasanathai, K, Mongkolsamrit, S and Hywel-Jones, N.L 2007 Atlas of Invertebrate-Pathogenic Fungi of Thailand, vol NSTDA publication Themma Group Co., Ltd 82 p ISBN 978-974-229-522-6 22 Inglis, G.D., M.S Goettel, T.M Butt, and H Strasser 2001 Used of hyphomycetous fungi for managing insect pests In: Butt T.M., Jackson C., and Magan N (eds.), Fungi as Biocontrol Agents, CAB International, Wallingford pp 23-69 23 Kwong, T.F.N 2003 A study of the distribution and molecular phylogeny of arthropod-pathogenic fungi Ph.D Thesis City University of Hong Kong 372pp 24 Kocharin, K and P Wongsa 2006 Semi-defined medium for in vitro cultivation of the fastidious insect pathogenic fungus Cordyceps unilateralis Mycopathologia 161(4): 255-260 25 Wongsa, P., K Tasanatai, P Watts, and N.L Hywel-Jones 2005 Isolation and in vitro cultivation of the insect pathogenic fungus Cordyceps unilateralis Micol Res 109(8): 936-940 10 ... loài côn trùng nơi che chắn điều kiện ngoại cảnh bất lợi cho côn trùng bào tử nấm phát triển Do đó, có mẫu nấm côn trùng thu mặt đất khu vực 3.2 Các loài nấm côn trùng Vườn Quốc gia Cát Tiên. .. chưa có công bố thức đa dạng phân bố nhóm nấm nước khu vực, đặc biệt Việt Nam Nghiên cứu đánh giá đa dạng phân bố loài nấm côn trùng khu vực phía nam Vườn Quốc gia Cát Tiên, mẫu nấm côn trùng thu... không khí cao, có đa dạng phong phú loài côn trùng điều kiện lý tưởng cho nấm côn trùng phát triển Nhiều loài nấm côn trùng ứng dụng rộng rãi đấu tranh sinh học kiểm soát dịch hại, phổ biến loài