Nghiên cứu ứng dụng vi khuẩn lactic để xử lý phế liệu tôm nhằm thu nhân chitin

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA HÀ NỘI NGÔ THỊ BÍCH NGỌC ĐỀ TÀI: NGHIÊN CỨU ỨNG DỤNG VI KHUẨN LACTIC ĐỂ XỬ LÝ PHẾ LIỆU TÔM NHẰM THU NHẬN CHITIN LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC CHUYÊN NGÀNH CÔNG NGHỆ SINH HỌC HÀ NỘI -2011   MỤC LỤC MỤC LỤC 1  LỜI CAM ĐOAN 1  DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT 2  DANH MỤC CÁC BẢNG 3  DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ 4  LỜI MỞ ĐẦU 5  CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 7  1.1 TÌNH HÌNH KHAI THÁC VÀ CHẾ BIẾN THỦY SẢN TẠI VIỆT NAM 7  1.2 PHỤ PHẨM CỦA CÔNG NGHIỆP CHẾ BIẾN TÔM .7  1.3 CẤU TẠO VỎ TÔM VÀ THÀNH PHẦN HÓA HỌC 8  1.3.1 Cấu tạo vỏ tôm [2] .8  1.3.1.1 Lớp biểu bì (epicuticle) .9  1.3.1.2 Lớp màu 9  1.3.1.3 Lớp canxi hóa 9  1.3.1.4 Lớp không bị canxi hóa 9  1.3.2 Thành phần hóa học phế liệu tôm [2] 9  1.4 KHÁI QUÁT VỀ CHITIN - CHITOSAN 11  1.4.1 Tính chất lý hóa .11  1.4.1.1 Chitin 11  1.4.1.2 Chitosan .13  1.4.2 Ứng dụng chitin, chitosan 14  1.4.2.1 Trong xử lý môi trường [51, 63, 58, 62] 14  1.4.2.2 Trong công nghệ thực phẩm [55, 26, 64, 20] 16  1.4.2.3 Trong y dược [1, 16, 38, 10] 17  1.4.2.4 Trong nông nghiệp [4] .18  1.4.2.5 Trong công nghiệp sản xuất giấy [55] .18  1.4.2.6 Trong công nghiệp mỹ phẩm [47] .18  1.4.3 Một số phương pháp thu nhận chitin - chitosan 19  1.4.3.1 Phương pháp học 19  1.4.3.2 Phương pháp hóa lý 19  1.4.3.3 Phương pháp hóa học .19  1.4.3.4 Phương pháp sinh học 23  1.5 VI KHUẨN LACTIC 25  1.5.1 Lịch sử nghiên cứu vi khuẩn lactic .25  1.5.2 Đặc điểm vi khuẩn lactic 26  1.5.2.1 Hình thái, sinh lí, sinh hóa vi khuẩn lactic [39] .26  1.5.2.2 Phân loại vi khuẩn lactic 26  1.5.2.3 Các yếu tố ảnh hưởng tới trình tạo sinh khối vi khuẩn lactic 28  1.5.2.3.1 Nhu cầu dinh dưỡng .28  1.5.2.3.2 Điều kiện nuôi cấy 30  1.5.3 Quá trình lên men lactic vi khuẩn lactic .31  1.5.3.1 Lên men lactic đồng hình 31  1.5.3.2 Lên men lactic dị hình 32  1.6 TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU VÀ SẢN XUẤT CHTIN-CHITOSAN TRÊN THẾ GIỚI VÀ Ở VIỆT NAM 33  1.6.1 Trên giới .33  1.6.2 Ở Việt Nam 33  CHƯƠNG 2: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 35  2.1 Vật liệu nghiên cứu 35  2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 35  2.1.2 Thiết bị dùng cho thí nghiệm 35  2.1.3 Hóa chất 35  2.2 Môi trường dùng cho nghiên cứu .36  2.2.1 Môi trường MRS 36  2.2.2 Môi trường MRS + CaCO3 37  2.2.3 Môi trường thạch + sữa gầy 37  2.3 Các phương pháp nghiên cứu .37  2.3.1 Phương pháp xác định định tính khả sinh axit vi khuẩn lactic 37  2.3.2 Phương pháp xác định hàm lượng axit lactic .37  2.3.3 Phương pháp xác định định tính hoạt tính protease .38  2.3.4 Phương pháp nghiên cứu động học sinh trưởng khả tích tụ axit lactic 38  2.3.5 Phương pháp quan sát hình thái tế bào 38  2.3.6 Phương pháp xác định hàm ẩm nguyên liệu 38  2.3.7 Phương pháp phân tích thành phần rỉ đường 39  2.3.8 Phương pháp xác định hàm lượng tro 40  2.3.9 Phương pháp xác định hàm lượng Protein (Phương pháp Biuret) .41  2.3.10 Phương pháp lên men vi khuẩn lactic 42  2.3.11 Phương pháp xác định hiệu suất khử khoáng khử protein 42  2.3.12 Phương pháp xác định đơn vị khuẩn lạc (CFU) 43  CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN .44  3.1 Phân lập tuyển chọn chủng vi khuẩn lactic 44  3.1.1 Đặc điểm hình thái 44  3.1.2 Khả sinh axit lactic 45  3.1.3 Đặc điểm hoạt tính phân giải protein (hoạt tính protease) 46  3.2 Nghiên cứu động học sinh trưởng hai chủng NCDN4 BNC1 47  3.3 Phân tích thành phần ban đầu PLT rỉ đường .49  3.3.1 Thành phần hóa học ban đầu phế liệu tôm 49  3.3.2 Phân tích thành phần rỉ đường 49  3.4 Nghiên cứu tối ưu điều kiện trình lên men PLT Lactobacillus plantarum NCDN4 50  3.4.1 Ảnh hưởng nguồn cacbon 50  3.4.2 Ảnh hưởng nồng độ rỉ đường tới hiệu suất khử khoáng 51  3.4.3 Ảnh hưởng pH ban đầu tới hiệu suất khử khoáng 52  3.4.4 Ảnh hưởng tỷ lệ giống tới hiệu suất khử khoáng .53  3.4.5 Ảnh hưởng tỷ lệ NaCl tới hiệu suất khử khoáng 54  3.4.6 Ảnh hưởng thời gian tới hiệu suất khử khoáng 55  3.5 Nghiên cứu kết hợp enzym neutrase trình lên men 56  3.6 So sánh trình lên men PLT có trùng không trùng 57  3.7 Thu hồi dịch sau lên men 58  CHƯƠNG 4: KẾT LUẬN 62  TÀI LIỆU THAM KHẢO 63  I Tài liệu Tiếng Việt 63  II Tài liệu Tiếng Anh 64  PHỤ LỤC 70  PHỤ LỤC 72  PHỤ LỤC 73  PHỤ LỤC 75  PHỤ LỤC 76  PHỤ LỤC 77  PHỤ LỤC 78  Ngô Thị Bích Ngọc - 2009 Luận văn thạc sĩ khoa học   LỜI CAM ĐOAN Tôi Ngô Thị Bích Ngọc xin cam đoan nội dung luận văn với đề tài “Nghiên cứu ứng dụng vi khuẩn lactic để xử lý phế liệu tôm nhằm thu nhận chitin ”là công trình nghiên cứu sáng tạo thực hướng dẫn TS Lê Thanh Hà - Bộ môn Công nghệ sinh học – Trường Đại học Bách Khoa Hà Nội.                                Viện CNSH&CNTP   1  Ngô Thị Bích Ngọc - 2009 Luận văn thạc sĩ khoa học   DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT STT Ký hiệu Tên đầy đủ                         1 PLT Phế liệu tôm                         2 DD Độ deaxetyl hóa IR                                                Infrared Radiation XRD B subtilis L plantarum DNS X- ray diffractometer Bacillus subtilis Lactobacillus plantarum Dinitro Salicylic     Viện CNSH&CNTP   2  Ngô Thị Bích Ngọc - 2009 Luận văn thạc sĩ khoa học   DANH MỤC CÁC BẢNG STT Tên bảng Trang Bảng 1.1- Thành phần phế liệu vỏ đầu tôm Bảng 1.2- Thành phần hóa học thịt tôm vỏ tôm Bảng 1.3- Một số tiêu sinh hóa phế liệu tôm (% chất khô) 10 Bảng 3.1- Kết vòng tròn phân giải CaCO3 chủng 46 Bảng 3.2- Kết vòng tròn phân giải protein 47 Bảng 3.3- Thành phần hóa học có PLT ban đầu 49 Bảng 3.4- Thành phần rỉ đường 49 Bảng 3.5- So sánh hiệu loại khoáng protein phương 57 thức lên men Bảng 3.6- So sánh hiệu loại khoáng protein điều kiện 58 trùng không trùng     Viện CNSH&CNTP   3  Ngô Thị Bích Ngọc - 2009 Luận văn thạc sĩ khoa học   DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ   STT Tên hình vẽ, đồ thị Trang Hình 1.1- Công thức cấu tạo chitin 11 Hình 1.2- Cấu tạo α-chitin, β-chitin, γ-chitin 12 Hình 1.3- Công thức cấu tạo chitosan 13 Hình 1.4- Vi khuẩn lactic 26 Hình 1.5- Sơ đồ trình lên men lactic 32 Hình 3.1- Hình ảnh nhuộm gram chủng Lactobacillus 44, 45 plantarum Hình 3.2 - Vòng tròn phân giải CaCO3 chủng 45 Hình 3.3- Hoạt tính protease chủng 46 Hình 3.4 - Đường cong sinh trưởng chủng L.plantarum NCDN4 48 10 Hình 3.5- Đường cong sinh trưởng chủng L.plantarum BNC1 50 11 Hình 3.6- Quy trình thu chitin từ phế liệu tôm 60 12 Đồ thị 3.1 - Ảnh hưởng phương thức nuôi cấy đến hiệu suất khử 50 khoáng 13 Đồ thị 3.2- Ảnh hưởng nồng độ rỉ đường tới hiệu suất khử 51 khoáng 14 Đồ thị 3.3- Ảnh hưởng pH ban đầu tới hiệu suất khử khoáng 52 15 Đồ thị 3.4- Ảnh hưởng tỷ lệ giống tới hiệu suất khử khoáng 53 16 Đồ thị 3.5- Ảnh hưởng nồng độ NaCl tới hiệu suất khử khoáng 54 17 Đồ thị 3.6- Ảnh hưởng thời gian lên men tới hiệu suất khử khoáng 55 18 Đồ thị 3.7- Qui trình lên men lactic kết hợp xử lí neutrase 56 Viện CNSH&CNTP   4  Ngô Thị Bích Ngọc - 2009 Luận văn thạc sĩ khoa học   LỜI MỞ ĐẦU   Việt Nam tiếng giới với sản phẩm hải sản xuất khẩu.Trong         đó, tôm đông lạnh sản phẩm với sản lượng ước tính đạt 600.000 tấn/ năm Tuy nhiên, với việc tăng sản lượng tôm khối lượng chất thải trình sản xuất, chế biến tăng lên Điều đặt cho ngành chế biến thủy sản yêu cầu tận dụng nguồn phế liệu nhằm nâng cao giá trị kinh tế nguồn lợi thủy sản Phế liệu nhà máy tôm đông lạnh chủ yếu đầu vỏ tôm, chứa lượng lớn protein, chất màu, chitin… Trong đó, chitin thành phần chủ yếu vỏ tôm Chitin polyme sinh học có cấu trúc mạch thẳng, gồm đơn vị N-axetyl-β-Dglucosamin nối với liên kết β-(1,4)-glucozit Chitin dẫn xuất – chitosan có hoạt tính sinh học cao tính kháng nấm, tính kháng khuẩn khả tự phân hủy sinh học nên chúng ứng dụng nhiều y, dược, công nghệ mỹ phẩm, nông nghiệp, xử lý môi trường, công nghệ thực phẩm… Từ trước đến nay, Việt Nam, có nhiều đề tài nghiên cứu chiết xuất chitinchitosan, polyme sinh học ứng dụng nhiều ngành công nghiệp từ phế liệu tôm Tuy nhiên, quy trình sản xuất chitin-chitosan quy mô lớn Việt Nam chủ yếu quy trình hóa học Việc sử dụng hóa chất với nồng độ cao dẫn đến lượng chitin-chitosan thu có chất lượng thấp, hóa chất chất hữu chưa tận thu thải gây ô nhiễm môi trường Công nghệ sinh học mở lựa chọn khác để tách chitin Điều có ý nghĩa quan trọng việc giải vấn đề ô nhiễm môi trường trầm trọng sở chế biến chitin-chitosan gây ra, góp phần phát triển bền vững ngành công nghiệp sản xuất chitin-chitosan từ phế liệu thủy sản Xuất phát từ yêu cầu mục đích tiến hành nghiên cứu đề tài " Nghiên cứu ứng dụng vi khuẩn lactic để xử lý phế liệu tôm nhằm thu nhận chitin" Đề tài bao gồm nội dung sau: Viện CNSH&CNTP   5  Ngô Thị Bích Ngọc - 2009 Luận văn thạc sĩ khoa học   13 Phạm Lê Dũng, Nguyễn Thị Đông, Phạm Thị Mai, Lê Thanh Sơn, Nguyễn Thị Kim Thanh, Rinaudo.M, Desbriers, Dẫn xuất N-cacboxyl chitosan, chất tương tự chitin, Tạp chí Hóa học, tập 37, trang 80-82, 1999 14 Phạm Thị Chân Châu, Trần Thị Ánh, Hóa sinh học, Nhà xuất Giáo dục, trang 150-153, 1992 15 Phạm Văn Kiệm, Phạm Hữu Điển, Châu Văn Minh, Trinh Cương, Đào Văn Trường, Một số nghiên cứu ban đầu Chitin từ vỏ Sam đuôi tam giác Việt Nam, Tạp chí Hóa học, tập 36, số 3, trang 63-66, 2001 16 Thanh, V.T.N, Đ.T.Phụ, N.V.Ty, “Nghiên cứu tác dụng tăng sinh collagen chitosan điều trị bỏng nhiệt thực nghiệm”, Tạp chí dược học số 9, mục 9, 2000 17 Thắng, V.H., "Vai trò nhóm vi khuẩn lactic trình chế biến nem chua" Luận văn cao học trường Đại học Bách Khoa Hà Nội, 1998 18 Trần Thị Luyến, Bùi Văn Tú, "Nghiên cứu sử dụng Lactobacillus plantarium lên men đầu tôm sú ( Penaeus monodon) để thu hồi chitin", Tạp chí Khoa học- Công nghệ Thủy sản, 03-04/2006 19 Trần Thị Luyến, Huỳnh Nguyễn Duy Bảo cộng sự, (2000), “Hoàn thiện quy trình sản xuất chitin – chitosan chế biến số sản phẩm công nghiệp từ phệ liệu vỏ tôm, cua”, Báo cáo khoa học, đề tài cấp bộ, Nha Trang 20 Trần Thị Luyến, Lê Thanh Long, "Nghiên cứu bảo quản trứng gà tươi màng bọc chitosan kết hợp phụ gia", Tạp chí khoa học-Công nghệ thủy sản, số 1, Đại học Nha trang, 2007 21 Trung tâm thông tin KHKT-KT Thủy sản (1999) 22 Vũ Đăng Đô, Hóa sinh vô cơ, Trường Đại học Tổng hợp, trang 12, 20, 38, 45 23. http://www.jimdo.com/info/framebuster/ II Tài liệu Tiếng Anh 24 A Gildberg and E Stenberg A new process for advanced utilisation of shrimp waste Process Biochemistry, 36: 809-812, (2001) 25 Aytekin O and Elibol M - Cocultivation of Lactococcus lactisand & Teredinobacter turnirae for biological chitin extraction from prawn waste Bioprocess and Biosystems Engineering 33 (2009) 393-399 Viện CNSH&CNTP   64  Ngô Thị Bích Ngọc - 2009 Luận văn thạc sĩ khoa học   26 Cenzig Caner, Ozge Cansiz, "Chitosan coating minimises eggshell breakage and improves egg quality", Journal of the Science of food and Agriculture, số 88, 2007, 5661.  27 Cerning, J Exocellular polysaccharide produced by lactic acid bacteria FEMS Microbiol Rev.1990,87, 113-130 28 G H Jo, W J Jung, J H Kuk, K T Oh, Y J Kim and R D Park Screening of protease-producing Serratia marcescens FS-3 and its application to deproteinization of crab shell waste for chitin extraction Carbohydrate Polymers, 74: 504-508, (2008) 29 H D De Holanda and F M Netto Recovery of Components from Shrimp (Xiphopenaeus kroyeri) Processing Waste by Enzymatic Hydrolysis Journal of Food Science, 71: C298-C303, (2006) 30 H K No and S P Meyers Crawfish chitosan as a coagulant in recovery of organic compounds from seafood processing streams Journal of Agricultural and Food Chemistry, 37: 580-583, (1989) 31 Han M.L.J.Jooster and Msnuel Nunez, Prevention of histamine formation in cheese by bacteriocin-producing Lactic acid bacteria Applied and Environmental microbiology, Arp, 1996 32 Hall, G.M and Desilva.S, Lactic acid fermentation of scampi (Penaeus Monodon) Weste for chitin recovery in advances in chitin and chitosan, Elseviea applied science, London, 1992 33 Hong K No, *1 Samuel P Meyers, and Leun S.Lee May/June (1989), “ Isolation and characterization of chitin from crawfish shell waste”, Journal of Agricultural and Food chemistry, Volume 37, (Number 3), pp: 575-579 34 J Synowiecki and N A A Q Al-Khateeb The recovery of protein hydrolysate during enzymatic isolation of chitin from shrimp Crangon crangon processing discards Food Chemistry, 68: 147-152, (2000) 35 J z Synowiecki and N A Al-Khateeb Production, Properties, and Some New Applications of Chitin and Its Derivatives Critical Reviews in Food Science and Nutrition, 43: 145-171, (2003) Viện CNSH&CNTP   65  Ngô Thị Bích Ngọc - 2009 Luận văn thạc sĩ khoa học   36 J Waldeck, G Daum, B Bisping and F Meinhardt Isolation and Molecular Characterization of Chitinase-Deficient Bacillus licheniformis Strains Capable of Deproteinization of Shrimp Shell Waste To Obtain Highly Viscous Chitin Appl Environ Microbiol., 72: 7879-7885, (2006) 37 Klaenhammer T.R Bacteriocins of lactic acid bacteria for biopreservation of meat and meat products Meat science, Vol 49, 1998 38 Knapczyk J., "Chitin and Chitosan Sources, Chemistry, Biochemistry, Physical Properties and Applications", Elsevier Applied Science, New York, 657-663, (1989) 39 Lactic acid bacteria-Microbiological and Functional Aspects, edited by University of Turku Turku, Finland; Atte von Wright University of Kuopio Kuopio, Finland; Arthur Ouwehand University of Turku Turku, Finland Copyright 2004 by Marcel Dekker, Inc All Rights Reserved New York 40 M Mizani, M Aminlari and M Khodabandeh An Effective Method for Producing a Nutritive Protein Extract Powder from Shrimp-head Waste Food Science and Technology International, 11: 49-54, (2005) 41 M S Rao, J Muñoz and W F Stevens Critical factors in chitin production by fermentation of shrimp biowaste Applied Microbiology and Biotechnology, 54: 808813, (2000) 42 M.R Adams and M.O Moss Food Microbiology Second Edition Moss University of Surrey, Guildford, UK 43 Mariae.C.Bruno and Thomas J.Montville, Common mechanistic action of bacteriocins from lactic acid bacteria, Applied and Environmental microbiology, Vol 20, p 129-138, Sept, 1993 44 Meyer S, Charaterization of astaxanthin pigment from heat processed crawfish waste, J Agric Food Chem, 1986 45 Meyers, S.P; Chen, H.M (1985), “ Process for the utilization of shellfish wastes” U.S Patent 4, 505, 936 46 Michael.J.gasson and Willem, De Vos, Genetic and biotechnology of lactic acid bacteria, Blackieacademic & professional, 1992 Viện CNSH&CNTP   66  Ngô Thị Bích Ngọc - 2009 Luận văn thạc sĩ khoa học   47 Muzzarelli, R.A.A., "Chitosan in pharmacy and chemistry", Grottammari, Atec, 2002, 524p 48.N Pacheco, M Garnica-González, J Y Ramírez-Hernández, B Flores-Albino, M Gimeno, E Bárzana and K Shirai Effect of temperature on chitin and astaxanthin recoveries from shrimp waste using lactic acid bacteria Bioresource Technology, 100: 2849-2854, (2009) 49 Olin, T.J., Rosado, J.M., Bailey, S.E and Bricka, R.M, "Low cost sorbents screening and engineering analysis of zeolite for treatment of metals contaminated water and soil extracts", final report, Report SERDP, 1996, 96-387, prepared for USEPA and SERDP 50 Peter A Vandenbergh, Lactic acid bacteria, their metabolic products and interference with microbial growth, Fermentations microbiology review 12, p 256296, 1993 51.R Chakrabarti CAROTENOPROTEIN FROM TROPICAL BROWN SHRIMP SHELL WASTE BY ENZYMATIC PROCESS Food Biotechnology, 16: 81-90, (2002) 52 Rogosa.M, Franklin.J.G and Perry.K.D, Correlations of the requiements with cultural and biochemical charaters of Lactobacillus sps, Chemistry Engineering, vol 65, p 597-603, 1987 53 Rao M S., Muñoz J., and Stevens W F - Critical factors in chitin production by fermentation of shrimp biowaste." Applied Microbiology and Biotechnology 54 (2000) 808-813 54 S.-L Wang and S.-H Chio Deproteinization of Shrimp and Crab Shell with the Protease of Pseudomonas Aeruginosa K-187 Enzyme and Microbial Technology, 22: 629-633, (1998) 55 Su Hyun Kim, Hong Kyoon No, and Witoon Prinyawiwatkul, " Effect of molecular weight, type of chitosan and chitosan solution pH on the shelf-life and quality of coated eggs", Journal of food science, số 72, 2007 Viện CNSH&CNTP   67  Ngô Thị Bích Ngọc - 2009 Luận văn thạc sĩ khoa học   56 T K Sini, S Santhosh and P T Mathew Study on the production of chitin and chitosan from shrimp shell by using Bacillus subtilis fermentation Carbohydrate Research, 342: 2423-2429, (2007) 57 Thompson, J;Chassy, B.M Uptake and metabolism of sucrose by Streptococcus lactics J Bacteriol 1981, 147,543-551 58 Volesky B, Holan Z, "Biosorption of heavy metals", Biotechnol., 1995, Prog.11: 235-250 59 W J Jung, G H Jo, J H Kuk, Y J Kim, K T Oh and R D Park Production of chitin from red crab shell waste by successive fermentation with Lactobacillus paracasei KCTC-3074 and Serratia marcescens FS-3 Carbohydrate Polymers, 68: 746-750, (2007) 60 W J Jung, J H Kuk, K Y Kim and R D Park Demineralization of red crab shell waste by lactic acid fermentation Applied Microbiology and Biotechnology, 67: 851-854, (2005) 61 W Jung, G Jo, J Kuk, K Kim and R Park Extraction of chitin from red crab shell waste by cofermentation with Lactobacillus paracaseisubsp toleransKCTC-3074 and Serratia marcescens FS-3 Applied Microbiology and Biotechnology, 71: 234237, (2006) 62 Wase, J., Forster, C.F., 1997, "Biosorbents for Metal Ions", Taylor & Francis, London, pp 238 63 Wu F.C., Tseng R.L and Juang R.S., 2000, "Comparative adsorption of metal and dyes on flake and bead types of chitosan prepared from fishery wastes", J Hazardous Mater B73, pp 63-75 64 Xian De Liu, Aera Jang, Dong Hun Kim, Bong Duk Lee and Cheorun Jo, "Effect of combination of chitosan coating and irradiation on physicochemical and functional properties of chicken egg during room-temperature storage", Radiation Physics and Chemistry, số 78, 2009, 589-591 65 Y.-S Oh, I.-L Shih, Y.-M Tzeng and S.-L Wang Protease produced by Pseudomonas aeruginosa K-187 and its application in the deproteinization of shrimp and crab shell wastes Enzyme and Microbial Technology, 27: 3-10, (2000) Viện CNSH&CNTP   68  Ngô Thị Bích Ngọc - 2009 Luận văn thạc sĩ khoa học   66 Y Xu, C Gallert and J Winter Chitin purification from shrimp wastes by microbial deproteination and decalcification Applied Microbiology and Biotechnology, 79: 687-697, (2008) Viện CNSH&CNTP   69  Ngô Thị Bích Ngọc - 2009 Luận văn thạc sĩ khoa học   PHỤ LỤC Bảng 1- Ảnh hưởng nguồn C tới hiệu suất khử khoáng Chủng VSV Nguồn C % tro lại Hiệu suất (%) BNC1 Glucose 22,34 40,69±1,5 NCDN4 Glucose 11,76 68,76±1,26 BNC1 Rỉ đường 29,02 22,96±0,9 NCDN4 Rỉ đường 25,44 32,46±1,45 Bảng 2- Ảnh hưởng nồng độ rỉ đường tới hiệu suất khử khoáng T/lệ rỉ đường % tro lại Hiệu suất (%) 5% 29,94 85,74±1,37 10% 24,37 87,89±0,31 15% 15,08 91,55±1,23 20% 5,35 97,46±0,84 25% 2,65 97,54±1,25 (w/w) Bảng 3- Ảnh hưởng pH ban đầu tới hiệu suất khử khoáng pH % tro lại Hiệu suất (%) 2,88 97,47±0,94 5,5 3,09 97,19±0,33 3,96 95,55±1,10 6,5 6,47 85,23±3,21 10,89 59,57±1,07 Viện CNSH&CNTP   70  Ngô Thị Bích Ngọc - 2009 Luận văn thạc sĩ khoa học   Bảng 4-Ảnh hưởng tỷ lệ giống tới hiệu suất khử khoáng Tỷ lệ giống % tro lại Hiệu suất (%) 5% 6,11 88,10±2,51 10% 3,3 95,74±3,48 15% 0,65 99,87±0,05 20% 2,56 97,12±2,43 (v/w) Bảng 5- Ảnh hưởng nồng độ NaCl tới hiệu suất khử khoáng T/lệ NaCl (w/w) % tro lại Hiệu suất (%) 0% 0,77 99,47±0,13 2% 0,68 99,48±0,01 4% 0,95 99,16±0,06 6% 2,24 95,43±0,94 8% 3,53 87,43± 0.12 Bảng 6- Ảnh hưởng thời gian lên men tới hiệu suất khử khoáng Thời gian % tro lại Hiệu suất (%) ngày 1,01 99,22±0,02 ngày 0,65 99,62±0,16 10 ngày 0,43 99,84±0,06 Viện CNSH&CNTP   71  Ngô Thị Bích Ngọc - 2009 Luận văn thạc sĩ khoa học   PHỤ LỤC P/loãng OD Phương trình đường chuẩn BSA 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,009 0,014 0,019 0,024 0,029 0,7 0,034 Phương trình đường chuẩn Glucose Nồng độ (g/l) 0,4 0,8 1,2 1,6 OD 0,275 0,543 0,75 0,994 1,227 0,1 0,003 Viện CNSH&CNTP   0,8 0,04 72  Ngô Thị Bích Ngọc - 2009 Luận văn thạc sĩ khoa học   PHỤ LỤC Kết phân tích thành phần axitamin mẫu bột sấy phun Viện CNSH&CNTP   73  Ngô Thị Bích Ngọc - 2009 Luận văn thạc sĩ khoa học     Viện CNSH&CNTP   74  Ngô Thị Bích Ngọc - 2009 Luận văn thạc sĩ khoa học   PHỤ LỤC Hình ảnh mẫu bột sấy phun   Viện CNSH&CNTP   75  Ngô Thị Bích Ngọc - 2009 Luận văn thạc sĩ khoa học   PHỤ LỤC Hình ảnh khuẩn lạc ban đầu chủng L.plantarum NCDN4     Viện CNSH&CNTP   76  Ngô Thị Bích Ngọc - 2009 Luận văn thạc sĩ khoa học   PHỤ LỤC Hình ảnh khuẩn lạc chủng L.plantarum NCDN4 lại sau ngày lên men điều kiện tối ưu Viện CNSH&CNTP   77  Ngô Thị Bích Ngọc - 2009 Luận văn thạc sĩ khoa học   PHỤ LỤC Hình ảnh phế liệu tôm ban đầu                Hình ảnh chitin thu sau khử protein khử khoáng Viện CNSH&CNTP   78  ... từ phế liệu thủy sản Xuất phát từ yêu cầu mục đích tiến hành nghiên cứu đề tài " Nghiên cứu ứng dụng vi khuẩn lactic để xử lý phế liệu tôm nhằm thu nhận chitin" Đề tài bao gồm nội dung sau: Vi n... Sử dụng vi khuẩn lactic để loại khoáng khỏi phần vỏ phế liệu tôm Vi c sử dụng vi khuẩn lactic để loại khoáng khỏi phế liệu tôm xu hướng mà nhiều nhà nghiên cứu quan tâm Trong trình lên men lactic, ... Ngọc xin cam đoan nội dung luận văn với đề tài Nghiên cứu ứng dụng vi khuẩn lactic để xử lý phế liệu tôm nhằm thu nhận chitin ”là công trình nghiên cứu sáng tạo thực hướng dẫn TS Lê Thanh Hà -