Bài báo cáo được tác giả thực hiện tại Trường Đại học Bách khoa TPHCM. Bài báo cáo nêu khái quát những nguyên tắc chung của sắc ký, phân tích làm rõ những đặc điểm quan trọng của một hệ thống sắc ký hiệu năng cao. Qua đó, định hướng ứng dụng HPLC trong phân tích các thành phần của thực phẩm. Bài báo cáo là tài liệu hay, ý nghĩa cho các bạn đang học sau đại học có học môn “Ứng dụng của sắc ký trong phân tích thực phẩm” để làm tài liệu tham khảo cho quá trình học tập.
HCM UNIVERSITY OF TECHNOLOGY FACULTY OF CHEMICAL ENGINEERING BÁO CÁO KHOA HỌC ỨNG DỤNG CỦA SẮC KÝ TRONG PHÂN TÍCH THỰC PHẨM Đề tài: Ứng dụng sắc ký hiệu cao (HPLC) phân tích thực phẩm Thực hiện: Nguyễn Văn Tú - PhD Student (51305919) TPHCM, 2017 NỘI DUNG I TỔNG QUAN VỀ KỸ THUẬT SẮC KÝ II CẤU TẠO CỦA HỆ THỐNG HPLC III ỨNG DỤNG HPLC TRONG PHÂN TÍCH THỰC PHẨM I TỔNG QUAN VỀ KỸ THUẬT SẮC KÝ • Nguyên lý: Quá trình tách cấu tử (chất cần phân tích khỏi chất nền) dựa lực khác cấu tử pha tĩnh pha động • Hệ thống: Pha tĩnh (stationary phase) pha động (mobile phase) • Các loại sắc ký phổ biến: Sắc ký khí (Gas chromatography) sắc ký lỏng (liquid chromatography) Nguyên tắc trình tách Tạp phẩm Trang sức Điện tử Nguyên tắc trình tách Tạp phẩm Trang sức Điện tử Nguyên tắc trình tách Tạp phẩm Trang sức Điện tử Nguyên tắc trình tách Tạp phẩm Trang sức Điện tử Nguyên tắc trình tách sắc ký đồ Nguyên tắc trình tách • Nguyên lý: Quá trình tách cấu tử (chất cần phân tích khỏi chất nền) dựa lực khác cấu tử pha tĩnh pha động • Hệ thống: Pha tĩnh (stationary phase) pha động (mobile phase) Nguyên tắc trình tách • Dựa vào mức độ tương tác (ái lực) kích thước khác chất cần phân tích với nhóm chức (phân cực không phân cực, ion dương âm ) với kích thước khoảng trống (rây phân tử) cột nhồi mà chất có thời gian lưu lại cột khác dẫn đến trình tách chất ỨNG DỤNG TRONG PHÂN TÍCH FLOFENICOL TRONG THỦY SẢN TẠI CÁC TRUNG TÂM KIỂM ĐỊNH CHẤT LƯỢNG NÔNG LÂM THỦY SẢN • Hoà tan phần cặn ml n- hexan, sau cho tiếp 1ml (V3) pha động vào, lắc khoảng 10 phút máy lắc , ly tâm phút, tốc độ 4000v/phút • Hút bỏ lớp n – hexan • Lấy lớp lọc qua màng lọc mẫu cho vào chai 1.5ml Dung dịch dùng để phân tích thiết bị HPLC ỨNG DỤNG TRONG PHÂN TÍCH FLOFENICOL TRONG THỦY SẢN TẠI CÁC TRUNG TÂM KIỂM ĐỊNH CHẤT LƯỢNG NÔNG LÂM THỦY SẢN ĐIỀU KIỆN PHÂN TÍCH TRÊN HPLC Thời gian chạy: 10 phút Pha động: Acetonitril: đệm Ammonium acetate = 25:75 (v/v) Rửa cột: Sau mẫu chạy hoàn tất, rửa cột hệ thống HPLC với nước cất acetonitril với lưu lượng 1ml/phút theo tỉ lệ: 35:65 60 phút ỨNG DỤNG TRONG PHÂN TÍCH FLOFENICOL TRONG THỦY SẢN TẠI CÁC TRUNG TÂM KIỂM ĐỊNH CHẤT LƯỢNG NÔNG LÂM THỦY SẢN • Cân cột sắc ký với pha động 30 phút trước tiêm mẫu chuẩn • Thứ tự tiêm: tiêm dãy chuẩn, mẫu trắng, mẫu kiểm soát, sau tiêm mẫu thử • Thể tích tiêm: 100µl • Tốc độ dòng: 1.0ml/phút • Bước sóng: 220nm PHÂN TÍCH FLORFENICOL THEO TIÊU CHUẨN QUỐC TẾ PHÂN TÍCH FLORFENICOL THEO TIÊU CHUẨN QUỐC TẾ ... (stationary phase) pha động (mobile phase) • Các loại sắc ký phổ biến: Sắc ký khí (Gas chromatography) sắc ký lỏng (liquid chromatography) Nguyên tắc trình tách Tạp phẩm Trang sức Điện tử Nguyên tắc trình... điện (Mono P) – Cột Ceramic Hydroapatite (CHT) Pha tĩnh • Sắc ký lỏng pha đảo (Reversed Phase Liquid Chromatography - RPLC) – Pha tĩnh gồm phân tử silic dioxyt (silica) có gắn nhóm chức không phân... nhóm silanol C8 Silica C18 Silica Silica Silanol Pha tĩnh • Sắc ký lỏng pha thuận (Normal Phase Liquid Chromatography - NPLC) – Pha tĩnh gồm phân tử silic dioxyt (silica) có gắn nhóm chức phân cực