Nghiên cứu thành phần hoá học trong cặn chiết n hexane và butanol từ loài ngọc cẩu (balanophora laxiflora hemsl

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM HÀ NỘI TRẦN THẾ TÙNG NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC TRONG CẶN CHIẾT N-HEXANE VÀ BUTANOL TỪ LOÀI NGỌC CẨU (BALANOPHORA LAXIFLORA HEMSL.) LUẬN VĂN THẠC SĨ CHUYÊN NGÀNH: HÓA HỌC HỮU CƠ HÀ NỘI - NĂM 2017 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM HÀ NỘI TRẦN THẾ TÙNG NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC TRONG CẶN CHIẾT N-HEXANE VÀ BUTANOL TỪ LOÀI NGỌC CẨU (BALANOPHORA LAXIFLORA HEMSL.) LUẬN VĂN THẠC SĨ Chuyên ngành: Hóa học Hữu Mã số: 60.44.01.14 Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS Phạm Hữu Điển HÀ NỘI - NĂM 2017 Luận văn Trần Thế Tùng LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan công trình nghiên cứu khoa học kết nghiên cứu cá nhân Các số liệu tài liệu trích dẫn công trình trung thực Kết nghiên cứu không trùng với công trình công bố trước Tôi xin chịu trách nhiệm với lời cam đoan Hà Nội, ngày tháng năm 2017 HỌC VIÊN Trần Thế Tùng Luận văn Trần Thế Tùng LỜI CẢM ƠN Luận văn hoàn thành Bộ môn Hóa Hữu cơ, Khoa Hóa học, Trường Đại học Sư phạm Hà Nội Với kính trọng biết ơn sâu sắc, xin gửi lời cảm ơn chân thành tới PGS.TS Phạm Hữu Điển Thầy giao đề tài, hướng dẫn, bảo tận tình, chu đáo quan tâm, động viên, tạo điều kiện tốt suốt trình học tập, nghiên cứu để hoàn thành Luận văn Luận văn tài trợ phần kinh phí từ đề tài NCKH cấp Bộ (mã số B2016-SPH-18) PGS.TS Đặng Ngọc Quang làm Chủ nhiệm đề tài Tôi xin gửi đến thầy lời cảm ơn trân trọng Ngoài ra, xin cảm ơn thầy cô Bộ môn Hóa Hữu thầy cô khoa Hóa học giúp đỡ đóng góp nhiều ý kiến quý báu Đồng thời xin cảm ơn lớp Cao học Hóa Hữu K25, anh chị học viên, nghiên cứu sinh, bạn sinh viên học tập, nghiên cứu Bộ môn gia đình bạn bè ủng hộ, động viên suốt trình thực đề tài Luận văn Trần Thế Tùng MỤC LỤC MỞ ĐẦU Chương I: TỔNG QUAN 1.1 Giới thiệu chung 1.1.1 Giới thiệu chi Balanophora 1.1.1.1 Phân loại khoa học 1.1.1.2 Các loài thuộc chi Balanophora 1.1.1.3 Đặc điểm thực vật 1.1.2 Giới thiệu loài Balanophora laxiflora Hemsl 10 1.1.2.1 Tên gọi 10 1.1.2.2 Mô tả 10 1.1.2.3 Phân bố 11 1.1.2.4 Công dụng 11 1.2 Các nghiên cứu chi Balanophora 12 1.2.1 Balanophora abbreviata 12 1.2.2 Balanophora fungosa 14 1.2.3 Balanophora harlandii 17 1.2.4 Balanophora indica 20 1.2.5 Balanophora involucrata 21 1.2.6 Balanophora japonica 26 1.2.7 Balanophora latisepala 31 1.2.8 Balanophora papuana 32 1.2.9 Balanophora polyandra 32 1.2.10 Balanophora tobiracola 35 1.3 Các nghiên cứu loài Balanophora laxiflora Hemsl 37 1.3.1 Thành phần hóa học 37 Trần Thế Tùng Luận văn 1.3.2 Hoạt tính sinh học 41 Chương II: THỰC NGHIỆM 44 2.1 Đối tượng, nội dung phương pháp nghiên cứu 44 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 44 2.1.2 Nội dung nghiên cứu 44 2.1.3 Phương pháp nghiên cứu 45 2.2 Hóa chất - Dụng cụ - Thiết bị 45 2.2.1 Hóa chất 45 2.2.2 Dụng cụ 45 2.2.3 Thiết bị 46 2.3 Thực nghiệm 46 2.3.1 Thu hái xử lý mẫu 46 2.3.1.1 Thu hái 46 2.3.1.2 Xử lí mẫu 46 2.3.2 Ngâm chiết tạo cặn chiết 47 2.3.3 Phân lập hợp chất từ cặn chiết n-hexane 48 2.3.3.1 Thực sắc kí cột thô cặn chiết n-hexane 48 2.3.3.2 Thực sắc kí cột tinh phân đoạn H8 49 2.3.4 Phân lập hợp chất từ cặn chiết butanol 50 2.3.4.1 Thực sắc kí thô cặn chiết butanol 50 2.3.4.2 Thực sắc kí cột tinh phân đoạn B3 52 2.3.4.3 Thực sắc kí cột tinh phân đoạn B4 52 2.3.5 Xác định cấu trúc phân tử hợp chất 53 2.3.6 Nghiên cứu hoạt tính sinh học hợp chất 53 2.3.6.1 Thử nghiệm hoạt tính kháng vi sinh vật kiểm định 53 2.3.6.2 Thử nghiệm hoạt tính gây độc tế bào ung thư biểu mô KB 55 Chương III: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 57 Trần Thế Tùng Luận văn 3.1 Xác định cấu trúc hợp chất phân lập từ cặn chiết n-hexane 57 3.1.1 Hợp chất NC2 57 3.1.2 Hợp chất NC8.1 62 3.1.3 Hợp chất NC8.3 66 3.2 Xác định cấu trúc hợp chất phân lập từ cặn chiết butanol 69 3.2.1 Hợp chất B1 69 3.2.2 Hợp chất B2 73 3.2.3 Hợp chất B3 75 3.2.4 Hợp chất B4 78 3.3 Hoạt tính sinh học hợp chất phân lập 80 KẾT LUẬN 82 TÀI LIỆU THAM KHẢO 83 PHỤ LỤC Luận văn Trần Thế Tùng DANH MỤC HÌNH ẢNH Hình 1.1 Loài Ngọc cẩu (Balanophora laxiflora Hemsl.) 11 Hình 2.1 Mẫu Ngọc cẩu thu hái Lào Cai, 8/2015 44 Hình 2.2 Sơ đồ ngâm chiết tạo cặn chiết từ cao tổng loài Ngọc cẩu 47 Hình 2.3 Sơ đồ phân lập hợp chất từ cặn chiết n-hexane loài Ngọc cẩu 50 Hình 2.4 Sơ đồ phân lập hợp chất từ cặn chiết butanol loài Ngọc cẩu 51 Hình 3.1 Một phần phổ 1H NMR hợp chất NC2 58 Hình 3.2 Một phần phổ 13C NMR hợp chất NC2 59 Hình 3.3 Phổ giãn 1H NMR hợp chất NC8.1 62 Hình 3.4 Một phần phổ 13C NMR hợp chất NC8.1 63 Hình 3.5 Một số tương tác H↔C phổ HMBC hợp chất NC8.1 66 Hình 3.6 Phổ giãn 1H NMR hợp chất NC8.3 67 Hình 3.7 Một phần phổ 13C NMR hợp chất NC8.3 68 Hình 3.8 Một phần phổ 1H NMR hợp chất B1 69 Hình 3.9 Một phần phổ 13C NMR hợp chất B1 70 Hình 3.10 Một số tương tác H↔C phổ HMBC hợp chất B1 72 Hình 3.11 Một phần phổ 1H NMR hợp chất B2 73 Hình 3.12 Phổ 13C NMR hợp chất B2 74 Hình 3.13 Một phần phổ 1H NMR hợp chất B3 76 Hình 3.14 Cấu trúc phân tử (1) tương tác H↔C phổ HMBC (2) hợp chất B3 77 Hình 3.15 Phổ 13C NMR hợp chất B4 78 Hình 3.16 Cấu trúc phân tử (1) tương tác H↔C phổ HMBC (2) hợp chất B4 79 Luận văn Trần Thế Tùng DANH MỤC BẢNG SỐ LIỆU Bảng 3.1 Các liệu phổ 1H NMR, 13C NMR, DEPT hợp chất NC2 so sánh với β-amyrin palmitate (balanophorin A) 60 Bảng 3.2 So sánh giá trị phổ 1H NMR 13C NMR hợp chất NC8.1 với 3β-acetylmonogynol A 64 Bảng 3.3 Các giá trị phổ 1H NMR 13C NMR hợp chất NC8.3 68 Bảng 3.4 So sánh giá trị phổ 1H NMR 13C NMR hợp chất B1 với quercetin 3-O--glucopyranoside (isoquercitrin) 71 Bảng 3.5 So sánh giá trị phổ 1H NMR 13C NMR hợp chất B2 với methyl p-coumarate 75 Bảng 3.6 So sánh giá trị phổ 1H NMR 13C NMR hợp chất B3 với methyl caffeate 77 Bảng 3.7 So sánh giá trị phổ 1H NMR 13C NMR hợp chất B4 với methyl gallate 79 Bảng 3.8 Kết thử nghiệm hoạt tính kháng vi sinh vật kiểm định hợp chất NC2, NC8.1 B1 80 Bảng 3.9 Kết thử nghiệm hoạt tính gây độc tế bào ung thư biểu mô KB hợp chất NC2, NC8.1 B1 80 Luận văn Trần Thế Tùng DANH MỤC VIẾT TẮT Kí hiệu CC DEPT Diễn giải - Ghi Phương pháp Column Chromatography sắc kí cột Distortionless Enhancement by Phổ xác định số H Polarization Transfer liên kết với C DMSO dimethyl sulfoxide DPPH 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl H:E n-hexan:ethyl acetate HHDP hexahydroxydiphenoyl Heteronuclear Multiple Phổ tương tác Bond Correlation gián tiếp H↔C Heteronuclear Single Phổ tương tác Quantum Coherence trực tiếp H↔C IR Infrared Radiation Phổ hồng ngoại MS Mass Spectrometry Phổ khối lượng NMR Nuclear Magnetic Resonance HMBC HSQC TH-DBF-DC TLC Phổ cộng hưởng từ hạt nhân 1’,1”-(3’,3”,4”,4”-tetrahydroxydibenzofurandicarboxyl) Thin Layer Chromatography Phương pháp sắc kí lớp mỏng Luận văn Trần Thế Tùng - 29 - Luận văn Trần Thế Tùng Phổ IR hợp chất B2 Phổ MS hợp chất B2 - 30 - Luận văn Trần Thế Tùng Phổ 1H NMR hợp chất B2 - 31 - Luận văn Trần Thế Tùng Phổ 13C NMR hợp chất B2 - 32 - Luận văn Trần Thế Tùng Phổ HSQC hợp chất B2 - 33 - Luận văn Trần Thế Tùng Phổ IR hợp chất B3 Phổ MS hợp chất B3 - 34 - Luận văn Trần Thế Tùng Phổ 1H NMR hợp chất B3 - 35 - Luận văn Trần Thế Tùng Phổ 13C NMR hợp chất B3 - 36 - Luận văn Trần Thế Tùng Phổ HSQC hợp chất B3 - 37 - Luận văn Trần Thế Tùng Phổ HMBC hợp chất B3 - 38 - Luận văn Trần Thế Tùng Phổ 1H NMR hợp chất B4 Phổ 13C NMR hợp chất B4 - 39 - Luận văn Trần Thế Tùng Phổ HSQC hợp chất B4 - 40 - Luận văn Trần Thế Tùng Phổ HMBC hợp chất B4 - 41 - Luận văn Trần Thế Tùng Kết thử nghiệm hoạt tính kháng vi sinh vật kiểm định - 42 - Luận văn Trần Thế Tùng Kết thử nghiệm hoạt tính gây độc tế bào ung thư biểu mô KB - 43 - ... GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM HÀ N I TR N THẾ TÙNG NGHI N CỨU THÀNH PH N HÓA HỌC TRONG C N CHIẾT N- HEXANE VÀ BUTANOL TỪ LOÀI NGỌC CẨU (BALANOPHORA LAXIFLORA HEMSL. ) LU N V N THẠC SĨ... Nghi n cứu thành ph n hóa học c n chiết n- hexane butanol từ loài Ngọc cẩu (Balanophora laxiflora Hemsl. )” Ngoài ra, đề tài Lu n v n thạc sĩ ph n Đề tài Khoa học Công nghệ cấp Bộ: “Ph n lập thành. .. Nguy n Thị Phương Thanh ho n thi n năm 2016 Đề tài nghi n cứu thành ph n hóa học c n chiết ethyl acetate từ Ngọc cẩu (Balanophora laxiflora Hemsl. ) Nhằm ho n thi n phát huy thành n y, lựa ch n đề