Nghiên cứu nhân giống cây gấc (Momordica cochinchinensis) bằng phương pháp nuôi cấy mô

đại học thái nguyên TRNG I HC KHOA HC Lấ TH HO NGHIấN CU NHN GING CY GC (MOMORDICA COCHINCHINENSIS) BNG PHNG PHP NUễI CY Mễ Chuyờn ngnh : Cụng ngh sinh hc Mó s : 60.42.80 LUN VN THC S CễNG NGH SINH HC Ngi hng dn khoa hc PGS TS Ngụ Xuõn Bỡnh Thỏi Nguyờn - 2011 S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn MC LC Trang Trang ph bỡa Danh mục ký hiệu, chữ viết tắt Danh mục bảng Danh mục đồ thị M U CHNG TNG QUAN TI LIU. TNG QUAN V CY GC 1.1 Gii thiu chung v cõy Gc 1.2 Ngun gc, phõn loi v c im thc vt hc ca cõy gc 1.2.1 Phõn b v gieo trng5 1.2.2 c im thc vt hc 1.2.3 c im sinh trng, phỏt trin 1.2.4 Cụng dng ca cõy Gc9 TèNH HèNH NGHIấN CU TRấN TH GII V VIT NAM V CY GC.10 2.1 Tỡnh hỡnh nghiờn cu v mt dc lý ca cõy Gc 10 2.2 Tỡnh hỡnh nghiờn cu v nhõn ging cõy Gc bng phng phỏp nuụi cy mụ 13 KHI QUT V NUễI CY Mễ T BO THC VT 13 3.1 Khỏi nim nuụi cy mụ t bo thc vt 13 3.2 S lc lch s nuụi cy mụ t bo thc vt 14 3.3 C s khoa hc ca phng phỏp nuụi cy mụ t bo thc vt 16 3.4 iu kin v mụi trng nuụi cy mụ t bo thc vt 17 3.5 Cỏc cụng on ca nuụi cõy mụ t bo 25 CHNG NI DUNG V PHNG PHP NGHIấN CU 28 i tng, a im v thi gian nghiờn cu 28 1.1 i tng nghiờn cu 28 1.2 Thi gian nghiờn cu 28 Ni dung v phng phỏp nghiờn cu 28 S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn 2.1 Ni dung nghiờn cu 28 2.2 Phng phỏp nghiờn cu 28 2.3 X lý s liu. 35 2.4 iu kin thớ nghim .36 2.4.1 Thớ nghim in vitro 36 2.4.2 Thớ nghim thớch ng cõy in vitro ngoi iu kin t nhiờn 36 CHNG KT QU NGHIấN CU V THO LUN 37 3.1 Kt qu nghiờn cu nh hng ca húa cht v thi gian kh trựng n t l sng ca mu Gc 37 3.1.1 Kt qu nghiờn cu nh hng ca H2O2 n t l sng ca mu Gc 37 3.1.2 Kt qu nghiờn cu nh hng ca HgCl2 n t l sng ca mu Gc 38 3.2 Kt qu nghiờn cu nh hng ca cỏc cht kớch thớch sinh trng n kh nng tỏi sinh chi cõy Gc. 41 3.2.1 Kt qu nghiờn cu nh hng ca Kinetin n kh nng tỏi sinh chi cõy Gc . . 41 3.2.2 Kt qu nghiờn cu nh hng ca BAP n kh nng tỏi sinh chi cõy Gc. 42 3.3 Kt qu nghiờn cu nh hng ca cỏc cht kớch thớch sinh trng n kh nng nhõn nhanh chi cõy Gc 43 3.3.1 Kt qu nghiờn cu nh hng ca Kinetin n hiu qu nhõn chi 44 3.3.2 Kt qu nghiờn cu nh hng ca BAP n hiu qu nhõn chi 45 3.3.3 Kt qu nghiờn cu nh hng ca s kt hp gia BAP v Kinetin n hiu qu nhõn chi. 47 3.3.4 Kt qu nghiờn cu nh hng ca s kt hp gia BAP v nc da n hiu qu nhõn chi. 48 3.3.5 Kt qu nghiờn cu nh hng ca s kt hp gia BAP v IBA n hiu qu nhõn chi. 49 S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn 3.4 Kt qu nghiờn cu nh hng ca cỏc cht kớch thớch sinh trng n kh nng r chi Gc.51 3.4.1 Kt qu nghiờn cu nh hng ca IBA n hiu qu r 51 3.4.2 Kt qu nghiờn cu nh hng ca NAA n hiu qu r53 3.5 Kt qu nghiờn cu nh hng ca giỏ th n t l sng ca cõy m.54 KT LUN V KIN NGH. 56 KT LUN. 56 KIN NGH 56 TI LIU THAM KHO PH LC S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn DANH MUC CAC BANG TRONG LUN VN Bang Bng 3.1 Tờn cac bang luõn nh hng ca nng H2O2 v thi gian kh trựng n t l sng ca mu gc (Sau 15 ngy nuụi cy)) Trang 37 nh hng ca nng HgCl2 v thi gian kh trựng Bng 3.2 n t l sng ca mu gc (Sau 15 ngy nuụi cy) 38 Bng 3.3 So sỏnh kt qu nghiờn cu kh trựng loi hoỏ cht (Oxy gi v HgCl2) 40 Bng 3.4 Kt qu nghiờn cu nh hng ca kinetin n kh nng tỏi sinh chi gc 41 Bng 3.5 Kt qu nghiờn cu nh hng ca BAP n kh nng tỏi sinh chi gc 42 Bng 3.6 Kt qu nghiờn cu nh hng ca nng kinetin n hiu qu nhõn chi 44 Bng 3.7 Kt qu nghiờn cu nh hng ca BAP n hiu qu nhõn chi 45 Bng 3.8 Kt qu nghiờn cu nh hng s phi hp gia BAP v kinetin n hiu qu nhõn chi gc 46 Bng 3.9 Kt qu nghiờn cu nh hng ca s kt hp gia BAP v nc da n hiu qu nhõn chi gc 48 Bng 3.10 Kt qu nghiờn cu nh hng ca s kt hp gia BAP v IBA n hiu qu nhõn chi gc 50 Bng 3.11 Kt qu nghiờn cu nh hng ca IBA n hiu qu r 51 Bng 3.12 Kt qu nghiờn cu nh hng ca NAA n hiu qu r 52 Bng 3.13 Kt qu nghiờn cu nh hng ca giỏ th n t l sng ca cõy m 54 S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn DANH MUC CAC HèNH TRONG LUN VN Hinh Tờn cac Hỡnh luõn Trang Hỡnh 3.1 nh hng ca cht kh trựng H2O2 n t l sng ca mu gc 38 Hỡnh 3.2 nh hng ca cht kh trựng HgCl2 n t l sng ca mu gc 39 Hỡnh 3.3 nh hng ca kinetin n kh nng tỏi sinh chi cõy gc 41 Hỡnh 3.4 nh hng ca BAP n kh nng tỏi sinh chi cõy gc 42 Hỡnh 3.5 nh hng ca kinetin n hiu qu nhõn chi cõy gc 44 Hỡnh 3.6 nh hng ca BAP n hiu qu nhõn chi cõy gc 46 Hỡnh 3.7 nh hng ca s kt hp gia BAP v Kinetin n hiu qu nhõn chi cõy gc 47 Hỡnh 3.8 nh hng ca s kt hp gia BAP v nc da n hiu qu nhõn chi cõy gc 49 Hỡnh 3.9 nh hng ca s kt hp gia BAP v IBA n hiu qu nhõn chi cõy gc 50 Hỡnh 3.10 nh hng ca IBA n hiu qu r cõy gc 52 Hỡnh 3.11 nh hng ca NAA n hiu qu r cõy gc 53 Hỡnh 3.12 nh hng ca giỏ th n t l sng ca cõy m 55 S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn NHNG CH VIấT TT BAP 6-benzylaminopurine CT Cụng thc TST iu tit sinh trng Kinetin furfurylaminopurine MS Murashinge and Skoog, 1962 NAA Naphlene acetic acid TN Thớ nghim IBA Indole butyric acid S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn M U Gc cú tờn khoa hc l Momordica cochinchinensis thuc b Vioales, h bu (Cucurbitaceae) [8] Trong gc cú cha lycopen v -caroten vi hm lng cao gp nhiu ln cỏc thc phm ang c s dng ph bin trờn th gii Qu gc v ht gc cha nhiu hp cht cú hot tớnh sinh hc cú giỏ tr, c bit ht gc c dựng nhiu bi thuc dõn tc cha bnh [5, 6, 8] Ngoi ra, cỏc nghiờn cu gn õy cũn cho thy du gc cú kh nng sa cha sai lch DNA b chiu tia t ngoi [9], cú tỏc dng chng phúng x ú l nhng c s s dng du gc vic iu tr bnh ung th [5] V mt dinh dng, tỏc gi Vng Thuý L ó chng minh rng, gc cú hm lng -carotene cao nht cỏc loi trỏi cõy vi hm lng 35,5mg/100g tht trỏi [20] Hm lng lycopene gc cao gp 76 ln khoai tõy [18] Vng Thuý L v cs (2002) ó kho sỏt thc nghim tỏc dng ca -carotene gc n tr em ( Bc Vit Nam) cho thy, lng hng cu, -carotene, vitamin A mỏu ca nhúm n xụi gc tng lờn rừ rt so vi hai nhúm n du gc v -carotene tng hp [19] Aoki v cs (2002) nghiờn cu nhng cht mu cú gc Gc cha -carotene, lycopene, zeaxanthin, -cryptoxanthin Trong ú hm lng lycopene t 380àg/g tht trỏi [14] Ishida v cs (2004) nghiờn cu thnh phn acid bộo v carotenoid gc cho thy, tht gc cha 22% acid bộo gm cú 32% oleic acid, 29% palmitic acid v 28% linoleic acid [18] V mt dc hc, ó cú nhiu nghiờn cu v kh nng khc phc hu qu cht c mu da cam v phũng cha ung th gan ca -carotene cú gc Thi gian gõn õy , qu gc ó bt u c tip th khu vc chõu vi nhiờu dang san phõm nh nc ộp, du gc T nm 2002, Vit Nam san phõm dõ u Gõc (VINAGA) c ban nhiờu trờn thi trng va ngoi nc Nhu cõu c ng tng ca sn phm qu g c lm nguyờn liu S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn chờ biờn mc cụng nghiờp a hi nh cac vung san xuõt nguyờn liờu tai nhiờu ti nh khu vc phớa Bc v phớa Nam ca Vit Nam Vit Nam cõy gc c trng ri rỏc khp ni, trung nhiu nht l cỏc vựng phớa Bc Gc cú th trng bng ht hay giõm cnh nhng cho h s nhõn ging khụng cao [8] Mt khỏc, gc l lo i cõy n tớnh khỏc gc, cõy moc t hat se phõn hoa cõy c va cõy cai ri ờng biờt Viờc trụng cõy gc bng phng phỏp gieo ht truyn thng lm gim hiu qu sn xut , tụn kem vờ cụng sc va chi ph khụng thờ phõn biờt c c iờm gii tớnh ca cõy giai on u trc cõy hoa Vi vy, phỏt trin vựng nguyờn liờu san xuõt gc, cõn thiờt phai tiờn hanh cac ky thuõt nhõn giụng vụ tớnh t cõy cỏi cú nng sut v cht lng n nh Phng phỏp ny ó v ang chng t l mt phng phỏp cú ý ngha quan trng cho cụng tỏc ging cõy trng, mang li hiu qu kinh t cao Xut phỏt t tớnh cp thit ca ti, chỳng tụi tin hnh: Nghiờn cu nhõn ging cõy gc (Momordica cochinchinensis) bng phng phỏp nuụi cy mụ Mc ớch nghiờn cu v ni dung nghiờn cu Mc ớch nghiờn cu Xõy dng thnh cụng quy trinh nhõn ging gc cú nng sut cao bng phng phỏp nuụi cy mụ Nh ú, ngi ta cú th nhõn lờn hng cõy cỏi v gi nguyờn tớnh trng di truyn ca cõy m ng thi, cỏc nghiờn cu v nuụi cy mụ s t c s cho cỏc nghiờn cu chn ging gc cú u th lai cao Ni dung nghiờn cu Nghiờn cu nh hng ca thi gian kh trựng v hoỏ cht kh trựng n t l sng ca mu gc; S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn Nghiờn cu nh hng ca mt s cht iu tit sinh trng n kh nng tỏi sinh chi gc; Nghiờn cu nh hng ca mt s cht iu tit sinh trng n kh nng nhõn nhanh ca chi gc; Nghiờn cu nh hng ca mt s cht iu tit sinh trng n kh nng r ca chi gc; Xỏc nh giỏ th phự hp cho sinh trng phỏt trin ca cõy in vitro ngoi m í ngha ca ti: - í ngha khoa hc Kt qu nghiờn cu a mt s k thut vi nhõn ging cõy gc bng phng phỏp in vitro T ú, ỏnh giỏ c tỏc ng ca mt s cht iu tit sinh trng nhõn ging cõy gc B sung ngun ti liu tham kho phc v nghiờn cu, ging dy v sn xut ging gc thng phm cú nng sut cao - í ngha thc tin Kt qu nghiờn cu gúp phn hon thin k thut nhõn ging cõy gc nhm cung cp ging gc vi s lng ln, cht lng m bo, ng thi gi c c tớnh di truyn ca cõy chn lc S húa bi Trung tõm Hc liu i hc Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read ... qu kinh t cao Xut phỏt t tớnh cp thit ca ti, chỳng tụi tin hnh: Nghiờn cu nhõn ging cõy gc (Momordica cochinchinensis) bng phng phỏp nuụi cy mụ Mc ớch nghiờn cu v ni dung nghiờn cu Mc ớch nghiờn