Tinh dầu rau má
BỘ CÔNG THƢƠNG TRƢỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHIỆP THỰC PHẨM TP.HỒ CHÍ MINH KHOA CÔNG NGHỆ HÓA HỌC TIỂU LUẬN MÔN HỌC : HƢƠNG LIỆU MỸ PHẨM GVHD LỮ THỊ MỘNG THY : Tp.Hồ Chí Minh, Tháng 02 Năm 2017 Trang BỘ CÔNG THƢƠNG TRƢỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHIỆP THỰC PHẨM TP.HỒ CHÍ MINH KHOA CÔNG NGHỆ HÓA HỌC TIỂU LUẬN MÔN HỌC: HƢƠNG LIỆU MỸ PHẨM Danh sách nhóm: STT HỌ VÀ TÊN MSSV Lê Thị Sương 2204150081 Nguyễn Hồng Thắm 2204150086 Võ Ngọc Tú 2204150011 Tp.Hồ Chí Minh, Tháng 02 Năm 2017 Trang i Mục lục 1.1 Sơ lược rau má: 1.1.1 Rau má sen: .2 1.1.2 Rau má mỡ: 1.1.3 Rau má dại: .3 1.2 Công dụng: 1.2.1 Trong thực phẩm: 1.2.2 Trong y học: 1.3 Thành phần hóa học rau má: .5 1.4 Tinh dầu rau má: 1.4.1 Tính chất vật lý .6 1.4.2 Thành phần hóa học tinh dầu rau má 1.4.3 Ứng dụng tinh dầu rau má 1.4.4 Thực nghiệm chiết tách tinh dầu rau má 1.4.5 Thử nghiệm hoạt tính kháng vi sinh vật tinh dầu rau má .10 1.4.6 Khảo sát yếu tố ảnh hưởng tách chiết tinh dầu rau má 10 Trang ii Danh mục hình Hình 1.1: Rau má .1 Hình 1.1.12: Rau má sen .2 Hình 1.1.23: Rau má mỡ Hình 1.1.34: Rau má dại Hình 1.4.35: Kem dưỡng da Hình 1.4.36: Xà phòng rau má Hình 1.4.37: Tinh dầu má Hình 1.4.108: đồ thị hàm lượng tinh dầu “rau má” theo lượng nước chưng cất .16 Hình 1.4.10:9 đồ thị hàm lượng tinh dầu “rau má” theo thời gian chưng cất 18 Hình 1.4.10: đồ thị hàm lượng tinh dầu “rau má” theo thời gian để héo nguyên liệu 19 Trang iii Danh mục bảng Bảng 1.3: Thành phần hóa học rau má Bảng 1.4.2: Thành phần hóa học tinh dầu rau má Bảng 1.4.43: So sánh thành phần hóa học tinh dầu thực nghiệm với tài liệu tham khảo .10 Bảng 1.4.5: Thử nghiệm hoạt tính kháng vi sinh vật tinh dầu rau má 10 Bảng 1.4.105: Hàm lượng tinh dầu “rau má” theo lượng nước chưng cất 16 Bảng 1.4.106: Hàm lượng tinh dầu “rau má” theo thời gian chưng cất 17 Bảng 1.4.10:7 Hàm lượng tinh dầu “rau má” theo thời gian để héo nguyên liệu .18 Trang iv 1.1 Sơ lƣợc rau má: - Rau má thuộc họ Apiaceae, mọc khắp Á Châu nên có nhiều tên khác nhau, Tích tuyết thảo (Tàu), Phanok (Lào), Trachiek kranh (Miên), Gotu kola (Sri Lanka), Pegagan (Indonesia), Takip kohol (Philippine), Bua-bok (Thái Lan) - Rau má loại thực vật mọc lan mặt đất, có trông giống đồng tiền tròn xếp nối tiếp nên gọi Liên tiền thảo - Tên khoa học Hidrocotyle asiatica Hình 1.1: Rau má Mô tả: Thân rau má gầy nhẵn, loại thân bò lan, màu xanh lục có rễ mấu Lá hình thận, màu xanh với cuống dài phần đỉnh tròn, kết cấu trơn nhẵn với Các gân dạng lưới hình chân vịt Các mọc từ cuống dài khoảng 5-20 cm Bộ rễ bao gồm thân rễ, mọc thẳng đứng Chúng có màu trắng kem che phủ lông tơ rễ Hoa rau má có màu từ ánh hồng tới đỏ, mọc thành tán nhỏ, tròn gần mặt đất Mỗi hoa bao phủ phần bắc màu xanh Các hoa lưỡng tính nhỏ (nhỏ mm), với 5-6 thùy tràng hoa Hoa có nhị vòi nhụy Quả có hình mắt lưới dày đặc, điểm phân biệt với loài chi Hydrocotyle có với bề mặt trơn, sọc hay giống mụn cơm Quả chín sau tháng toàn cây, bao gồm rễ, thu hái thủ công - Phân bố: Rau má thường mọc nơi ẩm ướt thung lũng, bờ mương thuộc vùng nhiệt đới Việt Nam, Lào, Campuchia, Indonesia, Malaysia, Srilanka, Ấn độ, Pakistan, Madagasca Trang 1.1.1 Rau má sen: Hình 1.1.12: Rau má sen - Tên khoa học: Hyđrocotyle bonariensis - Mô tả: Rau má thân mọc bò, có rễ mấu Lá mọc so le tụ tập nhiều mấu, tròn, có khía tai bèo, rộng 23 cm, cuống dài 3-5cm, phiến xanh, toàn tươi có mùi hăng, vị đắng Lá đài nhọn có màu lục, hoa từ đầu mùa xuân đến mùa thu Quả hình bầu dục, dày 1,5- 2mm, rộng 2,5- mm, đáy đỉnh có khía sống lưng phần bên gân rõ - Phân bố sinh thái: Cây sống dễ nước, nơi đất cát, bờ biển, mương rãnh hay nơi đất, vv…nhưng chịu môi trường khô, xuất xứ Nam Mĩ, gần phát mọc Việt Nam 1.1.2 Rau má mỡ: Hình 1.1.23: Rau má mỡ - Tên khoa học: Hydrocotyle Sibthorpioides Lam - Tên khác: Rau má họ, rau má chuột - Mô tả: Cây thảo nhỏ mọc quanh năm, thân mọc bò, mang rễ mấu, tròn, mép khía không Trang Cụm hoa nhiều tán mọc nách lá, mang hoa màu trắng Lá cụm hoa có cuống màu trắng dài Quả dẹt nhẵn có lông nhỏ - Phân bố sinh thái: Cây mọc chỗ ẫm, ven đường, bờ ruộng, bờ ao Ra hoa vào tháng tư Rau má mỡ thường gặp mọc hoang khắp nơi nước ta nước châu Á, Châu Phi, phân bố Châu Mỹ Ôxtrâylia 1.1.3 Rau má dại: Hình 1.1.34: Rau má dại - Tên khoa học: Hydrocotyle Chinenisis (Cunn) Craib - Tên khác: Rau má rừng - Mô tả: Cây thảo sống dai, có thân dài, cành mọc vươn lên dài -20 cm, có lông mềm, mang nhẵn, phiến hình thận mắt chim, lõm sâu hình tim, chia thùy hình tròn hay khía tai bèo, cuống dài, có lông, kèm mỏng, tròn hay hình trái xoan Cụm hoa nách đối diện với lá, thường đơn độc to lá, cuống tán dài cuống lá, nhẵn hay có lông dài, cuống hoa ngắn Bao chung có bắc nhỏ hình trái xoan, nguyên mang khía gốc, chín hình tròn, có màu đen, mang vòi ngắn Sinh thái phân bố: Cây mọc đất ẩm, gần khe suối rừng núi cao Ra hoa vào mùa thu Nhiều tài liệu cho loài Trung Quốc Việt Nam Ở nước ta gặp Cao Bằng, Sơn La, Hòa Bình vào đến KonTum 1.2 Công dụng: 1.2.1 Trong thực phẩm: Rau má dùng thực phẩm loại gia vị (ăn sống có vị thơm), rau ăn (nấu canh, luộc, muối dưa, ) dùng nước giải khát (cả giã nhuyễn với nước đường) Trang 1.2.2 Trong y học: Ít biết uống nước rau má nhiều gây nhức đầu, ý thức thoáng qua, phụ nữ uống nhiều rau má làm giảm khả mang thai Bên cạnh đó, rau má có tính hàn nên bị đầy bụng, tiêu chảy phải cẩn thận dùng, nên ăn kèm với vài lát gừng cho ấm bụng trung hòa tính hàn rau má Hơn dùng cách rau má chữa nhiều bệnh Theo tây y: - Rau má loại rau thông dụng có tác dụng sát trùng, giải độc, nhiệt, lương huyết Ngoài ra, rau má loại dược thảo có tính bổ dưỡng cao - Rau má có nhiều sinh tố, khoáng chất, chất chống oxi hóa, dùng để cải thiện trí nhớ, tăng tuổi thọ, làm máu lưu thông tĩnh mạch mao mạch, có tác dụng sát trùng, làm chậm lão hóa, hạ huyết áp - Hoạt chất rau má có tác dụng lên số biểu bì, kích thích sừng hóa tác dụng đến phân chia tế bào làm lành nhanh vết thương da - Chiết xuất từ rau má có tác dụng chống lại lão hóa da thúc đẩy trình tái tạo tế bào da làm cho da căng đầy sức sống bề mặt da săn Ngoài rau má có tác dụng chống loét dày, làm chậm phát triển khối u (khi thử nghiệm chuột), kháng virus kháng nấm - Rau má có tác dụng giúp cho cơ, xương khỏe chắc, da mịn màng, chống lão hóa, chống tress, giải độc gan, an thần - Đối với tuần hoàn huyết, hoạt chất rau má có tác dụng cải thiện vi quản tĩnh mạch, mao mạch, bảo vệ lớp áo thành mạch làm tăng tính đàn hồi mạch máu - Khả chống ung thư rau má: Các nghiên cứu tác dụng rau má ghi nhận tinh dầu rau má có tác dụng ức chế tăng trưởng tế bào gây bệnh ung thư Theo đông y: - Rau má có vị đắng, tính mát, có tác dụng nhiệt giải độc, tán ứ, thống, lương huyết tân sinh,…Toàn rau má dùng làm thuốc quanh năm, dùng tươi hay phơi khô tốt Trong trường hợp dùng khô, người ta nhổ rửa phơi khô, dùng đem thái nhỏ sắc lấy nước uống Sau số thuốc đơn giản: - Chữa mẩn ngứa: Lấy khoảng 50g rau má, rửa sạch, giã dập (với 200 ml nước sôi) uống ngày - Chữa rôm sẩy: Dùng 50 g rau má rửa giã vắt lấy nước, thêm đường cho dễ uống ăn rau má tươi trộn với canh dấm chữa bệnh rôm sảy - Mụn nhọt: Rau má gấc thứ 50 g rửa sạch, giã nhỏ, cho muối vào trộn đều, đắp lên chỗ đau băng lại, ngày thay thuốc lần đắp khỏi - Hạ sốt: Khi bị sốt, nhức đầu, lấy 30 g rau má tươi, rửa sạch, giã nát, thêm nước sôi để nguội, vắt lấy nước hòa 10 g bột sắn dây, thêm đường uống - Cảm nóng: Lấy 40g rau má, tre, cỏ nầm trầu, sắn dây, duối, thứ Trang 20g, sắc đặc uống ngày lầ, lần thang - Sốt xuất huyết: Rau má, cỏ nầm trầu, huyết dụ, cối xay thứ 20g, cỏ nhọi nồi cháy, sắc đặc, uống ngày lần , lần thang - Hạ huyết áp: Rễ nhàu 16g, rễ kiến cò12g, tre 12g, rễ tranh 12g, rễ cỏ xước 12g, rau má 16 g Sắc uống thay nước ngày - Trong trường hợp đái rắt, đái buốt, đái máu: Có thể dùng rau má 40g, nõn tre 40g tươi, giã nát với vài hạt muối, gạn lấy nước uống - Chữa mệt mỏi thay đổi thời tiết: Rau má 40g ngải cứu, tía tô, kinh giới thứ 20g, sắc đặc ngày uống lần - Chữa ho, viêm họng: Rau má rửa sạch, giã vắt lấy nước cốt đặc thêm đường cho dể uống Trẻ em ngày lần lần ½ bát cơm, người lớn ngày lần lần bát cơm Uống liên tục đến ngày - Trị khí hư, phụ nữ đau bụng lúc có kinh: Dùng rau má 20g, mã đề, rễ cỏ tranh, râu ngô, củ dứa, rau dừa thứ 20g, sài đất 20g Nếu rau má tươi giã nhuyễn lấy nước uống, khô sắc uống ngày lần - Chữa chảy máu chân răng, chảy máu cam chứng chảy máu: Rau má 30g, cỏ nhọ nồi, trắc bá diệp vị 15g sắc lấy nước uống - Thuốc lợi sữa: Rau má tươi hay luộc ăn nước - Ngộ độc ngón, say sắn: Rau má 50 -100g giã nát, hòa với nước chè đặc, thêm đường thật ngọt, uống lần (kinh nghiệm người Thái Tây Bắc) Hoặc lấy rau má tươi, rửa sạch, giã nát, hòa với nước ấm để uống - Ngộ độc nấm: Lấy 400 g rau má rửa sạch, giã nát, vắt lấy nước cốt, hòa với 200 g đường phèn để uống - Đơn thuốc có rau má phổ biến vào năm 1950 miền đông Nam Bộ gồm: Rau má, rễ cỏ tranh, cỏ mần trầu, cỏ nhọ nồi, cam thảo nam, ké đầu ngựa thứ g, muống trâu, củ sả, vỏ quýt thứ g, gừng tươi g Tất thái nhỏ, phơi khô, sắc uống hai lần ngày Thuốc điều hòa thể với tác dụng nhuận gan, nhuận tiểu, nhuận tràng, nhuận huyết, giải độc kích thích tiêu hóa - Hiện nay, vài nước người ta chế rau má dạng: Viên nén 0,01g rau má để chữa chứng giản tỉnh mạch, chứng nặng chân máu tỉnh mạch chảy chậm trở tim Ngày uống 3-6 viên vào bữa cơm Thuốc tiêm 1ml chứa 0,02g cao rau má Cách ngày tiêm bắp ống phối hợp thuốc bôi mỡ (1% cao rau má) dạng bột chứa 2% rau má để vết bỏng, vết thương chấn thương vết phẩu thuật tổn thương da niêm mạc (tai, mũi, họng) 1.3 Thành phần hóa học rau má: Một số nghiên cứu phân tích cho thấy thành phần hóa học rau má gồm phong phú Trang STT 10 Tên thành phần hóa học Nước Protein Cacbonhydrat Cellulose Vitamin C Vitamin B1 Calcium Phosphorus iron β-caroten Đơn vị Hàm lƣợng % khối lượng % chất khô % chất khô % chất khô mg% mg% mg% mg% mg% mg% 88,20 3,20 1,80 4,50 3,70 0,15 2,29 2,00 3,10 1,30 Bảng 1.3: Thành phần hóa học rau má Ngoài rau má chứa số acid béo hợp chất saponin, đặc biệt nhóm terpenoid Đây nhóm hoạt chất nghiên cứu nhiều lĩnh vực y dược nhằm phục vụ việc chữa bệnh cho người 1.4 Tinh dầu rau má: Nhiều quốc gia giới nghiên cứu tinh dầu Trung Quốc, Malaysia, Hàn Quốc, Srilanca, Ấn Độ , Bangladesh, Tây Himalaya, Nam Phi Năm 2004 Yu- Kuan Chou (Tai wan) sữ dụng phương pháp chưng cất lôi nước để chiết tinh dầu rau má xác định thành phần hóa học tinh dầu phương pháp sắc ký khí ghép phổ khối lượng Có 19 hợp chất tìm thấy tinh dầu rau má (Hydrocotyle Asiatica) 39 hợp chất từ tinh dầu Hydrocotyle sibthorpioides Lam Tinh dầu rau má có nhiều hoạt tính sinh học đáng lưu ý như: hoạt tính kháng khuẩn (gram dương: Bacillus subtilis, Staphylococcus aureus; gram âm: Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa Shigella sonnei); hoạt tính kháng nấm: Aspergillus niger, Rhizopus oryzae, Candida albicans, Fusarium solani, Colletotrichum musae; hoạt tính dược học số thuốc dân gian; hoạt tính xua đuổi loài muỗi Anopheles stephensi gây bệnh sốt rét; thành phần mỹ phẩm dưỡng da Đến có nghiên cứu tinh dầu rau má việt nam 1.4.1 Tính chất vật lý Tinh dầu thể lỏng, có màu vàng nhạt, mùi thơm dễ chịu Tỷ trọng 0.85 Chỉ số khúc xạ (230C) 1.48 Góc quay cực (200C) -6.670 IA 8.29 IE 25.76 IS 34.05 Trang 1.4.2 Thành phần hóa học tinh dầu rau má STT 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 Cấu phần p-Cimen d-Limonen Linalol 3-Nonen-2-on α-Terpineol α -Cubeben β-Elemen Cariophilen Tujopsen β-Farnesen Allo-aromadendren Acoradien 8-Cedren β-Patchoulen β -Chamigren β -Selinen β -Panasinsen y-Murolen δ-Cadinen Spatulenol Oxid cariophilen 3,4-Dimetil-3-ciclohexen-1-carboxaldehid 2-lsopropil-5-metil-9-metilenbiciclo[4,4,0]decen a-Murolen tau-iVlufolol 6-lsopropeniJ-4,8a-dimetil1,2,3,5,6,7,8,8a-octahidro-2-3- naptalenol Hợp chất hidrocarbon Tổng cộng % (GC/MS) 0,22 0,2 1.39 0,41 0.42 0,89 4,28 4,56 0,55 56.09 1,52 1,11 0.37 0,46 0,51 0,34 0,85 0,26 0.72 0.59 3,64 3,55 0,82 0.51 1.76 0,27 73,71 86,56 Bảng 1.4.2: Thành phần hóa học tinh dầu rau má 1.4.3 Ứng dụng tinh dầu rau má Trong thực phẩm: giúp cho thức ăn bảo quản lâu, khử trùng, chống nấm mốc… làm tăng hương vị thức ăn Mỹ phẩm: Dưỡng da: Đem lại da trắng mịn, xóa mụn Trộn với kem dưỡng, giúp giữ ẩm cho da, vào mùa đông Trang Hình 1.4.35: Kem dưỡng da Kháng khuẩn: Giúp sát trùng, kháng khuẩn Xua đuổi muỗi Hình 1.4.36: Xà phòng rau má Cho vào nước tắm Giúp kích thích hệ thống thần kinh, làm tinh trần tỉnh táo Giảm căng thẳng tăng cường trí nhớ Hình 1.4.37: Tinh dầu má Trang 1.4.4 Phƣơng pháp chiết tách tinh dầu rau má (Tài liệu: Nghiên cứu thành phần hóa học hoạt tính kháng khuẩn tinh dầu rau má, (Centella asiatica (L.) Urban tác giả: Nguyễn Ngọc Hạnh, Lê Ngọc Thạch) Nguyên liệu Phần mặt đất rau má thu hái xã thân cử nghĩa, huyện châu thành, tỉnh tiền giang, vùng chuyên canh rau má tiếng miền nam việt nam Chiết tách Tinh dầu chiết tách phương pháp chưng cất lôi nước (hydrodistillation, HD) đun nóng cổ điển (conventional heating hydrodistillation, CHHD), chiếu xạ vi sóng (microwave irradiation hydrodistillation) có thêm nước vào nguyên liệu (with water, MIHD) không thêm nước vào nguyên liệu (without water, MIHD) sử dụng lò vi sóng gia dụng cải tiến sanyo EM-D553N, 2.450 MHz, 750 W, với Clevenger 2000 ml (ống gạn tinh dầu nhẹ) Mỗi lần chiết tách sử dụng 400g nguyên liệu xay nhỏ 200 ml nước Lắp hệ thống chưng cất nước tiến hành đun khoảng thời gian định (tính từ giọt ngưng tụ đầu tiên) Để nguội, chiết tách phần tinh dầu ống gạn diethyl ether Làm khan nước dung dịch ether Na2SO4 khan Sau lọc thu hồi dung môi cô quay Xác định tinh dầu cao thu khối lượng nguyên liệu tươi tương ứng, tỉ lệ xem hàm lượng tinh dầu (%) nguyên liệu (hoặc hiệu suất tinh dầu) Do đó, hàm lượng tùy thuộc vào phương pháp chiết tách Thành phần hóa học Thành phần hó học tinh dầu phân tích phương pháp sắc ký khí ghép khối phổ (GC/MS), tiến hành máy Agilent, GC 7890A MS 5975C Cột TR-5MS (30m, 0.25mm, 0.25 μm film) Sử dụng helium làm khí mang áp suất 19.248 psi Nhiệt độ buồng tiêm 2500C Tỉ lệ chia dòng 1/20, thể tích tiêm 1μm Chương trình nhiệt: nhiệt độ đầu 600C, tăng 30C/phút đến 2400C Ghi nhận khối phổ m/z khoảng 300-500, lượng ion hóa 70eV Thư viện phổ NIST 2008 Kết thảo luận Chiết tách Chưng cất nước cổ điển tiến hành từ đến Chưng cất nước chiếu xạ vi sóng (có thêm nươc không thêm nước) tiến hành từ 42 phút tới 52 phút Kết ghi bảng sau Chưng cất nước Đun nóng cổ diển Chiễu xạ vi sóng (có thêm nước) Chiếu xạ vi sóng (không thêm nước) Thời gian 52 phút 48 phút Hàm lượng (%) 0.0374 0.0150 0.0146 Hàm lượng tinh dầu tương đối thấp phù hợp với kết giải phẫu học tuyến tinh dầu rau má, kích thước túi tiết nhỏ mật độ thấp Khi toàn thân rau má nguyên, khó ngửi thấy mùi thơm, vò nát thấy mùi thơm thoang thoảng Sự so sánh tinh dầu thu theo ba phương pháp cho thấy phương pháp chiếu xạ vi sóng (có thêm nước) cao thấy phương pháp chiếu xạ vi sóng (không thêm nước) Do phương pháp chiếu xạ vi sóng (không thêm nước) sử dụng lượng nước tự nhiên có sẵn nguyên liệu để lôi tinh dầu lượng nước không đủ Trang Thời gian chiết tách tốt phương pháp chiếu xạ vi sóng (có thêm nước) ngắn 5,2 lần so với phương pháp đun nóng cổ điển hàm lượng tinh dầu thu tư phương pháp chiếu xạ vi sóng (có thêm nước thấp 2,5 lần so với phương pháp đun nóng cổ điển Điều giải thích tinh dầu ram má chứa nhiều cấu phần không phân cực, thường loại hợp chất hydrocacbon hợp chất chứa oxygen Vì tinh dầu rau má thu theo phương pháp chiếu xạ vi sóng không phản ánh tự nhiên, khảo sát phía sau sử dụng loại tinh dầu thu theo phương pháp chưng cất nước đun nóng cổ điển So sánh thành phần hóa học tinh dầu thực nghiệm với tài liệu tham khảo Cấu phần Apiol Bicidogermacren Oxid cariophilen β-Cariophilen α-Copaen β-Elemen Mircen β-Farnesen Germacren D a-Humulen Hàm lƣợng cấu phần (%GC/MS) Thực Malaysia Bangladesh Srilanka Nghiệm 4.49 Tây Himalaya Ấn Độ 3.64 4.56 3.3 23.2 15.1 10.3 56.09 1.9 26.8 2.51 20.3 Vết 4.71 0.85 4.45 6.02 23.9 33.7 12 14 Nam Phi 11.22 0.27 19.8 1.58 6.55 6.3 5.4 23.1 4.6 11.3 6.29 21.06 Bảng 1.4.43: So sánh thành phần hóa học tinh dầu thực nghiệm với tài liệu tham khảo 1.4.5 Thử nghiệm hoạt tính kháng vi sinh vật tinh dầu rau má Vi sinh vật Staphylococcus aureus Escherichia coli Bacillus subtilis Proteus vulgaris Candida albicans Đƣờng kính vòng kháng vi sinh vât (mm) 10° 10-1 10-2 10-3 35 10 28 29 23 19 10 10 6 6 6 Bảng 1.4.5: Thử nghiệm hoạt tính kháng vi sinh vật tinh dầu rau má Tại nồng độ tinh dầu rau má nguyên chất 10-1 thấy vòng kháng vi sinh vật xuất tất chủng vi sinh vật thử nghiệm: Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Bacillus subtilis, Proteus vulgaris, Candida albicans Tại nồng độ 10-2 thấy vòng kháng vi sinh vật tiếp tục xuất chủng Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis Tại nồng độ 10-3 không thấy xuất vòng kháng vi sinh vật tất mẫu thử nghiệm 1.4.6 Khảo sát yếu tố ảnh hƣởng tách chiết tinh dầu rau má 1.4.6.1 Phương pháp thực nghiệm: 1.4.6.2 Thu mẫu xử lý mẫu: Rau má mua chợ Tân Tịch Khi mua chọn rau má tươi, xanh Trang 10 không bị vàng úa, lấy phần mặt đất gồm cuống rau má Nguyên liệu sau mua loại bỏ úa ,lá sâu, vàng, ….và rửa Rau má bảo quản tươi tiến hành thí nghiệm chưng cất lôi nước để ly trích tinh dầu 1.4.6.3 Sơ đồ trích ly tinh dầu: Trang 11 1.4.6.4 Khảo sát trình ly trích tinh dầu (khóa luận tốt nghiệp: ly trích tinh dầu từ rau má) Sự khảo sát trình ly trích tinh dầu thực với yếu tố: - Ảnh hưởng lượng nước chưng cất tinh dầu - Ảnh hưởng thời gian chưng cất tinh dầu - Ảnh hưởng thời gian để héo nguyên liệu Khi tìm thông số tối ưu, ta cố định thông số tìm thông số tối ưu lại Ảnh hƣởng lƣợng nƣớc chƣng cất tinh dầu: a) Cho 300g nguyên liệu phần mặt đất gồm cuống rau má xay nhuyễn với 75ml nước vào bình cầu đáy tròn có nhánh 500ml Lắp bình cầu vào chưng cất lôi nước mô hình Đun sôi nước để nước sang bình cất đun lửa theo dõi hệ thống qua ống thủy tinh bình nước sôi Theo dõi lượng tinh dầu cất Thời gian thực ngừng Sau đó, cho hỗn hợp tinh dầu nước vào bình lóng chiết đietyl ete làm khan Na2SO4 Lặp lại thí nghiệm với khối lượng nguyên liệu 300 gam, thời gian thực lượng nước thay đổi 100 ml, 150 ml 200ml Chúng thu khối lượng tinh dầu bảng sau: Thí nghiệm Lượng nước chưng cất (ml) 75 100 150 200 Thời gian chưng cất (giờ) 3 3 Khối lượng nguyên liệu (gam) 300 300 300 300 Khối lượng tinh dầu (gam) 0,25 0,3 0,2 0,18 Hàm lượng tinh dầu (%) 0,083 0,1 0,067 0,06 Bảng 1.4.105: Hàm lượng tinh dầu “rau má” theo lượng nước chưng cất Hình 1.4.108: đồ thị hàm lượng tinh dầu “rau má” theo lượng nước chưng cất Trang 16 Nhận xét: Tinh dầu chất lỏng suốt không màu, mùi thơm tự nhiên Qua đồ thị hình 3.1, ta thấy với thời gian chưng cất khối lượng nguyên liệu 300 gam hàm lượng tinh dầu tăng lượng nước tăng, với lượng nước chưng cất 100 ml hàm lượng tinh dầu cao nhất, lượng nước cao 100 ml hàm lượng tinh dầu lại giảm Từ kết luận, chưng cất 300 gam rau má lượng nước sử dụng tốt 100ml Do thử cố định lượng lượng nước thay đổi thời gian chưng cất tinh dầu b) Ảnh hƣởng thời gian chƣng cất tinh dầu: Cho 300g nguyên liệu phần mặt đất rau má xay nhuyễn với 100ml nước vào bình cầu đáy tròn có nhánh 500ml Lắp bình cầu vào chưng cất lôi nước mô hình Đun sôi nước để nước sang bình cất Đun lửa theo dõi hệ thống qua ống thủy tinh bình nước sôi Theo dõi lượng tinh dầu cất Thời gian chưng cất thực sau giờ, 30 phút, 30 phút Sau chiết đietyl ete làm khan Na2SO4 thu khối lượng tinh dầu 0,2 gam, 0,24 gam, 0,3 gam, 0,3 gam Khi thay đổi thời gian chưng cất tinh dầu thu kết thể Bảng 1.4.10 hình 1.4.10 Thí nghiệm Lượng nước chưng cất (ml) 100 100 100 100 Thời gian chưng cất (giờ) 2.30 3.30 Khối lượng nguyên liệu (gam) 300 300 300 300 Khối lượng tinh dầu (gam) 0,2 0,24 0,3 0,3 Hàm lượng tinh dầu (%) 0,067 0,08 0,1 0,1 Bảng 1.4.106: Hàm lượng tinh dầu “rau má” theo thời gian chưng cất Trang 17 Hình 1.4.10:9 đồ thị hàm lượng tinh dầu “rau má” theo thời gian chưng cất Nhận xét: Dựa vào bảng 3.2 hình 3.2 ta thấy, với khối lượng nguyên liệu 300g lượng nước chưng cất tối ưu 100ml, thời gian chưng cất thay đổi Khi thời gian tăng dần hàm lượng tinh dầu tăng Ở thời điểm hàm lượng tinh dầu đạt tối ưu thời gian chưng cất hàm lượng tinh dầu không tăng Vì vậy, cố định lượng nước chưng cất 100ml thời gian chưng cất tinh dầu thử thay đổi thời gian để héo nguyên liệu Ảnh hƣởng thời gian để héo nguyên liệu: c) Lấy 300g nguyên liệu để héo giờ, sau xay nhuyễn với 100ml nước vào bình cầu đáy tròn có nhánh 500ml Lắp bình cầu vào chưng cất lôi nước mô hình đun sôi nước để nước sang bình cất Đun lửa theo dõi hệ thống qua ống thủy tinh bình nước sôi Theo dõi lượng tinh dầu cất Thời gian thực ngừng Sau đó, cho hỗn hợp tinh dầu vào bình lóng tiếp tục chiết điety ete làm khan Na2SO4 Lặp lại thí nghiệm trên, lấy 300g nguyên liệu để héo giờ, giờ, xay nhuyễn 100ml nước Thí nghiệm Thời gian để Lượng nước Thời gian héo nguyên chưng cất chưng cất liệu (giờ) (ml) (giờ) 100 100 100 100 3 3 Khối lượng nguyên liệu (gam) 300 300 300 300 Khối lượng Hàm lượng tinh dầu tinh dầu (gam) (%) 0,31 0,3 0,17 0,15 0,103 0,1 0,056 0,05 Bảng 1.4.10:7 Hàm lượng tinh dầu “rau má” theo thời gian để héo nguyên liệu Trang 18 Hình 1.4.10: đồ thị hàm lượng tinh dầu “rau má” theo thời gian để héo nguyên liệu Nhận xét: Từ đồ thị hình 3.3 ta thấy, với khối lượng nguyên liệu 300gam thời gian chưng cất tối ưu lượng nước chưng cất tối ưu 100 ml thời gian để héo nguyên liệu tăng hàm lượng tinh dầu thu giảm dần Hàm lượng tinh dầu giảm từ nguyên liệu tươi đến để héo, sau hàm lượng tinh dầu giảm nhanh nên chọn thời gian để héo nguyên liệu từ lúc thu mẫu đến khoảng thời gian tốt thuận tiện cho việc ly trích tinh dầu Hàm lượng tinh dầu giảm để héo nguyên liệu lâu lượng nước giảm nhiều trình tinh dầu bị lôi theo Đồng thời, rau héo làm cho số thành phần dễ bị phân hủy tinh dầu tác động yếu tố môi trường nhiệt độ, ánh sáng,… điều hoàn toàn phù hợp với kết thực nghiệm d) Kết luận kiến nghị Kết luận: Qua kết khảo sát tinh dầu rau má, đưa số kết luận sau: - Tên khoa học rau má là: Hidrocotyle Asiatica - Bằng phương pháp chưng cất lôi nước, tách tinh dầu rau má từ phần mặt đất gồm cuống Quá trình chưng cất tiến hành với ảnh hưởng yếu tố: + Ảnh hưởng lượng nước chưng cất tinh dầu + Ảnh hưởng thời gian chưng cất tinh dầu + Ảnh hưởng thời gian để héo nguyên liệu - Từ kết thực nghiệm tìm điều kiện tối ưu cho việc ly trích tinh dầu phương pháp chưng cất lôi nước : Trang 19 + Thời gian chưng cất tinh dầu + Lượng nước chưng cất tinh dầu 100 ml + Thời gian để héo nguyên liệu Kiến nghị: - Tiến hành nghiên cứu tiếp tục việc ly trích tinh dầu rau má phương pháp khác để so sánh - Tiếp tục khảo sát tinh dầu rau má với nguồn nguyên liệu vùng khác để so sánh, tùy theo vùng hàm lượng tinh dầu khác nhau, thành phần hàm lượng cấu phần tinh dầu có khác biệt - Xác định thành phần hóa học tinh dầu rau má phương pháp phân tích đại Trang 20 ... phần hóa học rau má: .5 1.4 Tinh dầu rau má: 1.4.1 Tính chất vật lý .6 1.4.2 Thành phần hóa học tinh dầu rau má 1.4.3 Ứng dụng tinh dầu rau má ... Thực nghiệm chiết tách tinh dầu rau má 1.4.5 Thử nghiệm hoạt tính kháng vi sinh vật tinh dầu rau má .10 1.4.6 Khảo sát yếu tố ảnh hưởng tách chiết tinh dầu rau má 10 Trang ii Danh... phòng rau má Hình 1.4.37: Tinh dầu má Hình 1.4.108: đồ thị hàm lượng tinh dầu rau má theo lượng nước chưng cất .16 Hình 1.4.10:9 đồ thị hàm lượng tinh dầu rau má theo