Bước đầu nghiên cứu hình thái và cấu tạo giải phẫu của loài thuẫn râu (scutellaria barbata d don) ở hải dương, bắc ninh, hưng yên

TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM HÀ NỘI 2 KHOA SINH – KTNN _ _ __ _ _ NGÔ THỊ HUYỀN DUNG BƯỚC ĐẦU NGHIÊN CỨU HÌNH THÁI VÀ CẤU TẠO GIẢI PHẪU CỦA LOÀI THUẪN RÂU SCUTELLARIA BARBATA D.DON Ở HẢ

TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM HÀ NỘI 2

KHOA SINH – KTNN _ _ __ _ _

NGÔ THỊ HUYỀN DUNG

BƯỚC ĐẦU NGHIÊN CỨU HÌNH THÁI VÀ CẤU TẠO GIẢI PHẪU CỦA LOÀI THUẪN RÂU

(SCUTELLARIA BARBATA D.DON)

Ở HẢI DƯƠNG, BẮC NINH, HƯNG YÊN

KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC

Chuyên ngành: Thực vật học

LỜI CẢM ƠN

Em xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến Tiến sĩ Đỗ Thị Lan Hương đã

tận tình hướng dẫn em để hoàn thành khoá luận này

Em xin chân thành cảm ơn các thầy cô trong tổ Thực vật, khoa Sinh – KTNN, Trường Đại học Sư phạm Hà Nội 2 đã tạo điều kiện giúp đỡ em trong quá trình làm đề tài và hoàn thành khóa luận này

Vì lần đầu tiên bước vào làm nghiên cứu nên không tránh khỏi những thiếu sót, em rất mong nhận được ý kiến đóng góp của thầy cô và các bạn sinh viên để khóa luận của em được hoàn thiện hơn

Xuân Hòa, ngày 10, tháng 5, năm 2016

Sinh viên thực hiện

Ngô Thị Huyền Dung

LỜI CAM ĐOAN

Khóa luận này được thực hiện dưới sự hướng dẫn của Tiến sĩ Đỗ Thị Lan Hương

Tôi xin cam đoan:

- Đây là kết quả của tôi nghiên cứu

- Kết quả này không trùng với kết quả nghiên cứu của bất kì tác giả nào đã được công bố

Nếu sai tôi xin hoàn toàn chịu trách nhiệm

Sinh viên thực hiện

Ngô Thị Huyền Dung

DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT

MHD : Mẫu Hải Dương MBN : Mẫu Bắc Ninh MHY : Mẫu Hưng Yên

MỤC LỤC

MỞ ĐẦU 1

1.Lý do chọn đề tài 1

2 Mục đích nghiên cứu 2

3 Ý nghĩa khoa học và ý nghĩa thực tiễn 2

4 Bố cục khóa luận 2

CHƯƠNG 1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 3

1.1 Nghiên cứu hình thái và giải phẫu thực vật trên thế giới 3

1.2 Nghiên cứu hình thái và giải phẫu thực vật ở Việt Nam 4

1.3 Những nghiên cứu về loài Thuẫn râu (Scutellaria barbata ) 6

1.3.1 Trên thế giới 6

1.3.2 Ở Việt Nam 8

CHƯƠNG 2 ĐỐI TƯỢNG, ĐỊA ĐIỂM, THỜI GIAN VÀPHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 14

2.1 Đối tượng nghiên cứu 14

2.2 Thời gian nghiên cứu 14

2.3 Địa điểm nghiên cứu 14

2.4 Phương pháp nghiên cứu 14

2.4.2 Nghiên cứu ngoài thực địa 14

2.4.3 Phương pháp ngâm mẫu tươi 16

2.4.4 Nghiên cứu trong phòng thí nghiệm 16

CHƯƠNG 3 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 18

3.1 Cấu tạo giải phẫu của ba giống Thuẫn râu thu được ở ba khu vực Hưng

Yên, Bắc Ninh, Hải Dương 18

3.1.1 Giống Thuẫn râu tại khu vực Hải Dương 18

3.1.3 Giống Thuẫn râu tại khu vực Hưng Yên 32

3.2.Giá trị tài nguyên của loài Thuẫn râu 38

CHƯƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ Ý KIẾN ĐỀ XUẤT 40

TÀI LIỆU THAM KHẢO 41

DANH MỤC HÌNH

Hình 1: Cây Thuẫn râu (mẫu thu ở Hải Dương) 11

Hình 2: Cây Thuẫn râu (mẫu thu ở Bắc Ninh) 11

Hình 3: Cây Thuẫn râu (mẫu thu ở Hưng Yên) 11

Hình 4: Cấu tạo thứ cấp của rễ cây MHD 18

Hình 5: Cấu tạo sơ cấp thân MHD 20

Hình 6: Một phần thân thứ cấp của MHD 21

Hình 7: Cấu tạo giải phẫu lá cây MHD 23

Hình 8: Cấu tạo gân lá của MHD 24

Hình 9: Cấu tạo cuống lá của MHD 24

Hình 10: Cấu tạo thứ cấp của rễ cây MBN 25

Hình 11: Cấu tạo sơ cấp của thân MBN 27

Hình 12: Một phần thân sơ cấp của MBN 27

Hình 13: Cấu tạo thứ cấp thân MBN 29

Hình 14: Cấu tạo giải phẫu lá cây MBN 30

Hình 15: Cấu tạo gân chính MBN 31

Hình 16: Cấu tạo cuống lá MBN 31

Hình 17: Một phần rễ thứ cấp MHY 32

Hình 18: Cấu tạo sơ cấp của thân MHY 33

Hình 19: Cấu tạo thứ cấp của thân MHY 35

Hình 20: Cấu tạo lá MHY 36

Hình 21: Cấu tạo gân của MHY 37

Hình 22: Cấu tao cuống lá MHY 38

MỞ ĐẦU

1 Lý do chọn đề tài

Ở nước ta, tỉ lệ người mắc bệnh ung thư đang tăng lên rất cao Theo số

liệu thống kê mới nhất của Hiệp hội Ung thư Việt Nam, mỗi năm cả nước có

thêm khoảng 150.000 ca mắc bệnh mới và 75.000 ca tử vong do ung thư Nếu

cộng thêm với số bệnh nhân đã mắc tính đến thời điểm hiện tại, cả nước có

khoảng 240.000 – 250.000 bệnh nhân bị ung thư đang điều trị Vì vậy, các

nhà khoa học đang nỗ lực tìm ra các loài cây thuốc có hoạt tính ức chế các tế

bào ung thư mà không gây ảnh hưởng đến tế bào lành Những năm gần đây,

loài Thuẫn râu (Scutellaria barbata) được một số nước trong khu vực như

Trung Quốc, Hàn Quốc, Nhật Bản,… nghiên cứu và nhân giống để làm thuốc

Qua khảo sát hoạt tính sinh học của một số hợp chất trong loài cây này, các

nhà khoa học thấy rằng, chúng có khả năng ức chế sự phát triển của tế bào

ung thư Ở Việt Nam, Thuẫn râu (Scutellaria barbata D Don) (họ Bạc hà -

Lamiaceae Lindl.) hay còn gọi là Hoàng cầm râu, Thẩm râu, Bán chi liên,

Nha loát thảo, Hiệp diệp, Hàn tín thảo là loài cây thuốc có khả năng chữa

được nhiều bệnh như điều trị các khối u tân sinh, áp xe phổi, lao phổi xơ,

viêm ruột thừa, viêm gan, xơ gan cổ chướng, hạ sốt, lợi tiểu, trị mụn nhọt,

sưng đau, viêm mủ, rắn độc cắn, với ghi nhận đặc biệt cây có thể chữa bệnh

ung thư phổi, ung thư gan, ung thư trực tràng, ung thư vú ở thời kỳ đầu (theo

Đỗ Huy Bích và cộng sự, 2004; Đỗ Thị Thảo, 2004; Võ Văn Chi, 2007) [8,

13, 35]

Ở Việt Nam, ngoài tự nhiên, đây là loài rất khó gặp, khả năng tái sinh

tự nhiên bằng hạt kém Tại Hưng Yên, Bắc Ninh, Hải Dương đều ghi nhận chỉ

có một quần thể nhỏ, số lượng ít, sống ven bờ ruộng [24] Do đó việc nhận

dạng Thuẫn râu là rất khó Để góp phần vào việc bảo vệ nguồn gen, giúp

người nghiên cứu nhận dạng chính xác loài Thuẫn râu, chúng tôi tiến hành

nghiên cứu đề tài: “Bước đầu nghiên cứu hình thái và cấu tạo giải phẫu

của loài Thuẫn râu (Scutellaria barbata D Don) ở Hải Dương, Bắc Ninh,

Hưng Yên”

2 Mục đích nghiên cứu

- Mô tả hình thái và cấu tạo giải phẫu ba giống Thuẫn râu thu được ở 3

khu vực Hải Dương, Bắc Ninh, Hưng Yên

- Giá trị tài nguyên của loài Thuẫn râu

3 Ý nghĩa khoa học và ý nghĩa thực tiễn

3.1 Ý nghĩa khoa học

- Bổ sung kiến thức về hình thái, cấu tạo giải phẫu và giá trị tài nguyên

của loài Thuẫn râu (Scutellaria barabata D.Don)

3.2 Ý nghĩa thực tiễn

- Kết quả đạt được làm phong phú thêm dẫn liệu về hình thái, giải phẫu

các loài thực vật Có khả năng nhận dạng nhanh loài Thuẫn râu ngoài thực tế

4 Bố cục khóa luận

Khóa luận gồm 45 trang, 22 ảnh, 1 bảng được chia thành các phần

chính như sau: Mở đầu, phần 1 (Tổng quan tài liệu), phần 2 (Đối tượng, địa

điểm, thời gian, phương pháp nghiên cứu, phần 3 (Kết quả nghiên cứu), phần

4 (Kết luận và kiến nghị, đề xuất), Tài liệu tham khảo

CHƯƠNG 1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Nghiên cứu hình thái và giải phẫu thực vật trên thế giới

Thực vật có vai trò vô cùng quan trọng đối với con người cũng như các

sinh vật khác trên trái đất: điều hòa khí hậu, cung cấp khí oxi cho sự sống và

lương thực, thực phẩm, dược liệu, Để tận dụng được những lợi ích mà thực

vật đem lại, con người ngày càng có nhu cầu hiểu biết nhiều hơn về nó

Cách đây hơn 3000 năm, ở Trung Quốc, các sách cổ như “Kinh thi” đã

mô tả hình thái và giai đoạn sống của nhiều loại cây Thế kỉ XI trước Công

nguyên, một pho sách cổ ở Ấn Độ “Suscơruta” đã mô tả hình thái của 760

loại cây thuốc [7]

Théophraste (371-286 trước công nguyên) viết nhiều sách về thực vật

như “Lịch sử thực vật”,”Nghiên cứu về cây cỏ”… đã đề cập đến hình thái,

cấu tạo cơ thể thực vật cùng cùng nhiều cách sống, cách trồng, công dụng,

kiến thức phân biệt cơ quan sinh dưỡng và cơ quan sinh sản

Thế kỷ XVII, Robert Hook phát minh ra kính hiển vi mở đầu cho giai

đoạn mới nghiên cứu về tế bào và cuối cùng đưa đến “Học thuyết tế

bào”(1838) [17]

Giữa thế kỷ XIX, công trình nghiên cứu về thực vật có hạt của

Hoffmeister phân biệt được thực vật hạt trần và thực vật hạt kín, xác định

quy luật chung cho thực vật trong chu trình sống dưới hình thức xen kẽ thế

hệ, góp phần vào việc giải thích sự tiến hóa của giới thực vật

Cuối thế kỷ XIX và đầu thế kỷ XX, nhà sinh học người Nga

Tchitiacov phát hiện ra sự phân chia gián phân của tế bào, tiếp đến là

Gherasimov phát hiện ra vai trò của nhân tế bào [17]

Năm 1898, Navasin phát hiện ra sự thụ tinh đôi ở thực vật Hạt kín

Vào những năm 70 của thế kỷ XX, các nhà sinh vật học Malpigi (người

Ý) và Grew (người Anh) đã công bố công trình nghiên cứu “Giải phẫu thực

vật” và được xem là bước mở đầu cho khoa học về giải phẫu thực vật hiện

nay

Năm 1877, De Barry đã xuất bản cuốn “Giải phẫu so sánh các cơ quan

sinh dưỡng” Trong cuốn sách này, ông đã phân biệt được các mô, túi tiết,

mạch, ống nhựa mủ… [7]

Cuốn “Giải phẫu thực vật” của Katherien Esau đã mô tả giải phẫu cơ

quan dinh dưỡng và sinh sản của một số loài cây thân leo thuộc lớp Hai lá

mầm như: Mộc hương, Bí ngô, Nho trồng,… và qua đó đã cho thấy cấu tạo

giải phẫu liên quan đến chức năng của rễ hấp thụ, rễ dự trữ [15, 16]

Vào nửa sau của thế kỷ XX, viêc nghiên cứu hình thái và giải phẫu

thực vật được đẩy mạnh và được áp dụng cho các ngành khác như: phân loại,

sinh lý, sinh thái học thực vật…

1.2 Nghiên cứu hình thái và giải phẫu thực vật ở Việt Nam

Việt Nam được coi là một trong những nước thuộc vùng Đông Nam Á

giàu về đa dạng sinh học Ở Việt Nam do sự khác biệt lớn về khí hậu từ vùng

gần Xích đạo tới giáp vùng cận nhiệt đới, cùng với sự đa dạng về địa hình đã

tạo nên sự đa dạng về thiên nhiên và cũng do đó mà Việt Nam có tính đa dạng

sinh học cao Cho đến nay đã thống kê được 10.484 loài thực vật bậc cao có

mạch khoảng 800 loài rêu và 600 loài nấm Theo dự đoán của các nhà thực

vật học số loài thực vật bậc cao có mạch ít nhất sẽ lên đến 12.000 loài, trong

đó có khoảng 2.300 loài đã được nhân dân dùng làm nguồn lương thực, thực

phẩm, thuốc chữa bệnh, thức ăn cho gia súc, lấy gỗ, tinh dầu và nhiều nguyên

vật liệu khác Chắc chắn rằng hệ thực vật Việt Nam còn nhiều loài mà chúng

ta chưa biệt công dụng của chúng Cũng có thể có rất nhiều loài có tiềm năng

như một nguồn cung cấp dược liệu hết sức quan trọng [41]

Từ xa xưa, nhân dân ta đã có kiến thức rất phong phú về thực vật, đặc

biệt là sử dụng cây cỏ làm thuốc chữa bệnh Lê Quý Đôn (thế kỷ XVI) trong

bộ “Vân đài loại ngữ” đã mô tả chi tiết khá nhiều loại cây Tiếp đến là

Nguyễn Trữ đã đi sâu hơn về thực vật trong cuốn “ Việt Nam thực vật học”

Những năm gần đây, việc nghiên cứu và giảng dạy hình thái giải phẫu

đã được chú ý ở các trường Phổ thông và Đại học Nhiều cuốn sách của các

tác giả trong nước đã được xuất bản để phục vụ cho việc dạy và học, nghiên

cứu Năm 1980, giáo trình “Hình thái giải phẫu thực vật” của Hoàng Thị Sản,

Phan Nguyên Hồng, Nguyễn Tề Chỉnh được xuất bản [17] Trong đó đã đề

cập tới đặc điểm cấu tạo và sự phát triển chung của cơ thể thực vật, đồng thời

cũng đưa ra nhiều dẫn liệu về hình thái, giải phẫu thích nghi của loài

Năm 1970, Phan Nguyên Hồng đã mô tả hình thái và cấu tạo giải phẫu

của một số cơ quan của các loài ngập mặn theo hướng thích nghi trong đề tài

“Nghiên cứu đa dạng sinh học và sự thích nghi trong hệ sinh thái rừng ngập

mặn” [7]

Năm 1999, Nguyễn Thị Hồng Liên trong luận văn cao học “Cấu tạo

giải phẫu thích nghi cơ quan sinh sản của cây Trang” đã tìm ra đặc điểm

thích nghi sinh sản của một số loài cây họ Đước trong điều kiện bãi lầy ngập

mặn Cùng năm đó, Lê Xuân Tuấn nghiên cứu một số đặc điểm sinh trưởng

và giải phẫu ở loài Bần chua,Trang, Tra làm chiếu, tác giả đã mô tả đặc điểm

chung của thân cây Hai lá mầm và chỉ ra một số sai khác [7]

Năm 2002, Phan Thị Bích Hà nghiên cứu đề tài “ Tìm hiểu khả năng

chuyển cây dừa nước từ Miền Nam ra trồng trên một số vùng rừng gập mặn

ở Miền Bắc”, tác giả đã chỉ ra được một số đặc điểm cấu trúc thích nghi nghi

với điều kiện chịu hạn, chịu nhiều tác động cơ học nên lá cứng, giòn và các

nghiên cứu về cấu tạo giải phẫu rễ, thân, lá của cây Dừa nước ở các vùng khí

hậu khác nhau [7]

Ngoài các nghiên cứu của các tác giả trên, các nghiên cứu về hình thái

giải phẫu thích nghi với chức năng của cơ quan sinh dưỡng bước đầu cũng

được nghiên cứu một cách cụ thể Năm 2004, Đỗ Thị Lan Hương đã nghiên

cứu đặc điểm hình thái, cấu tạo giải phẫu thích nghi với chức năng của một

số cây trong 3 họ Bầu bí, Củ nâu và Khoai lang; tác giả Nguyễn Văn Quyền

(2008) nghiên cứu đặc điểm hình thái, giải phẫu thích nghi và sinh lý của một

số loài thuộc họ Cau [7]

Đỗ Thị Lan Hương (2012) trong luận án tiến sĩ “Nghiên cứu đặc điểm

hình thái và cấu tạo giải phẫu của một số loại cây dây leo thuộc miền bắc

Việt Nam” đã tìm ra đặc điểm thích nghi của một số loài cây Bầu bí trong

điều kiện khác nhau [7]

Nhìn chung các công trình nghiên cứu hình thái, giải phẫu thích nghi

phù hợp với chức năng bước đầu đã được nghiên cứu một cách cụ thể

1.3 Những nghiên cứu về loài Thuẫn râu (Scutellaria barbata )

1.3.1 Trên thế giới

Thuẫn râu (Scutellaria barbata) là loài thảo dược phân bố tự nhiên ở

vùng nhiệt đới và cận nhiệt đới châu Á Ở Trung Quốc, Triều Tiên, Thuẫn râu

được sử dụng với nhiều công dụng như thanh nhiệt, giải độc, ung thư, giảm

đau, tiêu viêm,…

Từ những năm 1987 đến nay, các nghiên cứu về Thuẫn râu của các nhà

khoa học trên khắp các quốc gia (Yin X, J Zhou, 2004; Yu và cs, 2004, S.J

Dai et al, 2006,…) đã chỉ ra rằng Thuẫn râu có hoạt tính ức chế tế bào ung thư

và không làm ảnh hưởng đến các tế bào lành khác [1]

Năm 1987-1989, các nhà khoa học của Nhật Bản (Tomimori) và Đài

Loan (Lin và Kuo) đã tiến hành độc lập nghiên cứu thành phần hóa học của

loài Thuẫn râu thu hái ở Trung Quốc và đã phân lập được một số ditecpenoit

Qua khảo sát hoạt tính sinh học của các hợp chất này, người ta thấy rằng,

chúng có khả năng điều trị các khối u, viêm gan và ung thư gan ác tính ở

Trung Quốc và Đài Loan [22] Từ đó, loài Thuẫn râu đã thu hút được sự quan

tâm nghiên cứu của nhiều nhà khoa học trên thế giới

Năm 2004, Yin X., J Zhou, C Jie, D Xing and Y Zhang đã khẳng

định dịch chiết với 30% ethanol của loài Thuẫn râu có hoạt tính chống ung

thư Các tác giả đã nghiên cứu tác dụng của dịch chiết này trên tế bào ung thư

phổi A549 Kết quả nghiên cứu cho thấy dịch chiết này ức chế sự phát triển

của dòng tế bào trên với IC50 là 0,21mg/ml [22]

Bên cạnh đó, còn có một số công trình nghiên cứu về loài Thuẫn râu

như Yu và cộng sự (2004) đã tìm ra hoạt tính kháng khuẩn của tinh dầu loài

Thuẫn râu; Sato và cộng sự đã tiến hành phân lập được hai hợp chất flavonoit

có hoạt tính kháng khuẩn là apigenin và luteolin [22]

S J Dai et al (2006), trong “Phytochemistry” đã chứng minh sự có

mặt của một số hợp chất ditecpenoit mới là barbatin A-C Các tác giả cũng đã

chỉ ra rằng các hợp chất này thể hiện hoạt tính gây độc tế bào trên các dòng tế

bào ung thư khác nhau [1]

Nghiên cứu của Kim Dong II et al (2005), T K Lee et al (2004), W

Lihui et al (2012) [3, 21, 22] về hoạt tính sinh học của loài Thuẫn râu

(S.barbata),… chỉ ra Thuẫn râu ức chế sự phát triển các tổn thương tiền ung

thư ở tuyến vú và sự sinh u ở mô hình ung thư da chuột nhắt trắng Ngoài ra

tác dụng ức chế của Thuẫn râu trên sự phát triển các dòng tế bào ung thư phụ

khoa cũng đã được chứng minh Đặc biệt, gần đây Công ty dược phẩm

Binovo Inc đã đăng ký phát triển chế phẩm thuốc làm từ dịch chiết nước và

ethanol của loài Thuẫn râu dùng điều trị bệnh ung thư Trong đó, các tác giả

đã cho thấy dịch chiết của Thuẫn râu cho hoạt tính ức chế mạnh sự phát triển

của tế bào ung thư vú và đáng quan tâm nhất đó là các dịch chiết này không

ảnh hưởng đến các tế bào lành Đây thực sự là một phát hiện rất quan trọng và

tạo ra một động lực lớn cho sự phát triển của cây Thuẫn râu nhằm tạo ra chế

phẩm trong điều trị bệnh ung thư hiện nay

1.3.2 Ở Việt Nam

Trong y học cổ truyền, Thuẫn râu có tính hàn, vị hơi cay, đắng, là loài

cây thuốc có khả năng chữa được nhiều bệnh như điều trị các khối u tân sinh,

áp xe phổi, lao phổi xơ, viêm ruột thừa, viêm gan, xơ gan cổ chướng, hạ sốt,

lợi tiểu, trị mụn nhọt, sưng đau, viêm mủ, rắn độc cắn, với ghi nhận đặc biệt

cây có thể chữa bệnh ung thư phổi, ung thư gan, ung thư trực tràng, ung thư

vú ở thời kỳ đầu [8, 13, 33] Đặc biệt Võ Văn Chi (2012) còn nêu 2 cách

thường dùng là: dùng uống để trị các khối u tân sinh, áp xe phổi (lao phổi xơ),

viêm ruột thừa, viêm gan, xơ gan cổ chướng; dùng ngoài trị các loại mụn

nhọt, sưng đau, viêm vú, viêm mủ da, rắn độc cắn, sâu bọ cắn đốt, ngã tổn

thương [32, 35]

Trên cơ sở các kinh nghiệm điều trị của nền Y học cổ truyền Phương

Đông, những năm gần đây cơ sở chữa bệnh từ thiện “Tuệ Tĩnh Đường – Tp

Hồ Chí Minh” đã sử dụng cây Thuẫn râu và Bạch hoa xà thiệt thảo trong việc

phòng chống các khối u theo một bài thuốc bí truyền do cơ sở Phật giáo Nhật

Bản Kyoto tặng Đây là bài thuốc được nhiều người đánh giá rất cao về hiệu

quả điều trị của nó Ngoài ra, cơ sở Y học cổ truyền Hòa Thuận Đường thuộc

thị xã Long Khánh - Đồng Nai đã phát triển và đưa vào sử dụng một loại thực

phẩm chức năng Katana có chứa cây Thuẫn râu để hỗ trợ điều trị bệnh u xơ tử

cung và tuyến tiền liệt Ngoài ra, khả năng phòng chống khối u của cây Thuẫn

râu cũng đã được các nhà khoa học tại viện Dược liệu - Bộ Y tế nghiên cứu

và khẳng định [19] Gần đây, trên thị trường có sản phẩm trà hòa tan “Bạch

liên thảo” do Công ty Dược liệu Trung ương II sản xuất có thành phần gồm

Bạch hoa xà thiệt thảo và Thuẫn râu (trong sản phẩm gọi là Bán chi liên) và

đường lactoza, dùng pha uống hàng ngày làm thuốc thanh nhiệt, mát gan, lợi

tiểu [22]

Về các bài thuốc, Võ Văn Chi (2013) trong tạp chí “Cây Thuốc quý”

đã nêu khá chi tiết về một số bài thuốc thường được dùng để trị bệnh trong đó có

vị Hoàng cầm râu – tên gọi khác của loài Thuẫn râu hay còn gọi là Bán chi liên

Ung thư mũi họng: Bán chi liên, dã bồ đào căn (Vitis wilsonae) 60 g,

bạch hoa xà thiệt thảo, đan sâm, tử thảo, đều 30 g, cấp tính tử (Phụng thiên

hoa), cóc khô 12 g, địa long, khương bán hạ, cam thảo 6 g, chế mã tiền tử 0,5

g Bỏ tất cả vào ấm sắc uống

Ung thư gan: Bán chi liên, bạch hoa xà thiệt thảo, kê cốt thảo, viễn chí

nhật đều 30 g, sắc uống Bán chi liên, hoàng mao nhĩ thảo (Hedyotis

chrysotricha), bán biên liên, ý dĩ nhân đều 30g, rau má mỡ 60 g, sắc uống

Bán chi liên, bạch hoa xà thiệt thảo, sinh địa đều 30g, chích miết giáp, uất

kim, trạch tả, lá vạn tuế đều 15 g, nhân sâm 10 g (gói riêng, chia làm ba lần,

hòa tan uống) Hồng táo 10 quả, sắc hòa bột nhân sâm vào uống

Ung thư bàng quang: Bán chi liên 60 g, tiên hạc thảo, mã đề, đại kế,

tiểu kế đều 30 g, sinh địa, tri mẫu, hoàng bá đều 15 g, sắc uống

Ung thư cổ tử cung: Bán chi liên 60 g, lậu lô (Rhapomticum

uniflorum) 30 g, sắc uống Bán chi liên 60 g, bạch mao căn 30 g, sao địa

hoàng, mộc hương đều 3 g, xa tiền tử, lậu lô đều 15 g, tỳ giải, chi tử đều 10 g,

sắc uống Bán chi liên 60 g, đan sâm, đảng sâm, sơn dược, bạch truật đều 10

g, thạch yến (giã nát cho vào sắc trước), ngõa lãng tử (gói riêng, giã nát cho

vào sắc trước) đều 30 g, lậu lô 15 g, cam thảo 3 g, sắc uống

Bên cạnh các bài thuốc, tác giả còn đưa ra các ví dụ minh chứng về

hiệu quả điều trị của các bài thuốc này [32, 35]

Về mặt sinh học: theo ghi nhận của Vũ Xuân Phương (2000) chi Thuẫn

hay còn gọi là chi Hoàng cầm (Scutellaria) ở nước ta có 15 loài (trong đó có

loài Thuẫn râu - Scutellaria barbata), 3 trong số 15 loài có thể là loài đặc hữu

của Việt Nam Các loài thuộc chi này có đặc điểm hình thái tương đối gần

nhau [37]

Theo Lã Đình Mỡi và cộng sự (2009), hầu hết các loài trong chi Thuẫn

đều có tinh dầu, nhiều loài trong chi này được sử dụng làm thuốc trong y học

dân tộc ở nhiều khu vực khác nhau trên thế giới Dịch chiết hoặc nước ép từ

một số loài được dùng làm thuốc chữa đau dạ dày, lợi tiểu và trị sốt rét Một

số loài được giã nhỏ hoặc sắc lấy nước đặc làm thuốc đắp ngoài chữa mụn

nhọt, ghẻ lở và nấm ngoài da [21]

Về mặt hóa học: Đỗ Thị Thảo (2004) [12, 13, 14] đã bước đầu phân lập

được một neo-clerodan ditecpenotit và hai flavonoid Trong đó có hợp chất

8-13-epoxy-3-en-7-hydroxy-6,11-O-dibenzoyl-15,16-clerodanolid có hoạt tính

kháng mạnh đối với cả 4 dòng tế bào ung thư trong thử nghiệm (với IC50 từ

2,15 đến 8,3 µM), trong đó có tác dụng kháng mạnh nhất trên dòng tế bào

ung thư vú (với IC50 là 2.15 µM), còn với dòng tế bào ung thư biểu mô người

thì tương đối yếu hơn (với IC50 là 8,3µM)

Năm 2009, Nguyễn Văn Hùng và cộng sự công bố dịch chiết và một số

hợp chất được phân lập từ Thuẫn râu thể hiện tính chống ôxy hóa khá tốt,

đồng thời cũng thể hiện hoạt tính ức chế sự phát triển của một số dòng tế bào

ung thư [29]

Theo kết quả nghiên cứu của Nguyễn Hồng Ngoan trong Luận văn tốt

nghiệp Đại học [24], ba giống Thuẫn râu thu được ở ba khu vực Hải Dương,

Bắc Ninh, Hưng Yên có đặc điểm hình thái như sau:

Quần thể thu được có nguồn gốc Việt Nam thu được ở Bắc Ninh và Hải

Dương có đặc điểm hình thái là tương đối đồng nhất, không tìm thấy sự khác

nhau rõ rệt giữa chúng

Thân dạng cỏ, mỏc thẳng, cao 15-50 m, thân vuông, thường có lông rải

rác trên thân Lá mọc đối, hình trứng, mũi mác, cỡ 1.5 -3 x 0.5-1.2, chóp lá

nhọn hay tròn, gốc cụt hay hình tim, mép lá xẻ răng cưa thưa, hai mặt gần như

nhẵn, gân bên 3-4 đôi, cuống lá dài 3-6 mm

Cụm hoa hình chùm ở nách lá phía đỉnh cảnh hay đỉnh cành

Hình 1: Cây Thuẫn râu

(mẫu thu ở Hải Dương)

Hoa mọc đối nhau và thường hướng về một phía Lá bắc giống lá ở

thân, càng lên ngọn, lá bắc càng nhỏ dần nhưng vẫn dài hơn đài Cuống hoa

dài 1-2 mm Đài hình chuông, dài 1.5-2 mm, có lông rải rác ở phía ngoài, 2

môi: môi trên 1 thùy, có vảy ốc hình bán nguyệt ở giữa ống đài; môi dưới 1

thùy Tràng màu trắng, dài 0.8-1.1 cm Ống tràng thẳng, tràng có lông tơ

mảnh ở phía ngoài, 2 môi: môi trên dạng mũ, đỉnh có khuyết, môi dưới có 3

thùy, thùy giữa lớn hơn 2 thùy bên Nhị 4, hướng lên phía môi trên của tràng,

thụt vào trong ống tràng; chỉ nhị có lông ở phía dưới; bao phấn màu vàng

trắng hay màu vàng Bầu có lông tơ và lông tuyến rải rác, vòi nhụy đính ở đáy

bầu, xẻ 2 thùy không bằng nhau ở đỉnh

Quả bế, hình thận, dài 0.8-3 mm, có lông tơ và lông tuyến rải rác Khi

chín tách thành đường vành khuyên

Hạt 4 trong mỗi quả, nhỏ, màu vàng, nâu hay đen, bề mặt sần, có dạng

nốt Rốn hạt có lông tơ dài

* Sự khác nhau về hình thái giữa loài Thuẫn râu (S.barbata) có nguồn

gốc từ Việt Nam và từ Trung Quốc

Bảng 1: So sánh đặc điểm hình thái của loài Thuẫn râu nguồn gốc từ

Việt Nam và Trung Quốc [24]

2 Lá Số lượng lá có chóp

tù chiếm tỷ lệ nhiều hơn; mép có số lượng răng thường là 1-3

Số lượng lá có chóp nhọn chiếm tỷ lệ nhiều hơn, mép lá có số lượng răng cưa thường là 3-4

6 Bộ nhụy Dài < 2 cm Dài < 2.3 cm

7 Quả Có lông tiết nhiều Có lông tiết ít

8 Hạt Rốn hạt có lông tơ dài Rốn hạt không có lông tơ

dài

CHƯƠNG 2 ĐỐI TƯỢNG, ĐỊA ĐIỂM, THỜI GIAN VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Đối tượng nghiên cứu

Giống Thuẫn râu thu được ở ba khu vực: Hưng Yên, Bắc Ninh, Hải

Dương hiện được trồng ở Viện Sinh thái và Tài nguyên sinh vật

2.2 Thời gian nghiên cứu

Từ 10-2015 đến 5 - 2016

2.3 Địa điểm nghiên cứu

Phòng thí nghiệm Thực vật học của Trường Đại học sư phạm Hà Nội 2

2.4 Phương pháp nghiên cứu

2.4.1 Phương pháp kế thừa

2.4.2 Nghiên cứu ngoài thực địa

Cách lấy mẫu: Chụp ảnh, thu cả cây đã có hoa

Đánh số hiệu; cố định mẫu trong dung dịch đã chuẩn bị sẵn Mẫu vật

được lưu trữ ở Phòng thí nghiệm Thực vật học của Trường Đại học Sư phạm

Hà Nội 2

 Điều kiện tự nhiên ở Hải Dương

- Địa hình: Hải Dương được chia làm 2 vùng: vùng đồi núi và vùng

đồng bằng Vùng đồi núi nằm ở phía Bắc, chiếm 11% diện tích tự nhiên gồm

13 xã thuộc thị xã Chí Linh và 18 xã thuộc huyện Kinh Môn; là vùng đồi núi

thấp, phù hợp với việc trồng cây ăn quả, cây lấy gỗ và cây công nghiệp ngắn

ngày Vùng đồng bằng còn lại chiếm 89% diện tích tự nhiên do phù sa sông

Thái Bình bồi đắp, đất màu mỡ, thích hợp với nhiều loại cây trồng, sản xuất

được nhiều vụ trong năm [40]

làm 4 mùa rõ rệt (xuân, hạ, thu, đông) Vào giai đoạn từ tiết lập xuân đến

tiết thanh minh (khoảng đầu tháng hai đến đầu tháng tư dương lịch) có hiện

tượng mưa phùn và nồm là giai đoạn chuyển tiếp từ mùa khô sang mùa mưa

Mùa mưa kéo dài từ tháng tư đến tháng mười hàng năm Lượng mưa trung

bình hàng năm là 1.300–1.700 mm Nhiệt độ trung bình khoảng 23,3°C Độ

ẩm tương đối trung bình là 85–87% Khí hậu thời tiết thuận lợi cho sản xuất

nông nghiệp, bao gồm cây lương thực, thực phẩm và cây ăn quả, đặc biệt là

sản xuất cây rau màu vụ đông [40]

 Điều kiện tự nhiên ở Bắc Ninh

- Địa hình: Địa hình của tỉnh này tương đối phẳng, có hướng dốc chủ

yếu từ Bắc xuống Nam và từ Tây sang Đông, được thể hiện qua các dòng

chảy bề mặt đổ về sông Đuống và sông Thái Bình Vùng đồng bằng thường

có độ cao phổ biến từ 3-7 m, địa hình trung du (hai huyện Quế Võ và Tiên

Du) có một số dải núi độ cao phổ biến 300–400 m Diện tích đồi núi chiếm tỷ

lệ nhỏ (0,53%) so với tổng diện tích, chủ yếu ở hai huyện Quế Võ và Tiên Du

Bắc Ninh có mạng lưới sông ngòi khá dày đặc, mật độ lưới sông khá cao, hàm

lượng phù sa lớn [39]

- Khí hậu: Bắc Ninh nằm trong vùng khí hậu cận nhiệt đới ẩm, chia

làm 4 mùa rõ rệt (xuân, hạ, thu, đông) Có sự chênh lệch rõ ràng về nhiệt độ

giữa mùa hè nóng ẩm và mùa đông khô lạnh Sự chênh lệch đạt

15-16 °C Mùa mưa kéo dài từ tháng năm đến tháng mười hàng năm Lượng mưa

trong mùa này chiếm 80% tổng lượng mưa cả năm Lượng mưa trung bình

hàng năm là 1.400-1.600 mm Nhiệt độ trung bình khoảng 23,3 °C Độ ẩm

tương đối trung bình là 79% [39]

 Điều kiện tự nhiên ở Hưng Yên

- Địa hình: Hưng Yên nằm ở trung tâm đồng bằng Bắc Bộ, trong vùng

kinh tế trọng điểm phía Bắc, là tỉnh đồng bằng xen đồi thấp, không có rừng,

núi và biển Độ cao đất đai không đồng đều mà hình thành các dải, các khu,

vùng cao thấp xen kẽ nhau như làn sóng [38]

- Khí hậu: Hưng Yên nằm trong vùng khí hậu cận nhiệt đới ẩm, chia làm

4 mùa rõ rệt (xuân, hạ, thu, đông) Mùa mưa kéo dài từ cuối tháng 4 đến tháng

10 hàng năm Lượng mưa trong mùa mưa chiếm tới 70% tổng lượng mưa cả

năm Lượng mưa trung bình hàng năm khoảng 1.450-1.650 mm Nhiệt độ

trung bình là 23,2 °C Độ ẩm tương đối trung bình là 85-87% [38]

2.4.3 Phương pháp ngâm mẫu tươi

Ngâm mẫu tươi trong hỗn hợp dung dịch: 400ml rượu etylic 96%, 80ml

formol, 40ml axit axetic 40%, 280ml nước cất (theo phương pháp của

Pauseva, 1974) [13] Dung dịch này giữ cho mẫu thực vật tươi lâu, để giữ

mẫu tươi lâu cần thay dung dịch 4 tháng 1 lần

2.4.4 Nghiên cứu trong phòng thí nghiệm

Làm tiêu bản giải phẫu tươi bằng dao lam cắt tay để quan sát cấu trúc cơ

quan cần nghiên cứu

Làm tiêu bản cố định theo phương pháp của R.M Klein và D.T Klein

(1979) [19, 20], Trần Công Khánh (1981) [31]

Lát cắt được nhuộm kép với xanh metylen và cacmin Các bước tiến hành:

- Mẫu vi phẫu sau khi cắt được ngâm ngay vào nước Javen 15–30 phút

để loại hết nội chất của tế bào

- Rửa sạch Javen bằng nước cất rồi ngâm mẫu vào nước có pha axit

axetic trong 5 phút để loại hết nước Javen còn dính lại

- Rửa hết axít axetic bằng nước cất

- Nhuộm màu trong dung dịch cacmin khoảng 30 phút

- Rửa lại trong nước cất

- Nhuộm mẫu trong dung dịch xanh metylen

- Lấy vi mẫu ra, rửa sạch bằng nước cất rồi đưa lên kính quan sát với

nước hoặc dung dịch glyxerin (với nước sẽ quan sát mẫu tươi, còn với dung

dịch glyxerin quan sát tươi nhưng có thể để được trong thời gian vài ngày)

Bóc biểu bì lá để quan sát cấu tạo hiển vi: Đun mẫu lá 1-2 phút trong

dung dịch HNO3loãng cho đến khi lá có màu vàng nhạt và có nhiều bọt khí

trên bề mặt lá thì dừng lại Lấy mẫu ra rửa sạch bằng nước cất, tách biểu bì

trên và biểu bì dưới Đặt mẫu lên lam kính rồi dùng bút lông đánh nhẹ để thịt

lá trôi đi rồi quan sát

Ghi lại hình ảnh quan sát được bằng máy ảnh kỹ thuật số nối với kính

hiển vi quang học OLIMPIA

Quan sát, đo, đếm mẫu vật qua kính hiển vi quang học Sử dụng trắc vi

vật kính và trắc vi thị kính để xác định kích thước tế bào và mẫu vật cần đo

theo phương pháp của Pauseva (1974) [17]

CHƯƠNG 3 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 3.1 Cấu tạo giải phẫu của ba giống Thuẫn râu thu được ở ba khu vực

Hưng Yên, Bắc Ninh, Hải Dương

3.1.1 Giống Thuẫn râu tại khu vực Hải Dương

3.1.1.1 Rễ cây

 Phần vỏ

Tầng bần gồm 1-2 lớp tế bào hình phiến, kích thước tương đối đồng

đều, xếp sít nhau tạo thành vòng bao quanh rễ Vách tế bào hóa bần do thấm

suberin, làm cho tế bào mất nội chất sống và có màu vàng Bên ngoài rễ có rất

nhiều lông hút giúp cây tăng khả năng hấp thụ nước và muối khoáng Dưới

bần là 8-10 lớp tế bào mô mềm vỏ Các tế bào này có kích thước đều nhau,