SỰ PHỤ THUỘC CỦA KHU HỆ KÝ SINH TRÙNG VÀO THỨC ĂN VÀ ĐỜI SỐNG CỦA VẬT CHỦ

Khu hệ ký sinh trùng phụ thuộc vào thức ăn của vật chủ Đặc tính thức ăn của vật chủ ảnh hưởng rất lớn đến ký sinh trùng đường ruột và nội ký sinh trùng khác theo hai hướng: thức ăn được

SỐNG CỦA VẬT CHỦ

2.1 Khu hệ ký sinh trùng phụ thuộc vào thức ăn của vật chủ

Đặc tính thức ăn của vật chủ ảnh hưởng rất lớn đến ký sinh trùng đường ruột và nội

ký sinh trùng khác theo hai hướng: thức ăn được động vật nuốt bị nh iễm bởi các dạng ấu trùng cảm nhiễm, mà các dạng ấu trùng này có thể thích nghi với đời sống ký sinh ở ruột Mặt khác, có thể thấy rằng, thức ăn có thành phần hoá học giống với môi trường đường ruột sẽ tạo điều kiện thuận lợi cho sự dinh dưỡng của vật ký s inh trong đường tiêu hoá của vật chủ

Khi xem xét sự phụ thuộc của khu hệ ký sinh trùng vào đặc điểm thức ăn và các yếu

tố sinh thái, sinh lý, cần thiết phải biết vật chủ nhiễm loài ký sinh trùng nào, khả năng phát triển và hoàn thành chu trình sống ra sao? Ở đây, chúng ta sẽ đề cập đến hiện tượng chuyên hoá như là sự thích nghi của vật ký sinh đối với vật chủ nhất định Vật ký sinh có thể thích nghi hẹp với loài vật chủ này mà không thể sống và phát triển được ở loài vật chủ khác Còn vật ký sinh thích nghi rộng thì có thể phát triển được ở nhiều loài vật chủ Rõ ràng, nhóm động vật này thể hiện được sự phụ thuộc vào các yếu tố sinh thái của môi trường

Như vậy, thành phần loài của khu hệ ký sinh trùng được xác định bởi lực cân bằng: một mặt là các yếu tố có tính lịch sử - đó là mối liên hệ trong lịch sử tiến hoá của vật ký sinh và vật chủ, mặt khác là các yếu tố sinh thái, trong đó phương thức đinh dưỡng và đặc tính thức ăn giữ vai trò quan trọng

Người và lợn, về bản chất đều là động vật ăn tạp, đặc tính thức ăn tương tự nhau

Vì vậy khu hệ ký sinh trùng đường ruột ở người và lợn tương tự giống nhau Ví dụ,

trong nhóm nguyên sinh động vật có loài thảo trùng Balantidium coli sống ở ruột già người và lợn hoặc ấu trùng Cysticercus của sán dây Taenia solium không chỉ gặp ở lợn

mà cả ở người Hoặc giun tròn Ascaris lumbricoides ở người về hình thái không khác

gì A suu m ở lợn rõ ràng ha i loài này bắt nguồn từ một dạng Hoặ c giun đầu ga i Macracanthorhynchus hirlldinaceus gặp ở ruột lợn và cả ở ruột người

Hoặc một ví dụ khác rất hay về ảnh hưởng của thức ăn giống nhau giữa động vật móng guốc và động vật gặm nhấm, là những động vật thuộc các bộ khác nhau nhưng

có hàng loạt loài ký sinh trùng đường ruột chung hoặc gần nhau, đặc biệt là thảo trùng

Rõ ràng, giữa hai nhóm động vật không có mối quan hệ gần gũi mà có phương thức sống giống nhau (ăn thức ăn có đặc tính như nhau) thì khu hệ ký sinh trùng của chúng giống nhau

Ngược lại, trong cùng một lớp chim, do đặc tính thức ăn chi phối mà chim ăn hạt có khu hệ ký sinh trùng nghèo nàn hơn chim ăn côn trùng và chim ăn thịt, bởi vì trong chu kỳ sống của các vật ký sinh này có sự tham gia của vật chủ trung gian là những động vật không xương sống, trong số đó có côn trùng

66

Belopolskaia (1952) khi nghiên cứu khu hệ ký sinh trùng ở chim vùng phía đông biển Barenxeva đã chia chim thành 3 nhóm:

- Nhóm 1 : chim ăn động vật không xương sống (như Somateria mollissima, Calidris maritima…)

- Nhó m 2: ch im ă n cá và động vật không xương sống (như Laru s, Rissa , Stercorarius, Sterna, Cepphus

- Nhóm 3: chim ăn cá (như Uria, Alca, Gavia, Phalacrocorax )

Động vật không xương sống là vật chủ trung gian của phần lớn các loài sán lá, sán dây Vì thế, có thể giải thích được sự liên quan trực tiếp giữa số lượng động vật không xương sống (đặc biệt là nhuyễn thể) trong thức ăn của chim với số lượng loài và cường độ nhiễm sán lá, sán dây ở một số loài chim Trong ba nhóm trên thì mức độ nhiễm giảm dần từ nhóm 1 đến nhóm 3

Nguyễn Thị Lê (1980) khi phân tích khu hệ sán lá ở chim Việt Nam đã chứng minh được rằng, ở nhóm chim mà trong thành phần thức ăn chủ yếu là động vật không xương sống (bộ ngỗng, bộ rẽ) đã tìm thấy 58 loài sán lá Ở nhóm chim ăn động vật có xương sống, chủ yếu là cá (bộ chim lặn, cò, sếu, mang biển) đã tìm thấy 56 loài sán lá

Trong khi đó ở chim ăn hạt, quả (bộ vẹt - Psitaciformes) hoặc một số họ trong bộ sẻ (Pycnonotidae, Plococeidae) chỉ tìm thấy 10 loài sán lá Một ví dụ khác,

Genhenxinsaja (1949) khi nghiên cứu khu hệ ký sinh trùng ở loài vịt Anas strepera chủ yếu ăn hạt và loài vịt A platyrhyncllos trong thành phần thức ăn có nhuyễn thể và ấu trùng côn trùng thì thấy, Ở vịt A strepera chỉ tìm thấy 12 loài giun sán, trong đó có hai loài có

ký chủ trung gian là nhuyễn thể; còn ở vịt A platyrhynchos tìm thấy 34 loài, có 13 loài

truyền qua nhuyễn thể

Các ví dụ trên cho thấy, nếu các loài gần nhau trong cùng một giống, sống gần nhau, nhưng lại khác nhau bởi đặc tính thức ăn thì khu hệ ký sinh trùng cũng hoàn toàn khác nhau Vả lạ i, khi vật chủ xa nhau trong cây chủng loại phát sinh, nhưng giống nhau về thức ăn thì khu hệ ký sinh trùng có nhiều nét giống nhau Đó là hiện tượng dễ dàng nhận thấy đối với các nhóm động vật có xương sống khác nhau

Như vậy, rõ ràng đặc tính thức ăn và khẩu phần thức ăn có ý nghĩa trong việc xác định thành phần loài của khu hệ ký sinh trùng ở động vật Nhưng mặt khác, sự có mặt của các loài ký sinh trùng xác định ở loài vật chủ nào đó có thể là minh chứng cho một số đặc tính thức ăn mà vật chủ đó sử dụng

2.2 Khu hệ ký sinh trùng phụ thuộc vào đời sống (phương thức sống) của vật chủ

Như đã nói ở trên, đặc tính thức ăn của động vật liên quan rõ rệt đến khu hệ ký sinh trùng ký sinh ở động vật đó Mặt khác, phương thức sống của động vật có liên hệ chặt chẽ với sự thay đổi đặc tính thức ăn Mỗi nhóm động vật có phương thức sống riêng Năm 1949, Socnina đã đưa ra những số liệu so sánh về khu hệ giun sán ký sinh

ở chuột sống trên cây (Glis glis) và chuột rừng sống dưới đất (Apodemus sylvaticus)

Tác giả cho biết, khu hệ ký sinh trùng ở chuột sống trên cây nghèo nàn hơn chuột sống dưới đất ở chuột sống trên cây chỉ tìm thấy 3 loài giun sán ký sinh (sán lá

Brachylaemus recurvus, sán dây Hymenolepis myoxi và giun tròn Heligmosomum gracile); ở chuột sống dưới đất tìm thấy 10 loài giun sán (2 loài sán lá, 3 loài sán dây và 5

loài giun tròn) Như vậy, khu hệ nội ký sinh trùng ở đây phụ thuộc vào phương thức sống trên cây hay dưới đất Khu hệ giun sán ở chuột sống trên cây "nghèo" hơn khu hệ giun sán ở chuột sống dưới đất

Thế nào là "nghèo" và "giàu”? Khái niệm "giàu” và "nghèo" ở đây không chỉ xét về

số lượng loài ký sinh trùng, mà còn phải xem xét cả về tỷ lệ và cường độ nhiễm loài ký sinh trùng đó

Bykhovskaja và Pawlovskaja (1952 - 1962) đã kết luận, mức độ nhiễm sán lá ở các nhóm chim sinh thái khác nhau thì rất khác nhau Ví dụ, nhóm chim trực tiếp tìm kiếm thức ăn trong nước (bói cá, hải âu, vịt) có số lượng loài sán lá rất lớn, chim ở đầm (rẽ giun) có tỷ lệ nhiễm thấp hơn, và ít nhất là chim ở cạn (bộ sẻ) Nguyễn Thị Lê (1980) khi nghiên cứu khu hệ sán lá ở ngỗng và vịt Việt Nam cho thấy, ở ngỗng có đời sống trên cạn

và vịt nhà có đời sống dưới nước thì thành phần loài sán lá khác nhau: ở ngỗng tìm thấy 11 loài sán lá, ở vịt tìm thấy 31 loài

2.3 Hiện tượng ngủ đông của vật chủ ảnh hưởng đến khu hệ ký sinh trùng

Vấn đề này còn ít được nghiên cứu, tuy nhiên đã có một số dẫn liệu đáng lưu ý Marlova (1938) đã nghiên cứu khu hệ ký sinh trùng của 2 loài dơi ở ngoại ô Peterbua

là Epseticus nilssoni và Plecotus acritus ở các lứa tuổi khác nhau vào mùa hè sau thời

gian ngủ đông và vào giữa tháng tư, trước lúc bay khỏi hang Trong ruột dơi hoàn toàn không có thức ăn nhưng lại tìm thấy hàng trăm sán lá thuộc 3 loài gặp ở dơi trưởng thành trong suốt mùa hè Đặc biệt lý thú là sán lá tìm thấy ở các độ tuổi khác nhau Như vậy, rõ ràng các loài sán lá này đã có ở trong dơi vào cuối hè của năm trước và trong thời gian dơi ngủ đông, chúng cũng ngủ đông cùng với vật chủ Mùa xuân, dơi

và sán lá cũng phát triển đạt đến giai đoạn phát dục Dơi nhiễm ấu trùng mới qua vật chủ trung gian

Cũng là thú ngủ đông, nhưng một số động vật khác trái ngược với dơi ngủ đông ở chỗ, trước khi ngủ thì vật chủ đào thải vật ký sinh ra khỏi cơ thể Theo Blanchard (19031, trong thời gian ngủ đông, vật ký sinh được hoàn toàn giải phóng khỏi vật chủ (ví

dụ loài Marmota ngủ vào mùa thu và thức dậy vào đầu mùa hè) Năm 1945, Lekevich và Dubinin cũng nhận thấy hiện tượng này ở thú Marmota tại Xibiri vùng

Zabaican: trước lúc bắt dầu ngủ đông, ở ruột của chúng đã giải phóng hoàn toàn các vật

ký sinh (chủ yếu là giun đũa Ascaris tarbagani)

Ảnh hưởng ngủ đông ở vật chủ, theo nghiên cứu của Dibin ina (1949) ở rùa

(Testudo horsfieldi) vùng Trung Á kéo dài trong 9 tháng Hoạt động sống tích cực nhất

kéo dài trong 3 tháng (tháng 4, 5, 6), ngủ hè trực tiếp chuyển sang ngủ đông Trong thời gian này, ký sinh trùng đường ruột phát triển với số lượng lớn (chủ yếu là giun tròn) Trong thời gian ngủ, giun tròn không ngừng phát triển nhưng rất chậm Nhờ vậy, trong suốt 4 - 5 tháng cường độ nhiễm giảm rất ít và phần lớn cá thể đạt đến giai đoạn trưởng thành Vào nửa thời gian sau của thời kỳ ngủ, cường độ nhiễm giun tròn giảm rất lớn vì tất

cả các cá thể non đã đạt đến thời kỳ phát dục, già đi và chết Đến cuối thời kỳ ngủ chỉ còn lại rất ít cá thể giun trưởng thành Như vậy, ký sinh trùng ở rùa trong thời gian rùa ngủ hoàn toàn khác với ký sinh trùng ở dơi, chúng không rơi vào trạng thái ngủ thà tiếp tục phát triển

Những ví dụ trên đây chứng tỏ rằng, ở các nhóm động vật khác nhau về thời gian ngủ thì các loài vật ký sinh có sự phát triển khác nhau, thể hiện sự thích nghi khác nhau

3 KHU HỆ KÝ SINH TRÙNG PHỤ THUỘC VÀO SỰ DI CƢ CỦA VẬT CHỦ

Một trong những yếu tố có ảnh hưởng lớn đến sự biến đổi của khu hệ ký sinh trùng

là hiện tượng di cư của vật chủ

Ví dụ rõ nhất là ở cá di cư Cá hồi con sống ở sông nước ngọt phương Bắc, dinh dưỡng kém và phát triển chậm Sau đó, chúng ra biển và do thức ăn đầy đủ nên sinh trưởng rất nhanh Sau 2 - 3 năm sống ở biển, cá trở về sông để đẻ lần đầu tiên thường vài tháng, đôi khi cả năm, trong thời gian này cá không ăn, mặc dù mất rất nhiều năng lượng để bơi ngược dòng sông (đôi khi là hàng ngàn kim vào trong cơ thể còn phát triển các sản phẩm sinh dục Sau khi đẻ chúng lại bơi ra biển, ở đấy 1 - 2 năm sau mới quay lại sông

Các kết quả nghiên cứu cho thấy, ở biển cá hồi giải phóng hoàn toàn ký sinh trùng mà chúng đã nhiễm ở vùng nước ngọt và nhiễm mới ký sinh trùng có nguồn gốc biển Khi những ký sinh trùng biển cùng cá về sông, chúng cũng lần lượt bị đào thải, trước tiên là đối với ngoại ký sinh trùng, sau đó là ký sinh trùng đường ruột, sự đào thải phụ thuộc vào thời gian sống của chúng ở sông

Một ví dụ nữa là khu hệ ký sinh trùng ở ch im d i cư Mùa ấm, ch im sống ở phương Bắc, khi trời lạnh (mùa đông) chúng di cư về phương Nam tránh rét Khi trở

về phương Bắc, những chim này mang theo khu hệ ký sinh trùng đã nhiễm từ phương Nam Có thể chia khu hệ ký sinh trùng do chim di cư mang từ phương Nam về thành 3 nhóm:

- Nhóm 1 : là những ngoại ký sinh trùng (chủ yếu là ve) Nhóm này ký sinh ở chim khi ch im sống ở phương Bắc, khi chim d i cư về phương Nam vẫn mang theo nhóm ký sinh trùng này (nhóm này không chỉ ký sinh ở chim bố mẹ mà còn lan truyền sang chim non)

- Nhóm 2: gồm một số ngoại ký sinh trùng khác Những ký sinh trùng này bị đào

Trên cơ sở các dữ liệu nêu trên và dựa vào nguồn gốc của vật ký sinh người ta chia khu hệ ký sinh trùng ở chim di cư thành 4 nhóm:

1 Nhóm ký sinh phân bố rộng (thường gặp): thấy ở vật chủ quanh năm, không phân biệt ở phương Nam hay phương Bắc

2 Nhóm phương Nam: nhiễm ở nơi trú đông

3 Nhóm phương Bắc: nhiễm ở nơi làm tổ

4 Nhóm ký sinh nhiễm trên đường đi di cư

Như vậy, sự biến động của khu hệ ký sinh trùng ở chim di cư rất phức tạp do tác động của nhiều yếu tố khác nhau: loài chim di cư, mùa, đặc tính thức ăn, chu kỳ sống của vật chủ trung gian, phương thức sống của vật chủ cuối cùng v.v

4 KHU HỆ KÝ SINH TRÙNG PHỤ THUỘC VÀO ĐỜI SỐNG XÃ HỘI CỦA VẬT CHỦ

Thực tế cho thấy, khu hệ ký sinh trùng phụ thuộc rõ rệt vào đời sống xã hội của vật chủ Nếu các cá thể vật chủ ít gặp nhau thì khu hệ ký sinh trùng ở chúng sẽ nghèo hơn, cường độ nhiễm thấp hơn và khả năng truyền từ cá thể vật chủ này sang cá thể vật chủ khác sẽ kém hơn so với động vật có đời sống xã hội Điều đó cũng giải thích tại

sao các động vật phân bố ở vùng biên của vùng phân bố ít có cơ hội gặp nhau hơn là động vật ở bên trong vùng phân bố, và tất nhiên sẽ đưa đến khu hệ ký sinh trùng ở

là do số lượng cá thể nhiều và sự tiếp xúc thường xuyên giữa các cá thể vật chủ với nhau

mà ký sinh trùng dễ dàng truyền từ các thể vật chủ này sang cá thể vật chủ khác, và số lượng chủng loại ký sinh trùng cũng trở nên phong phú hơn

Mỗi loài động vật có đời sống xã hội, ở chúng người ta cũng tìm thấy khu hệ

động vật đơn bào ký sinh rất phong phú (trên 200 loài Infusoria) Ngược lại, ở kiến cũng

có đời sống xã hội, tuy nhiên khu hệ ký sinh trùng lại nghèo nàn, có lẽ vì ở chúng có axil focmic làm chết nhiều vật ký sinh, đặc biệt là đơn bào ký sinh

Đời sống xã hội của loài người cũng làm cho loài người trở thành vật chủ của khu hệ ký sinh trùng rất phong phú và bệnh ký sinh trùng dễ lan truyền từ vùng này sang vùng khác Đồng thời do sự tiếp xúc của người với các loài động vật khác mà có những bệnh ký sinh trùng lan truyền từ người sang động vật và từ động vật sang người Nhiều loài ký sinh trùng hiện nay tìm thấy ở người có nguồn gốc từ động vật

như sán dây Dipylidium caninum ở chó; Echinococcus ở lợn, ngựa, bò là do người ngẫu nhiên thiết phải trứng sán dây Hoặc Asca ris suu m ở lợn chuyển thành A lumbricoides ở người, hoặc Trichinella spiralis ở lợn chuyển sang người do người ăn thịt xông khói hoặc thịt nấu chưa chín kỹ; Opisthorchisfelineus ở mèo chuyển sang

người (do người ăn cá sống) Có trường hợp vật ký sinh thay đổi vật chủ mà không thay đổi chỗ ở Một số trường hợp khác có thay đổi vật chủ và cả chỗ ở Ví dụ, giun

đũa lợn Ascarls suum từ lợn lây nhiễm cho người vẫn ký sinh ở ruột non người; song

một số loài đơn bào sống ở ruột già ngựa khi lây nhiễm sang bò lại sống ở dạ dày bò

5 KHU HỆ KÝ SINH TRÙNG PHỤ THUỘC VÀO VÙNG ĐỊA LÝ

Sự phân bố giun sán ở gia súc, gia cầm chịu ảnh hưởng của yếu tố vùng

Ký sinh trùng nói chung phân bố rất rộng Theo thống kê, giới động vật gồm 20 lớp thì lớp nào cũng có ký sinh trùng Riêng giun, sán đã phát hiện hơn 3.00 loài

Trematoda, hơn 1.500 loài Cestoda, hơn 3.000 loài Nematoda, hơn 400 loài Acanthocephala

Nước Việt Nam ở dãy đất ven đông của bán đảo Đông Dương, là tiền đồn tận cùng phía Đông Nam của lục địa Âu - Á rộng lớn, phân bố lọt hẳn trong miền nhiệt đới Lãnh địa Việt Nam dài hơn 1.600 km (kéo dài từ Bắc xuống Nam), từ 23,220

vĩ Bắc (chỗ giáp với nước Cộng hoà nhân dân Trung Hoa) đến 8,300

(mũi cà Mau)

Sự phân bố của ký sinh trùng phụ thuộc vào các điều kiện khí hậu, nhất là nhiệt độ

và ẩm độ Sự phát triển của ký sinh trùng và các ký chủ trưng gian của chúng (nhuyễn thể, cá, côn trùng) đòi hỏi những điều kiện nhiệt độ và ẩm độ nhất định Ở cùng một khu vực khí hậu thì độ nhiệt phụ thuộc một phần vào độ cao Sự phát triển của ký sinh trùng còn phụ thuộc vào khu hệ động vật và thực vật địa phương, sự di chuyển của các loài động vật và tập quán sinh hoạt của con người Vì vậy, có loại ký sinh trùng thấy quanh năm, có loài chỉ xuất hiện vào mùa nhất định

Lấy sự phân bố của giun sán theo vùng địa lý làm ví dụ Giun sán chia thành hai

nhóm: một nhóm gọi là giun sán sinh học (biohelminth), phải qua ký chủ trung gian

mới phát triển được, nhóm này phân bố không rộng, có nguồn dịch tự nhiên nhất định

của chúng; một nhóm gọi là giun sán địa học (geohelminth), nhóm này không cần ký

chủ trung gian và phân bố khá rộng Do đó, một số loài giun sán có thể gặp ở khắp nơi

trên thế giới, trong khi một số loài chỉ giới hạn ở những vùng nhất định

Một điều rõ ràng là, giun sán phổ biến và có nhiều chủng loại hơn ở xứ nóng, ở vùng ẩm thấp, lầy lội và vào mùa nóng ấm Điều kiện nóng, ẩm là những điều kiện cần thiết cho sự phát triển của giun sán, của trứng và ấu trùng giun sán Trứng giun sán chỉ phát triển thuận lợi ở nhiệt độ 15 - 300C Điều kiện thiếu không khí (O2) và nhiệt độ thân thể của động vật thường cao (trên 370C) làm trứng giun sán không thể phát triển thành phôi thai trong đường tiêu hoá ký chủ Có những loại trứng chỉ nở được khi rơi vào môi trường nước (trứng sán lá); có loại chỉ thích hợp với độ ẩm trung bình, chỗ có rêu, bùn, phân súc vật

Đối với các ký chủ trung gian và các nguồn dịch tự nhiên của giun sán sinh học học thuyết về nguồn dịch tự nhiên của Pavlovski E N yêu cầu phải nghiên cứu về động vật

có xương sống đã sinh, côn trùng ký sinh và những động vật không xương sống khác có thể làm môi giới truyền bệnh, các dã thú, chim trời và các loài gặm nhấm thườn g có th ể

là ký chủ man g trù ng củ a nh iều loài g iun sán nh ư: Fa sciola , Dicrocoelium, Echinococcus, Taeniahyrnchus, Trichostrongylidae, Dictyocaulus, Prosthogonimus, Raillietina, Echinostoma

Sự phân bố theo vùng địa lý của ký sinh trùng rộng hay hẹp phụ thuộc vào sự cùng tồn tại trong một khu vực hai hay ba sinh vật khác nhau, cần thiết cho chu kỳ sinh học của ký sinh trùng gây bệnh Có thể lấy ví dụ về một số bệnh do sán lá gây ra

Bệnh sán lá ở gia súc nhai lại (trâu, bò, dê, cừu) do Fasciola hepatica thấy phổ biến ở

khắp nơi trên thế giới, bởi vì ốc nước ngọt - ký chủ trung gian của sán lá này phân bố

rộng khắp thế giới Trái lại, bệnh sán lá do Fasciola gigantica thấy phổ biến hơn ở các

nước phía Nam Châu Á Theo Trịnh Văn Thịnh (1978), trong một khu vực tương đối

rộng là viễn đông sán lá Fa sciolopsis buski gây bệnh sán lá ruột ở lợn và người Trường hợp phân bố địa lý hẹp hơn nữa là sán lá ở voi Fasciola jacksoni hầu như chỉ

gặp ở Đông Nam Á Tuy nhiên, do việc tăng cường vận chuyển súc vật mà tình trạng phân bố hẹp theo vùng địa lý của một số loài ký sinh trùng sẽ không tồn tại nữa Như vậy, những điều kiện sinh thái của các vùng tự nhiên và các khu vực chăn nuôi đã quyết định tình trạng phân bố theo vùng địa lý của khu hệ ký sinh trùng đặc trưng cho từng vùng

Ở nước ta, tỷ lệ nhiễm ký sinh trùng ở gia súc, gia cầm khá cao Ngoại cảnh bị ô nhiễm nặng, nhất là ở những vùng có bệnh, thường xuyên hàng năm bệnh phát từng đợt (như vùng nghé ỉa cứt trắng do giun đũa ở miền núi, bệnh sán lá gan trâu, bò ở vùng ruộng nước, bệnh giun đũa và sán lá ruột ở một số trại chăn nuôi lợn tập trung, bệnh gạo lợn ở vùng núi nuôi lợn thả rông ) Ở những vùng này, mầm bệnh ký sinh trùng được phát hiện với tỷ lệ cao ở bãi chăn, nền chuồng và xung quang chuồng nuôi, ao và vườn trồng cây thức ăn cho gia súc

Sự phân bố ký sinh trùng và bệnh ký sinh trùng có liên quan mật thiết với sự phân bố các động vật, thực vật là ký chủ trung gian hoặc vật mô i giới truyền bệnh (ốc

đối với các loài Trematoda, giun đất đối với giun phổi Metastrongylus ) Có thể nhận xét chung là, khu hệ sán lá (Trematoda) ở vùng đồng bằng phong phú hơn miền núi; giun

thận và giun phổi lợn thấy nhiều ở vùng núi Tuy nhiên, phải chú ý là tình hình nhiễm nặng hay nhẹ đối với một loài giun sán có quan hệ với điều kiện địa hình, khu hệ sinh vật

và tập quán, kỹ thuật canh tác, phương thức chăn nuôi của từng vùng (vùng trồng lúa hay trồng màu, điều kiện nuôi tập trung hay phân tán, nuôi nhất hay thả rông, điều kiện vệ sinh chuồng trại, biện pháp xử lý phân và chất thải trong chăn nuôi, thức ăn chín hay sống, thiếu hay đủ v.v

6 KÝ SINH TRÙNG PHỤ THUỘC VÀO SỰ CÓ MẶT CỦA CÁC LOẠI KHÁC TRONG QUẦN LẠC KÝ SINH VÀ QUẦN LẠC SINH VẬT

Đây là hiện tượng ít được chú ý mặc dù nó giữ vai trò quan trọng trong sự hình thành khu hệ ký sinh trùng ở động vật Trong vật chủ thường có nhiều loài ký sinh trùng khác nhau, đặc biệt là sự phong phú và đa dạng của ký sinh trùng đường ruột như: giun, sán, cầu trùng Tổng hợp tất cả các sinh vật sống ký sinh trong cơ thể vật chủ, Pavlovski (1937) gọi là quần lạc ký sinh Tác giả cho rằng, giữa các loài ký sinh trùng có mối quan hệ chặt chẽ với nhau, điều này có ý nghĩa khi nghiên cứu cấu trúc quần lạc ký sinh v à mố i liên q uan g iữa vật ký sinh v à v ật chủ Pav lovs ki và Guhezdilov (1953) chú trọng đến chất lượng và số lượng của quần thể vật ký sinh ở các vật chủ khác nhau Chúng được xác định không chỉ bởi các yếu tố sinh thái mà còn bởi đặc điểm trạng thái của cơ thể vật chủ (môi trường dinh dưỡng) và sự liên quan giữa các loài riêng biệt là thành viên của quần lạc ký sinh Có trường hợp mối quan hệ

đó thể hiện là quan hệ đối kháng (khi có mặt loài này thì không có mặt loài khác và ngược lại) có trường hợp sự có mặt của loài này làm tăng khả năng tồn tại của loài

khác Các tác giả trên nhận thấy rằng, ở chó nhiễm giun tròn Toxocara canis thì tỷ lệ nhiễm ấu trùng Pleurocercoid của sán dây Diphyllobothrium latum thấp hơn nhiều so với chó không nhiễm Toxocara canis, bởi v ì g iun tròn Toxocara kìm hãm sự sinh trưởng phát triển của D latum

Là những sinh vật, ký sinh trùng phải tồn tại và phát triển giữa những sinh vật khác Theo Pavlovski (1937), tổng hợp tất cả các loài sinh vật sống trong môi trường ngoại cảnh được gọi là quần lạc sinh vật

Như đã trình bày ở trên, có rất nhiều điều kiện khác nhau ảnh hưởng đến khu hệ ký sinh trùng ở từng loài động vật, trong đó yếu tố môi trường ngoài có ảnh hưởng rõ rệt đến

sự hình thành hệ thống vật ký sinh - vật chủ Ngoài ra, khi xem xét những kiểu chu trình phát triển của vật ký sinh, chúng ta còn thấy một số mối quan hệ giữa các thành viên khác trong quần lạc ký sinh và mối quan hệ giữa ký sinh trùng với các thành viên khác trong quần lạc sinh vật

Trong thiên nhiên, sự tồn tại của vật ký sinh trong quần lạc sinh vật được đảm bảo bởi nhiều điều kiện: sự tồn tại của vật chủ cuối cùng và vật chủ trung gian thích

ký sinh vào vật chủ; những yếu tố của môi trường ngoài ảnh hưởng trực tiếp đến các pha phát triển của vật ký sinh khi chúng ở ngoài vật chủ, hoặc trực tiếp ảnh hưởng đến vật ký sinh thông qua vật chủ (Pavlovski, 1946)

Để nghiên cứu quá trình tuần hoàn phức tạp của vật ký sinh trong quần lạc sinh vật, theo Pavlovski (1935, 1948, 1955), ở Liên Xô (cũ) người ta đã nghiên cứu tổng hợp sinh thái - ký sinh trùng của những vật truyền bệnh giữa người và động vật Chính những nghiên cứu này đã cho phép Pavlovski đề xuất học thuyết về ổ dịch tự nhiên và cơ sở sinh thái của

sự phát tán là lây lan bệnh giữa người và động vật

Ví d ụ, một số tác g iả đ ã n gh iên cứu về bét Ixo des ricinu s là vật truy ền Babeziollosis ở gia súc vùng Tây Bắc Liên Xô và đã đạt được kết quả thực tế là phòng

chống được các bệnh này Thứ nhất là nghiên cứu về bét và khả năng truyền bệnh của chúng cho gia súc ngoài thiên nhiên thuộc vùng nghiên cứu Thứ hai là xác định số lượng và biến động số lượng của bét ở vùng nghiên cứu Thứ ba là nghiên cứu mối quan

hệ quần lạc sinh vật giữa bét và các vật chủ của chúng Thứ tư là xác định chu trình phát triển của bét ở vùng nghiên cứu

Nhiều ngoại ký sinh trùng, đặc biệt là ký sinh trùng tạm thời, các pha sống tự do có ý nghĩa trong chu trình phát triển của chúng Ngoại ký sinh trùng ở thú có mối quan hệ ngắn ngủi với cơ thể vật chủ là thành viên của các quần lạc sinh vật khác nhau (bét, muỗi, ruồi,

mò, mạt ) Các loài này mang và truyền bệnh từ động vật này sang động vật khác (vi rút

vi khuẩn, đơn bào ), chúng giữ vai trò truyền bệnh và tồn tại trong thiền nhiên để đảm bảo sự sinh tồn của loài Hiện nay đã biết trên 50 bệnh được truyền sang người do các vectơ

truyền bệnh Ví dụ, bệnh sốt rét truyền qua muỗi Anopheles hoặc bệnh giun chỉ truyền

qua muỗi, ruồi

Sự truyền bệnh từ động vật này sang động vật khác hoặc từ động vật sang con người đòi hỏi hàng loạt các yếu tố sinh học

1 Có bệnh đó trong thiên nhiên

2 Có động vật (hoặc người mang mầm bệnh

3 Có động vật truyền bệnh (vectơ)

4 Có động vật (hoặc người) có khả năng nhiễm bệnh đó

Tuy nhiên, quá trình truyền bệnh từ động vật này sang động vật khác hoặc sang người không tách rời khỏ i tác động trực tiếp hay gián tiếp của các yếu tố của môi trường bên ngoài

Bệnh được truyền từ động vật hoang sang người qua vectơ truyền bệnh được gọi

là ổ dịch tự nhiên Đó là bệnh mà vật truyền của nó và động vật là những nơi chứa mầm bệnh tiềm ẩn và chu chuyển qua các thế hệ trong thời gian dài ngoài thiên nhiên, không phụ thuộc vào con người trong quá trình tiến hoá cũng như trong thời gian hiện tại Nếu ở địa điểm nào đó, mầm bệnh từ các động vật hoang được các vectơ truyền

sang người và nếu người bị nhiễm bệnh thì có thể bị bệnh

Nhìn chung, sự phân bố ổ dịch tư nhiên có thể biểu diễn theo sơ đồ sau:

Ổ dịch tự nhiên đặc trưng cho từng vùng sinh thái (rừng, đồng bằng, trung du), vùng địa lý, mùa Ký sinh trùng được chu chuyển trong thiên nhiên theo sơ đồ sau:

Sơ đồ chu chuyển của ký sinh trùng trong thiên nhiên ở những vùng bị bệnh

Ghi chú: V - vectơ truyền bệnh

số lượng chủng loại nhiều và cường độ nhiễm cao (Đỗ Dương Thái và Trịnh Văn Thịnh, 1978) Cơ thể người và động vật đáp ứng như thế nào? Đó là câu hỏi mà rất nhiều người quan tâm tìm cách trả lời, hy vọng tìm ra được những phương án phòng nhiễm ký sinh trùng một cách hữu hiệu

Nói một cách tổng quát thì cơ thể có đáp ứng miễn dịch với ký sinh trùng nhưng không có mấy hiệu quả, nên các thể nhiễm ký sinh trùng thường mang tính kinh diễn, phản ánh cuộc đấu tranh liên tục xảy ra và đã gây ra những tổn thương kéo dài, ảnh hưởng đến sức đề kháng của cơ thể vật chủ

1.1 Đáp ứng miễn dịch tự nhiên

Là đáp ứng ít hiệu quả đối với các loại ký sinh trùng đa bào hay đơn bào Một số lớn ký sinh trùng vượt qua hàng rào phòng ngự của cơ thể như da, niêm mạc nhờ các vật chủ trung gian (muỗi: truyền ký sinh trùng sốt rét, giun chỉ cho người; ve: truyền

đơn bào Piroplasma cho bò, trâu ) hoặc vật môi giới (ruồi trâu và mong: truyền tiên mao trùng Trypanosoma cho trâu, bò, ngựa ), hay nhờ khả năng của chính bản thân

ký sinh trùng (ấu trùng giun đũa có vỏ dày đã giúp chúng thoát được quá trình thực bào của vật chủ) Vì vậy, sự chống đỡ của cơ thể chủ yếu dựa vào đáp ứng miễn dịch đặc hiệu

Ở những cơ thể nhiễm ký sinh trùng, khả năng sản xuất kháng thể dịch thể tăng,

nhưng thường ký sinh trùng có rất nhiều vùng mẫn cảm với kháng thể (epitope kháng nguyên), vì vậy tăng sản xuất kháng thể dịch thể là một phản ứng đa dòng (đa clon), trong

đó ngoài sự tăng IgG, IgM thì sự tăng IgE là khá đặc hiệu đối với cơ thể nhiễm ký sinh trùng Sản xuất kháng thể IgE đặc hiệu và tăng bạch cầu toan tính là biểu hiện thường thấy trong cơ thể gây nhiễm ký sinh trùng thực nghiệm hay trong bệnh ký sinh trùng Ở chuột,

khi gây nhiễm thực nghiệm với sán máng (Schistosoma) thì thấy có tăng bạch cầu toan

tính và nồng độ IgE trong máu Ở người cũng vậy Đó là 2 chỉ tiêu cơ bản giúp chẩn đoán nhiễm ký sinh trùng

Bình thường ở Việt Nam, những điều tra ban đầu cho thấy có trên 80% người Việt Nam bị nhiễm 1 - 2 loại ký sinh trùng đường ruột trở lên Vì thế mà ở người Việt

Nam, tạm gọi là "người bình thường", tỷ lệ bạch cầu toan tính chiếm tới 6% trong

công thức bạch cầu và IgE lên tới 400 người, cao hơn người ở Châu Âu và Châu Mỹ 2

- 3 lần Cơ chế của đáp ứng này là do kháng nguyên ký sinh trùng có xu hướng kích thích nhóm tê bào lymphô T CD4+ tiết IL-4 và IL-5 (là những Cytokin do bạch cầu tiết ra) thúc tế bào lymphô B chuyển sang sản xuất IgE và tuỷ xương tăng sản xuất bạch cầu toan tính Trong thực nghiệm, người ta đã thấy được sự phối hợp tác dụng của loe với bạch cầu toan tính theo cơ chế độc tế bào phụ thuộc kháng thể ADCC (Antibody Dependent Cell - Mediated Cytotoxicity)

Trong điều kiện invitro, kh i người ta cho ấu trùng Schistosoma vào cùng với

bạch cầu toan tính và IgE (bạch cầu toan tính và IgE đều lấy từ chuột đã nhiễm ký sinh trùng này) thì thấy IgE bám vào ấu trùng, đồng thời bạch cầu toan tính sáp tới, vỡ hạt và

ấu trùng ký sinh trùng bị tiêu huỷ Trong các hạt bạch cầu toan tính có chứa MBP (Major Basic Protein = Protein kiềm chủ yếu), tác dụng của MBP còn mạnh hơn cả những men tiêu protein hay các gốc tự do có trong thực bào

Bảng 1 Sự thay đổi một số chỉ tiêu miễn dịch ở người bị sốt rét ác tính

(Dẫn theo Vũ Triệu An và Jean Claude Homberg, 1997) Chỉ số Người bình thường Người sốt rét ác tính

Trong bảng trên, bạch cầu toan tính giảm trong cơn sốt rét ác tính là do chúng đã

bị mất hạt nên không phân biệt được rõ với loại bạch cầu trung tính Nhưng đại thực

NO và TNF Ngoài ra, cũng phải kể đến các in khác như IgG2 hoạt hoá bổ thể có thể giúp gây dung giải ký sinh trùng

Trong cơ thể người bị sốt rét, kháng thể dịch thể tăng khá rõ, nhưng theo Co hen thì chỉ có một phần nhỏ khoảng 5% là có tác dụng thực sự với ký sinh trùng sốt rét

(Plasmodium), phần lớn còn lại là những kháng thể tạp khác Nhưng rõ ràng là trong

cơn sốt rét ác tính, những thay đổi về một số chỉ tiêu miễn dịch đã cho thấy là có đáp ứng Bảng trên cũng cho thấy, trong bệnh sốt rét có sự giảm đáp ứng qua trung gian tế bào nhưng có tăng đáp ứng miễn dịch dịch thể, mặc dù một phần đã tham gia vào sự hình thành phức hợp miễn dịch Cũng vì thế mà có sự tiêu thụ mạnh bổ thể

Một số ký sinh trùng gây ra phản ứng hạt và phát triển xơ Trường hợp này hay

gặp ở ấu trùng Cysticerclts cellulosae của sán dây Taenia solium Sán dây trưởng

thành ký sinh ở ruột non người thải đốt sán già theo phân người ra ngoài Lợn thiết phải đốt hoặc trứng sán, ấu trùng nở ra sẽ qua niêm mạc dạ dày, ruột vào máu, đến các

cơ quan phát triển thành nang tại cơ vân Tại đây, phản ứng miễn dịch gây viêm, tạo thành tổ chức hạt với mô xơ phát triển xung quanh Ngoài sinh thiết thì có thể chẩn đoán bằng kỹ thuật miễn dịch như: phản ứng miễn dịch huỳnh quang, miễn dịch men ELISA Với amip cũng vậy, nhất là khi chúng gây áp xe gan, một biện pháp giúp cho chẩn đoán phân biệt là phát h iện kháng thể đặc h iệu chống kháng nguyên amip Trường hợp nhiễm giun chỉ, cơ chế của hiện tượng chân voi là do ký sinh trùng phát triển trong mạch bạch huyết, tạo ra tổ chức xơ làm tắc những mạch tương ứng thuộc địa phận có hiện tượng phù

1.2.2 Đáp ứng miễn dịch q ua trung gian tế bào (CMI: Cell Mediated Immunorespo nse)

Người ta cho rằng, miễn dịch qua trung gian tế bào là cơ chế phòng thủ quan

trọng nhất trong bệnh Leishmaniasis và Toxoplasmosis Ở những con vật bị nhiễm Toxoplasma, các tế bào đại thực bào đã được hoạt hoá đóng vai trò quan trọng trong đáp

ứng miễn dịch

Trong cơ thể nhiễm ký sinh trùng cũng sản sinh ra những tế bào độc TC (hay CrL), nhưng chúng có ít tác dụng và còn phụ thuộc nhiều vào cơ địa Trong thực

nghiệm gây nhiễm chuột với Plasmodillm bergei và dùng chất chiết bạch cầu thì có thể

truyền phần nào sức đề kháng miễn dịch tế bào cho chuột Gây nhiễm với đơn bào

Leishmania thấy có dòng nhậy và dòng kháng Ở dòng kháng có sự tăng tiết IFN và

TNF nhiều hơn bởi các tế bào TCD4, nhưng nếu tiêm kháng thể chống các cytokin trên thì tạo ra cơn nhiễm bột phát như ở dòng nhậy Ngược lại, ở dòng nhậy trong cơn nhiễm bột phát thấy tăng IL-4, nhưng nếu tiêm kháng thể chống IL-4 thì lại có phản ứng như dòng kháng Người ta cho rằng, các cytokin (IFN và TNF) làm tăng hoạt động đáp ứng miễn dịch qua trung gian tế bào, ở đây có sự th am gia của các tế bào hỗ trợ Th1, Th2 và các đại thực bào, còn IL-4 có tác dụng nhiều trong miễn dịch dịch thể nhưng lại ức chế đáp ứng miễn dịch qua trung gian tế bào Đến nay, người ta cũng đã

thấy bạch cầu toan tính và tiểu cầu cũng d iệt đ ược ký sinh trùng thông qua các receptor bề mặt Bạch cầu toan tính được lăng sinh dưới tác dụng của interleukin 5 và được hoạt hoá bởi interferon Khi có IgA, IgE đặc hiệu tương ứng kết hợp trên bề mặt ký sinh trùng thì chúng dễ dàng bị tiêu diệt bởi bạch cầu toan tính và tiểu cầu (thấy đối với giun xoăn, sán máng và tiên mao trùng)

1.2.3 Sự né tránh đáp ứng miễn dịch của ký sinh trùng

Ký sinh trùng có nhiều biện pháp để lẩn tránh đáp ứng miễn dịch của cơ thể vật chủ Những biện pháp thường thấy là:

- Ký sinh trùng luôn luôn thay đổi các kháng nguyên bề mặt trong suốt chu trình sống của chúng Có hai hình thức thay đổi:

Một là, thay đổi qua từng giai đoạn Hình thức này thấy điển hình ở ký sinh trùng sốt rét (khi là thể liệt, khi là thoa trùng, khi là tiểu thể hoa cúc) Ở mỗi thể này, ký sinh trùng sốt rét lại có những epitope kháng nguyên riêng Vì vậy, khi cơ thể ký chủ vừa tạo ra được kháng thể chống lại kháng nguyên ở thể này thì ký sinh trùng đã chuyển sang giai đoạn khác và né tránh được sự đe doạ của đáp ứng miễn dịch

Hai là, thay đổi liên tục kháng nguyên bề mặt Ví dụ điển hình của hình thức này

là tiên mao trùng Trypanosoma - loại ký sinh trùng đường máu có khả năng thay đổi

liên tục kháng nguyên bề mặt Mỗi đợt số lượng ký sinh trùng trong máu tăng lên là

một lần chúng thay đổi tính kháng nguyên Sở dĩ Trypanosoma có khả năng này là do

chúng có một glycoprotein bề mặt thay đổi - VSG (Variable Surface Glycoproteine)

Mỗi Trypanosoma có tới trên 1.000 gen VSG khác nhau, mỗi lẫn một đen này được

sao ra và biểu lộ, thay cho đen cũ bị loại đi Các loài tiên mao trùng khác nhau đều có các Immunoglobulin của vật chủ gắn với bề mặt tế bào của chúng Người ta cho rằng, các kháng thể này không gắn với tiên mao trùng qua vùng biến đổi của chúng mà lại qua phần Fc của phân tử kháng thể Các kháng thể này có thể che khuất ký sinh trùng

đó và làm cho các tế bào có thẩm quyền miễn dịch không nhận biết được ký sinh trùng Sự thay đổi tính kháng nguyên này làm khó khăn cho việc chế tạo ra một loại vạc xin hữu hiệu đối với ký sinh trùng Riêng đối với ký sinh trùng sốt rét, người ta đã phân lập được một kháng nguyên CS (Circumsporozoit) không thay đổi và từ đó tạo ra được một loại vạc xin có nhiều hứa hẹn

- Một số ký s inh t rù ng n áu mìn h b ên t ro ng t ế bà o (ví dụ: Toxoplasma, Plasmodium ) hoặc trong một vỏ bọc dày (ví dụ: amip, giun bao, giun kết hạt ) nên mọi

khả năng miễn dịch của ký chủ không tấn công được Không những thế, đôi khi vỏ bọc này còn có tác dụng trung hoà làm bổ thể cũng không hoạt động được, hoặc lâu lâu vỏ bọc lại tự bong ra và thay bằng vỏ mới

Người ta g iả đ ịnh rằng, trong một số trường hợp, phức hợp kháng nguyên - kháng thể trong huyết thanh của vật chủ gắn vào bề mặt của ký sinh trùng, phong bế một cách cơ học các tác động của kháng thể hoặc lâm ba cầu, gây độc cho tế bào và

trực tiếp ức chế tác động của các lâm ba cầu Cơ chế trốn thoát miễn dịch kiểu này là cơ chế của các giun, sán ký sinh

Sự ẩn náu của ký sinh trùng trong tế bào có thể bảo vệ cho ký sinh trùng tránh khỏi các tác động có hại, hoặc tác dụng gây chết của kháng thể, hoặc cơ chế đề kháng của tế

bào Ví dụ: ký sinh trùng sốt rét (Plasmodium) lúc đầu phát triển trong tế bào gan, sau đó

trong hồng cầu Chúng chỉ chịu tác động của kháng thể trong pha ng oại bào ngắn ngủ i

(g iai đoạn Sporozoit và Merozoit) Kh i ký sinh trong hồng cầu, Plasmodium tránh

được cơ chế phòng hộ miễn dịch của vật chủ nhưng cũng tạo nên những bất lợi cho ký sinh trùng (chúng phải lấy dinh dưỡng qua lớp màng tế bào của vật chủ và màng tế bào của chính nó) Vì vậy, chúng đã làm thay đổi cấu trúc tế bào của vật chủ bằng cách các protein của chúng gắn vào màng hồng cầu, vì thế chúng tránh được đáp ứng miễn dịch của vật chủ

- Đối với các loài giun sán kích thước tương đối lớn thì chỗ cư trú lâu dài là lòng ruột, chúng chí bị tiêu diệt khi vật chủ được sử dụng thuốc diệt giun, sán Tuy nhiên, chúng thường phải trải qua thời kỳ ấu trùng Với kích thước nhỏ bé, ấu trùng phải di chuyển qua máu, gan hay phổi, khi ấy miễn dịch có khả năng phát huy tác dụng, nếu không tiêu diệt được thì cũng gây khó khăn cho sự phát triển của chúng

Một số loài giun sán còn lẩn tránh miễn dịch bằng cách náu mình sau các kháng nguyên của chính vật chủ, vì thế mà cơ thể vật chủ không coi ký sinh trùng là vật lạ Một

ví dụ rõ nhất là ấu trùng sán máng Schistosoma: khi di chuyển từ da đến phổi, người ta

thấy chúng khoác lấy các glycolipit ABO hay phân tử MHC II của vật chủ (Major Histocompatibility Complex - các phân tử MHC lớp II thấy ở các tế bào trình diện kháng

nguyên như đại thực bào, tế bào lymphô B…) nên phần lớn tránh được các đòn miễn dịch

của vật chủ

- Ký sinh trùng còn gây suy giảm đáp ứng miễn dịch của vật chủ bằng bản thân các chất độc mà chúng tiết ra Ngoài ra, việc ký sinh trùng chiếm đoạt dinh dưỡng của vật chủ, dẫn đến tình trạng suy dinh dưỡng cũng là một cách gián tiếp làm suy giảm đáp ứng miễn dịch của vật chủ

2 VẤN ĐỀ KHÁNG THUỐC CHỐNG KÝ SINH TRÙNG

Hiện nay, chúng ta đang ở trong một giai đoạn mới về các thuốc chống ký sinh trùng Có rất nhiều loại thuốc phòng trị ký sinh trùng: giun sán, ngoại ký sinh trùng, đơn bào ký sinh Tuy nhiên, trong thực tế sử dụng thuốc chống ký sinh trùng đang diễn ra hai vấn đề: một mặt, các thuốc hiện có không phải bao giờ cũng có tác dụng tốt; mặt khác, nguy

cơ thất bại trong điều trị, không phải bao giờ cũng xảy ra

Từ những năm 80, các lactone đại phân tử vòng xuất hiện trên thị trường thuốc thú y và có ảnh hưởng lớn trong thực tiễn phòng chống ký sinh trùng, bởi 2 lý do: một

là, các sản phẩm này nhanh chóng chiếm lĩnh thị trường, cả trên đối tượng động vật nuôi và động vật cảnh; hai là, các sản phẩm này có tác dụng đồng thời cả trên nội và

ngoại ký sinh trùng (giun, sán, rận, ve, bét, ruồi ) Do tác dụng đa giá như vậy nên

ch ún g đ ược chú ý và đ ược man g tên là: thu ốc trị nộ i ng oại ký s inh trùn g (Endectocide) Người ta đã sử dụng rộng rãi các hoá dược này trong phòng chống giun tròn,

và gần đây đã sử dụng chống động vật chân đốt ký sinh

Sự tiến bộ trong hoá trị liệu chống ký sinh trùng được thể hiện bằng nhiều cách: sự xuất hiện của phân lớp mới trong dược học, sự cải tiến công thức, chế tạo các hoá dược

dễ sử dụng, an toàn cho vật nuôi

Tuy nhiên, tất cả những tiến bộ này gặp một bất lợi, đó là sự kháng thuốc của ký sinh trùng Kháng thuốc chống ký sinh trùng là sự xuất hiện tất yếu trong quá trình dùng thuốc

2.1 Một số tiến bộ của hoá trị liệu và hoá dự phòng nhiễm ký sinh trùng

2.1.1 Các thuốc hiện dùng trị ký sinh trùng

Thuốc trị ký sinh trùng rất khác nhau giữa các nước Những thu ốc chống ký sinh trùng ở các loài vật nuôi hiện có gồm:

- Trâu, bò nuôi thịt: Abamectine, Albendazole, Fenbendazole, Febantel, Doramectine, Moxidectine, Ivermectine, Levamisole, Oxfendazole, Netobimin, Trichlorfon, Tartrate và Citrate morantel

- Trâu, bò nuôi lấy sữa: Tartrate morantel, Trichlorfon

- Cừu : Albendazo le, Fenbenda zole , Febạntel, Ivermect ine, Leva miso le, Mebendazole, Netobimin, Oxfendazole

- Dê : Albendazo le, Fenbenda zole , Febantel, Dora mect ine, lvermect ine, Mebendazole, Netobimin, Oxfendazole

- Ngựa: Febantel, Fenbendazole, Ivermectine, Mebendazole, Oxibendazole, Embonate pyrantel, Trichlorfon

- Lợn : Mebendazole, Albendazole, Leva misole, Pra ziquantel, Fenbendazole, Ivermectine, Oxfenda zole

- Chó : Embonate py rante l, Oxfenda zole, Pra ziquante l, Flubenda zo le, Nitroscanate, Mebendazole, Fenbendazole, Levamisole, Niclosamide

- Mèo : Enbonat e pyrate l, Pra ziqua nte l, Flub enda zole, Me benda zo le, Fenbendazole

Như vậy, đối với mỗi loài vật nuôi có nhiều thuốc chống ký sinh trùng có thể sử

dụng được Tuy nhiên, sự lựa chọn loại thuốc phù hợp và có tác dụng tốt phải dựa trên

các tiêu chuẩn: có hiệu quả cao, an toàn với vật nuôi, giá thành hợp lý; đồng thời cũng dựa vào đặc điểm dịch tễ học của bệnh ký sinh trùng và xem xét tính kháng thuốc của

ký sinh trùng

2.1.2 Một số dạng mới của thuốc chống ký sinh trùng

Để dễ sử d ụng và tăng h iệu quả dùng thuố c, một số sản phẩm cũ (v í dụ : Benzimidazole) được chế dưới dạng các hệ thống giải phóng liên tục hoặc gián đoạn Các

hệ thống này được phát triển nhằm làm giảm thao tác lặp lại trên con vật

Một số dạng mới của thuốc chống ký sinh trùng gồm:

- Tảng đá liếm có chứa Prebendazole dùng cho gia súc liếm để phòng và trị giun sán Thời gian cho liếm thay đổi tuỳ con vật

- Viên thuốc lớn (bolus) giải phóng liên tục morantel để phòng trị giun sán cho

bò

Có hai dạng:

+ Paratec bolus: hệ thống bằng kim loại tác động từ 60 đến 90 ngày

+ Paratec flex: lá ba mảnh bằng nhựa Lá trung tâm có chứa Morantel Sau khi đưa

thuốc vào, các lá mở ra, g iải phóng thuốc tẩy giun tròn trong khoảng 90 ngày

Hệ thống "bolus" giải phóng liên tục Albendazole dùng cho cừu Bên trong hệ thống này có một lò xo làm cho viên thuốc tẩy giun sán tiếp xúc với dịch dạ cỏ và tan ra đều đặn trong 90 ngày (captex bolus)

Hệ thống "bolus" giải phóng liên tục Fenbendazole: tác động đều đặn trong 130 ngày

Hệ thống "bolus" giải phóng liên tục Ivermectine: tác động liên tục trong 135 ngày

Hệ thống "bolus" giải phóng liên tục Oxfendazole: 5 viên nén Oxfendazole được phân bố trong các buồng kế tiếp xung quanh trục bằng Me gie Sự bào mòn trục này cứ 21 ngày giải phóng 1 viên nén

2.1.3 Các lactone đại phân tử vòng

Nhiều loại thuốc chống ký sinh trùng có cấu trúc của lactone đại ph ân tử vòng Chúng tác động theo cơ chế tác động làm mở, theo cách không phản hồi vào các kênh Chlore của màng nguyên sinh chất tế bào cơ của ký sinh trùng (giun, sán)

Một số thuốc có cấu trúc lactone đại phân tử vòng gồm:

- Ivermectine Ivermectine là dẫn xuất của Avermectine Bị và Avermectine được tạo ra bởi vi khuẩn Streptomyces avermectilis

- Abamectine

- Moxidectine

- Milbemycine Oxime

- Doramectine

2.1.4 Các phân tử thuốc mới có tác dụng trong tương lai

Trong tương lai, việc nghiên cứu các phân tử thuốc mới có ý nghĩa quan trọng trong việc khắc phục tính kháng thuốc của ký sinh trùng

* Paraherquamide

Phân tử này được tạo ra từ nhiều loại nấm khác nhau thuộc chủng Penicillium và tỏ ra

có hiệu quả đối với hầu hết các giun ký sinh ở dạ dày, ruột và phổi Tuy nhiên, phân tử này có hiệu quả thấp và độc đối với chó Các nghiên cứu thực nghiệm cho thấy,

Paraherquamide được sử dụng chống Haemonchus contortus, Oesophagostomum circumcincta, Trichostrongylus colubriformis có hiệu quả

Phân tử Paraherquamide được quan tâm vì hiện nay các loài giun sán phát triển rất nhanh, khả năng kháng một số thuốc khác và cơ chế tác động của nó cũng khác với Avennectine và Milbemycine Việc sử dụng phân tử này nhằm phá vỡ sức kháng thuốc của

ký sinh trùng với Avermectine trong tương lai

Đây là một phân tử phức hợp có nguồn gốc từ nấm Những số liệu nghiên cứu ban đầu cho thấy, phân tử này có hiệu quả chống

Ascaridia g alli ở g à, To xoca ra ca nis v à T cati ở chó và mèo, H contortu s v à Ostertagia ostertagia ở trâu, bò, dê, cừu Phân tử này rất ít độc tính

* Dioxapyrromomycine Phân tử này cũng được tạo ra bởi nấm Streptomyces sp., có phổ hoạt lực hẹp Tác dụn g của p h ân tử n ày đ ược n gh iên cứu n h iều n hất ở H co nto rtus

Dio xapyrromomycine tác động trên những chủng giun sán kháng với Benzimidazole, Avermectine và Levamisole, nhưng không tác dụng trên những chủng kháng với Closantel

* Clonostachyol

Phân tử này được tạo ra từ nấm Clonostachys cylindrospora Các nghiên cứu ban đầu

cho thấy, thuốc tác dụng trên Haemonchus contortus

2.2 Tính kháng thuốc chống ký sinh trùng

2.2.1 Khái niệm về tính kháng thuốc chống ký sinh trùng

Tính kháng thuốc là sự giảm về mặt di truyền tính mẫn cảm của một quần thể ký sinh trùng với tác dụng của thuốc chống ký sinh trùng

Tính kháng thuốc và tính dung nạp thuốc là hai khái niệm khác nhau Không nên nhầm tính kháng thuốc với tính dung nạp thuốc, biểu hiện bằng sự không tác động của một sản phẩm trên một loài ký sinh trùng khi không có sự tiếp xúc từ trước đó

Sự xuất hiện sức kháng thuốc của vi sinh vật (vi khuẩn, nguyên sinh động vật) và

giun sán là một hiện tượng tất yếu Nhìn chung, sự kháng thuốc này ở giun tròn phát triển chậm hơn ở côn trùng, nguyên sinh động vật và vi khuẩn, điều này do những nguyên nhân sau:

- Giun tròn có giai đoạn thế hệ khá dài

- Tính di động của giun tròn ít so với tính di động của vật chủ

- Sự chọn lọc của giun tròn rất hạn chế khi ở các giai đoạn ký sinh khác nhau

- Thuốc trị giun tròn thường có hiệu quả cao và ít tồn lưu trong cơ thể vật chủ (trừ các thuốc có cấu trúc lactone đại phân tử vòng và các salicylanilide)

Tuy nhiên, sự kháng thuốc của giun, sán đang và sẽ ngày càng là một vấn đề cấp thiết

ở hầu hết các nước Vì vậy, cần quan tâm đến các vấn đề sau:

Tính kháng thuốc của các loài giun xoăn ở ngựa đã phổ biến ở rất nhiều nơi trên thế giới, trong đó có sự kháng lại cả pyrantel

- Tính kháng thuốc của các loài giun sán ký sinh ở cừu và dê (đối với tất cả các loại thuốc trị giun sán) đã xuất hiện nhiều ở một số nước như Úc, Niudilan

- Số lượng các trại chăn nuôi xuất hiện tính kháng thuốc chống ký sinh trùng tăng lên

và mức độ kháng thuốc cũng tăng dần lên Đây là vấn đề báo động về mức độ và phạm vi gia tăng tính kháng thuốc của ký sinh trùng Ngoài ra, tính kháng thuốc đa chủng loại (nghĩa là cùng lúc có nhiều giống loài ký sinh trùng kháng với cùng một loại thuốc) ngày càng xuất hiện nhiều

- Tính kháng thuốc thường chỉ được nhận ra khi các trường hợp gia súc bị bệnh ký sinh trùng nhưng điều trị bằng thuốc không hiệu quả hoặc hiệu quả rất thấp

2.2.2 Tình hình kháng thuốc chống ký sinh trùng ở một số loài vật nuôi trên thế giới

Tính kháng thuốc của ký sinh trùng ký sinh ở nhiều loài vật nuôi như dê, cừu, bò, ngựa, lợn đã được thông báo ở hầu hết các nước trên thế giới

* Ở cừu và dê Tính kháng thuốc chống ký sinh trùng Ở cừu và dê luôn đứng đầu trong các loài gia súc bởi những lý so sau:

- Ở những vùng nóng, ẩm và có chăn nuôi dê và cừu, việc dùng thuốc chống ký sinh trùng được thực hiện thường xuyên để phòng trị ký sinh trùng cho dê, cừu

- Dê, cừu được chăn thả hỗn hợp trên bãi chăn và khả năng nhiễm chéo các loài ký sinh trùng giữa dê và cừu chắc chắn xảy ra thường xuyên

Các ngh iên cứu cho thấy , Haemonchu s contortu s, Ostertagia sp và Trichostrongylus sp kháng với Benzimidazole đã thấy ở khắp nơi Những loài khác, Nematodirus, Cooperia, Oesophagostomum, Chabertia, Strongyloides ít được đề cập

- Bò là gia súc không được sử dụng thường xuyên thuốc tẩy giun sán

- Ấu trùng giun tròn tồn tại trong phân bò tạo ra sự lưu trữ ký sinh trùng mẫn cảm với thuốc Tuy vậy, đa số trường hợp tính kháng thuốc của ký sinh trùng trên bò thể hiện

đối với Benzimidazole, Pyrantel, Morantel, nhất là O ostertagia

của Ascaris suum và Oesophagostomum sp

2.2.3 Nguyên nhân của những thất bại trong điều trị bệnh ký sinh trùng

Thực tế cho thấy, trong điều trị bệnh ký sinh trùng bằng hoá dược chống ký sinh trùng, có những ca bệnh không khỏi hoặc khỏi không triệt để Điều này làm chúng ta nghĩ đến sự kháng thuốc của ký sinh trùng Song, vấn đề không đơn giản như vậy, bởi còn rất nhiều nguyên nhân dẫn đến việc điều trị bằng thuốc không hoặc ít hiệu quả Vì vậy, trước hết cần phải phân biệt hiện tượng kháng thuốc giả (do những sai lầm trong điều trị) và hiện tượng kháng thuốc thật

Những nguyên nhân của sự kháng thuốc giả gồm có:

- Chẩn đoán sai: rất nhiều bệnh do vi khuẩn, vi rút, do nhiễm độc mãn tính, do thiếu dinh dưỡng đều gây ra những triệu chứng lâm sàng giống bệnh ký sinh trùng Vì vậy, nếu chẩn đoán những trường hợp này là do ký sinh trùng gây ra và dùng thuốc trị ký sinh trùng thì việc điều trị không có hiệu quả

- Dùng liều thấp hơn liều quy định: điều này có thể xảy ra do xác định khối lượng gia súc, gia cầm không chính xác (ước lượng), hoặc do không hiểu biết về liều lượng, hoặc do muốn giảm giá thành sử dụng thuốc Dùng liều thấp hơn liều điều trị dẫn tới hiệu quả kém, thậm chí không có hiệu quả, đồng thời góp phần tạo ra sự kháng thuốc thật của ký

- Ngoại trừ các thuốc trị ký sinh trùng có cấu trúc lactone đại phân tử vòng và salicylanilide (có khả năng tồn lưu trong cơ thể gia súc), các thuốc tẩy giun sán thường ít tồn lưu, nghĩa là thuốc chỉ có tác dụng trong một thời gian rất ngắn (vài ngày) Trong khi đó, môi trường chăn nuôi luôn ô nhiễm mầm bệnh giun sán, làm cho vật nuôi sau khi dùng thuốc có hiệu quả rồi lại tiếp tục tái nhiễm rất nhanh Kết quả là vật nuôi vẫn có giun sán

ký sinh khi ta kiểm tra lại để xác định hiệu lực của thuốc Điều đó làm ta nghĩ tới thất bại trong điều trị, song rõ ràng không phải như vậy

- Một vài cơ chế sinh lý có thể ảnh hưởng đến tác dụng của thuốc (ví dụ, rãnh thực

quản của gia súc non )

- Sự khác nhau về động dược học (sự hấp thu, phân bố và thải trừ của thuốc) giữa các cá thể và các loài khác nhau có thể ảnh hưởng đến hiệu quả điều trị Ví dụ, dùng thuốc trị ký sinh trùng cho dê thường dùng liều cao hơn các vật nuôi khác (so với khối lượng cơ thể)

Một số bệnh khác ghép với bệnh ký sinh trùng hoặc chế độ ăn cũng ảnh hưởng đến hiệu quả điều trị bằng thuốc

Lựa chọn thuốc điều trị không thích hợp: ví dụ, ký sinh trùng đang ở giai đoạn ấu trùng trong cơ thể vật chủ, song lại dùng thuốc không có tác dụng với ấu trùng (chỉ có tác dụng với ký sinh trùng trưởng thành); hoặc dùng thuốc có hiệu quả không cao, hoặc thuốc bảo quản không tốt đã hư hỏng, hoặc thuốc đã hết hạn sử dụng

Việc lựa chọn thuốc không hợp lý là nguyên nhân tất yếu dẫn tới thất bại trong điều trị

Những nguyên nhân của hiện tượng kháng thuốc giả đã nêu ở trên thường rất phổ biến trong thực tế sản xuất ở tất cả các khu vực, tất cả các nước trên thế giới Hậu quả gần nhất của những nguyên nhân này là việc điều trị không đưa lại kết quả mong muốn Song, hậu quả nghiêm trọng hơn, đó là từ những sai lầm trong việc dùng thuốc sẽ dẫn đến những tác động làm giảm về mặt di truyền tính mẫn cảm của các loài ký sinh trùng với một loại thuốc nào đóc

Hiện nạy, sự kháng thuốc chống ký sinh trùng vẫn tiếp tục phát triển do hai nguyên nhân chính

Một là, chúng ta còn rất thiếu những kỹ thuật có độ tin cậy cao, thiếu thốn về kinh tế và cả kinh nghiệm thực tiễn để phát hiện ra sự kháng thuốc của ký sinh trùng Hai là, chúng ta thường xuyên đánh giá tính kháng thuốc của ký sinh trùng với liều thấp hoặc liều trung bình (liều lượng mà ta thường khuyến cáo cho người chăn nuôi sử dụng), còn những liều cao chỉ được sử dụng rất muộn (sau khi dùng liều thấp và liều trung bình không có tác dụng) Và như vậy là đã quá muộn cho việc dùng thuốc đúng nguyên tắc Tính kháng thuốc của ký sinh trùng bắt đầu cũng từ lý do này, và tính kháng thuốc cũng từ đó mà tiếp tục phát triển

Cũng cần biết rằng, khi sự kháng thuốc đã hình thành thì quá trình điều trị rất khó khăn, tốn kém về kinh tế và có hiệu quả thấp

2.2.4 Các yếu tố tham gia vào sự xuất hiện tính kháng thuốc của ký sinh trùng

Những yếu tố quan trọng làm xuất hiện tính kháng thuốc của ký sinh trùng gồm:

- Sự điều trị lặp lại Những nghiên cứu ở Úc, Nam Phi và Niudilan đã chứng

minh rằng, sự lặp lại điều trị bệnh giun sán cho dê và cừu đã làm tính kháng thuốc xuất hiện

và phát triển

- Dùng liều điều trị thấp Ngoài những lý do dẫn đến việc dùng liều điều trị thấp như

đã trình bày ở trên (ước lượng sai về khối lượng gia súc, muốn giảm giá thành sử dụng thuốc, do thiếu hiểu biết ) thì còn có thể do sai sót về dụng cụ (kích cỡ các loại súng lục

và dụng cụ định liều khác, do cân)

- Sử dụng kéo dài một loại thuốc mà không có sự luân phiên (xen kẽ) thuốc

Trong chăn nuôi gia súc, gia cầm, việc dùng thuốc chống ký sinh trùng với liều thấp kéo dài (bổ sung vào thức ăn) với mục đích phòng nhiễm ký sinh trùng có thể được khuyến cáo Tuy nhiên, một điều tai hại là việc dùng thuốc liều thấp kéo dài, đặc biệt lại dùng một loại thuốc trong thời gian dài như vậy sẽ rất dễ làm cho ký sinh trùng quen dần với loại thuốc đó, dần dần xuất hiện sự kháng thuốc của ký sinh trùng Vì vậy, cần có kế hoạch luân phiên thuốc trong thời gian rất ngắn, và với các thuốc khác nhau, có thể là những sản phẩm thuốc của cùng một họ

- Một số biện kỹ thuật được áp dụng trong chăn nuôi có thêm điều kiện thuận lợi để tính kháng thuốc xuất hiện và phát triển Ví dụ, chăn nuôi nhiều loại gia súc trong cùng

chuồng hoặc trên cùng bãi chăn thả, không nuôi cách ly những con vật bị bệnh ký sinh trùng, điều trị không triệt để cho những con vật bị bệnh, không có kế hoạch chẩn đoán

phát hiện gia súc mang ký sinh trùng để điều trị v.v Ngoài ra, không có kiến thức về sự

khác nhau của động dược học giữa các loài gia súc cũng là yếu tố làm thuận lợi cho tính kháng thuốc xuất hiện

2.2.5 Những biện pháp phát hiện tính kháng thuốc của ký sinh trùng

Để phát hiện tính kháng thuốc của ký sinh trùng, có thể áp dụng những biện pháp sau:

- Sử dụng thuốc trị ký sinh trùng và kiểm tra hiệu lực của thuốc qua mổ khám gia súc

Ví dụ, đối với gia súc bị bệnh giun, sán, có thể dùng thuốc tẩy giun sán với liều điều trị (ở cận trên), sau đó kiểm tra hiệu lực của thuốc bằng cách mổ khám gia súc để tìm xem còn giun sán ký sinh không Phương pháp này chính xác và hiệu quả, song tốn kém và cần nhiều thời gian

- Sử dụng thuốc trị ký sinh trùng và kiểm tra hiệu lực thuốc bằng kỹ thuật xét nghiệm phân Ví dụ, khi gia súc bị bệnh giun, sán, xét nghiệm phân để xác định cường

độ nhiễm (đếm số trứng/gam phân) Sau khi dùng thuốc tẩy giun sán 10 - 14 ngày xét

nghiệm lại phân, đếm số trứng/gam phân Nếu không còn trứng trong phân hoặc số lượng trứng giảm đi trên 95% thì thuốc có hiệu lực tốt và chưa xuất hiện tính kháng thuốc Nếu số lượng trứng giảm đi được 95% thì có thể xác định thuốc có hiệu lực nhưng chưa triệt để Trường hợp này xảy ra khi đã loại trừ hết các nguyên nhân của hiện tượng kháng thuốc giả thì cần nghĩ đến khả năng tính kháng thuốc của ký sinh trùng bắt đầu xuất hiện

Phương pháp này dễ áp dụng và ít tốn kém nhưng độ chính xác không cao

- Phương pháp nuôi cấy để kiểm tra khả năng nở của trứng ký sinh trùng sau khi dùng thuốc trị ký sinh trùng cho vật chủ So sánh sự phát triển của trứng ở một quần thể ký sinh trùng mẫn cảm và quần thể ký sinh trùng nghi ngờ đã kháng thuốc Thử nghiệm này cho kết quả tốt khi xác định tính kháng thuốc Benzimidazole của giun sán Tuy nhiên, để kết quả thử nghiệm chính xác, cần theo dõi ngay từ lúc trứng mới theo phân ra ngoài Vì vậy, các mẫu phân thu thập phải chuyển ngay về phòng thí nghiệm

- Phương pháp thử nghiệm sự phát triển của ấu trùng (L1 - L3 hoặc L3 - L4) Thử nghiệm này có thể áp dụng đối với các thuốc tẩy giun sán khác nhau và cho phép xác định

dễ dàng tính kháng thuốc của các loài giun sán với thuốc tẩy được sử dụng Thử nghiệm

về sự liệt của ấu trùng sau khi dùng thuốc tẩy giun sán Song, thử nghiệm này khá công phu

và mang tính chủ quan Ngoài ra, đây cũng là phương pháp xác định tính kháng thuốc của

ký sinh trùng đòi hỏi phương tiện xác định rất đắt tiền mà không phải phòng thí nghiệm nào cũng làm được

- Thử nghiệm hoá sinh và di truyền Các thử nghiệm về đặc điểm sinh vật, hoá học

và di truyền của ký sinh trùng trước và sau khi dùng thuốc, để xác định sự kháng thuốc của quán thể ký sinh trùng rất tốn kém và chỉ thực hiện được ở những phòng thí nghiệm hiện đại

- Thử nghiệ m trên động vật thí nghiệ m gây nh iễ m ký sinh trùng (v í dụ, thử

nghiệm trên chuột bạch và chuột lang nhiễm Haemonchus contortus hoặc Trichostrongyus colubriformis) Các thử nghiệm này cần nhiều thời gian, tốn kém Tuy

nhiên, những thử nghiệm này có thể tiến hành ở phòng thí nghiệm hoặc ở ngoài thực địa

và đều có thể phát hiện sớm sự kháng thuốc của ký sinh trùng

2.2.6 Chiến lược hạn chế sự phát triển tính kháng thuốc của ký sinh trùng

Trước hết, phải dự đoán trước tính kháng thuốc của một loài ký sinh trùng với một thuốc nào đó Từ đó, xác định chiến lược hạn chế sự phát triển tính kháng thuốc của ký sinh trùng Chiến lược được lựa chọn có thể thay đổi tuỳ hoàn cảnh của địa phương (phụ thuộc vào điều kiện khí hậu, dịch tễ học và loài ký sinh trùng hiện có của địa phương đó)

Chiến lược hạn chế sự phát triển tính kháng thuốc của ký sinh trùng gồm những vấn

đề sau:

- Hạn chế số lần điều trị để hạn chế sự xuất hiện tính kháng thuốc Các phương pháp điều trị luân phiên thuốc có thể công phu hơn, hiệu quả hơn, nhưng khi sự kháng thuốc đã xuất hiện và phát triển thì người chăn nuôi có những thiệt hại hơn nhiều

- Sử dụng nhóm hoá dược mới để phòng trị ký sinh trùng Các ký sinh trùng kháng thuốc bị loại trừ bởi nhóm hoá dược mới này

- Đánh giá kịp thời tính kháng thuốc có thể xảy ra và thay ngay thuốc khác khi hiệu quả điều trị giảm

- Không bao giờ dùng liều thấp hơn liều cận dưới và hạn chế dùng liều cận dưới Cần xác định đúng khối lượng con vật để tính liều lượng thuốc chống ký sinh trùng

- Phải nuôi cách ly, kiểm tra phân và điều trị triệt để bệnh ký sinh trùng cho các con vật mới mua về

- Điều trị mang tính phòng ngừa cho toàn bộ đàn gia súc khi trong đàn có một số con

bị bệnh ký sinh trùng, đồng thời có biện pháp chống ô nhiễm môi trường chăn nuôi (ủ phân, vệ sinh đồng cỏ, bãi chăn thả)

- Không nuôi chung các loại gia súc, nhất là những gia súc cùng bị một số loài ký sinh

trùng ký sinh (trâu, bò, dê, cừu )

- Phối hợp thuốc thuộc hai nhóm khác nhau để sử dụng điều trị một bệnh ký sinh trùng Điều này cũng làm tăng tác dụng của thuốc, hạn chế tính quen và kháng thuốc của

ký sinh trùng

3 VẮCXIN CHỐNG KÝ SINH TRÙNG

Ngày nay, công nghệ vắcxin đã phát triển mạnh mẽ ở nhiều quốc gia trên thế giới Nhờ công nghệ vắcxin mà một số bệnh truyền nhiễm ở người và vật nuôi đã được khống chế

Có rất nhiều loại vắcxin chống vi khuẩn và vi rút cho người và động vật, nhưng vắcxin chống ký sinh trùng cho người thì chưa có, vắcxin chống ký sinh trùng cho vật nuôi

đã có nhưng còn rất ít, thậm chí rất hiếm hoi Một câu hỏi đặt ra là: tại sao bệnh ký sinh trùng rất phổ biến và gây nhiều tác hại cho vật nuôi, ảnh hưởng lớn đến năng suất chăn nuôi mà việc nghiên cứu chế tạo các loại vắcxin phòng bệnh ký sinh trùng lại chưa được chú ý nhiều?

Theo giáo sư Bertrand Losson (2000), sở dĩ việc chế tạo và sử dụng vắcxin chống ký sinh trùng còn rất hạn chế là do những nguyên nhân sau:

- Đáp ứng miễn dịch chống ký sinh trùng thường kém hiệu lực

- Các loài ký sinh trùng có tính phức tạp kháng nguyên rất lớn so với vi khuẩn và

vi rút

Ví dụ , tính ph ức tạp của kháng nguyên ký sinh trùng sốt rét (Pla smodium

falciparum) lớn gấp 5 lần tính kháng nguyên của vi khuẩn E coli

- Các ký sinh trùng đã phát triển những phương pháp khác nhau nhằm né tránh hoặc biến đổi đáp ứng miễn dịch của vật chủ

Ví dụ, ký sinh trùng giống Schistosoma, Trypanosoma, ấu trùng của sán dây

Đáp ứng miễn dịch chống ký sinh trùng do vắcxin tạo ra phần lớn là miễn dịch mang trùng Tuy nhiên, tuỳ điều kiện mà các vắcxin chống ký sinh trùng có thể đưa đến miễn dịch không mang trùng, miễn dịch mang trùng, miễn dịch thể hiện ở mức độ ngăn ngừa các biểu hiện bệnh lý, loại trừ các ký sinh trùng có mặt trước khi chủng vắcxin hoặc ngăn chặn việc truyền lây ký sinh trùng

3.1 Các vắcxin chống ký sinh trùng đã và đang đƣợc sử dụng

Hiện nay, các vắcxin chống ký sinh trùng đang có chủ yếu được dùng trong thú y, rất hiếm loại vắcxin chống ký sinh trùng được dùng trong y học Có những loại vắcxin chống ký sinh trùng sau:

- Vắc xin ký sinh trùng sống được giảm độc: loại vắcxin này được chế tạo từ các chủng ký sinh trùng được giảm độc lực bằng cách chiếu xạ, nuôi c ấy trong điều kiện phòng thí nghiệm (in vivo) và gây truyền trong thực địa (in vivo)

- Vắcxin ký sinh trùng chết: gồm các vắcxin chết tự nhiên và vắcxin tái tổ hợp

Bảng 2 Các vắcxin sử dụng ký sinh trùng sống giảm độc

Loài ký sinh trùng Vật chủ Ascaris caninum Chó

Dictyocaulus viviparus Bò Dictyocaulus filaria Cừu, dê, bò, trâu Theileria annulata Bò

Theileria hirci Cừu, dê Babesia bovis Bò, trâu Babesia bigemina Bồi trâu Eimeria spp Gà Toxoplasma gondii Cừu

Vắcxin/kháng nguyên

Ấu trùng L3 được chiếu xạ

Ấu trùng L3 được chiếu xạ

Ấu trùng L3 được chiếu xạ

Thể phân chia (Schizonte) nuôi cấy Thể phân chia (Schizonte) nuôi cấy

Gây truyền in vivo Gây truyền in vivo

Oocyst được chiếu xạ

Gây truyền in vivo

Bảng 3 Các vắcxin chết được chế tạo nhờ công nghệ sinh học

Loài ký sinh trùng Vật chủ Kháng nguyên Tỷ lệ bảo hộ (%)

Boophilus microplus Babesia bovis Bò, trâu Bm 86 91

Fasciola hepatica Theilera parva Bò, trâu 12D3 HC5 75

* So sánh vắcxin nhược độc và vắcxin chết: Vắcxin nhược độc và vắcxin chết khi sử dụng chống ký sinh trùng đều có mặt có lợi và bất lợi Cụ thể như sau:

Bảng 4 So sánh những thuận lợi và bất lợi của 2 loại vắcxin

Thuận - Sử dụng đạt hiệu quả lợi - Kháng nguyên đa dạng

- Nhắc lại do việc nhiễm ký sinh trùng tự nhiên

- Phải bảo quản ở 40C

- Giảm độc không hoàn toàn và dễ chuyển thành có Bất lợi độc lực cao, gây bệnh ngẫu nhiên cho vật chủ

- Kiểm tra chất lượng vẳcxin phức tạp

- K hông có đáp ứ ng miễn

3.2 Vắcxin chống sán dây

Năm 1989, Johnson và cộng sự đã chế vắcxin Taenia bovis - một vắcxin tái tổ hợp

khi đưa vào cơ thể trâu, bò tạo ra miễn dịch chống lại dạng ấu trùng của sán dây Sử dụng vắcxin chống sán dây cho miễn dịch bảo hộ ít nhất 1 năm Trâu, bò được tiêm vắcxin thì kháng thể trong sữa đầu sẽ tạo ra sức miễn dịch cho con con Đồng thời, những con còn non đang bú sữa mẹ vẫn có thể chủng vắcxin ngay cả khi có mặt các kháng thể trong sữa đầu của mẹ Miễn dịch tạo ra sau kh i chủng vắcxin này có tác dụng bảo hộ đối với việc nhiễm tự nhiên sán dây ở trâu,bò

Kháng nguyên được sản xuất để chế vắcxin nhờ công nghệ gen Lấy việc sản xuất

các protein của Taenia ovis để chế vắcxin làm ví dụ:

- Người ta đã phân tích huyết thanh của con v ật được tiêm vắcxin, gây nhiễm và kiểm tra Kết quả cho phép xác định kháng nguyên KN47 và 57 KDa có khả năng bảo hộ cao và sự bảo hộ này là do kháng thể đặc hiệu mang lại

- Các huyết thanh tối miễn dịch trên thỏ chống các kháng nguyên này cũng đã được sản xuất

- Một ARN của một loại ấu trùng 6 móc (Oncosphere) chiết ra từ ấu trùng được sử

dụng để cấu tạo nên một ngân hàng ADN

Việc sàng lọc các clone trong điều kiện in vivo đã cho phép tách hai dạng clone tiết dịch mang tên 45w và 45s Các clone tiết dịch xuất hiện không đầy đủ Việc tiêm vắcxin với 2 loại protein trên tạo ra các kháng thể IgG nhưng không có khả năng bảo

hộ

- Đưa clone vào trong một vecteur khác, các protein hợp nhất với glutathione S, men chuyển (transferaza) 45w GST thành 45s GST Trong đó, 94% được bảo hộ bởi protein 45w GST, 0% được bảo hộ bởi protein 45s GST

Các nghiên cứu tương tự đang được tiến hành với sán dây Taenia solium, Taenia saginata và Echinococcus granulosa

Hiện có một số loại vắcxin chống giun tròn đã và đang được sử dụng

- Vắc xin nhược độc chống giun phổi ở bò và cừu: được chế tạo từ năm 1960, bằng cách chiếu xạ vào ấu trùng L3, tiêm 2 liều (mỗi liều khoảng 1.000 ấu trùng) cách nhau 1 tháng cho hiệu lực bảo hộ 98% Hiện vắcxin này vẫn đang được sử dụng

- Vắc xin nhược độc chống giun móc ở chó: được chế tạo từ năm 1978, bằng cách chiếu xạ giảm độc ấu trùng L3, cho kết quả bảo hộ từng phần Tuy nhiên, do giá thành sản xuất đắt, việc bảo quản khó khăn nên đã không được chế tạo và sử dụng sau 2 năm

ra đời

3.5 Vắcxin chống đơn bào ký sinh

3.5.1 Vắcxin chống lê dạng trùng

- Vắcxin nhược độc chống lê dạng trùng

Vắcxin được chế tạo từ các chủng Babesia bovis, Babesia bigemina giảm độc lực bằng

cách truyền qua bê được cắt lách Vắcxin này sử dụng phòng bệnh lê dạng trùng có hiệu quả nhưng có một số nhược điểm như sau: bảo quản khó, giá thành cao; các đơn bào đã nhược độc có thể chuyển thành có độc lực trong cơ thể gia súc và gây bệnh; có thể gây hoàng đản do dung huyết ở bê sử dụng vắcxin

- Vắcxin chết chống lê dạng trùng: được chế tạo từ những chủng Babesia bovis, B.canis Vắcxin này sử dụng những kháng nguyên sản xuất trên môi trường in vitro Tuy

nhiên, thực nghiệm cho thấy, việc sử dụng vắcxin này hiệu quả không cao

- Vắcxin chống lê dạng trùng sử dụng các protein tái tổ hợp khác nhau

Vắcxin này cho kết quả bảo hộ tốt, nhưng cần phải có chất bổ trợ Freund trong chế tạo vắcxin

Hiện nay, có một số nghiên cứu đang được tiến hành với mục đích thay thế chất bổ trợ Freund bằng chất bổ trợ khác, bước đầu cho kết quả có thể chấp nhận được

3.5.2 Vắcxin chống Theileria

- Vắcxin nhược độc chống Theileria annulata và Theileria hirci

Vắcxin được chế tạo bằng các chủng Theileria annulata và Theileria hirci được giảm độc lực bằng việc nuôi cấy và tiếp đời in vi tro các Schizonte của các đơn bào

này

Vắcxin loại này cho hiệu quả phòng chắc chắn đối với Theileriosis

- Vắc xin tái tổ hợp chống Theileria: được chế tạo từ đơn bào Theileria parva Bước đầu vắcxin tái tổ hợp chống Theileria parva cho kết quả bảo hộ tốt

3.5.3 Vắcxin chống cầu trùng gà

Để gây miễn dịch chống cầu trùng gà, có thể dùng liều nhỏ các Oocyst có sức

gây bệnh cho gà nuốt Song, làm như vậy khó và nguy hiểm v ì gà dễ bị bệnh cầu trùng

Vì vậy cũng có thể dùng Oocyst gây bệnh để gây nhiễm thực nghiệm, sau đó

dùng hoá dược điều trị cho gà mắc bệnh

Ngoài ra, cho đến nay một số vắcxin chống cầu trùng gà đã được chế tạo, tuy nhiên hiệu lực còn thấp

- Vắc xin nhược độc: được sản xuất từ những sản phẩm của giai đoạn sinh sản vô tính của cầu trùng, chúng ít độc nhưng vẫn có khả năng kích thích cơ thể tạo miễn dịch

- Vắcxin tái tổ hợp: nhiều loại vắcxin tái tổ hợp được nghiên cứu chế tạo, nhưng nhìn chung còn phải khắc phục một số hạn chế như: khả năng bảo hộ yếu, đường đưa vắcxin phải cải tiến, sự thay đổi tính kháng nguyên giữa các chủng cầu trùng

3.6 Vắcxin chống ngoại ký sinh trùng

Vắcxin tái tổ hợp (sử dụng kháng nguyên B - PM 86) dùng để gây miễn dịch cho trâu,

bò, dê, cừu chống ve Boophilus microplus

Miễn dịch thể hiện ở sự giảm về số lượng, kích thước và sự sinh sản của ve

3.7 Vắcxin chống ký sinh trùng trong tương lai

Trong tương lai, công nghệ vắcxin chống ký sinh trùng chuyển sang việc xác định các phân tử kháng nguyên dùng chế vắcxin Mục đích cần đạt được là:

- Chứng minh được miễn dịch bảo hộ bằng việc sử dụng các chất chiết hay các sản phẩm ký sinh trùng

- Xác định các phân tử bảo hộ tự nhiên

- Chọn các clone và thể hiện các protein gây miễn dịch

- Thử nghiệm vắcxin với các protein tái tổ hợp

Khái niệm "kháng nguyên ẩn", "kháng nguyên giấu hay "kháng nguyên mới" được sử dụng khi người ta dùng các kháng nguyên sống tách ra từ ký sinh trùng nhưng các kháng nguyên này bình thường không có trên vật chủ Đó là các kháng nguyên tách

ra từ màng ống tiêu hoá của ký sinh trùng dùng chế vắcxin chống ký sinh trùng đó

Theo các nhà khoa học, vắcxin chế từ "kháng nguyên giấu, "kháng nguyên ẩn" hay

"kháng nguyên mới" cho hiệu lực cao, khả năng bảo hộ tốt, có thể dùng cho gia súc non cũng cho hiệu quả tốt Đồng thời, một khi đã xác định được kháng nguyên bảo hộ cho một loài thì có thể làm thử giống như vậy trên một loài khác Như vậy, trong tương lai, vắcxin tái tổ hợp chống ký sinh trùng sẽ được chú ý nghiên cứu sử dụng, góp phần quan trọng trong việc khống chế bệnh ký sinh trùng ở vật nuôi

TÀI LIỆU THAM KHẢO PHẦN THỨ NHẤT (CHƯƠNG 1, 2, 3, 4, 5)

* Tiếng Việt

1 Vũ Triệu An, Jean Claude Homberg (1997), Miễn dịch học, Nhà xuất bản y học,

Hà Nội, Tr 219 - 224

2 Bertranđ Losson (2000), Hoá trị liệu và hoá dự phòng nhiễm giun tròn: các phân

tử và các dạng thuốc mới - vấn đề kháng thuốc chống ký sinh trùng (Do Bùi Trần Anh Đào dịch từ nguyên bản tiếng Pháp: "Chimiotherapie et Chimioprophylaxie des infestations vermineuses dues aux Nés matodes: nouvelles mo lécu les et formulations problématique des résistances aux anthelminthique") Trường Đại học Liege, B - 43, 4000, Liège, Bỉ, Tr 2 - 27

3 Drozdz J và Malczewski (1971), Nội ký sinh vật và bệnh ký sinh vật của gia súc

ở Việt Nam, Nhà xuất bản khoa học và kỹ thuật, Hà Nội, Tr 5 - 10

4 Nguyễn Thị Kỳ (1994), Sán dây (Cestoda) ký sinh ở động vật nuôi Việt Nam, Tập

1, Nhà xuất bản khoa học và kỹ thuật, Hà Nội, Tr 2 - 12

5 Phạm Sỹ Lăng, Tô Long Thành (2006), Bệnh đơn bào ký sinh ở vật nuôi, Nhà

xuất bản nông nghiệp, Hà Nội, Tr 34 - 53

6 Nguyễn Thị Lê (1998), Ký sinh trùng học đại cương, Nhà xuất bản Khoa học và

kỹ thuật, Hà Nội, Tr 8 - 74

7 Skrjabin K I và Petrov A M (1977), Nguyên lý môn giun tròn thú y (Bùi Lập,

Đoàn Thị Băng Tâm và Tạ Thị Vịnh dịch từ nguyên bản tiếng Nga) Tập 1, Nhà xuất bản khoa học và kỹ thuật, Hà Nội, Tr 19 - 38

8 Trịnh Văn Thịnh (1963), Ký sinh trùng thú y, Nhà xuất bản nông thôn, Hà Nội,

Tr 60 - 64

9 Trịnh Văn Thịnh, Phạm Xuân Dụ, Phạm Văn Khuê, Phan Địch Lân, Bùi Lập,

Dương Công Thuận (1978), Công trình nghiên cứu ký sinh trùng ở Việt Nam, Tập II, Nhà xuất bản khoa học và kỹ thuật Hà Nội, Tr 39 - 40, 65 - 70, 73 - 74

* Tiếng Anh

10 Urquhart G M, Armour J., Dun can J L., Dung A M., Jennings F W (1996),

Veterillary Parasitology, Blackwell Scienc, P 5 - 20

Phần thứ hai

KÝ SINH TRÙNG HỌC CHUYÊN KHOA

vì sự phổ biến và vai trò gây bệnh quan trọng của giun sán và động vật đơn bào ký sinh

1 PHƯƠNG PHÁP CHẨN ĐOÁN CÁC BỆNH GIUN, SÁN

Có hai cách chẩn đoán bệnh giun, sán: chẩn đoán trên con vật sống và chẩn đoán trên con vật đã chết

1.1 Phương pháp chẩn đoán trên con vật sống

Chẩn đoán bệnh giun sán trên con vật sống bao gồm các phương pháp: chẩn đoán lâm sàng, chẩn đoán trong phòng thí nghiệm và chẩn đoán miễn dịch

1.1.1 Chẩn đoán lâm sàng

Một số bệnh giun, sán có những biểu hiện lâm sàng rất đặc trưng và dễ nhận biết như: rối loạn hoạt động thần kinh (đi vòng quanh, co giật trong bệnh ấu sán ở não dê, cừu ); ỉa phân trắng trong bệnh giun đũa bê, nghé Tuy nhiên, đa số các bệnh giun sán thường không có những biểu hiện đặc trưng và khó phân biệt như: rối loạn tiêu

hoá, ăn uống kém, thể trạng gầy, da khô, lông xù Vì vậy, không thể chỉ dựa vào

triệu chứng lâm sàng để chẩn đoán chính xác mà cần phải có những phương pháp chẩn đoán phòng thí nghiệm

1.1.2 Chẩn đoán trong phòng thí nghiệm

Mục đích của phương pháp này là tìm g iun, sán trưởng thành, trứng hoặc ấu trùng giun, sán ở trong phân bằng các nghiên cứu định tính và định lượng

* Kỹ thuật lấy phân để xét nghiệm:

Trong đất hoặc trên nền chuồng có chứa số lượng lớn trứng và ấu trùng giun tròn sông tự do Khi gia súc, gia cầm thải phân, trứng và ấu trùng giun tròn sống tự do có thể dính vào phân, gây khó khăn cho việc xét nghiệm chẩn đoán Vì vậy, cần lấy phân trực tiếp qua hậu môn con vật Phân của mỗi con vật để riêng vào túi ngon sạch, mỗi mẫu khoảng 20 - 30 gam, có nhãn ghi số thứ tự mẫu, tuổi, tính biệt, khối lượng con vật, địa điểm thu thập mẫu Mẫu phân phải đưa về phòng thí nghiệm hoặc cơ sở nghiên cứu để xét nghiệm ngay (vì trứng nhiều loài giun tròn ở nhiệt độ 20 - 300C hoặc cao hơn, chỉ sau 16 - 18 giờ sẽ nở ra ấu trùng nên việc xét nghiệm chẩn đoán khó khăn

hơn Mặt khác, trong thời gian này, ấu trùng giun phổi Dictyocaulus cũng lột xác lần thứ

nhất và trở nên ít hoạt động hơn, nên sẽ gặp khó khăn khi phân ly ấu trùng bằng phương pháp Baerman)

Nếu mẫu phân chưa xét nghiệm được ngay thì cần bảo quản ở nhiệt độ dưới

100C, thời gian bảo quản không quá 3 ngày

1.1.2.1 Nghiên cứu định tính

Là phương pháp xác định có hoặc không có các loài giun sán ký sinh ở gia súc, gia cầm, tức là tìm giun sán trưởng thành hoặc đất sán dây, trứng hoặc ấu trùng giun sán trong phân

Đây là phương pháp thông dụng để đánh giá tình hình nhiễm giun sán ở các đàn gia súc, gia cầm

* Phương pháp tìm giun sán trưởng thành

Để tìm g iun sán trưởng thành hoặc các đốt sán dây được thải ra theo phân (đặc biệt

là khi tẩy giun sán thăm dò), có thể dùng que bới phân và quan sát bằng mắt thường hoặc quan sát kỹ hậu môn của từng con vật (có thể phát hiện cả đoạn sán dây lủng lẳng ở hậu môn dê, chó, gà) Thường thu gom toàn bộ phân của mỗi con vật vào chậu rồi hoà tan trong nước, để lắng, gạn nhiều lần cho đến khi cặn lắng trong thì gạn nước đi để tìm giun sán trong cặn

* Phương pháp tìm trứng giun sán

Có nhiều phương pháp tìm trứng giun sán, nhưng đạt hiệu quả cao và đơn giản, dễ làm là: phương pháp phù nổi Fullebom (1927), phương pháp Darling, phương pháp Cherbovick và phương pháp gạn rửa sa lắng Benedek (1943)

- Phương pháp Fullebom: là một trong các phương pháp phù nổi dễ là m và rẻ tiền Nguyên tắc của phương pháp này là lợi dụng dung dịch muối ăn (Nacl) bão hoà có tỷ trọng d = 1,18, lớn hơn tỷ trọng của trứng giun sán, làm cho trứng giun sán nổi lên bề mặt dung dịch Phương pháp Fullebom phát hiện khá tốt trứng giun tròn, trứng sán lá cơ quan

sinh sản gia cầm và Oocyst cầu trùng

Dung dịch nước muối bão hoà pha bằng cách: cho tinh thể muối ăn (Nacl) vào chậu hoặc nồi nước sôi, vừa cho vào vừa khuấy cho đến khi muối không hoà tan được nữa (thường dùng 380 - 400 gam muối tinh thể không ngậm nước, hoặc 450 gam muối tinh thể ngậm nước) Để nguội, được dung dịch muối bão hoà dùng để xét nghiệm trứng giun sán

- Phương pháp Darling: là phương pháp phù nổi có độ chính xác rất cao, tuy dụng cụ và thao tác có phức tạp hơn so với phương pháp Fullebom Trong phương pháp Darling, dung dịch nước muối bão hoà (Nacl) vẫn được sử dụng làm dung dịch xét nghiệm chẩn đoán, song cần có máy ly tâm để thực hiện phương pháp này Sau hai

lần ly tâm, trứng giun sán, Oocyst cầu trùng dễ dàng nổi lên bề mặt dung dịch nước

muối bão hoà Đồng thời, tiêu bản làm từ phương pháp Darling được loại bỏ cặn tốt hơn

nên "sạch" hơn, dễ phát hiện trứng giun sán hơn, đặc biệt là dễ phát hiện Oocyst cầu trùng

hơn so với tiêu bản làm từ phương pháp Fullebom

- Phương pháp Cherbovic k: là phương pháp có độ chính xác cao trong xét nghiệm trứng giun sán Cách tiến hành phương pháp Cherbovick cũng gồm hai lần ly tâm như phương pháp Darling, song tuỳ mục đích chẩn đoán mà có thể dùng dung dịch bão hoà khác nhau (dung dịch ma giê sunfat bão hoà, dung dịch nam hyposunfit bão hoà) Phương pháp gạn rửa sa lắng (còn gọi là phương pháp lắng cặn trứng giun sán): nguyên tắc của phương pháp này là dùng nước lã sạch tách trứng giun sán ra khỏi phân Trứng giun sán có tỷ trọng lớn hơn tỷ trọng của nước lã sẽ chìm xuống, có thể thu nhận để quan sát chẩn đoán dưới kính hiển vi

Phương pháp gạn rửa sa lắng có thể phát hiện khá tốt trứng sán lá gan, trứng sán lá dạ

cỏ, trứng sán lá ruột lợn, đốt sán dây Nếu để lắng cặn 30 - 60 phút có thể phát hiện trứng giun đũa và một số trứng giun tròn có kích thước lớn khác

Chú ý, khi xét nghiệm phân cần phân biệt trứng giun sán với cặn thức ăn, bào tử nang của nấm, trứng của các loài tiết túc có thể có trong phân, cũng như phải phân biệt đặc điểm h ình thái của từng loại trứng (hình 36, 37, 38, 39, 40) Trứng giun sán thường có 2 hoặc 4 lớp vỏ, nhẵn hoặc lồi lõm, trong trứng có phôi bào hoặc ấu trùng

Hình 36 Những vật không phải trứng giun sán

1 Tế bào thực vật; 2 Lông thực vật

3 Xơ thực vật; 4 Tế bào xoắn thực vật

5 Bào tử nấm; 6 Hạt phấn hoa

7 Giọt mỡ

Hình 40 Trứng giun sán ký sinh ở gia cầm

* Phương pháp tìm ấu trùng giun sán

Một số loài giun tròn (ví dụ, các loài thuộc giống giun tròn Dictyocaulus), sản

phẩm thải ra theo phân ký chủ không phải là trứng mà là ấu trùng Hoặc, các giun tròn

thuộc họ Trychostrongylidae đẻ trứng có hình thái và kích thước tương đối giống

nhau, nếu chỉ căn cứ vào trứng thì việc chẩn đoán phân biệt giống hoặc loài rất khó khăn Trứng của những giun tròn này lại có đặc điểm là nở thành ấu trùng khi tồn tại

và phát tán ở ngoại cảnh Lợi dụng đặc điểm này mà ta có thể nuôi để trứng nở thành

ấu trùng, rồi căn cứ vào hình thái của ấu trùng cảm nhiễm để chẩn đoán bệnh

Có những phương pháp phân ly ấu trùng sau:

- Phương pháp Baerman Phương pháp Baerman chủ yếu dựa trên nguyên tắc là, ấu trùng di chuyển ra khỏi

phân vào trong nước và lắng xuống đáy

Dùng phễu có đường kính 5 - 10 cm, cuối phễu lắp một ống cao su dài 10 - 15 cm, cuối ống cao su lắp ống nghiệm Đặt lưới thép hoặc vải màn lên miệng phễu, cho đầy nước ấm 37 - 380C, trên lưới thép đặt 10 - 15 gam phân (nếu là phân viên của dê, cừu thì 8

- 12 viên) Để yên 30 phút - 1 giờ, rồi lấy cặn ở ống nghiệm quan sát dưới kính hiển vi

để tìm ấu trùng

Cần chú ý rằng, ở nhiệt độ 20 - 300

C, Sau 18 - 24 giờ, trứng một số giun tròn

thuộc bộ Strongylata (như Oesophagostomum) sẽ nở ra ấu trùng, khó phân biệt với ấu trùng Dictyocaulus Vì vậy, tốt nhất là xét nghiệm ngay, không để phân qua đêm

Hiện nay, ở Việt Nam có thể thay thế phương pháp Baemlan bằng phương pháp của Essen và Donalson có cải tiến - phương pháp Thanh - Châu, dựa theo nguyên tắc của phương pháp Baerman, nhưng phương pháp này đơn giản, nhanh hơn và có hiệu

quả cao (Nguyễn Vũ Thanh và Nguyễn Ngọc Châu, 1993)

- Phương pháp Vaida Phương pháp Vaida đơn giản hơn so với phương pháp Baemlan, thường dùng để tìm ấu trùng trong phân gia súc có dạng viên như phân dê, cừu Đặt 4 - 5 viên phân vào đĩa petri và cho vào một ít nước ấm Sau 15 - 30 phút vớt các viên phân bỏ đi, còn nước ở hộp lồng đem quan sát dưới kính lúp hoặc kính hiển vi tìm ấu trùng Phương pháp này áp dụng dễ hơn đối với dê, cừu nhưng hiệu quả thấp hơn phương pháp Baerman

Trong đường tiêu hoá của g ia súc nhai lại có nh iều loài g iun tròn thuộc bộ

Strongylida ký sinh, trứng của chúng có hình thái gần giống nhau, khi nở thành ấu

trùng cũng khó phân biệt loài này với loài khác Tuy nhiên, các dạng ấu trùng cảm

nhiễm thuộc bộ Strongylida khác nhau bởi số lượng và hình dạng tế bào ruột, kích

thước của ấu trùng và phần mút đuôi của chúng

Ví dụ, có thể phân biệt một số ấu trùng cảm nhiễm thuộc bộ Strongylida như sau

(hình 42)

Ấu trùng giun tròn Dictyocaulus: mút đuôi hình nón, ruột chứa đầy các hạt màu

sáng

Ấu trùng giun tròn Haemonchus: mút đuôi không có gai, thực quản dài khoảng 1/5

chiều dài cơ thể

Ấu trùng giun tròn Trichostrongylus: mút đuôi có gai, thực quản dài khoảng 1/4

chiều dài cơ thể

Ấu trùng giun tròn Oesophagostomum: có 20 - 32 tế bào ruột, mút đuôi vuốt dài

Ấu trùng giun tròn Bunostomum: ruột là một ống dài không phân chia thành

những tế bào riêng biệt

Hình 42 Các dạng ấu trùng cảm nhiễm của bộ Strongylida

1 - Haemonchus contortus; 2 - Cooperia; 3 - Trichostrongylus; 4 - Ostertagia; 5 - Chabertia;

6 - Oesophagostomum columbianum; 7 - O venulosum;

8 - Bunostomum; 9 - Nematodirus (theo Poliakov, 1953)

1.1 2.2 Nghiên cứu định lượng

Để đếm số lượng trứng và ấu trùng giun sán trong phân, có thể dùng các phương pháp sau:

* Phương pháp đếm trứng Stoll Cho 5 gam phân vào trong một ống có vạch đo, cho dung dịch NaOH 0,1N tới vạch

75 ml Khuấy đều bằng đũa thuỷ tinh cho tan phân rồi dừng lại đột ngột, dùng pipet lấy

ra 0,05 ml nước phân loãng cho lên phiến kính, đậy lá kính và quan sát dưới kính hiển vi

Số trứng đếm được nhân với 32 sẽ cho biết số trứng trong 1 gam phân Tốt nhất nên làm vài lần để lấy số trung bình

Có thể dùng phương pháp phù nổi và gạn rửa sa lắng để đánh giá hiệu quả của thuốc sau khi tẩy giun sán mà không nhất thiết phải dùng phương pháp Stoll Trong trường hợp này phải lấy số lượng phân như nhau, các dụng cụ phải cùng kích thước, dung dịch dùng xét nghiệm phải như nhau So sánh số trứng trong một giọt váng bề mặt hoặc trong thị trường kính hiển vi (Nguyễn Thị Lê và cs, 1996)

* Phương pháp đếm trứng Mc Master (hình 43)

Phương pháp này dùng để xác định số lượng trứng giun tròn, trứng sán dây và

Oocyst cầu trùng trong 1 gam phân bằng buồng đếm Mc Master Cân 4 gam phân vào

cốc thuỷ tinh, thêm 56 ml dung dịch nước muối bão hoà, khuấy đều cho tan phân Lọc qua lưới thép vào một cốc khác và khuấy đều Trong khi đang khuấy, lấy công tơ hút hút dung dịch phân nhỏ đầy cả hai buồng đếm Mc Master (mỗi buồng đếm có dung

tích 0,5 ml) Để yên 5 phút rồi kiểm tra dưới kính hiển vi (độ phóng đại 10 x l0)