Nghiên cứu đặc điểm thực vật và thành phần hóa học theo định hướng tác dụng chống oxy hóa của cây phong quỳ sa pa anemone chapaensis gagnep , họ hoàng liên (ranunculaceae)

MC LC DANH MC CC Kí HIU, CH VIT TT DANH MC CC BNG, BIU DANH MC CC HèNH V, TH T VN CHNG I TNG QUAN .3 1.1.TNG QUAN V DC LIU NGHIấN CU 1.1.1.Tng quan v chi Anemone 1.1.1.1 Thc vt hc 1.1.1.2 Thnh phn húa hc 1.1.1.3 Tỏc dng sinh hc 1.1.2.Tng quan v cõy Phong qu Sa Pa (Anemone chapaensis Gagnep.) 1.1.2.1 c im thc vt v phõn b 1.1.2.2 Thnh phn húa hc v tỏc dng sinh hc 1.1.2.3 Cụng dng 1.2 TNG QUAN V VIấM, GC T DO, CHT CHNG OXI HểA. 1.2.1 Viờm 1.2.1.1 Khỏi nim 1.2.1.2 Nguyờn nhõn 1.2.2 Gc t do, cht chng oxi húa 10 1.2.2.1 Ngun gc ca gc t 10 1.2.2.2 Stress oxi húa, tỏc hi ca stress oxi húa 10 1.2.2.3 Cht chng oxi húa 11 CHNG II I TNG, VT LIU, PHNG PHP NGHIấN CU 12 2.1 I TNG NGHIấN CU 12 2.2 NGUYấN VT LIU NGHIấN CU 12 2.2.1 Húa cht v dung mụi 12 2.2.2 Thit b, mỏy múc, dng c 13 2.3 PHNG PHP NGHIấN CU 14 2.3.1 Nghiờn cu thc vt hc 14 2.3.1.1 Nghiờn cu v hỡnh thỏi 14 2.3.1.2 Nghiờn cu v c im vi hc 14 2.3.2 Nghiờn cu chit xut v sng lc tỏc dng ca cỏc phõn on dch chit lỏ Phong qu Sa Pa 14 2.3.2.1 Chit xut cn ton phn v phõn on 14 2.3.2.2 Sng lc tỏc dng dn gc t DPPH (1,1- Diphenyl-2picrylhydrazyl)cỏc phõn on dch chit 15 2.3.2.3 Sng lc tỏc dng c ch enzym xanthin oxidase invitro cỏc phõn on dch chit 16 2.3.3 Nghiờn cu v thnh phn húa hc lỏ Phong qu Sa Pa 18 2.3.3.1 Phõn lp cỏc hp cht 18 2.3.3.2 Xỏc nh cu trỳc cỏc hp cht phõn lp 19 2.4 X Lí S LIU 19 CHNG KT QU NGHIấN CU 20 3.1 KT QU NGHIấN CU THC VT 20 3.1.1 c im hỡnh thỏi v nh tờn khoa hc loi nghiờn cu 20 3.1.2 c im vi phu ca loi Anemone chapaensis Gagnep 22 3.1.3 c im bt ca loi Anemone chapaensis Gagnep 25 3.2 KT QU CHIT XUT V SNG LC TC DNG CC PHN ON DCH CHIT L PHONG QU SA PA 28 3.2.1.Chit xut lỏ Phong qu Sa Pa 28 3.2.2 Kt qu sng lc tỏc dng dn gc t DPPH cỏc phõn on dch chit 31 3.2.3 Kt qu sng lc tỏc dng c ch enzym xanthin oxidase in vitro cỏc phõn on dch chit 32 3.3 KT QU PHN LP V XC NH CU TRC MT S HP CHT T L PHONG QU SA PA 32 3.3.1.nh tớnh cn ethyl acetat bng sc kớ lp mng 32 3.3.2.Phõn lp mt s hp cht lỏ Phong qu Sa Pa 34 3.3.2.1.Phõn lp 34 3.3.2.2.Kim tra tinh khit cht phõn lp 37 3.3.3.Nhn dng cỏc cht phõn lp 39 3.3.3.1.Hp cht PQLE1 39 3.3.3.2 Hp cht PQLE2 42 3.3.3.3 Hp cht PQLE4 45 3.3.3.4 Hp cht PQLE6 46 CHNG BN LUN 49 4.1 V C IM THC VT 49 4.1.1 c im hỡnh thỏi v giỏm nh tờn khoa hc ca loi nghiờn cu 49 4.1.1 c im vi hc ca loi nghiờn cu 51 4.2 V CHIT XUT V SNG LC TC DNG CC PHN ON DCH CHIT L PHONG QU SA PA 51 4.2.1 V chit xut 51 4.2.2 V tỏc dng dn gc t DPPH 52 4.2.3 V tỏc dng c ch XO in vitro 52 4.3 V PHN LP V XC NH CU TRC CC HP CHT 53 KT LUN 57 KIN NGH 59 TI LIU THAM KHO PH LC DANH MC Kí HIU, CH VIT TT BuOH n-Butanol 13 Carbon (13) Nuclear Magnetic Resonance C-NMR DEPT Distortionless Enhancement by Polarization Transfer DMSO Dimethyl sulfoxid DPPH 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl ESI-MS Eletrospray Ionization Mass Spectroscopy EtOAc Ethyl acetat GF254 Gypsum fluorescent 254nm Proton Nuclear Magnetic Resonance H-NMR HSQC Hetoronuclear Single Quantum Coherence IC50 Half (50%) maximal Inhibitory Concentration MeOH Methanol MS Mass Spectroscopy PQL Cn ton phn lỏ Phong qu PQLB Cn phõn on n-butanol lỏ Phong qu PQLE Cn phõn on ethyl acetat lỏ Phong qu PQLH Cn phõn on n-hexan lỏ Phong qu PQLW Cn nc lỏ Phong qu Rf Retardation Factor RP18 Reversed Phase 18 SKLM Sc ký lp mng TT Thuc th UV-VIS Ultra Violet - Visible UV254nm Ultra Violet 254nm UV365nm Ultra Violet 365nm XO Xanthin oxidase DANH MC CC BNG STT Tờn bng Trang Bng 3.1 Khi lng cỏc cn phõn on t dch chit ethanol lỏ Phong qu Sa Pa 31 Bng 3.2 Kh nng dn gc t DPPH ca cỏc phõn on dch chit lỏ Phong qu Sa Pa 31 Bng 3.3 Kt qu ỏnh giỏ tỏc dng c ch XO in vitro ca cỏc phõn on dch chit lỏ Phong qu Sa Pa 32 Bng 3.4 Kt qu SKLM ca cht vi h dung mụi 39 Bng 3.5 S liu ph 1H v 13C-NMR ca hp cht PQLE1 40 Bng 3.6 S liu ph 1H v 13C-NMR ca hp cht PQLE2 43 Bng 3.7 S liu ph 1H v 13C-NMR ca hp cht PQLE4 46 Bng 3.8 S liu ph 1H v 13C-NMR ca hp cht PQLE6 47 DANH MC CC HèNH V STT Tờn hỡnh Trang Hỡnh 1.1 Mt s Flavonoid phõn lp t chi Anemone Hỡnh 1.2 Mt s saponin phõn lp t r cõy Anemone rivularis Hỡnh 1.3 Mt s Saponin phõn lp t r cõy Anemone tomentosa Hỡnh 1.4 Phong qu Sa Pa Anemone chapaensis Gagnep Hỡnh 2.1 S chit phõn on v sng lc tỏc dng 15 Hỡnh 3.1 Hỡnh nh cõy Phong qu Sa Pa 21 Hỡnh 3.2 Mt s b phn ca cõy Phong qu Sa Pa 21 Hỡnh 3.3 Vi phu gõn lỏ Phong qu Sa Pa 22 Hỡnh 3.4 Vi phu phin lỏ Phong qu Sa Pa 23 10 Hỡnh 3.5 Vi phu cung lỏ Phong qu Sa Pa 23 11 Hỡnh 3.6 Vi phu thõn cõy Phong qu Sa Pa 24 12 Hỡnh 3.7 Vi phu r cõy Phong qu Sa Pa 25 13 Hỡnh 3.8 Mt s c im bt thõn, lỏ Phong qu Sa Pa 26 14 Hỡnh 3.9 Mt s c im bt hoa, qu Phong qu Sa Pa 27 15 Hỡnh 3.10 Mt s c im bt r Phong qu Sa Pa 28 16 Hỡnh 3.11 S chit xut cỏc phõn on t lỏ Phong qu Sa Pa 30 17 Hỡnh 3.12 Sc ký cn ethyl acetat (h I) cỏc iu kin quan sỏt 33 18 Hỡnh 3.13 S phõn lp cỏc hp cht t phõn on ethyl acetat 36 19 Hỡnh 3.14 Sc ký ca PQLE1, PQLE2, cn EtOAc, PQLE6, PQLE4 h I 37 20 Hỡnh 3.15 Sc ký ca PQLE1, PQLE2, cn EtOAc, PQLE6, PQLE4 h II 38 21 Hỡnh 3.16 Sc ký ca PQLE1, PQLE2, cn EtOAc, PQLE6, PQLE4 h III 38 22 Hỡnh 3.17 Sn phm PQLE1 phõn lp c 39 23 Hỡnh 3.18 Cụng thc cu to ca hp cht PQLE1 42 24 Hỡnh 3.19 Sn phm PQLE2 phõn lp c 42 25 Hỡnh 3.20 Cụng thc cu to ca hp cht PQLE2 45 26 Hỡnh 3.21 Sn phm PQLE4 phõn lp c 45 27 Hỡnh 3.22 Cụng thc cu to ca hp cht PQLE4 46 28 Hỡnh 3.23 Sn phm PQLE6 phõn lp c 47 29 Hỡnh 3.24 Cụng thc cu to ca hp cht PQLE6 48 T VN Vit Nam l nc cú khớ hu nhit i, quanh nm núng m nờn cú h thc vt vụ cựng phong phỳ v a dng, vi hng nghỡn loi cõy c s dng lm thuc theo kinh nghim ca dõn gian õy l ngun ti nguyờn thiờn nhiờn quý giỏ, cung cp nguyờn liu cho nn y hc dõn gian, ngoi cũn cung cp thc phm, gia v, hng liu, m phm Ngy nay, nhng hp cht t nhiờn cú hot tớnh sinh hc c phõn lp t cõy c ó c ng dng rt nhiu ngnh cụng nghip cng nh nụng nghip, chỳng c dựng sn xut thc phm chc nng, thuc cha bnh, thuc bo v thc vt, lm nguyờn liu cho ngnh cụng nghip thc phm Vỡ vy, ngun cõy thuc dõn gian cng nh s dng phong phỳ ca ng bo cỏc dõn tc l kho tng quý giỏ khỏm phỏ, tỡm kim nhiu loi thuc mi cú hiu lc phũng v cha bnh Xu hng i sõu nghiờn cu v tỡm kim cỏc hot cht t nhiờn cú hot tớnh sinh hc t cỏc loi thc vt lm dc phm cha bnh ang ngy cng thu hỳt c s quan tõm ca cỏc nh khoa hc bi u im ca chỳng l sn cú, r tin, c tớnh thp, d hp thu v chuyn húa c th Phong qu Sa Pa (Anemone chapaensis Gagnep.) l mt loi mc hoang Sa Pa, c nh thc vt Phỏp Gagnepain mụ t ln u tiờn nm 1929 [81] Trong dõn gian, chi Phong qu c ngi dõn dựng r iu tr viờm hng, viờm tỳi mt, au d dy, au rng, phong thp au nhc Tuy nhiờn, nhng nghiờn cu v Phong qu Sa Pa c Vit Nam v th gii cũn rt ớt, mi ch cú nghiờn cu mụ t s lc v hỡnh thỏi thc vt [78], cha cú ti liu no nghiờn cu chi tit v c im thc vt, thnh phn húa hc v tỏc dng sinh hc ca cõy Nhm mc ớch tỡm hiu v c im thc vt v thnh phn húa hc ca cõy Phong qu Sa Pa, mt cõy c hu ca a phng, cú thờm tri thc v nõng cao giỏ tr s dng cõy thuc, chỳng tụi xut thc hin ti: Nghiờn cu c im thc vt v thnh phn húa hc theo nh hng tỏc dng chng oxy húa ca cõy Phong qu Sa Pa Anemone chapaensis Gagnep., H Hong liờn (Ranunculaceae) vi cỏc mc tiờu: 1 Mụ t c im hỡnh thỏi, giỏm nh tờn khoa hc v mụ t c im vi hc ca mu nghiờn cu Chit xut v sng lc tỏc dng dn gc t DPPH v c ch xanthin oxidase in vitro ca cỏc phõn on dch chit lỏ Phong qu Sa Pa Phõn lp v xỏc nh cu trỳc húa hc ca 1-2 cht lỏ Phong qu Sa Pa CHNG I TNG QUAN 1.1 TNG QUAN V DC LIU NGHIấN CU 1.1.1 Tng quan v chi Anemone 1.1.1.1 Thc vt hc - V trớ phõn loi Chi Anemone thuc h Hong Liờn (Ranunculaceae), b Hong Liờn (Ranunculales), lp Ngc Lan (Magnoliopsida), ngnh Ngc Lan (Magnoliophyta) [2], [4] - c im thc vt Cõy tho, sng nhiu nm, gc thnh c, cú thõn r hoc mc thnh bi Lỏ mc so le, b chia ct sõu nhiu hay ớt Hoa u, n c hay thng thnh tỏn cú mt bao chung gm lỏ chột i dng cỏnh, cú mu trng, vng, hoc lam, 5-10 phin; trng khụng cú; nh nhiu, lỏ noón cú vũi nhy Qu b, n ht, ri, hp thnh u [4] - Phõn b Chi Anemone phõn b ch yu vựng cú khớ hu ụn i, mỏt m nh bc n , Nepal, Trung Quc, Hn Quc, Nht Bn, Bc M [25], [68] Theo cỏc cụng b trờn th gii, hin chi Anemone cú khong 120-150 loi [5], [59], [81], ú cú khong 50 loi c tỡm thy t Trung Quc [68] Vit Nam, Anemone c gi l chi Phong qu, mc khỏ ph bin vựng nỳi phớa Bc nh: Yờn Bỏi, Lai Chõu, H Giang v vựng nỳi cao trung [1], [2], [4] Theo cỏc ti liu thỡ Vit Nam cú 05 loi l A japonica, A rivularis, A chapaensis, A polilanei, A sumatrana, ú cú 02 loi c bit nhiu l A japonica v A rivularis [1], [2], [4], [8] 1.1.1.2 Thnh phn húa hc Mt s nghiờn cu ó cho bit thnh phn húa hc chớnh cỏc loi thuc chi Anemone l saponin v flavonoid, r v lỏ ca cỏc loi nh A tomentosa, A taipaiensis, A rivullaris, A anhuiensis, A flaccida, A raddeana, A hupehensis, A coronaria [15], [19], [21], [27], [28], [45], [67], [72], [74], [75], [77] Ngoi cỏc loi Anemone cũn cha diterpenoid glycosid, coumarin, mt s acid bộo phõn cc tng dn: n-hexan (HX), ethyl acetat (EtOAc) v n-butanol (BuOH) thu c cỏc cn phõn on vi lng Hx (1,31%), EtOAc (4,22%), BuOH (2,61%) so vi nguyờn liu khụ ban u 4.2.2 V tỏc dng quột gc t DPPH ca cỏc cn phõn on t lỏ Phong qu Sa Pa DPPH l mt gc t tng hp, khụng cú c th sng Vic ỏnh giỏ tỏc dng dn gc t DPPH thc hin n gin, nhanh, cho kt qu n nh, r tin Vỡ vy, DPPH thng c dựng sng lc tỏc dng dn gc t ca cỏc mu, t ú nh hng cho cỏc nghiờn cu sõu hn Trong cụng trỡnh ny nhúm nghiờn cu s dng tỏc dng dn gc t DPPH ỏnh giỏ tỏc dng ca cỏc phõn on dch chit t lỏ Phong qu Kt qu cho thy c dch chit ton phn v cỏc phõn on u cú tỏc dng dn gc t do, ú phõn on ethyl acetat cú tỏc dng mnh nht vi giỏ tr IC50 = 16,81 àg/ml Kt qu ny chng minh lỏ Phong qu cú cha cỏc cht dn gc t do, ú cú tỏc dng chng oxy húa Vỡ vy, nghiờn cu thnh phn húa hc ca lỏ Phong qu l cn thit xỏc nh hot cht ca nú 4.2.3 V tỏc dng c ch XO in vitro Vi phng phỏp ỏnh giỏ tỏc dng c ch XO in vitro dch chit ton phn EtOH v cỏc phõn on chit xut t lỏ Phong qu Sa Pa, nhn thy rng phõn on ethyl acetat th hin tỏc dng c ch XO l tt nht (IC50 = 93,8 àg/ml), dch chit ton phn EtOH v cỏc phõn on khỏc khụng th hin tỏc dng c ch XO nng 300 àg/ml Do vy vic ỏnh giỏ kh nng chng viờm ca dch chit ethanol lỏ Phong qu Sa Pa l cn thit cú th kt lun chớnh xỏc hn v tỏc dng iu tr ca lỏ Phong qu i vi mi th nghim in vitro, bờn cnh vic xỏc nh cỏc iu kin th nghim phự hp, vic la chn cht i chng dng l yờu cu bt buc iu ny giỳp nh lng tng i hot tớnh ca cỏc mu nghiờn cu so sỏnh vi cựng mt cht chun Vi nghiờn cu sng lc tỏc dng c ch XO in vitro, cht thng c s dng lm mu i chng dng l allopurinol Allopurinol l cht c c s dng trờn lõm sng iu tr bnh gout lm gim acid uric huyt, v ó 52 c chng minh s hu hot tớnh c ch XO mnh in vitro, ng thi sn cú v giỏ thnh r Vỡ vy, vic la chn allopurinol lm cht i chng dng ca nghiờn cu ny l phự hp vi iu kin thc tin Mc dự kt qu nghiờn cu ca lun cho thy dch chit ton phn EtOH lỏ Phong qu Sa Pa khụng cú hot tớnh c ch XO mnh v tim nng, nhiờn, õy l nghiờn cu u tiờn tin hnh ỏnh giỏ hot tớnh c ch XO in vitro ca loi nghiờn cu Vỡ vy, kt qu ca lun ó gúp phn b sung nhng thụng tin cho c s d liu hng nghiờn cu tỏc dng sinh hc ca lỏ Phong qu Sa Pa núi chung v nhng hp cht phõn lp c núi riờng Trong quỏ trỡnh thc hin lun vn, iu kin khú khn v s lng cỏ th loi A chapaensis Gagnep cú ớt, thõn r li rt nh nờn chỳng tụi khụng thu c mu cho vic nghiờn cu, ỏnh giỏ tỏc dng v nghiờn cu v thnh phn húa hc ca r 4.3 V PHN LP V XC NH CU TRC CC HP CHT Hin nay, lnh vc nghiờn cu húa thc vt, phng phỏp nghiờn cu phõn lp hp cht t nhiờn theo nh hng tỏc dng sinh hc c s dng khỏ ph bin Phng phỏp ny cú u im l em li xỏc sut thnh cụng cao hn ng thi tit kim c chi phớ v thi gian nghiờn cu Tuy nhiờn, nhc im ca phng phỏp l cú th b sút nhng hp cht cú hot tớnh ỏng quan tõm nhng phõn on khụng c nghiờn cu p dng phng phỏp ny, da trờn kt qu sng lc tỏc dng quột gc t DPPH v c ch xanthin oxidase in vitro ca cỏc mu cn cỏc phõn on khỏc t dch chit lỏ Phong qu Sa Pa, ó nh hng quỏ trỡnh nghiờn cu v húa hc ca lun ỏn vo phõn on ethyl acetat ti s dng cỏc phng phỏp sc ký l sc ký ct pha thng, sc ký ct pha o õy l cỏc phng phỏp c s dng ph bin phõn lp cỏc cht Vit Nam, s dng thit b r tin, cht hp ph sn cú, d kim, tin hnh n gin hn so vi cỏc phng phỏp phõn lp khỏc Bc u ti ó phõn lp c hp cht t phõn on ethyl acetat Cu trỳc ca cỏc hp cht c xỏc nh l (1) trans-tiliroside, (2) arctiin, (3) arctigenin v (4) 5-hydroxymethylfurfural da trờn tớnh cht lý húa (cm quan, nhit núng 53 chy) v cỏc d liu ph (ESI-MS), ph hng ngoi (IR), ph cng hng t ht nhõn NMR (1H-NMR, 13 C-NMR, DEPT) Theo cỏc ti liu tham kho tra cu c cha thy cú cụng trỡnh nghiờn cu no phõn lp c bn hp cht ny t lỏ Phong qu Sa Pa v ca chi Anemone núi chung Vỡ vy, õy l úng gúp mi ca ti, em li tri thc mi v thnh phn húa hc ca lỏ Phong qu Sa Pa v chi Anemone TRANS - TILIROSIDE Trans-Tiliroside, hay kaempferol-3-O--D-(6-O-trans-p-coumaroyl)- glucopyranosid, l mt este flavonol tỡm thy mt s tho dc, thuc v mt s thc phm ( nng tng i thp) nh dõu tõy, mõm xụi Trung Quc, Tm Xuõn [79] Ngy cng cú nhiu bng chng in vitro v in vivo c nghiờn cu trờn ng vt cho thy rng trans-tiliroside cú nhng tỏc dng cú li n sc khe ngi, nh tỏc dng chng viờm [57], bo v gan [41] v chng ỏi thỏo ng [50] Ngoi ra, s dng tiliroside liu thp (0,1-10 mg/kg th trng/ngy) cú tỏc dng c ch s tng trng lng c th (c bit l lng cht bộo ni tng); lm gim triglyceride gan v cỏc axit bộo m khụng nh hng n lng thc n [50] Cỏc tỏc gi cũn cho rng s chuyn húa lipid c thỳc y bi ung trans-tiliroside [50] ARCTIIN V ARCTIGENIN Arctigenin l mt dibenzylbutyrolactone loi lignan (DBL) hỡnh thnh bng cỏch ngng t cỏc cp cu trỳc phenylpropane, c tỡm thy cõy di dng aglycone t hoc liờn kt vi mt phõn t glucose, to thnh glycosid arctiin [64] Arctigenin v arctiin tn ti mt s loi thc vt nh trỏi ca cõy Arctium lappa [11], [39], chi Centaurea [46], [56], Forsythiae intermedia [40], Saussurea medusa [44], Carthamus tinctoius [11], Serratula tinctoria [10] Cú th thu arctigenin t cỏc cõy cha artiin bng cỏch thy phõn bi enzyme glycosidase hoc acid vi hiu qu ca phng phỏp c cho l nh [10] Xột v tm quan trng ca cp lignan aglycon-glycosid ny, arctigenin cho thy cú tỏc dng c ch tt hn i vi s phỏt trin u t bo so vi arctiin [35] 54 Arctiin c s dng trờn lõm sng gii cm nht, lm gim au c hng, loi b cỏc cht c hi v iu tr sng [12] Arctiin ó c chng minh l cú hiu qu c ch 12-Otetradecanoylphorbol-13-acetate (TPA) gõy phự tai chut [58], cú tỏc dng chng viờm bng cỏch c ch cỏc cht trung gian gõy viờm thụng qua s bt hot ca NF-kB [36] v lm gim s lng cỏc t bo ung th tuyn tin lit ca ngi [26] Bờn cnh ú, arctiin ó c chng minh l cú kh nng gõy c t bo, chng tng sinh [47], [55], kớch hot yu t i khỏng tiu cu (PAF) [30], i khỏng canxi [29], chng ung th [39] v khỏng virus cỳm A trờn chut suy gim dch [34] Arctigenin c s dng trờn lõm sng Trung Quc nh mt thuc tr liu iu tr tỡnh trng viờm nh cm lnh, au hng, ho, si, giang mai [12] ó cú nhiu nghiờn cu chng minh Arctigenin cú kh nng chng viờm v chng u Kh nng chng viờm ca arctigenin c chng minh cú liờn quan cht ch n s c ch cỏc cytokine tin viờm Arctigenin lm gim LPS - cht gõy tỡnh trng viờm cp tớnh phi, thõm nhim t bo viờm v sn xut cỏc cytokine gõy viờm [70], chng viờm thụng qua ng c ch NOS [22] hay c ch phosphoryl-STAT1 v phosphoryl-STAT3 bi bt hot ca JAK2 v LPS gõy gim sn xut ROS thụng qua cỏc hot ng chng oxy húa ca nú [71] Cỏc nghiờn cu v tỏc ng ca arctigenin trờn t bo u cho thy arctigenin gõy nh hng n quỏ trỡnh gõy c cỏc dũng t bo khỏc nhau, nh tỏc ng ung th phi ngi [61], gõy c v chng tng sinh trờn cỏc t bo bch cu dũng ty TF-1 chut MH60 u ty [42] Ngoi ra, arctigenin cng ó c chng minh cú hot tớnh bo v thn kinh [31], khỏng virus cỳm A trờn chut suy gim dch [34] hay c ch s nhõn lờn ca vi rỳt gõy suy gim dch ngi [20], [60] 5- HYDROXYMETHYL-2-FURFURAL (5-HMF) 5-hydroxymethyl-2-furfural (5-HMF) l mt cht t nhiờn c xỏc nh cú mt ong, nc ộp tỏo, nc cam, bia, ru, sa, ng cc n, nng, sn phm t c chua v l mt sn phm trung gian ph bin cỏc phn ng Maillard (mt chui cỏc phn ng húa nõu khụng enzym c dựng x lý nhit cỏc loi thc phm cú cha ng kh v axit amin) [63] 5-HMF cũn c 55 xỏc nh khúi thuc lỏ, caramel - mt cht to mu s dng rng rói thc phm, dc phm hay sa c x lý nhit cao hn 120 oC cú s hin din ca ng kh l lactose [63] Trong thc vt, 5-HMF c phõn lp t Laurencia undulata [37], chi Cornus v chi Schisandra [18], [73] Nhiu bỏo cỏo liờn quan n 5- HMF ó cung cp bng chng quan trng cho tim nng ng dng thc t cỏc lnh vc thc phm, m phm, v dc phm Trong dc phm, HMF chng minh cú hot tớnh chng ung th, ng dng cỏc thuc thn kinh, bo v c tim, iu tr cỏc bnh tn thng tim mch c võn v ni tng bng cỏch kt hp vi protein, v gim s tớch t cỏc cht c c th [23] Ngoi 5-HMF cũn c chng minh cú th phỏt trin nh mt cht chng oxy húa t nhiờn vi cỏc hot ng chng oxy húa nh quột gc t do, chng oxy húa protein mng t bo, chng oxy húa enzyme myeloperoxidase (MPO), enzyme glutathione (GSH) v superoxide dismutase (SOD) [Invitro antioxidant] 5-HMF c coi l mt cht kớch thớch v cú th gõy kớch thớch mt, ng hụ hp trờn, da v mng nhy Con ngi tip xỳc vi HMF thụng qua hớt phi, nut phi hoc hp th qua da Nh vy, vi bn hp cht phõn lp c ó gúp phn vic nh hng nghiờn cu thờm v thnh phn húa hc cng nh tỏc dng sinh hc ca lỏ Phong Qu Sa Pa 56 KT LUN Qua quỏ trỡnh tin hnh lm thc nghim, lun ó thu c mt s kt qu sau õy: V nghiờn cu thc vt - ó mụ t chi tit c im hỡnh thỏi, c quan dinh dng v c quan sinh sn ca loi nghiờn cu ; giỏm nh c tờn khoa hc ca loi ny l Anemone chapaensis Gagnep., h Hong liờn (Ranunculaceae) - ó mụ t c im vi phu lỏ, thõn, r v c im bt cỏc b phn ca loi nghiờn cu, gúp phn tiờu chun húa loi ny V nghiờn cu chit xut v sng lc tỏc dng - ó chit xut lỏ Phong qu Sa Pa bng phng phỏp ngõm vi dung mụi EtOH, sau ú chit lng - lng vi cỏc dung mụi cú phõn cc tng dn: n-hexan (HX), ethyl acetat (EtOAc) v n-butanol (BuOH) thu c cỏc cn phõn on vi lng cn EtOAc l nhiu nht (4,22% so vi nguyờn liu khụ ban u) - Kt qu sng lc tỏc dng dn gc t DPPH v tỏc dng c ch XO cho thy phõn on EtOAc th hin tỏc dng mnh nht, ú lun la chn phõn on EtOAc tip tc nghiờn cu phõn lp cỏc hp cht t lỏ Phong qu Sa Pa V nghiờn cu thnh phn húa hc - T phõn on ethyl acetat ca dch chit lỏ Phong qu Sa Pa, ó phõn lp c 04 cht bng phng phỏp sc ký v xỏc nh c cu trỳc húa hc ca cht ny l (1) trans-tiliroside, (2) arctiin, (3) artigenin v (4) 5-hydroxymethylfurfural C cht u c phõn lp ln u tiờn t loi nghiờn cu Anemone chapaensis Gagnep v t chi Anemone 57 KIN NGH Do thi gian thc hin ti cú hn nờn nhng kt qu nghiờn cu trờn õy mi ch úng gúp phn no cụng trỡnh nghiờn cu v cõy Phong qu Sa Pa, ng thi cng m nhng hng nghiờn cu sõu hn nhm ti mc tiờu tỡm hot cht chớnh cú kh nng ng dng lm cht chun kim nghim Vỡ vy chỳng em xin a mt s xut: Tip tc nghiờn cu v thnh phn hoỏ hc ca cõy Phong qu Sa Pa, gm c phn trờn mt t v c bit l phn thõn r Tin hnh nghiờn cu th tỏc dng sinh hc ca dch chit ton phn lỏ v dch chit ton phn r cõy 58 TI LIU THAM KHO Ting Vit Nguyn Tin Bõn, V P Serov (2003), Danh lc cỏc loi thc vt Vit Nam, II, Nh xut bn Nụng nghip Vừ Vn Chi (2003), T in Thc vt thụng dng, I, NXB Khoa hc K thut Vn ỡnh Hoa, Nguyn Ngc Lanh (2007), Sinh lý bnh v Min dch, tr.113125, Nh xut bn Y hc, H Ni Phm Hong H (1999), Cõy c Vit Nam, I, tr.320, NXB Tr Trn Vn n (2012), Thc vt v nhn bit cõy thuc, Trung tõm thụng tinTh vin i hc Dc H Ni Nguyn Vits Thõn (2003), Kim nghim dc liu bng phng phỏp hin vi, NXB Khoa hc v K thut, H Ni Vin Dc liu (2006), Nghiờn cu thuc t tho dc, NXB Khoa hc v k thut, tr.493-511, 581-602 ng Kim Vui, Hong Vn Hựng (2013), ỏnh giỏ a dng sinh hc thc vt c hu v quý him ti quc gia Hong Liờn, huyn Sa Pa, tnh Lo Cai, Tp khoa hc v cụng ngh, 104(04):49-54 Ting Anh Aitzetmỹller K (1995), Fatty acid patterns of Ranunculaceae seed oils, Plant systematics and evolution, 9:229240 10 Anna Súlyomvỏry, Zsolt Mervaic, Gerg o Túth, gnes Evelin Ress, Bộla Noszỏld, Ibolya Molnỏr-Perle, Kornộlia Baghy, Ilona Kovalszk, Imre Boldizsỏr (2015), A simple and effective enrichment process of the antiproliferative lignan arctigenin based on the endogenous enzymatic hydrolysis of Serratula tinctoria and Arctium lappa fruits, Process Biochemistry, 50(12): 22812288 11 Asgarpanah J, Kazemivash N (2013), Phytochemistry, pharmacology and medicinal properties of Carthamus tinctorius L, Chinese Jounal of Integrative Medicine, 19(2):153-159 12 Ayres DC, Loike JD (1990), Lignan: chemical, biological and clinical properties, Cambridge: UK7 Cambridge University Press, pp 402 13 Bagchi K., Puri S (1998), "Free radicals and antioxidants in health and disease", East Mediterranean Health Jounal, 4(2), pp.350-360 14 Cheeseman K.H., Slater T.F (1993), "An introduction to free radical biochemistry", British Medical Bulletin, 49(3):481-493 15 Chen X, Li JC, He WF, Chi HD, Yamashita K, Manabe M, Kodama H (2009) Antiperoxidation activity of triterpenoids from rhizome of Anemone raddeana, Fitoterapia, 80(2):105-111 16 Chrysoula Spanou, Aristidis S Veskoukis, Thalia Kerasioti, Maria ontou, Apostolos Angelis, Nektarios Aligiannis, AlexiosLeandros Skaltsounis, Dimitrios Kouretas (2012), Flavonoid Glycosids Isolated from Unique Legume Plant Extracts as Novel Inhibitors of Xanthine Oxidase, Plos one 7(3): e32214 17 Cotelle N (2001), Role of flavonoids in oxidative stress, Current Topics in Medicinal Chemistry, 1(6):569590 18 Ding, X., M Y Wang, Z L Yu, W Hu, and B C Cai (2008), Studies on separation, appraisal and the biological activity of 5-HMF in Cornus officinalis, Zhongguo Zhong Yao Za Zhi, 33(4):392-396, 484 19 Ding Y, Tian XR, Tang HF, Feng JT, Zhang W, Hai WL, Wang XY, Wang Y (2012), Two new glycosides from the whole plant of Anemone rivularis var.flore-minore, Phytochemistry Letters, 5(3):668672 20 Eich E, Pertz H, Kaloga M, Schulz J, Fesen MR, Mazumder A, et al (1996), Arctigenin as a lead structure for inhibitors of human immunodeficiency virus type-1 integrase, Journal Medicinal Chemistry, 39(1):8695 21 Fan L, Lu JC, Wang J, Cheng WM, Yao Y, Liu RX, Zhang HF (2010) Two triterpenoid saponins from rhizome of Anemone raddeana Regel, Jounal Natural Medicin, 64:50-54 22 Feng Zhao, Lu Wang, Ke Liu (2009), In vitro anti-inflammatory effects of arctigenin, a lignan from Arctium lappa L., through inhibition on iNOS pathway, Journal of Ethnopharmacology, 122(3):457462 23 Fu ZQ, MY Wang, and BC Cai (2008), Discussion of 5-hydroxymethylfurfural (5-HMF) in Chinese Native Medicine Research Presents, Zhongguo Zhong Yao Za Zhi, 26:3 24 Halliwell B (1995), "How to characterize an antioxidant- An update", Biochemical Society symposium, 61:73-101 25 Harvard University Herbaria (2008), Flora of North America, Anemone Genus, Volume 26 Huang DM, Shen YC, Wu C, Huang YT, Kung FL, Teng CM, Guh JH (2004), Investigation of extrinsic and intrinsic apoptosis pathways of new clerodane diterpenoids in human prostate cancer PC-3 cells, European Journal of Pharmacology, 503(1-3):17-24 27 Hu HB, Zheng XD, Jian YF, Liu JX, Zhu JH (2010), Flavonoids from Anemone tomentosa roots, Chemistry of Natural Compounds, 46:636637 28 Hu HB, Zheng XD, Zhu JH, Zhang XD (2011), Two glycosides and other constituents from Anemone tomentosa roots, Helvetica Chimica Acta, 94:711718 29 Ichikawa K, Kinoshita T, Nishibe S, Sankawa U (1986), The Ca2+ activity of lignans, Chemical and Pharmaceutical Bulletin, 34:3514-3517 30 Iwakami S, Wu JB, Ebizuka Y, Sankawa U (1992), Platelet activating factor (PAF) antagonists contained in medicinal plants: lignans and sesquiterpenes, Chemical and Pharmaceutical Bulletin, 40:1196-1198 31 Jang YP, Kim SR, Choi YH, Kim J, Kim SG, Markelonis GJ, et al (2002), Arctigenin protects cultured cortical neurons from glutamate-induced neurodegeneration by binding to kainate receptor, Journal of Neuroscience Research, 68(2):233240 32 Kang HS, Choi JH, Cho WK, Park JC, Choi JS (2004), A sphingolipid and tyrosinase inhibitors from the fruiting body of Phellinus linteus, Archives of Pharmacal Research, 27(7):742-750 33 Kaouadji M (1990), Acylated and non-acylated kaempferol monoglycosides from Platanus acerifolia buds, Phytochemistry, 29(7):2295-2297 34 Kyoko Hayashi, Kazuto Narutaki, Yasuo Nagaoka, Toshimitsu Hayashi, Sinichi Uesato (2010), Therapeutic effect of arctiin and arctigenin in immunocompetent and immunocompromised mice infected with influenza A virus, Biological and Pharmaceutical Bulletin, 33(7):11991205 35 Kyungsu Kang, H.J Lee, C.Y Kim, S.B Lee, J Tunsag, D Batsuren, C.W Nho (2007), The chemopreventive effects of Saussurea salicifolia through induction of apoptosis and phase II detoxification enzyme, Biological and Pharmaceutical Bulletin, 30(12): 23522359 36 Lee et al (2011), Anti-inflammatory function of arctiin by inhibiting COX-2 expression via NF-B pathways, Journal of Inflammation, 8:16 37 Li Yong-Xin, Yong Li, Zhong-Ji Qian, Moon-Moo Kim, Se-Kwon Kim (2009), Invitro antioxidant activity of 5-HMF isolated from marine red alga Laurencia undulata in free radical mediate oxidative systems, Journal of microbiology and biotechnology, 19(11):13191327 38 Li X., Fang P et al ( 2013), "Targeting mitochondrial reactive oxygen species as novel therapy for inflammatory diseases and cancers", Journal of Hematology & Oncology, 6:19 39 Liu S, Chen K, Schliemann W, Strack D (2005), Isolation and identification of arctiin and arctigenin in leaves of burdock (Arctium lappa L.) by polyamide column chromatography in combination with HPLC-ESI MS, Phytochem analysis,16:86-89 40 Maiada M A Rahman, Paul M Dewick, David E Jackson and Jonh A Lucas (1990), Lignans of Forsythia intermedia, Phytochemistry, 29(6):19711980 41 Matsuda H, Ninomiya K, Shimoda H, Yoshikawa M (2002), Hepatoprotective principles from the flowers of Tilia argentea (Linden): structure requirements of tiliroside and mechanisms of action, Bioorganic Medicinal Chemistry, 10(3):707712 42 Matsumoto T., Hosono-Nishiyama K., Yamada H (2006), Antiproliferative and apoptotic effects of butyrolactone lignans from Arctium lappa on leukemic cells, Planta Medica, 72: 276278 43 Md Nur Alam , Nusrat Jahan Bristi, Md Rafiquzzaman (2013), "Review on in vivo and in vitro methods evaluation of antioxidant activity", Saudi Pharmaceutical Journal, 21(2):143-152 44 Midori T, Takao K, Katsuko K, Harukuni T, Hoyoku N (2000), Antitumorpromoting activity of lignans from the aerial part of Saussureamedusa, Cancer Letters; 158(1):5359 45 Mimaki Y, Watanabe K, Matsuo Y, Sakagami H (2009), Triterpene glycosides from the tubers of Anemone coronaria, Chemical and Pharmaceutical Bulletin, 57(7):724729 46 Mohammad Shoeb, M Mukhlesur Rahman, Lutfun Nahar, Abbas Delazar, Marcel Jaspars, Stephen M macmanus and Satyajit D Sarker (2004), Bioactive lignans from the seeds of Centaurea macrocephala, DARU Journal of Pharmaceutical Sciences, 12(3):87-93 47 Moritani S, Nomura M, Takeda Y, Miyamoto K (1996), Cytotoxic components of Bardanae fructus (goboshi), Biological and Pharmaceutical Bulletin, 19(11):1515-1517 48 National Pharmacopoeia Committee (2010), Pharmacopoeia of Peoples Republic of China; Chemical Industry Press: Beijing, China, p.157 49 Nguyen Mai Trang et al (2004), "Xanthine oxidase inhibitory activity of Vietnamese medicinal plants", Biological and Pharmaceutical Bulletin, 27(9), p.1414-1421 50 Ninomiya K, Matsuda H, Kubo M et al (2007), Potent anti-obese principle from Rosa canina: Structure requirements and mode of action of transtiliroside, Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, 17:305964 51 Olga Sayanova, Richard Haslam, Monica Venegas Caleron, and Johnathan A Napier (2007), Cloning and Characterization of Unusual Fatty Acid Desaturases from Anemone leveillei: Identification of an Acyl-Coenzyme A C20 5-Desaturase Responsible for the Synthesis of Sciadonic Acid, Plant physiology, 144(1):455-67 52 Pashkow F.J (2011), "Oxidative stress and inflammation in heart disease: Do antioxidants have a role in treatment and/or prevention?", International Journal of Inflammation, volume 2011, pp.514-623 53 Rao A.L., Bharani M., Pallavi V (2006), "Role of antioxidants and free radicals in health and disease.", Advances in Pharmacology Toxicology, 7:29-38 54 Roy Upton, Alison Williamson Graff, Georgina (2011), Jolliffe,Reinhard Botanical Lọnger, Elizabeth pharmacognosy: Microscopic characterization of botanical medicines, American Herbal Pharmacopoeia 55 Ryu S, Ahn J, Kang Y, Han B (1995), Antiproliferative effect of arctigenin and arctiin, Archives of Pharmacal Research,18:462-463 56 Samah Djeddi, C Argyropoulou, H Skaltsa (2008), Secondary metabolites from Centaurea grisebachii ssp grisebachii, Biochemical Systematics and Ecology, 36(5-6):336339 57 Sala A, Recio MC, Schinella GR et al (2003), Assessment of the antiinflammatory activity and free radical scavenger activity of tiliroside, European Journal of Pharmacology, 461:5361 58 Sansei Nishibe (1997), Bioactive phenolic compounds for cancer prevention from herbal medicines, Food Factors for Cancer Prevention, 276-279 59 Sara B Hoot, Kyle M Meyer, John C Manning (2012), Phylogeny and Reclassification of Anemone (Ranunculaceae), with an Emphasis on Austral Species, Systematic Botany, 37(1):139152 60 Schroder HC, Merz H, Steffen R, Muller WE, Sarin PS, Trumm S, et al (1990), Differential in vitro anti-HIV activity of natural lignans, Zeitschrift fỹr Naturforschung C, 45(11-12):12151221 61 Siti Susanti, H Iwasaki, M Inafuku, N Taira, H Oku (2013), Mechanism of arctigenin-mediated specific cytotoxicity against adenocarcinoma cell lines, Phytomedicine, 21(1):3946 human lung 62 Stefanis L., Burke R.E., Greene L.A (1997), "Apoptosis in neurodegenerative disorders", Current Opinion Neurology, 10:299-305 63 Technical Resources International, 5-(Hydroxymethyl)-2-furfural, Cas No 67-47-0, Prepared for NCI under Contract No.: NO1-CP-56019 (12/94) 64 Toshiaki Umezawa (2003), Diversity in lignan biosynthesis, Phytochemistry Reviews, 2(3): 371390 65 Van Hoorn DE, Nijveldt RJ, Van Leeuwen PA, Hofman Z, MRabet L (2002), Accurate prediction of xanthine oxidase inhibition based on the structure of flavonoids, European Journal of Pharmacology, 451:111118 66 Wang JL, Liu K, Gong WZ, Wang Q, Xu DT, Liu MF, Bi KL, Song YF (2012), Anticancer, antioxidant, and antimicrobial activities of Anemone (Anemone cathayensis), Food Science and Biotechnology, 21:551557 67 Wang MK, Wu FE, Chen YZ (1997), Triterpenoid saponins from Anemone hupehensis, Phytochemistry, 44:333335 68 Wang Wencai, Svetlana N Ziman, Bryan E Dutton (2001), Flora of China, 6:307-328 69 Wang XY, Chen XL, Tang HF, Tian XR, Gao H, Zhang PH (2011), Cytotoxic triterpenoid saponins from the rhizomes of Anemone taipaiensis, Planta Medica, 77:15501554 70 Wen-zhou Zhang, Zheng-kui Jiang, Bao-xia He, and Xian-ben Liu (2015), Arctigenin Protects against Lipopolysaccharide-Induced Pulmonary Oxidative Stress and Inflammation in a Mouse Model via Suppression of MAPK, HO-1, and iNOS Signaling, Inflammation, 38(4):1406-1414 71 Xianjuan Kou, Shimei Qi, Wuxing Dai, Lan Luo, Zhimin Yin (2011), Arctigenin inhibits lipopolysaccharide-induced iNOS expression in RAW264.7 cells through suppressing JAK-STAT signal pathway, International Immunopharmacology, 11(8):10951102 72 Xiaoyang Wang, Minchang Wang, Min Xu, Yi Wang, Haifeng Tang (2014), Cytotoxic Oleanane-Type Triterpenoid Saponins from the Rhizomes of Anemone rivularis var flore-minore, Molecules, 19:2121-2134 73 Xu, Q., Y H Li, and X Y Lu (2007), Investigation on influencing factors of 5-HMF content in Schisandra, Journal of Zhejiang University Science B, 8:439-445 74 Ye WC, Zhang QW, Zhao SX, Che CT (2001), Four new oleanane saponins from Anemone anhuiensis, Chem Pharm Bull, 49:632634 75 Yi Wang, Wei Kang, Liang-jian Hong, Wen-li Hai, Xiao-yang Wang, Haifeng Tang, Xiang-rong Tian (2013), Triterpenoid saponins from the root of Anemone tomentosa, Journal of Natural Medicines, 67(1):70-77 76 Yim SH, Lee YJ, Park KD, Lee IS, Shin BA, Jung DW, Williams DR, Kim HJ (2015), Phenolic constituents from the flowers of Hamamelis japonica, Natural Product Sciences, 21(3):162-169 77 Zhang LT, Zhang YW, Takaishi Y, Duan HQ (2008), Antitumor triterpene saponins from Anemone flaccida, Chinese chemical letters, 19:190192 78 Zhang Yu, Yang Qin-er (2014), The Identity of Anemone chapaensis (Ranunculaceae) from Vietnam, Journal of Tropical and Subtropical Botany, 22(4):335 79 Zijun Luo, Michael R A Morgan and Andrea J Day (2015), Transport of trans-tiliroside (kaempferol-3-b-D-(6-p-coumaroyl-glucopyranoside) and related flavonoids across Caco-2 cells, as a model of absorption and metabolism in the small intestine, Xenobiotica, 45(8):722-730 80 Ziman SN, Bulakh EV, Kadota Y et al (2008), Modern view on the taxonomy of the genus Anemone L sensu stricto (Ranunculaceae), The Journal of Japanese Botany, 83(3): 127-155 Ting Phỏp 81 F Gagnepain (1929), Deux Anộmones nouvelles d'Indo-Chine, Bulletin de la Sociộtộ Botanique de France, 76(2):315-316 Ting c 82 Eichler H (1958), Revision der Ranunculaceen Malesiens, Bibliotheca Botanica, 31(124):8-14 [...]... nghiên cứu chi tiết về đặc điểm thực vật (vi phẫu, soi bột ), thành phần hóa học và tác dụng sinh học của cây 1.1.2.1 Đặc điểm thực vật và phân bố a) Đặc điểm thực vật Phong quỳ Sa Pa A chapaensis Gagnep đƣợc nhà thực vật Pháp mô tả lần đầu tiên vào năm 1929 [81] Theo các tài liệu trƣớc đây mô tả cây Phong quỳ Sa Pa là cây thảo, thân 2-4cm mang lá chụm ở đất Lá có cuống dài 10-15cm, mềm, có lông rải rác;... gặp ở Sa Pa, thƣờng mọc ở sƣờn dốc với độ cao từ 1500m trở lên [4 ], [8 ], [81] 1.1.2.2 Thành phần hóa học và tác dụng sinh học Cho đến nay chƣa có nghiên cứu nào của Việt Nam và trên thế giới công bố về thành phần hóa học và tác dụng sinh học của Phong quỳ Sa Pa (Anemone chapaensis) 1.1.2.3 Công dụng Thân rễ và rễ Phong quỳ Sa Pa đƣợc ngƣời dân địa phƣơng sử dụng để điều trị viêm họng, viêm túi mật, đau... 11/9/2013 và mẫu tiêu bản số 02 thu hái ngày 24/5/2015 tại đèo Hoàng Liên, huyện Sa Pa, tỉnh Lào Cai là loài Anemone chapaensis Gagnep. , thuộc họ Hoàng liên (Ranunculaceae) (Hình 3.1) Kết quả nghiên cứu này đƣợc giám định bởi TS Đỗ Thị Xuyến, Bộ môn Thực vật, Khoa Sinh học, Đại học Khoa học tự nhiên, Đại học Quốc gia Hà Nội Đặc điểm thực vật của loài Anemone chapaensis Gagnep đƣợc minh họa ở hình 3.1 và hình... khác ), A rivullaris để điều trị viêm họng, sƣng amydal, viêm gan, viêm túi mật, đau dạ dày, l , thiên đầu thống, bế kinh, đái ra máu, rắn cắn, đau răng, phong thấp đau nhức, đòn ngã và giải độc ô đầu [4] 1.1.2 Tổng quan về cây Phong quỳ Sa Pa (Anemone chapaensis Gagnep. ) Đến nay mới thấy các tài liệu mô tả về hình thái thực vật của Phong quỳ Sa Pa A chapaensis Gagnep. , chƣa có tài liệu nào nghiên cứu. .. PHÁP NGHIÊN CỨU 2.3.1 Nghiên cứu thực vật học 2.3.1.1 Nghiên cứu về hình thái - Quan sát tại thực địa và trong phòng thí nghiệm, mô tả đặc điểm hình thái thực vật về: dạng sống; thân; lá (hình dạng phiến, chóp, gân, gốc, cuống, kích thƣớc…); hoa (dạng cụm hoa, vị trí cụm hoa, kích thƣớc, lá bắc, bộ nh , bộ nhụy…); quả và hạt (hình dạng, màu sắc, kích thƣớc…) Dụng cụ sử dụng gồm: kính lúp soi nổi, máy... cành, l , hoa số 01 thu hái ngày 11/9/2013 và mẫu tiêu bản số 02 thu hái ngày 24/5/2015 tại đèo Hoàng Liên, huyện Sa Pa, tỉnh Lào Cai đƣợc lƣu giữ tại phòng Bách thảo thực vật, Khoa Sinh học, Trƣờng Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia Hà Nội và Khoa Hóa phân tích-Tiêu chuẩn, Viện Dƣợc liệu Mẫu dƣợc liệu đƣợc lƣu giữ tại Khoa Hóa phân tích-Tiêu chuẩn, Viện Dƣợc liệu Nghiên cứu chiết xuất, sàng... ảnh cây Phong quỳ Sa Pa Lá Lá Rễ và thân rễ Hoa Hoa và quả Cụm hoa Bộ nhị và nhụy Qủa Hạt Hình 3.2 Một số bộ phận của cây Phong quỳ Sa Pa 21 3.1.2 Đặc điểm vi phẫu của loài Anemone chapaensis Gagnep 3.1.2.1 Đặc điểm vi phẫu lá  Vi phẫu gân lá Mặt cắt ngang gân lá gồm: Biểu bì (2)(3) là một hàng tế bào hình chữ nhật, hóa cutin, xếp đều đặn, mang lông che chở Mô mềm (4) gồm những tế bào tròn to, thành. .. chiết xuất, sàng lọc tác dụng sinh học của các phân đoạn dịch chiết và phân lập một số hợp chất đƣợc tiến hành với bộ phận trên mặt đất (trong luận văn gọi tắt là lá ví phần lớn phần trên mặt đất là lá và cuống lá) của cây Phong quỳ Sa Pa đƣợc thu hái ở đèo Hoàng Liên (Ô Qui H , ở độ cao 1500 đến 1800m ), thuộc huyện Sa Pa, tỉnh Lào Cai 2.2 NGUYÊN VẬT LIỆU NGHIÊN CỨU 2.2.1 Hóa chất và dung môi - Các dung... thấp có thể tƣơng tác một cách an toàn với các gốc tự do và chấm dứt chuỗi phản ứng trƣớc khi các phân tử quan trọng bị phá hủy [24] 11 CHƢƠNG II ĐỐI TƢỢNG, VẬT LIỆU, PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 ĐỐI TƢỢNG NGHIÊN CỨU Nghiên cứu thực vật đƣợc tiến hành trên toàn cây Phong quỳ Sa Pa khi cây có đủ hoa, quả đƣợc thu hái ở đèo Hoàng Liên (Ô Qui H , ở độ cao 1500 đến 1800m ), thuộc huyện Sa Pa, tỉnh Lào Cai Mẫu... lý học đã chứng minh các saponin nhóm triterpenoid, thành phần chính trong rễ của chi này có hoạt tính sinh học tiềm năng, bao gồm kháng u, kháng khuẩn, chống oxi hóa, ngăn chặn côn trùng… [15 ], [66 ], [77 ], trong đó tác dụng gây độc tế bào của A taipaiensis và A rivullaris đã đƣợc báo cáo [69 ], [72] 6 Hơn 10 loài trong chi này đã đƣợc ngƣời dân Trung Quốc sử dụng nhƣ thuốc dân gian Ví dụ: thân rễ của ... thái thực vật [78 ], chƣa có tài liệu nghiên cứu chi tiết đặc điểm thực vật, thành phần hóa học tác dụng sinh học Nhằm mục đích tìm hiểu đặc điểm thực vật thành phần hóa học Phong quỳ Sa Pa, đặc. .. phƣơng, để có thêm tri thức nâng cao giá trị sử dụng thuốc, đề xuất thực đề tài: Nghiên cứu đặc điểm thực vật thành phần hóa học theo định hƣớng tác dụng chống oxy hóa Phong quỳ Sa Pa Anemone chapaensis. .. chapaensis Gagnep. ) Đến thấy tài liệu mô tả hình thái thực vật Phong quỳ Sa Pa A chapaensis Gagnep. , chƣa có tài liệu nghiên cứu chi tiết đặc điểm thực vật (vi phẫu, soi bột ), thành phần hóa học tác dụng