báo cáo đề tài nhân nhanh in vitro cây hoắc hương qua giai đoạn mô sẹo

TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC KHOA KHOA HỌC SỰ SỐNG ĐỀ TÀI SINH VIÊN NGHIÊN CỨU KHOA HỌC NHÂN NHANH IN VITRO CÂY HOẮC HƯƠNG QUA GIAI ĐOẠN MÔ SẸO Sinh viên thực hiện : NGUYỄN THI HẠNH Giáo viên hướng dẫn: Ts Vũ Thanh Sắc Thái Nguyên, 2012 NỘI DUNG BÁO CÁO Mở đầu Vật liệu và phương pháp nghiên cứu Kết quả và thảo luận Kết luận và kiến nghị Phần 1: MỞ ĐẦU Hoắc hương (Pogostemon cablin (Blanco) Benth.) Trong y học và công nghiệp Tinh dầu hoắc hương Nhân giống in vitro Là phương pháp nhân nhanh dòng chọn lọc, tạo nguồn giống đồng đều, bệnh, giữ đặc tính quý nguyên liệu ban đầu với hệ số nhân giống cao gấp nhiều lần thể tính ưu việt việc so với phương pháp truyền thống Xuất phát từ thực tiễn nêu tiến hành nghiên cứu đề tài: “ nhân nhanh in vitro hoắc hương qua giai đoạn mô sẹo” Phần VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Vật liệu nghiên cứu  Cây hoắc hương (Pogostemon cablin (Blanco) Benth.) phòng thí nghiệm Sinh học- Khoa Khoa học Sự sống – Trường Đại học Khoa học – Đại học Thái Nguyên cung cấp  Hóa chất phòng thí nghiệm Sinh học - Khoa Khoa học Sự sống - Trường Đại học Khoa học cung cấp 2.2 Phương pháp nghiên cứu  Phương pháp nuôi cấy mô tế bào: phương pháp nuôi cấy mô sẹo, phương pháp tái sinh từ mô sẹo  Phương pháp bố trí thí nghiệm  Phương pháp xử lý số liệu phần mềm excel 2.3 Các tiêu theo dõi Tỷ lệ tạo mô sẹo (%) = ( số mẫu tạo mô sẹo/ tổng số mẫu cấy) x 100 Hệ số nhân mô sẹo (lần) = khối lượng mô sẹo sau nhân nhanh/ khối lượng mô sẹo ban đầu  Tỷ lệ tạo chồi từ mô sẹo (%) = (số mẫu mô sẹo tạo chồi/ số mẫu mô sẹo thí nghiệm) x 100 Phần 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Nghiên cứu ảnh hưởng auxin đến khả tạo mô sẹo in vitro hoắc hương 3.1.1 Nghiên cứu ảnh hưởng auxin đến khả tạo mô sẹo từ hoắc hương Hình 3.1: Ảnh hưởng của auxin đến khả tạo mô sẹo từ lá hoắc hương 20 ngày 40 ngày Hình 3.2: Kết quả tạo mô sẹo từ lá môi trường bổ sung 1,5 mg/l 2,4 D 3.1.2 Nghiên cứu ảnh hưởng auxin đến khả tạo mô sẹo thân hoắc hương Hình 3.3: Ảnh hưởng của auxin đến khả tạo mô sẹo ở thân hoắc hương 45 ngày 60 ngày Hình 3.4: Kết quả tạo mô sẹo từ thân hoắc hương sau 45 ngày và 60 ngày 3.2 Nghiên cứu ảnh hưởng của than hoạt tính đến khả tạo mô sẹo ở lá hoắc hương Hình 3.5: Ảnh hưởng của THT đến khả tạo mô sẹo từ hoắc hương Sau 20 ngày Sau 40 ngày Hình 3.6: Kết quả tạo mô sẹo môi trường bổ sung 0,5 mg/l THT 3.3 Nghiên cứu nhân sinh khối mô sẹo hoắc hương Hình 3.7: Ảnh hưởng của BAP và kinetin đến nhân sinh khối mô sẹo hoắc hương 30 ngày 45 ngày Hình 3.8: Kết quả nhân sinh khối mô sẹo sau 30 ngày và sau 45 ngày 3.4 Nghiên cứu tái sinh chồi từ mô sẹo hoắc hương Hình 3.9: Ảnh hưởng của BAP và kinetin đến khả tái sinh chồi từ mô sẹo Hình 3.10: Kết quả tái sinh chồi từ mô sẹo Phần 4: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Kết luận MT phù hợp cho tạo mô sẹo từ lá thân hoắc hương là môi trường MS + 20 g/l đường + 10 g/l agar + 1,5 mg/l 2,4-D Tỷ lệ tạo mô sẹo từ đạt 94,44% từ thân đạt 95% Nồng độ THT thích hợp nhất cho tạo mô sẹo hoắc hương là 0,5 g/l ứng với môi trường MS + 1,5 mg/l 2,4-D + 0,5 g/l THT, cho tỷ lệ tạo mô sẹo là 97,67% MT phù hợp nhất cho nhân nhanh mô sẹo hoắc hương là MS + 1,5 mg/l 2,4-D + 0,5 g/l THT + 1,0 BAP Hệ số nhân nhanh mô sẹo đạt 4,93 MT tốt nhất cho tái sinh chồi mô sẹo hoắc hương là MS+ 20 g/l đường + 10g/l agar + 0,5 mg/l THT + mg/l kinetin Sử dụng môi trường nuôi cấy cho tỷ lệ tái sinh chồi đạt 80,56% chồi có chất lượng tốt Kiến nghị Chúng mong có nghiên cứu để xây dựng hoàn chỉnh quy trình nhân giống hoắc hương [...]... cây hoắc hương Sau 20 ngày Sau 40 ngày Hình 3.6: Kết qua tạo mô sẹo trong môi trường bổ sung 0,5 mg/l THT 3.3 Nghiên cứu nhân sinh khối mô sẹo cây hoắc hương Hình 3.7: Ảnh hưởng của BAP và kinetin đến nhân sinh khối mô sẹo hoắc hương 30 ngày 45 ngày Hình 3.8: Kết qua nhân sinh khối mô sẹo sau 30 ngày và sau 45 ngày 3.4 Nghiên cứu tái sinh chồi từ mô sẹo cây hoắc hương Hình... auxin đến khả năng tạo mô sẹo ở thân cây hoắc hương Hình 3.3: Ảnh hưởng của auxin đến khả năng tạo mô sẹo ở thân cây hoắc hương 45 ngày 60 ngày Hình 3.4: Kết qua tạo mô sẹo từ thân hoắc hương sau 45 ngày và 60 ngày 3.2 Nghiên cứu ảnh hưởng của than hoạt tính đến khả năng tạo mô sẹo ở lá cây hoắc hương Hình 3.5: Ảnh hưởng của THT đến khả năng tạo mô sẹo từ lá cây. .. với môi trường MS + 1,5 mg/l 2,4-D + 0,5 g/l THT, cho tỷ lệ tạo mô sẹo là 97,67% 3 MT phù hợp nhất cho nhân nhanh mô sẹo cây hoắc hương là MS + 1,5 mg/l 2,4-D + 0,5 g/l THT + 1,0 BAP Hệ số nhân nhanh mô sẹo đạt 4,93 4 MT tốt nhất cho tái sinh chồi mô sẹo cây hoắc hương là MS+ 20 g/l đường + 10g/l agar + 0,5 mg/l THT + 1 mg/l kinetin Sử dụng môi trường nuôi cấy này cho tỷ lệ tái sinh... và kinetin đến khả năng tái sinh chồi từ mô sẹo Hình 3.10: Kết qua tái sinh chồi từ mô sẹo Phần 4: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Kết luận 1 MT phù hợp nhất cho tạo mô sẹo từ lá và thân cây hoắc hương là môi trường MS + 20 g/l đường + 10 g/l agar + 1,5 mg/l 2,4-D Tỷ lệ tạo mô sẹo từ lá đạt 94,44% và từ thân đạt 95% 2 Nồng độ THT thích hợp nhất cho tạo mô sẹo cây hoắc hương. .. môi trường nuôi cấy này cho tỷ lệ tái sinh chồi đạt 80,56% và các chồi đều có chất lượng tốt Kiến nghị Chúng tôi mong rằng sẽ có những nghiên cứu tiếp theo để xây dựng hoàn chỉnh quy trình nhân giống cây hoắc hương ... Nghiên cứu nhân sinh khối mô sẹo hoắc hương Hình 3.7: Ảnh hưởng của BAP và kinetin đến nhân sinh khối mô sẹo hoắc hương 30 ngày 45 ngày Hình 3.8: Kết qua nhân sinh khối mô sẹo sau... Tỷ lệ tạo mô sẹo (%) = ( số mẫu tạo mô sẹo/ tổng số mẫu cấy) x 100 Hệ số nhân mô sẹo (lần) = khối lượng mô sẹo sau nhân nhanh/ khối lượng mô sẹo ban đầu  Tỷ lệ tạo chồi từ mô sẹo (%)... hưởng auxin đến khả tạo mô sẹo thân hoắc hương Hình 3.3: Ảnh hưởng của auxin đến khả tạo mô sẹo ở thân hoắc hương 45 ngày 60 ngày Hình 3.4: Kết qua tạo mô sẹo từ thân hoắc hương