Luận văn Nghiên cứu hoàn thiện quy trình nuôi cấy bao phấn lúa

B GIÁO D C VÀ ðÀO T O TRƯ NG ð I H C NÔNG NGHI P HÀ N I NGUY N KIM OANH NGHIÊN C U HOÀN THI N QUY TRÌNH NUÔI C Y BAO PH N LÚA LU N VĂN TH C SĨ NÔNG NGHI P Chuyên ngành: CÔNG NGH SINH H C Mã s : 60.42.02.01 Ngư i hư ng d n khoa h c: PGS.TS PHAN H U TÔN HÀ N I – 2013 L I CAM ðOAN Tôi xin cam ñoan s li u k t qu nghiên c u lu n văn trung th c chưa h ñư c s d ng ñ b o v m t h c v Tôi xin cam ñoan m i s giúp ñ cho vi c th c hi n lu n văn ñã ñư c c m ơn thông tin trích d n lu n văn ñã ñư c ch rõ ngu n g c Hà N i, ngày 25 tháng năm 2013 Tác gi lu n văn Nguy n Kim Oanh Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c Nông nghi p ……………………… i L I C M ƠN ð hoàn thành ñ tài lu n văn cao h c này, s n l c c g ng c a b n thân, ñã nh n ñư c s giúp ñ t n tình c a th y cô, b n bè ngư i thân Tôi xin chân thành c m ơn th y, cô giáo b môn Sinh h c phân t Công ngh sinh h c ng d ng ñã t n tình giúp ñ trình th c t p ð c bi t xin bày t! lòng bi t ơn sâu s c nh"t t#i th y giáo hư#ng d n PGS.TS Phan H$u Tôn - Trư%ng B môn Sinh h c phân t Công ngh sinh h c ng d ng - Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i, ñã t n tình hư#ng d n, ch b o, giúp ñ ñ ng viên su t trình th c hi n ñ tài Qua ñây xin g i l i c m ơn ñ n Trung tâm B o t n Phát tri n ngu n gen tr ng - Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i ñã t o ñi u ki n giúp ñ trình th c hi n ñ tài Cu i cùng, xin g i l i c m ơn chân thành ñ n gia ñình, ngư i thân toàn th b n bè ñã ñ ng viên khích l ñ su t trình h c t p hoàn thi n lu n văn Xin chân thành c m ơn ! Hà N i, ngày 25 tháng năm 2013 H c viên Nguy n Kim Oanh Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c Nông nghi p ……………………… ii M CL C L i cam ñoan i L i c m ơn ii M cl c iii Danh m c ký hi u, ch vi t t t vi Danh m c b ng vii Danh m c hình viii M ð U 1.1 ð tv nñ 1.2 M c ñích c a ñ tài 1.3 Yêu c u c a ñ tài 2 T NG QUAN TÀI LI U 2.1 Gi i thi u v phương pháp nuôi c y bao ph n ch n t o gi ng tr ng 2.2 Tình hình nghiên c u ng d ng k thu t nuôi c y bao ph n lúa 2.2.1 Tình hình nghiên c u th gi i 2.2.2 Tình hình nghiên c u nư c 2.3 Các y u t 2.3.1 Ki!u gen c a cho bao ph n 11 2.3.2 Giai ño n phát tri!n c a h t ph n 13 2.3.3 ði u ki n sinh lý c a cho bao ph n 14 2.3.4 Nhi t ñ" th i gian x# lý ñòng 15 2.3.5 ði u ki n nuôi c y 16 2.3.6 Thành ph n môi trư ng nuôi c y 16 2.3.7 Qúa trình phân hoá callus 20 2.3.8 Hi n tư$ng b ch t ng 21 2.4 Cây ñơn b"i ñ c ñi!m di truy n c a ñơn b"i 22 nh hư ng ñ n trình nuôi c y bao ph n lúa Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c Nông nghi p ……………………… 11 iii V%T LI U, N I DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN C(U 24 3.1 V t li u ph m vi nghiên c u 24 3.1.1 V t li u nghiên c u 24 3.1.2 Ph m vi nghiên c u 24 3.2 ð)a ñi!m th i gian ti n hành 24 3.2.1 ð)a ñi!m nghiên c u 24 3.2.2 Th i gian ti n hành: 25 3.3 N"i dung nghiên c u 25 3.4 Phương pháp nghiên c u 25 3.4.1 L y m*u x# lý m*u 26 3.4.2 C y bao ph n ñ! t o callus 26 3.4.3 Tái sinh t+ callus 27 3.4.4 Môi trư ng nuôi c y 27 3.5 B trí thí nghi m 27 3.5.1 Thí nghi m 27 3.5.2 Thí nghi m 27 3.5.3 Thí nghi m 28 3.5.4 Thí nghi m 29 3.5.5 Thí nghi m 29 3.5.6 Thí nghi m 30 3.5.7 Thí nghi m7 30 3.5.8 Thí nghi m 31 3.6 Phương pháp ñánh giá x# lý s li u 31 3.6.1 Phương pháp ñánh giá 31 3.6.2 Phương pháp x# lý s li u 32 K,T QU- VÀ TH-O LU%N 33 4.1 Giai ño n T o callus 33 4.1.1 Ph n ng c a bao ph n trình nuôi c y 33 Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c Nông nghi p ……………………… iv 4.1.2 -nh hư ng c a ki!u gen t i s hình thành callus 35 4.1.3 -nh hư ng c a th i gian x# lý l nh ñ n kh t o callus 39 4.1.4 -nh hư ng c a n ng ñ" ch t kh# trùng ñ n t0 l s ng c a m*u c y 43 4.1.5 -nh hư ng c a môi trư ng MS N6 ñ n kh t o callus c a m*u c y 4.1.6 45 -nh hư ng c a n ng ñ" 2,4D ñ n kh hình thành callus c a bao ph n 47 4.2 Giai ño n tái sinh ch i 50 4.2.1 -nh hư ng ch t lư$ng callus ñ n kh tái sinh 50 4.2.2 -nh hư ng c a n ng ñ" BAP ñ n kh tái sinh ch i 54 4.3 Giai ño n r1 hình thành hoàn ch2nh 57 4.3.1 -nh hư ng c a n ng ñ" NAA ñ n kh r1 c a tái sinh 57 4.3.2 -nh hư ng c a môi trư ng thu n dư3ng ñ n kh sinh trư ng c a 63 K,T LU%N VÀ ð4 NGH5 70 5.1 K t lu n 70 5.2 ð ngh) 70 TÀI LI U THAM KH-O 72 PH L C Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c Nông nghi p ……………………… v DANH M C CÁC KÝ HI U, CÁC CH VI T T T 2,4D Acid 2,4 dichlorophenoxy axetic Cs C"ng s CT Công th c BAP 6- Benzylaminopurine Kinetin 6- Furfurylaminopurine MS Murashige and Skoog, 1962 N6 Chu & Cs, 1976 NAA Naphlene axetic acid NCBP Nuôi c y bao ph n NXB Nhà xu t b n Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c Nông nghi p ……………………… vi DANH M C B NG STT Tên b ng Trang 4.1 -nh hư ng c a ki!u gen ñ n s hình thành callus 35 4.2 ð"ng thái hình thành callus sau tu n theo dõi 38 4.3 -nh hư ng c a th i gian x# lý l nh ñ n kh t o callus 40 4.4 -nh hư ng c a n ng ñ" ch t kh# trùng ñ n t0 l s ng c a dòng nghiên c u 43 4.5 -nh hư ng c a môi trư ng ñ n kh t o callus t+ bao ph n lúa 46 4.6 -nh hư ng c a n ng ñ" 2,4D ñ n t0 l t o thành callus t2 l 48 ch t c a dòng nghiên c u 4.7a -nh hư ng c a n ng ñ" BAP ñ n kh tái sinh ch i công th c nghiên c u thu"c dòng N39 4.7b -nh hư ng c a n ng ñ" BAP ñ n kh tái sinh ch i 54 công th c nghiên c u thu"c dòng N13 4.8 -nh hư ng c a n ng ñ" NAA ñ n kh r1 c a m*u c y công th c thí nghi m dòng N39 N13 4.9 4.11 59 -nh hư ng c a môi trư ng thu n dư3ng ñ n t0 l s ng c a lúa 4.10 56 63 -nh hư ng c a m"t s môi trư ng thu n dư3ng ñ n chi u dài r1, chi u cao cây, s s nhánh 64 Kh s ng c a in vitro ñi u ki n t nhiên 68 Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c Nông nghi p ……………………… vii DANH M C HÌNH STT Tên hình Trang 4.1 Hình nh callus 34 4.2 -nh hư ng c a ki!u gen ñ n kh hình thành callus 37 4.3 M i tương quan gi a t0 l bao ph n ch t t0 l bao ph n t o callus 37 4.4a -nh hư ng c a th i gian x# lý l nh ñ n kh t o callus t0 l ch t c a m*u c y dòng N39 41 4.4b -nh hư ng c a th i gian x# lý l nh ñ n kh t o callus t0 l ch t c a m*u c y dòng N13 41 4.5a -nh hư ng c a n ng ñ" ch t kh# trùng ñ n t2 l s ng t0 l ch t c a m*u c y dòng N39 44 4.5b -nh hư ng c a n ng ñ" ch t kh# trùng ñ n t2 l s ng t0 l ch t c a m*u c y dòng N13 44 4.6 -nh hư ng c a môi trư ng ñ n kh t o callus t+ bao ph n lúa dòng N39 N13 (sau tu n theo dõi) 46 4.7a -nh hư ng c a n ng ñ" 2,4D ñ n t0 l t o thành callus t2 l ch t 4.7b công th c dòng N39 49 -nh hư ng c a n ng ñ" 2,4D ñ n t0 l t o thành callus t2 l ch t công th c dòng N13 49 4.8 -nh callus ch m xanh 52 4.9 -nh tái sinh xanh 52 4.10 -nh r1 ăn lan vào môi trư ng th ch 52 4.11 -nh callus tái sinh m"t xanh m"t b ch t ng 53 4.12 -nh r 4.13 -nh tái sinh b ch t ng 53 c ch ch i phát tri!n 53 Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c Nông nghi p ……………………… viii 4.14a -nh hư ng c a n ng ñ" BAP ñ n kh tái sinh ch i công th c nghiên c u thu"c dòng N39 55 4.14b -nh hư ng c a n ng ñ" BAP ñ n kh tái sinh ch i công th c nghiên c u thu"c dòng N13 56 4.15 Ch i xanh tái sinh t+ callus sau 25 ngày nuôi c y 57 4.16 Ch i lúa m i ñư$c c y môi trư ng r1 58 4.17a -nh hư ng c a n ng ñ" NAA ñ n kh r1 c a m*u c y công th c nghiên c u dòng N39 60 4.17b -nh hư ng c a n ng ñ" NAA ñ n kh r1 c a m*u c y công th c nghiên c u dòng N13 60 4.18 Cây lúa N39 sau 10 ngày c y môi trư ng r1 61 4.19 -nh r1 môi trư ng th ch c a tái sinh 61 4.20a -nh hư ng c a môi trư ng thu n dư3ng ñ n kh sinh trư ng c a lúa dòng N39 65 4.20b -nh hư ng c a môi trư ng thu n dư3ng ñ n kh sinh trư ng c a lúa dòng N13 65 4.21 -nh in vitro ñ t tiêu chu6n 69 4.22 Ra t nhiên 69 Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c Nông nghi p ……………………… ix PH L C HÌNH NH M T SE HÌNH -NH THÍ NGHI M NUÔI C=Y BAO PH=N LÚA nh 1: Bao ph!n lúa t*o callus nh 2: Callus tái sinh ch+i nh 3: Tách ch+i tái sinh riêng bi(t ñ3 t*o r nh 4: Cây tái sinh r nh 5: Cây in vitro Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c Nông nghi p ……………………… PH L C X? LÝ TH@NG KÊ nh hư ng c a th i gian x lý l nh BALANCED ANOVA FOR VARIATE MSEO FILE XLLANH PAGE Anh hương thoi gian xu ly lanh den ty le callus N39 VARIATE V003 MSEO LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTHUC$ 482.204 96.4409 132.31 0.000 * RESIDUAL 12 8.74665 728887 * TOTAL (CORRECTED) 17 490.951 28.8795 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE XLLANH PAGE Anh hương thoi gian xu ly lanh den ty le callus N39 MEANS FOR EFFECT CTHUC$ CTHUC$ NOS MSEO 5.00000 9.00000 3 10.8000 13.0667 16.6000 SE(N= 3) 0.492912 5%LSD 12DF 1.51883 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE XLLANH PAGE Anh hương thoi gian xu ly lanh den ty le callus N39 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |CTHUC$ | (N= 18) SD/MEAN | | NO BASED ON BASED ON % | | OBS TOTAL SS RESID SS | | MSEO 18 12.578 5.3740 0.85375 6.8 0.0000 BALANCED ANOVA FOR VARIATE MSEO FILE XLLANH PAGE Anh hương thoi gian xu ly lanh den ty le callus N13 VARIATE V003 MSEO LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTHUC$ 450.027 90.0053 378.54 0.000 * RESIDUAL 12 2.85327 237773 * TOTAL (CORRECTED) 17 452.880 26.6400 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE XLLANH PAGE Anh hương thoi gian xu ly lanh den ty le callus N13 MEANS FOR EFFECT CTHUC$ CTHUC$ NOS MSEO 6.13333 Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c Nông nghi p ……………………… 3 3 3 8.20000 9.86667 12.6667 20.8667 16.2667 SE(N= 3) 0.281527 5%LSD 12DF 0.867481 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE XLLANH PAGE Anh hương thoi gian xu ly lanh den ty le callus N13 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |CTHUC$ | (N= 18) SD/MEAN | | NO BASED ON BASED ON % | | OBS TOTAL SS RESID SS | | MSEO 18 12.333 5.1614 0.48762 4.0 0.0000 nh hư ng c a n ng ñ ch t kh trùng n t l s ng c u m u c y BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLSONG FILE TLSONG PAGE Thi nghiem anh huong cua nong chat khu trung den ty le song cua bao phan lua N39 VARIATE V003 TLSONG LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTHUC$ 1519.91 506.636 295.13 0.000 * RESIDUAL 13.7331 1.71664 * TOTAL (CORRECTED) 11 1533.64 139.422 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TLSONG PAGE Thi nghiem anh huong cua nong chat khu trung den ty le song cua bao phan lua N39 MEANS FOR EFFECT CTHUC$ CTHUC$ NOS TLSONG 15.6000 46.6000 3 37.2667 32.1333 SE(N= 3) 0.756448 5%LSD 8DF 2.46670 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TLSONG PAGE Thi nghiem anh huong cua nong chat khu trung den ty le song cua bao phan lua N39 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |CTHUC$ | (N= 12) SD/MEAN | | NO BASED ON BASED ON % | | OBS TOTAL SS RESID SS | | TLSONG 12 32.900 11.808 1.3102 4.0 0.0000 Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c Nông nghi p ……………………… BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLSONG FILE KDTN PAGE Thi nghiem anh huong cua nong chat khu trung den ty le song cua bao phan lua N13 VARIATE V003 TLSONG LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTHUC$ 1471.56 490.519 139.75 0.000 * RESIDUAL 28.0801 3.51001 * TOTAL (CORRECTED) 11 1499.64 136.331 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE KDTN PAGE Thi nghiem anh huong cua nong chat khu trung den ty le song cua bao phan lua N13 MEANS FOR EFFECT CTHUC$ CTHUC$ NOS TLSONG 18.6000 49.3333 3 37.4667 31.4667 SE(N= 3) 1.08167 5%LSD 8DF 3.52721 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE KDTN PAGE Thi nghiem anh huong cua nong chat khu trung den ty le song cua bao phan lua N13 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |CTHUC$ | (N= 12) SD/MEAN | | NO BASED ON BASED ON % | | OBS TOTAL SS RESID SS | | TLSONG 12 34.217 11.676 1.8735 5.5 0.0000 nh hư ng c a môi trư ng ñ n kh ngăng t o callus c a m u c y ANOVA FOR VARIATE CALLUS FILE MSN6 PAGE Thi nghiem anh huong cua moi truong MS va N6 den kha nang tao callus dong N39 VARIATE V003 CALLUS LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTHUC$ 255.454 255.454 447.19 0.000 * RESIDUAL 2.28499 571247 * TOTAL (CORRECTED) 257.739 51.5478 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE MSN6 PAGE Thi nghiem anh huong cua moi truong MS va N6 den kha nang tao callus dong N39 MEANS FOR EFFECT CTHUC$ CTHUC$ NOS CALLUS 6.00000 19.0500 SE(N= 3) 0.436366 5%LSD 4DF 1.71046 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE MSN6 Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c Nông nghi p ……………………… PAGE Thi nghiem anh huong cua moi truong MS va N6 den kha nang tao callus dong N39 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |CTHUC$ | (N= 6) SD/MEAN | | NO BASED ON BASED ON % | | OBS TOTAL SS RESID SS | | CALLUS 12.525 7.1797 0.75581 6.0 0.0003 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CALLUS FILE MSN6 PAGE Thi nghiem anh huong cua moi truong MS va N6 den kha nang tao calus dong N13 VARIATE V003 CALLUS LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTHUC$ 158.620 158.620 320.98 0.000 * RESIDUAL 1.97668 494169 * TOTAL (CORRECTED) 160.597 32.1194 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE MSN6 PAGE Thi nghiem anh huong cua moi truong MS va N6 den kha nang tao calus dong N13 MEANS FOR EFFECT CTHUC$ CTHUC$ NOS CALLUS 9.11667 19.4000 SE(N= 3) 0.405861 5%LSD 4DF 1.59089 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE MSN6 PAGE Thi nghiem anh huong cua moi truong MS va N6 den kha nang tao calus dong N13 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |CTHUC$ | (N= 6) SD/MEAN | | NO BASED ON BASED ON % | | OBS TOTAL SS RESID SS | | CALLUS 14.258 5.6674 0.70297 4.9 0.0004 nh hư ng c a n ng ñ 2,4D ñ n kh t o callus BALANCED ANOVA FOR VARIATE CALLUS FILE NAAC PAGE Thi nghiem anh huong cua 2,4D den kha nang tao callus tu bao phan lua N39 VARIATE V003 CALLUS LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTHUC$ 391.807 78.3613 296.32 0.000 * RESIDUAL 12 3.17335 264446 * TOTAL (CORRECTED) 17 394.980 23.2341 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE NAAC PAGE Thi nghiem anh huong cua 2,4D den kha nang tao callus tu bao phan lua N39 MEANS FOR EFFECT CTHUC$ CTHUC$ NOS CALLUS Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c Nông nghi p ……………………… 4.00000 14.2000 3 16.0000 18.0000 17.1333 14.8667 SE(N= 3) 0.296898 5%LSD 12DF 0.914845 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE NAAC PAGE Thi nghiem anh huong cua 2,4D den kha nang tao callus tu bao phan lua N30 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |CTHUC$ | (N= 18) SD/MEAN | | NO BASED ON BASED ON % | | OBS TOTAL SS RESID SS | | CALLUS 18 14.033 4.8202 0.51424 3.7 0.0000 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CALLUS FILE MSEO PAGE Thi nghiem anh huong cua 2.4D den kha nang t o callus t bao ph n lúa N13 VARIATE V003 CALLUS LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTHUC$ 399.431 79.8862 506.32 0.000 * RESIDUAL 12 1.89332 157777 * TOTAL (CORRECTED) 17 401.324 23.6073 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE MSEO PAGE Thi nghiem anh huong cua 2.4D den kha nang t o callus t bao ph n lúa N13 MEANS FOR EFFECT CTHUC$ CTHUC$ NOS CALLUS 8.06667 14.8667 3 17.4000 23.5333 19.5333 16.4667 SE(N= 3) 0.229330 5%LSD 12DF 0.706643 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE MSEO PAGE Thi nghiem anh huong cua 2.4D den kha nang t o callus t bao ph n lúa N13 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |CTHUC$ | (N= 18) SD/MEAN | | NO BASED ON BASED ON % | | OBS TOTAL SS RESID SS | | CALLUS 18 16.644 4.8587 0.39721 2.4 0.0000 Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c Nông nghi p ……………………… nh hư ng c a BAP ñ n kh tái sinh ch i xanh BALANCED ANOVA FOR VARIATE CHOIX FILE BAP PAGE Thi nghiem anh huong cua BAP den kha nang tao choi xanh lua N39 VARIATE V003 CHOIX LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTHUC$ 9044.67 1292.10 110.75 0.000 * RESIDUAL 16 186.667 11.6667 * TOTAL (CORRECTED) 23 9231.33 401.362 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE BAP PAGE Thi nghiem anh huong cua BAP den kha nang tao choi xanh lua N39 MEANS FOR EFFECT CTHUC$ CTHUC$ NOS CHOIX 50.0000 62.0000 3 84.0000 75.3333 54.0000 48.0000 44.0000 16.0000 SE(N= 3) 1.97203 5%LSD 16DF 5.91217 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE BAP PAGE Thi nghiem anh huong cua BAP den kha nang tao choi xanh lua N39 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |CTHUC$ | (N= 24) SD/MEAN | | NO BASED ON BASED ON % | | OBS TOTAL SS RESID SS | | CHOIX 24 54.167 20.034 3.4157 6.3 0.0000 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CHOIX FILE BAP PAGE Thi nghiem anh huong cua BAP den kha nang tao choi xanh lua N13 VARIATE V003 CHOIX LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTHUC$ 9696.00 1385.14 117.05 0.000 * RESIDUAL 16 189.334 11.8334 * TOTAL (CORRECTED) 23 9885.33 429.797 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE BAP PAGE Thi nghiem anh huong cua BAP den kha nang tao choi xanh lua N13 MEANS FOR EFFECT CTHUC$ CTHUC$ NOS CHOIX 56.6667 72.6667 3 84.0000 76.0000 69.3333 Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c Nông nghi p ……………………… 57.3333 40.6667 18.0000 SE(N= 3) 1.98607 5%LSD 16DF 5.95426 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE BAP PAGE Thi nghiem anh huong cua BAP den kha nang tao choi xanh lua N13 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |CTHUC$ | (N= 24) SD/MEAN | | NO BASED ON BASED ON % | | OBS TOTAL SS RESID SS | | CHOIX 24 59.333 20.732 3.4400 5.8 0.0000 nh hư ng c a n ng ñ NAA ñ n kh r c a ch i BALANCED ANOVA FOR VARIATE MOSEO FILE NAA PAGE Thi nghiem anh huong cua NAA den kha nang tao re lua N39 VARIATE V003 MOSEO LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTHUC$ 32.3428 6.46856 100.37 0.000 * RESIDUAL 12 773334 644445E-01 * TOTAL (CORRECTED) 17 33.1161 1.94801 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE NAA PAGE Thi nghiem anh huong cua NAA den kha nang tao re lua N39 MEANS FOR EFFECT CTHUC$ CTHUC$ NOS MOSEO 11.3000 12.6667 3 11.4000 9.90000 9.46667 8.70000 SE(N= 3) 0.146566 5%LSD 12DF 0.451619 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE NAA PAGE Thi nghiem anh huong cua NAA den kha nang tao re lua N39 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |CTHUC$ | (N= 18) SD/MEAN | | NO BASED ON BASED ON % | | OBS TOTAL SS RESID SS | | MOSEO 18 10.572 1.3957 0.25386 2.4 0.0000 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SO RE FILE RECAY PAGE Anh huong cua NAA den kha nang re cua choi xanh dong N13 VARIATE V003 SO RE RE LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c Nông nghi p ……………………… CTHUC$ 32.9378 6.58756 31.96 0.000 * RESIDUAL 12 2.47333 206111 * TOTAL (CORRECTED) 17 35.4111 2.08301 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE RECAY PAGE Anh huong cua NAA den kha nang re cua choi xanh dong N13 MEANS FOR EFFECT CTHUC$ CTHUC$ NOS SO RE 12.1000 13.0333 3 12.5333 10.6667 9.86667 9.46667 SE(N= 3) 0.262114 5%LSD 12DF 0.807662 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE RECAY PAGE Anh huong cua NAA den kha nang re cua choi xanh dong N13 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |CTHUC$ | (N= 18) SD/MEAN | | NO BASED ON BASED ON % | | OBS TOTAL SS RESID SS | | SO RE 18 11.278 1.4433 0.45399 4.0 0.0000 BALANCED ANOVA FOR VARIATE DAI RE FILE NAA PAGE Thi nghiem anh huong cua NAA den dai re cua choi xanh lua N39 VARIATE V003 DAI RE DAI RE LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTHUC$ 10.8117 2.16233 149.70 0.000 * RESIDUAL 12 173334 144445E-01 * TOTAL (CORRECTED) 17 10.9850 646176 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE NAA PAGE Thi nghiem anh huong cua NAA den dai re cua choi xanh lua N39 MEANS FOR EFFECT CTHUC$ CTHUC$ NOS DAI RE 6.20000 8.73333 3 7.56667 7.40000 7.20000 6.80000 SE(N= 3) 0.693889E-01 5%LSD 12DF 0.213811 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE NAA PAGE Thi nghiem anh huong cua NAA den dai re cua choi xanh lua N39 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |CTHUC$ | (N= 18) SD/MEAN | | Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c Nông nghi p ……………………… 10 NO BASED ON BASED ON % | | OBS TOTAL SS RESID SS | | DAI RE 18 7.3167 0.80385 0.12019 1.6 0.0000 BALANCED ANOVA FOR VARIATE DAI RE FILE NAA PAGE Thi nghiem anh huong cua NAA den dai re lua N13 VARIATE V003 DAI RE LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTHUC$ 17.2178 3.44356 206.61 0.000 * RESIDUAL 12 200000 166667E-01 * TOTAL (CORRECTED) 17 17.4178 1.02458 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE NAA PAGE Thi nghiem anh huong cua NAA den dai re lua N13 MEANS FOR EFFECT CTHUC$ CTHUC$ NOS DAI RE 6.30000 9.30000 3 8.46667 7.76667 7.50000 6.93333 SE(N= 3) 0.745357E-01 5%LSD 12DF 0.229670 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE NAA PAGE Thi nghiem anh huong cua NAA den dai re lua N13 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |CTHUC$ | (N= 18) SD/MEAN | | NO BASED ON BASED ON % | | OBS TOTAL SS RESID SS | | DAI RE 18 7.7111 1.0122 0.12910 1.7 0.0000 nh hư ng c a môi trư ng thu n dư ng ñ n t l s ng c a lúa BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLSONG FILE TLSONG PAGE Anh huong cua moi truong thuan duong den ty le song cua cay lua nuoi cay tu bao phan VARIATE V003 TLSONG LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTHUC$ 10000.0 3333.33 57.14 0.000 * RESIDUAL 466.667 58.3333 * TOTAL (CORRECTED) 11 10466.7 951.515 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TLSONG PAGE Anh huong cua moi truong thuan duong den ty le song cua cay lua nuoi cay tu bao phan Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c Nông nghi p ……………………… 11 MEANS FOR EFFECT CTHUC$ CTHUC$ NOS TLSONG 100.000 100.000 3 100.000 33.3333 SE(N= 3) 4.40959 5%LSD 8DF 14.3792 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TLSONG PAGE Anh huong cua moi truong thuan duong den ty le song cua cay lua nuoi cay tu bao phan F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |CTHUC$ | (N= 12) SD/MEAN | | NO BASED ON BASED ON % | | OBS TOTAL SS RESID SS | | TLSONG 12 83.333 30.847 7.6376 9.2 0.0000 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TDRE FILE DO DAI RE PAGE Thi nghiem anh huong moi truong thuan duong den dai re N39 VARIATE V003 TDRE LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTHUC$ 71.6223 23.8741 169.77 0.000 * RESIDUAL 1.12500 140625 * TOTAL (CORRECTED) 11 72.7473 6.61339 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE DO DAI RE PAGE Thi nghiem anh huong moi truong thuan duong den dai re N39 MEANS FOR EFFECT CTHUC$ CTHUC$ NOS TDRE 12.8333 16.2167 3 19.5000 17.6667 SE(N= 3) 0.216506 5%LSD 8DF 0.706005 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE DO DAI RE PAGE Thi nghiem anh huong moi truong thuan duong den dai re N39 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION – VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |CTHUC$ | (N= 12) SD/MEAN | | NO BASED ON BASED ON % | | OBS TOTAL SS RESID SS | | TDRE 12 16.554 2.5717 0.37500 2.3 0.0000 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TDRE FILE TLSONG PAGE Thi nghiem anh huong cua moi truong thuan duong den chieu dai re cua cay lua N13 VARIATE V003 TDRE LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c Nông nghi p ……………………… 12 ============================================================================= CTHUC$ 75.1273 25.0424 567.01 0.000 * RESIDUAL 353326 441658E-01 * TOTAL (CORRECTED) 11 75.4806 6.86187 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TLSONG PAGE Thi nghiem anh huong cua moi truong thuan duong den chieu dai re cua cay lua N13 MEANS FOR EFFECT CTHUC$ CTHUC$ NOS TDRE 12.7500 16.7333 3 19.5000 17.9667 SE(N= 3) 0.121334 5%LSD 8DF 0.395658 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TLSONG PAGE Thi nghiem anh huong cua moi truong thuan duong den chieu dai re cua cay lua N13 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |CTHUC$ | (N= 12) SD/MEAN | | NO BASED ON BASED ON % | | OBS TOTAL SS RESID SS | | TDRE 12 16.738 2.6195 0.21016 1.3 0.0000 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CCAY FILE XONG PAGE Thi nghiem anh huong cua moi truong thuan duong den chieu cao cay lua N39 VARIATE V003 CCAY LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTHUC$ 866.047 288.682 314.72 0.000 * RESIDUAL 7.33809 917261 * TOTAL (CORRECTED) 11 873.385 79.3987 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE XONG PAGE Thi nghiem anh huong cua moi truong thuan duong den chieu cao cay lua N39 MEANS FOR EFFECT CTHUC$ CTHUC$ NOS CCAY 11.3100 24.0533 3 21.0867 35.1367 SE(N= 3) 0.552950 5%LSD 8DF 1.80311 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE XONG PAGE Thi nghiem anh huong cua moi truong thuan duong den chieu cao cay lua N39 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |CTHUC$ | (N= 12) SD/MEAN | | NO BASED ON BASED ON % | | OBS TOTAL SS RESID SS | | CCAY 12 22.897 8.9106 0.95774 4.2 0.0000 Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c Nông nghi p ……………………… 13 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CAOCAY FILE CAOCAY PAGE Thi nghiem anh huong cua moi truong thuan duong den kha nang la cac dong lua duoc tao tu bao phan.N39 VARIATE V003 CAOCAY LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTHUC$ 102.182 34.0608 817.44 0.000 * RESIDUAL 333339 416674E-01 * TOTAL (CORRECTED) 11 102.516 9.31960 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE CAOCAY PAGE Thi nghiem anh huong cua moi truong thuan duong den kha nang la cac dong lua duoc tao tu bao phan.N39 MEANS FOR EFFECT CTHUC$ CTHUC$ NOS CAOCAY 4.33333 5.00000 3 5.75000 11.6667 SE(N= 3) 0.117852 5%LSD 8DF 0.384304 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE CAOCAY PAGE Thi nghiem anh huong cua moi truong thuan duong den kha nang la cac dong lua duoc tao tu bao phan.N39 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |CTHUC$ | (N= 12) SD/MEAN | | NO BASED ON BASED ON % | | OBS TOTAL SS RESID SS | | CCAY 12 6.6875 3.0528 0.20413 3.1 0.0000 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CCAY FILE XONG PAGE Thi nghiem anh huong cua moi truong thuan duong den chieu cao cay lua N13 VARIATE V003 CCAY LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTHUC$ 872.053 290.684 951.85 0.000 * RESIDUAL 2.44310 305388 * TOTAL (CORRECTED) 11 874.496 79.4996 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE XONG PAGE Thi nghiem anh huong cua moi truong thuan duong den chieu cao cay lua N13 MEANS FOR EFFECT CTHUC$ CTHUC$ NOS CCAY 11.7100 25.3200 3 22.6533 3 5.6700 SE(N= 3) 0.319055 Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c Nông nghi p ……………………… 14 5%LSD 8DF 1.04041 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE XONG PAGE Thi nghiem anh huong cua moi truong thuan duong den chieu cao cay lua N13 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |CTHUC$ | (N= 12) SD/MEAN | | NO BASED ON BASED ON % | | OBS TOTAL SS RESID SS | | CCAY 12 23.838 8.9163 0.55262 2.3 0.0000 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SOLA FILE SOLA PAGE Thi nghiem nghien cuu anh huong cua moi truong thuan duong den kha nang la dong N13 VARIATE V003 SOLA LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTHUC$ 110.854 36.9514 591.20 0.000 * RESIDUAL 500018 625023E-01 * TOTAL (CORRECTED) 11 111.354 10.1231 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE SOLA PAGE Thi nghiem nghien cuu anh huong cua moi truong thuan duong den kha nang la dong N13 MEANS FOR EFFECT CTHUC$ CTHUC$ NOS SOLA 4.25000 4.83333 3 6.16667 11.9167 SE(N= 3) 0.144340 5%LSD 8DF 0.470679 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE SOLA PAGE Thi nghiem nghien cuu anh huong cua moi truong thuan duong den kha nang la dong N13 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |CTHUC$ | (N= 12) SD/MEAN | | NO BASED ON BASED ON % | | OBS TOTAL SS RESID SS | | SOLA 12 6.7917 3.1817 0.25000 3.7 0.0000 BALANCED ANOVA FOR VARIATE DNHANH FILE NHANH PAGE Thi nghiem anh huong cua moi truong thuan duong den kha nang de nhanh cua lua.N39 VARIATE V003 NHANH LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTHUC$ 1.93229 644097 61.83 0.000 * RESIDUAL 833334E-01 104167E-01 Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c Nông nghi p ……………………… 15 * TOTAL (CORRECTED) 11 2.01562 183239 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE NHANH 21/ 9/** 13:24 PAGE Thi nghiem anh huong cua moi truong thuan duong den kha nang de nhanh cua lua.N39 MEANS FOR EFFECT CTHUC$ CTHUC$ NOS CCAY 0.750000 1.00000 3 1.16667 1.83333 SE(N= 3) 0.589256E-01 5%LSD 8DF 0.192150 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE NHANH 21/ 9/** 13:24 PAGE Thi nghiem anh huong cua moi truong thuan duong den kha nang de nhanh cua lua.N39 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |CTHUC$ | (N= 12) SD/MEAN | | NO BASED ON BASED ON % | | OBS TOTAL SS RESID SS | | DNHANH 12 1.1875 0.42806 0.10206 8.6 0.0000 BALANCED ANOVA FOR VARIATE DNHANH FILE NHANH PAGE Thi nghiem anh huong cua moi truong thuan duong den kha nang de nhanh.N39 VARIATE V003 DNHANH LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTHUC$ 3.93750 1.31250 63.00 0.000 * RESIDUAL 166667 208333E-01 * TOTAL (CORRECTED) 11 4.10417 373106 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE NHANH PAGE Thi nghiem anh huong cua moi truong thuan duong den kha nang de nhanh.N39 MEANS FOR EFFECT CTHUC$ CTHUC$ NOS CCAY 0.500000 1.25000 2.08333 SE(N= 3) 0.833334E-01 5%LSD 8DF 0.271742 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE NHANH PAGE Thi nghiem anh huong cua moi truong thuan duong den kha nang de nhanh.N39 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |CTHUC$ | (N= 12) SD/MEAN | | NO BASED ON BASED ON % | | OBS TOTAL SS RESID SS | | DNHANH 12 1.2083 0.61082 0.14434 11.9 0.0000 Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c Nông nghi p ……………………… 16 ... hành nghiên c u ñ tài: Nghiên c u hoàn thi n quy trình nuôi c"y bao ph"n lúa 1.2 M$c ñích c%a ñ# tài Xác ñ)nh ñư$c ñi u ki n nuôi c y t i ưu nh t cho trình t o callus tái sinh xanh Hoàn thi n quy. .. Vi t Nam, k thu t nuôi c y bao ph n ñã thành công nhi u ñ i tư$ng tr ng ñó có lúa. Tuy nhiên, hi u qu c a trình nuôi c y bao ph n lúa ph thu"c nhi u y u t : ki!u gen c a ñưa vào nuôi c y, y u t... thi u v phương pháp nuôi c y bao ph n ch n t o gi ng tr ng 2.2 Tình hình nghiên c u ng d ng k thu t nuôi c y bao ph n lúa 2.2.1 Tình hình nghiên c u th gi i 2.2.2 Tình hình nghiên c u nư c 2.3